CN114052116B - 一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114052116B
CN114052116B CN202210051444.2A CN202210051444A CN114052116B CN 114052116 B CN114052116 B CN 114052116B CN 202210051444 A CN202210051444 A CN 202210051444A CN 114052116 B CN114052116 B CN 114052116B
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
parts
probiotic
composite
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210051444.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114052116A (zh
Inventor
王诚
常莹
战余铭
董桂红
王化东
何荣彦
李燕
赵福平
王玲
巩倩
邢烛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Jianyuan Biological Technology Co ltd
Original Assignee
Shandong Jianyuan Biological Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Jianyuan Biological Technology Co ltd filed Critical Shandong Jianyuan Biological Technology Co ltd
Priority to CN202210051444.2A priority Critical patent/CN114052116B/zh
Publication of CN114052116A publication Critical patent/CN114052116A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114052116B publication Critical patent/CN114052116B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/169Plantarum

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用,属于生物医药技术领域。所述益生菌植物提取物复合生物制剂由以下重量份的原料组成:复合益生菌粉1‑3份、紫花苜蓿提取物8‑12份、淫羊藿提取物6‑8份。本发明将复合益生菌粉与紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物复配使用,能同时发挥益生菌和植物提取物的双重作用,达到1+1>2的效果。其中,复合益生菌粉由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母复配而成,三种菌株之间有协同增效的作用,能提高NK细胞活性;紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物与复合益生菌粉复配,不仅可以为益生菌提供营养,还可以作为免疫刺激的辅助因子发挥作用,从而显著提高了动物的机体免疫能力。

