CN114128890A - 营养补充性组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种营养补充性组合物,尤其是一种降血脂或降血糖组合物。所述组合物包括:i)一种或多种的来源的β‑葡聚糖;ii)牛磺酸,其中,所述组合物中,通过所述β‑葡聚糖与牛磺酸的用量比的调整,能够实现协同降血脂或协同降血糖的功效,并且,所述组合物任选地也可以包括其它营养性成分。
Description
技术领域
本发明属于食品领域,涉及一种营养补充性组合物,更具体的,涉及一种具有降血脂作用的功能性保健或营养组合物,以及涉及一种具有降血糖作用的功能性保健或营养组合物。
背景技术
随着生活水平的提高和生活节奏的改变,“三高症”的发病率越来越高,“三高症”是指高血压、高血糖(糖尿病)和高血脂症。它们属于心脑血管疾病,主要是现代文明派生出来的“富贵病”,可能单独存在,也可能相互关联。例如:糖尿病人很容易同时患上高血压或高血脂症,而高血脂又是动脉硬化形成和发展的主要因素,动脉硬化患者血管弹性差,从而加剧血压升高。因此,出现这三种疾患中的任何一种,后期都易发展形成“三高症”,尤其在老年人、机体功能衰退者中发病率最高。
高血脂是中老年人常见疾病。医学专家研究发现,糖尿病、肾病、胆石症等个别疾病会引发脂质代谢紊乱导致高血脂。而且,降低血糖的药物、利尿剂、口服雌激素避孕药等药物也会引发继发性高血脂症。控制血脂一般是采用口服降血脂药物、限制饮食种类等来实现,这样会导致患者营养成分的摄入受限。从全球看来患有高血脂的人数每年都在增加,高血脂的发病率也随着年龄的增长而增加,现在用于降血脂药物的他汀类、烟酸类、贝特类、胆酸螯合树脂类和胆固醇吸收抑制剂等,虽能显著降低和预防心血管病的发生,但不足之处是,这些药物价格昂贵,长期使用还会使机体产生一定的抗药性,并具有一定的毒副作用。因此开发一款健康无副作用的降血脂的组合物显得尤为重要。
此外,患有糖尿病的人数每年也都在增加,并且并未有明显有效治疗的手段。糖尿病发病率也随年龄的增长而增加,中老年糖尿病患者占糖尿病患者总人数的98%。而且,糖尿病还会引发多种并发症,糖尿病及其并发症会给患者带来肉体和精神的双重伤害,甚至会威胁患者的生命健康,同时也会给患者的家庭带来人力、物力双重损失。因此,预防糖尿病的发生、减轻糖尿病的危害,是我们现今社会急需解决的问题。现今社会多采用控制饮食、口服降血糖药物、注射胰岛素等方式来控制血糖,这不仅使患者摄入食品营养成分的多样性受限,而且还会给患者带来种种痛苦和不便。因此开发一款健康无副作用的降血糖的组合物也显得尤为重要。
已知的是β-葡聚糖是由葡萄糖单位构成的,在微生物、植物和动物中广泛存在,是葡萄糖的多聚糖单位。结构上它们大部分是以β-1,3键结合,是一种聚合物,具有一定的生物活性。近几年的多项试验研究表明,β-葡聚糖在降血糖、减脂和提高免疫能力方面有显著的作用,对人体各种生理功能都有很大的益处。作为β-葡聚糖的一种代表,酵母葡聚糖来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),由于其特殊的结构具有多种生理活性,并且在美国FDA已将它列入GRAS(通常认为是安全的)中,作为食品原料,被广泛运用于各种食品中。酵母葡聚糖作为膳食纤维,能被肠道细菌分解,促进胃肠蠕动,刺激消化液的分泌,具有辅助消化的功能;可增加肠道的蠕动,促进排便,从而有效防止便秘;可以增加人体肠道对钙、镁和锌的吸收。酵母葡聚糖独特的β-(1→3)骨架结构使其具有较强的免疫调节活性。能显著提高人体免疫力。
另外,牛磺酸是一种内源性含硫氨基酸,可由甲硫氨酸和半胱氨酸合成,也可由饮食提供,在鱼贝类等海产品中含量丰富。牛磺酸结构简单且不参与蛋白质合成,主要以游离形式存在于哺乳动物的肝脏、肾脏、脂肪组织、视网膜等组织器官,发挥维持视觉、调节渗透压、抗氧化、调节脂类代谢等作用。
目前而言,在降血脂方面,动物实验表明牛磺酸可减少实验动物体脂,降低血液中甘油三酯水平,改善脂肪肝。体外实验显示,牛磺酸可抑制HepG2细胞甘油三酯的合成。此外,将多种具有保健功效的物质混合使用以起到降血脂的效果的做法较为普遍。例如:引用文献1公开了一种用于预防心脑血管疾病的成人奶粉,针对现有成人奶粉配方及其生产技术工艺进行了改进,调整配比,根据情况添加了选自牛磺酸、γ-亚麻酸、酵母β葡聚糖、左旋肉碱等中的一种或多种,显著提高现有技术中成人奶粉普遍存在的高脂肪以及过多的反式脂肪酸的问题,从而大大降低心脑血管疾病的发生概率。引用文献2公开了一种具有辅助降血糖作用的组合物及其应用,其包括L-阿拉伯糖、菊粉、燕麦β-葡聚糖、牛磺酸和叶酸类化合物。提供了一种成分明确、降糖良好且无副作用、并且兼具降血脂作用的组合物。引用文献3公开了一种降三高耗牛奶粉,原料中添加了药食同源、新资源食品及中老年所需的多种维生素,以及酵母β-葡聚糖等,经其所公开的方法制得到耗牛奶粉,具有较高的胆固醇和甘油三酯的降解能力。引用文献4公开了一种海鲜调味品及其制备方法,其包括牡蛎蛋白肽粉、复合蛋白酶、墨角兰基料、红葡萄酒等。其中,牡蛎富含牛磺酸,且无机盐、维生素含量也很丰富,在调节血脂、促进新陈代谢、改善高血糖等方面均有益处。
此外,目前在降血糖方面,一些现有的研究初步显示了牛磺酸或β-葡聚糖与改善高血糖状态相关,例如,有报道显示,牛磺酸可以改善糖代谢障碍,其中,临床试验、动物实验均证实牛磺酸能改善I型糖尿病的高血糖状态。且有研究表明,饮水中补充2%的牛磺酸既能显著提高小鼠的糖耐量及胰岛素敏感性,也能有效改善大鼠因果糖诱导的高血糖、高胰岛素血症及胰岛素抵抗。另外,也有报道燕麦β-葡聚糖摄入介于3至8周或许有利于2型糖尿病患者的血糖控制,但受限于小样本数,并无充分结论。同样,现有的降血糖的保健性食品中,将多种具有营养补充、保健功效的物质混合使用在目前来看也是一件自然而然事情。例如:引用文献5公开了一种多功能儿童生长奶粉,该奶粉原料中含有牛磺酸35~80份,并且其中含有的多糖为酵母β-葡聚糖,该奶粉可以提高身体免疫力,提高皮肤的防御能力,还可以促进骨骼的生长,防止骨质疏松。引用文献6公开了一种牡蛎功能食品的制备方法,牡蛎中含有高蛋白质、低脂肪,同时富含牛磺酸、维生素,具有降血糖、增强免疫力、抗衰老、抗氧化等功能,其提供了一种牡蛎功能食品的制备方法,能够将牡蛎蛋白降解为小分子多肽和氨基酸,促进人体的吸收,并辅以植物精华提取物以使所制备的牡蛎功能食品具备保肝、护肝以及抗血栓、降血糖等功效。引用文献7公开了一种降血糖、调血脂、抗疲劳、增强免疫力的固体饮料,该饮料包括米糠脂肪烷醇微胶囊、乳清蛋白、大豆分离蛋白、大豆肽粉、酵母β-葡聚糖、麦芽糊精等原料。
虽然上述现有技术已经通过多种功能性成分的添加在降血脂或降血糖方面取得了一定的进展,但对于提供一种机理更明确、成分更为简单的降血脂营养补充性组合物而言,仍然有进一步探讨的空间。
引用文献:
引用文献1:CN113080263A
引用文献2:CN109846868B
引用文献3:CN113632849A
引用文献4:CN112826067A
引用文献5:CN113632851A
引用文献6:CN113679012A
引用文献7:CN112890066A
发明内容
发明要解决的问题
一方面,有关降血脂的尝试,本领域中已经提出了与血脂控制相关的各种功能性组合物。但在具体的研究实验中,发明人也发现了如下问题:
