CN114195676A - 双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114195676A
CN114195676A CN202111516158.0A CN202111516158A CN114195676A CN 114195676 A CN114195676 A CN 114195676A CN 202111516158 A CN202111516158 A CN 202111516158A CN 114195676 A CN114195676 A CN 114195676A
Authority
CN
China
Prior art keywords
boc
compound
preparation
nmr
isopropylbenzamide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202111516158.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114195676B (zh
Inventor
陈河如
何业谱
朱文达
刘志军
陈世坚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Yaoben Junan Pharmaceutical Technology Co ltd
Original Assignee
Guangzhou Yaoben Junan Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Yaoben Junan Pharmaceutical Technology Co ltd filed Critical Guangzhou Yaoben Junan Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority to CN202111516158.0A priority Critical patent/CN114195676B/zh
Publication of CN114195676A publication Critical patent/CN114195676A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114195676B publication Critical patent/CN114195676B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C243/00—Compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C243/10—Hydrazines
    • C07C243/22—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C243/00—Compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C243/10—Hydrazines
    • C07C243/12—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C243/16—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C07C243/18—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用，所述芳基肼类化合物的结构如式I所示，其加合物是在双芳基肼类化合物的肼基上加合苄氧羰基甘胺酰脯氨酰基。本发明的双芳基肼类化合物的抗癌活性优于现有阳性对照药物丙卡巴肼；其Z‑GP加合物能显著降低对正常细胞的体外毒性和体内毒性，在体内外能被FΑP‑α酶特异性水解切除二肽部分(Z‑GP)释放出肼解产物；其Z‑GP加合物能显著抑制荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长以及降低对非靶器官毒性。
Figure DDA0003397188710000011

Description

双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用
技术领域
本发明属于抗肿瘤化学药物领域，具体涉及一种双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
烷化剂是最早问世的细胞毒类药物，主要用于恶性淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病，也可用于恶性肿瘤，特别是小细胞肺癌所致的上腔静脉综合症。常用的烷化剂有环磷酰胺、氮芥、噻替哌、环已亚硝脲、马利兰(白消安)、氮烯米胺、甲基苄肼等。与其他抗肿瘤药相比，烷化剂很少产生耐药性，包括烷化剂之间或是烷化剂与非烷化剂之间均较少发生交叉耐药，且程度较轻。骨髓抑制和胃肠道反应为本类药物常见的不良反应。
肼类烷化剂由于在制备上比较简便而受到药物学家的关注。最早应用于临床的肼类烷化剂药物是丙卡巴肼(procarbazine，Pcb)，主要用于治疗何杰金氏病，对于其他恶性肿瘤如恶性淋巴瘤、肺癌、多发性骨髓瘤等也有一定的疗效。由于抗癌活性和选择性存在严重不足，丙卡巴肼具有较大的毒副作用，诸如骨髓抑制、肝脏毒性、生殖毒性等。
发明内容
为了降低药物对正常细胞的毒副作用，同时提高其抗肿瘤效果，本发明的目的在于提供一种双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种双芳基肼类化合物，其结构如式I所示：
Figure BDA0003397188690000011
其中1Ar为4-(N-异丙基氨基)甲酰基苄基；
2Ar为如下结构的任一种：
Figure BDA0003397188690000021
其中X＝H,F,Cl,Br,CH3,OCH3,OCF3,NO2；X可以在芳环的任一位置上；
优选地，所述的双芳基肼类化合物包括以下的具体化合物：
Figure BDA0003397188690000022
Figure BDA0003397188690000031
Z-GP-双芳基肼(Z-GP-DAZ)，是在上述双芳基肼类化合物的肼基上加合苄氧羰基甘胺酰脯氨酰基(Z-GP)，其结构如式II所示：或者为式II所示化合物的同分异构体，其结构如式III所示：
Figure BDA0003397188690000032
式II和式III为同分异构体，两者在药物代谢、药物用途中具有相同效果，均是肿瘤间质成纤细胞激活蛋白酶α(FAP-α)的特异性水解底物。
所述双芳基肼类化合物和Z-GP-双芳基肼的制备方法，包括以下步骤：
(1)1-叔丁氧羰基单芳基肼的制备
当2Ar为
Figure BDA0003397188690000033
时，将芳肼与二苯甲酮反应，生成N-芳基二苯甲酮腙；将N-芳基二苯甲酮腙与二碳酸二叔丁酯在碱存在下反应，生成N-Boc-N-芳基二苯甲酮腙；将N-Boc-N-芳基二苯甲酮腙与羟胺反应，生成1-叔丁氧羰基单芳基肼；
合成路线如下所示：
Figure BDA0003397188690000034
当2Ar为
Figure BDA0003397188690000035
时，将N-Boc肼与二苯甲酮反应，生成N-Boc二苯甲酮腙；将N-Boc二苯甲酮腙与芳甲基溴、叔丁醇钾反应，生成N-Boc-N-芳甲基二苯甲酮腙；将N-Boc-N-芳甲基二苯甲酮腙与羟胺反应生成1-叔丁氧羰基单芳甲基肼；
合成路线如下所示：
Figure BDA0003397188690000041
上述步骤中，所述芳肼或N-Boc肼与二苯甲酮的摩尔比为1:(1～3)；
所述N-芳基二苯甲酮腙与二碳酸二叔丁酯(Boc2O)的摩尔比为1:(1～3)；所述碱为三乙胺或碳酸钾；
所述N-Boc二苯甲酮腙与芳甲基溴、叔丁醇钾的摩尔比为1:(1～3):(1～3)；
所述N-Boc-N-芳基二苯甲酮腙或N-Boc-N-芳甲基二苯甲酮腙与羟胺的摩尔比为1:(1～3)；
(2)双芳基肼类化合物的制备
将1-叔丁氧羰基单芳基肼或1-叔丁氧羰基单芳甲基肼在碱性试剂作用下与4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺反应，随后脱保护得到本发明的双芳基肼类化合物；
合成路线如下所示：
Figure BDA0003397188690000042
所述1-叔丁氧羰基单芳基肼或1-叔丁氧羰基单芳甲基肼与4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺、碱性试剂的摩尔比为1.0:(1.0～3.0):(0.1～0.3)；
所用的碱性试剂为碘化钾、碳酸钾或碳酸锂中的一种以上；
所述脱保护所用的试剂优选三氟醋酸或4.0M盐酸甲醇溶液；
(3)Z-GP-双芳基肼的制备
将双芳基肼类化合物、苄氧羰基甘氨酰脯氨酸(Z-GP-OH)和缩合试剂，在0℃～30℃下搅拌反应，得混合物；向所得混合物中加入饱和盐溶液，进行淬灭、分离、纯化，即得化合物Z-GP-双芳基肼；
合成路线如下所示：
Figure BDA0003397188690000051
所述的缩合试剂至少含有1-羟基苯骈三唑(HOBT)和N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)；
所述的缩合试剂还含有2-(7-氧化苯骈三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、氯甲酸乙酯、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)、N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、六氟磷酸苯骈三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷或1-氯N,N,2-三甲基丙烯胺中的至少一种；
优选地，所述的缩合试剂为HATU、HOBT和DIPEA的混合物。
所述双芳基肼类化合物、苄氧羰基甘氨酰脯氨酸(Z-GP-OH)与缩合试剂的摩尔比为1:(1～3.0):(1.05～3.0)。
本发明的双芳基肼类化合物和Z-GP-双芳基肼及它们在生理上可接受的盐具有抗肿瘤活性，可用于制备抗肿瘤化合物；
所述肿瘤为恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌、乳腺癌、胶质瘤或多发性骨髓瘤；
所述在生理上可接受的盐为酒石酸盐、硫酸盐、盐酸盐；
所述的双芳基肼类化合物和Z-GP-双芳基肼在生理上可接受的盐由以下步骤制得：
将双芳基肼类化合物或Z-GP-双芳基肼溶于含1.05～3.0摩尔量酸(HA)的有机溶剂中，于-10℃～40℃下搅拌反应3～20小时，分离固体化合物，洗涤，再将固体化合物重新溶于水中，冷冻干燥，即得双芳基肼类化合物或Z-GP-双芳基肼在生理上可接受的盐；
优选地，所述有机溶剂为体积比为1:1的甲醇和二氯甲烷的混合溶液。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
1、本发明的双芳基肼类化合物的抗癌活性优于现有阳性对照药物丙卡巴肼；其Z-GP加合物能显著降低对正常细胞的体外毒性和体内毒性，在体内外能被FΑP-α酶特异性水解切除二肽部分(Z-GP)释放出肼解产物；其Z-GP加合物能显著抑制荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长以及降低对非靶器官毒性；
2、本发明Z-GP-双芳基肼的制备方法具有反应条件温和、实验步骤简单、收率高、产品纯度高、经济实用等特点。
附图说明
图1是FΑP-α对化合物Z-GP-DAZ1的酶解率曲线。
图2是FΑP-α对化合物Z-GP-DAZ8的酶解率曲线。
图3是FΑP-α对化合物Z-GP-DAZ11的酶解率曲线。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
N-异丙基-4-((2-苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ1)的制备，包括以下步骤：
1.1.N-异丙基对甲基苯甲酰胺的制备
