CN113694046A - 一种重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法及其应用 - Google Patents
一种重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,包括以下步骤:采用薄膜分散法、反相蒸发法或溶剂注入法制备脂质体,然后采用喷雾干燥法或冷冻干燥法进行干燥,得到重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂。本发明制备的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂生产条件易控,制成的微粒粒度分布较集中,具有良好的稳定性、流动性和分散性,电位为25~32mV,可在16~24h内缓慢释药。所述重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂可用于制备预防或治疗2019‑nCoV的药物。
Description
技术领域
本发明涉及药物制备技术领域,特别是涉及一种重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法及其应用。
背景技术
七叶一枝花(Paris polyphylla)为重楼属Paris百合科(Liliaceae)植物,又名蚤休、草河车、白甘遂,其根茎称为重楼。重楼作为中草药,药用历史悠久。临床上,重楼内服用于止血、止痛、平喘、止咳、抗肿瘤等;外用用于抗感染、抗炎和镇痛等,民间还用于治疗各种疮毒、痈疽、毒蛇咬伤等,还有研究报道重楼对亚洲A型流感病毒(influenza Avirus,IAV)有抑制作用。国内外学者对重楼的化学成分展开了深入研究,从中分离鉴定出甾体皂苷类、植物蜕皮激素类、黄酮类、三萜类和脂肪酸类等多种化学成分。其中,甾体皂苷类是重楼抗肿瘤的主要活性成分,同时还兼具免疫调节、抗感染、抗菌、止血、消炎、抗氧化、驱虫、保护血管内皮细胞和促进子宫收缩等多种药理作用。
肺部给药是一种方便有效且具有发展前景的新型给药途径,剂型包括定量吸入的气雾剂、喷雾剂(雾化用溶液与水雾剂)和粉雾剂(dry powder inhalation,DPI)。气雾剂由于存在启动与吸入不协调,启动时抛射剂快速蒸发而产生制冷效应,抛射剂氟里昂影响环保等,其应用受到一定的限制,尤其对于活性蛋白和多肽类药物,因蛋白质在抛射剂中溶解性差,稳定性及剂量难以达到要求。而雾化剂依赖于雾化器等较笨重的给药装置,吸入持续时间长,不易普及,也不适宜于门诊病人使用。一般的DPI虽然起效快、剂量小,但普遍存在药物半衰期短、使用频率高的缺陷。
脂质体由于处方相对简单,可灵活地根据制剂要求调整处方性能,是目前研究最广泛的药物载体,尽管有不少产品已经成功实现产业化,但脂质体储存过程中的不稳定性仍未完全克服和解决。而采用脂质体通过肺部给药早期的研究大多集中在肺局部疾病的治疗方面,用于全身性疾病的治疗研究比较有限。目前暂时还没有脂质体吸入DPI进入人体临床研究,但已有一些药物通过气管内给药途径进行了动物实验评价,包括富马酸酮替芬、他克莫司、亮丙瑞林、胰岛素和甲状旁腺素等。随着药用辅料、给药装置和技术的发展,肺部给药作为治疗局部及系统性疾病给药途径的研究日益受到重视。纳米脂质体粒径小于100nm,在稳定性、吸收和体内分布等方面具有特殊效应,但也由于粒径很小,单独吸入时大半会被呼出,因此常需要加入其他组分。
发明内容
本发明的目的是提供一种重楼皂苷纳米脂质体吸入粉雾剂,以解决上述现有技术存在的稳定性较差,脂质体容易发生氧化、沉降,不耐储存的问题。
鉴于甾体皂苷的抗病毒及免疫调节活性,本发明基于分子对接模拟,选取重楼中含量较丰富的几种重要活性成分重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅵ,考察其与HCoV-19受体的结合作用,从而为制备治疗COVID-19的药物发现提供研究思路。
为实现上述目的,本发明提供了如下方案:
本发明提供一种重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,包括以下步骤:采用薄膜分散法、反相蒸发法或溶剂注入法制备前体脂质体,然后采用喷雾干燥法或冷冻干燥法进行干燥,得到重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂。
进一步的,冷冻干燥法进行冻干的过程中加入冻干保护剂。
进一步地,所述冻干保护剂包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、木糖醇、聚维酮、聚乙二醇或β-环糊精中的一种或几种。
进一步地,制备脂质体的过程中加入脂质组分。
进一步地,所述脂质组分为磷脂或类脂中的一种几种。
进一步地,所述磷脂包括蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、饱和大豆磷脂酰甘油或硬脂酰胺;所述类脂为胆固醇以及基于胆固醇结构修饰的脂质。
本发明提供一种由所述制备方法制备的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂。