Description

一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用。
背景技术
益生菌(Probiotics)是一种有取代或平衡生态系统中一种或多种菌系作用的微生物添加物,即通过补充动物消化道内的有益微生物,改善消化道菌群平衡而对动物产生有益作用,迅速提高机体的抗病能力、代谢能力和对饲料的消化吸收能力,达到防治疾病和促进生长的双重作用。
近年来,益生菌的生产和使用量飞速增长,益生菌的使用可减少抗生素的用量,有利于生态平衡。但是,单一的外源性益生菌进入肠道后,复活后往往因为缺乏增殖所需要的营养物质而不能快速的定殖,很快被排出体外,而无法发挥其维持肠道微生态平衡的作用。
植物提取物是指采用适当的溶剂和方法,从植物(植物全部或者某一部分)为原料提取或加工而成的物质。将植物提取物和益生菌组合使用是当前研究的热点,在动物生产中应用效果良好。但是,益生菌和植物提取物的功能复杂多样,不同益生菌、不同植物提取物的免疫激活和调节机制不同。若植物提取物和益生菌组合恰当,其以促进外源性益生菌在动物肠道中定殖和生长,并选择性刺激肠道内源有益菌群的增殖,改善动物肠道微生态群系平衡,提高动物机体的免疫力;但若植物提取物和益生菌组合不当,其不但起不到协同增效的作用,反而有可能还会降低各自的作用。因此,开发高效配伍的益生菌-植物提取物生物制剂仍是当前的技术难点所在。
发明内容
针对上述现有技术,本发明的目的是提供一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用。本发明的益生菌植物提取物复合生物制剂能够提高动物的脏器指数、淋巴细胞增殖能力,从而显著提高动物机体的免疫力。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
本发明的第一方面,提供一种益生菌植物提取物复合生物制剂,由以下重量份的原料组成:
复合益生菌粉1-3份、紫花苜蓿提取物8-12份、淫羊藿提取物6-8份;
所述复合益生菌粉由植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和产朊假丝酵母(Candida utilis)配制而成;所述复合益生菌粉中的活菌数为1×108cfu/g-8×108cfu/g;
所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备而成:
将紫苜蓿(Medicago sativa L.)全草干燥,粉碎,向粉碎后的紫苜蓿中加入8-10重量倍的乙醇溶液进行回流提取,提取时间2-3h,提取液回收乙醇后加入氧化铝吸附杂质,过滤,收集滤液,滤液喷雾干燥,即制备得到紫苜蓿提取物;
所述淫羊藿提取物由如下方法制备而成:
将淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)粉碎,采用超临界CO2进行萃取,萃取温度为35-40℃,萃取压力25-28MPa、萃取时间2-3h,收集萃取液;将萃取液冷冻干燥,即制备得到淫羊藿提取物。
进一步的,上述益生菌植物提取物复合生物制剂,由以下重量份的原料组成:
复合益生菌粉2份、紫花苜蓿提取物10份、淫羊藿提取物8份。
更优选的,所述复合益生菌粉由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母按重量比1:1:1配制而成;所述植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC),其中,植物乳杆菌的菌种编号为CICC 21809,枯草芽孢杆菌的菌种编号为CICC 10071,产朊假丝酵母的菌种编号为CICC 1314。
本发明的第二方面,提供上述益生菌植物提取物复合生物制剂的制备方法,包括以下步骤:
将复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物按重量份混合均匀,即得。
本发明的第三方面,提供上述益生菌植物提取物复合生物制剂在制备提高动物机体免疫力的产品中的应用。
上述应用中,所述产品的形式包括但不限于:液体制剂、固体制剂或微胶囊。
上述应用中,所述产品具体可以为饲料添加剂。所述的饲料添加剂通常是指添加于动物饲料中,在动物摄取该饲料的同时被摄取的组合物。但是,只要可被动物摄取,并不一定要添加于饲料中。
对于饲料添加剂的剂型,没有特别限制,例如可以根据与饲料混合的效果等进行适当的选择。
本发明的有益效果:
本发明将复合益生菌粉与紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物复配使用,能同时发挥益生菌和植物提取物的双重作用,达到1+1>2的效果。其中,复合益生菌粉由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母复配而成,三种菌株之间有协同增效的作用,能提高NK细胞活性,并能生成多种有机酸和酶类物质,抑制肠道内有害微生物的增殖,又可促进有益菌的增殖,形成一个良性循环;紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物与复合益生菌粉复配,不仅可以为益生菌提供营养,还可以作为免疫刺激的辅助因子发挥作用,从而显著提高了动物的机体免疫能力。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是例示性的,旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