虽然一些结果显示单独的β-葡聚糖或牛磺酸存在降血脂的功效,但针对二者的生物学实证研究并不充分,例如有报道灌胃给药燕麦β-葡聚糖4周后,可显著降低高血脂症大鼠血清TC和LDL-C,显著升高HDL-C。但该实验动物模型在食用高脂饲料3周后其TG值与正常组相比均无显著变化,因此无充分结论证明燕麦β-葡聚糖是否有利于TG的降低(燕麦β-葡聚糖治疗大鼠高脂血症,《第二军医大学学报》,2006,裴素萍等)。另外,牛磺酸抑制甘油三酯合成相关酶的报道较少,并且关于牛磺酸降低细胞脂质的有效浓度报道不一,需要进一步深入的研究。
引用文献1中作为非必要组分添加了选自牛磺酸、酵母β葡聚糖等中的一种或多种,但对于其实际作用及含量并未考察,且并未提及二者之间的协同增效作用。引用文献2中公开了作为具备优异降血糖作用的组合物中的燕麦β-葡聚糖以及牛磺酸用量,该组合物虽同时具备降血脂作用,但发挥改善血脂作用时的β-葡聚糖以及牛磺酸用量并未提及。引用文献3中成分复杂,虽然提及了β-葡聚糖,但并非作为必要的组分。引用文献4中虽然提及了牡蛎中富含牛磺酸,但其同时具备多种对人体有益的作用,没有针对牛磺酸在降血脂方面的功能进行详细描述。
另一方面,有关降血糖的尝试,如前所述,本领域中已经提出了与血糖控制的各种营养补充性组合物。但在具体的研究实践中,发明人也发现了如下问题:
尽管已经有报道在独立的对牛磺酸或者葡聚糖研究中显示了它们各自可能与减缓高血糖状态存在关联,但一方面,这样的药学性研究中,每种组分用量较高,作为营养补充性食品而言,几乎不可能添加如此高含量的组分;另一方面,现有的营养补充组合物为多种营养补充成分同时加入,必须考虑各种组分之间的相互影响或作用,因此考虑到这两方面的问题,这样的研究可能对于营养补充性食品的指导有限。
另外,引用文献5中奶粉原料中虽含有牛磺酸以及酵母β-葡聚糖,但除此之外,还需在其他多种物质配合下,整体上起到降血糖的作用,且具体协同效应组分之间的关系并不明显。引用文献6则强调了作为牡蛎中的一种成分的牛磺酸具有降血糖的作用,但该成分并未作为主要成分进行研究。引用文献7中虽提及含有酵母β-葡聚糖的固体饮料具备降血糖功能,但其也需要多种物质相互配合整体起作用,并未强调各组分之间协同增效的作用。
由此可见,上述这些现有技术并未从细胞层面建立β-葡聚糖、牛磺酸与降血脂或降血糖作用的有效直接联系,也并未提及β-葡聚糖与牛磺酸的在降血脂或降血糖方面是否存在协同的作用。
因此,针对现有技术存在的上述不足,本发明要解决的问题在于:
在本发明的第一发明方面,提供一种组成简单的具有降血脂功能的组合物,该组合物中β-葡聚糖与牛磺酸在限定用量的配合下,能够获得协同增效作用,并且实验结果也能够显示该组合即使在β-葡聚糖或牛磺酸用量较低的情况下也能获得明显的降血脂效果。
在本发明的第二发明方面,提供一种组成简单的具有降血糖功能的组合物,该组合物中β-葡聚糖与牛磺酸在限定用量的配合下,能够获得协同增效作用,并且实验结果也能够显示该组合即使在β-葡聚糖用量或牛磺酸用量较低的情况下也能获得明显的降血糖的效果。
用于解决问题的方案
通过本发明发明人长期的研究,发现通过以下的技术方案能够解决上述技术问题:
[1].一种营养补充性组合物,其中,所述组合物包括:
i)一种或多种的来源的β-葡聚糖;
ii)牛磺酸,
其中,所述组合物中,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为0.05~5:1,并且所述组合物任选地包括其它营养性成分。
[2].根据[1]所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为0.8~4:1。
[3].根据[1]或[2]所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖选自来源于植物或者真菌的β-葡聚糖中的一种或多种;所述牛磺酸选自来源于动植物的提取物或者人工合成牛磺酸中一种或多种。
[4].根据[1]~[3]任一项所述的组合物,其中,所述其他营养成分包括蛋白质、维生素、单糖或多糖、或植物提取物等中的一种或多种。
[5].根据[1]~[4]任一项所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖包括酵母β-葡聚糖。
[6].根据[1]~[5]任一项所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖的含量为0.003质量%以上;所述牛磺酸的含量为0.03质量%以上。
[7].根据[1]~[6]任一项所述的组合物,其中,所述组合物为液体、半固体或固体。
[8].一种降血脂组合物,其中,所述组合物包括根据[1]~[7]任一项所述的组合物。
[9].一种营养补充性组合物,其中,所述组合物包括:
a)一种或多种的来源的β-葡聚糖;
b)牛磺酸;
其中,所述组合物中,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为10:1以下,并且所述组合物任选地包括其它营养性成分。
[10].根据[9]所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为0.6:1以上。
[11].根据[9]或[10]所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖选自来源于植物或者真菌的β-葡聚糖中的一种或多种;所述牛磺酸选自来源于动植物的提取物或者人工合成牛磺酸中一种或多种。
[12].根据[9]~[11]任一项所述的组合物,其中,所述其他营养成分包括蛋白质、维生素、单糖或多糖、或植物提取物等中的一种或多种。
[13].根据[9]~[12]任一项所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖包括酵母β-葡聚糖。
[14].根据[9]~[13]任一项所述的组合物,其中,所述β-葡聚糖的含量为0.003质量%以上;所述牛磺酸的含量为0.01质量%以上。
[15].根据[9]~[14]任一项所述的组合物,其中,所述组合物为液体、半固体或固体。
[16].一种降血脂组合物,其中,所述组合物包括根据[9]~[15]任一项所述的组合物。
[17].一种食品,其中,所述食品经由根据[1]~[16]任一项所述的组合物而得到。
[18].根据[17]所述的食品,其中,所述食品包括面食、饮料、可冲调食品、烘焙糕点、酱料或营养补充性食品或宠物食品。
[19].根据权利要求18所述的食品,其中,所述饮料包括水果或蔬菜类饮料、茶饮料、奶制品类饮料、维生素类功能性饮料、固体饮料。
发明的效果
通过上述技术方案的实施,本发明中第一和第二发明具有如下优势以及能够获得如下的技术效果:
1)本发明第一和第二发明中分别提供的降血脂或降血糖营养补充性组合物,组成简单明确,更有利于方便、准确地复配,也更有利于便利地添加或制备各种食品,尤其是饮料类的食品;
2)本发明第一和第二发明的组合物中β-葡聚糖与牛磺酸在限定用量的配合下,分别能够获得降血脂或降血糖协同增效作用,并且该组合即使在二者用量较低的情况下也能实现对血脂或血糖水平的调节和改善,对于二者在可食用组合物中的应用提供了更大的便利性;
