CN113790945B - 一种改良的苏木精染液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改良的苏木精染液及其制备方法，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1‑2份，1,2‑丙二醇3‑8份，无水乙醇8‑12份，十八水硫酸铝4‑6份，十二水硫酸铝钾1.0‑2.0份，氧化剂0.1‑0.5份，冰醋酸1‑2份，蒸馏水68‑81份。本发明制备得到的苏木精染色液表面几乎无金属氧化膜覆盖，下层析出的沉淀物少，细胞核着色能力强，3分钟之内可染成紫蓝色，使用寿命长，染切片数量是经典配方的3倍。
Description
技术领域
本发明涉及染色液技术领域，具体涉及一种改良的苏木精染液及其制备方法。
背景技术
病理诊断是一种形态学诊断，主要是对离体组织进行固定、取材、再固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、摊片、烘片、染色、封片等处理后在显微镜下进行形态学观察而给出诊断。染色的好与坏直接影响病理诊断，染色液的好与坏直接影响染色的好与坏。病理染色有多种方法，比如，常规苏木精-伊红染色法(简称H-E染色法)，特使染色法、免疫组化染色法以及PCR染色法等等。苏木精-伊红染色法(简称H-E染色法)是一种经典古老的染色法，其具体操着步骤有：脱蜡、由高浓度至低浓度梯度至水、浸染或滴染苏木精染液(核染)、水洗、分化、水洗、返蓝、水洗、浸染或滴染伊红染液、由低浓度至高浓度梯度脱水，烘干、封片等步骤。苏木精染液的好与坏直接影响细胞核着色效果，细胞核以染成紫蓝色、背景清晰为佳。细胞核着色快又佳可证明苏木精染色液的质量不错，如果染液使用寿命长，那其质量更佳。到现在为止配制苏木精染液的企业不少于五十家。为了制备着色快、背景清晰、使用寿命长的苏木精染液，每一家企业都在不断地加大科研投入，在经典的配制基础进行改良。苏木精染液经典配制方法有三种：(1)氧化汞氧化法(Harry’s)，(2)碘酸钠氧化法(Mayer’s)，(3)自然氧化法(Ehrlich’s)。三种经典配制方法中，第一种、第三种苏木精染液的表层覆盖一层金属氧化膜，随时间的延长金属氧化膜越来越厚，下层析出明矾沉淀物，随时间的延长沉淀物增多，如遇气温下降沉淀物更多，着色能力和使用寿命随着时间推移而下降；第二种苏木精染液的表层覆盖的金属氧化膜较薄，随时间的延长金属氧化膜增长较慢，下层析出硫酸铝沉淀物，随时间的延长沉淀物增多，如遇气温下降沉淀物更多，着色能力和使用寿命随着时间推移而下降。
发明内容
本发明所要解决的问题是：提供一种改良的苏木精染液及其制备方法，制备得到的苏木精染色液表面几乎无金属氧化膜覆盖，下层析出的沉淀物少，细胞核着色能力强(3分钟之内可染成紫蓝色)，使用寿命长(染切片数量是经典配方的3倍)。
本发明为解决上述问题所提供的技术方案为：一种改良的苏木精染液，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1-2份，1,2-丙二醇3-8份，无水乙醇8-12份，十八水硫酸铝4-6份，十二水硫酸铝钾1.0-2.0份，，氧化剂0.1-0.5份，冰醋酸1-2份，蒸馏水68-81份。
优选的，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1.5份，1,2-丙二醇5份，无水乙醇10份，十八水硫酸铝5份，十二水硫酸铝钾1份，氧化剂0.3份，冰醋酸2份，蒸馏水75份。