进一步的,所述脂质体粉雾剂的活性成分为重楼皂苷I,重楼皂苷VI或者重楼皂苷VII中的一种或两种及以上的组合,结构式如下:
进一步的,本发明所述的重楼皂苷I,重楼皂苷VI或者重楼皂苷VII通过以下方法确定:
(1)分子对接研究重楼提取物与HCoV-19受体及病毒蛋白的结合力,筛选出先导药物PDB库获得受体三维结构。为了获得最稳定的化合物结构构象和静电势运用高斯09(Gaussian 09)在HF/6-31 G(d,p)水平计算化合物的单点。所有的对接实验运用Autodock4.2程序。在AutoDock 4.2计算程序中,采用间隔的70×70×70点阵模块。使用Lamarckian遗传算法进行对接计算,算法如下:150的群体,最大值2500万次能源评估,最高次数27000,交叉率0.8,突变率0.02,独立对接运行100次。使用公差为2的均方根偏差将对接构象聚类,并根据结合自由能评估最终对接结构。初步通过计算机模拟筛选方法对多种武当特色中草药来源的化合物进行了筛选,从中优选出3种化合物。七叶一枝花及其活性成分结构图见图1,其中图1A为重楼照片,图1B为重楼皂苷I(Polyphyllin I)的结构及分子量,图1C为重楼皂苷VI(Polyphyllin VI)的结构及分子量,图1D重楼皂苷VII(PolyphyllinVII)的结构及分子量。
(2)分子动力学模拟研究药物及靶点的结合力
靶点和先导药物的结合过程中,先导药物从溶剂中进入到受体的结合口袋中,靶点的结构构象发生相应的改变,药物的结构构象也发生了相应的变化,它们两者相互的调整结构以适应彼此,以便于两者达到最佳的几何和能量的适应。一般来说,这样的过程是在溶剂中进行的,因此会因为去溶剂化的效应而引起溶剂分子的重排,同样靶点和先导药物结合体系中的焓和熵发生着变化,用公式1表达如下:
△G=△H-T△S=△Ggas-△GR solv-△GL solv+△GRL solv
≈△Ggas-T△S-△GR solv-△GL solv+△GRL solv (公式1)
公式1中△H代表结合体系的焓变,△G代表体系的吉布斯自由能变化,△S代表体系的熵变,T代表结合反应发生时间,△Ggas代表的是靶点和先导药物的结合自由能,△GR solv代表的是受体的溶剂化能,△GL solv代表的是先导化合物的溶剂化能,△GRL solv代表的是结合的溶剂化能。靶点和先导药物的结合要达到最终稳定的结构构象,需要在结构和空间上达到相互匹配的效果,以及需要在空间匹配的情况下所形成的各种相互作用力来维持这一稳定的结构构象。这些相互作用力包括靶点和先导药物在结合过程中形成的氢键;靶点和先导药物间正、负电基团之间,以及它们内部产生的静电相互作用力;以及非极性基团之间产生的疏水相互作用力和范德华相互作用力;还有芳香族的分子基团的堆叠形成的π-π的吸引作用等等。七叶一枝花活性成分结合HCoV-19的分子对接结果见图2,3种化合物的分子对接结果见表1。
表1 3种化合物的分子对接结果
结合位点汇总分析,三种配体均作用于蛋白的活性位点区域,且比较保守关键的残基均有Pro346,THR347,ALA348,ASP350,ASN394,His401,GLU402残基,如图2所示。结合能角度,配体2(重楼皂苷VI)的结合能最低,为-9.01kcl/mol,推测在与蛋白相互作用时候406残基与其形成的氢键起到关键作用。
本发明通过计算机辅助药物设计,应用量子化学、分子动力学、构效关系等数据来研究药物对病毒因子及受体等作用的药效模型,从而达到药物设计的目的。本发明通过分子对接把大量的虚拟化合物库缩减成可操作的子集,并用于快速评估药物与靶蛋白的亲和力,改变了传统高通量筛选的生产模式,大大加快了新药设计的速度,降低了药物开发的成本,从而有目的地开发新药。
本发明提供所述的脂质体粉雾剂的应用,所述脂质体粉雾剂用于制备预防或治疗2019-nCoV的药物。
本发明公开了以下技术效果:
以脂质体粉雾剂作为载体进行肺部给药具有很多优势:①稳定性大大增加,方便运输、储存;②方便雾化吸入,可以直接到达病灶,提高局部治疗浓度;③脂质体粉雾剂经肺部给药后,遇体液溶解形成脂质体,可促进水溶性药物的肺部吸收,减少局部刺激和肺损伤,降低毒性和免疫反应的发生几率;增强被包封药物的细胞内转运作用,提高治疗指数。
本发明通过冻干或者喷雾干燥制成了固体的脂质体,解决了脂质体溶液容易发生氧化、沉降,不耐储存的问题。本发明制备的重楼皂苷脂质体粉雾剂生产条件易控,制成的微粒粒度分布较集中,具有良好的稳定性、流动性和分散性,电位为25~32mV,可在16~24h内缓慢释药。本发明将计算机辅助药物设计应用于本地特色中草药抗新型冠状病毒研究,降低了研究成本、节省了研究时间,期望尽快为抑制HCoV-19贡献本地资源,尽快为疾病提供治疗思路。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为重楼照片及其活性成分结构图,其中图1A为重楼照片,图1B为重楼皂苷I(Polyphyllin I)的结构及分子量,图1C为重楼皂苷VI(Polyphyllin VI)的结构及分子量,图1D重楼皂苷VII(Polyphyllin VII)的结构及分子量;
