CN114014956A - 一种肝素钠无盐提取制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：肠粘膜制备：将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1‑12‑18混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌10‑15分钟，得初步粘膜液；PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至8.6‑9.4。本发明具有如下的有益效果：对动物小肠进行PH调节然后再加入复合型酶溶液对粘膜液进行酶解，使动物小肠中含有的肝素钠能够充分酶解，其次再进行超声酶解再配合季铵盐提取，使得肝素钠的提取含量达到最高。采用本工艺提取的肝素钠，相比于现有技术而言，每2000根动物小肠最终可获得的肝素钠含量达到1075g，其得率高，质量稳定。
Description
技术领域
本发明涉及肝素钠提取技术领域，具体涉及一种肝素钠无盐提取制备工艺。
背景技术
肝素钠(Heparin sodium)能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。其作用机制比较复杂，主要通过与抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)结合，而增强后者对活化的Ⅱ、Ⅸ、X、Ⅺ和Ⅻ凝血因子的抑制作用，其后果涉及阻止血小板凝集和破坏、妨碍凝血激活酶的形成、阻止凝血酶原变为凝血酶，抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而发挥抗凝作用。
常用的肝素钠提取方法主要是采用盐析法来提取的：用碱性盐法将肝素钠从肝素钠与其他物质形成的复合物中分离出来，然后用强碱性阴离子交换树脂将解离出来的肝素钠负离子吸附，再用高浓度的盐水将肝素钠从树脂上洗脱下来，再经过乙醇沉淀、丙酮干燥等步骤得到肝素钠的粗品。
该种提取方法导致高盐废水很难进行无污染处理进行排放，对环境的影响会造成很大的影响。
发明内容
针对现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种肝素钠无盐提取制备工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。
本发明解决技术问题采用如下技术方案：
本发明提供了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
肠粘膜制备：将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-12-18混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌10-15分钟，得初步粘膜液；
PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至8.6-9.4；
然后再经过初步粘膜液酶解，再超声酶解处理；
超声酶解：将经过酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合3-5min，温度保持在62-71℃，随后过滤得滤液；
树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附5-7h，吸附完成后将树脂滤出；然后再进行洗脱、沉淀处理。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述初步粘膜液酶解的具体操作步骤为：
向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
具体的复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.0-1.2:0.6-0.8：0.3-0.5的质量份比例混合而成。
作为本发明的再进一步技术方案是：在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至35-39℃，并保持30-40min。
作为本发明的再进一步技术方案是：在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.001-0.0015。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述树脂按照3-5g/L的比例加入到所述滤液中。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述树脂为FPA53离子交换树脂。
作为本发明的再进一步技术方案是：所述洗脱中：
将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为35％-40％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为25％-30％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀18-26h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品；
其中乙醇浓度为35％-45％，沉淀22h小时后去除上部清液。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
对动物小肠进行PH调节然后再加入复合型酶溶液对粘膜液进行酶解，使动物小肠中含有的肝素钠能够充分酶解，其次再进行超声酶解再配合季铵盐提取，使得肝素钠的提取含量达到最高。采用本工艺提取的肝素钠，相比于现有技术而言，每2000根动物小肠最终可获得的肝素钠含量达到1075g，其得率高，质量稳定。
此外，在本发明中，通过复合型酶溶液：蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶对动物小肠中的肠粘膜进行酶解，其酶解的整体效果相比于现有技术而言，具有较好的技术效果；在本发明中，未采用加盐的方式进行提取，所产生的废水不会存在较多的污染情况，有效降低废水的处理成本，提高环境效益；
在本发明中，采用向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺的方法，十六烷基三甲基溴化胺的加入可以获得更佳的提取效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
在本发明中：一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
S100，肠粘膜制备：将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-12-18混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌10-15分钟，得初步粘膜液；
S200，PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至8.6-9.4；
S300，初步粘膜液酶解：向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
S400，超声酶解：将经过复合型酶溶液酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
S500，季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合3-5min，温度保持在62-71℃，随后过滤得滤液；
S600，树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附5-7h，吸附完成后将树脂滤出；
S700，洗脱：将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为35％-40％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为25％-30％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
S800，沉淀：将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀18-26h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品。
所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
所述复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.0-1.2:0.6-0.8：0.3-0.5的质量份比例混合而成。
在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至35-39℃，并保持30-40min。
在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.001-0.0015。
所述树脂按照3-5g/L的比例加入到所述滤液中。
所述树脂为FPA53离子交换树脂。
所述乙醇浓度为35％-45％，沉淀22h小时后去除上部清液。
下面通过具体的实施例与对比例来说明本发明的优越性。
实施例1：
