CN114159360B - 一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物、制备方法及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物、制备方法及其应用。本发明提供了一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物，包括抗蓝光活性成分和辅料；所述抗蓝光活性成分包括燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物和可可籽提取物；所述辅料包括乳化剂、助乳化剂、多元醇、液体脂质和水。本发明根据吸收辐射、改善色素沉着、调节生理节律、延缓皮肤衰老四种化学防蓝光机制将五种抗蓝光活性成分共同包载，按照本发明中的配比进行合理搭配，协同增效。本发明纳米组合物能有效提高活性物的稳定性以及皮肤透过量和皮肤储留量，对皮肤温和无刺激，可在化妆品中广泛应用。

Description

一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物、制备方法及其应用
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物、制备方法及其应用。
背景技术
蓝光为400nm～480nm之间的具有较高能量的可见光，我们最常见的太阳光中就有蓝光，此外，在手机、电脑等数码产品中也存在着蓝光。与紫外线相比，蓝光对皮肤的穿透力更强，可以穿透皮肤表层而到达真皮层，因此其对皮肤的伤害并不亚于紫外线。长时间照射蓝光及使用电子产品会造成视力减弱，对皮肤的危害主要表现为黑色素沉着，皮肤松弛无弹性，加速皮肤衰老。
在化妆品中，不同抗蓝光技术，其作用机制有所不同，主要包括物理阻挡和化学防护，化学防护包括吸收辐射、改善色素沉着、调节生理节律、延缓皮肤衰老等。
近几年，随着科学技术的发展，人们生活水平的提高，对抗蓝光的化妆品引起了较高的重视，虽然市面上的抗蓝光产品层出不穷，但仍然存在诸多弊端，如抗蓝光机制单一或者抗蓝光机制不明确，有些活性成分只是概念性添加，抗蓝光效果不显著；其次有些抗蓝光活性成分如叶黄素稳定性差，对氧、光、热敏感，在产品放置过程中易氧化变质而失去抗蓝光作用；另外由于皮肤自有屏障，抗蓝光活性成分难以透过角质层进入皮肤真皮层，并在真皮层中滞留，大大降低抗蓝光功效。基于上述技术问题，提供一种稳定的可显著抗蓝光的化妆品对本领域来讲是非常迫切的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物、制备方法及其应用。本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物将吸收辐射、改善色素沉着、调节生理节律、延缓皮肤衰老四种作用机制的活性成分共同包载，多角度、全方位抵御蓝光对皮肤造成的伤害，协同增效；同时纳米组合物可提高活性物的稳定性，大大增加活性成分在皮肤中的透过量和滞留量，并能缓释、控释，提高其生物利用度。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物，包括抗蓝光活性成分和辅料；
所述抗蓝光活性成分包括燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物和可可籽提取物；
所述辅料包括乳化剂、助乳化剂、多元醇、液体脂质和水。
优选的，以抗蓝光纳米组合物的总质量计，所述抗蓝光活性成分中燕窝酸为0.1～20％，肌肽为0.1～10％、叶黄素为0.1～10％、头状胡枝子叶/茎提取物为0.1～10％和可可籽提取物为0.1～10％。
优选的，以抗蓝光纳米组合物的总质量计，所述辅料中乳化剂为1～20％、助乳化剂为1～20％、多元醇为1～20％、液体脂质为1～20％和水为0.1～95.5％。
优选的，所述乳化剂包括磷脂类乳化剂、聚乙二醇类乳化剂、聚甘油类乳化剂和葡糖苷类乳化剂中的一种或多种；
所述助乳化剂包括醚类助乳化剂和/或醇类助乳化剂；
所述多元醇包括甘油、丙二醇、丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、二丙二醇、异丙醇、聚乙二醇-200和PPG-10山梨醇中的一种或多种；
所述液体脂质包括植物油脂和/或合成油脂。
本发明还提供了上述技术方案中所述的抗蓝光纳米组合物的制备方法，包括以下步骤：
将燕窝酸、肌肽和部分水混合，得到内水相；
将叶黄素、液体脂质、乳化剂、助乳化剂和多元醇混合，得到油相；
将所述内水相和油相混合乳化，得到油包水内体系；
将头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物和余量水混合，得到外水相；
将所述油包水内体系和外水相混合乳化，得到水包油包水双连续体系；
将所述水包油包水双连续体系进行微米化处理，得到微米级分散体；
将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到燕窝酸抗蓝光纳米组合物。
优选的，所述内水相和油相混合乳化包括：在搅拌的条件下，将所述内水相加入至所述油相中；
所述油包水内体系和外水相混合乳化包括：在搅拌的条件下，将所述油包水内体系加入至所述外水相中。
优选的，所述纳米化处理包括高压均质处理或高速微射流处理。
优选的，所述高压均质处理的压力为200～1800bar，循环次数为1～12次，温度为20～70℃；
优选的，所述高速微射流处理的压力为4000～17000psi，循环次数为1～12次，温度为20～70℃。
本发明还提供了上述技术方案中所述的抗蓝光纳米组合物在化妆品中的应用。
有益效果：
本发明提供了一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物，包括抗蓝光活性成分和辅料；所述抗蓝光活性成分包括燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物和可可籽提取物；所述辅料包括乳化剂、助乳化剂、多元醇、液体脂质和水。
本发明根据吸收辐射、改善色素沉着、调节生理节律、延缓皮肤衰老四种化学防蓝光机制将燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物五种活性成分共同包载，按照本发明中的配比进行合理搭配，协同增效，使抗蓝光效果突出。
同时，本发明制备得到的水包油包水双连续体系同时包含内水相和油相，能将油溶活性成分和水溶活性成分层层包裹，进而改善叶黄素和肌肽的稳定性。
进一步的，本发明提供的纳米组合物的粒径为10～200nm，具有粒径小，比表面积大的特性，与细胞之间具有更强的粘附性和生物相容性，能促进活性成分更有效渗透进入皮肤深层结构并长时间滞留，缓释、控释，可显著提高活性成分皮肤透过量、皮肤滞留量，进而提高活性成分蓝光防护功效。
更进一步的，本发明提供的纳米组合物易溶于水，可提高活性物在水中的溶解度，并且可直接添加到不同类型的抗蓝光产品中，使用方便，温和无刺激。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为实施例11制备的纳米组合物在室温条件下放置12个月前后外观对比图；