如前所述,免疫力是指机体抵抗外来侵袭,维护体内环境稳定性的能力。免疫机制的异常成为引起各种疾病的原因。因此,开发能够提高机体免疫力的产品将具有十分重要的意义。
益生菌被广泛应用于提高免疫产品,然而其提高免疫力效果仍有待提高,究其原因是没有考虑菌种间的协同与抑制,菌种间的这种关系影响因素包括:菌种的类别、种别以及菌种的配比等。通过菌株复配的方式寻找在提高免疫力方面协同增效作用佳、生物学功能获得拓展的复合菌剂将有利于造福动物和人类健康。
基于此,本发明首先通过菌株复配的方式开发免疫效果协同增强的复合益生菌。植物乳杆菌是一种重要的肠道有益微生物,植物乳杆菌所起的免疫调节作用与其菌本身和代谢产物有关,甚至死的菌体也有免疫调节作用;其对革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌均有抑制作用,它通过与病原菌对限制性营养素的能力竞争,来抑制病原菌的生长,调节肠道微生态的组成,形成生物学屏障,并通过其代谢所产生的乳酸、细菌素等物质对其他细菌的作用,调整菌群之间的关系,维持和保证菌群最佳优势组合,通过拮抗致病菌的生长及其毒素的粘附,阻止其侵入和定植。枯草芽孢杆菌在动物肠道中复苏增殖后可发挥其益生特性,包括改善动物肠道菌群、增强机体免疫力以及提供多种动物所需的酶类等,可以弥补动物体内源酶的不足,促进动物的生长发育,具有显著的益生作用。产朊假丝酵母本身含有丰富的酶类,如单胃蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶及植酸酶等,这些酶类可以将淀粉、纤维素水解成小分子糖、氨基酸等易被消化和吸收的低分子物质;产朊假丝酵母的细胞壁富含甘露糖和β-葡聚糖等物质,这些物质具有免疫促进剂的功能,能够激发或增强机体免疫功能。
本发明意外的发现:将菌种编号为CICC 21809的植物乳杆菌、菌种编号为CICC10071的枯草芽孢杆菌和菌种编号为CICC 1314的产朊假丝酵母按一定比例进行复配形成复合益生菌粉,其能够提高NK细胞活性,进而显著提高机体免疫力。
天然植物提取物中含有多糖、皂苷、生物碱、精油和有机酸等多种免疫有效活性成分。植物提取物的免疫调节作用是多方面的,其不仅与各种免疫细胞有关,还与细胞因子的产生和活性密切相关。同时天然植物饲料添加剂对免疫系统的影响往往受机体因素及用药剂量的影响,呈双向调节作用,这是植物提取物免疫机理的复杂之处。
紫花苜蓿和淫羊藿所含成分复杂,有效成分和无效成分并存,因此,有效成分和有效部位的富集是制约药物开发的关键环节。本发明对从紫花苜蓿和淫羊藿中提取有效成分的工艺进行了优化,并制备得到了具有提高免疫活性的紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物。
将植物提取物和益生菌组合使用是当前研究的热点,在动物生产中应用效果良好。但是,益生菌和植物提取物的功能复杂多样,不同益生菌、不同植物提取物的免疫激活和调节机制不同。因此,开发高效配伍的益生菌-植物提取物生物制剂仍是当前的技术难点所在。
本发明在获得具有提高免疫能力的复合益生菌粉和紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物之后,尝试将其组合使用,考察复合之后对于动物机体免疫能力的影响。结果发现:紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物与复合益生菌粉复配,不仅可以为益生菌提供营养,还可以作为免疫刺激的辅助因子发挥作用,从而显著提高了动物的机体免疫能力。即:复合益生菌、紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物三者复配,在提高动物机体免疫力方面具有显著的协同增效作用,由此提出了本发明。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案,以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。
本发明实施例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料,均可通过商业渠道购买得到。其中:
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和产朊假丝酵母(Candida utilis)均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC),其中,植物乳杆菌的菌种编号为CICC 21809,枯草芽孢杆菌的菌种编号为CICC 10071,产朊假丝酵母的菌种编号为CICC 1314。