称取对甲苯甲酸273mg(2.0mmol)于25mL的圆底烧瓶中，加入5.0mL(68.8mmol)二氯亚砜(过量)，于78℃油浴加热回流2h；旋蒸除去过量的二氯亚砜，得对甲基苯甲酰胺；将对甲基苯甲酰胺重新溶于2.0mL干燥的二氯甲烷(DCM)中；另取1.0mL(11.7mmol)异丙胺溶于2.0mL干燥的DCM中，得A液；控制温度在30℃下，逐渐将A液滴加到反应体系中，加料完毕继续搅拌30min，室温下搅拌反应3h；之后升温至40℃，继续反应30min，停止加热；将反应液倾入50mL冰水中，用二氯甲烷-乙醚(体积比1∶5)萃取4次，合并有机相，依次用水、稀盐酸、水、稀氢氧化钠溶液、水洗涤，无水硫酸镁干燥；旋蒸除去溶剂，得白色固体化合物289.8mg，收率88.9％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.67(d,J＝3.0Hz,1H),7.64(d,J＝3.0Hz,1H),7.21(d,J＝3.0Hz,1H),7.19(d,J＝3.0Hz,1H),4.22～4.33(m,1H),2.38(s,3H),1.26(s,3H),1.24(s,3H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ:166.6,141.5,132.1,129.1,129.1,126.8,126.8,41.7,22.8,21.3,21.3.ESI-MS m/z:178.2[M+H]+,200.3[M+Na]+。以上数据证明所得白色固体产物为N-异丙基对甲基苯甲酰胺。
1.2.4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备
称取4-甲基-N-异丙基苯甲酰胺(177.0mg,1.0mmol)，N-溴代琥珀酰亚胺(178.0mg,1.0mmol)和过氧苯甲酸酐(24.2mg,0.1mmol)于50mL圆底烧瓶中，加入5.0mL氯仿，搅拌10min后置于40W白炽灯下继续反应。3h后溶液呈血红色，继续反应直至红色消失，即显示反应已经完全。停止光照，将反应液倾入30mL水中，用二氯甲烷萃取(3×30mL)，合并有机相。无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，得浅黄色固体化合物，硅胶柱层析(EA/PE＝1/8，V/V)梯度洗脱分离纯化，得白色固体194.7mg，收率为76.0％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.51(d,J＝8.2Hz,2H),4.73(s,2H),4.08(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.87,140.81,134.67,129.04,127.61,41.00,33.59,22.31.
1.3.N-苯基二苯甲酮腙的制备
称取苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)和二苯甲酮(218.7mg,1.2mmol)溶于30mL甲醇/醋酸(体积比5:1)中，搅拌溶解，将反应装置置于60℃油浴锅中加热回流反应5～8h，TLC监控直至反应完全，停止加热，反应液冷却，有固体析出，抽滤收集固体，用己烷洗涤固体，真空干燥，得N-苯基二苯甲酮腙220.6mg，收率81％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.72(s,1H),7.95(m,2H),7.61(m,5H),7.35(m,7H),7.11(m,1H)；ESI-MS(m/z):272.3[M+H]+。
1.4.N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙的制备
称取N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)，溶于10mL二氯甲烷，室温搅拌5min，加入三乙胺(0.7mL,5.0mmol)，随后逐滴加入二碳酸二叔丁酯(0.3mL,1.3mmol)，搅拌过夜，TLC跟踪监控。反应结束后加水淬灭，用二氯甲烷萃取(3×20mL)，合并有机相。无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，得淡黄色油状物，硅胶柱层析(EA/PE＝1/40，V/V)梯度洗脱分离纯化，得白色固体309.1mg，收率83％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.93(m,2H),7.58(m,5H),7.33(m,7H),7.07(m,1H),1.50(s,9H)；ESI-MS(m/z):373.6[M+H]+。
1.5.1-Boc-1-苯基肼的制备
称取N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)，溶于10mL吡啶，随后加入盐酸羟胺(139.0mg,2.0mmol)，N2保护下油浴80℃搅拌反应过夜，冷却后加入DCM，共沸蒸馏除去吡啶，得淡黄色油状物，硅胶柱层析(EA/PE＝1/40，V/V)梯度洗脱分离纯化，得淡黄色油状物202.0mg，收率97％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45(d,J＝7.7Hz,2H),7.31-7.25(m,2H),7.05(t,J＝7.3Hz,1H),5.04(s,2H),1.45(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:154.48,143.85,127.77,123.70,123.03,80.26,27.92。
1.6.4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
称取1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)、4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺(256.0mg,1.0mmol)、无水碳酸钾(210.0mg,1.5mmol)和碘化钾(16.0mg,0.1mmol)于100mL圆底烧瓶中，加入30mL无水乙腈，回流15h，TLC点板检测。反应结束后旋干溶剂得白色固体，加入20mL二氯甲烷充分溶解，过滤去除不溶物，用少量二氯甲烷洗涤，合并滤液和洗涤液。随后加入30mL饱和氯化钠水溶液，用二氯甲烷萃取(3×30mL)，合并有机相。无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂得粗品，硅胶柱层析(EA/PE＝1/6，V/V)梯度洗脱分离纯化，得淡黄色油状物303.0mg，收率79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(d,J＝7.7Hz,1H),7.76(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝7.9Hz,2H),7.35(d,J＝8.2Hz,2H),7.28(t,J＝7.9Hz,2H),7.08(t,J＝7.3Hz,1H),5.87(t,J＝5.7Hz,1H),4.08(dd,J＝13.9,6.8Hz,1H),3.99(d,J＝5.6Hz,2H),1.44(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.07,153.68,142.34,140.80,133.57,128.43,128.06,127.04,124.35,123.56,80.64,53.10,40.91,27.87,22.32.
1.7.4-((2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ1)的制备
称取4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)于25mL圆底烧瓶中，加入10mL无水二氯甲烷，搅拌溶解，逐滴加入4M盐酸甲醇溶液(2.0mL,8.0mmol)，搅拌过夜，TLC点板跟踪检测。反应结束后抽滤得白色固体285.8mg，收率为89.3％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.32(d,J＝7.8Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.30(t,J＝7.9Hz,2H),7.18(d,J＝7.7Hz,2H),6.98(t,J＝7.3Hz,1H),4.38(s,2H),4.10(dd,J＝13.3,6.6Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.84,143.56,135.24,133.28,130.60,129.15,127.29,122.17,116.06,51.02,41.08,22.31.TOF-MS(m/z):calcd for C17H22N3O([M+H]+)284.1763,found 284.1766。所有数据证实该化合物为4-((2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ1)。
Figure BDA0003397188690000081
实施例2
N-异丙基-4-((2-苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ2)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
2.1.N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为对甲基苯肼盐酸盐(158.6mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙237.7mg，收率83％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.69(s,1H),7.93(m,2H),7.58(m,5H),7.36(m,7H),2.33(s,3H)；ESI-MS(m/z):287.5[M+H]+。
2.2.N-Boc-N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙(286.4mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙328.5mg，收率85％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.94(m,2H),7.59(m,5H),7.34(m,7H),2.35(s,3H),1.46(s,9H)；ESI-MS(m/z):387.4[M+H]+。
2.3.1-Boc-1-(4-甲基)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙(386.5mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物180.1mg，收率81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.30(d,J＝8.4Hz,2H),7.08(d,J＝8.2Hz,2H),4.99(s,2H),2.25(s,3H),1.43(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ154.59,141.42,132.86,128.29,123.18,80.12,27.98,20.40。
2.4.4-((2-Boc-2-(4-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(4-甲基)苯基肼(266.7mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物310.1mg，收率为78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),7.24(d,J＝8.3Hz,2H),7.09(d,J＝8.3Hz,2H),5.81(t,J＝5.7Hz,1H),4.08(dd,J＝13.3,6.6Hz,1H),3.96(d,J＝5.7Hz,2H),2.26(s,3H),1.42(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13CNMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.11,153.79,140.92,139.77,133.59,133.55,128.60,128.46,127.07,123.80,80.44,52.99,40.95,27.92,22.36,20.45.
