发明内容
本发明旨在提供一种可有效获得纯净卡格列净的中间体。
在本发明的第一方面,提供式I所示的卡格列净丙酮水合物:
其中,0.6≤x≤1.2,0.5≤y≤1.0。
在另一实施方式中,以所述卡格列净丙酮水合物的总重量计,其中的水分含量为2.0-4.5wt%,优选为3.0-4.0wt%。
在另一实施方式中,以所述卡格列净丙酮水合物的总重量计,其中的丙酮含量为5.5-11.5wt%,优选为7-10wt%。
在另一实施方式中,所述卡格列净丙酮水合物的粒径D50在30-80μm。
在另一实施方式中,所述卡格列净丙酮水合物通过高效液相色谱法(HPLC)测定的HPLC含量在97.0%以上,优选在99.0%以上。
在另一实施方式中,所述卡格列净丙酮水合物通过高效液相色谱法(HPLC)测定,其中结构如式Ⅲ所示的异构体杂质的HPLC含量不超过0.3%,优选不超过0.2%,更优选不超过0.1%。
在另一实施方式中,晶型通过X-粉末衍射技术(XRPD)测定并以布拉格2θ角(Bragg2-Theta)表征如下:3.89±0.2°、10.94±0.2°、13.03±0.2°、13.60±0.2°、13.96±0.2°、15.48±0.2°、16.24±0.2°、17.32±0.2°、18.82±0.2°、20.28±0.2°、21.10±0.2°、22.52±0.2°、22.74±0.2°、23.40±0.2°、25.10±0.2°、26.80±0.2°。
在另一实施方式中,卡格列净丙酮水合物的晶型XRPD图谱如图1所示。
在另一实施方式中,使用差示扫描量热技术(DSC)分析时,DSC图谱中存在两个特征峰在57±6℃和86±12℃处。
在另一实施方式中,卡格列净丙酮水合物的差示扫描量热法分析图谱如图2所示。
在另一实施方式中,使用热重分析(TGA)时,TGA图谱在150℃前失重7-16%。
在另一实施方式中,卡格列净丙酮水合物的热重分析图谱如图3所示。
在另一实施方式中,使用核磁分析(HNMR)时,HNMR图谱在2.08±0.2处有丙酮的特征化学位移峰,氢个数在3-6。
在另一实施方式中,卡格列净丙酮水合物的核磁分析图谱如图4所示。
在本发明的第二方面,提供一种如上所述的本发明提供的卡格列净丙酮水合物的制备方法,所述方法包括步骤:
(1)使卡格列净粗品与丙酮或含有丙酮的有机溶剂形成的溶液1与水混合,得到溶液2;
(2)使溶液2与抗溶剂混合后降温、析晶得到如上所述的本发明提供的卡格列净丙酮水合物。
在另一实施方式中,步骤(1)中,卡格列净粗品与水的摩尔比为3:1-1:10,优选为2:1-1:3。
在另一实施方式中,步骤(1)中当使用丙酮形成溶液1,卡格列净粗品与丙酮的重量比为1:3-1:20,优选为1:5-1:10。
在另一实施方式中,步骤(1)中当使用含有丙酮的有机溶剂形成溶液1,卡格列净粗品与含有丙酮的有机溶剂的重量比为1:3-1:10,优选为1:4-1:5。
在另一实施方式中,步骤(1)中所述含有丙酮的有机溶剂中包括丙酮和酯类,所述丙酮和酯类的重量比为2:1-1:3,优选为1:1-1:2。
在另一实施方式中,所述酯类为C3-C6酯,优选为乙酸甲酯、乙酸乙酯或乙酸异丙酯;更优选为乙酸乙酯。
在另一实施方式中,步骤(2)中所述抗溶剂为正己烷、异己烷、正庚烷、正辛烷、甲基叔丁基醚、异丙醚、乙醚、或油醚;优选为正己烷或正庚烷。
在另一实施方式中,步骤(2)中降温至0-20℃,优选至10-20℃。
在本发明的第三方面,提供一种如上所述的本发明提供的卡格列净丙酮水合物在制备治疗II型糖尿病的药物中的应用。
在另一实施方式中,所述药物为或含有结构如式Ⅱ所示的卡格列净;
在本发明的第四方面,提供一种如上所述的本发明提供的卡格列净的制备方法,所述方法包括步骤:
(i)使如如上所述的本发明提供的卡格列净丙酮水合物与有机溶剂混合,得到澄清溶液;
(ii)使步骤(i)得到的澄清溶液降温并与抗溶剂混合,得到结构如式Ⅱ所示的卡格列净;