实施例1:复合益生菌粉的制备
以低聚木糖作为菌粉基质,将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和产朊假丝酵母(Candida utilis)按重量比1:1:1复配,再与菌粉基质混合均匀,制备得到复合益生菌粉。所制备的复合益生菌粉中的总活菌数≥5×108cfu/g。
实施例2:紫花苜蓿提取物的制备
将紫苜蓿(Medicago sativa L.)全草干燥,粉碎,向粉碎后的紫苜蓿中加入10重量倍的乙醇溶液(体积分数60%)进行回流提取,提取时间2h;提取液回收乙醇后加入氧化铝吸附杂质,过滤,收集滤液,滤液喷雾干燥,即制备得到紫花苜蓿提取物。
实施例3:淫羊藿提取物的制备
将淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)粉碎,采用超临界CO2进行萃取,萃取温度为37℃,萃取压力28MPa、萃取时间2.5h,收集萃取液;将萃取液冷冻干燥,即制备得到淫羊藿提取物。
实施例4:益生菌植物提取物复合生物制剂的制备
1、原料组成(按重量份计):
复合益生菌粉2份、紫花苜蓿提取物10份、淫羊藿提取物8份;
其中,复合益生菌粉由实施例1制备而成;紫花苜蓿提取物由实施例2制备而成;淫羊藿提取物由实施例3制备而成。
2、制备方法:
按组方量称取复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物,将其混合均匀,即得。
实施例5:益生菌植物提取物复合生物制剂的制备
1、原料组成(按重量份计):
复合益生菌粉1份、紫花苜蓿提取物12份、淫羊藿提取物6份;
其中,复合益生菌粉由实施例1制备而成;紫花苜蓿提取物由实施例2制备而成;淫羊藿提取物由实施例3制备而成。
2、制备方法:
按组方量称取复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物,将其混合均匀,即得。
实施例6:益生菌植物提取物复合生物制剂的制备
1、原料组成(按重量份计):
复合益生菌粉3份、紫花苜蓿提取物8份、淫羊藿提取物8份;
其中,复合益生菌粉由实施例1制备而成;紫花苜蓿提取物由实施例2制备而成;淫羊藿提取物由实施例3制备而成。
2、制备方法:
按组方量称取复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物,将其混合均匀,即得。
试验例1:复合益生菌对NK细胞活性的影响
1、试验方法:
参考“复合益生菌制剂对Balb/c小鼠非特异性免疫功能的影响”(食品与发酵科技,2017年1期)的方法考察本发明制备的复合益生菌粉对小鼠NK细胞活性的影响。具体方法如下:
SPF级雄性Balb/c小鼠(购自济南朋悦实验动物繁育有限公司),体重18~22 g,适应性喂养3 d 后,随机分成5组,每组10 只,分别为空白对照组、复合益生菌粉组、植物乳杆菌组、枯草芽孢杆菌组和产朊假丝酵母组;其中:
复合益生菌粉组灌胃实施例1制备的复合益生菌粉;
植物乳杆菌组灌胃菌种编号为CICC 21809的植物乳杆菌菌粉;
枯草芽孢杆菌组灌胃菌种编号为CICC 10071的枯草芽孢杆菌菌粉;
产朊假丝酵母组灌胃菌种编号为CICC 1314的产朊假丝酵母菌粉;
各组菌粉均是低聚木糖作为菌粉基质,活菌数均调整为5×108cfu/g;各组的给药量均为50mg/kg小鼠体质量,空白组给予相同量的蒸馏水;每天1次,连续灌胃30天。
处死小鼠,无菌取脾,置于无菌Hank′s液中,研磨,经200目筛网过滤,制成细胞悬液。8600r/min离心3s,弃上清后加入Hank′s液清洗并离心,上述过程重复3次。然后调整细胞悬液中的细胞浓度到2×107个/ml,作为效应细胞。选取传代24h生长良好的YAC-1细胞并调整其细胞浓度到4×105个/ml,作为靶细胞。于96孔板中加入细胞悬液:靶细胞和培养液中各100μL加入自然释放孔,其余各孔加靶细胞和效应细胞各100μL。上述各项均设三个平行孔,于37℃、5%CO2培养箱中培养4h,然后吸取100μL上清液置于新板中,同时加入100μL乳酸脱氢酶基质液,反应10min后,每孔加入30μL 1mol/L的盐酸溶液终止反应,在492nm处利用酶标仪读取OD值,并按以下公式计算NK细胞活性。
NK细胞活性(%)=[(OD反应孔-OD自然释放孔)/(OD最大释放孔-OD自然释放孔)] ×100
2、试验结果:
各组的NK细胞活性测定结果见表1。
表1:对小鼠NK细胞活性的影响
组别 NK细胞活性(%)
空白对照组 9.4±0.4
复合益生菌粉组 26.2±1.5
植物乳杆菌组 12.3±0.6
枯草芽孢杆菌组 15.8±0.8
产朊假丝酵母组 13.5±0.6