2.5.4-((2-(4-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ2)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(4-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(397.5mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体277.2mg，收率为93.2％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.27(d,J＝7.7Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.58(d,J＝8.2Hz,2H),7.13(d,J＝8.2Hz,2H),7.02(d,J＝8.4Hz,2H),4.32(s,2H),4.09(dd,J＝13.4,6.6Hz,1H),2.25(s,3H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.05,130.58,129.69,129.62,127.69,127.37,125.01,116.86,112.21,41.11,41.01,22.40,20.31.TOF-MS(m/z):calcd for C18H24N3O([M+H]+)298.1919,found 298.1917.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ2)。
Figure BDA0003397188690000091
实施例3
N-异丙基-4-((2-苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ3)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
3.1.N-(3-甲基苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为间甲基苯肼盐酸盐(158.6mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙234.8mg，收率83％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.67(s,1H),7.94(m,2H),7.59(m,6H),7.51(m,1H),7.35(m,3H),7.25(m,1H),7.09(m,1H),2.29(s,3H)；ESI-MS(m/z):287.5[M+H]+。
1.3.2.N-Boc-N-(3-甲基苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(3-甲基苯基)二苯甲酮腙(286.4mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(4-甲基苯基)二苯甲酮腙324.6mg，收率84％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.93(m,2H),7.59(m,6H),7.53(m,1H),7.34(m,3H),7.26(m,1H),7.11(m,1H),2.31(s,3H),1.51(s,9H)；ESI-MS(m/z):387.5[M+H]+。
3.3.1-Boc-1-(3-甲基)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(3-甲基苯基)二苯甲酮腙(386.5mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物177.9mg，收率80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.29(m,1H),7.15(t,J＝7.8Hz,1H),6.98(s,1H),6.87(d,J＝7.4Hz,1H),5.01(s,2H),2.28(s,3H),1.44(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ154.54,143.79,136.96,127.62,124.45,123.67,120.29,80.24,27.97,21.11。
3.4.4-((2-Boc-2-(3-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(3-甲基)苯基肼(266.7mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物314.1mg，收率为79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.15(d,J＝7.8Hz,1H),7.78(d,J＝8.2Hz,2H),7.35(d,J＝8.2Hz,2H),7.17(t,J＝5.1Hz,3H),6.90(d,J＝6.0Hz,1H),5.82(t,J＝5.7Hz,1H),4.09(dd,J＝13.3,6.6Hz,1H),3.98(d,J＝5.7Hz,2H),2.26(s,3H),1.43(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:165.11,153.73,142.23,140.88,137.26,133.58,128.52,127.90,127.08,125.14,124.30,120.88,80.56,53.10,40.96,27.91,22.36,21.0。
3.5.4-((2-(3-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ3)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(3-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(397.5mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体276.0mg，收率为92.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(d,J＝7.8Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.63(d,J＝8.3Hz,2H),7.19(t,J＝8.1Hz,1H),6.96(d,J＝6.6Hz,2H),6.81(d,J＝7.6Hz,1H),4.38(s,2H),4.09(td,J＝13.3,6.6Hz,1H),2.26(s,3H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.94,143.42,138.65,135.33,133.18,130.70,129.15,127.37,123.22,116.74,113.37,51.12,41.17,22.37,21.23.TOF-MS(m/z):calcd for C18H24N3O([M+H]+)298.1919,found 298.1943.所有数据证实该化合物为4-((2-(3-甲基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ3)。
Figure BDA0003397188690000101
实施例4
N-异丙基-4-((2-(4-氯苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ4)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
4.1.N-(4-氯苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为对氯苯肼盐酸盐(179.0mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(4-氯苯基)二苯甲酮腙260.8mg，收率85％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.65(s,1H),7.96(m,2H),7.58(m,5H),7.35(m,3H),7.11(m,4H)；ESI-MS(m/z):307.9[M+H]+。
4.2.N-Boc-N-(4-氯苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(4-氯苯基)二苯甲酮腙(306.8mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(4-氯苯基)二苯甲酮腙349.9mg，收率86％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.97(m,2H),7.59(m,5H),7.36(m,3H),7.12(m,4H),1.52(s,9H)；ESI-MS(m/z):407.8[M+H]+。
4.3.1-Boc-1-(4-氯)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(4-氯苯基)二苯甲酮腙(406.9mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物199.0mg，收率82％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.50(d,J＝8.9Hz,2H),7.32(d,J＝8.9Hz,2H),5.08(s,2H),1.45(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ154.29,142.86,127.68,127.41,124.31,80.72,27.89。
4.4.4-((2-Boc-2-(4-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(4-氯)苯基肼(291.2mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物334.4mg，收率为80％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.43(d,J＝8.8Hz,2H),7.32(dd,J＝12.6,5.9Hz,4H),5.93(s,1H),4.08(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),4.00(t,J＝5.4Hz,2H),1.45(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.09,153.47,141.47,140.66,133.63,129.29,128.54,127.97,127.11,124.84,81.12,53.11,40.96,27.85,22.36。
4.5.4-((2-(4-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ4)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(4-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(417.9mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体288.8mg，收率为90.6％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(d,J＝7.7Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.62(d,J＝8.2Hz,2H),7.34(d,J＝8.8Hz,2H),7.15(d,J＝8.8Hz,2H),4.34(s,2H),4.09(dd,J＝13.3,6.6Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.77,135.16,130.40,128.90,127.63,127.24,125.23,117.40,113.57,51.19,41.02,22.27.TOF-MS(m/z):calcd for C17H21N3OCl([M+H]+)318.1373,found 318.1378.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ4)。
Figure BDA0003397188690000111
实施例5
N-异丙基-4-((2-(3-氯苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ5)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
5.1.N-(3-氯苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为间氯苯肼盐酸盐(179.0mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(3-氯苯基)二苯甲酮腙254.7mg，收率83％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.66(s,1H),7.95(m,2H),7.73(s,1H),7.59(m,6H),7.35(m,3H),7.28(m,1H),7.21(m,1H)；ESI-MS(m/z):307.8[M+H]+。
5.2.N-Boc-N-(3-氯苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(3-氯苯基)二苯甲酮腙(306.8mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(3-氯苯基)二苯甲酮腙345.8mg，收率85％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.94(m,2H),7.72(s,1H),7.58(m,6H),7.36(m,3H),7.29(m,1H),7.22(m,1H),1.51(s,9H)；ESI-MS(m/z):407.7[M+H]+。