据此,本发明提供了一种简便且高收率获得纯净卡格列净的方法。
具体实施方式
发明人经过广泛而深入的研究,发现可以通过将卡格列净粗品与水和丙酮混合形成的溶液获得一种结构如式Ⅰ所示的卡格列净丙酮水合物,该过程可有效除去结构如式Ⅲ所示的异构体杂质。在此基础上,完成了本发明。
本发明中涉及的主要化合物如下表所列:
如本文所用,“卡格列净粗品”是指经高效液相色谱法(HPLC)测定,卡格列净的HPLC纯度在93.0-98.0%。在本发明的一种实施方式中,卡格列净粗品可通过本领域所有制备方法得到;其中含有式Ⅲ的杂质,还含有其他容易精制去除的工艺杂质。
根据本领域的相关规定,作为原料药的卡格列净(一般是通过精制的)的杂质需控制在HPLC含量0.15%以内。
如本文所用,“HPLC纯度”或“HPLC含量”可以互换使用,都是指以通过HPLC的测定方法所得到的所有保留时间下的峰面积或峰高的总和为计,其中某个保留时间下的峰面积或峰高所占的百分比。
本发明中式Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的HPLC测定方法相同。
如本文所用,“卡格列净丙酮水合物”、“卡格列净丙酮水合物多晶型物”或“式Ⅰ化合物”可以互换使用,都是指结构如式Ⅰ所示的化合物。
如本文所用,“卡格列净”或“式Ⅱ化合物”可以互换使用,都是指结构如式Ⅱ所示的化合物。
如本文所用,“卡格列净异构体”、“异构体杂质”或“式Ⅲ化合物”可以互换使用,都是指结构如式Ⅲ所示的化合物。
本发明提供了一种如式(Ⅰ)所示的卡格列净丙酮水合物。
每摩尔卡格列净包含0.6-1.2mol的水和0.5-1.0mol的丙酮;优选为每摩尔卡格列净包含0.8-1.0mol的水和/或0.7-0.9mol的丙酮。
在本发明的一种实施方式中,以所述卡格列净丙酮水合物的总重量计,其中的水分含量为2.0-4.5wt%,丙酮含量为5.5-11.5wt%。
在本发明的一种实施方式中,提供的卡格列净丙酮水合物的粒径D50在30-80μm。
在本发明的一种实施方式中,提供的卡格列净丙酮水合物的HPLC纯度≥97.0%,优选地≥99.0%。
在本发明的一种实施方式中,提供的卡格列净丙酮水合物中结构如式Ⅲ的异构体杂质的HPLC含量不超过3.0%,优选不超过1.0%,更优选不超过0.5%。
本发明提供的卡格列净丙酮水合物,晶型使用粉末X-射线衍射分析,采用Cu-Ka辐射,所述卡格列净丙酮水合物以2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在以下位置具有特征峰:3.89±0.2°、10.94±0.2°、13.03±0.2°、15.48±0.2°、17.32±0.2°、18.82±0.2°、20.28±0.2°、22.52±0.2°、22.74±0.2°、25.10±0.2°、26.80±0.2°;更优选地,其XRPD图谱如图1所示。
上述卡格列净丙酮水合物使用差示扫描量热技术(DSC)分析时,表现为升温速度为2℃/min的DSC图谱中存在两个吸热峰,分别在57±6℃和86±12℃处,具体地,在57±6℃处为失溶剂吸热峰,在86±12℃处有熔化吸热峰;更优选地,其DSC图谱如图2所示。
上述卡格列净丙酮水合物的热重分析(TGA)图谱在150℃前失重7-16%%;更优选地,其TGA图谱如图3所示。
上述卡格列净丙酮水合物的的核磁共振(HNMR)分析图谱在2.08±0.2处有丙酮的特征峰;更优选地,其HNMR图谱如图4所示。
本发明还提供了卡格列净丙酮水合物的制备方法,所述方法包括步骤:
第一步,使卡格列净粗品和丙酮或含有丙酮的有机溶剂混合,得到溶液1;
第二步,使溶液1与水混合,得到溶液2;
第三步,使溶液2与抗溶剂混合后降温、析晶得到本发明提供的卡格列净丙酮水合物。
