CN114053331B - 一种口腔抑菌组合物、口腔抑菌液、应用及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及口腔抑菌技术领域，尤其涉及一种口腔抑菌组合物及其应用和该口腔抑菌组合物制成的口腔抑菌液及其制备方法。该口腔抑菌组合物包括以下重量份数的成分：连翘提取液0.05～0.3份，金银花提取液0.05～0.3份，甘草提取液0.05～0.3份，板蓝根提取液0.05～0.3份，西吡氯铵0.02～0.1份和葡萄糖酸氯己定0.02～0.1份。该口腔抑菌组合物具有快速且长效的抑菌作用，能够有效清新口气，并且对于口腔溃疡的溃疡面无刺激，还能够加速口腔溃疡愈合。用该口腔抑菌组合物可制成口腔喷雾等口腔抑菌产品。

Description

一种口腔抑菌组合物、口腔抑菌液、应用及制备方法
技术领域
本发明涉及口腔抑菌技术领域，尤其涉及一种口腔抑菌组合物及其应用和该口腔抑菌组合物制成的口腔抑菌液及其制备方法。
背景技术
口腔作为呼吸道及胃肠道的起点，是机体内环境与外环境直接联系的门户，外环境生态系统中许多细菌可通过呼吸、进食等各种日常生命活动不断进入口腔，并在温暖湿润的口腔中繁殖。链球菌、葡萄球菌和乳酸杆菌等会引发各种口腔疾病，如龋齿、口臭、牙龈炎等。由于口腔内缝隙多且细小，日常刷牙难以对致病菌进行彻底清理，故龋齿和牙龈炎还会进一步加重口臭。另一方面，随着现代人生活节奏加快、工作压力增大，不健康的作息(如熬夜)以及饮食习惯(如不定时进餐，喜食麻、辣、烫等重口味食物)会导致身体内分泌异常，进而引起口腔内酸碱平衡度失调、口腔溃疡，以及牙龈肿痛、出血、萎缩等口腔问题，同样可导致口臭。
由于口臭严重干扰着人们社交和心理健康，所以口臭者多采用含片、袋泡茶、口香糖等进行遮蔽，但是这些方法耗时费力，且仅能短暂起效，并不能从根本上解决口臭问题。含有抗生素成分的口腔喷雾可杀灭或抑制口腔内细菌，但大多具有一定的刺激性，当口腔内有溃疡时，会造成使用者明显刺痛，并且长期使用含抗生素成分的口腔喷雾还可能使口腔内菌群失调，并诱导口腔细菌产生耐药性。
发明内容
针对目前的口腔喷雾具有一定刺激性、可引起口腔内菌群失调并使细菌产生耐药性的问题，本发明提供一种口腔抑菌组合物、口腔抑菌液、应用及制备方法。
为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下技术方案：
一方面，本发明实施例提供一种口腔抑菌组合物，包括以下重量份数的成分：连翘提取液0.05～0.3份，金银花提取液0.05～0.3份，甘草提取液0.05～0.3份，板蓝根提取液0.05～0.3份，西吡氯铵0.02～0.1份和葡萄糖酸氯己定0.02～0.1份。
在该口腔抑菌组合物中，西吡氯铵通过降低表面张力而抑制和杀灭细菌，对多种口腔致病菌和非致病菌有抑制和杀灭作用，并能减少或抑制牙菌斑的形成，具有保持口腔清洁、清除口腔异味的作用。葡萄糖酸氯己定能够吸附于细菌胞浆膜的渗透屏障，使细胞内容物漏出而发挥抗菌作用，抗菌谱广，杀菌作用强。
连翘果实含连翘酚、甾醇化合物、三萜皂甙及黄酮醇甙类、马苔树脂醇甙等成分，果皮含齐墩果酸、香豆精等成分，其提取液对口腔常见的致病菌具有一定的抑制作用，并可抑制流感病毒；金银花含有木犀草素、肌醇、皂甙、绿原酸和异绿原酸等成分，其提取液对多种口腔致病菌以及病毒均有一定的抑制和杀灭作用。
甘草含有三萜皂苷和黄酮类化合物等活性成分，其提取液具有抗炎、抗菌、抗病毒、镇咳、抗溃疡、祛痰、抗氧化、抗癌、免疫调节等多种药理活性，能够抑制人类免疫缺陷病毒(HIV-1)、传染性非典型肺炎病毒(SARS)、呼吸系统病毒、水泡性口膜炎病毒等多种病毒的增殖。
板蓝根含有吲哚类化合物、喹唑类生物碱、芥子苷类化合物、含硫类化合物、有机酸类等成分，其提取液具有清热解毒、凉血利咽的作用，可抑制多种口腔常见致病菌，并对甲型流感病毒、乙型脑炎病毒、腮腺炎病毒、流感病毒的增殖有抑制作用。
本发明通过以上成分复配，所得口腔抑菌组合物具有快速且长效的抑菌作用，能够有效清新口气。并且，本发明经过研究发现，将连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液合用，能够使该组合物不仅对于口腔溃疡的溃疡面无刺激，还具有加速口腔溃疡愈合的作用。
优选地，所述口腔抑菌组合物包括以下重量份数的成分：连翘提取液0.1～0.2份，金银花提取液0.1～0.2份，甘草提取液0.1～0.2份，板蓝根提取液0.1～0.2份，西吡氯铵0.08～0.1份和葡萄糖酸氯己定0.06～0.08份。
优选地，所述口腔抑菌组合物包括以下重量份数的成分：连翘提取液0.1份，金银花提取液0.1份，甘草提取液0.1份，板蓝根提取液0.1份，西吡氯铵0.08份和葡萄糖酸氯己定0.06份。以上成分采用该配比时具有更持久的抑菌作用，且能更有效地加速口腔溃疡愈合。
可选地，所述甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于所述生甘草质量5～7倍的水煎煮1～1.5h，降温至40～50℃后，加入相当于所述生甘草质量0.5～1.5％的纤维素酶在40～50℃酶解2～3h，然后升温至90～95℃保持5～10min灭酶，过滤，得酶解液和滤渣；向所述滤渣中加入相当于所述滤渣质量5～7倍的水，在20～30kHz的频率下超声提取20～30min，过滤，得超声提取液；将所述酶解液和所述超声提取液合并后，浓缩至1.2～1.3g/ml，得所述甘草提取液。
