CN114010546A - 一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体及制备方法 - Google Patents
一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体及制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体及制备方法。该脂质载体按重量份组分：美白剂8～55份、油脂6～36份、复合乳化剂2～10份、余量为去离子水。本发明通过缓释和控释将不同机制的美白剂作用于肌肤，达到较好的美白协同增效作用，具有增效美白，抑制黑色素，淡化色斑的效果。该多重负载美白增效纳米结构脂质载体应用到护肤化妆品领域中有很好的作用，如膏霜、乳液、面膜等不同剂型化妆品中，或美白祛斑、保湿补水、抗衰祛皱等不同功效化妆品中。
Description
技术领域
本发明涉及一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体，同时也涉及相应的制备方法，属于化妆品技术领域。
背景技术
从古至今，皮肤白皙是东方女性的主要诉求。美白，成为人们变美的手段之一。不管是黄种人、白种人还是黑种人，多多少少都有黑色素的存在。黑色素是由黑色素细胞通过酪氨酸酶催化酪氨酸变成多巴，多巴再经过多步氧化演变而成的。由于外在因素的影响，黑色素会往皮肤表层转移，最后形成色斑。
使皮肤变白是美容皮肤科学的重要课题。一白遮百丑，开发一种具有美白增效的纳米结构脂质载体，是时代所需。通过负载多种不同机制的美白剂，达到高效美白，让人青春永驻。
苯乙基间苯二酚，简称377，外观为白色到淡棕色粉末。苯乙基间苯二酚具有高效的美白效果，主要起抑制酪氨酸酶活性，但由于苯乙基间苯二酚化学性质不稳定，见光易氧化变色，水溶性差，因此被限制应用在化妆品领域中；熊果苷，又名熊果素，外观为白色粉末。熊果苷可有效抑制酪氨酸酶活性，阻断黑色素合成，从而达到美白效果，是二十一世纪的理想皮肤美白剂；烟酰胺，又名尼克酰胺，外观为白色结晶性粉末。烟酰胺能加速肌肤的新陈代谢，使含有黑色素细胞的角质脱落，促进胶原蛋白的合成，防止黑色素过度沉着，达到美白效果。通过将三种机制进行负载，采用纳米脂质载体技术进行制备，起到美白增效协同作用。
常见的纳米载体包括纳米乳液(Nanoemulsions)、脂质体(Liposomes)、固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles，简写为SLN)以及纳米结构脂质载体(nanostructurelipid carrier，简写为NLC)等，这些体系尽管制备方法，理化性质，稳定性能以及药物释放动力学都不尽相同，但都能够不同程度的提高功效成分的稳定性和功效性，其中SLN和NLC不论是从载药能力、载药稳定性以及药物释放特性上都被认为是其中最为优秀的载药体系。因此，纳米载体在一定程度上能解决功效成分的缺陷，但其优化技术的空间仍很广阔。
纳米结构脂质载体由于其生物相容性好、负载能力高、渗透性好等优势，是一种具有产业化前景的纳米载体技术。目前的纳米脂质载体技术，在一定程度上改变了活性物的理化性质，例如提高稳定性、分散性、物理强度甚至降低毒性等。“第二代脂质载体”NLC采用的是用液体脂质取代部分固态脂质作为赋形剂。液体油脂的加入可以提供更多的缺陷结构，液态分子随机取代晶格中的固态分子，降低固体脂质的结晶度，提高载药量；此外，使药物有更好的溶解度，使药物均匀地分散在纳米球中。因而，纳米结构脂质载体是一种理想的载体，同时适用于化妆品领域。
发明内容
本发明所要解决的首要技术问题在于提供一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用下述的技术方案：
根据本发明实施例的第一方面，提供一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体，按重量份表示包括以下组分：美白剂8～55份、油脂6～36份、复合乳化剂2～10份、余量为去离子水。
其中较优地，所述美白剂按重量份表示包括以下组分：苯乙基间苯二酚1～30份、熊果苷3～10份、烟酰胺1～5份、红曲提取物3～10份。
其中较优地，所述油脂包括固体油脂和液体油脂。