图2为实施例12制备的纳米复合霜剂和对比例2制备的普通霜剂在12h后体外皮肤累积透过量；与普通霜剂比较，**P<0.05；
图3为实施例12制备的纳米复合霜剂和对比例2制备的普通霜剂的体外皮肤滞留量；与普通霜剂比较，**P<0.05；
图4为实施例9～11和4号样品抗蓝光损伤结果；与模型组比较，*P<0.05；与4号样品比较，#P<0.05；
图5为4～9号样品的抗蓝光损伤结果；与5号样品比较，aP<0.05；与6号样品比较，bP<0.05；与7号样品比较，cP<0.05；与8号样品比较，dP<0.05；与9号样品比较，eP<0.05。
具体实施方式
本发明提供了一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物，包括抗蓝光活性成分和辅料；所述抗蓝光活性成分包括燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物和可可籽提取物；所述辅料包括乳化剂、助乳化剂、多元醇、液体脂质和水。
如无特殊说明，本发明对组分的来源没有特殊要求，采用本领域技术人员所熟知的市售商品即可。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括0.1％～20％燕窝酸，进一步优选为0.5％～15％，更优选为1％～10％。在本发明中，燕窝酸化学名为N-乙酰神经氨酸，是人体内的代谢物质之一，天然广泛地存在于人体内，不存在细胞毒性作用。燕窝酸能有效抑制酪氨酸羟基酶和多巴羟基酶的活性，从而抑制因蓝光辐射引起的色素沉着；另外，燕窝酸的活性羟基可提供活泼氢与超氧阴离子自由基和羟自由基结合，起到抗自由基氧化、抗衰老的作用。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括0.1％～10％肌肽，进一步优选为0.5％～8％，更优选为1％～5％。在本发明中，肌肽是由德国德之馨公司开发的一款抗蓝光原料，在人类表皮黑素细胞培养实验中肌肽可以把黑色素含有量降到百分之三十，而人类离体皮肤照射实验中可以降到百分之四十，说明肌肽对可见光引起的黑色素沉着有着较好的抑制作用。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括0.1％～10％叶黄素，进一步优选为0.1％～5％，更优选为0.2％～3％。在本发明中，叶黄素的化学结构中存在着许多含共轭双键的长多烯链，具有独特的光吸收特性，主要存在于黄斑区，作为高能量蓝光的过滤器，直接吸收蓝光、降低蓝光的透过率起到防护作用。此外，叶黄素具有很强的抗氧化作用，可聚积在氧化损伤的部位，通过清除蓝光诱导产生的活性氧物质起到抗氧化损伤的作用。
以质量百分含量计，本发明提供的本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括0.1％～10％头状胡枝子叶/茎提取物，进一步优选为0.5％～8％，更优选为1％～5％。在本发明中，头状胡枝子叶/茎提取物含有的活性成分刺苞菊甙和异夏佛塔苷直接涉及到维持生理节律，它能够有效调节生理节律依赖性生物功能，如水通道蛋白，增强节律相关Nrf2排毒体系的作用效果，调控蓝光介导的氧化应激。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括0.1％～10％可可籽提取物，进一步优选为0.5％～8％，更优选为1％～5％。在本发明中，可可籽提取物含有分子肽、糖类和多酚，具有很好的抗氧化能力，可以显著减少由蓝光压力引发的线粒体活性氧和细胞活性氧，有助于维持暴露在蓝光压力下角质形成细胞中的视蛋白的含量，修复细胞损伤，并且提高胶原蛋白和纤维蛋白含量，改善皮肤弹性。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括1～20％乳化剂，进一步优选为4％～16％，更优选为6％～12％。
在本发明中，所述乳化剂优选包括但不限于磷脂类乳化剂、聚乙二醇类乳化剂、聚甘油类乳化剂、葡糖苷类乳化剂中的一种或多种。所述磷脂类乳化剂优选为大豆卵磷脂、羟基化卵磷脂、氢化卵磷脂中的一种或多种，进一步优选为大豆卵磷脂、氢化卵磷脂中的一种或两种；所述聚乙二醇类乳化剂优选为PEG-10甘油异硬脂酸酯、PEG-10油酸酯、PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种或多种，进一步优选为PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油、PEG-10油酸酯中的一种或两种；所述聚甘油类乳化剂优选为聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-10二棕榈酸酯中的一种或两种；所述葡糖苷类乳化剂优选为鲸蜡硬脂基葡糖苷；更优选的，本发明所述乳化剂由上述物质的1～2种组成；最优选的，当所述乳化剂包括1种物质时，所述乳化剂优选为PEG-10油酸酯、聚甘油-10二棕榈酸酯、氢化卵磷脂、大豆卵磷脂、聚氧乙烯氢化蓖麻油、鲸蜡硬脂基葡糖苷中的一种，所述质量优选为1～7％，进一步优选为2～6％；当乳化剂包括2种物质时，所述乳化剂优选为聚甘油-10肉豆蔻酸酯和PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类，所述聚甘油-10肉豆蔻酸酯和PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类的质量比优选为0.5～3：1，进一步优选为3：2；或大豆卵磷脂和PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类，所述大豆卵磷脂和PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或鲸蜡硬脂基葡糖苷和聚氧乙烯氢化蓖麻油，所述鲸蜡硬脂基葡糖苷和聚氧乙烯氢化蓖麻油的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1。在本发明中，乳化剂选用特定非离子乳化剂，皮肤相容性好，温和无刺激，稳定性高，乳化剂主要作用是形成牢固的乳化膜从而降低油水界面张力，并且对活性成分还能起到增溶效果。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括1～20％助乳化剂，进一步优选为5～18％，更优选为8％～14％。