上述第一步的混合温度为25-35℃;在本发明的一种实施方式中,将卡格列净粗品溶解于丙酮或含有丙酮的有机溶剂中以形成卡格列净的丙酮溶液或含有丙酮的有机溶剂的混合溶液。
在本发明的一种实施方式中,上述第一步中所述含有丙酮的有机溶剂中还含有酯类化合物,所述丙酮和酯类的重量比为2:1-1:3,优选为1:1-1:2;所述酯类可以是C3-C6酯,优选为乙酸甲酯、乙酸乙酯或乙酸异丙酯;本发明优选的含有丙酮的有机溶剂为丙酮和乙酸乙酯的混合溶剂。
在本发明的一种实施方式中,上述第一步中卡格列净的粗品与丙酮的重量比为1:3-1:20,优选为1:5-1:10;卡格列净粗品与含有丙酮的有机溶剂的重量比为1:3-1:10,优选为1:4-1:5。
上述第二步的混合温度为25-35℃;在本发明的一种实施方式中,将所述混合是将水加入溶液1中得到溶液2。
在本发明的一种实施方式中,上述第二步中,第一步中使用的卡格列净的粗品与第二步中加入的水的摩尔比为3:1-1:10,优选为2:1-1:3。
上述第一步和第二步得到的溶液1和溶液2都是澄清液体。
上述第三步的混合温度为25-35℃;在本发明的一种实施方式中,将所述混合是将抗溶剂加入溶液2中。
上述第三步降温至0-20℃,例如但不限于,0-5℃、3-15℃等。
在本发明的一种实施方式中,上述第三步在降温后静置(析晶)3-5小时。
上述第三步中使用的抗溶剂选自下组:正己烷、异己烷、正庚烷、正辛烷、甲基叔丁基醚、异丙醚、乙醚、油醚。
在本发明的一种实施方式中,上述第三步在析晶后进行过滤以得到本发明提供的卡格列净丙酮水合物。
本发明提供的卡格列净丙酮水合物中异构体杂质含量极低,可用于制备高纯度卡格列净,也可用于开发治疗II型糖尿病的药物供临床使用。
本发明也提供卡格列净的精制方法,所述方法包括步骤:
第一步,使通过本发明提供的方法获得的卡格列净丙酮水合物和有机溶剂混合,得到澄清溶液;
第二步,使第一步得到的溶液降温后与抗溶剂混合,得到精制的卡格列净。
上述第一步中所述卡格列净丙酮水合物与有机溶剂的用量比(质量比)为1:2-6;优选为1:3-4。
上述第一步的混合温度为50-70℃,例如但不限于,52-55℃、57-67℃、54-68℃等。
上述第一步中的有机溶剂为酯类化合物,所述酯类可以是C3-C6酯,优选为乙酸甲酯、乙酸乙酯或乙酸异丙酯。
上述第二步中将温度将为的混合温度为10-30℃,例如但不限于,15-21℃、14-25℃、12-28℃等。
在本发明的一种实施方式中,上述第二步中可以使用本领域常规的方法进行降温,例如但不限于,冰浴降温、智能高低温程控温槽程序降温等。
在本发明的一种实施方式中,上述第二步在降温后向溶液中加入抗溶剂,例如但不限于,缓慢滴加等,加入后保温1-4小时。
在本发明的一种实施方式中,上述第二步中使用的抗溶剂选自下组:正己烷、异己烷、正庚烷、正辛烷、甲基叔丁基醚、异丙醚、乙醚、油醚。
在本发明的一种实施方式中,上述第二步在加入抗溶剂后抽滤得到精制的卡格列净。
本发明提到的上述特征,或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用,说明书中所揭示的各个特征,可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明,所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。
本发明的主要优点在于:
1、本发明提供的卡格列净丙酮水合物粒径比卡格列净大,流动性好,在生产过程中离心、烘料、出料和包装方面都有优势。