5.3.1-Boc-1-(3-氯)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(3-氯苯基)二苯甲酮腙(406.9mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物196.6mg，收率81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.58(t,J＝1.9Hz,1H),7.49(dd,J＝8.3,1.1Hz,1H),7.30(t,J＝8.1Hz,1H),7.12–7.07(m,1H),5.10(s,2H),1.46(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ154.22,145.38,132.23,129.44,123.08,121.96,120.87,81.01,27.89。
5.4.4-((2-Boc-2-(3-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(3-氯)苯基肼(291.2mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物338.6mg，收率为81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.7Hz,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.50–7.46(m,1H),7.41(d,J＝8.3Hz,1H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),7.29(t,J＝8.1Hz,1H),7.13–7.09(m,1H),5.95(t,J＝5.5Hz,1H),4.08(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),4.00(d,J＝5.5Hz,2H),1.46(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.13,153.42,144.05,140.66,133.68,132.42,129.73,128.62,127.16,123.82,122.54,121.43,81.43,53.15,41.01,27.87,22.39。
5.5.4-((2-(3-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ4)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(3-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(417.9mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体290.7mg，收率为91.2％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(d,J＝7.7Hz,1H),7.86(d,J＝8.3Hz,2H),7.62(d,J＝8.2Hz,2H),7.29(t,J＝8.1Hz,1H),7.20(s,1H),7.05(d,J＝8.1Hz,1H),6.95(d,J＝7.8Hz,1H),4.34(s,2H),4.09(td,J＝13.3,6.6Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.79,135.04,133.57,130.67,130.25,127.64,127.21,125.38,120.85,114.74,113.80,51.51,41.00,22.27.TOF-MS(m/z):calcd for C17H21N3OCl([M+H]+)318.1373,found 318.1371.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-氯)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ5)。
Figure BDA0003397188690000131
实施例6
N-异丙基-4-((2-(4-溴苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ6)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
6.1.N-(4-溴苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为对溴苯肼盐酸盐(223.5mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(4-溴苯基)二苯甲酮腙302.6mg，收率86％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.63(s,1H),7.97(m,2H),7.73(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(m,5H),7.42(d,J＝8.3Hz,2H),7.32(m,3H)；ESI-MS(m/z):352.3[M+H]+。
6.2.N-Boc-N-(4-溴苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(4-溴苯基)二苯甲酮腙(351.2mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(4-溴苯基)二苯甲酮腙392.7mg，收率87％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.98(m,2H),7.75(d,J＝8.3Hz,2H),7.60(m,5H),7.43(d,J＝8.3Hz,2H),7.33(m,3H),1.53(s,9H)；ESI-MS(m/z):452.5[M+H]+。
6.3.1-Boc-1-(4-溴)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(4-溴苯基)二苯甲酮腙(451.4mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物238.3mg，收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.35(d,J＝8.3Hz,2H),6.81(d,J＝8.3Hz,2H),5.08(s,2H),1.45(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:154.26,143.31,130.61,124.69,115.54,80.79,27.90。
6.4.4-((2-Boc-2-(4-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(4-溴)苯基肼(344.6mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物379.2mg，收率为82％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.15(d,J＝7.7Hz,1H),7.76(d,J＝8.2Hz,2H),7.46–7.43(m,2H),7.36(dd,J＝16.3,8.5Hz,4H),5.93(t,J＝5.5Hz,1H),4.12–4.04(m,1H),3.99(d,J＝5.2Hz,2H),1.44(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:165.10,153.40,141.90,140.62,133.64,130.87,128.52,127.08,125.16,116.19,81.16,53.10,40.95,27.83,22.33。
6.5.4-((2-(4-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ6)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(4-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(462.4mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体325.0mg，收率为89.7％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(d,J＝7.8Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.63(d,J＝8.3Hz,2H),7.48(d,J＝8.9Hz,2H),7.12(d,J＝8.9Hz,2H),4.37(s,2H),4.09(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.77,143.08,135.24,133.22,131.78,130.53,127.25,117.91,113.51,51.03,41.03,22.28.TOF-MS(m/z):calcd for C17H21N3OBr([M+H]+)362.0868,found 362.0872.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ6)。
Figure BDA0003397188690000141
实施例7
N-异丙基-4-((2-(3-溴苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ7)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
7.1.N-(3-溴苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为间溴苯肼盐酸盐(223.5mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(3-溴苯基)二苯甲酮腙295.0mg，收率84％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.65(s,1H),7.96(m,2H),7.60(m,6H),7.53(s,1H),7.36(m,4H)；ESI-MS(m/z):352.3[M+H]+。
7.2.N-Boc-N-(3-溴苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(3-溴苯基)二苯甲酮腙(351.2mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(3-溴苯基)二苯甲酮腙379.1mg，收率84％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.95(m,2H),7.83(m,1H),7.58(m,6H),7.52(s,1H),7.36(m,4H),1.53(s,9H)；ESI-MS(m/z):452.5[M+H]+。
7.3.1-Boc-1-(3-溴)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(3-溴苯基)二苯甲酮腙(451.4mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物238.3mg，收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72(d,J＝1.7Hz,1H),7.52(dt,J＝7.0,2.2Hz,1H),7.27-7.20(m,2H),5.09(s,2H),1.46(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ154.24,145.51,129.79,126.02,124.89,121.33,120.65,81.05,27.92。
7.4.4-((2-Boc-2-(3-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(3-溴)苯基肼(344.6mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物379.2mg，收率为82％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,2H),7.62(s,1H),7.47–7.42(m,1H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),7.26–7.21(m,2H),5.95(t,J＝5.2Hz,1H),4.13–4.04(m,1H),4.01(t,J＝7.6Hz,2H),1.46(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.06,153.36,144.12,140.60,133.66,129.97,128.55,127.11,126.66,125.42,121.81,120.73,81.37,53.11,40.96,27.82,22.34。
7.5.4-((2-(3-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ7)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(3-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(462.4mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体331.3mg，收率为91.2％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26(d,J＝7.7Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.61(d,J＝8.2Hz,2H),7.32(s,1H),7.22(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(d,J＝7.8Hz,2H),4.33(s,2H),4.10(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.76,134.99,130.92,130.14,127.20,123.63,123.55,122.05,117.44,114.06,113.95,51.60,40.98,22.26.TOF-MS(m/z):calcd for C17H21N3OBr([M+H]+)362.0868,found362.0877.所有数据证实该化合物为4-((2-(3-溴)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ7)。