在本发明中，所述助乳化剂优选包括但不限于醚类助乳化剂和/或醇类助乳化剂。所述醚类助乳化剂优选为PPG-24-甘油聚醚-24、油醇聚醚-12、胆甾醇聚醚-24、二乙二醇单乙基醚、PPG-26-丁醇聚醚-26、PPG-28-丁醇聚醚-35、PPG-1-PEG-9月桂二醇醚中的一种或多种，进一步优选为胆甾醇聚醚-24、二乙二醇单乙基醚、PPG-26-丁醇聚醚-26、PPG-28-丁醇聚醚-35、PPG-1-PEG-9月桂二醇醚，更优选为二乙二醇单乙基醚、PPG-26-丁醇聚醚-26、PPG-1-PEG-9月桂二醇醚中的一种或多种；所述醇类助乳化剂优选为辛基十二醇；更优选的，本发明所述助乳化剂由上述物质中的1～2种组成；最优选的，当助乳化剂包括1种物质时，所述助乳化剂优选为辛基十二醇、胆甾醇聚醚-24、二乙二醇单乙基醚、油醇聚醚-12、PPG-24-甘油聚醚-24和PPG-26-丁醇聚醚-26中的一种，所述质量优选为1～10％，进一步优选为2～6％；当助乳化剂包括2种物质时，所述助乳化剂优选为PPG-26-丁醇聚醚-26和二乙二醇单乙基醚，所述PPG-26-丁醇聚醚-26和二乙二醇单乙基醚的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或者PPG-1-PEG-9月桂二醇醚和辛基十二醇，所述PPG-1-PEG-9月桂二醇醚和辛基十二醇的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或PPG-26-丁醇聚醚-26和PPG-28-丁醇聚醚-35，所述PPG-26-丁醇聚醚-26和PPG-28-丁醇聚醚-35的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1。在本发明中，助乳化剂既能够提高油水界面膜的柔顺性和牢固性，又可增加乳化剂的溶解性，协助乳化剂调节亲油亲水平衡值，降低界面张力和整个体系的黏度。
以质量百分含量计，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括1～20％多元醇，进一步优选为5～18％，更优选为8％～16％。
在本发明中，所述多元醇优选包括甘油、丙二醇、丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、二丙二醇、异丙醇、聚乙二醇-200和PPG-10山梨醇中的一种或多种，进一步优选为甘油、1,3-丙二醇、丁二醇、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、二丙二醇中的一种或多种，更优选为1,3-丙二醇、丁二醇、1,2-戊二醇、1,2-己二醇中的一种或多种；更优选的，本发明所述多元醇由上述物质中的1～2种组成；最优选的，当多元醇包括1种物质时，所述多元醇优选为甘油、聚乙二醇-200、PPG-10山梨醇、二丙二醇、1,2-己二醇和1,2-戊二醇中的一种，所述多元醇的质量百分含量优选为1～8％，进一步优选为2～6％；当多元醇包括2种物质时，所述多元醇优选为丁二醇和1,2-己二醇，所述丁二醇和1,2-己二醇的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或1,2-戊二醇和1,2-己二醇，所述1,2-戊二醇和1,2-己二醇质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或1,3-丙二醇和丁二醇，所述1,3-丙二醇和丁二醇的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或1,2-戊二醇和1,3-丙二醇，所述1,2-戊二醇和1,3-丙二醇的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1，或1,3-丙二醇和二丙二醇，所述1,3-丙二醇和二丙二醇的质量比优选为0.1～2：1，进一步优选为3：5。在本发明中，多元醇不仅能起到助乳化的作用，改变纳米乳骨架的刚性，提高液体油脂的乳化稳定性，降低界面张力从而使纳米乳自发形成，扩大纳米乳的形成区域，而且多元醇具有透皮促进作用，可促进活性物透过皮肤角质层，还能改善难溶活性物的溶解性和水分散性。
本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物优选包括液体脂质优选包括1～20％的液体脂质，进一步优选为4～15％，更优选为6％～12％。
在本发明中，所述液体脂质包括但不限于植物油脂和合成油脂中的一种或多种。所述植物油脂优选为澳洲坚果籽油、霍霍巴油、蓖麻籽油、氢化亚麻籽油和橄榄油中的一种或多种，进一步优选为霍霍巴油、橄榄油、氢化亚麻籽油中的一种或多种；所述合成油脂优选为辛酸癸酸甘油三脂、甘油三(乙基己酸)酯、甘油亚油酸酯、甘油肉豆蔻酸酯、椰油酸乙基己酯、棕榈酸异丙酯、甘油椰油酸酯中的一种或多种，进一步优选为辛酸癸酸甘油三脂、甘油亚油酸酯、甘油肉豆蔻酸酯、椰油酸乙基己酯、甘油三(乙基己酸)酯中的一种或多种；更优选为辛酸癸酸甘油三脂、甘油亚油酸酯、椰油酸乙基己酯中的一种或多种；更优选的，本发明所述液体脂质由上述物质中的的1～2种组成；最优选的，当液体脂质包括1种物质时，所述液体脂质优选为橄榄油、氢化亚麻籽油、甘油三(乙基己酸)酯、辛酸癸酸甘油三脂和椰油酸乙基己酯中的一种，所述质量优选为1～7％，进一步优选为2～6％；当液体脂质包括2种物质时，所述液体脂质优选为辛酸癸酸甘油三脂和甘油亚油酸酯，所述辛酸癸酸甘油三脂和甘油亚油酸酯的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或者霍霍巴油和甘油亚油酸酯，所述霍霍巴油和甘油亚油酸酯的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为1：1；或者甘油亚油酸酯和甘油肉豆蔻酸酯，所述甘油亚油酸酯和甘油肉豆蔻酸酯的质量比优选为0.5～2：1，进一步优选为6：7。在本发明中，液体脂质和水在乳化剂的作用下形成油水界面膜来包裹活性成分，油脂对纳米乳单相区的存在及药物的增溶非常重要。
在本发明中，所述水优选为蒸馏水或纯化水；除去所述燕窝酸抗蓝光纳米组合物包括的其他物质，余量为水；具体的，所述水的含量优选为0.1～95.5％。
在本发明中，所述液体脂质和水具备溶解功效活性成分的作用。
蓝光对皮肤的危害主要表现为诱发色素沉着，同时加速皮肤衰老，其原理为：皮肤可以通过角质形成细胞和黑素细胞上的视蛋白光感受器感知蓝光，并生成酪氨酸酶和多巴色素互变酶的蛋白复合物，持续激活酪氨酸酶，导致肌肤黑素沉着、肤色暗沉、失光光泽等；其次，蓝光可以诱导细胞产生自由基，使皮肤真皮层的纤维细胞受损，导致细胞外的基质大量减少，进而加速皮肤老化。
本发明根据吸收辐射、改善色素沉着、调节生理节律、延缓皮肤衰老四种化学防蓝光机制将燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物五种活性成分共同包载，合理搭配，协同增效。
本发明还提供了上述技术方案所述燕窝酸抗蓝光纳米组合物的制备方法，包括以下步骤：
将燕窝酸、肌肽和部分水混合，得到内水相；
将叶黄素、液体脂质、乳化剂、助乳化剂和多元醇混合，得到油相；
将所述内水相和油相混合乳化，得到油包水内体系；
将头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物和余量水混合，得到外水相；
将所述油包水内体系和外水相混合乳化，得到水包油包水双连续体系；
将所述水包油包水双连续体系进行微米化处理，得到微米级分散体；
将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到燕窝酸抗蓝光纳米组合物。
本发明将燕窝酸、肌肽和部分水混合，得到内水相。在本发明中，所述混合优选为搅拌混合；在本发明中，所述混合溶解优选在水浴下进行，所述水浴的温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