其中较优地，所述固体油脂按重量份表示包括以下组分：单硬脂酸甘油酯1～5份、棕榈酸甘油酯1～8份、硬脂酸棕榈酸甘油酯1～7份、月桂醇1～5份、肉豆蔻酸1～5份。
其中较优地，所述液体油脂按重量份表示包括以下组分：辛酸癸酸甘油三酯1～6份。
其中较优地，所述复合乳化剂按重量份表示包括以下组分：泊洛沙姆188 1～5份、吐温80 1～5份。
其中较优地，所述红曲提取物通过以下步骤发酵提取制备：
步骤1、红曲米的制备
按重量比将白米以1:1比率浸渍在净化水中1小时之后，进行加热灭菌，在灭菌的100g白米接种10CFU/ml的红曲菌株，在30℃下有氧静置培养2日，在25℃下有氧静置培养6日，将完成发酵的红曲米在90℃下加热1小时，杀灭红曲菌；
步骤2、利用酵母的红曲米发酵物的制备
在灭菌的红曲米中加入2倍重量的净化水，接种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae；JTL-L1,KCCM12008P)菌株，接种之后，在25～30℃下进一步有氧发酵7日；
步骤3、红曲提取物的制备
将结束酵母发酵的红曲米通过离心分离去除之后，将剩余的上层液减压浓缩到初期体积的1/10，接着，缓慢加入该浓缩液的4倍体积的95％乙醇，在4℃下放置24小时，进行乙醇沉淀反应，接着，通过离心分离去除上层液，冷冻干燥沉淀的提取物，得到红曲提取物；
步骤4、红曲提取物的预准备处理
取重量为10份的红曲提取物加入1份复合乳化剂(含0.5份泊洛沙姆188、0.5份吐温80)、1份辛酸癸酸甘油(液体油脂)、和10份的水，40℃下混合搅拌30分钟，预准备完成。
根据本发明实施例的第二方面，提供一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、按重量份称取美白剂和油脂加入到烧杯中，加热搅拌溶解，保温60℃，得到油相；
步骤2、按重量份称取复合乳化剂和去离子水加入到烧杯中，加热搅拌溶解，保温60℃，得到水相；
步骤3、将由步骤2得到的水相在剪切力为10000～16000r/min作用下缓慢加入由步骤1得到的油相均质4～8min，得到初乳；
步骤4、将步骤3得到的初乳，通过高压均质机在压力为500～1000bar作用下均质2～8次，迅速冷却至温度为15～40℃得到多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
其中较优地，所述纳米结构脂质载体的粒径在50～200nm。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过缓释和控释将不同机制的美白剂作用于肌肤，达到较好的美白协同增效作用，具有增效美白，抑制黑色素，淡化色斑的效果。本多重负载美白增效纳米结构脂质载体还可以作为重要的增白、抑制黑色素的有效成分，广泛的应用到各个护肤化妆品领域中，如膏霜、乳液、面膜等不同剂型化妆品中，或美白祛斑、保湿补水、抗衰祛皱等不同功效化妆品中。
附图说明
图1为斑马鱼胚胎的空白对照图。
图2为采用斑马鱼胚胎对实施例1所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的验证图。
图3为采用斑马鱼胚胎对实施例2所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的验证图。
图4为采用斑马鱼胚胎对实施例3所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的验证图。
图5为采用斑马鱼胚胎对实施例4所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的验证图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明的技术内容进行详细具体的说明。
红曲提取物通过以下步骤发酵提取制备：
步骤1、红曲米的制备
按重量比将白米以1:1比率浸渍在净化水中1小时之后，进行加热灭菌，在灭菌的100g白米接种10CFU/ml的红曲菌株，在30℃下有氧静置培养2日，在25℃下有氧静置培养6日，将完成发酵的红曲米在90℃下加热1小时，杀灭红曲菌；
步骤2、利用酵母的红曲米发酵物的制备
在灭菌的红曲米中加入2倍重量的净化水，接种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae；JTL-L1,KCCM12008P)菌株，接种之后，在25～30℃下进一步有氧发酵7日；