NK细胞可以非特异性的直接杀伤某些肿瘤细胞和病毒感染细胞,分泌IFN-γ和TNF-α等细胞因子,从而参与免疫调节增效机体抗感染效应。结果表明:与单独使用植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母相比,将上述3种菌株复配后形成的复合益生菌菌粉能显著增强NK细胞活性,可有效增强机体的非特异性免疫功能。
试验例2:益生菌植物提取物复合生物制剂对小鼠免疫机能的影响
1、试验方法:
参考“复合益生菌粉对小鼠免疫机能的影响研究”(中国食物与营养,2021,27(7):61-66)的方法考察本发明制备的益生菌植物提取物复合生物制剂对动物机体免疫力的影响。具体方法如下:
SPF级雌性ICR小鼠(购自济南朋悦实验动物繁育有限公司),18~22 g,适应性喂养3 d 后,随机分成5组,每组10 只,分别为空白对照组、复合益生菌粉组、紫花苜蓿提取物组、淫羊藿提取物组和益生菌植物提取物复合生物制剂组;其中:
复合益生菌粉组灌胃实施例1制备的复合益生菌粉;
紫花苜蓿提取物组灌胃实施例2制备的紫花苜蓿提取物;
淫羊藿提取物组灌胃实施例3制备的淫羊藿提取物;
益生菌植物提取物复合生物制剂组灌胃实施例4制备的益生菌植物提取物复合生物制剂;
各组的给药量均为0.1g/kg小鼠体质量,空白组给予相同量的蒸馏水;每天1次,连续灌胃30天。各组均正常饮食、饮水。
最后一次灌胃后,禁食12h,测定小鼠体质量,小鼠脱颈处死,并测定各项免疫指标。
(1)脾脏和胸腺的脏器指数测定:
小鼠脱颈处死后,摘取脾脏及胸腺称质量,按下式计算脏器指数。
脾脏指数(mg•g-1)=脾脏的质量(mg)/体质量(g);
胸腺指数(mg•g-1)=胸腺的质量(mg)/体质量(g)。
(2)淋巴细胞增殖能力测定:
无菌取脾,置于盛有无菌Hank′s液的玻璃培养皿中,制成细胞悬液,经200目筛网过滤。用无菌Hank′s液洗三次,每次离心(1000r/min)10min,计算活细胞数,调整细胞浓度为2×107个/ml,每孔加入0.2ml细胞悬液,再加入培养基至1ml,其中一孔中加入75μL ConA液(7.5μg/ml),另一孔作为空白对照,继续培养72h。培养结束前4h,弃掉上清液,并加入新鲜的RPM1640不完全培养基,同时加入MTT(5mg/ml)50μL,继续孵育4h。结束后去掉上清液,每孔中加入1mL异丙醇,震荡溶解后,置于酶标仪上测定吸光度(570nm)。
淋巴细胞的增殖能力=OD加ConA孔- OD不加ConA孔
2、试验结果:
各处理组的脾脏和胸腺的脏器指数测定结果以及淋巴细胞增殖能力测定结果见表2。
表2:试验结果
组别 脾脏指数(mg•g<sup>-1</sup>) 胸腺指数(mg•g<sup>-1</sup>) 淋巴细胞增殖能力
空白对照组 5.45±0.34 3.12±0.15 0.102±0.005
复合益生菌粉 5.58±0.38 3.20±0.16 0.128±0.020
紫花苜蓿提取物组 5.62±0.40 3.18±0.14 0.124±0.018
淫羊藿提取物组 5.70±0.42 3.25±0.20 0.132±0.030
益生菌植物提取物复合生物制剂组 6.08±0.45 3.46±0.25 0.186±0.046
脾脏指数和胸腺指数能够直观的反应动物的免疫功能,由表2可以看出:将复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物进行复配,能显著提高小鼠的免疫功能。
淋巴细胞的增殖能力是体现T淋巴细胞和B淋巴细胞免疫反应水平的重要指标,结果表明:与单独使用复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物相比,本发明制备的益生菌植物提取物复合生物制剂能显著提高小鼠淋巴细胞的增殖能力,其效果要优于单独使用复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物的效果之和。
综合上述试验结果可以看出:本发明制备的益生菌植物提取物复合生物制剂能提高动物机体的免疫能力。
试验例3:益生菌植物提取物复合生物制剂在育雏蛋鸡中的应用
1、试验方法:
从山东省泰安市某蛋鸡场的育雏蛋鸡中选取部分鸡只进行试验,分成试验1组、试验2组、试验3组、试验4组和对照组5个处理,其中:
试验1组是将实施例1制备的复合益生菌粉按1公斤复合益生菌粉兑水4000斤,制成给药溶液;分别10-14日龄、免疫空白期(21-25日龄)和43-49日龄三个时期以饮水的方式给予上述给药溶液,每次集中4-5小时饮用。
试验2组是将实施例2制备的紫花苜蓿提取物按1公斤提取物兑水4000斤,制成给药溶液;分别10-14日龄、免疫空白期(21-25日龄)和43-49日龄三个时期以饮水的方式给予上述给药溶液,每次集中4-5小时饮用。
试验3组是将实施例3制备的淫羊藿提取物按1公斤提取物兑水4000斤,制成给药溶液;分别10-14日龄、免疫空白期(21-25日龄)和43-49日龄三个时期以饮水的方式给予上述给药溶液,每次集中4-5小时饮用。
试验4组是将实施例4制备的益生菌植物提取物复合生物制剂按1公斤组合物兑水4000斤,制成给药溶液;分别10-14日龄、免疫空白期(21-25日龄)和43-49日龄三个时期以饮水的方式给予上述给药溶液,每次集中4-5小时饮用。