本发明将叶黄素、液体脂质、乳化剂、助乳化剂和多元醇混合，得到油相。在本发明中，所述混合溶解优选在水浴下进行，所述水浴的温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
本发明将所述内水相和油相混合乳化，得到油包水内体系。在本发明中，所述内水相和油相混合乳化的方式优选包括：将所述内水相滴加至所述油相中。所述滴加的速度优选为1～16滴/秒，进一步优选为2～14滴/秒，更进一步优选为3～12滴/秒，更优选为4～10滴/秒，最优选为5～8滴/秒；在本发明中，每滴体积优选为0.03～0.1mL，进一步优选为0.05～0.08mL。本发明优选将所述混合乳化在搅拌条件下进行，所述搅拌的速率优选为200～1000r/min，进一步优选为400～900r/min，更进一步优选为500～800r/min，更优选为600～700r/min；所述混合乳化的温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
本发明将头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物和余量水混合，得到外水相；在本发明中，所述混合优选为搅拌混合；在本发明中，所述混合优选在水浴下进行，所述水浴的温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
本发明对部分水和余量水的质量比没有特殊要求，任意满足制备过程的比例均可。
本发明将所述油包水内体系和外水相混合乳化，得到水包油包水双连续体系；在本发明中，所述油包水内体系和外水相混合乳化的方式优选包括：将所述油包水内体系加入至所述外水相中。所述滴加的速度优选为1～16滴/秒，进一步优选为2～14滴/秒，更进一步优选为3～12滴/秒，更优选为4～10滴/秒，最优选为5～8滴/秒；在本发明中，每滴体积优选为0.03～0.1mL，进一步优选为0.05～0.08mL。本发明优选将所述混合乳化在搅拌条件下进行，所述搅拌的速率优选为200～1000r/min，进一步优选为400～900r/min，更进一步优选为500～800r/min，更优选为600～700r/min；所述混合乳化的温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
本发明制备得到的水包油包水双连续体系同时包含内水相和油相，能将油溶活性成分和水溶活性成分层层包裹，提高油溶活性成分和水溶活性成分的溶解性和稳定性。
得到水包油包水双连续体系后，本发明将所述水包油包水双连续体系进行微米化处理。在本发明中，所述微米化处理的方式优选为高速剪切乳化，所述剪切转速优选为3000～16000rpm，进一步优选为4000～14000rpm，更进一步优选为5000～12000rpm，更优选为6000～10000rpm，最优选为7000～8000rpm。所述剪切时间优选为1～15min，进一步优选为2～12min，更进一步优选为3～10min，更优选为5～8min，最优选为4～6min。在本发明中，所述微米化处理得到的微米化分散体粒径优选为1～100μm，进一步优选为10～50μm。
得到微米级分散体后，本发明将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到燕窝酸抗蓝光纳米组合物。
在本发明中，所述纳米化处理的方式优选为高压均质处理或高速微射流处理。当选择高压均质处理微米级分散体至纳米级时，所述高压均质处理的压力优选为200～1800bar，进一步优选为300～1600bar，更进一步优选为500～1400bar，更优选为600～1200bar，最优选为800～1000bar；所述高压均质的循环次数优选为1～12次，进一步优选为2～10次，更进一步优选为3～8次，更优选为4～7次，最优选为5～6次；所述高压均质的温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
当采用高速微射流技术处理微米级分散体至纳米级时，所述高速微射流处理的压力优选为4000～17000psi，进一步优选为5000～15000psi，更优选为6000～8000psi；所述高速微射流处理的循环次数优选为1～12次，进一步优选为2～10次，更优选为4～8次，最优选为5～6次；所述高速微射流处理温度优选为20～70℃，进一步优选为30～60℃，更优选为40～50℃。
在本发明中，所述纳米化处理得到的燕窝酸抗蓝光纳米组合物粒径优选为10～200nm，进一步优选为20～60nm。
本发明还提供了上述技术方案所述燕窝酸抗蓝光纳米组合物在制备化妆品中的应用。具体的，本发明所述纳米组合物用于制备具有抗蓝光、抗衰等功效的化妆品。所述化妆品的形式包括但不限于化妆水、精华、膏霜、乳液、面膜和凝胶。利用本发明所述燕窝酸抗蓝光纳米组合物制备为化妆品时，可直接将所述纳米组合物添加于各类抗蓝光、抗衰产品基质中，使用方便。本发明通过纳米药物靶向载体制剂技术将五种活性成分包载于同一纳米载体中，以此制备的纳米组合物能有效提高活性物的稳定性、溶解性，进而可增加活性物在化妆品中的添加量；所述纳米组合物在化妆品中添加的质量百分含量优选为0.1～30％，进一步优选为1～20％。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物、制备方法和应用进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
以下实施例，如无特殊说明，所提及的百分含量均为相应组分在燕窝酸抗蓝光纳米组合物中所占质量的比例，纳米组合物的粒径均采用ZetasizerNano-ZS90激光粒度仪检测。
实施例1
按照质量百分含量配料，将20％燕窝酸、10％肌肽加入到60％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到内水相；
将0.1％叶黄素、1％橄榄油、4％PEG-10油酸酯、3％PPG-24-甘油聚醚-24、1％甘油混合，50℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以3滴/秒的速度滴加至油相中并在50℃、700r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将0.1％头状胡枝子叶/茎提取物、0.1％可可籽提取物加入到0.7％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到外水相；
(具体为将20g燕窝酸、10g肌肽加入到60g纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到内水相；
将0.1g叶黄素、1g橄榄油、4gPEG-10油酸酯、3gPPG-24-甘油聚醚-24、1g甘油混合，50℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以3滴/秒的速度滴加至油相中并在50℃、700r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将0.1g头状胡枝子叶/茎提取物、0.1g可可籽提取物加入到0.7g纯化水中，20℃水浴加热溶解，得到外水相；下述实施例中均为此种总量100g的配料形式，下述不再赘述)