2、通过本发明提供的制备方法可以有效除去卡格列净粗品中的异构体杂质,从而通过获得的纯净的卡格列净丙酮水合物方便得到纯净的卡格列净。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的,例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。除非另行定义,文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外,任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
下述实施例采集数据所用的仪器:
X-射线粉末衍射(XPRD)数据采自于荷兰帕纳科X射线衍射仪X'Pert powder;
差热分析(DSC)数据采自于METTLER TOLEDO DSC3-7863;
热重分析(TGA)数据采自于PerkinElmer,PE-TGA4000;
核磁(HNMR)数据采自于BRUKER 400MHz;
水分数据采自于Karl Fischer V20;
HPLC数据采自于Agilent 1260;
GC(丙酮含量)数据采自于Agilent 7890B
下述实施例得到的卡格列净丙酮水合物多晶型物等纯度HPLC测定方法:
仪器:Agilent 1260液相色谱仪,带DAD检测器或等效仪器。
色谱柱:Lux-Cellulose-4 4.6×250mm,5um;
进样量:10μL;
检测波长:225nm;
柱温:35℃;
流速:1mL/min;
流动相A:0.1%三乙胺水溶液;
流动相B:乙腈;
梯度运行表:
时间(分钟) |
0 |
10 |
15 |
35 |
35 |
42 |
流动相(B) |
30 |
50 |
95 |
95 |
30 |
30 |
稀释溶剂(即配制供试品的溶剂):乙腈:水=1:1;
供试品溶液:称取供试品20mg置于20ml容量瓶中,加溶剂溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
下述实施例得到的卡格列净丙酮水合物多晶型物中丙酮含量的GC测定方法:
仪器:安捷伦7890B气相色谱仪带FID检测器或与之等效的仪器;
色谱柱:DB-624,60m×0.53mm×3μm或等效色谱柱;
进样口温度:180℃;
检测器温度:280℃;
进样量:1μL;
分流比:5:1;
空气流速:450mL/min;
氢气流速:40mL/min;
氮气流速:30mL/min;
柱流速:2.0mL/min;
程序升温:
升温速率(℃/min) |
温度(℃) |
驻留时间(min) |
/ |
60 |
3 |
5 |
120 |
0 |
10 |
220 |
12 |
下述实施例中的粒径测定方法:
1.仪器与用具
1.1仪器:MALVERN激光粒度仪或相当仪器;
1.2型号:Mastersizer 3000或相当型号;
1.3分散单元:Hydro 3000SM或同等规格;
1.4工作站:Mastersizer3000-V3.60数据工作站或其他工作站;
1.5烧杯:25ml。
2.试剂与溶液:
2.1分散剂:1%吐温20溶液配制:称取1.5g吐温20加入到148.5g纯化水的烧杯中搅拌均匀,然后超声20min至分散均匀备用。;
2.2清洗溶剂:纯化水。
3.供试品混悬液的制备:
3.2微粉产品:称取混合均匀的供试品约0.12g于10mL分散剂的烧杯中搅拌至无可见团聚,再水浴超声10S使成均匀混悬液;(混悬液中应目测无可见团聚;)
4.仪器条件和参数:
4.1分散方法:湿法分散;
4.2分析模型:通用模型;
4.3灵敏度:正常;
4.4搅拌速度:2400rpm;
4.5样品折射率:2.00;
4.6样品吸收率:0.1;
4.7分散剂折射率:1.33;
4.8背景测量时间:12s;
4.9样品测量时间:12s;
4.10遮光度范围:10~30%;
4.11检测次数:3次;
4.12超声时间:10S;
4.13超声强度:70%。
5.操作步骤:
5.1背景测量,按上述要求设置好测量参数,进样前用清洗溶剂清洗进样系统至少3次,直到背景测量正常。
