CN113616629B

CN113616629B - 马兜铃烷型倍半萜类化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途

Info

Publication number: CN113616629B
Application number: CN202110917242.7A
Authority: CN
Inventors: 王启隆; 吴红华; 高秀梅; 王跃飞; 刘二伟; 房景梅; 李冉
Original assignee: Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Current assignee: Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
Priority date: 2021-08-11
Filing date: 2021-08-11
Publication date: 2023-04-18
Anticipated expiration: 2041-08-11
Also published as: CN113616629A

Abstract

本申请提供了马兜铃烷型倍半萜类化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途，其中，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物选自马兜铃酮和甘松香酮H中的至少一种。马兜铃烷型倍半萜类化合物能够舒张胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉，舒张血管，增加血管内皮细胞中eNOS磷酸化，保护血管内皮细胞，降低血压，从而能够用于预防和/或治疗心脑血管疾病，进而用于制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物。本申请还提供了包含马兜铃烷型倍半萜类化合物的药物组合物及其在制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物中的用途，其中，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物选自马兜铃酮和甘松香酮H中的至少一种。

Description

马兜铃烷型倍半萜类化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途

技术领域

本申请涉及医药技术领域，特别是涉及马兜铃烷型倍半萜类化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途。

背景技术

随着科技和医学的发展，心脑血管疾病在诊治方面不断取得可观的研究成果，但每年仍有大量病患因无法得到有效治疗而去世。心脑血管疾病的发生与血管状况有关，血管内皮细胞是维持血管稳态的重要调节部位，血管功能障碍会导致血管异常收缩，引起一系列心脑血管疾病。因此寻找具有舒张血管和保护血管内皮细胞功能的药物，以用于心脑血管疾病的防治，具有重要的社会意义和经济意义。

发明内容

本申请的发明人通过深入研究，发现马兜铃烷型倍半萜类化合物具有舒张血管的作用，能够保护血管内皮细胞，从而可以用来预防和/或治疗心脑血管疾病，并基于此完成了本申请。

本申请的第一方面提供马兜铃烷型倍半萜类化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途，其中，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物选自马兜铃酮和甘松香酮H中的至少一种。

本申请的第二方面提供一种药物组合物，其包含马兜铃烷型倍半萜类化合物，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物选自马兜铃酮和甘松香酮H中的至少一种。

本申请的第三方面提供本申请第二方面的药物组合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途。

马兜铃烷型倍半萜类化合物能够舒张胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉，舒张血管，增加血管内皮细胞中eNOS磷酸化，保护血管内皮细胞，降低血压，从而能够用于预防和/或治疗心脑血管疾病，进而用于制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物。进一步地，包含马兜铃烷型倍半萜类化合物的药物组合物，同样能够用于制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，还可以根据这些附图获得其他的实施例。

图1显示了不同浓度甘松香酮H对胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉舒张率的影响。

图2显示了不同浓度马兜铃酮对胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉舒张率的影响。

图3显示了马兜铃酮对血管内皮细胞中p-eNOS含量的影响。

图4显示了马兜铃酮对血压的影响。

具体实施方式

下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员基于本申请所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

本申请中，马兜铃酮((-)-aristolone，CAS号：25274-27-5)的结构式如式I所示，甘松香酮H(kanshone H，CAS号：1445952-33-9)的结构式如式II所示。

发明人在研究中发现，本申请的马兜铃烷型倍半萜类化合物能够舒张胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉，舒张血管，增加血管内皮细胞eNOS磷酸化，保护血管内皮细胞，降低血压，从而能够用于预防和/或治疗心脑血管疾病，进而用于制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物。

本申请中，术语“治疗”具有其一般含义，并且在本文可以是指对已经罹患心脑血管疾病的哺乳动物个体(优选为人)采用本申请的药物进行处理，以期对所述疾病产生治疗、治愈、缓解、减轻等作用。类似地，如本文使用的，术语“预防”具有其一般含义，并且在本文可以是指对可能罹患心脑血管疾病或者对心脑血管疾病具有罹患风险的哺乳动物个体采用本申请的药物进行处理，以期对所述疾病产生防止、预防、阻止、隔断等作用。