步骤3、红曲提取物的制备
将结束酵母发酵的红曲米通过离心分离去除之后，将剩余的上层液减压浓缩到初期体积的1/10，接着，缓慢加入该浓缩液的4倍体积的95％乙醇，在4℃下放置24小时，进行乙醇沉淀反应，通过离心分离去除上层液，加热至90℃保持10分钟后降至室温，得到红曲提取物。
步骤4、红曲提取物的预准备处理
取重量为10份的红曲提取物加入1份复合乳化剂(含0.5份泊洛沙姆188、0.5份吐温80)、1份辛酸癸酸甘油(液体油脂)、和10份的水，40℃下混合搅拌30分钟，预准备完成。
实施例1：一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、按重量份称取美白剂组分(包括以下组分：苯乙基间苯二酚、熊果苷、烟酰胺、预准备处理后的红曲提取物)和油脂组分(包括以下固体油脂组分：单硬脂酸甘油酯、棕榈酸甘油酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯、月桂醇、肉豆蔻酸；包括以下液体油脂组分：辛酸癸酸甘油)加入到烧杯中，加热搅拌溶解，保温60℃，得到油相；
步骤2、按重量份称取复合乳化剂和去离子水加入到烧杯中，加热搅拌溶解，保温60℃，得到水相；
步骤3、将由步骤2得到的水相在剪切力为10000r/min作用下缓慢加入由步骤1得到的油相均质5min，得到初乳；
步骤4、将步骤3得到的初乳，通过高压均质机在压力为700bar作用下均质3次，迅速冷却至温度为15℃得到多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
本发明实施例所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，按合计的重量份表示包括以下组分：苯乙基间苯二酚20份、熊果苷6份、烟酰胺5份、红曲提取物10份、单硬脂酸甘油酯2份、棕榈酸甘油酯3份、硬脂酸棕榈酸甘油酯3份、月桂醇3份、肉豆蔻酸4份、辛酸癸酸甘油三酯2份、泊洛沙姆188为2份、吐温80为2份、余量为去离子水。
实施例2：一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、步骤2、和实施例1相同；
步骤3、将由步骤2得到的水相在剪切力为12000r/min作用下缓慢加入由步骤1得到的油相均质5min，得到初乳；
步骤4、将步骤3得到的初乳，通过高压均质机在压力为800bar作用下均质4次，迅速冷却至温度为20℃得到多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
本发明实施例所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，按合计的重量份表示包括以下组分：苯乙基间苯二酚25份、熊果苷5份、烟酰胺3份、红曲提取物8份、单硬脂酸甘油酯3份、棕榈酸甘油酯3份、硬脂酸棕榈酸甘油酯4份、月桂醇4份、肉豆蔻酸4份、辛酸癸酸甘油三酯2份、泊洛沙姆188为2份、吐温80为2份、余量为去离子水。
实施例3，一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、步骤2、和实施例1相同；
步骤3、将由步骤2得到的水相在剪切力为10000r/min作用下缓慢加入由步骤1得到的油相均质6min，得到初乳；
步骤4、将步骤3得到的初乳，通过高压均质机在压力为700bar作用下均质4次，迅速冷却至温度为20℃得到多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
本发明实施例所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，按合计的重量份表示包括以下组分：苯乙基间苯二酚30份、熊果苷10份、烟酰胺3份、红曲提取物8份、单硬脂酸甘油酯2份、棕榈酸甘油酯2份、硬脂酸棕榈酸甘油酯2份、月桂醇3份、肉豆蔻酸3份、辛酸癸酸甘油三酯3份、泊洛沙姆188为4份、吐温80为2份、余量为去离子水。
实施例4，一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、步骤2、和实施例1相同；
