CN113759027B - 一种中药单煎合并物质的质量评价方法及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种中药单煎合并物质的质量评价方法及其应用，其中质量评价方法包括：至少采用特征图谱或指纹图谱的关键质量属性相似系数Scqa作为评价指标对单煎合并物质的质量进行评价；评价过程为：特征图谱或指纹图谱的Scqa值的数值范围在0.7‑1.3的特征峰个数为总特征峰个数的80％以上；其中，Scqa值＝单煎合并物质中各特征峰对应S峰的相对峰面积/共煎物质中各特征峰对应S峰的相对峰面积。本发明能够更加简便且准确的评断出单煎合并物质与共煎物质是否更为一致。

Description

一种中药单煎合并物质的质量评价方法及其应用
技术领域
本发明涉及中药领域，具体涉及一种中药单煎合并物质的质量评价方法及其应用。
背景技术
为方便临床用药，由单味饮片提取、浓缩、干燥及制剂成型而得的中药配方颗粒应运而生，且越来越受到市场的认可。该中药配方颗粒是以饮片投料，经水提、浓缩、干燥、制粒而成，其保持了传统中药汤剂水煎提取的物质基础，免除了临床服用前的煎煮环节，是中药汤剂发展的重要实践方式。但是中药传统除少数品种需单煎外，多数以处方饮片共同煎煮为多。
而通常单煎和共煎获得的提取物质的物质组成存在差异，进而导致单煎和共煎所含的物质基础通常不太一致，进而无法保证临床疗效的一致性。因此，如何对单独、共同煎煮的产品进行质量评价越来越受到研究者的关注。目前的药学研究对比方法，多数是单独提取获得的物质按比例混合后与共同提取获得的实物进行片面的比较分析，例如：采用有效/指标成分含量的差异进行比较，指纹图谱相似度进行比较，特征图谱相对保留时间或相对峰面积进行比较等。
目前采用的上述比较分析方法均只是对实物进行片面比较，存在无法有效判断单煎与共煎物质是否一致的问题。
发明内容
因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中评价单煎药剂的方法均是采用有效/指标成分含量、指纹图谱相似度或特征图谱相对保留时间或相对峰面积等片面的评价手段，进而无法判定单煎合并物质与共煎物质是否在整体上不一致的缺陷；从而提供能够更加简便且准确的评断出单煎合并物质与共煎物质是否更为一致的一种中药单煎合并物质的质量评价方法及其应用。
一种中药单煎合并物质的质量评价方法，包括：至少采用特征图谱或指纹图谱的关键质量属性相似系数Scqa作为评价指标对单煎合并物质的质量进行评价；评价过程为：特征图谱或指纹图谱的Scqa值的数值范围在0.7-1.3的特征峰个数为总特征峰个数的80％以上；
其中，特征图谱或指纹图谱的关键质量属性相似系数Scqa的获取过程为：获得单煎合并物质和共煎物质，单煎合并物质与共煎物质的制备工艺相同；将二者进行检测获得特征图谱或指纹图谱，采用共煎物质中具有的一种成分作为指标成分，采用该指标成分所对应的特征峰作为S峰，获得的特征图谱或指纹图谱的各个特征峰相对于S峰的相对峰面积，根据各特征峰的相对峰面积计算Scqa值；Scqa值＝单煎合并物质中各特征峰对应S峰的相对峰面积/共煎物质中各特征峰对应S峰的相对峰面积。
所述评价指标还包括特征图谱或指纹图谱的相对保留时间的S值，相对峰保留时间的S值＝单煎合并物质中各特征峰对应S峰的相对保留时间/共煎物质中各特征峰对应S峰的相对保留时间，S值的范围为0.90-1.10，优选为0.95-1.05。
所述单煎合并物质和共煎物质为提取液、浓缩液、干燥粉或制剂。即单煎合并物质可以为提取液、浓缩液、干燥粉或制剂；相应的，共煎物质也可以是与单煎合并物质类型相同的提取液、浓缩液、干燥粉或制剂。具体的，单煎合并物质为提取液时，共煎物质也为提取液；以此类推，单煎合并物质为制剂时，共煎物质也为制剂。
所述共煎物质与单煎合并物质采用同批次的药材。
上述一种中药单煎合并物质的质量评价方法在鉴别中药组合物在制备单煎合并物质中的应用。
所述中药组合物为改善肺部炎症的中药组合物或改善慢性心力衰竭的中药组合物。
所述改善肺部炎症的中药组合物的原料包括金银花、连翘、桑叶、菊花、薏苡仁、浙贝母和苦杏仁；
所述改善肺部炎症的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法为高效液相色图谱法，该高效液相色图谱法的色谱条件如下：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长：230-250nm；以乙腈为流动相A，以0.08～0.12％体积浓度的磷酸水溶液为流动相B，按以下梯度洗脱程序进行洗脱：