将油包水内体系以3滴/秒的速度滴加至外水相中并在50℃、700r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为12000rpm的条件下高速剪切乳化10min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在50℃、压力为1600bar的条件下进行高压均质处理，循环10次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为195.6nm。
实施例2
将18％燕窝酸、5％肌肽加入到58％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到内水相；
将0.5％叶黄素、4％氢化亚麻籽油、1％聚甘油-10二棕榈酸酯、8％油醇聚醚-12、3％聚乙二醇-200混合，50℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以4滴/秒的速度滴加至油相中并在50℃、600r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将0.5％头状胡枝子叶/茎提取物、0.5％可可籽提取物加入到1.5％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以4滴/秒的速度滴加至外水相中并在50℃、600r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为10000rpm的条件下高速剪切乳化8min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在50℃、压力为1400bar的条件下进行高压均质处理，循环7次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为119.3nm。
实施例3
将16％燕窝酸、8％肌肽加入到42％纯化水中，40℃水浴加热溶解，得到内水相；
将1％叶黄素、6％甘油三(乙基己酸)酯、6％氢化卵磷脂、5％胆甾醇聚醚-24、5％PPG-10山梨醇混合，40℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以10滴/秒的速度滴加至油相中并在40℃、600r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将3％头状胡枝子叶/茎提取物、3％可可籽提取物加入到5％纯化水中，40℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以10滴/秒的速度滴加至外水相中并在40℃、600r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为6000rpm的条件下高速剪切乳化4min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在40℃、压力为4000psi的条件下进行高速微射流处理，循环4次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为81.7nm。
实施例4
将10％燕窝酸、4％肌肽加入到41％纯化水中，30℃水浴加热溶解，得到内水相；
将4％叶黄素、6％澳洲坚果籽油、6％辛酸癸酸甘油三脂、6％大豆卵磷脂、6％PEG-10甘油异硬脂酸酯、1％二乙二醇单乙基醚、4％二丙二醇、4％丙二醇混合，30℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以12滴/秒的速度滴加至油相中并在30℃、900r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将2％头状胡枝子叶/茎提取物、2％可可籽提取物加入到4％纯化水中，30℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以12滴/秒的速度滴加至外水相中并在30℃、900r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为5000rpm的条件下高速剪切乳化3min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在30℃、压力为600bar的条件下进行高压均质处理，循环3次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为47.5nm。
实施例5
将0.1％燕窝酸、2％肌肽加入到10％纯化水中，70℃水浴加热溶解，得到内水相；
将10％叶黄素、10％霍霍巴油、10％甘油亚油酸酯、7％羟基化卵磷脂、7％聚甘油-10肉豆蔻酸酯、10％PPG-1-PEG-9月桂二醇醚、10％辛基十二醇、6％1,3-丙二醇、6％1,2-戊二醇混合，70℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以1滴/秒的速度滴加至油相中并在70℃、1000r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将4％头状胡枝子叶/茎提取物、4％可可籽提取物加入到3.9％纯化水中，70℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以1滴/秒的速度滴加至外水相中并在70℃、1000r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为16000rpm的条件下高速剪切乳化15min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在70℃、压力为1800bar的条件下进行高压均质处理，循环12次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为171.3nm。
实施例6
将2％燕窝酸、3％肌肽加入到6％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到内水相；
将5％叶黄素、6％蓖麻籽油、10％甘油肉豆蔻酸酯、8％PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、8％聚氧乙烯氢化蓖麻油、6％PPG-26-丁醇聚醚-26、6％PPG-28-丁醇聚醚-35、9％丁二醇、9％1,2-己二醇混合，60℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以5滴/秒的速度滴加至油相中并在60℃、700r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将8％头状胡枝子叶/茎提取物、8％可可籽提取物加入到6％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以5滴/秒的速度滴加至外水相中并在60℃、700r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为8000rpm的条件下高速剪切乳化6min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在60℃、压力为1200bar的条件下进行高压均质处理，循环6次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为142.8nm。
