CN113647607B - 一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种负载矿物质的卵清蛋白‑多酚纳米颗粒及其制备方法与应用。该方法包括如下步骤:(1)将卵清蛋白加入到水中,并调节pH值至7.0±0.1,然后静置使蛋白质充分水合,得到卵清蛋白分散液;(2)将多酚加入到水中,并调节pH值至7.0±0.1,得到多酚溶液;(3)将多酚溶液加入到卵清蛋白分散液中,并调节pH值至1.0~10.0,得到卵清蛋白‑多酚复合溶液;(4)将矿物质加入到卵清蛋白‑多酚复合溶液中,搅拌均匀后离心,取上清,得到负载矿物质的卵清蛋白‑多酚纳米颗粒。本发明利用蛋白质的结构特征以及与多酚的相互作用,形成高荷载的蛋白纳米制品,可提高纳米颗粒的稳定性,可用于负载不同的矿物质。
Description
技术领域
本发明属于食品包埋技术领域,特别涉及一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒及其制备方法与应用。
背景技术
矿物质是动物所需的六种营养物质之一,包括常量元素和微量元素。人体需要矿物质来维持正常的生命活动,大部分人都有因缺乏矿物质而患有各种疾病。在现代社会,人们经常服用多种维生素或矿物质等膳食补充剂来改善健康状况,但这些维生素和矿物质在人体吸收过程中会受到其它营养物质的影响,从而降低使用效果,这也是目前面临的一个重要问题。因此,需要研发一种天然健康且能够负载不同矿物质,并可用于保健品或功能性食品的有效制剂。
卵清蛋白(OVA,ovalbumin)是蛋清中含量最丰富的蛋白质,具有起泡性、胶凝性、持水性和自组装等功能特性。已有研究表明,蛋白质与其他天然产物形成的复合物能够提高系统的稳定性。研究发现,已有卵清白蛋白偶联阿魏酸试剂的生产,此试剂的生产是通过化学交联形成,并且针对蛋白质-多酚体系的研究很多,例如不同pH、CaCl2浓度下玉米醇溶蛋白-阿魏酸相互作用、结构表征及理化特性研究,但是对钙离子负载率高的载体,对其他的矿物质负载率不一定高。且现在鸡蛋的深加工率还相对较低,鸡蛋中的卵清蛋白未得到合理的应用,多酚和矿物质具有多种功能,却利用率低,不合适的载体导致矿物质(如钙、钾、镁、硫等)流失严重,造成矿物质资源浪费等问题。但到目前为止,尚未有使用卵清蛋白-阿魏酸、卵清蛋白-没食子酸、卵清蛋白-EGCG、卵清蛋白-儿茶素纳米颗粒载体负载不同矿物质(钙、钾、镁、硫)的有关报道。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足,提供一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的制备方法。
本发明的另一目的在于提供所述方法制备得到的负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒。
本发明的再一目的在于提供所述负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的制备方法,包括如下制备步骤:
(1)将卵清蛋白加入到水中,搅拌均匀,并调节pH值至7.0±0.1,然后静置使蛋白质充分水合,得到卵清蛋白分散液;
(2)将多酚加入到水中,搅拌均匀,并调节pH值至7.0±0.1,得到多酚溶液;其中,多酚为阿魏酸(FA)、没食子酸(GA)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、儿茶素(CT)中的至少一种;
(3)将步骤(2)中得到的多酚溶液加入到步骤(1)中得到的卵清蛋白分散液中,搅拌混合均匀,并调节pH值至1.0~10.0,得到卵清蛋白-多酚复合溶液;
(4)将矿物质加入到步骤(3)中得到的卵清蛋白-多酚复合溶液中,搅拌均匀后离心,取上清,得到负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒。
步骤(1)中所述的静置使蛋白质充分水合的条件为:4℃低温静置12~24h;优选为:4℃低温静置24h。
步骤(1)、(2)和(4)中所述的水优选为去离子水。
步骤(1)、(2)和(4)中所述的搅拌的条件为:室温连续搅拌2h以上。
步骤(1)中所述的卵清蛋白分散液的浓度为5mg/mL~50mg/mL;优选为10mg/mL。
步骤(1)、(2)和(3)中所述的用于调节pH值的调节剂优选为0.5~1mol/L的HCl溶液和0.5~1mol/L的NaOH溶液。
步骤(2)中所述的多酚溶液的浓度为1mg/m/L~10mg/mL;优选为5mg/L。
步骤(3)中所述的卵清蛋白分散液和多酚溶液的体积比为(1~48):(1~4);进一步优选为(2~6):1;再进一步优选为4:1。
步骤(3)中所述的pH值的大小优选为4.0~10.0;进一步优选为6.0~10.0;再进一步优选为6.0±0.1。
步骤(3)中所述的搅拌的条件为:400rpm~1200rpm搅拌5~30min。