Figure BDA0002985221320000021
Figure BDA0002985221320000031
上述梯度洗脱程序中，A11为6％±2％，A12为14％±2％，A13为25％±2％，A14为40％±2％，A15为80％±2％，且A11＜A12＜A13＜A14＜A15。
色谱柱的柱长为100-150mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.8μm，流速为0.2-0.4ml/min。
所述改善慢性心力衰竭的中药组合物的原料包括茯苓、桂枝、白术、甘草；
所述改善肺部炎症的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法为高效液相色图谱法，该高效液相色图谱法的色谱条件如下：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长：237nm；以乙腈为流动相A，以0.05％体积浓度的磷酸水溶液为流动相B，按以下梯度洗脱程序进行洗脱：
Figure BDA0002985221320000032
在上述特征图谱或指纹图谱的检测方法中，色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.7μm，流速为0.3ml/min。
本发明技术方案，具有如下优点：
1.本发明提供的了一种新的质量评价的指标Scqa值，通过Scqa值可以有效评价出单煎合并物质与共煎物质是否在整体上一致，当特征图谱或指纹图谱的Scqa值的数值范围在0.7-1.3的特征峰个数为总特征峰个数的80％以上时，可以有效证明单煎合并物质与共煎物质的物质组成和配比基本一致，进而可以使单煎合并物质的临床疗效与共煎物质的临床疗效一致。
2.本发明提供的评价方法中还包括特征图谱或指纹图谱的相对保留时间的S值，将S值的范围设置为0.90-1.10，优选为0.95-1.05，可以进一步在无需对照品溶液的情况下，有效保证单煎合并物质与共煎物质的物质组成的一致性，提高临床疗效一致性和安全性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明中实施例1中共煎提取液的特征图谱。
图2是本发明中实施例1中小鼠肺组织的病理切片图。
图3是本发明中实施例1中TNFα、IL-6的检测结果柱状图。
图4是本发明中实施例2的TNFα、IL-6等指标结果柱状图。
图5是本发明中实施例3中TNFα、IL-6的检测结果柱状图。
图6是本发明中实施例4中共煎提取液的特征图谱。
图7是本发明中实施例4中IL-6、BNP的检测结果柱状图。
具体实施方式
实施例1
一种中药单煎合并提取液质量评价方法，本实施例中考察改善肺部炎症的中药组合物的单煎合并物质的质量，该改善肺部炎症的中药组合物的配方为：金银花25份，连翘25份，桑叶10份，菊花8份，薏苡仁25份，浙贝母10份，苦杏仁6份。具体如下：
1、单共煎提取液的制备
单煎合并提取液：分别取处方中各味药饮片，各加12倍量水；一煎加热提取90分钟，过滤，收集滤液；二煎加10倍量水加热提取90分钟，过滤，收集滤液，合并滤液，即得。
共煎提取液：取处方中各味药饮片，加12倍量水；一煎加热提取90分钟，过滤，收集滤液；二煎加10倍量水加热提取90分钟，过滤，收集滤液，即得。
2、单共煎提取液的高效液相指纹/特征图谱的获取
色谱条件与系统适应性以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长240nm；以乙腈为流动相A，以0.1％体积浓度的磷酸溶液为流动相B，按以下梯度洗脱程序进行洗脱，按以下表1所示的梯度洗脱程序进行洗脱。
表1梯度洗脱表
Figure BDA0002985221320000041
Figure BDA0002985221320000051
色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.8μm，流速为0.3ml/min。
对照品溶液的制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70％甲醇制成每1ml含40μg绿原酸的溶液，即得(10℃以下保存)；
供试品溶液的制备：分别取上述单煎合并提取液与共煎提取液，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液、单煎合并提取液制备得到的供试品溶液与共煎提取液制备得到的供试品溶液各3μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