图2为重楼皂苷(重楼皂苷I、重楼皂苷VI、重楼皂苷VII)结合HCoV-19的分子对接结果,其中图2A为HCoV-19的受体结构及重楼皂苷的结合图,图2B为HCoV-19的受体上结合重楼皂苷的具体氨基酸残基位点;
图3为重楼皂苷VI纳米脂质体外观图;
图4为BB实验设计回归分析结果响应曲面(胆固醇);
图5为BB实验设计回归分析结果响应曲面(氢化大豆磷脂);
图6为BB实验设计回归分析结果响应曲面(乙醇);
图7为激光粒度仪检测重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂复溶后的粒径分布图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式,该详细说明不应认为是对本发明的限制,而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式,并非用于限制本发明。另外,对于本发明中的数值范围,应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明,否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料,但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入,用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时,以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下,可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化,这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等,均为开放性的用语,即意指包含但不限于。
实施例1重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用乙醇注入法制备重楼皂苷脂质体,固定药脂比为1∶10,即取270mg氢化大豆磷脂、30mg胆固醇溶于10ml无水乙醇中作为有机相,取30mg重楼皂苷VI,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液(pH7.4,0.01M)中作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,采用喷雾干燥的方法制备粉雾剂,具体工艺条件为:用旋转蒸发仪浓缩重楼皂苷VI纳米脂质体,以可溶性固形物为指标,浓缩至喷雾干燥所需的浓缩液浓度(16wt%)。以200ml浓缩液为基量,出风温度为150℃,β-CD(乳糖、甘露醇)作为助干剂添加量为7g/100ml,浓缩液浓度10%,进风温度220℃和进料速度16~50ml/min,风机速度15m3·h-1,雾化压强0.3Mpa。
粗粉末经气流粉碎后(粉碎压力:0.6Mpa,进料压力:0.4Mpa),得重楼皂苷脂质体吸入用粉雾剂。将其装入3号胶囊得到重楼皂苷吸入粉雾剂,平行制备3批样品。
依《中国药典》2015版第四部通则“吸入制剂微细粒子空气动力学特性测定法”测得制备所得重楼皂苷VI脂质体粉雾剂,微细粒子剂量分别为(12.6±2.2)%,纳米粒径测定仪测定所得脂质体的平均粒径为200~350nm,电位为25~32mV。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为43±5%(n=3)。
实施例2重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用溶剂注入法制备重楼皂苷VI脂质体:以乙酸乙酯∶乙醇(1∶1,v:v)为溶剂、固定药脂比为1∶10(质量比),以氢化大豆磷脂∶胆固醇∶硬脂酰胺(1∶1∶0.1,质量比)作脂质组分,溶于5~10ml溶剂中作为有机相,取30mg重楼皂苷,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,即得重楼皂苷VI纳米脂质体,见图3;采用冷冻干燥的方法制备粉雾剂,其工艺条件为:以乳糖和甘露醇1:1(质量比)作为冻干保护剂,用量10%作为助干剂,先在-20℃预冻12h后移入-80℃,真空干燥即得重楼皂苷纳米脂质体吸入用粉雾剂。
制备重楼皂苷脂质体吸入DPI,微细粒子剂量为(10.8±2.2)%。结果显示,所得各脂质体的平均粒径为200~350nm,电位为25~32mV,可在16~24h内缓慢释药。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为43±5%(n=3),脂质体粉末∶甘露醇质量比为1:0、1:4、1:9和1:19时,由干粉吸入装置释出的剂量分别为53%、58%、66%和73%。采用多级撞击器进行的体外肺部沉积试验表明,微细粒子剂量为33%~37%。
实施例3重楼皂苷VI纳米脂质体的制备