步骤(4)中所述的矿物质为本发明卵清蛋白-多酚复合溶液可以负载的矿物质,可以为含单一元素的矿物质,如氯化钾、氯化钙等,也可以为两种以上的元素的矿物质(要求所负载矿物质之间不发生化学反应,对负载体系不产生影响,不影响各自矿物质的负载率);优选为含有钙、钾、镁、硫、铁、铜、碘、锰和锌元素中的至少一种的矿物质;进一步优选为含有钙、钾、镁和硫元素中的至少一种的矿物质;再进一步优选为含有钙、钾、镁、硫元素和其他元素的矿物质;其中,其他元素为铁、铜、碘、锰和锌元素中的至少一种;最优选为多维元素片(21)。
步骤(4)中所述的矿物质与所述卵清蛋白的质量比为0.15~0.2:1.2;优选为0.2:1.2。
步骤(4)中,
当负载的矿物质为含有钙元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚优选为阿魏酸(FA);
当负载的矿物质为含有钾元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚优选为表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG);
当负载的矿物质为含有镁元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚优选为儿茶素(CT);
当负载的矿物质为含有硫元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚优选为没食子酸(GA)。
步骤(4)中所述的搅拌的条件为:700rpm~1500rpm搅拌10~30min。
步骤(4)中所述的离心的条件为:2000rpm~8000rpm离心5~20min;优选为:4000rpm离心5~15min。
一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒,通过上述任一项所述的方法制备得到。
所述的负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒在食品、保健品、化妆品或药品(药物)领域中的应用。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(1)本发明将卵清蛋白水溶液和多酚水溶液混合,通过调控两者的添加比例及复合溶液的pH,获得粒径较小且电位绝对值较大的卵清蛋白-多酚纳米颗粒,然后利用其负载不同矿物质,具有良好的分散性,生物相容性。
(2)本发明在一定程度上扩大了鸡蛋的用途,拓展了人们对于鸡蛋蛋白的认知,解决了其产量过剩的问题,增大了社会和经济价值,在一定程度上也解决了多酚和矿物质难以利用和矿物质资源浪费的问题。
(3)本发明利用蛋白质的结构特征,以及与多酚的相互作用,形成高荷载的蛋白纳米制品,可以大大提高纳米颗粒的稳定性,在无需添加任何有机溶剂前提下,即可成功获得高稳定性、高荷载的蛋白-多酚纳米颗粒复合液,其对钙、钾、镁、硫离子起到了很好的保护作用。
(4)本发明的选择性负载特定矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒具有包埋率高,稳定性好,制备简单,安全,成本低,能耗低,操作可控,避免矿物质浪费等优点,适合大规模工业化生产与加工,在食品、保健品、日化用品、药品行业具有广阔的应用空间。
附图说明
图1是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,两者均在pH 7.0±0.1,混合比例为(48:1)~(1:4)时,所得卵清蛋白-多酚纳米颗粒溶液的外观图和粒径图(图中,FA:阿魏酸;GA:没食子酸;CT:儿茶素;EGCG:表没食子儿茶素没食子酸酯);其中:(a)、(b)、(c)和(d)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液的外观图;(e)、(f)、(g)和(h)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液纳米颗粒溶液的粒径图。
图2是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,两者均在pH 7.0±0.1,混合比例为(48:1)~(1:4)时,所得卵清蛋白-多酚纳米颗粒溶液的电位图;其中:(a)、(b)、(c)和(d)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液的电位图。
图3是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,混合比例为4:1,复合溶液pH 1~10时,所得卵清蛋白-多酚纳米颗粒溶液的外观图和粒径图;其中,(a)、(b)、(c)和(d)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液的外观图;(e)、(f)、(g)和(h)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液纳米颗粒溶液的粒径图。