Figure BDA0003397188690000151
实施例8
N-异丙基-4-((2-(4-甲氧基苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ8)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
8.1.N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为对甲氧基苯肼盐酸盐(174.6mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙281.2mg，收率93％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.62(s,1H),7.93(m,2H),7.60(m,5H),7.55(d,J＝8.1Hz,2H),7.36(m,3H),7.05(d,J＝8.1Hz,2H),3.85(s,3H)；ESI-MS(m/z):303.5[M+H]+。
8.2.N-Boc-N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙(302.4mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙366.3mg，收率91％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.95(m,2H),7.59(m,5H),7.51(d,J＝8.1Hz,2H),7.35(m,3H),7.12(d,J＝8.1Hz,2H),3.84(s,3H),1.45(s,9H)；ESI-MS(m/z):403.3[M+H]+。
8.3.1-Boc-1-(4-甲氧基)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙(402.5mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物202.5mg，收率85％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.29(d,J＝9.0Hz,2H),6.84(d,J＝9.0Hz,2H),4.98(s,2H),3.72(s,3H),1.41(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:155.92,154.76,137.07,124.97,113.06,79.93,55.19,28.01。
8.4.4-((2-Boc-2-(4-甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(4-甲氧基)苯基肼(285.9mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物347.4mg，收率为84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.8Hz,1H),7.76(d,J＝8.2Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),7.21(d,J＝8.9Hz,2H),6.84(d,J＝9.0Hz,2H),5.79(t,J＝5.6Hz,1H),4.08(dd,J＝13.4,6.6Hz,1H),3.96(d,J＝5.5Hz,2H),3.72(s,3H),1.40(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13CNMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.19,156.42,154.06,141.05,135.30,133.54,128.48,127.08,125.83,113.35,80.28,55.23,52.95,40.99,27.98,22.39。
8.5.4-((2-(4-甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ8)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(4-甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(413.5mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体287.7mg，收率为91.5％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝7.8Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.61(d,J＝8.3Hz,2H),7.20(d,J＝9.0Hz,2H),6.92(d,J＝9.0Hz,2H),4.30(s,2H),4.09(dd,J＝13.3,6.6Hz,1H),3.72(s,3H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.76,155.67,136.08,135.16,133.32,130.42,127.23,120.05,114.44,55.27,50.82,41.02,22.27.TOF-MS(m/z):calcd for C18H24N3O2([M+H]+)314.1869,found314.1869.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ8)。
Figure BDA0003397188690000161
实施例9
N-异丙基-4-((2-(4-三氟甲氧基苯基肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ9)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
9.1.N-(4-三氟甲氧基苯基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为对三氟甲氧基苯肼盐酸盐(228.6mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(4-三氟甲氧基苯基)二苯甲酮腙310.0mg，收率87％。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:11.65(s,1H),7.95(m,2H),7.58(m,5H),7.56(d,J＝8.7Hz,2H),7.37(m,3H),7.15(d,J＝8.7Hz,2H)；ESI-MS(m/z):357.5[M+H]+。
9.2.N-Boc-N-(4-三氟甲氧基苯基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(4-三氟甲氧基苯基)二苯甲酮腙(356.3mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(4-三氟甲氧基苯基)二苯甲酮腙402.2mg，收率89％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.94(m,2H),7.59(m,5H),7.51(d,J＝8.6Hz,2H),7.38(m,3H),7.14(d,J＝8.6Hz,2H),1.47(s,9H)；ESI-MS(m/z):457.6[M+H]+。
9.3.1-Boc-1-(4-三氟甲氧基)苯基肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(4-三氟甲氧基苯基)二苯甲酮腙(456.5mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物245.5mg，收率84％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.62–7.56(m,2H),7.26(d,J＝8.5Hz,2H),5.11(s,2H),1.46(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:154.78,144.36,143.50,124.53,121.87,120.98,81.24,28.32。
9.4.4-((2-Boc-2-(4-三氟甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(4-三氟甲氧基)苯基肼(350.7mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物383.3mg，收率为82％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(d,J＝7.8Hz,1H),7.76(d,J＝8.2Hz,2H),7.52(d,J＝9.0Hz,2H),7.35(d,J＝8.2Hz,2H),7.26(d,J＝8.5Hz,2H),5.96(t,J＝5.6Hz,1H),4.08(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),4.01(d,J＝5.6Hz,2H),1.46(s,9H),1.15(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ165.04,153.47,144.32,141.63,140.56,134.51,133.64,128.53,127.06,124.57,120.70,81.18,53.15,40.92,27.81,22.31。
9.5.4-((2-(4-三氟甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ9)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(4-三氟甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(467.5mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体336.0mg，收率为91.2％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(d,J＝7.8Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.64(d,J＝8.3Hz,2H),7.31(d,J＝8.7Hz,2H),7.23(d,J＝9.1Hz,2H),4.38(s,2H),4.10(td,J＝13.3,6.6Hz,1H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ164.75,143.19,142.70,135.17,130.42,127.22,122.05,121.41,118.87,116.88,51.28,41.00,22.26.TOF-MS(m/z):calcd for C18H21N3O2F3([M+H]+)368.1586,found 368.1578.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-三氟甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ9)。
Figure BDA0003397188690000171
实施例10
N-异丙基-4-((2-(6-甲氧基-2-萘基)肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ10)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
10.1.N-(6-甲氧基-2-萘基)二苯甲酮腙的制备
将苯肼盐酸盐(144.6mg,1.0mmol)替换为6-甲氧基-2-萘肼盐酸盐(224.7mg,1.0mmol)，按步骤1.3进行。得N-(6-甲氧基-2-萘基)二苯甲酮腙320.7mg，收率91％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:11.61(s,1H),7.94(m,2H),7.64(m,1H),7.59(m,5H),7.38(m,5H),7.09(m,1H),6.96(m,1H),6.86(m,1H),3.83(s,3H)；ESI-MS(m/z):353.4[M+H]+。
10.2.N-Boc-N-(6-甲氧基-2-萘基)二苯甲酮腙的制备
将N-苯基二苯甲酮腙(272.4mg,1.0mmol)替换为N-(6-甲氧基-2-萘基)二苯甲酮腙(352.4mg,1.0mmol)，按步骤1.4进行。得N-Boc-N-(6-甲氧基-2-萘基)二苯甲酮腙393.7mg，收率87％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.95(m,2H),7.64(m,1H),7.58(m,5H),7.38(m,5H),7.07(m,1H),6.98(m,1H),6.87(m,1H),3.82(s,3H),1.46(s,9H)；ESI-MS(m/z):453.7[M+H]+。