采用乙醇注入法制备重楼皂苷VI脂质体,即取400mg氢化大豆磷脂、50mg胆固醇溶于10ml无水乙醇中作为有机相,取50mg重楼皂苷VI,50mg甘露醇溶于50ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,冷冻干燥可以得到重楼皂苷VI前体纳米脂质体粉雾剂;采用Box-Behnken试验对影响重楼皂苷包封率的主要因素进行优化,因素为乙醇质量(X1),氢化大豆磷脂质量(X2),胆固醇质量(X3),进行因素水平的中心组合设计。以包封率为指标,按表2的因素水平表安排实验,对重楼皂苷脂质体进行处方优化,实验结果采用多元二次回归模型分析。
表2脂质体制备处方筛选响应面因素水平表
BB实验设计的15组实验结果回归分析见表3。模型P值小于0.01,R2=0.9932,表明模型具有一定的准确性和可行性,该模型拟合程度良好。得到的多元二次回归方程为
En=64.33-1.25X1-3.63X2-4.13X3+5.00X1X2-3.00X1X3-6.25X2X3-14.29X1X1-12.54X2X2-8.54X3X3。回归分析结果的响应曲面如图4~图6所示。可见,在检测范围内,3个响应面均为开口向下的凸形曲面,表明响应值(包封率)存在极高值,其等高线中心均位于-1~1,表明制备的最优条件位于所涉及的因素水平范围内。计算得到的最优提取条件的编码值为:X1=-0.04,X2=-0.078,X3=-0.178,经变换公式计算可得最佳处方为:乙醇质量19.2mL,氢化大豆磷脂质量192.2mg,胆固醇质量232.2mg,由回归方程可得包封率的预测值是64.95%。采用多元二次回归模型最优处方制备重楼皂苷脂质体,进行3次平行试验,包封率分别为62.81%、66.27%、64.25%,平均包封率为64.44%,与预测值的相对误差为0.78%。
表3多元二次回归分析结果
实施例4重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用溶剂注入法制备重楼皂苷VI脂质体。以乙酸乙酯∶乙醇(1∶1,v:v)为溶剂、固定药脂比为1∶10(质量比),以氢化蛋黄卵磷脂∶胆固醇∶硬脂酰胺(1∶1∶0.1,质量比)作脂质组分,溶于5~10ml溶剂中作为有机相,取30mg重楼皂苷,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,采用冷冻干燥的方法制备粉雾剂,其工艺条件为:以乳糖和甘露醇1:1(质量比)作为冻干保护剂,用量10%作为助干剂,先在-20℃预冻12h后移入-80℃,真空干燥即得重楼皂苷纳米脂质体吸入用粉雾剂。
制备重楼皂苷脂质体吸入DPI,微细粒子剂量为(9.6±1.5)%。结果显示,所得各脂质体的平均粒径为200~350nm,电位为25~32mV,可在16~24h内缓慢释药。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为38.8±4.9%(n=3),脂质体粉末∶甘露醇质量比分别为1:0、1:4、1:9和1:19时,由干粉吸入装置释出的剂量分别为48%、54%、58%和61%。采用多级撞击器进行的体外肺部沉积试验表明,微细粒子剂量为28%~31%。
实施例5重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用溶剂注入法制备重楼皂苷VI脂质体。以乙酸乙酯∶乙醇(1∶1,v:v)为溶剂、固定药脂比为1∶10(质量比),以二棕榈酰磷脂酰胆碱∶胆固醇∶饱和大豆磷脂酰甘油(1∶1∶0.1,质量比)作脂质组分,溶于5~10ml溶剂中作为有机相,取30mg重楼皂苷,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,采用冷冻干燥的方法制备粉雾剂,其工艺条件为:以乳糖和甘露醇1:1(质量比)作为冻干保护剂,用量10%作为助干剂,先在-20℃预冻12h后移入-80℃,真空干燥即得重楼皂苷纳米脂质体吸入用粉雾剂。
制备重楼皂苷脂质体吸入DPI,微细粒子剂量为(11.4±2.0)%。结果显示,所得各脂质体的平均粒径为180~300nm,电位为25~32mV,可在16~24h内缓慢释药。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为48.1±2.5%(n=3),脂质体粉末∶甘露醇质量比分别为1:0、1:4、1:9和1:19时,由干粉吸入装置释出的剂量分别为57%、63%、68%和75%。采用多级撞击器进行的体外肺部沉积试验表明,微细粒子剂量为36%~40%。
实施例6重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用溶剂注入法制备重楼皂苷VI脂质体:以乙酸乙酯∶乙醇(1∶1,v:v)为溶剂、固定药脂比为1∶10(质量比),以大豆卵磷脂∶胆固醇∶磷脂酰乙醇胺(1∶1∶0.1,质量比)作脂质组分,溶于5~10ml溶剂中作为有机相,取30mg重楼皂苷,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,采用冷冻干燥的方法制备粉雾剂,其工艺条件为:以乳糖和甘露醇1:1(质量比)作为冻干保护剂,用量10%作为助干剂,先在-20℃预冻12h后移入-80℃,真空干燥即得重楼皂苷纳米脂质体吸入用粉雾剂。