图4是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,混合比例为4:1,复合溶液pH1-10时,所得卵清蛋白-多酚纳米颗粒溶液的电位图;其中:(a)、(b)、(c)和(d)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液的电位图。
图5是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,混合比例为4:1,复合溶液pH 6时,多酚对卵清蛋白荧光强度的影响图(图中的浓度为OVA-多酚复合溶液中多酚的浓度,单位为mg/mL);其中:(a)、(b)、(c)和(d)分别为卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)以及卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒溶液的荧光强度图。
图6是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,混合比例为4:1,复合溶液pH6时,多酚对卵清蛋白红外光谱的影响图;其中,A为卵清蛋白和卵清蛋白-多酚(OVA-FA、OVA-EGCG、OVA-GA 、OVA-CT)纳米颗粒溶液的红外光谱图;B为卵清蛋白和卵清蛋白-多酚(OVA-FA、OVA-EGCG、OVA-GA、OVA-CT)纳米颗粒溶液的红外酰胺Ⅰ带高斯拟合结果。
图7是卵清蛋白(OVA)浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,混合比例为4:1,复合溶液pH 6时,负载钙、钾、镁、硫离子的卵清蛋白-多酚纳米颗粒微观现象图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法,通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。除非特别说明,本发明所用试剂和原材料均可通过市售获得。
本发明中所述的用于调节pH值的酸碱液为本领域常规的pH值调节剂,如盐酸、氢氧化钠等;优选为0.5~1mol/L的HCl溶液和0.5~1mol/L的NaOH溶液。
本发明实施例中涉及卵清蛋白(生物技术级)购自上海麦克林生化科技有限公司(中国,上海)。
实施例1
(1)准确称取1g卵清蛋白(OVA)粉末,将其分散于100g去离子水中(默认去离子水的密度为1.00mg/mL),并于室温连续搅拌3h,用酸碱液将pH调为7.0±0.1,后置于4℃低温12h,使蛋白质充分水化,以获得浓度为10mg/mL的卵清蛋白贮存液。
(2)分别称取0.5g阿魏酸(FA),表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子酸(GA),儿茶素(CT)粉末加入到100g去离子水中,并于室温下连续搅拌2h,用碱液将pH调为7.0±0.1,使多酚充分混匀,以获得浓度均为5mg/mL的多酚溶液。
(3)将步骤(1)获得的卵清蛋白溶液分别与步骤(2)获得的多酚溶液按48:1、24:1、12:1、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1、1:1、1:2、1:4体积比混合(以不加入多酚溶液为对照),在磁力搅拌下(室温),将多酚溶液逐滴加入到卵清蛋白溶液中,磁力搅拌速度为400rpm~1200rpm,搅拌时间为5~30min,得到卵清蛋白-多酚复合溶液。
(4)最后用酸碱液分别将步骤(3)获得的卵清蛋白-多酚复合溶液的pH调为1~10(分别命名为pH1、pH2、pH3、pH4、pH5、pH6、pH7、pH8、pH9、pH10)。
本实施例考察了卵清蛋白浓度为10mg/mL,多酚浓度为5mg/mL,两者按不同体积比混合的粒径电位变化情况。不同体积比卵清蛋白-多酚纳米颗粒复合液外观和粒径如图1所示,电位如图2所示。卵清蛋白和多酚的混合体积比不同,复合溶液呈现的颜色也不相同。随着多酚所占比例的增加,络合溶液的粒径、电位绝对值逐渐增加,这是由于卵清蛋白和多酚之间发生相互作用,形成了纳米尺寸大小的复合物,且卵清蛋白与多酚以体积比为4:1混合时,复合物的粒径和电位绝对值最大,因此,卵清蛋白与多酚混合的最佳比例为4:1,说明定量卵清蛋白和多酚此条件下形成纳米颗粒最多。
本实施例还考察了pH对卵清蛋白-多酚纳米颗粒复合溶液粒径电位的影响。不同pH卵清蛋白-多酚复合溶液外观和粒径如图3所示,电位如图4所示,不同pH的卵清蛋白-多酚复合溶液呈现的颜色也不相同。由于卵清蛋白的等电点在4.5左右,复合物在pH4附近聚集,主要是由于卵清蛋白在等电点附近的电荷几乎为0,分子间的相互吸引较强,存在聚集现象。由图4可以发现,卵清蛋白-多酚复合溶液在pH6时粒径最小,电位绝对值最大,表明复合溶液在pH6时最稳定,所以,卵清蛋白与多酚复合的pH最佳条件为pH6,此pH条件下可以形成最稳定的卵清蛋白-多酚纳米颗粒。