可选地，所述板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，加入相当于所述板蓝根质量6～8倍的10～20％v/v乙醇水溶液，在功率为750～950W、温度为30～40℃条件下微波萃取10～15min，过滤，得滤渣和微波提取液；将所述滤渣用15～25％v/v乙醇水溶液回流提取2～3次，每次20～30min，合并回流提取液；将所述微波提取液和所述回流提取液合并，浓缩至1.2～1.3g/ml，得所述板蓝根提取液。
用上述制备方法制得的甘草提取液和板蓝根提取液均能够使该口腔抑菌组合物具有更好的长效抑菌效果，并且能更显著地加速口腔溃疡愈合。
可选地，所述连翘提取液的制备方法为：以15～25％v/v乙醇水溶液在25～35℃对连翘进行超声提取，先在25～35kHz的频率下提取20～30min，再在50～70kHz的频率下提取15～25min；提取完成后过滤，将所得滤液浓缩至1.2～1.3g/ml，得所述连翘提取液；其中，所述15～25％v/v乙醇水溶液的质量为所述连翘质量的5～8倍。
可选地，所述金银花提取液的制备方法为：以45～65％v/v乙醇水溶液在45～60℃对金银花进行超声提取，先在20～35kHz的频率下超声提取20～30min，再在55～70kHz的频率下超声提取15～20min；提取完成后过滤，将所得滤液浓缩至1.2～1.3g/ml，得所述金银花提取液；其中，所述45～65％v/v乙醇水溶液的质量为所述金银花质量的7～10倍。
用上述制备方法获得的连翘提取液和金银花提取液均能够进一步提高该口腔抑菌组合物的抑菌效果，并延长抑菌时间，且能够降低该组合物对黏膜以及溃疡面的刺激性。
第二方面，本发明实施例还提供了上述口腔抑菌组合物在制备口腔抑菌产品中的应用。
上述口腔抑菌组合物对于口腔常见致病菌具有快速而长效的抑菌效果，对皮肤和口腔黏膜温和、安全，并且对于口腔溃疡等口腔问题具有显著的改善作用，可用于制备口腔抑菌产品。
第三方面，本发明实施例还提供了一种口腔抑菌液，包括上述口腔抑菌组合物。该口腔抑菌液可作为漱口水用于含漱，也可灌装于喷雾装置中作为口腔喷雾剂，使用简单，并且携带方便。
所述口腔抑菌液包括以下重量份数的成分：
所述保湿剂为甘油；
所述矫味剂选自木糖醇、三氯蔗糖中的至少一种，其中木糖醇是一种天然、健康的甜味剂，在增加该口腔抑菌液甜味的同时，还能够带来一定的清凉感，并有助于增强牙齿的清洁度，减少牙斑菌的附着；
所述抗氧剂为柠檬酸钠。
以上优选的原料均为口腔用产品的常用组分，安全性高，对口腔黏膜无刺激，在上述用量范围内使用不会引起口腔不适。
第四方面，本发明还提供上述口腔抑菌液的制备方法，包括以下步骤：
向所述水中加入所述保湿剂、矫味剂、西吡氯铵、葡萄糖酸氯己定和抗氧剂，搅拌至溶解；
加入所述连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液，搅拌分散均匀；
加入预混均匀的所述乙醇、聚山梨醇酯-80和香精，混合均匀，得所述口腔抑菌液。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。
以下实施例中所采用的实验方法如无特殊说明，均为本领域的常规方法。
以下实施例中所使用的连翘、金银花、生甘草和板蓝根均符合《中国药典》(2015年版)一部正文各药材项下的有关规定。
以下实施例中所采用的原料、试剂等，如无特殊说明，均从商业途径获得。
实施例1～9
本发明口腔抑菌组合物的制备：各实施例中包括以下如表1所示的重量份数配比的成分：
表1实施例1～9口腔抑菌组合物
实施例1中，连翘提取液的制备方法为：以20％v/v乙醇水溶液在30℃超声提取：先在30kHz提取25min，再在60kHz的频率下提取20min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；其中，20％v/v乙醇水溶液的质量为连翘质量的6倍；
金银花提取液的制备方法为以55％v/v乙醇水溶液在50℃超声提取：先在30kHz超声提取25min，再在60kHz的频率下超声提取18min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；其中，55％v/v乙醇水溶液的质量为金银花质量的8倍；
甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于其质量6倍的水煎煮1.2h，降温至45℃后，加入相当于该生甘草质量1.0％的纤维素酶在45℃酶解2.5h，然后升温至93℃保持8min灭酶，过滤，得酶解液和滤渣；向该滤渣中加入相当于其质量6倍的水，在25kHz的频率下超声提取25min，过滤，得超声提取液；将酶解液和超声提取液合并后，在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，加入相当于其质量7倍的15％v/v乙醇水溶液，在功率为850W、温度为35℃条件下微波萃取12min，过滤，得滤渣和微波提取液；将滤渣用20％v/v乙醇水溶液回流提取2次，每次25min，合并回流提取液；将微波提取液和回流提取液合并，在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得。