制备重楼皂苷脂质体吸入DPI,微细粒子剂量为(12.3±2.3)%。结果显示,所得各脂质体的平均粒径为150~310nm,电位为27~33mV,可在16~24h内缓慢释药。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为49.2±3.2%(n=3),脂质体粉末∶甘露醇质量比分别为1:0、1:4、1:9和1:19时,由干粉吸入装置释出的剂量分别为60%、65%、69%和78%。采用多级撞击器进行的体外肺部沉积试验表明,微细粒子剂量为38%~41%。
实施例7重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用溶剂注入法制备重楼皂苷VI脂质体:以乙酸乙酯∶乙醇(1∶1,v:v)为溶剂、固定药脂比为1∶10(质量比),以蛋黄卵磷脂∶二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱:胆固醇∶二月桂酰磷脂酰胆碱(1∶1∶1∶0.1,质量比)作脂质组分,溶于5~10ml溶剂中作为有机相,取30mg重楼皂苷,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,采用冷冻干燥的方法制备粉雾剂,其工艺条件为:以乳糖和甘露醇1:1(质量比)作为冻干保护剂,用量10%作为助干剂,先在-20℃预冻12h后移入-80℃,真空干燥即得重楼皂苷纳米脂质体吸入用粉雾剂。
制备重楼皂苷脂质体吸入DPI,微细粒子剂量为(11.5±1.7)%。结果显示,所得各脂质体的平均粒径为120~230nm,电位为28~35mV,可在16~24h内缓慢释药。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为47.2±3.5%(n=3),脂质体粉末∶甘露醇质量比分别为1:0、1:4、1:9和1:19时,由干粉吸入装置释出的剂量分别为59%、65%、70%和76%。采用多级撞击器进行的体外肺部沉积试验表明,微细粒子剂量为41%~44%。
实施例8重楼皂苷VI纳米脂质体粉雾剂的制备
采用溶剂注入法制备重楼皂苷VI脂质体:以乙酸乙酯∶乙醇(1∶1,v:v)为溶剂、固定药脂比为1∶10(质量比),以二硬脂酰磷脂酰胆碱∶胆固醇∶二油酰磷脂酰胆碱∶鞘磷脂(1∶1∶1∶0.1,质量比)作脂质组分,溶于5~10ml溶剂中作为有机相,取30mg重楼皂苷,30mg甘露醇溶于30ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,采用冷冻干燥的方法制备粉雾剂,其工艺条件为:以乳糖和甘露醇1:1(质量比)作为冻干保护剂,用量10%作为助干剂,先在-20℃预冻12h后移入-80℃,真空干燥即得重楼皂苷纳米脂质体吸入用粉雾剂。
制备重楼皂苷脂质体吸入DPI,微细粒子剂量为(12.9±1.9)%。结果显示,所得各脂质体的平均粒径为100~150nm,电位为28~32mV,可在16~24h内缓慢释药。采用中国药典2010年版二部附录XH方法两级玻璃撞击器测定冻干后颗粒的平均粒径,结果颗粒大小约3~5μm。采用HPLC法,以重楼皂苷VII为定量依据,测得的脂质体中重楼皂苷的含量为48.2±2.4%(n=3),脂质体粉末∶甘露醇质量比分别为1:0、1:4、1:9和1:19时,由干粉吸入装置释出的剂量分别为61%、67%、72%和78%。采用多级撞击器进行的体外肺部沉积试验表明,微细粒子剂量为41%~44%。
实施例9重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂的制备
取300mg的氢化大豆磷脂、50mg胆固醇溶于10ml无水乙醇中作为有机相,取50mg重楼皂苷I,50mg甘露醇溶于50ml磷酸缓冲液中(pH7.4,0.01M)作为水相。将有机相缓慢加入已恒温至50℃的水相中,搅拌10min,混合均匀,持续搅拌至乙醇挥发完全,冷冻干燥即得重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂。平行制备同一样品三份。
包封率的测定:取上述重楼皂苷脂质体粉雾剂适量,加入去离子水,浓度为10mg/ml,取1.0ml置于透析袋内,搅拌透析至平衡时间,精密吸取透析外液0.1ml,稀释定容到适当浓度HPLC进样分析,按照重楼皂苷VI的含量计算游离药物含量W1;精密量取重楼皂苷脂质体溶液0.1ml,加入甲醇破乳,稀释定容至适当浓度后HPLC进样分析,计算脂质体药物总含量W0,包封率计算公式如下:
En(%)=(W0-W1)/W0*100%
重楼皂苷I、VI、VII的含量测定方法HPLC条件:C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水从35:65到55:45(v:v)在1-40min梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长:203nm,样品检测时间是60min。取重楼皂苷I对照品配制成0.5mg/mL的母液,再梯度稀释配制成各浓度溶液,用0.22μm滤膜过膜后,依次进样。以色谱峰面积为纵坐标,重楼皂苷标准品质量浓度为横坐标绘制标准曲线,数据分析得线性回归方程,重楼皂苷I:A=126510X+14302,r=0.9998;重楼皂苷VI:A=120759X-3458,r=0.9999;VII:A=106355X-13604,r=0.9991。线性浓度区间分别是2-50μg,5-100μg和5-100μg。本实施例中重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂的包封率和含量测定结果见表4。