3、特征图谱或指纹图谱的处理结果
单煎合并提取液与共煎提取液的指纹图谱相似度为96.4％。共煎的特征图谱如图1所示，该单煎合并提取液与共煎提取液的特征图谱中均应呈现32个特征峰，其中32个特征峰的相对保留时间和相对峰面积，以及对应计算得到的S值和Scqa值如表2和表3所示。
表2
Figure BDA0002985221320000052
Figure BDA0002985221320000061
表3
Figure BDA0002985221320000062
Figure BDA0002985221320000071
通过上述表格结果可知：单煎合并提取液与共煎提取液的特征图谱相对保留时间的各个特征峰的S值均为1.00，有26个特征峰相对峰面积的Scqa在0.7-1.3之间，占32个总特征峰的81％。
4、单共煎提取液的效果验证
对上述单煎合并提取液与共煎提取液的药效进行检测，检测方法如下：选择6-8周，体重18-22克的C57BL/6雄性小鼠作为研究对象，随机分为4组，每组6只。空白组小鼠不予以任何处理；对照组小鼠采用2mg/kg的内毒素气管内滴注(LPS)，药物处理组小鼠分为两组，在小鼠采用2mg/kg的内毒素气管内滴注后，再分别采用本实施例1中的单煎合并提取液和共煎提取液(0.2ml/10g)进行灌喂。所有组小鼠均在LPS处理24小时后收集肺组织及肺泡灌洗液(BALF)，制备苏木精-伊红染色法病理切片，用于观察肺组织病理学改变；采用酶联免疫吸附实验检测BALF中炎症因子TNFα、IL-6的表达水平。
其中，肺组织病理学切片如图2所示，TNFα、IL-6的表达水平如图3所示。
通过上述检测结果可知：共煎提取液能够改善LPS诱导的肺组织损伤程度，可明显减轻小鼠肺组织中间质水肿出血、炎症细胞浸润，使肺泡结构趋于完整；降低BALF中炎性因子TNFα、IL-6水平。以上结果提示，共煎提取液和单煎合并提取液对LPS诱导的肺组织损伤具有保护作用。共煎提取液和单煎合并提取液对TNFα、IL-6等指标的改善并无显著性的差异，表明了二者在改善肺部炎症方面疗效相当。
实施例2
一种中药单煎合并物质的质量评价方法，本实施例中改善肺部炎症的中药组合物的配方为：金银花30份，连翘30份，桑叶15份，菊花10份，薏苡仁30份，浙贝母15份，苦杏仁9份。具体考察过程如下：
1、单共煎浓缩液的制备
单煎合并浓缩液：分别取处方中各味药饮片，分别进行煎煮，各加10倍量水；一煎加热提取60分钟，过滤，收集滤液；二煎加8倍量水加热提取60分钟，过滤，收集滤液，60℃进行减压浓缩至相对密度1.05～1.09(60℃)，合并浓缩液，即得。
共煎浓缩液：取处方中各味药饮片，加10倍量水；一煎加热提取60分钟，过滤，收集滤液；二煎加8倍量水加热提取60分钟，过滤，收集滤液，60℃进行减压浓缩至相对密度1.05～1.09(60℃)，即得。
2、单共煎浓缩液的高效液相指纹/特征图谱的获取
色谱条件与系统适应性以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长230nm；以乙腈为流动相A，以0.08％体积浓度的磷酸溶液为流动相B，按以下表4的梯度洗脱程序进行洗脱。
表4梯度洗脱表
Figure BDA0002985221320000081
色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.8μm，流速为0.4ml/min。
对照品溶液的制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70％甲醇制成每1ml含40μg绿原酸的溶液，即得(10℃以下保存)；
供试品溶液的制备：分别取上述单煎合并浓缩液与共煎浓缩液10ml于50ml容量瓶中，加入50％甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液、单煎合并浓缩液制备得到的供试品溶液与共煎浓缩液制备得到的供试品溶液各3μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
3、特征图谱或指纹图谱的处理结果
单煎合并浓缩液与共煎浓缩液的指纹图谱相似度为97.1％。特征图谱中均应呈现32个特征峰，其中32个特征峰的相对保留时间和相对峰面积，以及对应计算得到的S值和Scqa值如表5和表6所示。
表5
峰号 标准品相对保留时间 供试品相对保留时间 S值