步骤3、将由步骤2得到的水相在剪切力为16000r/min作用下缓慢加入由步骤1得到的油相均质4min，得到初乳；
步骤4、将步骤3得到的初乳，通过高压均质机在压力为800bar作用下均质6次，迅速冷却至温度为25℃得到多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
本发明实施例所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，按合计的重量份表示包括以下组分：苯乙基间苯二酚26份、熊果苷5份、烟酰胺5份、红曲提取物5份、单硬脂酸甘油酯5份、棕榈酸甘油酯5份、硬脂酸棕榈酸甘油酯5份、月桂醇3份、肉豆蔻酸3份、辛酸癸酸甘油三酯5份、泊洛沙姆188 2份、吐温80 2份、余量为去离子水。
斑马鱼胚胎评价原理：斑马鱼与人类的基因相似程度高达80％，皮肤结构和人体相似度高，斑马鱼在发育初期全身透明，胚胎发育至24h时黑色素开始从视网膜上皮生长。色素细胞起源于背部外胚层分化的一群细胞——神经嵴细胞，然后增值、迁徙、分化成色素母细胞。在黑色素形成的过程中进行干预，可抑制黑色素的形成。通过将斑马鱼24h胚胎置于美白剂溶液中，暴露24h后于荧光显微镜下观察并拍照，通过对比斑马鱼体表黑色素含量，来反应美白剂的美白功效。
验证实验1：所制备的美白剂的美白功效对斑马鱼胚胎的影响
选取发育正常的24h斑马鱼胚胎，放置于24孔板中，每孔10～15枚，在不伤害胚胎的情况下除去孔板中标准稀释水，向每孔中迅速加入1ml一定浓度的多重美白剂溶液。在28.5℃恒温培养箱中避光孵育，孵育24h后，从表型和行为正常的斑马鱼中随机选取至少10尾斑马鱼，用3％甲基纤维素固定，在荧光显微镜下观察并拍照，使用图像分析软件对斑马鱼图片进行分析，以此来计算斑马鱼黑色素含量。结果见表1所示。
表1：黑色素抑制率
| 项目 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 空白对照 |
| 黑色素抑制率 | 86％ | 88％ | 90％ | 91％ | 0％ |
结果表明，本发明的多重负载美白剂明显抑制斑马鱼体表黑色素，具有显著的美白功效。
验证实验2：所制备的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的美白功效对斑马鱼胚胎的影响
为了进一步验证多重负载美白剂的纳米结构脂质载体对斑马鱼胚胎的美白增效作用，以实施例1的多重美白剂进行包裹，制备出多重负载美白增效纳米结构脂质载体。采用斑马鱼胚胎对多重负载美白增效纳米结构脂质载体进行评价，通过与空白对照比较可以计算实施例1～4对于黑色素的抑制效率(图1、2、3、4、5)。结果见表2所示。
表2：黑色素抑制率
| 实验项目 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 空白对照 |
| 黑色素抑制率 | 90％ | 89％ | 95％ | 97％ | 0％ |
结果表明，本发明的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，包裹后美白效果有所增强，明显抑制斑马鱼体表黑色素，具有显著的美白功效。
应用实施例1美白营养霜
表3给出含有本发明的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的美白营养霜配方。
表3
制备方法：A相80℃溶解混合均匀，B相80℃溶解混合均匀，环聚二甲基硅氧烷乳化前加入B相，乳化时B相加入A相并均质5min，降温至50℃时加入C相并均质2分钟，陈化24h后包装，即可。
应用实施例2美白乳液
表4给出含有本发明的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的美白乳液配方。
表4
制备方法：A相80℃溶解混合均匀，B相80℃溶解混合均匀，乳化时A相加入B相并均质5min，降温至50℃时加入C相并均质2分钟，陈化24h后包装，即可。
应用实施例3：人体试用评价实验
1、实验方法
应用实施例1及应用实施例2分别进行人体试用评价。选取18～60岁的志愿者50名。使用方法为每日洁面后使用，每天两次(早晚各涂一次)，左脸使用按应用实施例2制备的乳液，右脸使用按应用对比例1制备的营养霜。实验期为两个月，试验期间受试部位不使用其他化妆品，使用两个月后观察左脸和右脸的肤色和斑点、暗沉情况。