3)本发明第一和第二发明的组合物的β-葡聚糖与牛磺酸用量均在安全用量范围内,因此可以长期使用,同时适用于各种不特定的人群;
4)本发明第一和第二发明的组合物,还具有辅助抗疲劳以及提高免疫力等功效。
附图说明
图1:本发明第一发明中油红O染色观察组合物配比对细胞脂质沉积的影响
具体实施方式
以下,针对本发明的内容进行详细说明。以下所记载的技术特征的说明基于本发明的代表性的实施方案、具体例子而进行,但本发明不限定于这些实施方案、具体例子。
需要说明的是:
本说明书中,使用“数值A~数值B”表示的数值范围是指包含端点数值A、B的范围。
本说明书中,使用“以上”或“以下”表示的数值范围是指包含本数的数值范围。
本说明书中,使用“可以”表示的含义包括了进行某种处理以及不进行某种处理两方面的含义。
本说明书中,使用“任选”或“任选的”表示某些物质、组分、执行步骤、施加条件等因素使用或者不使用。
本说明书中,所使用的“室温”表示“20℃”的室内环境温度。
本说明书中,所使用的单位名称均为国际标准单位名称,并且如果没有特别声明,所使用的“%”均表示重量或质量百分含量。
本说明书中,使用“基本上”表示与理论模型或理论数据的标准偏差在5%、优选为3%、更优选为1%范围以内。
本说明书中,所提及的“一些具体/优选的实施方案”、“另一些具体/优选的实施方案”、“实施方案”等是指所描述的与该实施方案有关的特定要素(例如,特征、结构、性质和/或特性)包括在此处所述的至少一种实施方案中,并且可存在于其它实施方案中或者可不存在于其它实施方案中。另外,应理解,所述要素可以任何合适的方式组合在各种实施方案中。
本发明包括第一发明以及第二发明,其中,第一发明中提供了一种具有降血脂效果的营养补充性组合物,第二发明中提供了一种具有降血糖效果的营养补充性组合物。
[第一发明]
第一发明中,首要的提出了在营养性补充组合物中通过添加特定质量比例的β-葡聚糖与牛磺酸,通过二者的协同效应,能够起到降血脂的保健性效果,具体如下。
<第一发明第一方面>
第一发明的第一方面中,提供了一种包括i)一种或多种的来源的β-葡聚糖和ii)牛磺酸的营养补充性组合物,并且所述组合物任选地包括其它营养性成分。该组合物表现出了具有明显的协同增效作用,以能够显著控制和改善血脂,同时也具有辅助抗疲劳等提高免疫力的功效。
第一发明的技术方案主要是基于如下的见解而得到:
本发明首先从(细胞)生物学角度验证了β-葡聚糖以及牛磺酸的安全用量范围,并且在该范围内,分别研究了二者各自的、以及在不同用量配合的情况下的生物学表现,因此,意外的发现了在特定含量的配合下,β-葡聚糖以及牛磺酸在改善血脂方面能够产生明显的协同增效作用。
(β-葡聚糖)
Beta-葡聚糖(简称β-葡聚糖),属于纤维类多糖(复合糖),结构上,它们大部分是以β-1,3键结合的一种聚合物,并且可来源于多种微生物、动物或植物。
本发明中对于β-葡聚糖的具体来源没有特别限制,可以适用于本发明的β-葡聚糖的来源包括酵母、燕麦、大麦、真菌(菇类)以及藻类等中的一种或它们的混合物。可以进一步具体列举的例如燕麦β-葡聚糖、海带β-葡聚糖、热凝胶β-葡聚糖、金藻昆布β-葡聚糖、香菇β-葡聚糖、地衣β-葡聚糖、平菇β-葡聚糖、酵母多糖、黑木耳β-葡聚糖、大麦多糖。优选地,可以使用水溶性的β-葡聚糖。
在本发明一些优选的实施方案中,对于β-葡聚糖,可以使用来自于酵母、燕麦、大麦来源的β-葡聚糖中的一种或它们的混合物,更优选地,选自酵母β-葡聚糖和/或燕麦β-葡聚糖。
在本发明中一些具体的实施方案中,对于β-葡聚糖可以使用含有该成分的植物、真菌等原料以赋予最终组合物中的一定含量的β-葡聚糖,另外优选的,也可以直接使用从这些原料中提取的具有较高纯度的β-葡聚糖有效成分。
进一步,对于使用提取的β-葡聚糖的使用方式,没有特别限制,可以直接使用这样的β-葡聚糖形成混合物,也可以先将β-葡聚糖制备为溶液或乳液的方式使用。
(牛磺酸)
牛磺酸(Taurine,又称β-氨基乙磺酸)广泛分布于哺乳动物组织细胞内,可由甲硫氨酸和半胱氨酸合成,其为一种含硫的非蛋白氨基酸,在体内以游离状态存在,结构简单且不参与体内蛋白的生物合成。动物实验和临床实验表明牛磺酸可显著改善肥胖,降低血清甘油三酯水平,减少肝脏脂肪蓄积以及抗疲劳等功效,因此,常常作为营养补充成分而使用。
牛磺酸的相对密度与水基本相同,化学性质稳定,溶于水,不溶于乙醇、乙醚等有机溶剂。其分子量较小,无抗原性,各种途径给药均易吸收。
另外,动物体内的牛磺酸含量远高于植物,海生动物含量最高。含量最丰富的是海鱼、贝类、如鱼类的青花鱼、墨鱼、章鱼、虾、贝类的海蛎、海螺等。由于牛磺酸易溶于水,所以鱼贝类煮的汤中含量丰富。
本发明中对于牛磺酸的来源没有特别限制,可以来源于以上提到的一种或多种,也可以使用高纯度的人工合成的牛磺酸原料等。另外,对于牛磺酸的使用形式,在一些具体的实施方案中,可以以高纯度牛磺酸提取物、合成牛磺酸商品,在另外一些具体的实施方案中,也可以使用按照牛磺酸含量计量的含有牛磺酸的动植物原料或它们的加工物。
进一步,对于使用提取的牛磺酸或人工合成的牛磺酸的使用方式,没有特别限制,可以将牛磺酸制备为溶液使用。
(协同增效)
如前所述,尽管现有技术中,对于β-葡聚糖和牛磺酸的研究有初步的结论似乎有些显示了二者均可能存在一定的改善血脂的功效,但:
一方面,例如燕麦β-葡聚糖治疗大鼠高脂血症的报道中对于β-葡聚糖与改善血脂的效果提出了一定的挑战。另外,关于牛磺酸降低细胞脂质的有效浓度报道不一。因此,这些现有的工作仍然需要进一步深入的研究;
另一方面,大多数现有的技术方案均是多种营养性或功能性组分的组合使用,至于具体哪些组分或哪些组分的是否存在协同效应,仍然没有给出明确的分析或研究。
此外,现有技术中对于葡聚糖和牛磺酸二者是否存在或者可能形成协同增效的血脂改善能力并无研究和报告。
本发明中,认为以特定含量将β-葡聚糖与牛磺酸组合使用,能够意外的发现对于血脂控制具有协同增效的现象。此外,也发现,该协同效应也赋予了在使用相对低计量的β-葡聚糖和牛磺酸时也可以获得改善血脂的效果。
此外,在本发明的一些具体的实施方案中,β-葡聚糖与牛磺酸的用量比在0.05:1以上,优选为0.8:1以上,更优选为1:1以上,可以具体列举的为(0.06、0.08、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.85、0.9或0.95):1以上。如果β-葡聚糖的比例过低,则存在β-葡聚糖在低的绝对用量的情况下,存在两种组分的协同效果不佳的担忧。另外,对于该比例的上限,可以在5:1以下,优选为4.5:1以下,更优选在4:1以下,可以列举的包括(4.8、4.6、4.2、3.8、3.6、3.4、3.2、3.0、2.8、2.6、2.4、2.2、2.0、1.8或1.6):1以下。β-葡聚糖的比例过高,也存在两种组分的协同效果不佳的担忧。
本发明进一步发现,在保证细胞活性的前提下,单独使用β-葡聚糖或者单独使用牛磺酸对于调控血脂的效果而言并不能说是明显的,有时甚至是相反的。通过上述含量的匹配,则可以在即使较低含量的β-葡聚糖或较低含量的牛磺酸的配合下也能表现出协同控制血糖的效果。