实施例2中，连翘提取液的制备方法为以15％v/v乙醇水溶液在25℃超声提取：先在25kHz提取30min，再在50kHz的频率下提取25min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.2g/ml，即得；其中，15％v/v乙醇水溶液的质量为连翘质量的5倍；
金银花提取液的制备方法为以45％v/v乙醇水溶液在45℃超声提取：先在20kHz超声提取30min，再在55kHz的频率下超声提取20min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.2g/ml，即得；其中，45％v/v乙醇水溶液的质量为金银花质量的7倍；
甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于其质量5倍的水煎煮1h，降温至50℃后，加入相当于该生甘草质量0.5％的纤维素酶在50℃酶解2h，然后升温至95℃保持5min灭酶，过滤，得酶解液和滤渣；向该滤渣中加入相当于其质量5倍的水，在20kHz的频率下超声提取30min，过滤，得超声提取液；将酶解液和超声提取液合并后，在50℃减压浓缩至1.2g/ml，即得；
板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，加入相当于其质量6倍的20％v/v乙醇水溶液，在功率为750W、温度为40℃条件下微波萃取10min，过滤，得滤渣和微波提取液；将滤渣用15％v/v乙醇水溶液回流提取3次，每次30min，合并回流提取液；将微波提取液和回流提取液合并，在50℃减压浓缩至1.2g/ml，即得。
实施例3中，连翘提取液的制备方法为以25％v/v乙醇水溶液在35℃超声提取：先在35kHz提取20min，再在70kHz的频率下提取15min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.3g/ml，即得；其中，25％v/v乙醇水溶液的质量为连翘质量的8倍；
金银花提取液的制备方法为以65％v/v乙醇水溶液在60℃超声提取：先在35kHz超声提取20min，再在70kHz的频率下超声提取15min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；其中，65％v/v乙醇水溶液的质量为金银花质量的10倍；
甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于其质量7倍的水煎煮1.5h，降温至40℃后，加入相当于该生甘草质量1.5％的纤维素酶在40℃酶解3h，然后升温至90℃保持10min灭酶，过滤，得酶解液和滤渣；向该滤渣中加入相当于其质量7倍的水，在30kHz的频率下超声提取20min，过滤，得超声提取液；将酶解液和超声提取液合并后，在50℃减压浓缩至1.3g/ml，即得；
板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，加入相当于其质量8倍的10％v/v乙醇水溶液，在功率为950W、温度为30℃条件下微波萃取15min，过滤，得滤渣和微波提取液；将滤渣用25％v/v乙醇水溶液回流提取2次，每次20min，合并回流提取液；将微波提取液和回流提取液合并，在50℃减压浓缩至1.3g/ml，即得。
实施例4～9中，连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
实施例10～18
本发明提供了口腔抑菌液及其制备方法：各实施例中包括以下如表2所示的重量份数配比的成分：
表2实施例10～18口腔抑菌液
其中连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
该口腔抑菌液的制备方法为：
向水中加入甘油、木糖醇、三氯蔗糖、葡萄糖酸氯己定和柠檬酸钠，搅拌至溶解；
加入连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液，搅拌分散均匀；
加入预混均匀的乙醇、聚山梨醇酯-80和香精，混合均匀，即得口腔抑菌液。
对比例1
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，用相当于其质量6倍的水煎煮提取2次，每次30min；过滤，合并滤液，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
连翘提取液、金银花提取液和板蓝根提取液制备方法同实施例1。
对比例2
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，用相当于其质量6倍的水溶液超声提取45min，超声频率为25Hz；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
连翘提取液、金银花提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