优选的，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉2份，1,2-丙二醇8份，无水乙醇12份，十八水硫酸铝6份，十二水硫酸铝钾2份，氧化剂0.5份，冰醋酸2份，蒸馏水68份。
本发明还公开了一种如上述任意一项所述的改良的苏木精染液的制备方法，所述方法包括以下步骤
S1、按重量份数称取苏木精粉置烧杯中，加无水乙醇溶解，再加适量的95℃蒸馏水使苏木精粉完全溶解，备用；
S2、称取十八水硫酸铝，十二水硫酸铝钾，1,2-丙二醇，置同一配料缸中，加95℃蒸馏水使硫酸铝和硫酸铝钾完全溶解，备用；
S3、将通过步骤S1制得的溶液加到步骤S2中的配料缸中，再用步骤S2中的溶液清洗步骤S1中的烧杯2次并将清洗液并入步骤S2中的配料缸中，用玻璃棒搅匀；
S4、擦干配料缸外壁和底部的水分，置电炉上，小火加热至溶液沸腾，加热过程中要间断性搅拌，防止炸缸；
S5、将电炉功率调至最小，在搅拌状态下加入氧化剂，氧化剂加完后调大电炉功率保持微沸腾状态，不停搅拌，直至溶液由紫色变为酱紫色并且粘稠后关闭电炉电源；
S6、将配料缸移至冰水中冰浴，至完全冷却后后取出；
S7、加冰醋酸，搅匀，调pH值至3.5，静置一周；
S8、染色效果检测；
S9、合格后，过滤，灌装，贴标签、装箱入库。
优选的，所述步骤S1中蒸馏水的温度为95℃。
优选的，所述步骤S2中蒸馏水的温度为95℃。
优选的，所述步骤S6中冷却时间为2小时。
优选的，所述步骤S8中染色效果合格的标准为三分钟之内细胞核着紫蓝色，背景清晰。
与现有技术相比，本发明的优点是：
本发明中用到了1,2-丙二醇，1,2-丙二醇具有：
(1)防止苏木精染液中二氧化苏木素进一步氧化成三氧化苏木素或四氧化苏木素；
(2)不会象无水乙醇一样降低硫酸铝、硫酸铝钾的溶解度。Al3+离子是媒染剂，其浓度下降直接影响氧化苏木素对DNA的上染率。氧化苏木素羰基中的氧原子最外层轨道含有孤对电子，能与Al3+、Fe3+等金属离子形成外轨型配合物。氧化苏木素通过金属离子与细胞核内DNA双链外侧磷酸基上带有孤对电子的氧原子形成配位键而使细胞核内的DNA着色。媒染剂的使用不但大大提高了氧化苏木素对DNA的上染率，也加强了染液的水洗牢度；
(3)具有保湿、调湿，助清洗等作用；
(4)防冻。
具体实施方式
以下将通过具体实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。
应当理解，当在本说明书和所附权利要求书中使用时，术语“包括”和“包含”指示所描述特征、整体、步骤、操作、元素和/或组件的存在，但并不排除一个或多个其它特征、整体、步骤、操作、元素、组件和/或其集合的存在或添加。
还应当理解，在此本发明实施例说明书中所使用的术语仅仅是出于描述特定实施例的目的而并不意在限制本发明实施例。如在本发明实施例说明书和所附权利要求书中所使用的那样，除非上下文清楚地指明其它情况，否则单数形式的“一”、“一个”及“该”意在包括复数形式。
实施例1
一种改良的苏木精染液，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1.5份，1,2-丙二醇5份，无水乙醇10份，十八水硫酸铝5份，十二水硫酸铝钾1份，氧化剂0.3份，冰醋酸2份，蒸馏水75份。
实施例2
一种改良的苏木精染液，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉2份，1,2-丙二醇8份，无水乙醇12份，十八水硫酸铝6份，十二水硫酸铝钾2份，氧化剂0.5份，冰醋酸2份，蒸馏水68份。
实施例3
一种改良的苏木精染液，包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1.0份，1,2-丙二醇3份，无水乙醇8份，十八水硫酸铝4份，十二水硫酸铝钾1份，氧化剂0.1份，冰醋酸2份，蒸馏水81份。