另外,对于组合物中β-葡聚糖与牛磺酸的绝对含量(尤其是上限绝对含量),本发明没有特别的限制,一方面与食品安全规定有关,另一方面也与不同产品的形态和使用方式相关。可以列举的是,在一些具体的实施方案中,本发明提供的营养补充性组合物中,以组合物的总质量计,从保证协同效果以及用量安全性的角度考虑,所述β-葡聚糖的含量为0.003质量%以上,所述牛磺酸的含量为0.01质量%以上。在一些实施方案中,β-葡聚糖的含量可以为0.01~0.5质量%(例如0.015、0.02、0.04、0.06、0.08、0.2、0.3、0.4、质量%等);在一些实施方案中,牛磺酸的含量0.01~1质量%(例如0.015、0.02、0.03、0.04、0.06、0.08、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.4、0.6质量%等)。
(组合物)
本发明的营养补充性组合物至少包括了上文所描述的β-葡聚糖和牛磺酸。
对于组合物的形成方式,没有特别的限定,可以由上文所述的包含这些成分的动植物原料混合而成(植物、真菌、海生动物等物质混合而成),也可以是将高纯度的两种提取物进行混合。
此外,对于本发明的组合物中还可以使用的其他组分,没有特别限定,在不损害本发明效果的前提下,可以使用本领域常用的其他的营养成分。这些营养成分包括可蛋白质、维生素、单糖或其他的多糖、或植物提取物等中的一种或多种。
本发明的营养补充性组合物可以为液态方式存在,也可以为半固态或固态方式而存在。
进一步,本发明的上述组合物通过实验验证,可显著减轻OA诱导的HepG2肝细胞中甘油三酯的蓄积,表明组合物能够改善OA诱导的脂质沉积现象,因此可以具有较为明显的改善血脂的功效,同时也具有控制血糖、提高人体免疫力的效用,因此,可以作为一种营养补充性保健品或营养补充性保健添加物而被使用。
<第一发明第二方面>
本发明的第二方面中,提供了一种营养补充性保健食品,尤其是适合于高血脂患者的降血脂保健食品。其经由根据上述第一发明第一方面所描述的功能性组合物而加工得到。
对于本发明的食品,没有特别限制,通常可以为面食、饮料、可冲调食品、烘焙糕点、酱料或营养补充性食品以及宠物食品等。
对于面食,可以包括作为主食的面粉类原料加工或制作的主食、杂粮类主食等,具体的例如馒头类、饼类、面条类、馅类主食等。
对于烘焙糕点,可以为主要基于奶油、鸡蛋和发酵粉类的烘焙蛋糕或饼干等。
对于饮料,没有特别限制,可以为水果类饮品、蔬菜类饮品、奶茶类饮品、茶类饮品、牛奶、酸奶、维生素类功能性饮料等。对于水果或蔬菜类饮品,除了可以包括本发明的两种功能性组分以外,还可以包括水果或蔬菜的汁液、或它们的固体成分等。对于维生素饮料,除了可以包括本发明的两种功能性组分以外,还主要的包含功能性的各种维生素以及其他功能性成分,具体可以例如包括白砂糖、甜蜜素、安赛蜜、山梨酸钾、赖氨酸、肌醇、左旋肉碱、维生素pp、维生素A、维生素D、维生素E、维生素K、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、生物素、叶酸、烟酸、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒等。在本发明一些优选的实施方案中,提供了一种具有保健功效,尤其是具有降血酯功效的饮料,该饮料包括本发明所限定的β-葡聚糖、牛磺酸、维生素,以及任选的包括植物提取物。
对于可冲调食品,典型的可以为可冲调的奶粉制品,例如成人奶粉、中老年份奶粉等。
对于宠物食品,典型的可以为猫用营养粉、猫宠物零食等。
另外,对于营养补充性食品,没有特别限制,可以作为营养补充剂或替代餐而使用,这样的食品中,除了包括本发明的两种功能性组分以外还可以包括如下组分中的一种或多种:蛋白质、脂肪、必要的碳水化合物、膳食纤维、补充元素、维生素、植物或膳食成分等。
其中,所述蛋白质选自乳清蛋白粉、大豆分离蛋白、全脂奶粉、全蛋粉、乳铁蛋白、牛初乳、氨基酸、蛋白肽中的至少一种;并且,所述氨基酸选自L-赖氨酸-L-谷氨酸、L一谷氨酸、L一精氨酸、L-色氨酸、L一谷氨酰胺、牛磺酸、L一缬氨酸、L-异亮氨酸、L一亮氨酸中的至少一种;所述蛋白肽选自大豆低聚肽、小麦蛋白肽、蚕蛹蛋白肽、海洋鱼低聚肽粉、可乐肽、氨基肽、卵白蛋白肽中的一种或多种。
所述脂肪可以包括饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、OPO结构脂、DHA、EPA、ARA、磷脂中的至少一种,更具体地说所述脂肪包括红花籽油、核桃油,花生油,大豆油,阿甘油、橄榄油、茶油、美藤果油、橄榄油、椰子油、紫苏油、深海鱼油、可可油、棕榈油、牛油、奶油、猪油、中链甘油三酯、卵磷脂。
所述碳水化合物包括淀粉或改性淀粉。所述膳食纤维包含菊粉、魔芋粉、低聚半乳糖、低聚果糖、低聚异麦芽糖、大豆多糖、环糊精、抗性糊精、大豆纤维中的一种或多种。
所述补充元素选自柠有机酸类的金属离子盐,例如檬酸钙、L-乳酸钙、磷酸氢钙、葡萄糖酸钾、柠檬酸钠、葡萄糖酸亚铁、碘化钾、葡萄糖酸锌、亚硒酸钠、葡萄糖酸铜、硫酸铬、葡萄糖酸锰和葡萄糖酸镁中的一种或多种。
所述维生素选自维生素A、β-胡萝卜素、维生素D3、维生素E、维生素K1、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、泛酸、叶酸、烟酸、胆碱、肌醇、生物素中的一种或多种。
所述植物或膳食成分包括谷类、豆类、薯类、蔬菜类、菌藻类、坚果种子类、鱼虾类、禽畜肉类、水果类中的一种或多种。
[第二发明]
本发明的第二发明中,首要的提出了在营养性补充组合物中通过添加特定质量比例的β-葡聚糖与牛磺酸,通过二者的协同效应,能够起到控制血糖水平的保健性效果,具体如下。
<第二发明第一方面>
第二发明的第一方面中,提供了一种包括a)一种或多种的来源的β-葡聚糖和b)一种或多种的来源的牛磺酸以及任选地包括其他营养性成分的营养补充性组合物.该组合物表现出了具有明显的协同增效作用,以能够显著控制和降低人体血糖含量,同时也具有辅助抗疲劳等提高免疫力的功效。
第二发明的技术方案主要是基于如下的见解而得到:
本发明首先从(细胞)生物学角度验证了β-葡聚糖以及牛磺酸的安全用量范围,并且在该范围内,分别研究了二者各自的、以及在不同用量配合的情况下的生物学表现,因此,意外的发现了在特定含量的配合下,β-葡聚糖以及牛磺酸在降低人体血糖方面能够产生明显的协同增效作用。
进一步,本发明的β-葡聚糖和牛磺酸的来源以及营养性补充组合物的组成可以与第一发明相同。
(协同增效)
尽管现有技术中,对于β-葡聚糖和牛磺酸的研究有初步的结论显示了二者均可能存在一定的调控血糖的功效,但如前所述,一方面,对于二者是否存在或者可能形成协同增效的血糖调控能力并无研究和报告,另一方面,目前大部分现有方案在验证牛磺酸或者β-葡聚糖的功效时,其可验证的初步效果基本上基于高纯度物质的一定计量,而这样的计量用量在营养补充性组合物,例如各种食品中几乎是难以达到的。因此,本发明所提出的β-葡聚糖和牛磺酸在特定用量比例下的协同作用为二者在营养补充性组合物中使用提供了新的应用思路。
本发明中,认为以特定含量将β-葡聚糖与牛磺酸组合使用,在安全用量的范围内,意外的发现对于血糖控制具有协同增效的现象。此外,也发现,该协同效应也赋予了在使用相对低计量的β-葡聚糖/牛磺酸时也可以获得改善血糖的效果,这对于营养补充性组合物中使用提供了改进的适应性。
具体而言,在本发明的一些具体的实施方案中,β-葡聚糖与牛磺酸的用量比(质量比)在10:1以下,并且在此比例范围时能够显示出二者的协同作用。