对比例3
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，用相当于其质量7倍的20％v/v乙醇水溶液加热回流提取2次，每次25min；过滤，合并滤液，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
连翘提取液、金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1。
对比例4
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，用相当于其质量7倍的15％v/v乙醇水溶液在功率为850W、温度为35℃条件下微波萃取12min，过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
连翘提取液、金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1。
对比例5
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中连翘提取液的制备方法为：将连翘用6倍的20％v/v乙醇水溶液加热回流提取2次，每次30min；过滤，合并滤液，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
对比例6
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中连翘提取液的制备方法为：将连翘用6倍的20％v/v乙醇水溶液超声提取45min，超声频率为45Hz；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
对比例7
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中金银花提取液的制备方法为：将金银花用8倍的55％v/v乙醇水溶液加热回流提取2次，每次30min；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
连翘提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
对比例8
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，其成分同实施例1。
其中金银花提取液的制备方法为：将金银花用8倍的55％v/v乙醇水溶液超声提取45min，超声频率为45Hz；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
连翘提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1。
对比例9
本对比例提供一种口腔抑菌组合物，包括以下重量份数配比的成分：
西吡氯铵0.08份和葡萄糖酸氯己定0.06份。
对比例10
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中连翘提取液、金银花提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1，甘草提取液的制备方法同对比例1。
对比例11
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中连翘提取液、金银花提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1，甘草提取液的制备方法同对比例2。
对比例12
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中连翘提取液、金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1，板蓝根提取液的制备方法同对比例3。
对比例13
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中金银花提取液、柑橘提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1，板蓝根提取液的制备方法同对比例4。
对比例14
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1，连翘提取液的制备方法同对比例5。
对比例15
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1，连翘提取液的制备方法同对比例6。
对比例16
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中连翘提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1，金银花提取液的制备方法同对比例7。
对比例17
