CN113876834A - 一种中药提取物在制备抗乳腺增生中药产品中的用途 - Google Patents
一种中药提取物在制备抗乳腺增生中药产品中的用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种中药提取物桑叶提取物在制备抗乳腺增生中药产品中的新用途。本发明充分利用中药资源,在制备桑叶提取物的基础上,通过药理实验,开发出桑叶提取物缓解乳腺增生的新用途,该提取物可以添加至不同剂型的产品中去,用于缓解乳腺增生的症状,具有疗效好、副作用小等优点。
Description
技术领域
本发明属于中药医疗领域,具体涉及一种中药提取物桑叶提取物在制备抗乳腺增生中药产品中的新用途。
背景技术
乳腺增生病 (hyperplasia of mammary gland,HMG)又称乳腺结构不良,是乳房的一种非炎症性疾病,又称乳腺小叶增生或慢性囊性乳腺病,是乳腺主质和间质不同程度的增生与复旧不全所致的乳腺结构在数量和形态上的异常。乳腺增生是 25~40 岁女性的多发病与常见病,其临床特点主要为周期性乳房胀痛、乳叶增厚和颗粒性结节。随着生活环境变化、生活节奏加快、社会压力增大等因素,乳腺增生发病率逐年增长。乳腺增生是一种良性增生性疾病,具有癌变的趋势,尤其是非典型性增生更易发展为乳腺癌,因此对于本病应该引起足够的重视,做到早发现、早诊断、早治疗。本病特点是病程长,进展缓慢,易复发,严重危害女性身心健康。
目前临床上对于乳腺增生病的治疗,主要是外科手术和内分泌治疗等西医手段。乳腺的生长发育主要受到下丘脑-垂体-卵巢轴的调控。当此调控轴功能失调,造成内分泌紊乱,致使雌激素水平长期增高而诱发乳腺增生。临床上治疗乳腺增生的西药主要为激素类药物、维生素类药物以及碘制剂。激素类药物,如他莫昔芬,与雌激素竞争受体抑制雌激素的作用,短期疗效虽显著,但因其靶器官广泛,副作用也很明显,不宜长期使用,且停药后复发率高。维生素类药物和碘制剂,前者主要是通过改善肝功能来灭活过多的雌激素,后者促进黄体生成素生成,恢复卵巢功能,平衡雌激素,但它们或是疗效短暂,或是效果不明显,还不能作为治疗乳腺增生症的一线药物。因此,除非症状严重影响生活,西药一般不作为治疗乳腺增生的首选。中医药治疗能够改善患者症状,对质地中等或较软的增生肿块可以起到明显的缩小和消散作用,中医中药治疗乳腺增生由于具有无创伤性、毒副作用小、疗效显著等特点也越来越被人们接受。
桑叶为桑科植物桑(Morus alba L)的干燥叶,性味甘、苦、寒,归肺、肝经,具有疏散风热,清肺润燥,清肝明目的功效,用于风热感冒,肺热燥咳,头晕头痛,目赤昏花等症。桑叶中含有黄酮类、生物碱类、多糖类、酚酸类、香豆素类、氨基酸类、维生素类、脂类、矿物质类等多种化学成分,现代药理研究表明,桑叶具有抗氧化、降血脂、降低心肌耗氧量、降血糖、抗肿瘤和提高免疫等药理作用。目前尚未有报道桑叶提取物用于抗乳腺增生。
发明内容
针对现有乳腺增生症治疗中存在的问题,本发明提供了桑叶提取物的制备方法和新用途,即抗乳腺增生的作用。
为了实现上述目的,本发明采取的技术方案为:取桑叶药材粉碎过筛,加入5-10倍70%-95%乙醇热回流提取2-4个小时,提取3次,提取液减压浓缩进一步干燥后的固体粉末即为桑叶醇提取物。
本发明应用的桑叶提取物可以和药学上允许的任意一种辅料或药物赋形剂制成的产品,其制剂可以是药学上允许的任意一种剂型,包括但不限于片剂、凝胶、乳膏剂、丸剂、液体制剂、颗粒剂、冲剂、软胶丸、软胶囊、滴丸剂、软膏剂;或者作为活性成分和其他抗乳腺增生的中药提取物以及常用辅料配制成制剂上允许的任意一种剂型。所用的辅料可以采用所述剂型常用辅料,复配所用的其他抗乳腺增生的中药提取物(醇提取物或水提物),如活血化瘀中药王不留行提取物、丹参提取物、三棱提取物、泽兰提取物等,清热类中药蒲公英提取物、夏枯草提取物等,软坚散结类中药昆布提取物、海藻提取物、桂花提取物等。
与现有技术比较本发明的有益效果:桑叶提取物能减轻乳腺增生的症状,如减小乳头直径和乳腺小叶体积,能调节机体的雌孕激素分泌水平达到抗乳腺增生的目的。因此,桑叶提取物可制备抗乳腺增生的中药产品,本发明为桑叶提取物提供了新用途,扩大了其应用范围。
附图说明
图1:桑叶提取物对乳腺增生模型小鼠乳腺组织病理学改变的影响