在一些优选的实施方案中,β-葡聚糖与牛磺酸的用量比(质量比)在0.01~10:1。优选为0.1~10:1,更优选为0.6~6:1,进一步优选为0.8~5:1,并且,可以列举的比例为(0.03、0.06、0.15、0.20、0.30、0.40、0.50、0.70、0.80、0.90、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9或9.5):1。如果β-葡聚糖的比例过低,则存在β-葡聚糖在低的绝对用量的情况下,存在两种组分的协同效果不佳的担忧。
此外,另外,对于组合物中β-葡聚糖与牛磺酸的绝对用量(尤其是最高用量),本发明没有特别的限制,一方面与食品安全规定有关,另一方面也与不同产品的形态和使用方式相关。
在一些具体的实施方案中,本发明提供的营养补充性组合物中,以组合物的总质量计,从保证协同效果以及用量安全性的角度考虑,所述β-葡聚糖的含量为0.003质量%以上,所述牛磺酸的含量为0.01质量%以上。在一些实施方案中,β-葡聚糖的含量可以为0.01~0.5质量%(例如0.015、0.02、0.04、0.06、0.08、0.2、0.3、0.4质量%等);在一些实施方案中,牛磺酸的含量0.01~1质量%(例如0.015、0.02、0.03、0.04、0.06、0.08、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.4、0.6质量%等)。
本发明进一步发现,在保证细胞活性的前提下,单独使用β-葡聚糖或者单独使用牛磺酸对于调控血糖的效果而言并不能说是明显的,有时甚至是相反的。通过上述含量的匹配,则可以在即使较低含量的β-葡聚糖或较低含量的牛磺酸的配合下也能表现出协同控制血糖的效果。
<第二发明第二方面>
本发明的第二方面中,提供了一种营养补充性保健食品,尤其是适合于高血糖患者的降血糖保健食品。其经由根据上述第二发明第一方面所描述的功能性组合物而加工得到。对于保健食品的种类和组成物种类可以与第一发明的第二方面描述内容相同。
尤其地,本方面中,提供了一种具有保健功效,尤其是具有降血糖功效的饮料,该饮料包括第二发明中所限定的β-葡聚糖、牛磺酸、维生素,以及任选的包括植物提取物。
实施例
以下,将通过具体的实施例对本发明进行进一步具体说明。除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规的试剂、方法和设备。
<原料>
在以下实施例部分中,除非另有说明,否则所使用的原料如下。
酵母β葡聚糖:上海统园食品技术有限公司,货号HH1006
牛磺酸:上海麦克林生化科技有限公司,货号107-35-7
在以下部分中,除非另有说明,否则在提及营养组合物中的成分的质量份和比率时,该质量份指的是作为活性成分的酵母β葡聚糖、牛磺酸的质量份,该比率指的是作为活性成分的酵母β葡聚糖、牛磺酸的质量比。
通过将酵母β葡聚糖、牛磺酸原料按照以下表1中所示的浓度制备各个实验例。
表1:
实验类型 | 实验例编号 |
血脂控制 | 实验例a1~实验例a13 |
血糖控制 | 实验例b1~实验例b13 |
<细胞实验实施例>
1.材料与方法
1.1.实验试剂与耗材
表2-1:
1.2.实验设备
实验主要仪器设备参见下表。
表2-2:
编号 | 仪器名称 | 公司 |
1 | 二氧化碳培养箱 | 美国Thermo公司 |
2 | 生物安全柜 | 美国Thermo公司 |
3 | 酶标仪 | 美国Dynatech公司 |
4 | 手掌式离心机 | 海门其林贝尔仪器公司 |
5 | 台式高速冷冻离心机 | 德国Beckman公司 |
6 | 倒置显微镜 | 日本OLMPUS公司 |
7 | 磁力搅拌器 | 杭州仪表有限公司 |
8 | 漩涡混合器 | 海门其林贝尔仪器公司 |
9 | 恒温水浴槽 | 上海森信实验仪器公司 |
10 | 实时荧光定量PCR | 美国Bio-Rad公司 |
1.3.实验方法
1.3.1细胞培养
HepG2细胞置于含有10%FBS的DMEM完全培养基中,37℃,5%CO2饱和湿度细胞培养箱中培养,隔天换液。对数生长期汇合度大于80%可以传代,PBS清洗2次,0.25%胰蛋白酶消化细胞10~15min,至细胞脱离瓶壁,转移至离心管中,无菌针头吹至单细胞,以1∶3的比例传代培养。取对数生长期细胞进行试验。
1.3.2细胞活力检测
制备HepG2肝细胞单细胞悬液,将约1×104个细胞接种于96孔板中,培养至细胞约占孔80%,进行药物干预。经药物干预24h后,.使用移液器向板的每个孔中加入10μL CCK8溶液。置于37℃恒温培养箱中孵育4h后,使用酶标仪测量450nm处的吸光度。
1.3.3甘油三酯含量测定
药物提前干预细胞2h,随后加入0.5mM油酸(Oleic acid,OA)处理16h,干预完成后吸弃培养液,PBS溶液清洗细胞2次,并吸弃PBS,加入甘油三酯裂解液破碎细胞,室温静置10min,裂解液分为两部分,一部分转移至离心管中,70℃加热10min,2000r/min离心5min,收集上清液使用TG试剂盒(北京普利莱组织甘油三酯测定试剂盒)测定TG含量;另一部分裂解液12000r/min离心15min,收集上清液测定蛋白含量(碧云天BCA测定试剂盒),用蛋白浓度矫正TG含量。
1.3.4长链脂肪酸酯的制备和细胞葡萄糖消耗量检测
将油酸或棕榈酸溶于20mL的无水乙醇中,待脂肪酸完全溶解于无水乙醇后加入用1.6mol/L的氢氧化钠皂化,皂化后的半凝固溶液在通风橱中干燥48h,获得沉淀,待沉淀被完全干燥后,置于80C水浴锅中加热至完全溶解,待溶液温度降低至50℃左右加入等体积20%(w/v)BSA进行共轭溶解,置于50℃磁力搅拌器中磁力搅拌4h,使得脂肪酸与BSA完全结合,形成脂肪酸-BSA(配制浓度为:3mmol/L),使用0.22μm滤膜将脂肪酸酯进行过滤除菌备用。
药物提前干预细胞2h,随后加入0.2mM棕榈酸酯(Palmitate,PA)处理24h,吸取培养液上清,通过测定培养液上清葡萄糖含量(北京普利莱葡萄糖消耗测定试剂盒)反应葡萄糖消耗情况,根据试剂盒说明书进行测定,通过葡萄糖消耗量反馈细胞胰岛素抵抗程度,葡萄糖消耗越低表明胰岛素抵抗程度加重,葡萄糖消耗量越高表明胰岛素抵抗程度减弱。
1.3.5实时定量荧光PCR(Real-time PCR)
(1)药物干预完成后吸除细胞培养基上清后可直接在培养皿中立即使用(南京诺唯赞RNA提取试剂盒)Buffer RL进行消化、裂解。
(2)将裂解后样本转移至FastPure gDNA-Filter ColumnsⅢ(FastPure gDNA-Filter ColumnsⅢ已放入收集管)中,12,000rpm(13,400×g)离心30sec。弃掉FastPuregDNA-Filter ColumnsⅢ,收集滤液。
(3)向滤液中加入0.5倍滤液体积的无水乙醇(对于肝组织样本,加入1倍滤液体积的50%乙醇),充分混匀。加入乙醇后,溶液出现浑浊或絮状沉淀,属正常现象,震荡混匀后可直接进行下一步操作。
(4)将步骤3混合液全部转移至FastPure RNA ColumnsⅢ(FastPure RNA ColumnsⅢ已放入收集管)中,12,000rpm(13,400×g)离心30sec,弃滤液。
(5)向FastPure RNA ColumnsⅢ中加入700μl Buffer RW1,12,000rpm(13,400×g)离心30sec,弃滤液。