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比和制备方法同实施例10，其中连翘提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的制备方法同实施例1，金银花提取液的制备方法同对比例8。
对比例18
本对比例提供一种口腔抑菌液及其制备方法，该口腔抑菌液的成分配比以实施例10为基础，去掉连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液，其余成分不变，制备方法同实施例10。
试验例1
本试验例对上述实施例1～9和对比例1～9制备所得口腔抑菌组合物进行了抑菌效果考察。
下述实验中所采用的营养琼脂培养基的成分配比为：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL；
沙氏培养基的成分为：蛋白胨10g、琼脂20g、葡萄糖40g，蒸馏水1L。
试验菌株：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌(ATCC10231)。
1、实验方法
将试验菌第5代的营养琼脂培养基斜面培养物(24h)用5mL 0.03mol/L磷酸盐缓冲液(以下简称PBS)洗下菌苔，用上述PBS稀释，制成浓度为5×104cfu/ml的菌悬液。
以实施例1～9和对比例1～9制备所得口腔抑菌组合物样品作为被试样液，取被试样液(5mL)和对照样液(与被试样液成分相同，但不含连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液、板蓝根提取液、西吡氯铵和葡萄糖氯己定，且经灭菌处理)各4管。
分别在每个被试样液和对照样液内滴加100μL上述菌悬液，均匀混合，开始计时，作用2min、5min、10min、20min、1h、2h，用无菌镊分别将混合后的样液(0.5mL)投入含5mLPBS的试管内，充分混匀，分别吸取0.5ml，置于两个平皿，用凉至40～50℃的营养琼脂培养基(细菌)或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15mL作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平板，35℃±2℃培养48h(细菌)或72h(酵母菌)，作活菌菌落计数。
试验重复3次，按下式计算抑菌率：
X＝(A-B)/A×100％；
式中：X为抑菌率，A为对照样液平均菌落数；B为被试样液平均菌落数。
2、实验结果
记录各口腔抑菌组合物在不同作用时间下的抑菌率平均值，结果见表3～5。
表3对金黄色葡萄球菌的抑菌数据
表4对大肠杆菌的抑菌数据
表5对白色念珠菌的抑菌数据
由表3～表5试验结果可见，本发明实施例1～9所得口腔抑菌组合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率在5min～2h时均＞99.9％，优于各对比例对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率。实施例1～5所得口腔抑菌组合物对白色念珠菌的抑菌率在5min～2h时均＞99.9％，优于各对比例所得的口腔抑菌组合物对白色念珠菌的抑菌率。
试验例2
本试验例考察了上述实施例10～18制备所得口腔抑菌液的急性眼刺激性。
1、实验方法
采用眼部健康的新西兰家兔27只，雌性，体重2.0～2.5kg，以普通级家兔维持饲料喂养，温度20～26℃，相对湿度40％～70％。
根据《消毒技术规范》(2002年版)2.3.4.3对实施例10～18制备所得口腔抑菌液分别进行急性眼刺激试验(各样品以3只家兔进行试验)：实验前约24h对家兔两眼进行检查，所选动物均为无眼刺激症状、角膜缺陷及结膜损伤。试验时吸取待测口腔抑菌液0.1ml，滴入家兔一侧眼结膜囊内。另一侧眼以生理盐水作为正常对照。滴受试物后，将眼被动闭合4s，30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后分别计算每只动物在1h、24h、48h、72h对眼睛的刺激强度，并根据表6进行急性眼刺激反应评分。结果见表7(表中数值为各样品对应的3只家兔的平均评分)。
表6急性刺激反应评分标准
表7实施例10～18所得口腔抑菌液的试验结果
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由表7结果可见，实施例10～18所得口腔抑菌液对白兔眼刺激强度均为无刺激性。
试验例3
本试验例对上述实施例10～14和对比例10～18制备所得口腔抑菌液进行了其对加速口腔溃疡愈合的效果。
1、实验动物
SPF级Wistar大鼠，雌雄各半，体重200g±20g。
2、试验方法
将大鼠随机分为实施例10～14组、对比例10～18组、空白对照组，每组10只。将各组大鼠用乙醚麻醉，仰卧固定，用浸透900g/L苯酚溶液、直径约6mm的棉球在大鼠一侧颊黏膜上灼烧60s，可见颊黏膜上出现直径约5mm左右的白色损害；次日可见大鼠口唇边潮湿，流口水，颊黏膜处红肿，表示造模成功。记录各组大鼠在给药前的溃疡面直径。