表4重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂包封率和含量
粒径测定:采用激光粒度仪检测本实施例重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂复溶后的粒径分布。典型结果如图6所示,从图6可以得知,重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂冻干前后粒径几乎无变化。
本实施例重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂颗粒粒径测定:用APS3321型空气动力学粒径测定仪测定本品粉末的空气动力学粒径。结果如表5所示,三批产品的空气动力学粒径均小于5μm,说明本品适合用于吸入。
表5重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂空气动力学直径
本实施例的重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂颗粒松密度和振实密度测定结果见表6。
表6重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂颗粒松密度和振实密度
本实施例的重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂颗粒休止角的测定结果见表7,从表7可以得知重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂流动性良好。
表7重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂颗粒休止角
本实施例重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂的细微粒子剂量和递送剂量均一性检查:按照中国药典2015版中“吸入制剂微细粒子空气动力学特性测定法”(通则0951)的规定,采用“装置3”(NGI)检查本品的细微粒子剂量。设定流速为(50±5)L·min-1,设置的吸入时间为4s。在AerolizerTM干粉吸入装置中,刺破胶囊,插入适配器中进行测定。4s后放入另一胶囊进行测定,一共测定10粒。用流动相作为洗液分别对NGI中各部位的粉末进行清洗,将洗液分别收集,HPLC法进行测定。
按照中国药典2015版中“吸入制剂”通则项下(通则0111)的规定,检查本品的递送剂量均一性。设定流速为(50±5)L·min-1,设置的吸入时间为4s,共测定10粒。以流动相作为洗液清洗滤纸和收集管内部,合并洗液,HPLC法测定。结果见表8。结果表明重楼皂苷吸入粉雾剂的细微粒子剂量和递送剂量均一性均符合中国药典2015年版要求。
表8重楼皂苷I纳米脂质体粉雾剂细微粒子剂量和递送剂量均一性
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进,均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:采用薄膜分散法、反相蒸发法或溶剂注入法制备脂质体,然后采用喷雾干燥法或冷冻干燥法进行干燥,得到重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂。
2.根据权利要求1所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,其特征在于,冷冻干燥法进行冻干的过程中加入冻干保护剂。
3.根据权利要求2所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,其特征在于,所述冻干保护剂包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘氨酸、右旋糖苷、木糖醇、聚维酮、聚乙二醇或β-环糊精中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,其特征在于,制备脂质体的过程中加入脂质组分。
5.根据权利要求4所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,其特征在于,所述脂质组分为磷脂或类脂中的一种或两种。
6.根据权利要求5所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法,其特征在于,所述磷脂包括蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、饱和大豆磷脂酰甘油或硬脂酰胺;所述类脂为胆固醇以及基于胆固醇结构修饰的脂质。