(6)向FastPure RNA ColumnsⅢ中加入700μl Buffer RW2(已加入无水乙醇),12,000rpm(13,400×g)离心30sec,弃滤液。
(7)向FastPure RNA ColumnsⅢ中加入500μl Buffer RW2(已加入无水乙醇),12,000rpm(13,400×g)离心2min,小心将吸附柱从收集管中取出,避免接触滤液,导致污染。
(8)若吸附柱有液体残留或接触到滤液,弃滤液,将FastPure RNA ColumnsⅢ放回收集管中,12,000rpm(13,400×g)空离1min,防止乙醇的污染。
(9)小心将吸附柱转移至新的RNase-free Collection Tubes 1.5ml离心管中,向吸附柱中央悬空滴加50-200μl的RNase-free ddH2O,室温静置1min,12,000rpm(13,400×g)离心1min,洗脱RNA。
(10)超微量分光光度计定量RNA浓度,使用cDNA逆转录试剂盒逆转录RNA样本。
(11)引物序列的设计及合成:相关引物序列如表所示(表2-3):
表2-3:
(12)在0.2mL荧光定量PCR八联管中加入反应物,以cDNA为模板,使用荧光定量PCR扩增仪对目的基因进行扩增,并进行荧光定量PCR测定,下表2-4给出了R eal-time PCR体系的具体情况):
表2-4:
反应液 | 体积(μL) |
SYBR GREEN | 10 |
Primer up | 0.5 |
Primer down | 0.5 |
ddH<sub>2</sub>O | 7 |
cDNA | 2 |
(13)将混合后的反应物进行振荡混匀,离心后将八联管置入qRT-PCR反应仪中。设置PCR反应程序:预变性:94℃,30min;变性:94℃,10s,60℃,10s,72℃,30s,40个循环;延伸:72℃,5min,4℃保存。设置PCR仪热盖温度为105℃。
(14)根据通过2–ΔΔCT法计算Srebp1c、GLUT4、PPAR-α目的基因的表达变化。
1.4细胞实验分组
具体实验分组和剂量见下表2-5。
表2-5a:细胞实验剂量(血脂控制)
表2-5b:细胞实验剂量(血糖控制)
1.5统计分析
所有实验独立重复三次,采用SPSS 22.0统计软件对实验数据进行统计学分析,实验结果通过方差齐性检验,使用单因素方差分析各组间的统计学差异,用均数±标准差(x±SD)表示。P>0.05表示无统计学意义,P<0.05为差异有统计学意义。
2.实验结果
2.1各样品对HepG2细胞安全剂量的筛选
其中表2-6显示了酵母β葡聚糖对HepG2细胞活力的影响,表2-7显示了牛磺酸对HepG2细胞活力的影响。
表2-6:
注:**表示与对照组比,P<0.01;***表示与对照组比,P<0.001;
表2-7:
注:*表示与对照组比,P<0.05;***表示与对照组比,P<0.001;
CCK-8细胞增殖检测试剂盒是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速灵敏度试剂盒。在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan),其颜色的深浅与存活细胞数目的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,可以间接反映活细胞的数量,检测的OD值越高,表明活细胞数目越多,OD值越低,表明存活细胞数越少。
2.2各样品对HepG2细胞甘油三酯蓄积的影响
为了衡量混合营养或单独营养处理对OA诱导的HepG2细胞甘油三酯蓄积的影响,我们评估了细胞甘油三酯的含量,以估计改善血脂的效果。下表显示了包含酵母β葡聚糖、牛磺酸的不同营养组合物样品对甘油三酯蓄积的影响。
表2-8:
注:*与空白对照组比较p<0.05,***与空白对照组比较p<0.001;∧与阳性对照组比较p<0.05,∧∧与阳性对照组比较p<0.01;∧∧∧与阳性对照组比较p<0.001
甘油三酯由甘油与脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,组织和细胞中的甘油三酯积聚增加与肥胖和脂肪肝密切相关,通过甘油三酯检测试剂盒能精确测量组织细胞中的甘油三酯含量,其检测用蛋白进行矫正,其测定值越高,表明甘油三酯水平越高,其测定值越低,表明甘油三酯含量越低。
样品处理结果显示,与模型对照组相比,酵母β葡聚糖和牛磺酸单独使用时,在保证细胞活性的情况下,没有表现出减轻OA诱导的HepG2细胞甘油三酯蓄积的效果或者这样的效果有限。但是当二者复配使用时,尤其是将酵母β葡聚糖:牛磺酸的计量比控制在0.05~5:1以下时,能够获得明显的减轻OA诱导的HepG2细胞甘油三酯蓄积的效果,有助于改善血脂。
具体而言,以实验例a3、实验例a6和实验例a9相比较而说明,相对于阳性对照组而言,细胞实验实验例a3、a6分别使得OA诱导的HepG2细胞甘油三酯蓄积量减少了0.06和0.082,而细胞实验实验例a9使得甘油三酯蓄积量减少了0.155,其大于前两者之和(0.06+0.082=0.142),表明两种组分之间存在协同效应,能够协同地减少甘油三酯蓄积,辅助降血脂。
2.3油红O染色观察组合物配比对细胞脂质沉积的影响
附图1显示了油红O染色结果。油红染液能够与脂类物质结合,细胞内脂滴被油红O染色时显示为橘黄至红色,通过其脂滴的多少和大小来判断细胞内脂质的含量。
2.4酵母β葡聚糖和牛磺酸组合物配比对OA诱导的脂代谢基因的变化
下表显示了包含酵母β葡聚糖、牛磺酸的不同营养组合物样品荧光定量PCR结果:
表2-9:
注:*与空白对照组比较P<0.05,**与空白对照组比较P<0.01,#与阳性对照组比较P<0.05,##与阳性对照组比较P<0.01,###与阳性对照组比较P<0.001。
Srebp1c基因:膳食脂肪酸摄入过多或摄入不平衡,可导致血浆中饱和脂肪酸升高,会激活肝脏的SREBP-1c,促进甘油三酯和脂肪酸合成基因的表达,从而导致肝脏甘油三酯合成增加,流出减少,使肝细胞脂肪贮积增多。因此,Srebp1c的表达越高,表明细胞能够促使细胞甘油三酯积聚的能力越强。
样品处理结果显示,与空白对照组相比,酵母β葡聚糖、牛磺酸组合可显著降低Srebp1c的表达,说明组合物促进脂肪分解的能力强,均有助于改善血脂。
上述实验显示了本发明中第一发明的有益效果:本发明提供了特定混合配里昂酵母β葡聚糖、牛磺酸组合物,其在降血脂,尤其是在改善OA诱导的HepG2细胞甘油三酯蓄积方面带来影响,为未来营养补充性食品的开发提供了新思路。酵母β葡聚糖、牛磺酸在机体改善血脂方面的前景广阔。研究表明,在体外模型中,使用酵母β葡聚糖、牛磺酸的组合处理的HepG2细胞,脂肪沉积得到了明显的改善,组分之间具有较好的协同效应。
2.5各样品对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响
为了衡量混合营养或单独营养处理对PA诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗的影响,我们评估了细胞葡萄糖消耗的比例,以估计改善血糖的效果。下表2-10显示了包含酵母β葡聚糖、牛磺酸的不同营养组合物样品对胰岛素抵抗的影响。