本实施例进一步研究了多酚对卵清蛋白荧光强度的影响。如图5所示,除卵清蛋白-儿茶素外,其他复合物的荧光强度均随浓度的增加而降低,表明与多酚的相互作用使OVA的荧光强度猝灭,可能是由于OVA的展开。有研究报道称OVA-CT复合物荧光强度的增加,有待进一步研究。此外,红移表明卵清蛋白与多酚的相互作用导致色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)的微环境发生改变,使色氨酸暴露在极性环境中。特别地,OVA-EGCG的红移幅度达14.8nm,比其它复合物红移更明显。因此可以推断出EGCG显著改变了OVA的分子构象。此外,OVA-GA发生了轻微的蓝移,这可能是因为OVA中芳香族氨基酸残基的苯环与GA发生了pi堆积。
本实施例还研究了多酚对卵清蛋白红外光谱的影响:
酰胺Ⅰ(1650cm-1)和Ⅲ带(1312cm-1)分别为C=O伸缩振动、N-H弯曲振动与C-N伸缩振动耦合引起的OVA特征峰,结果如图6A所示。由图6A可以看出,与阿魏酸、没食子酸、儿茶素结合后,未发现OVA的酰胺Ⅲ带,这可能是由于OVA的N-H弯曲与C-N伸缩振动结合参与了与多酚的相互作用。此外,3298.3cm-1处的强宽峰是N-H伸缩振动与氢键耦合产生,几种蛋白多酚复合物发生了不同程度的位移,表明卵清蛋白的N-H与酚羟基相互作用形成氢键。此外,OVA与EGCG结合的峰红移程度较大,这可能是由于OVA与EGCG之间形成了较强的氢键。
蛋白质的二级结构可以通过酰胺Ⅰ带来反映,因此对酰胺Ⅰ带进行了高斯拟合,并计算了酰胺Ⅰ带的α-螺旋(α-helix)、β-折叠(β-sheet)、β-翻转(β-turn)和无规则卷曲(random coil)含量,结果如图6B所示。由图6B可以发现,与纯卵清蛋白相比,阿魏酸和EGCG的添加增加络合物的α-螺旋和β-折叠含量,降低了无规则卷曲含量,有研究表明β-折叠有利于氢键的形成,α-螺旋有利于蛋白质结构稳定,这可能是由于蛋白质中的部分无规则卷曲转变为α-螺旋和β-折叠,使蛋白质结构更加的稳定。反之,没食子酸和儿茶素的添加降低了α-螺旋含量,增加了无规则卷曲含量,降低了纳米颗粒体系的稳定性。
实施例2
(1)准确称取1g卵清蛋白(OVA)粉末,将其分散于100g去离子水中(默认去离子水的密度为1.00mg/mL),并于室温连续搅拌3h,用酸碱液将pH调为7.0±0.1,后置于4℃低温12h,使蛋白质充分水化,以获得浓度为10mg/mL的卵清蛋白贮存液。
(2)分别称取0.5g阿魏酸(FA),表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子酸(GA),儿茶素(CT)加入到100g去离子水中,并于室温下连续搅拌2h,用碱液将pH调为7.0±0.1,使多酚充分混匀,以获得浓度均为5mg/mL的多酚溶液。
(3)将步骤(1)获得的卵清蛋白溶液与步骤(2)获得的多酚溶液按4:1体积比混合,在磁力搅拌下,将多酚溶液逐滴加入到卵清蛋白溶液中,磁力搅拌速度为400rpm~1200rpm,搅拌时间为5~30min,得到卵清蛋白-多酚复合溶液。
(4)用酸碱液分别将步骤(3)获得的将卵清蛋白-多酚纳米颗粒复合溶液的pH调为6.0±0.1。
(5)分别称取0.15~0.2g矿物质(本实验所用矿物质为多维元素片(21),购于广州某药房,产品批号为P20C010;该多维元素片(21)含有钙、钾、镁、硫等元素,经负载测定,发现钾、钙、镁和硫这四种元素的负载率相比于其它更高,且这四种矿物质都有与之对应的负载率最高的多酚,因此,后续实验均是针对这四种元素进行)在磁力搅拌下(搅拌速度为700rpm~1500rpm,搅拌时间为10~60min)将其加入到步骤(4)获得的纳米颗粒复合溶液(150mL)中,然后将得到的纳米颗粒复合溶液在4000rpm条件下离心一定时间(约10min),去除不溶物,上清液即为负载钙、钾、镁、硫离子的卵清蛋白-多酚纳米颗粒复合液。
本实施例考察负载钙、钾、镁、硫离子的卵清蛋白-阿魏酸(OVA-FA)、卵清蛋白-没食子酸(OVA-GA)、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯(OVA-EGCG)、卵清蛋白-儿茶素(OVA-CT)纳米颗粒复合物微观现象图。通过SEM-EDS检测样品中钙、钾、镁、硫原子的含量,结果如图7所示:针对不同的矿物质(钙、钾、镁、硫),卵清蛋白-阿魏酸、卵清蛋白-没食子酸、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯、卵清蛋白-儿茶素纳米颗粒载体具有不同的负载量,纯卵清蛋白的不同矿物质(钙、钾、镁、硫)负载量均低于卵清蛋白-阿魏酸、卵清蛋白-没食子酸、卵清蛋白-表没食子儿茶素没食子酸酯、卵清蛋白-儿茶素纳米颗粒载体体系。由结果还发现,相比于OVA-GA、OVA-EGCG、OVA-CT纳米颗粒载体,OVA-FA对于钙离子的负载率较高(33.9%),而对于其它矿物质(钾、镁、硫)的负载率均低于其它纳米颗粒负载体系,OVA-EGCG纳米颗粒负载体系对钾离子的负载效果最好(35.4%),明显高于其它纳米颗粒负载体系;并且,OVA-GA纳米颗粒负载体系对硫离子的负载效果最好(32.60%),但对于其它矿物质的负载,明显差于其它纳米颗粒负载体系,而OVA-CT纳米颗粒负载体系对镁离子的负载效果最好(13.88%),明显高于其它纳米颗粒负载体系,但是对于其它矿物质的负载却低于对应的纳米颗粒负载体系。