CN114009340A - 一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基及培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基及培育方法，应用于百合鳞片组培生产体系。选用该培养基并采用公开的培育方法进行培育，使得特定的百合鳞片能够在常温环境下使处理的鳞片在较短时间内分化不定芽，诱导率为100％，每个鳞片诱导不定芽数不低于32个，该方法快速高效，显著提高了百合鳞片组培中的分化效率，适合百合规模化生产，对提高百合鳞片生产繁殖效率具有重要实际应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及百合鳞片的诱导培养技术领域，尤其涉及一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基及培育方法。
背景技术
百合(Lilium)是百合科百合属多年生球根花卉，是世界园艺产业中重要的观赏花卉，随着市场需求量的不断增加，人们对百合花的品种质量要求也越来越高，为进一步丰富和改善百合品种及观赏价值，开发野生百合资源，提高百合的组培价值及商品价值，人们对百合野生品种资源、野生百合的组培繁殖以及试管苗生长发育做了大量研究。
百合组培再生方法主要分为间接再生和直接再生两种。间接再生就是诱导外植体产生愈伤，之后通过愈伤再生出不定芽；直接再生就是通过鳞片等外植体直接分化不定芽。在这两个途径中，直接再生比间接再生具有更加明显的优势，直接再生过程更加简便，诱导效率高于间接再生，周期短，并且节省材料。在百合不定芽诱导和增殖阶段一般选用细胞分裂素与生长素的组合，不同的品种对于植物激素的浓度要求不同，目前在不定芽分化阶段的平均诱芽数在3到6之间。
目前对于百合组培的研究中都是使用不同浓度的生长素与细胞分裂素的组合，由于不同品种最佳的培养条件差异较大，有些品种的组培效率并不高，因此，高效的不定芽诱导方法的研究是百合生产中亟待解决的问题。
发明内容
针对上述存在的问题，本发明旨在提供一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基及培育方法，得到较高的扦插繁殖系数，提高百合鳞片不定芽的增殖数量，为百合进一步引种推广提供高效的技术方案。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基，所述诱导培养基为MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖、且pH＝5.8的固体培养基，其中，所述草甘膦的浓度为2.5mg·L-1。
一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取生长健康的百合鳞片，经灭菌后备用；
S2、随后将其切成1.0cm×1.0cm作为外植体；
S3、将外植体凹面朝上接入含有草甘膦的诱导培养基上，放置到暗处培养，培养温度为25±1℃，培养30d。
进一步的，选取的健康鳞片，灭菌后切成1.0cm×1.0cm作为外植体。
进一步的，将所述外植体凹面朝上接种在诱导培养基为MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖、且pH＝5.8的固体培养基。
进一步的，所述草甘膦的浓度为2.5mg·L-1。
进一步的，诱导分化条件为放置在暗处培养，培养温度为25±1℃，培养30d。
本发明的有益效果是：通过选用MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖、pH＝5.8的固体诱导培养基对亚洲百合‘小飞碟’鳞片进行诱导，可实现每个鳞片可增殖出35个以上不定芽。
通过选用MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖、pH＝5.8的固体诱导培养基对亚洲百合‘丹蝶’鳞片进行诱导，可实现每个鳞片可增殖出32个以上不定芽。
附图说明
图1为本发明亚洲百合‘小飞碟’鳞片在不同浓度草甘膦的诱导培养基上生长对比图。
图2为本发明亚洲百合‘丹蝶’鳞片在不同浓度草甘膦的诱导培养基上生长对比图。
具体实施方式
为了使本领域的普通技术人员能更好的理解本发明的技术方案，下面结合附图和实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。
实施例1亚洲百合‘小飞碟’鳞片不定芽诱导
选取生长健康的‘小飞碟’的中层鳞片，随后将其切成1.0cm×1.0cm左右的小块作为外植体，优选的将外植体凹面朝上接入MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖、pH＝5.8的固体诱导培养基(如表1所示)，放置到培养室暗培养，培养温度为25±1℃。
在上述不同浓度的培养基中暗培养30d后观察不定芽诱导情况(如图1所示)，统计不定芽诱导率，并进行差异显著性分析，结果如表1所示。
表1含草甘膦的诱导培养基对百合‘小飞碟’鳞片不定芽诱导的影响
由表1可知，含2.5mg·L-1草甘膦的诱导培养基的繁殖系数为35.46±0.68，显著比未加草甘膦的培养基诱导系数高。
实施例2亚洲百合‘丹蝶’鳞片不定芽诱导
选取生长健康的‘丹蝶’的中层鳞片，随后将其切成1.0cm×1.0cm左右的小块作为外植体，接着将外植体凹面朝上接入MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖、pH＝5.8的固体诱导培养基(如表2所示)，放置到培养室暗培养，培养温度为25±1℃。
在上述不同浓度的培养基中暗培养30d后观察不定芽诱导情况(如图2所示)，统计不定芽诱导率，并进行差异显著性分析，结果如表2所示。
表2含草甘膦的诱导培养基对百合‘丹蝶’鳞片不定芽诱导的影响
由表2可知，含2.5mg·L-1草甘膦的诱导培养基的繁殖系数为32.23±0.21，显著比未加草甘膦的培养基诱导系数高。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (6)
1.一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基为MS+6-BA+NAA+草甘膦+蔗糖、且pH＝5.8的固体培养基。
2.根据权利要求1所述的一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基，其特征在于：所述诱导培养基为MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2.5mg·L-1草甘膦+30g·L-1蔗糖。
3.根据权利要求2所述的一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基，其特征在于：所述草甘膦的浓度为2.5mg·L-1。
4.一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取生长健康的百合鳞片，经灭菌后备用；
S2、随后将其切成1.0cm×1.0cm作为外植体；
S3、将外植体凹面朝上接入含有草甘膦的诱导培养基上，放置到暗处培养，培养温度为25±1℃，培养30d。
5.根据权利要求4所述的一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基的培育方法，其特征在于：选取的健康鳞片，灭菌后切成1.0cm×1.0cm作为外植体。
6.根据权利要求4所述的一种提高百合鳞片不定芽诱导培养基的培育方法，其特征在于：诱导分化条件为放置在暗处培养，培养温度为25±1℃，培养30d。
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| 崔祺等: "青素合成调节基因B1 /C1 转化东方百合‘索邦’的研究", 《北京林业大学学报》 * |
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