7.一种权利要求1-6任一项所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的制备方法制备的脂质体粉雾剂。
9.一种根据权利要求7所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的应用,其特征在于,所述脂质体粉雾剂在制备预防2019-nCoV药物中的应用。
10.一种根据权利要求7所述的重楼皂苷纳米脂质体粉雾剂的应用,其特征在于,所述脂质体粉雾剂在制备治疗2019-nCoV药物中的应用。
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---|---|---|---|---|
CN115429759A (zh) * | 2022-08-24 | 2022-12-06 | 中国人民解放军空军军医大学 | 以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法及应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103599337A (zh) * | 2013-11-06 | 2014-02-26 | 临沂大学 | 大蒜皂苷脂质体及其制备方法 |
US20150152133A1 (en) * | 2012-06-13 | 2015-06-04 | Hangzhou Bensheng Pharmaceutical Co., Ltd. | Acylation derivatives of paridis saponins i, preparation method therefor and application thereof |
CN106177359A (zh) * | 2016-08-25 | 2016-12-07 | 王昌利 | 治疗肿瘤的纳米混悬剂及其制备方法 |
CN106924501A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-07-07 | 陕西中医药大学 | 一种重楼总皂苷固体脂质纳米粒的制备方法 |
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Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20150152133A1 (en) * | 2012-06-13 | 2015-06-04 | Hangzhou Bensheng Pharmaceutical Co., Ltd. | Acylation derivatives of paridis saponins i, preparation method therefor and application thereof |
CN103599337A (zh) * | 2013-11-06 | 2014-02-26 | 临沂大学 | 大蒜皂苷脂质体及其制备方法 |
CN106177359A (zh) * | 2016-08-25 | 2016-12-07 | 王昌利 | 治疗肿瘤的纳米混悬剂及其制备方法 |
CN106924501A (zh) * | 2017-03-03 | 2017-07-07 | 陕西中医药大学 | 一种重楼总皂苷固体脂质纳米粒的制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
V.R. MOHAN等人: "Antinutritional Factors in Legume Seeds: Characteristics and Determination" * |
司渊等: "三种七叶一枝花活性成分抗新型冠状病毒的分子对接预测", 《天然产物研究与开发》 * |
姚静,张自强编著: "《药物冻干制剂技术的设计及应用》", 30 June 2007, 中国医药科技出版社 * |
张小飞等: "RP-HPLC测定重楼总皂苷长循环脂质体中重楼总皂苷的含量", 《临床医学研究与实践》 * |
张小飞等: "重楼总皂苷固体脂质纳米粒的制备及药剂学性质研究", 《中国药师》 * |
潘卫三,杨星钢主编: "《工业药剂学》", 31 December 2019, 中国医药科技出版社 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115429759A (zh) * | 2022-08-24 | 2022-12-06 | 中国人民解放军空军军医大学 | 以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法及应用 |
CN115429759B (zh) * | 2022-08-24 | 2023-07-21 | 中国人民解放军空军军医大学 | 以重楼皂苷活性提取物为膜材的脂质体的制备方法及应用 |
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