本发明还公开了一种改良的苏木精染液的制备方法，所述方法包括以下步骤
S1、按重量份数称取苏木精粉置烧杯中，加无水乙醇溶解，再加适量的95℃蒸馏水使苏木精粉完全溶解，备用；
S2、称取十八水硫酸铝，十二水硫酸铝钾，1,2-丙二醇，置同一配料缸中，加95℃蒸馏水使硫酸铝和硫酸铝钾完全溶解，备用；
S3、将通过步骤S1制得的溶液加到步骤S2中的配料缸中，再用步骤S2中的溶液清洗步骤S1中的烧杯2次并将清洗液并入步骤S2中的配料缸中，用玻璃棒搅匀；
S4、檫干配料缸外壁和底部的水分，置电炉上，小火加热至溶液沸腾，加热过程中要间断性搅拌，防止炸缸；
S5、将电炉功率调至最小，在搅拌状态下加入氧化剂，氧化剂加完后调大电炉功率保持微沸腾状态，不停搅拌，直至溶液由紫色变为酱紫色并且粘稠后关闭电炉电源；
S6、将配料缸移至冰水中冰浴，至完全冷却后后取出；
S7、加冰醋酸，搅匀，调pH值至3.5，静置一周；
S8、染色效果检测；
S9、合格后，过滤，灌装，贴标签、装箱入库。
其中，所述步骤S1中蒸馏水的温度为95℃。
其中，所述步骤S2中蒸馏水的温度为95℃。
其中，所述步骤S6中冷却时间为2小时。
其中，所述步骤S8中染色效果合格的标准为三分钟之内细胞核着紫蓝色，背景清晰。
以上仅就本发明的最佳实施例作了说明，但不能理解为是对权利要求的限制。本发明不仅局限于以上实施例，其具体结构允许有变化。凡在本发明独立权利要求的保护范围内所作的各种变化均在本发明保护范围内。
Claims (4)
1.一种改良的苏木精染液的制备方法，其特征在于：包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1-2份，1,2-丙二醇3-8份，无水乙醇8-12份，十八水硫酸铝4-6份，十二水硫酸铝钾1.0-2.0份，氧化剂0.1-0.5份，冰醋酸1-2份，蒸馏水68-81份；
所述方法包括以下步骤，
S1、按重量份数称取苏木精粉置烧杯中，加无水乙醇溶解，再加适量的95℃蒸馏水使苏木精粉完全溶解，备用；
S2、称取十八水硫酸铝，十二水硫酸铝钾，1,2-丙二醇，置同一配料缸中，加95℃蒸馏水使硫酸铝和硫酸铝钾完全溶解，备用；
S3、将通过步骤S1制得的溶液加到步骤S2中的配料缸中，再用步骤S2中的溶液清洗步骤S1中的烧杯2次并将清洗液并入步骤S2中的配料缸中，用玻璃棒搅匀；
S4、擦干配料缸外壁和底部的水分，置电炉上，小火加热至溶液沸腾，加热过程中要间断性搅拌，防止炸缸；
S5、将电炉功率调至最小，在搅拌状态下加入氧化剂，氧化剂加完后调大电炉功率保持微沸腾状态，不停搅拌，直至溶液由紫色变为酱紫色并且粘稠后关闭电炉电源；
S6、将配料缸移至冰水中冰浴，至完全冷却后取出；
S7、加冰醋酸，搅匀，调pH值至3.5，静置一周；
S8、染色效果检测；
S9、合格后，过滤，灌装，贴标签、装箱入库。
2.根据权利要求1所述的一种改良的苏木精染液的制备方法，其特征在于：包括以下重量份数配比的原料，苏木精粉1.5份，1,2-丙二醇5份，无水乙醇10份，十八水硫酸铝5份，十二水硫酸铝钾1份，氧化剂0.3份，冰醋酸2份，蒸馏水75份。
3.根据权利要求1所述的一种改良的苏木精染液的制备方法，其特征在于：所述步骤S6中冷却时间为2小时。
4.根据权利要求1所述的一种改良的苏木精染液的制备方法，其特征在于：所述步骤S8中染色效果合格的标准为三分钟之内细胞核着紫蓝色，背景清晰。
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