实施例7
将1％燕窝酸、0.5％肌肽加入到12％纯化水中，30℃水浴加热溶解，得到内水相；
将8％叶黄素、7％椰油酸乙基己酯、7％棕榈酸异丙酯、10％鲸蜡硬脂基葡糖苷、10％聚氧乙烯氢化蓖麻油、7％二乙二醇单乙基醚、7％PPG-26-丁醇聚醚-26、5％1,3-丙二醇、5％丁二醇混合，30℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以8滴/秒的速度滴加至油相中并在30℃、500r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将5％头状胡枝子叶/茎提取物、5％可可籽提取物加入到10.5％纯化水中，30℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以8滴/秒的速度滴加至外水相中并在30℃、500r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为7000rpm的条件下高速剪切乳化5min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在30℃、压力为800bar的条件下进行高压均质处理，循环5次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为52.4nm。
实施例8
将12％燕窝酸、0.1％肌肽加入到20.9％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到内水相；
将2％叶黄素、3％甘油椰油酸酯、5％辛酸癸酸甘油三脂、4％大豆卵磷脂、4％PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、6％胆甾醇聚醚-24、3％1,2-己二醇、3％异丙醇混合，50℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以14滴/秒的速度滴加至油相中并在50℃、600r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将10％头状胡枝子叶/茎提取物、10％可可籽提取物加入到17％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以14滴/秒的速度滴加至外水相中并在50℃、600r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为4000rpm的条件下高速剪切乳化2min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在50℃、压力为500bar的条件下进行高压均质处理，循环2次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为28.9nm。
实施例9
将2％燕窝酸、1％肌肽加入到40.8％纯化水中，20℃水浴加热溶解，得到内水相；
将0.2％叶黄素、5％辛酸癸酸甘油三脂、5％甘油亚油酸酯、5％羟基化卵磷脂、4％聚甘油-10肉豆蔻酸酯、10％辛基十二醇、10％1,2-戊二醇、10％1,3-丙二醇混合，20℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以16滴/秒的速度滴加至油相中并在20℃、400r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将1％头状胡枝子叶/茎提取物、1％可可籽提取物加入到5％纯化水中，20℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以16滴/秒的速度滴加至外水相中并在20℃、400r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为3000rpm的条件下高速剪切乳化1min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在20℃、压力为300bar的条件下进行高压均质处理，循环1次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为15.6nm。
实施例10
将5％燕窝酸、4％肌肽加入到20％纯化水中，40℃水浴加热溶解，得到内水相；
将4％叶黄素、6％椰油酸乙基己酯、5％甘油椰油酸酯、6％聚甘油-10肉豆蔻酸酯、4％PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、9％二乙二醇单乙基醚、9％PPG-1-PEG-9月桂二醇醚、7％1,2-戊二醇、7％1,2-己二醇混合，40℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以6滴/秒的速度滴加至油相中并在40℃、200r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将4％头状胡枝子叶/茎提取物、4％可可籽提取物加入到6％纯化水中，40℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以6滴/秒的速度滴加至外水相中并在40℃、200r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为7000rpm的条件下高速剪切乳化5min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在40℃、压力为1000bar的条件下进行高压均质处理，循环8次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为61.4nm。
实施例11
将8％燕窝酸、6％肌肽加入到8％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到内水相；
将6％叶黄素、6％甘油亚油酸酯、7％甘油肉豆蔻酸酯、6％大豆卵磷脂、5％鲸蜡硬脂基葡糖苷、10％二乙二醇单乙基醚、6％PPG-26-丁醇聚醚-26、6％1,3-丙二醇、10％二丙二醇混合，60℃水浴加热溶解，得到油相；
将内水相以2滴/秒的速度滴加至油相中并在60℃、800r/min的转率下不断搅拌，得到油包水内体系；
将6％头状胡枝子叶/茎提取物、6％可可籽提取物加入到4％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到外水相；
将油包水内体系以2滴/秒的速度滴加至外水相中并在60℃、800r/min的转率下不断搅拌，得到水包油包水双连续体系；