在本申请第一方面的一些实施方式中，所述心脑血管疾病包括但不限于动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗死、高血压、高血压性心脏病、糖尿病血管并发症、血管成形术后再狭窄、脑卒中、肺动脉高压、肺心病、脉管炎、血管性头痛、微血管病变中的至少一种。

在本申请第二方面的一些实施方式中，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物是以单体的形式提供，或以包含其的植物提取物的形式提供；其中，所述植物提取物，可以是选自甘松提取物、马兜铃提取物、香附提取物、藏菖蒲提取物和石菖蒲提取物中的至少一种。在本申请中，对所述提取物的提取方式没有特别限制，只要能实现本申请的目的即可，本领域技术人员可以通过现有的任意方式获取包含所述马兜铃烷型倍半萜类化合物的植物提取物，示例性地，可以用70-80％乙醇溶液进行加热回流提取，得到包含所述马兜铃烷型倍半萜类化合物的植物提取物。

在本申请第二方面的一些实施方式中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。

在本申请第二方面的一些实施方式中，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自溶剂、稀释剂、崩解剂、沉淀抑制剂、表面活性剂、助流剂、粘合剂、润滑剂、分散剂、助悬剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂中的至少一种。

本文中，“药学上可接受的”表示当以通常用药剂量使用时没有实质的毒性作用，从而可被政府或与其相当的国际组织批准或者已被批准用于动物，更特别地用于人，或者被登录在药典上。

本申请药物组合物中可用的“药学上可接受的载体或赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的载体，特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。

如本文使用的，术语“药物组合物”具有其一般含义。此外，本申请的“药物组合物”还可以以保健品、精油、功能性食品、食品、食品添加剂等形式存在或提供。可采用制药领域特别是制剂领域中的常规技术，通过药品生产中常用的提取分离纯化手段得到本申请的药物组合物的原料的有效成分，任选地与一种或更多种药学可接受的载体或赋形剂混合，然后形成所需的剂型，来制备本申请的药物组合物。根据本申请的药物组合物，其为可以适用于口服给药的药物制剂、适用于胃肠外注射(例如静脉注射、皮下注射)的药物制剂(例如溶液剂)、适用于表面给药的药物制剂(例如软膏剂、贴剂或乳膏剂)、或适用于直肠给药的药物制剂(例如栓剂)等。用于口服施用的剂型可包括例如片剂、丸剂、硬或软胶囊剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、散剂、粉剂、细粒剂、颗粒剂、小丸剂、酏剂等，并不限于此。除了活性成分外，这些制剂还可包含稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素和甘氨酸)、润滑剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其镁盐、钙盐和聚乙二醇)。片剂还可包含粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷。必要时，其还可包含药用添加剂，例如崩解剂(如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐)、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂等。片剂可根据常用的混合、造粒或包衣的方法制备。

在本申请第三方面的一些实施方式中，所述心脑血管疾病包括但不限于动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗死、高血压、高血压性心脏病、糖尿病血管并发症、血管成形术后再狭窄、脑卒中、肺动脉高压、肺心病、脉管炎、血管性头痛、微血管病变中的至少一种。

本文所用的术语，如未明确说明或定义，则它们具有本领域技术人员公知的一般含义。

材料：9,11-二脱氧基-11α,9α-亚甲基环氧前列腺素F2α(11-Didexy-11α,9α-epoxymethanoprostaglandin F2α，u46619)、乙酰胆碱(Acetylcholinechloride，Ach)、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)：sigma公司；钙离子通道激动剂A23187：MCE公司；氯化钾(KCl)：天津市光复科技发展有限公司；人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、内皮细胞培养基：ALLCELLS生物技术有限公司；磷酸化一氧化氮合成酶3(p-eNOS，Ser117)：abcam公司；一氧化氮合成酶3(eNOS)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的抗体、羊抗兔Ⅱ抗(Proteintech)：美国CST公司；SDS-PAGE凝胶制备试剂盒、TBST溶液、电泳液、转膜液：康为世纪公司；5％BSA封闭液：北京索莱宝生物有限公司；医用组织胶水：贝朗医疗西班牙有限公司；醋酸去氧皮质酮(DOCA)：TCI公司；食品级橄榄油：欧丽薇兰。仪器：多通道离体血管张力测定系统630AM：DMT公司；PowerLab生物信号采集分析系统：ADInstruments公司；血压遥感监测系统：Millar Instruments公司；体式显微镜：LEICA公司；生物安全柜和CO₂培养箱：力康生物医疗科技控股有限公司；多功能酶标仪：TECAN公司；凝胶成像系统：日本GE公司；电泳仪和转膜仪：Bio-Rad公司。