图1 A:正常对照组,腔内见少量分泌物,乳腺组织无明显增生现象;图1 B:模型组的乳腺组织出现明显增生,乳腺导管扩张,腺体分布欠均匀,腺腔中见多量分泌物;图1 C:阳性药(乳康片)组,导管上皮未见明显增生,腺体轻度扩张,腔内见较少量分泌物;图1 D:桑叶提取物低剂量组,腺体未见明显扩张,腔内未见明显分泌物,腺上皮轻度增生;图1 E:桑叶提取物中剂量组,腺体未见明显扩张,腔内见少量分泌物,腺上皮轻度增生;图1 F:桑叶提取物高剂量组,腺体轻度扩张,腔内见多量分泌物,腺上皮未见明确增生。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明效果做进一步说明:
实施例1:制备桑叶提取物
取桑叶药材粉碎过筛,加入5倍75%乙醇热回流提取2-4个小时,提取3次,提取液减压浓缩进一步干燥后的固体粉末即为桑叶醇提取物,提取率约为11%。
实施例2:桑叶提取物对小鼠乳腺增生模型的影响
1 材料
1.1 实验材料
雌性昆明种小鼠 60 只,体重 20~22 g,清洁级,实验动物饲养室室温(22±2)℃,湿度55%~65% ,光照昼夜交替,通风良好。净化工作台,酶联免疫检测仪,电子天平,倒置生物显微镜,电热恒温水槽,全自动离心机。
1. 2药品与试剂
乳康片(安康正大制药有限公司),苯甲酸雌二醇注射液(上海通用药业股份有限公司),黄体酮注射液(浙江仙居制药股份有限公司)。
1.3 实验样品
样品组1为实施例1。
2 实验方法与步骤
2. 1动物分组及造模
取清洁级雌性小鼠 60只,随机分为实验组(50 只)和空白组(10 只),正常空白组10只常规饲养,实验组小鼠以苯甲酸雌二醇小鼠腹腔注射制备乳腺增生模型,每次0.5 mg/kg,1 次/1 日。造模第4d,以小鼠出现乳腺隆起外观为模型制备成功,按体重随机分为 5组,每组各 10 只,分别为模型组、阳性组(乳康片组)、实施例1组(低剂量组、中剂量组、高剂量组)。前 25 d 给予经橄榄油稀释的苯甲酸雌二醇注射液(0.5 mg·kg-1 ),1 次/1 日,腹腔注射25 d。第26 天改为橄榄油稀释的黄体酮注射液(5 mg·kg-1 ),连续肌肉注射 5d。
2. 2给药
造模第5d灌胃给药,阳性组0.4 mg·kg-1,实施例1组(低剂量组0.167mg·kg-1、中剂量组0.5 mg·kg-1、高剂量组1.5 mg·kg-1),模型组和对照组以同体积生理盐水 ig,每天灌胃1次,连续灌胃30 d。
2. 3 标本采取及指标观察
于末次给药后第二天,用电子天平称量小鼠体重。脱毛后,用游标卡尺测量小鼠右下腹部乳头直径。摘眼球取血1mL,放置30 min,4000 r·min-1离心5min,取血清,置-20℃冰箱保存送南京军区总医院生殖医学中心测定雌二醇(E2)、孕酮(P)含量。取血后,完整剥取小鼠胸部,乳腺用10%的甲醛固定,常规石蜡包埋、切片,HE染色,在光镜下观察小叶腺泡、导管上皮增生等乳腺组织情况。
2. 4 统计学处理
采用 SPSS 20. 0 统计软件分析,多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA) 检验,成对组间比较采用 t 检验,以 P<0.05 为差异具有统计学意义。
3 结果
3. 1 对乳腺增生小鼠体重的影响
模型组注射苯甲酸雌二醇后,体重明显增大,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。与模型组比较,乳康片阳性药物组连续给药 30 天后,体重明显减小(P<0.05);实施例1提取物中剂量组体重显著降低 (P<0.05),桑叶提取物高、低剂量组体重极显著降低(P<0.001)。见表 1。小鼠注射苯甲酸雌二醇后体重明显增加,模型组与对照组比较有显著性差异(P<0.01) ,这可能是因为模型组小鼠体内雌激素水平增高,导致小鼠代谢水平紊乱体重增大,而桑叶提取物可能通过调理小鼠体内雌激素水平,使小鼠与对照组小鼠体重无明显差异。
表 1 桑叶提取物对乳腺增生小鼠体重和乳头直径的影响(mm)
编号 | 组别 | 动物只数/只 | 剂量/ mg·kg<sup>-1</sup> | 乳头直径/mm | 体重/g |