将水包油包水双连续体系在转速为14000rpm的条件下高速剪切乳化12min，得到微米级分散体；
将微米级分散体在60℃、压力为17000psi的条件下进行高速微射流处理，循环6次，冷却至室温，得到纳米组合物。
对上述纳米组合物的粒径进行检测，可得该纳米组合物粒径为78.2nm。
测试例1
稳定性试验
将实施例1～11制备得到的纳米组合物在密闭容器、室温条件下放置3、6、9、12个月后，对样品的粒径进行检测，观察样品性状，并通过高效液相色谱HPLC检测各样品中燕窝酸的含量，并计算12个月后燕窝酸剩余质量含量百分比，综合评价纳米组合物的稳定性。具体检测结果如表1所示。
表1实施例1～11中燕窝酸抗蓝光纳米组合物稳定性试验结果
由表1可以看出，本发明高压均质处理和高速微射流处理制备的燕窝酸抗蓝光纳米组合物粒径在10～200nm之间，满足实际应用要求，样品在放置12个月后粒径未发生显著性变化，且燕窝酸室温条件下放置12个月后含量没有出现显著变化，仍然满足实际应用需求。样品在放置12个月后未出现团聚、变色、分层现象，尤其在活性成分浓度高的情况下仍然较稳定，未发现结晶析出现象，如图1为实施例11在考查前后外观照片。因此，本发明提供的燕窝酸抗蓝光纳米组合物具有良好的稳定性。
对比例1
制备空白霜剂：将5％辛酸癸酸甘油三酯、5％白油、2％十六十八醇、2％硬脂醇聚醚-2、2％硬脂醇聚醚-21于75℃水浴中加热熔融后得到油相；将5％丙二醇、0.15％卡波姆和余量的纯化水于75℃水浴溶解，得到水相；将油相滴加至水相搅拌混合，于10000rpm转速下剪切乳化3min，加入0.15％三乙醇胺，继续剪切2min，冷却后加入0.5％苯氧乙醇，搅拌均匀即得空白霜剂。
测试例2
刺激性试验
将实施例1～11所制得的纳米组合物样品，分别与对比例1中的空白霜剂按照质量比3：7进行复配，制备复合霜剂，进行皮肤刺激性试验。
取健康家兔72只，体重2.0±0.2kg，随机分为12组，每组动物6只，于实验前24h将家兔背部皮肤两侧去毛，去毛后24h检查去毛皮肤是否受伤，受伤皮肤不宜做皮肤刺激性试验。11组每天分别涂抹使用实施例1～11制得的纳米组合物制备的复合霜剂3次，连续涂抹7天；剩余1组涂抹空白霜剂进行对照，观察试验结果，将试验结果列于表2中。
表2实施例1～11样品制备的复合霜剂及空白组皮肤刺激性观察结果
注：“+”家兔皮肤充血、红肿；“++”表示充血、红肿现象仍在，但有增加趋势；“—”表示无充血、红肿现象。
根据表2中的试验结果可以看出，使用实施例1～11纳米组合物制备的复合霜剂及对比例1中的空白霜剂涂抹于家兔皮肤后均无充血、红肿现象，说明本发明提供的纳米组合物对皮肤没有刺激性，安全性高。
实施例12
制备纳米复合霜剂：将实施例9制备的纳米组合物与对比例1中的空白霜剂按照质量百分含量1：9进行复配，即得到纳米复合霜剂。
纳米复合霜剂中功效成分及含量分别为：0.2％燕窝酸、0.1％肌肽、0.02％叶黄素、0.1％头状胡枝子叶/茎提取物、0.1％可可籽提取物。
对比例2
制备与纳米复合霜剂中功效成分及含量相同的普通霜剂：将0.02％叶黄素、5％辛酸癸酸甘油三酯、5％白油、2％十六十八醇、2％硬脂醇聚醚-2、2％硬脂醇聚醚-21于75℃水浴中加热熔融后得到油相；将0.2％燕窝酸、0.1％肌肽、0.1％头状胡枝子叶/茎提取物、0.1％可可籽提取物、5％丙二醇、0.15％卡波姆和余量的纯化水于75℃水浴溶解，得到水相；将油相滴加至水相搅拌混合，于10000rpm转速下剪切乳化3min，加入0.15％三乙醇胺，继续剪切2min，冷却后加入0.5％苯氧乙醇，搅拌均匀，即得与纳米复合霜剂中功效成分及含量相同的普通霜剂。
实施例13
制备纳米复合霜剂：将实施例10制备的纳米组合物与对比例1中的空白霜剂按照质量百分含量1：9进行复配，即得到纳米复合霜剂。
实施例14
制备纳米复合霜剂：将实施例11制备的纳米组合物与对比例1中的空白霜剂按照质量百分含量1：9进行复配，即得到纳米复合霜剂。
测试例3
体外透皮实验
采用垂直式Franz扩散池法进行离体鼠皮的透皮实验。将SD雄性大鼠腹部皮肤固定于接收室和供给室之间，取实施例12制备的纳米复合霜剂和对比例2制备的普通霜剂各1g于供给室中，以质量分数15％乙醇、5％吐温80和80％的生理盐水为接收液，37℃下搅拌扩散。于1，2，4，6，8，10，12h取0.5mL接收液，并即时补充等量恒温的新鲜接收液。HPLC分析，计算不同时间特定药物单位面积累积透过量。12h后，取下皮肤，洗净后剪碎，研磨成匀浆液，加适量接收液离心，取上清液HPLC分析，计算特定药物的单位面积皮肤滞留量。本实验中测定的药物为燕窝酸。实验数据如图2、图3和表3所示。
表3纳米复合霜剂和普通霜剂在12h后体外皮肤累积透过量和皮肤滞留量结果
组别 纳米复合霜剂 普通霜剂
皮肤累积透过量(μg/cm2) 210.3 120.6
皮肤滞留量(μg/cm2) 38.7 16.5
由图2和表3可知，对比例2制备的普通霜剂12h后皮肤累积透过量仅为120.6μg/cm2，而实施例12制备的纳米复合霜剂12h后皮肤累积透过量为210.3μg/cm2(**P<0.01)，表明活性物经纳米组合物包载后在皮肤中的累积透过量显著提高。游离活性物由于皮肤屏障作用很难透过皮肤角质层到达皮肤深层结构发挥作用，经纳米包载后由于纳米载体粒径小，比表面积大，与细胞之间具有更强的粘附性和生物相容性，活性物能更有效穿透皮肤表层到达真皮层，提高了活性成分的生物利用度，发挥更好的抗蓝光效果。
由图3和表3可知，对比例2制备的普通霜剂12h后皮肤滞留量仅为16.5μg/cm2，而实施例12制备的纳米复合霜剂12h后皮肤滞留量为38.7μg/cm2(**P<0.01)，表明活性物经纳米组合物包载后在皮肤中的滞留量显著提高。活性物经纳米包载后在皮肤中能高浓度富集和长时间滞留，并能缓释、控释，延长活性成分的作用时间，增强抗蓝光功效。
测试例4
建立成纤维细胞的蓝光损伤模型
测试样品：将实施例9、10、11所得纳米组合物用DMEM培养液稀释800倍得到的纳米组合物培养样品，对应编号1、2、3号；取燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物作为游离活性原料，利用DMEM培养液稀释，至其百分含量与3号样品相同，作为游离对照组，对应编号4号。取燕窝酸作为活性原料，利用DMEM培养液稀释，至其百分含量与4号样品五种活性物总含量相同，对应编号5号；取肌肽作为活性原料，利用DMEM培养液稀释，至其百分含量与4号样品五种活性物总含量相同，对应编号6号；取叶黄素作为活性原料，利用DMEM培养液稀释，至其百分含量与4号样品五种活性物总含量相同，对应编号7号；取头状胡枝子叶/茎提取物作为活性原料，利用DMEM培养液稀释，至其百分含量与4号样品五种活性物总含量相同，对应编号8号；取可可籽提取物作为活性原料，利用DMEM培养液稀释，至其百分含量与4号样品五种活性物总含量相同，对应编号9号。
将成纤维细胞以每孔3×104个细胞的密度接种到96孔板中，置于37℃、5％CO2细胞培养箱中培养24h。培养结束后吸出细胞板中的培养基，空白对照组和模型组各加入500μL的无血清培养基，空白对照组避光培养，模型组用波长405nm、照射强度160μW/cm2的LED蓝光光源，水平放置在距离细胞培养瓶底25mm的正上方进行照射，给药组加入测试样品后在同样条件下进行LED蓝光照射处理，每次照射完成后将细胞放入培养箱中继续培养。培养24h后，每孔加入10μL的CCK-8溶液，在培养箱中孵育2h，使用酶标仪在450nm处测定OD值，计算细胞存活率。实验结果见图4、图5和表4、表5。