对照组在相应时间段给予等量的清水。
试验组和对照组的其他饲养条件保持一致。
每天统计死淘鸡只的数量,在8周末(第56天)统计鸡只死淘率。
死淘率(%)=死淘鸡只的数量/初始进鸡的数量
2、试验结果:
试验结果见表3。
表3:对育雏蛋鸡的作用效果
组别 进鸡数(只) 死淘数(只) 死淘率(%)
试验1组 200 5 2.5
试验2组 200 7 3.5
试验3组 200 6 3.0
试验4组 200 1 0.5
对照组 200 8 4.0
育雏蛋鸡的免疫力相对偏低,是鸡疾病的高发期,鸡群的死淘率偏高。结果表明:在育雏期饲喂复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物均能在一定程度上降低育雏蛋鸡的死淘率。而将复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物和淫羊藿提取物组合使用后,其降低育雏蛋鸡死淘率的效果更为显著。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已,并不用于限制本申请,对于本领域的技术人员来说,本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种益生菌植物提取物复合生物制剂,其特征在于,由以下重量份的原料组成:
复合益生菌粉1-3份、紫花苜蓿提取物8-12份、淫羊藿提取物6-8份;
所述复合益生菌粉由植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和产朊假丝酵母(Candida utilis)按重量比1:1:1配制而成;所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和产朊假丝酵母(Candida utilis)均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心,其中,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的菌种编号为CICC 21809,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的菌种编号为CICC 10071,产朊假丝酵母(Candida utilis)的菌种编号为CICC1314;所述复合益生菌粉中的活菌数为1×108cfu/g-8×108cfu/g;
所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备而成:
将紫苜蓿(Medicago sativa L.)全草干燥,粉碎,向粉碎后的紫苜蓿中加入8-10重量倍的乙醇溶液进行回流提取,提取时间2-3h,提取液回收乙醇后加入氧化铝吸附杂质,过滤,收集滤液,滤液喷雾干燥,即制备得到紫苜蓿提取物;
所述淫羊藿提取物由如下方法制备而成:
将淫羊藿(Epimedium brevicornu Maxim.)粉碎,采用超临界CO2进行萃取,萃取温度为35-40℃,萃取压力25-28MPa、萃取时间2-3h,收集萃取液;将萃取液冷冻干燥,即制备得到淫羊藿提取物。
2.根据权利要求1所述的益生菌植物提取物复合生物制剂,其特征在于,由以下重量份的原料组成:
复合益生菌粉2份、紫花苜蓿提取物10份、淫羊藿提取物8份。
3.权利要求1或2所述的益生菌植物提取物复合生物制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将复合益生菌粉、紫花苜蓿提取物、淫羊藿提取物按重量份混合均匀,即得。
4.权利要求1或2所述的益生菌植物提取物复合生物制剂在制备提高动物机体免疫力的产品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述产品的形式为液体制剂、固体制剂或微胶囊。
CN202210051444.2A 2022-01-18 2022-01-18 一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用 Active CN114052116B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210051444.2A CN114052116B (zh) 2022-01-18 2022-01-18 一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210051444.2A CN114052116B (zh) 2022-01-18 2022-01-18 一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114052116A CN114052116A (zh) 2022-02-18
CN114052116B true CN114052116B (zh) 2022-04-08