2、实验结果
使用两个月后发现，有42名试验者使用了按应用实施例2制备的乳液的左脸的肤色明显好于使用了按应用对比例1制备的营养霜的右脸的肤色，并且斑点和暗沉情况明显改善，有效率达84％。
上面对本发明所提供的多重负载美白增效纳米结构脂质载体及制备方法进行了详细的说明。对本领域的一般技术人员而言，在不背离本发明实质内容的前提下对它所做的任何显而易见的改动，都将构成对本发明专利权的侵犯，将承担相应的法律责任。
Claims (9)
1.一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于按重量份表示包括以下组分：美白剂8～55份、油脂6～36份、复合乳化剂2～10份、余量为去离子水。
2.如权利要求1所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于：
所述美白剂按重量份表示包括以下组分：苯乙基间苯二酚1～30份、熊果苷3～10份、烟酰胺1～5份、红曲提取物3～10份。
3.如权利要求1所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于：
所述油脂包括固体油脂和液体油脂。
4.如权利要求3所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于：
所述固体油脂按重量份表示包括以下组分：单硬脂酸甘油酯1～5份、棕榈酸甘油酯1～8份、硬脂酸棕榈酸甘油酯1～7份、月桂醇1～5份、肉豆蔻酸1～5份。
5.如权利要求3所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于所述液体油脂按重量份表示包括以下组分：辛酸癸酸甘油三酯1～6份。
6.如权利要求1所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于：
所述复合乳化剂按重量份表示包括以下组分：泊洛沙姆188 1～5份、吐温80 1～5份。
7.如权利要求2所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体，其特征在于所述红曲提取物通过以下步骤发酵提取制备：
步骤1、红曲米的制备
按重量比将白米以1:1比率浸渍在净化水中1小时之后，进行加热灭菌，在灭菌的100g白米接种10CFU/ml的红曲菌株，在30℃下有氧静置培养2日，在25℃下有氧静置培养6日，将完成发酵的红曲米在90℃下加热1小时，杀灭红曲菌；
步骤2、利用酵母的红曲米发酵物的制备
在灭菌的红曲米中加入2倍重量的净化水，接种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae；JTL-L1,KCCM12008P)菌株，接种之后，在25～30℃下进一步有氧发酵7日；
步骤3、红曲提取物的制备
将结束酵母发酵的红曲米通过离心分离去除之后，将剩余的上层液减压浓缩到初期体积的1/10，接着，缓慢加入该浓缩液的4倍体积的95％乙醇，在4℃下放置24小时，进行乙醇沉淀反应，接着，通过离心分离去除上层液，冷冻干燥沉淀的提取物，得到红曲提取物；
步骤4、红曲提取物的预准备处理
取重量为10份的红曲提取物加入1份复合乳化剂(含0.5份泊洛沙姆188、0.5份吐温80)、1份辛酸癸酸甘油(液体油脂)、和10份的水，40℃下混合搅拌30分钟，预准备完成。
8.一种多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤1、按重量份称取美白剂和油脂加入到烧杯中，加热搅拌溶解，保温60℃，得到油相；
步骤2、按重量份称取复合乳化剂和去离子水加入到烧杯中，加热搅拌溶解，保温60℃，得到水相；
步骤3、将由步骤2得到的水相在剪切力为10000～16000r/min作用下缓慢加入由步骤1得到的油相均质4～8min，得到初乳；
步骤4、将步骤3得到的初乳，通过高压均质机在压力为500～1000bar作用下均质2～8次，迅速冷却至温度为15～40℃得到多重负载美白增效纳米结构脂质载体。
9.如权利要求8所述的多重负载美白增效纳米结构脂质载体的制备方法，其特征在于：
所述纳米结构脂质载体的粒径在50～200nm。
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