1 0.648 0.650 1.00
2 0.680 0.685 1.01
3 0.878 0.880 1.00
4(S) 1.000 1.000 1.00
5 1.121 1.123 1.00
6 1.239 1.238 1.00
7 1.312 1.311 1.00
8 1.358 1.361 1.00
9 1.409 1.408 1.00
10 1.414 1.418 1.00
11 1.441 1.440 1.00
12 1.587 1.590 1.00
13 1.652 1.650 1.00
14 1.702 1.698 1.00
15 1.738 1.737 1.00
16 1.761 1.758 1.00
17 1.785 1.780 1.00
18 1.808 1.805 1.00
19 1.849 1.842 1.00
20 1.909 1.910 1.00
21 1.968 1.966 1.00
22 1.989 1.987 1.00
23 2.103 2.101 1.00
24 2.138 2.137 1.00
25 2.231 2.229 1.00
26 2.268 2.266 1.00
27 2.300 2.301 1.00
28 2.449 2.450 1.00
29 2.925 2.921 1.00
30 2.960 2.951 1.00
31 2.986 2.988 1.00
32 3.096 3.086 1.00
表6
Figure BDA0002985221320000091
Figure BDA0002985221320000101
通过上述表格结果可知：单煎合并浓缩液与共煎浓缩液的特征图谱相对保留时间的各个特征峰的S值均在0.95-1.05之间，有26个特征峰相对峰面积的Scqa在0.7-1.3之间，占32个总特征峰的81％。
4、单共煎浓缩液的效果验证
对上述单煎合并浓缩液与共煎浓缩液的药效进行检测，检测方法如下：选择6-8周，体重18-22克的C57BL/6雄性小鼠作为研究对象，随机分为4组，每组6只。空白组小鼠不予以任何处理；对照组小鼠采用2mg/kg的内毒素气管内滴注(LPS)，药物处理组小鼠分为两组，在小鼠采用2mg/kg的内毒素气管内滴注后，再分别采用本实施例2中的单煎合并浓缩液与共煎浓缩液共煎物质(0.04ml/10g)进行灌喂。
所有组小鼠均在LPS处理24小时后收集肺组织及肺泡灌洗液(BALF)，制备苏木精-伊红染色法病理切片，用于观察肺组织病理学改变；采用酶联免疫吸附实验检测BALF中炎症因子TNFα、IL-6的表达水平，如图4所示。
通过上述检测结果可知：单煎合并浓缩液与共煎浓缩液对TNFα、IL-6等指标的改善并无显著性的差异，表明了二者在改善肺部炎症方面疗效相当。
实施例3
一种中药单煎合并物质的质量评价方法，本实施例中改善肺部炎症的中药组合物的配方为：金银花35份，连翘35份，桑叶20份，菊花12份，薏苡仁35份，浙贝母20份，苦杏仁12份。具体考察过程如下：
1、单共煎颗粒的制备
单煎合并颗粒：分别取处方中各味药饮片，分别进行煎煮，各加14倍量水；一煎加热提取120分钟，过滤，收集滤液；二煎加12倍量水加热提取120分钟，过滤，收集滤液，60℃进行减压浓缩至相对密度1.05～1.09(60℃)，合并干浸膏粉后进行喷雾干燥(出风口温度为170℃)；合并干膏粉，加入适量糊精后，干法制粒，即得。
共煎颗粒：取处方中各味药饮片，加14倍量水；一煎加热提取120分钟，过滤，收集滤液；二煎加12倍量水加热提取120分钟，过滤，收集滤液，60℃进行减压浓缩至相对密度1.05～1.09(60℃)后进行喷雾干燥(出风口温度为170℃)；合并干膏粉，加入适量糊精后，干法制粒，即得。
2、单共煎颗粒的高效液相指纹/特征图谱的获取
色谱条件与系统适应性以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；检测波长250nm；以乙腈为流动相A，以0.12％体积浓度的磷酸溶液为流动相B，按以下表7的梯度洗脱程序进行洗脱。
表7梯度洗脱表
Figure BDA0002985221320000111
色谱柱的柱长为150mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.8μm，流速为0.2ml/min。
对照品溶液的制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70％甲醇制成每1ml含40μg绿原酸的溶液，即得(10℃以下保存)；