10.3.1-Boc-1-(6-甲氧基-2-萘基)肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(6-甲氧基-2-萘基)二苯甲酮腙(452.6mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物233.6mg，收率81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.64(m,1H),7.42(m,1H),7.38(m,1H),7.08(m,1H),6.97(m,1H),6.88(m,1H),4.86(s,2H),3.77(s,3H),1.45(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:155.93,153.11,140.07,129.51,127.82(2),126.23,118.62,117.93,108.06,104.33,79.94,55.85,28.38(3)。
10.4.4-((2-Boc-2-(6-甲氧基-2-萘基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(6-甲氧基-2-萘基)肼(346.0mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物375.5mg，收率为81％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.13(d,J＝7.9Hz,1H),7.83(m,1H),7.64(m,1H),7.42(m,1H),7.38(m,1H),7.34(d,J＝7.9Hz,2H),7.08(m,1H),6.97(m,1H),6.88(m,1H),4.91(m,1H),4.21(m,1H),3.96(d,J＝5.6Hz,2H),3.72(s,3H),1.40(s,9H),1.15(d,J＝6.8Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:167.13,156.39,152.42,141.06,139.48,132.25,129.43,127.81(2),127.32(2),127.03(2),126.13,118.62,117.94,108.21,104.35,80.26,55.81,52.32,45.19,28.39(3),23.21(2)。
10.5.4-((2-(6-甲氧基-2-萘基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ10)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(6-甲氧基-2-萘基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(463.8mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体331.8mg，收率为91.3％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.63(m,1H),7.93(d,J＝8.1Hz,1H),7.82(m,1H),7.65(m,1H),7.41(m,1H),7.37(m,1H),7.33(d,J＝8.1Hz,2H),7.09(m,1H),6.98(m,1H),6.87(m,1H),4.96(m,1H),4.19(m,1H),3.93(d,J＝5.8Hz,2H),3.81(s,3H),1.17(d,J＝6.8Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:167.15,152.43,140.07,139.52,132.31,129.42,127.83(2),127.33(2),127.05(2),126.12,118.61,117.93,108.12,104.33,55.83,55.11,45.23,23.21(2).TOF-MS(m/z):calcd forC22H26N3O2([M+H]+)364.2025,found364.2028.所有数据证实该化合物为4-((2-(6-甲氧基-2-萘基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ10)。
Figure BDA0003397188690000191
实施例11
N-异丙基-4-((2-(4-甲氧基苄基)肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ11)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按1.1和1.2步骤进行。
11.1.N-Boc-二苯甲酮腙
将N-Boc-苯肼(132.2mg,1.0mmol)和二苯甲酮(218.7mg,1.2mmol)溶于30mL甲醇/醋酸(体积比5:1)中，搅拌溶解，将反应装置置于60℃油浴锅中加热回流反应5～8h，TLC跟踪监控直至反应完全，停止加热，反应液冷却，有固体析出，抽滤收集固体，用己烷洗涤固体，真空干燥，得白色固体231.2mg，收率78％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:10.79(s,1H),7.96(m,2H),7.59(m,5H),7.35(m,3H),1.48(s,9H)；ESI-MS(m/z):297.3[M+H]+。
11.2.N-Boc-N-(4-甲氧基苄基)二苯甲酮腙的制备
将N-Boc-二苯甲酮腙(296.4mg,1.0mmol)溶解于20mL干燥的THF中，冰浴冷却，搅拌下加入叔丁醇钾(168.3mg,1.5mmol)，随后加入对甲氧基苄溴(221.2mg,1.1mmol)。混合物在60℃搅拌反应4～8小时，旋蒸除去溶剂，残留物用乙酸乙酯萃取，合并有机相，随后分别用饱和氯化铵、水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂，残留物快速层析分离纯化，得N-Boc-N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙399.9mg，收率96％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.95(m,2H),7.59(m,5H),7.35(m,3H),7.13(d,J＝8.3Hz,2H),6.92(d,J＝8.3Hz,2H),4.32(s,2H),3.85(s,3H),1.43(s,9H)；ESI-MS(m/z):417.6[M+H]+。
11.3.1-Boc-1-(4-甲氧基苄基)肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(4-甲氧基苯基)二苯甲酮腙(416.5mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物219.5mg，收率87％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.14(d,J＝9.1Hz,2H),6.90(d,J＝9.1Hz,2H),4.97(s,2H),4.26(s,2H),3.83(s,3H),1.42(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:158.92,156.76,130.51(2),128.37,114.08,79.66,56.32,55.81,28.41(3)。
11.4.4-((2-Boc-2-(4-甲氧基苄基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(4-甲氧基苄基)肼(302.8mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物363.4mg，收率为85％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.11(d,J＝7.9Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,2H),7.35(d,J＝8.3Hz,2H),7.15(d,J＝8.8Hz,2H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),5.07(t,J＝5.6Hz,1H),4.23(s,2H),4.18(dd,J＝13.4,6.6Hz,1H),3.98(d,J＝5.5Hz,2H),3.82(s,3H),1.45(s,9H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:167.21,158.63,156.72,139.48,132.22,130.56(2),128.41,127.32(2),127.03(2),114.11(2),79.63,55.84,54.16,52.62,45.21,28.43(3),23.17(2)。
11.5.4-((2-(4-甲氧基苄基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ11)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(4-甲氧基苄基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(427.5mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体305.8mg，收率为93.4％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.36(d,J＝8.2Hz,2H),7.16(d,J＝8.6Hz,2H),6.90(d,J＝8.6Hz,2H),5.09(t,J＝5.6Hz,2H),4.18(m,1H),3.96(d,J＝5.3Hz,4H),3.83(s,3H),1.15(d,J＝6.5Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:167.23,158.65,139.46,132.23,130.57(2),128.42,127.34(2),127.02(2),114.13(2),55.82,55.42(2),45.23,23.18(2).TOF-MS(m/z):calcd for C19H26N3O2([M+H]+)328.2025,found 328.2019.所有数据证实该化合物为4-((2-(4-甲氧基苄基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ11)。
Figure BDA0003397188690000201
实施例12
N-异丙基-4-((2-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼基)甲基)苯甲酰胺(DAZ12)的制备
4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺的制备按步骤1.1和1.2进行；N-Boc-二苯甲酮腙的制备按步骤11.1进行。
12.1.N-Boc-N-(6-甲氧基-2-萘甲基)二苯甲酮腙的制备
将对甲氧基苄溴(221.2mg,1.1mmol)替换为6-甲氧基-2-溴甲基萘(251.1mg,1.1mmol)，按步骤11.2进行。得N-Boc-N-(6-甲氧基-2-萘甲基)二苯甲酮腙443.2mg，收率95％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.96(m,2H),7.75(m,2H),7.59(m,5H),7.47(s,1H),7.35(m,4H),7.21(s,1H),7.06(m,1H),4.45(s,2H),3.83(s,3H),1.45(s,9H)；ESI-MS(m/z):467.7[M+H]+。
12.2.1-Boc-1-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼的制备
将N-Boc-N-苯基二苯甲酮腙(372.5mg,1.0mmol)替换为N-Boc-N-(6-甲氧基-2-萘甲基)二苯甲酮腙(466.5mg,1.0mmol)，按步骤1.5进行。得淡黄色油状物251.0mg，收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.75(m,2H),7.45(m,1H),7.36(m,1H),7.21(m,1H),7.06(m,1H),4.58(br,2H),4.35(s,2H),3.81(s,3H),1.44(s,9H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:156.67,156.11,133.07,132.83,129.41,129.03,126.72,126.11,118.63,105.36,79.54,56.73,55.86,28.39(3)。
12.3.4-((2-Boc-2-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺的制备
将1-Boc-1-苯基肼(250.0mg,1.2mmol)替换为1-Boc-1-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼(362.8mg,1.2mmol)，按步骤1.6进行。得淡黄色油状物377.3mg，收率为79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.11(d,J＝7.8Hz,2H),7.82(d,J＝8.1Hz,1H),7.76(m,2H),7.45(m,1H),7.37(m,1H),7.34(d,J＝7.8Hz,2H),7.22(m,1H),7.09(m,1H),5.01(m,1H),4.35(s,2H),4.19(m,1H),3.93(d,J＝5.5Hz,2H),3.79(s,3H),1.43(s,9H),1.15(d,J＝6.7Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:167.19,156.75,156.12,139.49,132.81,132.26,133.01,129.45,129.02,128.52,127.33(2),127.04(2),126.73,126.12,118.63,117.94,105.43,80.11,55.84,54.53,52.61,45.17,28.41(3),23.22(2)。