5.2样品检测,必须摇晃样品混悬液使其均匀后,再向进样器内缓慢加入样品混悬液至要求遮光度范围内;待信号稳定、遮光度不再变化后开始检测(检测1次)。
实施例1
卡格列净丙酮水合物的制备
卡格列净粗品(80g)和丙酮(480g)加入1000ml三口瓶中,25-35℃搅拌溶清。向溶液中加入水(3.8g)。在25-35℃下缓慢滴加正庚烷(200g)。滴加结束后,冰水浴降温,內温控制在10-20℃,保温搅拌1-2小时,抽滤,固体50℃减压烘干得到85.3g得到白色固体。摩尔收率92%,获得的卡格列净丙酮水合物HPLC纯度为99.90%,式Ⅲ的异构体杂质的HPLC含量为0.10%。
获得的卡格列净丙酮水合物的XRPD如图1,DSC如图2,TGA如图3,HNMR如图4,HPLC如图5,GC如图6。
获得的卡格列净丙酮水合物中水分3.7%,丙酮含量10.39%。
获得的卡格列净丙酮水合物的粒径D50是53.4μm。
实施例2
卡格列净(API)的精制
卡格列净粗品(100g)和乙酸乙酯(540g)加入1000ml三口瓶中,加热至35-50℃,搅拌使其溶清,然后降温至25-35℃。向溶液中加入水(3.2g)。內温控制在25-35℃,缓慢滴加正庚烷(420g)。滴加结束后,在25-35℃保温搅拌1-2小时,抽滤,固体50℃减压烘干得到90.8g得到白色固体。摩尔收率89%,HPLC纯度为97.19%,式Ⅲ的异构体杂质2.57%(杂质不合格,不能作为原料药使用)。
精制的卡格列净的XRPD如图7,DSC如图8,TGA如图9,HNMR如图10,HPLC如图11。水分2.16%。
实施例3
卡格列净(API)的精制
卡格列净粗品(100g)和乙酸异丙酯(360g)加入1000ml三口瓶中,20-35℃搅拌溶清。向溶液中加入水(4g)。冰水浴降温,內温控制在10-20℃,缓慢滴加正庚烷(210g)。滴加结束后,在10-20℃保温搅拌1-2小时,抽滤,固体50℃减压烘干得到95.9g得到白色固体。收率94%,HPLC纯度为96.51%,式Ⅲ的异构体杂质3.13%(杂质不合格,不能作为原料药使用)。
精制的卡格列净的XRPD如图12,DSC如图13,TGA如图14,HNMR如图15,HPLC如图16。水分2.35%。
实施例4
卡格列净(API)的精制
实施例1得到的卡格列净丙酮水合物(100g)和乙酸乙酯(300g)加入1000ml三口瓶中,60-65℃搅拌溶清。冰水浴降温,內温控制在10-20℃,缓慢滴加正庚烷(100g)。滴加结束后,在10-20℃保温搅拌2-3小时,抽滤,固体60℃减压烘干得到84.2g白色固体。
获得的卡格列净的XRPD如图17,DSC如图18,TGA如图19,HPLC如图20。
收率98%,HPLC纯度为99.89%,式Ⅲ的异构体杂质0.07%(杂质含量合格,可作为原料药使用)。
结果表明,通过本发明的方法可以简便地(一次精制)获得一种很纯的卡格列净丙酮水合物,尤其是其中所含有的式Ⅲ异构体杂质非常低,从而有助于有效获得纯净的卡格列净。
本领域常规方法要使式Ⅲ异构体杂质含量达到这样低的程度则需要经过多次结晶处理,例如根据实施例2和3的方法,根据去除率计算,分别需要6次和10精制才可能使精制的卡格列净中的式Ⅲ异构体杂质HPLC含量控制在本领域希望的0.15%以内。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并非用以限定本发明的实质技术内容范围,本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中,任何他人完成的技术实体或方法,若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同,也或是一种等效的变更,均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。