表2-10:
注:*与空白对照组比较p<0.05,***与空白对照组比较p<0.001;∧与阳性对照组比较p<0.05,∧∧与阳性对照组比较p<0.01;∧∧∧与阳性对照组比较p<0.001
胰岛素抵抗会导致细胞消耗葡萄糖的速率下降,通过检测细胞葡萄糖的消耗量反应细胞胰岛素抵抗的程度,葡萄糖消耗量低则细胞胰岛素抵抗程度高,葡萄糖消耗高则其胰岛素抵抗程度低。
样品处理结果显示,与模型对照组相比,酵母β葡聚糖和牛磺酸单独使用时,在保证细胞活性的情况下,没有表现出减轻PA诱导的胰岛素抵抗的效果或者这样的效果有限。但是当二者复配使用时,根据上述数据,可以认为尤其是当酵母β葡聚糖:牛磺酸的计量比控制在0.6~10:1时,都能够获得明显的减轻PA诱导的胰岛素抵抗的效果。
具体而言,以实验例b2、实验例b5和实验例b8相比较而说明,相对于细胞实验对照组而言,细胞实验实验例b2、b5分别使得PA诱导胞内葡萄糖消耗比例增加了-0.004和0.016,而细胞实验实验例b8使得胞内葡萄糖耗比例增加了0.044,其大于前两者之和(-0.004+0.016=0.012),表明两种组分之间存在协同效应,能够协同地增加葡萄糖耗比例,辅助降血糖。同时,也惊讶的发现,上述数据也显示了较低剂量的酵母β葡聚糖搭配较低剂量的牛磺酸就也可以起到很好的改善胰岛素抵抗、辅助降血糖的效果。
2.6各样品对PA诱导的葡萄糖代谢基因的变化
以下表2-11显示了包含酵母β葡聚糖、牛磺酸的不同营养组合物样品对PA诱导的葡萄糖代谢基因定量结果。
表2-11:
注:#与阳性对照组比较P<0.05,##与阳性对照组比较P<0.01,###与阳性对照组比较P<0.001。
GLUT4基因主要调控葡萄糖转运,在正常情况下,GLUT4从细胞内储存囊泡转位到细胞膜上,发挥转运葡萄糖的作用,增加葡萄糖的摄取,在胰岛素抵抗模型中,GLUT4基因表达显著下降,而GLUT的表达增加表明细胞葡萄糖速率增加,加速葡萄糖的消耗,反应胰岛素抵抗程度低。
样品处理结果显示,与模型对照组相比植物甾醇中高剂量、酵母β葡聚糖高剂量可显著增加GLUT4基因的表达,加速葡萄糖的消耗,反应胰岛素抵抗程度低,这说明有助于改善血糖。
以上数据显示了本发明中第二发明的有益效果:本发明提供了特定混合配量的酵母β葡聚糖、牛磺酸组合物,对降血糖,尤其是对改善PA诱导的胰岛素抵抗方面带来影响,为未来营养补充性食品的开发提供了新思路。酵母β葡聚糖、牛磺酸在机体改善血糖方面的前景广阔。
研究表明,在体外模型中,使用酵母β葡聚糖、牛磺酸的组合处理的HepG2细胞,胰岛素抵抗得到了明显的改善,组分之间具有较好的协同效应。
进一步,以上也研究显示,在酵母β葡聚糖:牛磺酸的计量比控制在0.6~5:1,优选1~4:1为时能够同时起到协同降血脂和协同降血压的效果。
<a.血脂控制应用例>
以下应用例中的“份”均为重量份数,成分的%含量均为重量%含量。
另外,在以下各应用例中,除非另有说明,否则所使用的以下原料来源如下。
生牛乳:黑龙江飞鹤乳业有限公司
全脂乳粉:黑龙江飞鹤乳业有限公司
酵母β葡聚糖:上海统园食品技术有限公司,HH1006
牛磺酸:湖北潜江制药股份有限公司
复配维生素:帝斯曼维生素(上海)有限公司
复配矿物质:帝斯曼维生素(上海)有限公司
固体玉米糖浆:保龄宝生物股份有限公司
乳糖:美国Hilmar
脱脂乳粉:爱尔兰Kerry
低聚异麦芽糖:保龄宝生物股份有限公司
单双甘油脂肪酸酯:丹尼斯克(中国)有限公司
应用例a1
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳粉,适用于中老年食用,每1000份调制乳粉由如下重量份的组分制得:
本发明的奶粉所用的原料有:全脂乳粉436份、牛磺酸粉1.05份(每份中牛磺酸95%)、酵母β葡聚糖0.05份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、脱脂乳粉250份、乳糖90.9份、固体玉米糖浆179份、低聚异麦芽糖40份、复配维生素2份、复配矿物质1份;将上述原料混合均匀后,经巴氏杀菌、均质、蒸发浓缩和喷雾干燥成粉状半成品,将混合均匀后的奶粉充氮包装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.005%,牛磺酸0.1%。比例为0.05:1。
应用例a2
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳,每1000份调制乳由如下重量份的组分制得:
本发明的调制乳,生牛乳990.26份、酵母β葡聚糖0.31份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、牛磺酸粉0.63份(每份中牛磺酸95%)、低聚果糖8.3份、单双甘油脂肪酸酯0.5份;将上述原料混合、均质、UHT杀菌、均质,无菌灌装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.03%,牛磺酸0.06%。比例为0.5:1。
应用例a3
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳,每1000份调制乳由如下重量份的组分制得:
本发明的调制乳,生牛乳983份、酵母β葡聚糖0.61份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、牛磺酸粉0.32份(每份中牛磺酸95%)、低聚果糖15.57份、单双甘油脂肪酸酯0.5份;将上述原料混合、均质、UHT杀菌、均质,无菌灌装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.06%,牛磺酸0.03%。比例为2:1。
应用例a4
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳粉,适用于中老年食用,每1000份调制乳粉由如下重量份的组分制得:
本发明的奶粉所用的原料有:全脂乳粉436份、牛磺酸粉0.16份(每份中牛磺酸95%)、酵母β葡聚糖0.61份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、脱脂乳粉250份、乳糖91.23份、固体玉米糖浆179份、低聚异麦芽糖40份、复配维生素2份、复配矿物质1份;将上述原料混合均匀后,经巴氏杀菌、均质、蒸发浓缩和喷雾干燥成粉状半成品,将混合均匀后的奶粉充氮包装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.06%,牛磺酸0.015%。比例为4:1。
应用例a5
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳粉,适用于中老年食用,每1000份调制乳粉由如下重量份的组分制得:
本发明的奶粉所用的原料有:生牛乳以干基计(12.2%)73.2份,全脂乳粉500份,乳糖94.76份,脱盐乳清粉208份,低聚异麦芽糖80份、核桃油40份、复配维生素2份、复配矿物质1份、酵母β葡聚糖0.51份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、牛磺酸粉0.53份(每份中牛磺酸95%),将上述原料混合均匀后,经巴氏杀菌、均质、蒸发浓缩和喷雾干燥成粉状半成品,将混合均匀后的奶粉充氮包装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.05%,牛磺酸0.05%。比例为1:1。