本实施例提供了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
S100，肠粘膜制备：取动物小肠20根，本实施例选用猪小肠，将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-12混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌10分钟，得初步粘膜液；
S200，PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至8.6；
S300，初步粘膜液酶解：向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
S400，超声酶解：将经过复合型酶溶液酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
S500，季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合3min，温度保持在62℃，随后过滤得滤液；
S600，树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附5h，吸附完成后将树脂滤出；
S700，洗脱：将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为35％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为25％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
S800，沉淀：将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀18h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品。
所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
所述复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.0-:0.6-：0.3的质量份比例混合而成。
在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至35℃，并保持30min。
在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.001。
所述树脂按照3g/L的比例加入到所述滤液中。
所述树脂为FPA53离子交换树脂。
所述乙醇浓度为35％，沉淀22h小时后去除上部清液。
实施例2：
本实施例提供了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
S100，肠粘膜制备：取动物小肠20根，本实施例选用猪小肠，将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-18混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌15分钟，得初步粘膜液；
S200，PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至9.4；
S300，初步粘膜液酶解：向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
S400，超声酶解：将经过复合型酶溶液酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
S500，季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合5min，温度保持在71℃，随后过滤得滤液；
S600，树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附7h，吸附完成后将树脂滤出；
S700，洗脱：将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为40％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为30％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
S800，沉淀：将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀26h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品。
所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
所述复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.2:0.8：0.5的质量份比例混合而成。
在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至39℃，并保持40min。
在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.0015。
所述树脂按照5g/L的比例加入到所述滤液中。
所述树脂为FPA53离子交换树脂。
所述乙醇浓度为45％，沉淀22h小时后去除上部清液。
实施例3：
本实施例提供了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
S100，肠粘膜制备：取动物小肠20根，本实施例选用猪小肠，将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-14混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌12分钟，得初步粘膜液；
S200，PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至8.8；
S300，初步粘膜液酶解：向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
S400，超声酶解：将经过复合型酶溶液酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
S500，季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合3.5min，温度保持在65℃，随后过滤得滤液；
S600，树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附5.5h，吸附完成后将树脂滤出；
S700，洗脱：将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为37％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为27％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
S800，沉淀：将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀20h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品。
所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
所述复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.05-:0.65：0.35的质量份比例混合而成。
在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至36℃，并保持34min。
在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.0012。
所述树脂按照3.5g/L的比例加入到所述滤液中。
所述树脂为FPA53离子交换树脂。
所述乙醇浓度为38％，沉淀22h小时后去除上部清液。
实施例4：
本实施例提供了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
S100，肠粘膜制备：取动物小肠20根，本实施例选用猪小肠，将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-16混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌14分钟，得初步粘膜液；
S200，PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至9.1；
S300，初步粘膜液酶解：向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
S400，超声酶解：将经过复合型酶溶液酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
S500，季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合4.5min，温度保持在68℃，随后过滤得滤液；
S600，树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附6.5h，吸附完成后将树脂滤出；