下述实施例中所用实验材料和方法，如无特别说明，均为常规材料和方法。

实施例1马兜铃烷型倍半萜类化合物对胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉舒张的影响

选用8-10周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠，体重18-25g；8周龄雄性SD大鼠，体重200-250g。麻醉处死，分别取C57BL/6小鼠胸主动脉、肠系膜动脉和SD大鼠冠状动脉，去除血管周围的脂肪和结缔组织，并剪成3-4mm长的血管环，将血管环置于盛有Krebs-Hennseleit(K-H)溶液(K-H溶液的组成：NaCl 118mmol/L、KCl 4.7mmol/L、NaHCO₃25mmol/L、KH₂PO₄1.2mmol/L、MgSO₄ 1.2mmol/L、CaCl₂ 1.3mmol/L、D-葡萄糖10mmol/L)的浴槽中，保持温度在37℃，并持续通入95％O₂和5％CO₂混合气体，在显微镜下，将血管环穿入两个平行的钢针上，一个钢针连接压力传感器，另一个连接张力调节旋钮，此时不给予血管任何作用力，血管在未受力状态下适应15min，仪器调零；旋动张力调节旋钮，调整血管初始张力为5mN，并更换K-H液，此后每隔15min换K-H液一次，如果张力下降，则重新调节到5mN，血管平衡60min；加入20nmol/L u46619刺激使血管收缩，待收缩达到最大值后，依次加入终浓度分别为10^-9、10^-8、10^-7、10^-6、10^-5mol/L的乙酰胆碱，采用多通道离体血管张力测定系统测定加入乙酰胆碱后收缩力，按照以下公式计算舒张率：舒张率％＝(1-(加入乙酰胆碱后收缩力-初始张力)/u46619最大收缩力)×100％，血管的最大舒张率达到60-80％，表示血管内皮完整，方可进行下一步实验。在血管内皮检测完成后，分别向孵育有胸主动脉、肠系膜动脉、冠状动脉的浴槽中加入u46619刺激血管收缩，收缩平稳后依次加入终浓度为10、25、50、75、100μmol/L的甘松香酮H(以DMSO为溶剂)或终浓度为10、50、100、150、200μmol/L的马兜铃酮(以DMSO为溶剂)，同时设对照组为依次加入等体积DMSO，给药间隔均为5min，分别记录舒张率，并绘制舒张曲线，得到甘松香酮H对胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉舒张率的影响结果如图1所示，马兜铃酮对胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉舒张率的影响结果如图2所示。

根据图1可知，甘松香酮H能够显著增加C57BL/6小鼠胸主动脉的舒张率(n＝13,**P<0.01,与对照组比)，显著增加C57BL/6小鼠肠系膜动脉的舒张率(n＝4,**P<0.01,与对照组比)，显著增加SD大鼠冠状动脉的舒张率(n＝4,**P<0.01,与对照组比)，表明甘松香酮H能够显著舒张胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉，具有舒张血管的作用。根据图2可知，马兜铃酮能够显著增加C57BL/6小鼠胸主动脉的舒张率(n＝13,**P<0.01,与对照组比)，显著增加C57BL/6小鼠肠系膜动脉的舒张率(n＝4,**P<0.01,与对照组比)，显著增加SD大鼠冠状动脉的舒张率(n＝4,**P<0.01,与对照组比)，表明马兜铃酮能够显著舒张胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉，具有舒张血管的作用。