供试品溶液的制备：分别取上述单煎合并颗粒与共煎颗粒约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液、单煎合并颗粒制备得到的供试品溶液与共煎颗粒制备得到的供试品溶液各3μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
3、特征图谱或指纹图谱的处理结果
单煎合并颗粒与共煎颗粒的指纹图谱相似度为95.8％。特征图谱中均应呈现32个特征峰，其中32个特征峰的相对保留时间和相对峰面积，以及对应计算得到的S值和Scqa值如表8和表9所示。
表8
Figure BDA0002985221320000121
Figure BDA0002985221320000131
表9
峰号 对照品相对峰面积 供试品相对峰面积 <![CDATA[S<sub>cqa</sub>]]>
1 0.649 0.307 0.5
2 0.701 0.529 0.8
3 0.279 0.124 0.4
4(S) 1.000 1.000 1.0
5 2.872 1.641 0.6
6 0.189 0.142 0.8
7 0.045 0.039 0.9
8 0.060 0.046 0.8
9 0.537 0.409 0.8
10 1.121 1.088 1.0
11 0.088 0.073 0.8
12 0.950 0.834 0.9
13 0.247 0.234 0.9
14 0.159 0.142 0.9
15 1.139 0.591 0.5
16 0.028 0.021 0.8
17 1.192 1.355 1.1
18 0.223 0.194 0.9
19 0.056 0.044 0.8
20 0.272 0.146 0.5
21 0.221 0.154 0.7
22 0.132 0.111 0.8
23 0.173 0.132 0.8
24 0.401 0.312 0.8
25 0.079 0.067 0.8
26 0.070 0.056 0.8
27 0.224 0.178 0.8
28 0.160 0.144 0.9
29 0.040 0.041 1.0
30 0.029 0.030 1.0
31 0.024 0.021 0.9
32 0.070 0.059 0.8
通过上述表格结果可知：单煎合并颗粒与共煎颗粒的特征图谱相对保留时间的各个特征峰的S值均在0.95-1.05之间，有27个特征峰相对峰面积的Scqa在0.7-1.3之间，占32个总特征峰的84％。
4、单共煎颗粒的效果验证
对上述单煎合并颗粒与共煎颗粒的药效进行检测，检测方法如下：选择6-8周，体重18-22克的C57BL/6雄性小鼠作为研究对象，随机分为4组，每组6只。空白组小鼠不予以任何处理；对照组小鼠采用2mg/kg的内毒素气管内滴注(LPS)，药物处理组小鼠分为两组，在小鼠采用2mg/kg的内毒素气管内滴注后，再分别采用本实施例3中的单煎合并颗粒与共煎颗粒(0.02g/10g)进行灌喂。
所有组小鼠均在LPS处理24小时后收集肺组织及肺泡灌洗液(BALF)，制备苏木精-伊红染色法病理切片，用于观察肺组织病理学改变；采用酶联免疫吸附实验检测BALF中炎症因子TNFα、IL-6的表达水平，如图5所示。
通过上述检测结果可知：单煎合并颗粒与共煎颗粒对TNFα、IL-6等指标的改善并无显著性的差异，表明了二者在改善肺部炎症方面疗效相当。
以上实施例1-实施例3的结果提示，三组共煎物质和单煎合并物质对LPS诱导的肺组织损伤均具有一定保护作用。共煎物质和单煎合并物质对TNFα、IL-6等指标的改善并无显著性的差异，表明了二者在改善肺部炎症方面疗效相当，因此对于改善肺部炎症的中药组合物而言，能够采用本发明的质量评价方法鉴别中药组合物是否适合采用单煎合并物质的方法进行制备。
实施例4
一种中药单煎合并物质的质量评价方法，本实施例中考察改善慢性心力衰竭的中药组合物的单煎合并物质的质量，该改善慢性心力衰竭的中药组合物的配方为：茯苓4份，桂枝3份，白术2份，甘草2份。具体如下：
1、单共煎冻干粉的制备
单煎合并冻干粉：分别取处方中各味药饮片，分别进行煎煮，各加1200ml水；加盖浸泡30min，武火(500W)煮沸后，文火(300W)保持微沸煎煮150min。趁热用150目药典筛滤过，冷冻干燥，合并干膏粉，即得。
共煎冻干粉：取处方中各味药饮片，加水1200ml水；加盖浸泡30min，武火(500W)煮沸后，文火(300W)保持微沸煎煮150min。趁热用150目药典筛滤过，冷却至室温，量取药液体积，体积范围为：540ml～660ml，冷冻干燥收取干膏粉，即得。