S700，洗脱：将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为38％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为28％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
S800，沉淀：将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀22h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品。
所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
所述复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.15:0.75：0.45的质量份比例混合而成。
在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至38℃，并保持37min。
在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.0014。
所述树脂按照4.5g/L的比例加入到所述滤液中。
所述树脂为FPA53离子交换树脂。
所述乙醇浓度为42％，沉淀22h小时后去除上部清液。
实施例5：
本实施例提供了一种肝素钠无盐提取制备工艺，包括以下步骤：
S100，肠粘膜制备：取动物小肠20根，本实施例选用猪小肠，将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌13分钟，得初步粘膜液；
S200，PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至9.0；
S300，初步粘膜液酶解：向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
S400，超声酶解：将经过复合型酶溶液酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
S500，季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合4min，温度保持在66℃，随后过滤得滤液；
S600，树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附6h，吸附完成后将树脂滤出；
S700，洗脱：将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为37.5％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为27.5％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
S800，沉淀：将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀21h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品。
所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
所述复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.1:0.7：0.4的质量份比例混合而成。
在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至37℃，并保持35min。
在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.00125。
所述树脂按照4g/L的比例加入到所述滤液中。
所述树脂为FPA53离子交换树脂。
所述乙醇浓度为40％，沉淀22h小时后去除上部清液。
对比例1：
与实施例5不同的是未加入蛋白分解酶。
对比例2：
与实施例5不同的是未加入脂肪分解酶。
对比例3：
与实施例5不同的是未加入十六烷基三甲基溴化胺。
实施例1-5及对比例1-3提取的肝素钠结果如下
| 肝素钠提取量(g) | |
| 实施例1 | 9.51 |
| 实施例2 | 9.82 |
| 实施例3 | 10.12 |
| 实施例4 | 10.08 |
| 实施例5 | 10.75 |
| 对比例1 | 9.13 |
| 对比例2 | 9.07 |
| 对比例3 | 9.21 |
从实施例1-5及对比例1-3得出，根据本发明实施例5的制备工艺，相同数量的动物小肠，最终提取出来的肝素钠重量最多。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
对动物小肠进行PH调节然后再加入复合型酶溶液对粘膜液进行酶解，使动物小肠中含有的肝素钠能够充分酶解，其次再进行超声酶解再配合季铵盐提取，使得肝素钠的提取含量达到最高。采用本工艺提取的肝素钠，相比于现有技术而言，每2000根动物小肠最终可获得的肝素钠含量达到1075g，其得率高，质量稳定。
此外，在本发明中，通过复合型酶溶液：蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶对动物小肠中的肠粘膜进行酶解，其酶解的整体效果相比于现有技术而言，具有较好的技术效果；在本发明中，未采用加盐的方式进行提取，所产生的废水不会存在较多的污染情况，有效降低废水的处理成本，提高环境效益；
在本发明中，采用向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺的方法，十六烷基三甲基溴化胺的加入可以获得更佳的提取效果。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (10)
1.一种肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
肠粘膜制备：将动物小肠粉碎至颗粒状，并按照动物小肠与水的比例为1-12-18混合加入清水，将混合物加入到搅拌机中搅拌10-15分钟，得初步粘膜液；
PH调节：向初步粘膜液中加入碱性调和液，将初步粘膜液的PH升至8.6-9.4；
然后再经过初步粘膜液酶解，再超声酶解处理；
超声酶解：将经过酶解后的初步粘膜液加入到超声机进行继续酶解，得到酶解液；
季铵盐提取：向酶解液中加入十六烷基三甲基溴化胺并混合3-5min，温度保持在62-71℃，随后过滤得滤液；
树脂吸附:经冷却后向上述滤液中加入树脂并搅拌吸附5-7h，吸附完成后将树脂滤出；然后再进行洗脱、沉淀处理。
2.根据权利要求1所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述动物小肠与水的比例为1-15混合加入清水。
3.根据权利要求1所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述碱性调和液为氢氧化钠、者氢氧化钾以及氨水的组合溶液，其质量份比例为1：0.6:0.3。
4.根据权利要求1所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述初步粘膜液酶解的具体操作步骤为：
向经过PH值调节后的初步粘膜液中加入复合型酶溶液，得到混合粘膜液，复合型酶溶液与初步粘膜液的比例为1:30；并将混合粘膜液加入到酶解设备中进行酶解；
具体的复合型酶溶液为蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶，复合型酶溶液是蛋白分解酶、淀粉分解酶、脂肪分解酶以1.0-1.2:0.6-0.8：0.3-0.5的质量份比例混合而成。
5.根据权利要求4所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，在所述PH调节步骤中，对初步粘膜液进行加热处理，加热至35-39℃，并保持30-40min。
6.根据权利要求5所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，在所述超声机中进行酶解时，超声机的超声波发射功率为260W，总持续时间为5min。
7.根据权利要求4所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述酶解液与十六烷基三甲基溴化胺的质量份配比为1:0.001-0.0015。
8.根据权利要求1所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述树脂按照3-5g/L的比例加入到所述滤液中。
9.根据权利要求8所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述树脂为FPA53离子交换树脂。
10.根据权利要求1所述的肝素钠无盐提取制备工艺，其特征在于，所述洗脱中：
将滤出后的树脂用浓度为5％的盐水清洗掉部分杂质，随后用浓度为35％-40％的盐水洗脱树脂3h，得第一次滤液，再用浓度为25％-30％的盐水洗脱树脂，得第二次滤液，将第一次滤液和第二滤液合并得洗脱滤液；
将所述洗脱滤液加入乙醇，沉淀18-26h小时后去除上部清液，得到沉淀物，将沉淀物烘干即可得到肝素钠粗品；
其中乙醇浓度为35％-45％，沉淀22h小时后去除上部清液。
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