将实施例10～14以及对比例10～18组的口腔抑菌液分别浓缩至各自原体积的50％，每天分别对实施例10～14组、对比例10～18组大鼠在溃疡处喷4次，相邻两次之间间隔2h。空白对照组不给药。每次给药后禁食禁水30min，连续给药6d。给药期间内，每天最后一次给药后记录口腔溃疡愈合的总只数，在最后一次给药后12h时记录各组大鼠溃疡面直径，结果如表8所示。
表8各组口腔抑菌液对加速口腔溃疡愈合的试验结果
注：a与空白对照组相比P＜0.05；b与实施例10组相比，P＜0.05
由表8的结果可见，与空白对照组以及不使用连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液的对比例18相比，本发明实施例10～14提供的口腔抑菌液能够显著加速口腔溃疡的愈合，并且与采用其他方式进行连翘、金银花、甘草和板蓝根提取的对比例10～17相比，本发明实施例10～14提供的口腔抑菌液能够更有效地促进使溃疡面直径缩小。
由试验例1、2和3的结果可见，本发明实施例提供的口腔抑菌组合物具有优异的抑菌效果，且对黏膜无刺激。并且，以该口腔抑菌组合物制成的口腔抑菌液能够有效促进口腔溃疡的愈合。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种口腔抑菌组合物，其特征在于，由以下重量份数的成分组成：连翘提取液0.05~0.3份，金银花提取液0.05~0.3份，甘草提取液0.05~0.3份，板蓝根提取液0.05~0.3份，西吡氯铵0.02~0.1份和葡萄糖酸氯己定0.02~0.1份；
所述甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于所述生甘草质量5~7倍的水煎煮1~1.5h，降温至40~50℃后，加入相当于所述生甘草质量0.5~1.5%的纤维素酶在40~50℃酶解2~3h，然后升温至90~95℃保持5~10min灭酶，过滤，得酶解液和滤渣；向所述滤渣中加入相当于所述滤渣质量5~7倍的水，在20~30kHz的频率下超声提取20~30min，过滤，得超声提取液；将所述酶解液和所述超声提取液合并后，浓缩至1.2~1.3g/ml，得所述甘草提取液；
所述板蓝根提取液的制备方法为：将板蓝根破碎，加入相当于所述板蓝根质量6~8倍的10~20%v/v乙醇水溶液，在功率为750~950W、温度为30~40℃条件下微波萃取10~15min，过滤，得滤渣和微波提取液；将所述滤渣用15~25%v/v乙醇水溶液回流提取2~3次，每次20~30min，合并回流提取液；将所述微波提取液和所述回流提取液合并，浓缩至1.2~1.3g/ml，得所述板蓝根提取液；
所述连翘提取液的制备方法为：以15~25%v/v乙醇水溶液在25~35℃对连翘进行超声提取，先在25~35kHz的频率下提取20~30min，再在50~70kHz的频率下提取15~25min；提取完成后过滤，将所得滤液浓缩至1.2~1.3g/ml，得所述连翘提取液；其中，所述15~25%v/v乙醇水溶液的质量为所述连翘质量的5~8倍；
所述金银花提取液的制备方法为：以45~65%v/v乙醇水溶液在45~60℃对金银花进行超声提取，先在20~35kHz的频率下超声提取20~30min，再在55~70kHz的频率下超声提取15~20min；提取完成后过滤，将所得滤液浓缩至1.2~1.3g/ml，得所述金银花提取液；其中，所述45~65%v/v乙醇水溶液的质量为所述金银花质量的7~10倍。
2.根据权利要求1所述的口腔抑菌组合物，其特征在于，由以下重量份数的成分组成：连翘提取液0.1~0.2份，金银花提取液0.1~0.2份，甘草提取液0.1~0.2份，板蓝根提取液0.1~0.2份，西吡氯铵0.08~0.1份和葡萄糖酸氯己定0.06~0.08份。
3.根据权利要求2所述的口腔抑菌组合物，其特征在于，由以下重量份数的成分组成：连翘提取液0.1份，金银花提取液0.1份，甘草提取液0.1份，板蓝根提取液0.1份，西吡氯铵0.08份和葡萄糖酸氯己定0.06份。
4.权利要求1~3任一项所述口腔抑菌组合物在制备口腔抑菌产品中的应用。
5.一种口腔抑菌液，其特征在于，包括权利要求1所述的口腔抑菌组合物。
6.根据权利要求5所述的口腔抑菌液，其特征在于，包括以下重量份数的成分：
水75~85份；
保湿剂3~6份；
矫味剂0.05~3.5份；
抗氧剂0.01~0.1份；
乙醇0.1~8份；
聚山梨醇酯-802~8份；
香精0.5~1.2份；
连翘提取液0.05~0.3份；
金银花提取液0.05~0.3份；
甘草提取液0.05~0.3份；
板蓝根提取液0.05~0.3份；
西吡氯铵0.02~0.1份；
葡萄糖氯己定0.02~0.1份。
7.根据权利要求6所述的口腔抑菌液，其特征在于，所述保湿剂为甘油；和/或
所述矫味剂选自木糖醇、三氯蔗糖中的至少一种；和/或
所述抗氧剂为柠檬酸钠。
8.权利要求6或7所述的口腔抑菌液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
向所述水中加入所述保湿剂、矫味剂、西吡氯铵、葡萄糖酸氯己定和抗氧剂，搅拌至溶解；
加入所述连翘提取液、金银花提取液、甘草提取液和板蓝根提取液，搅拌分散均匀；
加入预混均匀的所述乙醇、聚山梨醇酯-80和香精，混合均匀，得所述口腔抑菌液。
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