2、单共煎冻干粉的高效液相指纹/特征图谱的获取
色谱条件与系统适应性以Waters ACUITY
Figure BDA0002985221320000141
BEH Shield RP18为色谱柱；检测波长237nm；以乙腈为流动相A，以0.05％体积浓度的磷酸溶液为流动相B，按以下表10所示的梯度洗脱程序进行洗脱。
表10梯度洗脱表
Figure BDA0002985221320000151
色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.7μm，流速为0.3ml/min。
对照品溶液的制备：取甘草苷对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70％乙醇制成每1ml含20μg甘草苷的溶液，即得；
供试品溶液的制备：分别取上述单煎合并冻干粉与共煎冻干粉约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液、单煎合并冻干粉制备得到的供试品溶液与共煎冻干粉制备得到的供试品溶液各3μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
3、特征图谱或指纹图谱的处理结果
单煎合并冻干粉与共煎冻干粉的指纹图谱相似度为95.9％。对照品的特征图谱如图6所示，该供试品和对照品的特征图谱中均应呈现20个特征峰，其中20个特征峰的相对保留时间和相对峰面积，以及对应计算得到的S值和Scqa值如表11和表12所示。
表11
Figure BDA0002985221320000152
Figure BDA0002985221320000161
表12
峰号 对照品相对峰面积 供试品相对峰面积 <![CDATA[S<sub>cqa</sub>]]>
1 0.033 0.035 1.1
2 0.042 0.027 0.6
3 0.047 0.047 1.0
4(S) 0.058 0.053 0.9
5 0.393 0.446 1.1
6 0.476 0.464 1.0
7 0.026 0.042 1.6
8 0.119 0.124 1.0
9 0.502 0.451 0.9
10 0.069 0.050 0.7
11 0.106 0.052 0.5
12 0.087 0.105 1.2
13 0.054 0.058 1.1
14 0.051 0.050 1.0
15 0.115 0.119 1.0
16 0.046 0.032 0.7
17 0.024 0.046 1.9
18 1.000 1.000 1.0
19 0.098 0.099 1.0
20 0.019 0.022 1.1
通过上述表格结果可知：单煎合并冻干粉与共煎冻干粉的特征图谱相对保留时间的各个特征峰的S值均在0.95-1.05之间，有17个特征峰相对峰面积的Scqa在0.7-1.3之间，占20个总特征峰的85％。
4、单共煎冻干粉的效果验证
对上述单煎合并冻干粉与共煎冻干粉的药效进行检测，检测方法如下：选择体重200-220克的SD雄性大鼠作为研究对象，随机分为4组，每组6只。空白组大鼠不予以任何处理；对照组大鼠采用5mg/kg的异丙肾上腺素腹腔注射，连续注射7天造模；药物处理组大鼠分为两组，在大鼠采用采用5mg/kg的异丙肾上腺素腹腔注射，连续注射7天造模后，再分别采用本实施例4中的单煎合并冻干粉与共煎冻干粉(0.06g/100g)进行灌喂，空白组和对照组仅灌胃相同剂量生理盐水。
所有组大鼠灌胃治疗四周后所有组大鼠收集左心室，酶联免疫吸附实验(ELISA)检测中血清中IL-6、BNP的含量，IL-6、BNP的表达水平如图7所示。IL-6是一种介导细胞间相互作用的炎性因子，BNP(Brain natriuretic peptide)主要由心室肌细胞分泌，其增高程度与心衰严重程度呈正相关，是心衰诊断、患者管理、临床风险评估等的重要指标。
通过上述检测结果可知：单煎合并冻干粉与共煎冻干粉对异丙肾上腺素诱导的慢性心力衰竭，均具有改善作用。单煎合并冻干粉与共煎冻干粉对IL-6、BNP等指标的改善并无显著性的差异，表明了二者在改善慢性心衰方面疗效相当。因此，对于改善慢性心力衰竭的中药组合物而言，也能够采用本发明的质量评价方法鉴别中药组合物是否适合采用单煎合并冻干粉的方法进行制备。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (9)