1 | 对照组 | 10 | - | 0.6000±0.029*** | 32.22±0.7597** |
2 | 模型组 | 10 | - | 0.8667±0.024 | 35.56±0.7474 |
3 | 阳性药物组 | 10 | 0.4 | 0.7400±0.027** | 32.60±0.7630* |
4 | 实施例1低剂量组 | 10 | 0.167 | 0.7000±0.030*** | 29.80 ±0.7118*** |
5 | 实施例1中剂量组 | 10 | 0.5 | 0.6889±0.031*** | 33.20±0.6799* |
6 | 实施例1高剂量组 | 10 | 1.5 | 0.6778±0.028*** | 31.22±0.5958*** |
注: 与模型对照组比较,* P<0.05,**P<0.01,*** P<0.001
3. 2 对表观指标乳头直径的影响
模型组注射苯甲酸雌二醇后,乳头直径明显增大,与对照组比较有显著性差异(P<0.001),说明模型建立成功。与模型组比较,乳康片阳性药物组连续给药 30 天后,乳头直径明显减小(P<0.01);桑叶提取物高、中、低剂量组乳头直径明显减小(P<0.001);桑叶提取物高中低剂量组其作用强度与与乳康片组相比,无统计学差异,见表1。结果表明,桑叶提取物可改善小鼠乳腺增生模型的表观指标,对实验性小鼠乳腺增生具有较好的预防作用。
3. 3 各组乳腺增生模型小鼠生化指标雌二醇、孕酮水平比较
与对照组比较,模型组小鼠血清 E2 水平显著升高(P<0.01)、血清 P水平显著降低( P<0.01),说明造模成功。与模型组比较,桑叶提取物高中低剂量组可使小鼠血清 E2水平显著降低(P<0.05)、桑叶提取物高剂量组可使小鼠血清P水平明显升高(P<0. 05)。见表2。此结果表明,桑叶提取物可改善小鼠乳腺增生模型的某些生化指标,对实验性小鼠乳腺增生具有较好的预防和治疗作用,其机理可能是通过抑制血清中雌二醇的水平,减少雌二醇对乳腺组织的刺激而达到预防乳腺增生的作用。
表2 各组乳腺增生模型小鼠E2、P含量的影响( x±s,ng·L-1)
编号 | 组别 | 动物只数/只 | 剂量/ mg·kg<sup>-1</sup> | E<sub>2</sub> / ng·L<sup>-1</sup> | P / ng·L<sup>-1</sup> |
1 | 对照组 | 10 | - | 112.3±13.38** | 15.99±6.352** |
2 | 模型组 | 10 | - | 181.3±12.98 | 12.54±1.382 |
3 | 阳性药物组 | 10 | 0.4 | 155.1±9.280* | 14.56±1.579 |
4 | 实施例1低剂量组 | 10 | 0.167 | 153.4 ±8.000* | 14.88±1.154 |
5 | 实施例1中剂量组 | 10 | 0.5 | 154.8 ±8.695* | 13.71 ±1.188 |
6 | 实施例1高剂量组 | 10 | 1.5 | 137.6 ±5.522* | 16.50±1.061* |
注: 与模型对照组比较,* P<0.05,**P<0.01,*** P<0.001
3.4 对乳腺组织病理学改变的影响
如附图1所示:光镜下观察到,正常对照组,腔内见少量分泌物,乳腺组织无明显增生现象(图1 A)。模型组的乳腺组织中导管出现明显增生,乳腺导管扩张,腺体分布欠均匀,腺腔中见多量分泌物 (图1 B)。阳性药(乳康片)组,导管上皮未见明显增生,腺体轻度扩张,腔内见较少量分泌物 (图1 C)。桑叶提取物低剂量组,腺体未见明显扩张,腔内未见明显分泌物,腺上皮轻度增生(图1 D)。桑叶提取物中剂量组,腺体未见明显扩张,腔内见少量分泌物,腺上皮轻度增生(图1 E)。桑叶提取物高剂量组,腺体轻度扩张,腔内见多量分泌物,腺上皮未见明确增生(图1 F)。实验结果表明,桑叶提取物干预后,乳腺小叶轻度增生或未见明确增生,增生情况得到改善,充分证明桑叶提取物能够改善实验性小鼠乳腺增生组织病理形态,从而发挥其抗乳腺增生作用,并促进其向正常发展,因此桑叶提取物可抗乳腺小叶增生。
以上实验结果表明,桑叶提取物在改善乳腺增生模型小鼠表观指标、生化指标及组织病理学指标方面,具有显著的疗效。提示桑叶提取物对乳腺增生具有一定的预防和治疗作用。