12.4.4-((2-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ12)的制备
将4-((2-Boc-2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(383.5mg,1.0mmol)替换为4-((2-Boc-2-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(477.6mg,1.0mmol)，按步骤1.7进行。得白色固体345.8mg，收率为91.6％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.92(d,J＝8.2Hz,1H),7.83(m,1H),7.75(m,2H),7.47(m,1H),7.38(m,1H),7.35(d,J＝8.2Hz,2H),7.23(m,1H),7.06(m,1H),4.98(m,2H),4.18(m,1H),4.03(d,J＝5.6Hz,2H),3.93(d,J＝5.8Hz,2H),3.82(s,3H),1.16(d,J＝6.8Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:167.18,156.12,139.51,133.04,132.81,132.23,129.41,129.02,128.53,127.34(2),127.05(2),126.73,126.15,118.62,105.38,55.84,55.76,55.43,45.32,23.24(2).TOF-MS(m/z):calcd for C23H28N3O2([M+H]+)378.2182,found 378.2186.所有数据证实该化合物为4-((2-(6-甲氧基-2-萘甲基)肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(DAZ12)。
Figure BDA0003397188690000211
实施例13
Z-GP-DAZ1的制备
称取Z-GP-OH(367.3mg,1.0mmol)，HOBt(161.7mg,1.2mmol)和HATU(450.0mg,1.2mmol)溶于10mL干燥DCM，将其倒入50mL圆底烧瓶中，加入DIPEA(0.2mL,1.2mmol)，将反应瓶置于冰浴中搅拌活化30min；另称取4-((2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(283.2mg,1.0mmol)溶于5mL干燥DCM，将其倒入西林瓶中，加入DIPEA0.2mL，反应30min后，将溶液缓慢滴加到活化的反应瓶中，随后将反应瓶移至室温反应3-4h；反应完毕后加饱和NaCl溶液淬灭，以DCM萃取多次，合并有机相，依次用水、饱和NaCl溶液洗涤，无水Na2SO4干燥后减压蒸除溶剂；所得混合物经硅胶柱色谱(氯仿-甲醇，体积比10:1)和RP-HPLC分离纯化(淋洗剂为MeOH:Water＝50:50,V/V)，得白色固体388.7mg，收率68％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(d,J＝7.8Hz,1H),7.81(d,J＝8.3Hz,2H),7.50(d,J＝8.3Hz,1H),7.38–7.29(m,3H),7.17–7.11(m,1H),6.82(d,J＝8.1Hz,2H),6.73(t,J＝7.3Hz,1H),5.04(s,1H),4.66(d,J＝15.0Hz,1H),4.28(dd,J＝8.5,3.3Hz,0H),4.10(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),3.86(ddd,J＝32.9,17.0,5.8Hz,1H),3.60–3.43(m,1H),1.77(dd,J＝60.1,22.5Hz,2H),1.16(d,J＝6.6Hz,3H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ170.84,167.57,165.12,156.46,148.86,141.13,137.09,133.63,128.75,128.34,127.78,127.69,127.49,127.21,118.41,112.62,65.41,56.44,53.61,45.80,42.78,40.93,29.01,24.31,22.35.TOF-MS(m/z):calcd for C32H38N5O5([M+H]+)572.2873,found 572.2881.以上数据证明所得白色固体为Z-GP-DAZ1，其结构如下式所示：
Figure BDA0003397188690000221
或者为上述化合物的同分异构体，其结构如下式所示：
Figure BDA0003397188690000222
实施例14
Z-GP-DAZ8的制备
将4-((2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(283.2mg,1.0mmol)替换为4-((2-(4-甲氧基)苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(327.2mg,1.0mmol)，按实施例13进行。得淡黄色固体439.2mg，收率为75％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.16(d,J＝7.7Hz,1H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.49(d,J＝8.1Hz,2H),7.37-7.29(m,6H),6.78(dd,J＝19.4,9.2Hz,4H),5.03(s,2H),4.66-4.51(m,2H),4.24(dd,J＝8.5,3.2Hz,1H),4.09(dt,J＝11.9,6.0Hz,1H),3.93-3.77(m,1H),3.65(s,3H),3.57-3.41(m,2H),2.01-1.63(m,4H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:170.76,167.54,165.14,156.48,152.61,143.24,141.27,137.10,133.58,128.35,127.79,127.70,127.68,127.15,114.44,114.14,65.43,58.64,57.07,55.25,45.79,42.81,40.94,28.98,24.24,22.37.TOF-MS(m/z):calcdfor C33H39N5O6([M+H]+)602.2996,found 602.2992.以上数据证明所得淡黄色固体为Z-GP-DAZ8，其结构如下式所示：
Figure BDA0003397188690000231
或者为上述化合物的同分异构体，其结构如下式所示：
Figure BDA0003397188690000232
实施例15
Z-GP-DAZ11的制备
将4-((2-苯基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(283.2mg,1.0mmol)替换为4-((2-(4-甲氧基苄基肼基)甲基)-N-异丙基苯甲酰胺(327.2mg,1.0mmol)，按实施例13进行。得淡黄色固体461.8mg，收率为75％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.13(m,1H),7.96(d,J＝8.3Hz,2H),7.83(d,J＝7.5Hz,1H),7.38(d,J＝8.3Hz,2H),7.33-7.32(m,5H),7.15(d,J＝9.2Hz,4H),6.88(d,J＝9.2Hz,4H),5.03(s,2H),4.66-4.51(m,2H),4.24(dd,J＝8.5,3.2Hz,1H),4.09(dt,J＝11.9,6.0Hz,1H),3.93-3.77(m,3H),3.65(s,3H),3.57-3.41(m,2H),2.01-1.63(m,4H),1.16(d,J＝6.6Hz,6H)；13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:172.76,169.11,167.43,165.14,158.62,156.23,139.61,136.15,132.19,130.53(2),128.89(2),128.43,127.62,127.32(s),127.13(2),127.03(2),114.13,67.76,66.82,57.75,55.83,52.72,52.63,45.26,42.82,30.13,25.06,24.24,22.37.TOF-MS(m/z):calcd for C33H39N5O6([M+H]+)616.3135,found 616.3132.以上数据证明所得淡黄色固体为Z-GP-DAZ11，其结构如下式所示：
Figure BDA0003397188690000241
或者为上述化合物的同分异构体，其结构如下式所示：
Figure BDA0003397188690000242
实施例16
双芳基肼类化合物对肿瘤细胞得增殖抑制实验
实验方法：取对数生长期的细胞(大鼠胶质瘤细胞(C6)、小鼠黑色素瘤细胞(K1735)、人结肠癌细胞(SW620)、人恶性黑色素瘤细胞(A357)、肝癌细胞(HepG-2)、人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、小鼠黑色素瘤细胞(B16)，均购于中国科学院上海细胞库)，分别加入RPMI 1640培养液(含胎牛血清10％，青霉素100U/mL)适量，调整细胞浓度为5×105个/mL，接种于96孔培养板，每孔接种肿瘤细胞悬液100μL。置于5％CO2培养箱中，37℃培养24h后，加入配制好的供试药物(对照组不加药物)，继续培养48h后，每孔中加入5mg/mL MTT溶液30μL，37℃温孵4h，弃去上清液，每孔加入DMSO 100μL溶解形成的甲臜(formazan)，应用酶标仪(Thermo产品)于570nm处测OD值。
细胞生长抑制率按如下公式计算：
Figure BDA0003397188690000243
以样品浓度为横轴，以细胞生长抑制率为纵轴绘制曲线。根据细胞生长抑制曲线，计算出半数有效抑制浓度IC50值。
实验结果：从表1-1和表1-2可知，阳性对照药丙卡巴肼Pcb(也称盐酸丙卡巴肼、甲基苄肼、甲苄肼)只对B16表现出较好的增殖抑制活性，而所检测的双芳基肼类化合物对多个肿瘤细胞株表现出比阳性对照药Pcb更好的细胞增殖抑制活性，尤其是化合物DAZ8、DAZ10、DAZ11和DAZ12，对C6、K1735、HepG-2、MDA-MB-231和B16均有较好的增殖抑制活性，其对B16细胞的增殖抑制活性比Pcb还要好。DAZ3表现出对SW620细胞独特的细胞增殖抑制作用。
表1-1.目标化合物对不同肿瘤细胞作用48h的IC50值(μM)
Figure BDA0003397188690000251
表1-2.目标化合物对不同肿瘤细胞作用48h的IC50值(μM)
Figure BDA0003397188690000252
Figure BDA0003397188690000261
实施例17
Z-GP-DAZ靶向释放特性的考察实验
实验方法：HPLC色谱条件如下：高效液相色谱仪Agilent 1200；色谱柱CosmosilC18反相色谱柱(4.6×250mm，5μm)；流动相(0min，55％甲醇和45％水(含2mM甲酸铵)；10min，65％甲醇和35％水(含2mM甲酸铵)；15min，75％甲醇和25％水(含2mM甲酸铵)；30min，85％甲醇和15％水(含2mM甲酸铵)；40min，85％甲醇和15％水(含2mM甲酸铵)；流速1mL/min；检测波长：254nm；进样量2μL。
建立Z-GP-DAZ检测标准曲线方法如下：分别将Z-GP-DAZ1、Z-GP-DAZ8和Z-GP-DAZ11溶解于酶解缓冲液(50mM Tris-HCl,1.0M NaCl,pH 7.4)，设置5个浓度梯度分别为0.012725、0.006363、0.003181、0.001591、0.000795μg/ml，以峰面积为纵坐标，药物浓度为横坐标绘制标准曲线，本实验重复3次，将终浓度为30mM的Z-GP-DAZ孵育于含5μg/ml和10μg/ml的rhFΑP-α的缓冲液中，反应温度为37℃，在孵育0、4、8、12、16、24h时间点，取上清液用HPLC法检测游离的双芳基肼。
按如下公式计算酶解率：
Figure BDA0003397188690000262
其中，[S]0是底物的起始浓度，[S]t表示在时间t时底物的浓度。
实验结果：酶解实验结果表明，FΑP-α能催化Z-GP-DAZ水解释放DAZ，且其酶解率与酶浓度呈正相关(图1-图3)。FΑP-α是肿瘤相关成纤维细胞分泌的一种激活蛋白酶，在肿瘤的发生、发展中起重要作用。FΑP-α在人体中超过90％癌种的肿瘤相关成纤维细胞表面上高度特异性表达。Z-GP-DAZ能被FΑP-α水解，说明其能够在肿瘤组织中被酶解释放出DAZ抗癌物质。
实施例18
Z-GP-DAZ酶解前后细胞毒性变化的考察实验
实验方法：将Z-GP-DAZ1、Z-GP-DAZ8、Z-GP-DAZ11与DAZ1、DAZ8和DAZ11分别在0.1-50μM的药物浓度范围内对C6、K1735、HepG-2、MDA-MB-231和B16细胞株(购于中国科学院上海细胞库)处理48h，采用MTT法比较两者的细胞毒性；
将Z-GP-DAZ1、Z-GP-DAZ8、Z-GP-DAZ11分别与FΑP-α共孵育，取孵育上清液处理分别C6、K1735、HepG-2、MDA-MB-231和B16细胞株48h，采用MTT法分析FΑP-α酶解作用对Z-GP-DAZ细胞毒性的影响，在FΑP-α酶解作用下Z-GP-DAZ是否可恢复其潜在的细胞毒性。
实验结果：实验结果见表2。实验结果表明，Z-GP-DAZ对C6、K1735、HepG-2、MDA-MB-231和B16细胞的细胞毒性明显低于DAZ；在FΑP-α酶解作用下，Z-GP-DAZ恢复其对肿瘤细胞株的细胞毒作用；其中，DAZ1/Z-GP-DAZ1只对乳腺癌MDA-MB-231细胞比较敏感；而DAZ8/Z-GP-DAZ8和DAZ11/Z-GP-DAZ11对C6、K1735、HepG-2、MDA-MB-231和B16肿瘤细胞株都有较好的增殖抑制作用。
表2.目标化合物对不同肿瘤细胞作用48h的IC50值(μM)
Figure BDA0003397188690000271
“-”表示没有数据.