<b.血糖控制应用例>
以下应用例中的“份”均为重量份数,成分的%含量均为重量%含量。
另外,在以下各应用例中,除非另有说明,否则所使用的以下原料来源如下。
生牛乳:黑龙江飞鹤乳业有限公司
全脂乳粉:黑龙江飞鹤乳业有限公司
酵母β葡聚糖:上海统园食品技术有限公司,HH1006
牛磺酸:湖北潜江制药股份有限公司
复配维生素:帝斯曼维生素(上海)有限公司
复配矿物质:帝斯曼维生素(上海)有限公司
固体玉米糖浆:保龄宝生物股份有限公司
乳糖:美国Hilmar
脱脂乳粉:爱尔兰Kerry
低聚异麦芽糖:保龄宝生物股份有限公司
单双甘油脂肪酸酯:丹尼斯克(中国)有限公司
应用例b1
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳粉,适用于中老年食用,每1000份调制乳粉由如下重量份的组分制得:
本发明的奶粉所用的原料有:全脂乳粉336份、牛磺酸粉1.05份(每份中牛磺酸95%)、酵母β葡聚糖0.05份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、脱脂乳粉350份、乳糖90.9份、固体玉米糖浆179份、低聚异麦芽糖40份、复配维生素2份、复配矿物质1份;将上述原料混合均匀后,经巴氏杀菌、均质、蒸发浓缩和喷雾干燥成粉状半成品,将混合均匀后的奶粉充氮包装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.005%,牛磺酸0.1%。比例为0.05:1。
应用例b2
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳,每1000份调制乳由如下重量份的组分制得:
本发明的调制乳,生牛乳990.26份、酵母β葡聚糖0.31份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、牛磺酸粉0.63份(每份中牛磺酸95%)、低聚果糖8.3份、单双甘油脂肪酸酯0.5份;将上述原料混合、均质、UHT杀菌、均质,无菌灌装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.03%,牛磺酸0.06%。比例为0.5:1。
应用例b3
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳,每1000份调制乳由如下重量份的组分制得:
本发明的调制乳,生牛乳983份、酵母β葡聚糖0.61份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、牛磺酸粉0.32份(每份中牛磺酸95%)、低聚果糖15.57份、单双甘油脂肪酸酯0.5份;将上述原料混合、均质、UHT杀菌、均质,无菌灌装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.06%,牛磺酸0.03%。比例为2:1。
应用例b4
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳粉,适用于中老年食用,每1000份调制乳粉由如下重量份的组分制得:
本发明的奶粉所用的原料有:全脂乳粉336份、牛磺酸粉0.16份(每份中牛磺酸95%)、酵母β葡聚糖0.61份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、脱脂乳粉350份、乳糖91.23份、固体玉米糖浆179份、低聚异麦芽糖40份、复配维生素2份、复配矿物质1份;将上述原料混合均匀后,经巴氏杀菌、均质、蒸发浓缩和喷雾干燥成粉状半成品,将混合均匀后的奶粉充氮包装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.06%,牛磺酸0.015%。比例为4:1。
应用例b5
含有酵母β葡聚糖和牛磺酸的调制乳粉,适用于中老年食用,每1000份调制乳粉由如下重量份的组分制得:
本发明的奶粉所用的原料有:生牛乳以干基计(12.2%)73.2份,全脂乳粉500份,乳糖94.76份,脱盐乳清粉208份,低聚异麦芽糖80份、核桃油40份、复配维生素2份、复配矿物质1份、酵母β葡聚糖0.51份(每份中酵母β葡聚糖98.0%)、牛磺酸粉0.53份(每份中牛磺酸95%),将上述原料混合均匀后,经巴氏杀菌、均质、蒸发浓缩和喷雾干燥成粉状半成品,将混合均匀后的奶粉充氮包装即得终产品。产品中酵母β葡聚糖含量0.05%,牛磺酸0.05%。比例为1:1。
产业上的可利用性
本发明所提供的营养补充性组合物可以在工业上制备,并适用于改善血脂或改善血糖。
Claims (10)
1.一种营养补充性组合物,其特征在于,所述组合物包括:
i)一种或多种的来源的β-葡聚糖;
ii)牛磺酸,
其中,所述组合物中,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为0.05~5:1,并且所述组合物任选地包括其它营养性成分。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为0.8~4:1。
3.一种营养补充性组合物,其特征在于,所述组合物包括:
a)一种或多种的来源的β-葡聚糖;
b)牛磺酸;
其中,所述组合物中,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为10:1以下,并且所述组合物任选地包括其它营养性成分。
4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于,所述β-葡聚糖与牛磺酸的用量比为0.6:1以上。
5.根据权利要求1~4任一项所述的组合物,其特征在于,所述β-葡聚糖选自来源于植物或者真菌的β-葡聚糖中的一种或多种,优选的,所述β-葡聚糖包括酵母β-葡聚糖;所述牛磺酸选自来源于动植物的提取物或者人工合成牛磺酸中一种或多种;所述β-葡聚糖的含量为0.003质量%以上;所述牛磺酸的含量为0.01质量%以上。
6.根据权利要求1~5任一项所述的组合物,其特征在于,所述其他营养成分包括蛋白质、维生素、单糖或多糖、或植物提取物等中的一种或多种。
7.根据权利要求1~6任一项所述的组合物,其特征在于,所述组合物为液体、半固体或固体。
8.一种降血脂组合物,其特征在于,所述组合物包括根据权利要求1,2,5~7任一项所述的组合物。
9.一种降血糖组合物,其特征在于,所述组合物包括根据权利要求3~7任一项所述的组合物。
10.一种食品,其特征在于,所述食品经由根据权利要求1~9任一项所述的组合物而得到,优选地,所述食品包括面食、饮料、可冲调食品、烘焙糕点、酱料或营养补充性食品或宠物食品;优选地,所述饮料包括水果或蔬菜类饮料、茶饮料、奶制品类饮料、维生素类功能性饮料、固体饮料。
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