Family

ID=80231227

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210051444.2A Active CN114052116B (zh) 2022-01-18 2022-01-18 一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114052116B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116686903B (zh) * 2023-08-03 2023-10-10 山东健源生物科技有限公司 一种复合菌酶生物发酵剂及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105767502A (zh) * 2014-12-25 2016-07-20 张天国 一种提高陇东黑山羊肉质的饲料
KR20180075979A (ko) * 2016-12-27 2018-07-05 민경갑 당 영양소 첨가 복합 미생물 배양액을 포함하는 기능성 사료 곡물 발효 첨가제 및 이를 이용하는 기능성 사료의 제조방법

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101810247A (zh) * 2009-12-30 2010-08-25 沈阳科丰牧业科技有限公司 一种鸡的复合微生物饲料添加剂
CN105053737A (zh) * 2015-09-18 2015-11-18 北京科慧通智慧科技有限公司 一种猪用高效饲料添加剂
CN107183346A (zh) * 2017-06-23 2017-09-22 舒城县明公农业开发有限责任公司 一种高品质肉猪饲料
EP3742905A1 (en) * 2018-01-24 2020-12-02 Omnigen Research, LLC Bacillus combination for administration to animals
CA3124973A1 (en) * 2018-12-31 2020-07-09 Omnigen Research, Llc Feed supplements

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105767502A (zh) * 2014-12-25 2016-07-20 张天国 一种提高陇东黑山羊肉质的饲料
KR20180075979A (ko) * 2016-12-27 2018-07-05 민경갑 당 영양소 첨가 복합 미생물 배양액을 포함하는 기능성 사료 곡물 발효 첨가제 및 이를 이용하는 기능성 사료의 제조방법

Also Published As

Publication number Publication date
CN114052116A (zh) 2022-02-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108813098B (zh) 含天然抗菌组分的微生物发酵复合无抗饲料
CN102366023A (zh) 一种含中药活性益生菌的奶牛饲料添加剂的制造方法
CN1831107A (zh) 中药多菌种混合固体发酵技术及其应用
CN111011643A (zh) 提高肉仔鸡生长性能的菌酶发酵中药及其制备方法
KR101025810B1 (ko) 곤충을 이용한 항생제 대체용 비분해성 사료첨가제 및 이의 제조방법
CN116033923A (zh) Variovorax病菌作为球虫病替代治疗的用途
CN113907208B (zh) 一种预防仔猪腹泻的饲料添加剂及其制备方法和应用
CN104206789A (zh) 一种用于预防奶牛乳房炎和布鲁氏菌病的饲料添加剂及其制备方法
CN1029857C (zh) 拟杆菌微生态制剂的制备方法
CN112471353A (zh) 禽类饲用的长效共生复合液态微生态制剂及其制备方法
CN114468124B (zh) 一种防治坏死性肠炎的发酵中草药饲料添加剂
CN102367416A (zh) 牛饲料用中药益生菌固体培养基、培养方法及饲料添加剂
CN114052116B (zh) 一种益生菌植物提取物复合生物制剂及其制备方法和应用
CN113575764B (zh) 一种酿酒酵母培养物及其应用
KR20160026280A (ko) 무항생제 가축용 단미 펠렛 사료
CN113615766A (zh) 复合植物提取物与益生菌生物发酵饲料的制备及应用
CN107961260A (zh) 治疗、预防禽类大肠杆菌性腹泻病的药剂及其制备方法
CN113967243B (zh) 一种用于防治家禽腹泻的发酵中药制剂及其制备方法
CN111821322A (zh) 一种可替代抗生素的禽用微生态口服制剂及其应用
CN113925894A (zh) 一种抑菌消炎的中草药提取物饲料添加剂及其应用
CN113854401A (zh) 一种发酵中药饲料添加剂及其制备方法
CN103550770B (zh) 一种鸡传染性法氏囊病复合泡腾片的制备方法
CN106666151A (zh) 防控仔猪腹泻的无抗添加剂及其制备方法
CN1857326A (zh) 一种乳酸芽孢杆菌微生态制剂及其制备方法与应用
CN101028038A (zh) 益生康

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract

Application publication date: 20220218

Assignee: Hebei Jiulonghe Agricultural Development Co.,Ltd.

Assignor: SHANDONG JIANYUAN BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO.,LTD.

Contract record no.: X2024980016697

Denomination of invention: A probiotic plant extract composite biological preparation and its preparation method and application

Granted publication date: 20220408

License type: Common License

Record date: 20240930