实施例3:桑叶提取物乳膏
桑叶提取物1g,硬脂酸100g,十六醇20g,单硬脂酸甘油酯10g,液体石腊10g,羟苯甲酯0.8g,羟苯丁酯0.2g,甘油140g,氢氧化钾5g,乙醇10g,蒸馏水加至1000g。
实施例4:桑叶提取物凝胶
桑叶提取物1g,PEG400450g,己二醇80g,吐温8020g,卡波姆30g,乙醇胺6ml,苯甲醇10g,蒸馏水加至1000g。
实施例5:桑叶提取物胶囊
桑叶提取物100g,淀粉80g,羧甲基淀粉钠24g,糊精17g,70%乙醇适量,制成1000粒(每粒含桑叶提取物100mg)。
实施例6:桑叶提取物片
桑叶提取物1000g,乳糖55g,可压性淀粉15g,羟丙纤维素10g,硬脂酸镁5g,70%乙醇适量,制成1000片(每片含桑叶提取物1000mg)。
实施例7:桑叶提取物颗粒剂
桑叶提取物10g,乳糖粉800g,硬脂酸镁194g,70%乙醇适量,制成1000克颗粒(每g颗粒制中含桑叶提取物10mg)。
实施例8:桑叶提取物软胶囊
桑叶提取物50g,大豆油10g,明胶5g,甘油5g,蒸馏水7g,制成1000粒(每粒含桑叶提取物50mg)。
实施例9:桑叶提取物、王不留行提取物、蒲公英提取物及海藻提取物四种组合物乳膏
桑叶提取物1g,王不留行提取物1g,蒲公英提取物1g,海藻提取物1g,硬脂酸100g,十六醇20g,单硬脂酸甘油酯10g,液体石腊10g,羟苯甲酯0.8g,羟苯丁酯0.2g,甘油140g,氢氧化钾5g,乙醇10g,蒸馏水加至1000g。
实施例10:桑叶提取物、丹参提取物、夏枯草提取物及海藻提取物四种组合物凝胶
桑叶提取物1g,丹参提取物1g,夏枯草提取物1g,海藻提取物1g,PEG400 450g,己二醇80g,吐温8020g,卡波姆30g,乙醇胺6ml,苯甲醇10g,蒸馏水加至1000g。
实施例11:桑叶提取物、泽兰提取物、蒲公英提取物及桂花提取物四种组合物凝胶
桑叶提取物1g,泽兰提取物1g,蒲公英提取物1g,桂花水提取物1g,PEG400 450g,己二醇80g,吐温8020g,卡波姆30g,乙醇胺6ml,苯甲醇10g,蒸馏水加至1000g。
实施例12:桑叶提取物、三棱提取物、夏枯草提取物及桂花提取物四种组合物凝胶
桑叶提取物1g,三棱提取物1g,夏枯草提取物1g,桂花提取物1g,PEG400 450g,己二醇80g,吐温8020g,卡波姆30g,乙醇胺6ml,苯甲醇10g,蒸馏水加至1000g。
Claims (5)
1.桑叶提取物在制备抗乳腺增生中药产品中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于桑叶提取物作为活性成分和常用辅料配制成中药产品的任意一种剂型;或者作为活性成分和其他抗乳腺增生的中药提取物以及常用辅料配制成中药制剂产品上允许的任意一种剂型。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于产品剂型可以是片剂、凝胶、乳膏剂、丸剂、液体制剂、颗粒剂、冲剂、软胶丸、软胶囊、滴丸剂、软膏剂等。
4.根据权利要求2所述的用途,所用的辅料可以采用所述剂型常用辅料,复配所用的其他中药提取物为抗乳腺增生中药提取物(醇提取物或水提取物),如活血化瘀中药王不留行提取物、丹参提取物、三棱提取物、泽兰提取物等,清热类中药蒲公英提取物、夏枯草提取物等,软坚散结类中药昆布提取物、海藻提取物、桂花提取物等。
5.根据权利要求1所述的桑叶提取物,其特征在于:制备方法是通过乙醇提取桑叶得到的醇提物干燥后的固体,提取方法可以为热回流提取法、煎煮法等;优选浓度为70-90%乙醇提取得到的提取物干燥后的固体粉末,干燥方法可以为喷雾干燥、高温干燥、低温冷冻干燥等。
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PB01 | Publication | ||
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GR01 | Patent grant | ||
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