1.一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，包括：至少采用特征图谱或指纹图谱的关键质量属性相似系数Scqa作为评价指标对单煎合并物质的质量进行评价；评价过程为：特征图谱或指纹图谱的Scqa值的数值范围在0.7-1.3的特征峰个数为总特征峰个数的80%以上；
其中，特征图谱或指纹图谱的关键质量属性相似系数Scqa的获取过程为：获得制备工艺相同的单煎合并物质和共煎物质，将二者进行检测获得特征图谱或指纹图谱，采用共煎物质中具有的一种成分作为指标成分，采用该指标成分所对应的特征峰作为S峰，获得的特征图谱或指纹图谱的各个特征峰相对于S峰的相对峰面积，根据各特征峰的相对峰面积计算Scqa值；Scqa值=单煎合并物质中各特征峰对应S峰的相对峰面积/共煎物质中各特征峰对应S峰的相对峰面积；
单煎合并物质采用中药组合物制备，所述中药组合物为改善肺部炎症的中药组合物或改善慢性心力衰竭的中药组合物；所述改善肺部炎症的中药组合物的原料包括金银花、连翘、桑叶、菊花、薏苡仁、浙贝母和苦杏仁；
所述改善肺部炎症的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法为高效液相色图谱法，该高效液相色图谱法的色谱条件如下：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；色谱柱的柱长为100-150mm，内径为2.1mm，粒度为1.8μm；检测波长：230-250nm；以乙腈为流动相A，以0.08～0.12%体积浓度的磷酸水溶液为流动相B，按以下梯度洗脱程序进行洗脱：
上述梯度洗脱程序中，A11为6%±2%，A12为14%±2%，A13为25%±2%，A14为40%±2%，A15为80%±2%；
所述改善慢性心力衰竭的中药组合物的原料包括茯苓、桂枝、白术、甘草；
所述改善慢性心力衰竭的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法为高效液相色图谱法，该高效液相色图谱法的色谱条件如下：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；色谱柱的柱长为100mm，内径为2.1mm，填料粒径为1.7μm；以乙腈为流动相A，以0.05%体积浓度的磷酸水溶液为流动相B，按以下梯度洗脱程序进行洗脱：
。
2.根据权利要求1所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，所述评价指标还包括特征图谱或指纹图谱的相对保留时间的S值，相对峰保留时间的S值=单煎合并物质中各特征峰对应S峰的相对保留时间/共煎物质中各特征峰对应S峰的相对保留时间，S值的范围为0.9-1.1。
3.根据权利要求2所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，S值的范围为0.95-1.05。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，所述单煎合并物质和共煎物质为提取液、浓缩液、干燥粉或制剂。
5.根据权利要求1-3任一所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，所述共煎物质与单煎合并物质采用同批次的药材。
6.根据权利要求1-3任一项所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，在改善肺部炎症的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法中，流速为0.2～0.4ml/min。
7.根据权利要求1-3任一项所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法， 所述改善慢性心力衰竭的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法中，检测波长：237nm。
8.根据权利要求7所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法，其特征在于，在改善慢性心力衰竭的中药组合物的特征图谱或指纹图谱的检测方法中，流速为0.3ml/min。
9.采用权利要求1-8任一所述的一种中药单煎合并物质的质量评价方法在鉴别中药组合物制备单煎合并物质中的应用。
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