实施例2马兜铃烷型倍半萜类化合物对p-eNOS的影响

发明人在研究中发现，血管内皮细胞可释放血管舒张因子如一氧化氮(NO)等以舒张血管，而本申请的马兜铃烷型倍半萜类化合物，能够通过刺激血管内皮细胞中eNOS磷酸化，刺激血管内皮细胞释放NO，从而舒张血管。

于37℃、5％O₂和95％CO₂条件下培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，将其接种于6孔板中，分别加入浓度为10、50、100、150、200μmol/L的马兜铃酮(以DMSO为溶剂)，同时设对照组加入DMSO，设阳性给药组加入浓度为1μmol/L的A23187(以DMSO为溶剂)，给药时间均为15min，分别收取细胞，提取蛋白，采用Western Blot检测给药后HUVEC细胞的p-eNOS含量的变化，结果如图3所示。根据图3可知，不同浓度的马兜铃酮均能够显著增加p-eNOS的含量(n＝4,*P<0.05,与对照组比)，表明马兜铃酮能够增加血管内皮细胞的eNOS磷酸化，从而保护血管内皮细胞并舒张血管。

实施例3马兜铃烷型倍半萜类化合物对血压的影响

选用8-10周龄雄性SD大鼠6只，体重200-250g，分别用异氟醚麻醉SD大鼠，切除左肾，腹腔内植入遥感血压植入子，恢复一周；皮下注射醋酸去氧皮质酮(DOCA)50mg/kg，持续一周；更换饮用水为0.9％的NaCl和0.2％的KCl，连续4周，以诱导大鼠高血压。通过植入子遥测连续测量腹主动脉内的血压。马兜铃酮以橄榄油为溶剂，配制成浓度为100mg/ml的注射溶剂，进行腹腔注射1ml/kg，同时设对照组腹腔注射橄榄油1ml/kg，记录腹主动脉血压，以给药后的血压值-给药前的血压值，计算给予马兜铃酮、橄榄油前后血压的差值，根据图4可知，马兜铃酮给药前后收缩压、平均动脉压和舒张压的差值均为负值，表明马兜铃酮降低了收缩压、平均动脉压和舒张压，且具有显著性差异(n＝3,*P<0.05,与对照组比)，结果表明马兜铃酮具有降血压的作用。

综上，本申请的马兜铃烷型倍半萜类化合物甘松香酮H和马兜铃酮均能够舒张胸主动脉、肠系膜动脉和冠状动脉，舒张血管，马兜铃酮能够增加血管内皮细胞中eNOS磷酸化，保护血管内皮细胞，降低血压，因此本申请的马兜铃烷型倍半萜类化合物能够用于预防和/或治疗心脑血管疾病，从而用于制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物。进一步地，包含马兜铃烷型倍半萜类化合物的药物组合物，同样能够用于制备预防和/或治疗心脑血管疾病的药物。

以上所述仅为本申请的较佳实施例，并非用于限定本申请的保护范围。凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本申请的保护范围内。

Claims

1.马兜铃烷型倍半萜类化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的用途，其中，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物选自马兜铃酮和甘松香酮H中的至少一种；所述心脑血管疾病为高血压。

2.一种药物组合物在制备预防和/或治疗高血压药物中的用途，其中，所述药物组合物包含马兜铃烷型倍半萜类化合物，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物选自马兜铃酮和甘松香酮H中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的用途，其中，所述马兜铃烷型倍半萜类化合物是以单体的形式提供，或以包含其的植物提取物的形式提供。

4.根据权利要求3所述的用途，其中，所述植物提取物选自甘松提取物、马兜铃提取物、香附提取物、藏菖蒲提取物和石菖蒲提取物中的至少一种。

5.根据权利要求2所述的用途，其中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。

6.根据权利要求5所述的用途，其中，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自溶剂、稀释剂、崩解剂、表面活性剂、助流剂、粘合剂、润滑剂、等渗剂、防腐剂、稳定剂、水合剂、缓冲剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂中的至少一种。