由此可见,不同矿物质(钙、钾、镁、硫)具有与之对应的最优的负载OVA-FA、OVA-GA、OVA-EGCG OVA-CT纳米颗粒载体。本研究发现针对不同的矿物质(钙、钾、镁、硫),OVA-FA、OVA-GA、OVA-EGCG OVA-CT纳米颗粒载体具有不同的负载率,而多酚的添加均提高了矿物质(钙、钾、镁、硫)的负载率,因此,本研究的结果可以为矿物质(钙、钾、镁、硫)达到最大负载率和利用率、避免钙、钾、镁、硫离子资源浪费提供理论依据。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下制备步骤:
(1)将卵清蛋白加入到水中,搅拌均匀,并调节pH值至7.0±0.1,然后静置使蛋白质充分水合,得到卵清蛋白分散液;
(2)将多酚加入到水中,搅拌均匀,并调节pH值至7.0±0.1,得到多酚溶液;其中,多酚为阿魏酸、没食子酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、儿茶素中的至少一种;
(3)将步骤(2)中得到的多酚溶液加入到步骤(1)中得到的卵清蛋白分散液中,搅拌混合均匀,并调节pH值至6.0±0.1,得到卵清蛋白-多酚复合溶液;
(4)将矿物质加入到步骤(3)中得到的卵清蛋白-多酚复合溶液中,搅拌均匀后离心,取上清,得到负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒;
步骤(1)中所述的卵清蛋白分散液的浓度为10mg/mL;
步骤(2)中所述的多酚溶液的浓度为5mg/L;
步骤(3)中所述的卵清蛋白分散液和多酚溶液的体积比为4:1;
步骤(4)中所述的矿物质与所述卵清蛋白的质量比为0.15~0.2:1.2;
步骤(4)中所述的矿物质为含有钙、钾、镁和硫元素中的至少一种的矿物质;
步骤(4)中,
当负载的矿物质为含有钙元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚为阿魏酸;
当负载的矿物质为含有钾元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚为表没食子儿茶素没食子酸酯;
当负载的矿物质为含有镁元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚为儿茶素;
当负载的矿物质为含有硫元素的矿物质时,步骤(2)中的多酚为没食子酸。
2.根据权利要求1所述的负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的制备方法,其特征在于:
步骤(4)中所述的矿物质为多维元素片(21)。
3.根据权利要求1所述的负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的制备方法,其特征在于:
步骤(4)中所述的矿物质与所述卵清蛋白的质量比0.2:1.2。
4.根据权利要求1所述的负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒的制备方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的静置使蛋白质充分水合的条件为:4℃低温静置12~24h;
步骤(1)和(2)中所述的水为去离子水;
步骤(1)、(2)和(4)中所述的搅拌的条件为:室温连续搅拌2h以上;
步骤(1)、(2)和(3)中,用于调节pH值的调节剂为0.5~1mol/L的HCl溶液和0.5~1mol/L的NaOH溶液;
步骤(3)中所述的搅拌的条件为:400rpm~1200rpm搅拌5~30min;
步骤(4)中所述的搅拌的条件为:700rpm~1500rpm搅拌10~30min;
步骤(4)中所述的离心的条件为:2000rpm~8000rpm离心5~20min。
5.一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒,其特征在于:通过权利要求1~4任一项所述的方法制备得到。
6.权利要求5所述的负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒在制备食品、保健品、化妆品或药品中的应用。
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CN202110899355.9A CN113647607B (zh) | 2021-08-06 | 2021-08-06 | 一种负载矿物质的卵清蛋白-多酚纳米颗粒及其制备方法与应用 |
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