CN103122040A - 超声酶解制备肝素钠制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种肝素钠技术，尤其是一种复频组合超声强化双酶提取肝素钠技术背景技术。本发明的目的是在于提供一种双酶法提取肝素钠的制备方法，利用双酶组进行酶促提取肝素纳，通过选择酶的种类、酶组合的比例、超声场的强度、控制好时间以及其他几道工序制成肝素钠。本发明与现有技术相比，具有如下优点：1、整个工序的时间减少了大概33％；2、产品的收率提高了29．6％；3、效价稳定在120以上(国内先进技术产品效价90-"0)。
Description
技术领域
本发明涉及一种肝素钠技术，尤其是一种复频组合超声强化双酶提取肝素钠技术背景技术。
背景技术
目前我国生产几乎全部采用猪小肠为原料，在常规反应器内运用盐解法、 碱解法和酶解法等几种，其中盐解法应用最为普通，其生产工序是：原料(肠 黏膜)、常规反应器内盐水提取、过滤、树脂吸附、洗脱、乙醇沉淀、脱水、干 燥、肝素钠粗品。
上述方法生产肝素钠的工艺过程虽然比较简单易于实现，但存在的不足之处在于过程的精致，因为粗品肝素钠经反复的酸碱处理，不仅会使肝素钠的收率减少，而且对肝素钠的生物活性也影响很大，尤其效价很难达到90USPu／mg以上，并且时间较长。
发明内容
本发明的目的是在于提供一种双酶法提取肝素钠的制备方法，利用双酶组进行酶促提取肝素纳，通过选择酶的种类、酶组合的比例、超声场的强度、控制好时间以及其他几道工序制成肝素钠。
该方法采用以下步骤：
一种超声酶解制备肝素钠制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(a)、将刮制好的小肠粘膜抽入常规酶解罐，在加温前先加入重量比为2，3％-2．8％的精盐，调PH值到9．0-9．2；将刮制好的小肠粘膜抽入复频超声反应罐，复频超声条件为20+40kHZ，选择超声强度在0．1W／m2到0．9W／m2；
(b)、将步骤(a)中的溶液加温到40℃-45℃时加入胰蛋白酶和脂肪酶，并且使其比例在10：0．5到10：5之间，双酶在步骤(a)中溶液的重量比为0．3％-0．4％，继续加温到50℃-55‘C，保温酶解2h-5h，然后继续加温到80℃-85℃，保温10-20分钟后过滤；
(c)、对步骤(b)中的过滤溶液进行吸附、洗涤、洗脱、沉淀、脱水干燥常规步骤后获得肝素钠产品。
所述的步骤(b)中，所选择的胰蛋白酶和脂肪酶的优选比例为10：2。
本发明与现有技术相比，具有如下优点：
1、整个工序的时间减少了大概33％；
2、产品的收率提高了29．6％；
3、效价稳定在120以上(国内先进技术产品效价90-"0)。
具体实施方式
实施例1
制小肠粘膜(10副小肠)，每根小肠与水混合后约4-6公斤，将刮制好的小肠抽入常规酶解罐，在加温前先加入2．3-2．8％(体量)的精盐，调PH值9．0-9．2：在42℃时加入胰蛋白酶和脂肪酶(比例为10：2)，占总溶液重量比为0．4％；继续加温至52℃，保温3小时后进行酶解，然后继续加温到80℃-85‘C，保温15分钟后过滤，对上述步骤中的过滤溶液进行吸附：吸附水过滤，冷却到58’C时加入树脂吸附；洗涤：收集树脂，清水漂洗数次，再用清水加温58-60‘C，调PH到7。5，到树脂洗干净为止，用1．2N盐水溶液，调PH到8加入树脂中，加温到60℃，洗涤0．5h，去处洗涤溶液，滤干树脂；洗脱：用4M的NaCl溶液洗脱2次后，将两次洗脱溶液合并，过滤：沉淀：将一、二次洗脱液用85％的乙醇沉淀，体积比例是1：1．5左右，兑好后的酒精混合液浓度大约是30-40度，沉淀后脱水干燥得肝素钠产品。
Claims (5)
1.一种超声酶解制备肝素钠制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(a)、将刮制好的小肠粘膜抽入常规酶解罐，在加温前先加入重量比为2，3％-2．8％的精盐，调PH值到9．0-9．2；将刮制好的小肠粘膜抽入复频超声反应罐，复频超声条件为20+40kHZ，选择超声强度在0．1W／m2到0．9W／m2；
(b)、将步骤(a)中的溶液加温到40℃-45℃时加入胰蛋白酶和脂肪酶，并且使其比例在10：0．5到10：5之间，双酶在步骤(a)中溶液的重量比为0．3％-0．4％，继续加温到50℃-55‘C，保温酶解2h-5h，然后继续加温到80℃-85℃，保温10-20分钟后过滤；
(c)、对步骤(b)中的过滤溶液进行吸附、洗涤、洗脱、沉淀、脱水干燥常规步骤后获得肝素钠产品。
2. 根据权利要求l所述的超声酶解制备肝素钠制备方法，其特征在于：所述的步骤(b)中，所选择的胰蛋白酶和脂肪酶的优选比例为10：2。
3. 根据权利要求1或2所述的超声酶解制备肝素钠制备方法，其特征在于：所述的步骤(b)中，所选择保温酶解的优选时间在2h。
4.根据权利要求1所述的超声酶解制备肝素钠制备方法，其特征在于：复频超声反应罐所选择的超声强度优选为0．3W／m2到0．7W／m’。
5.所述的步骤(b)中，所选择的胰蛋白酶和脂肪酶的优选比例为10：2。
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| CN 201310087477 CN103122040A (zh) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | 超声酶解制备肝素钠制备方法 |
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Publications (1)
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| CN103122040A true CN103122040A (zh) | 2013-05-29 |
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| CN 201310087477 Pending CN103122040A (zh) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | 超声酶解制备肝素钠制备方法 |
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|---|---|
| CN (1) | CN103122040A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107267572A (zh) * | 2017-08-10 | 2017-10-20 | 盐城盛大肠衣食品有限公司 | 一种复合酶法提取肝素钠技术 |
| CN107312111A (zh) * | 2017-08-10 | 2017-11-03 | 如皋市永兴肠衣有限公司 | 多种酶复合肠黏膜水解技术 |
| CN107383242A (zh) * | 2017-08-10 | 2017-11-24 | 盐城盛大肠衣食品有限公司 | 一种超声酶解提取肝素钠技术 |
| CN114014956A (zh) * | 2021-12-06 | 2022-02-08 | 潢川县鹏升畜产品有限公司 | 一种肝素钠无盐提取制备工艺 |
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2013
- 2013-03-19 CN CN 201310087477 patent/CN103122040A/zh active Pending
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| CN114014956A (zh) * | 2021-12-06 | 2022-02-08 | 潢川县鹏升畜产品有限公司 | 一种肝素钠无盐提取制备工艺 |
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
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