表4 1～4号样品抗蓝光损伤结果
样品名称 空白组 模型组 1号样品 2号样品 3号样品 4号样品
存活率/％ 100.0 35.6 52.2 68.3 76.1 50.1
表5 4～9号样品抗蓝光损伤结果
样品名称 4号样品 5号样品 6号样品 7号样品 8号样品 9号样品
存活率/％ 50.1 33.6 36.5 38.3 31.3 32.7
由图4和表4可知，经蓝光照射后，模型组细胞存活率显著下降，说明成纤维细胞的蓝光损伤模型建立成功。与模型组比较，实施例9、10、11制得的纳米组合物(1～3号样品)均能显著提高细胞存活率，细胞存活率分别为52.2％、68.3％和76.1％(*P<0.05)，说明本申请高压均质处理和高速微射流处理制备的纳米组合物能有效抵御蓝光辐射，降低蓝光对皮肤的损伤；与游离活性物(4号样品)细胞存活率(50.1％)比较，实施例11制得的纳米组合物(3号样品)对细胞存活率的提高具有显著性差异(#P<0.05)，表明活性物经纳米包载后能更有效地抵御蓝光辐射对皮肤的损伤。
4～9号样品活性物总含量相同，5～9号样品为单独活性物，4号样品为多种活性物，由图5和表5可知，与5～9号样品相比，4号样品对细胞存活率的提高具有显著性差异(与5号样品比较，aP<0.05；与6号样品比较，bP<0.05；与7号样品比较，cP<0.05；与8号样品比较，dP<0.05；与9号样品比较，eP<0.05)，表明活性成分燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物具有协同作用，同时使用具有更优异的蓝光防护功效。
测试例5
调节生理节律
测试样品：对比例1、实施例12、实施例13、实施例14、对比例2
征集30名女性，随机分为5组，在夜间安排志愿者观看人造光幕后进行双盲半脸测试，分别比较对比例1、实施例12、实施例13、实施例14和对比例2的蓝光防护效果，实验7天后，志愿者们进行自我评估，评估标准为：(1)3天后，使用霜剂的半脸皮肤油脂、暗沉比未使用霜剂的半脸明显改善，皮肤疲劳症状消失，皮肤状态恢复原样为显效；(2)5天后，使用霜剂的半脸皮肤油脂、暗沉比未使用霜剂的半脸改善，皮肤疲劳症状缓解为有效；(3)7天后，使用霜剂的半脸皮肤油脂、暗沉比未使用霜剂的半脸改善，皮肤疲劳症状缓解为微效；(4)7天后，使用霜剂的半脸皮肤油脂、暗沉症状未改善为无效。实验结果见表6。
表6对比例1、实施例12、实施例13、实施例14和对比例2对调节生理节律结果
样品名称 显效 有效 微效 无效 显效率
对比例1 0 0 1 9 0
实施例12 7 1 2 0 70％
实施例13 8 1 1 0 80％
实施例14 9 0 1 0 90％
对比例2 3 3 3 1 30％
由表6可知，使用空白膏霜(对比例1)后显效率为0，皮肤疲劳症状改善不明显，皮肤状态较差，说明空白膏霜蓝光防护效果较差，蓝光辐射会破坏皮肤生理节律，加重皮肤疲劳症状，使皮肤状态变差；使用实施例12～14制备的纳米复合霜剂后，显效率为70％以上，说明本专利纳米组合物可有效改善因蓝光导致的皮肤疲劳。普通霜剂(对比例2)活性成分含量与实施例12制备的纳米复合霜剂相同，普通霜剂显效率为30％，而实施例12制备的纳米复合霜剂显效率为70％，纳米复合霜剂对皮肤疲劳症状和皮肤状态的改善效果显著提高，表明活性物经纳米包载后对皮肤保持昼夜节律的平衡、保持皮肤健康状态有着更优效果。
综上所述，本发明制备的纳米组合物可有效提高活性物的稳定性，同时可促进燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物靶向透皮至皮肤深层组织，并能高浓度、长时间滞留，显著提高活性成分生物利用度，五种活性成分依据抗蓝光四种机制多角度、全方位抵御蓝光对皮肤造成的伤害，相互搭配，协同增效，本发明制备的纳米组合物不仅具有优异的抗蓝光功效，还能起到抗衰老、提亮肤色的效果。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (7)

1.一种燕窝酸抗蓝光纳米组合物，其特征在于，包括抗蓝光活性成分和辅料；
所述抗蓝光活性成分由燕窝酸、肌肽、叶黄素、头状胡枝子叶/茎提取物和可可籽提取物组成；
所述辅料包括乳化剂、助乳化剂、多元醇、液体脂质和水；
以抗蓝光纳米组合物的总质量计，所述抗蓝光活性成分中燕窝酸为0.1～20%，肌肽为0.1～10%、叶黄素为0.1～10%、头状胡枝子叶/茎提取物为0.1～10%和可可籽提取物为0.1～10%；所述辅料中乳化剂为1～20%、助乳化剂为1～20%、多元醇为1～20%、液体脂质为1～20%和水为0.1～95.5%；
所述乳化剂包括磷脂类乳化剂、聚乙二醇类乳化剂、聚甘油类乳化剂和葡糖苷类乳化剂中的一种或多种；
所述助乳化剂包括醚类助乳化剂和/或醇类助乳化剂；
所述多元醇包括甘油、丙二醇、丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、1,2-己二醇、二丙二醇、异丙醇、聚乙二醇-200和PPG-10山梨醇中的一种或多种；
所述液体脂质包括植物油脂和/或合成油脂；
所述抗蓝光纳米组合物为水包油包水双连续体系。
2.权利要求1所述的抗蓝光纳米组合物的制备方法，其特征在于，由以下步骤组成：
将燕窝酸、肌肽和部分水混合，得到内水相；
将叶黄素、液体脂质、乳化剂、助乳化剂和多元醇混合，得到油相；
将所述内水相和油相混合乳化，得到油包水内体系；
将头状胡枝子叶/茎提取物、可可籽提取物和余量水混合，得到外水相；
将所述油包水内体系和外水相混合乳化，得到水包油包水双连续体系；
将所述水包油包水双连续体系进行微米化处理，得到微米级分散体；
将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到燕窝酸抗蓝光纳米组合物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述内水相和油相混合乳化包括：在搅拌的条件下，将所述内水相加入至所述油相中；
所述油包水内体系和外水相混合乳化包括：在搅拌的条件下，将所述油包水内体系加入至所述外水相中。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述纳米化处理包括高压均质处理或高速微射流处理。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述高压均质处理的压力为200～1800bar，循环次数为1～12次，温度为20～70℃。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述高速微射流处理的压力为4000～17000psi，循环次数为1～12次，温度为20～70℃。
7.权利要求1所述的抗蓝光纳米组合物或权利要求2～6任一项所述制备方法制备得到的抗蓝光纳米组合物在制备化妆品中的应用。
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