实施例19
双芳基肼类化合物和Z-GP-双芳基肼对正常细胞的体外毒性实验
实验方法：按实施例16方法检测双芳基肼类化合物和其Z-GP加合物对小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3以及人肝正常细胞HL-7702的体外细胞毒性。
实验结果：实验结果见表3。实验结果揭示，Z-GP-DAZ对NIH-3T3和HL-7702的细胞毒性远小于相应的双芳基肼(见表3)。说明经靶向修饰后化合物的细胞毒性明显降低。
表3.MTT法测定双芳基肼及其Z-GP加合物对正常细胞的毒性作用
Figure BDA0003397188690000281
以上结果揭示了本发明的Z-GP-DAZ能显著降低对正常细胞的体外毒性和体内毒性，在体外能被FAP-α酶特异性水解切除二肽部分(Z-GP)，释放出双芳基肼，有望开发成新的抗肿瘤靶向药。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种双芳基肼类化合物，其特征在于结构如式I所示：
Figure FDA0003397188680000011
其中1Ar为4-(N-异丙基氨基)甲酰基苄基；
2Ar为如下结构的任一种：
Figure FDA0003397188680000012
其中X＝H,F,Cl,Br,CH3,OCH3,OCF3,NO2。
2.根据权利要求1所述的双芳基肼类化合物，其特征在于是以下的化合物：
Figure FDA0003397188680000013
Figure FDA0003397188680000021
3.Z-GP-双芳基肼，其特征在于是在权利要求1或2所述双芳基肼类化合物的肼基上加合苄氧羰基甘胺酰脯氨酰基，结构如式II或式III所示：
Figure FDA0003397188680000022
4.权利要求1或2所述双芳基肼类化合物和权利要求3所述Z-GP-双芳基肼的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)1-叔丁氧羰基单芳基肼的制备
当2Ar为
Figure FDA0003397188680000023
时，将芳肼与二苯甲酮反应，生成N-芳基二苯甲酮腙；将N-芳基二苯甲酮腙与二碳酸二叔丁酯在碱存在下反应，生成N-Boc-N-芳基二苯甲酮腙；将N-Boc-N-芳基二苯甲酮腙与羟胺反应，生成1-叔丁氧羰基单芳基肼；
当2Ar为
Figure FDA0003397188680000024
时，将N-Boc肼与二苯甲酮反应，生成N-Boc二苯甲酮腙；将N-Boc二苯甲酮腙与芳甲基溴、叔丁醇钾反应，生成N-Boc-N-芳甲基二苯甲酮腙；将N-Boc-N-芳甲基二苯甲酮腙与羟胺反应生成1-叔丁氧羰基单芳甲基肼；
(2)双芳基肼类化合物的制备
将1-叔丁氧羰基单芳基肼或1-叔丁氧羰基单芳甲基肼在碱性试剂作用下与4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺反应，随后脱保护得到所述的双芳基肼类化合物；
(3)Z-GP-双芳基肼的制备
将双芳基肼类化合物、苄氧羰基甘氨酰脯氨酸(Z-GP-OH)和缩合试剂，在0℃～30℃下搅拌反应，得混合物；向所得混合物中加入饱和盐溶液，进行淬灭、分离、纯化，即得化合物Z-GP-双芳基肼。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述1-叔丁氧羰基单芳基肼或1-叔丁氧羰基单芳甲基肼与4-溴甲基-N-异丙基苯甲酰胺、碱性试剂的摩尔比为1.0:(1.0～3.0):(0.1～0.3)。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述双芳基肼类化合物、苄氧羰基甘氨酰脯氨酸(Z-GP-OH)与缩合试剂的摩尔比为1.0:(1.0～3.0):(1.05～3.0)。
7.权利要求1或2所述双芳基肼类化合物和权利要求3所述Z-GP-双芳基肼及它们在生理上可接受的盐在制备抗肿瘤化合物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌、乳腺癌、胶质瘤或多发性骨髓瘤。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述在生理上可接受的盐为酒石酸盐、硫酸盐或盐酸盐。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述在生理上可接受的盐由以下步骤制得：
将权利要求1或2所述双芳基肼类化合物或权利要求3所述Z-GP-双芳基肼溶于含1.05～3.0摩尔量酸(HA)的有机溶剂中，于-10℃～40℃下搅拌反应3～20小时，分离固体化合物，洗涤，再将固体化合物重新溶于水中，冷冻干燥，即得双芳基肼类化合物或Z-GP-双芳基肼在生理上可接受的盐。
CN202111516158.0A 2021-12-07 2021-12-07 双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用 Active CN114195676B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111516158.0A CN114195676B (zh) 2021-12-07 2021-12-07 双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111516158.0A CN114195676B (zh) 2021-12-07 2021-12-07 双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114195676A true CN114195676A (zh) 2022-03-18
CN114195676B CN114195676B (zh) 2022-08-05

Family

ID=80652848

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111516158.0A Active CN114195676B (zh) 2021-12-07 2021-12-07 双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114195676B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1356977A (zh) * 1999-05-17 2002-07-03 诺沃挪第克公司 胰高血糖素拮抗剂/反向激动剂
WO2008112156A1 (en) * 2007-03-08 2008-09-18 Altiris Therapeutics Chemokine receptor modulators
CN103819393A (zh) * 2010-03-01 2014-05-28 瑞科西有限公司 化合物及其治疗应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1356977A (zh) * 1999-05-17 2002-07-03 诺沃挪第克公司 胰高血糖素拮抗剂/反向激动剂
WO2008112156A1 (en) * 2007-03-08 2008-09-18 Altiris Therapeutics Chemokine receptor modulators
CN103819393A (zh) * 2010-03-01 2014-05-28 瑞科西有限公司 化合物及其治疗应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN114195676B (zh) 2022-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110156787B (zh) 一种三氮唑并嘧啶衍生化合物、包含其的药物组合物及其用途
KR101335746B1 (ko) 이치환된 프탈라진 헷지호그 경로 길항제
JP2011231015A (ja) 含窒素複素環を有する新規ウラシル化合物又はその塩
CN110099909B (zh) 作为Syk抑制剂和/或Syk-HDAC双重抑制剂的杂环化合物
CN110627801B (zh) 一类hdac抑制剂及其用途
JPH051794B2 (zh)
WO2018126898A1 (zh) 噻吩并嘧啶衍生物、其制备方法及在制备抗肿瘤药物中的应用
CN107383004B (zh) 2-氨基咪唑并吡啶类衍生物及制备和应用
CZ419797A3 (cs) Diglykosylované 1,2-dioly, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
CN109575013A (zh) 三氮唑并嘧啶、三氮唑并吡啶化合物及其组合物用于治疗prc2介导的疾病
CN115353508B (zh) 5-吡啶-1h-吲唑类化合物、药物组合物和应用
CN111217741B (zh) 氟取代单咔唑类衍生物、其制备方法及应用
EP4212524A1 (en) Cd73 inhibitor and application thereof in medicine
CN113735828A (zh) 一种靶向降解egfr的化合物及其制备方法和应用
AU2005221959B2 (en) Novel indole derivative for alkylating specific base sequence of DNA and alkylating agent and drug each comprising the same
EP0680950B1 (en) Propenone derivatives
IE920754A1 (en) 6,9 BIS(SUBSTITUTED-AMINO) BENZO[g]-ISOQUINOLINE-5,10-DIONES
CN107698521B (zh) 一种5-氟尿嘧啶取代羧酸衍生物的制备及用途
US5905149A (en) Substituted quinolymethylen-oxindole analogues as tyrosine kinase inhibitors
WO2022121317A1 (zh) 1,1'-联苯-2，6-二酚类化合物及其应用
CN114195676B (zh) 双芳基肼类化合物及其加合物和在制备抗肿瘤药物中的应用
JP4652647B2 (ja) セラミド類似体類、それらの調製方法及び抗腫瘍剤としてのそれらの使用
JPH0892090A (ja) 医薬組成物
CN113717174B (zh) 肿瘤靶向性抗耐药o6-噻吩甲基鸟嘌呤-吲哚醌-氯乙基亚硝基脲联合分子及其制备方法
CN113636970B (zh) 一种异吲哚酮的化合物、制备方法及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant