CN113603803A - 一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法 - Google Patents

一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113603803A
CN113603803A CN202110991560.8A CN202110991560A CN113603803A CN 113603803 A CN113603803 A CN 113603803A CN 202110991560 A CN202110991560 A CN 202110991560A CN 113603803 A CN113603803 A CN 113603803A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
phytosterol
dragon fruit
stems
steps
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110991560.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113603803B (zh
Inventor
唐雅园
何雪梅
孙健
李昌宝
零东宁
刘国明
李丽
盛金凤
易萍
王雪峰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences filed Critical Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN202110991560.8A priority Critical patent/CN113603803B/zh
Priority to NL2029555A priority patent/NL2029555B1/en
Publication of CN113603803A publication Critical patent/CN113603803A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113603803B publication Critical patent/CN113603803B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/02—Solvent extraction of solids
    • B01D11/0288—Applications, solvents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/02—Solvent extraction of solids
    • B01D11/0203—Solvent extraction of solids with a supercritical fluid
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/02—Solvent extraction of solids
    • B01D11/0261—Solvent extraction of solids comprising vibrating mechanisms, e.g. mechanical, acoustical
    • B01D11/0265—Applying ultrasound
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D9/00—Crystallisation
    • B01D9/0004—Crystallisation cooling by heat exchange
    • B01D9/0013—Crystallisation cooling by heat exchange by indirect heat exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D9/00—Crystallisation
    • B01D9/005—Selection of auxiliary, e.g. for control of crystallisation nuclei, of crystal growth, of adherence to walls; Arrangements for introduction thereof
    • B01D9/0054—Use of anti-solvent
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Acoustics & Sound (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Thermal Sciences (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于农副产品深加工技术领域，具体涉及一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，它包括以下制备步骤：(1)火龙果茎粉末制备；(2)植物甾醇和多糖联合提取；(3)植物甾醇和多糖分离；(4)植物甾醇纯化；(5)多糖纯化。本发明以火龙果茎为原料，原料易得，通过本发明方法，可以同时提取植物甾醇和多糖，大大提升了火龙果茎的附加价值，充分利用资源，而且通过本发明方法制备的“植物甾醇具有高纯度、多糖具有高得率和高含量”的优势。

Description

一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法
技术领域
本发明属于农副产品深加工技术领域，具体涉及一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法。
背景技术
火龙果为仙人掌科(Cactaceae)三角柱属(Hylocereus undatus)和蛇鞭柱属(Seleniereus mejalantous)的多年生植物，是一种高维生素、低糖类、低脂肪的保健水果，近年来在我国海南、广西、福建、广东等省份大规模种植。在火龙果的栽培过程中，为提高大果率和果实品质，通常不断修剪火龙果分枝，由此产生大量的废弃茎。合理开发利用火龙果茎不仅可降低其处理成本，还可提高其附加值。但火龙果茎目前多作为一种废弃物被扔掉，对其鲜有利用。多项研究指出火龙果茎富含植物多糖、植物甾醇等生物活性成分，具有较高的开发利用价值。
植物多糖是一种髙分子聚合物，在机体所有的生命活动中起着十分重要的作用。植物多糖有多种重要的生理作用，能够增强机体免疫功能，抑制肿瘤细胞生长、保护肝脏等器官以及延缓衰老等。以传统的水提醇沉法得到火龙果茎中的多糖在干样中的含量约占7％。目前火龙果茎多糖提取方法存在多糖提取率低、杂质多、提取时间长、设备要求高等缺点。
植物甾醇是一类具有生理活性的物质，很早就作为预防动脉粥样硬化的药物。FDA根据研究报告作出声明，每天至少摄入1.3g植物甾醇可起到降低胆固醇功效。因此在食品工业中，植物甾醇作为食品添加剂中的降胆固醇成分正日益受到人们的重视。研究表明火龙果茎中植物甾醇在茎干品中平均含量高达0.311％。经现代分析技术鉴定，火龙果茎中含有麦角甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、菜籽甾醇、蒲公英甾醇等多种植物甾醇。
目前尚无如何从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的相关研究，因此研究开发一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，进一步提升火龙果茎的附加价值非常有必要。
发明内容
本发明旨在解决上述技术问题，提供一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，解决现有技术中以火龙果茎为原料时，没有同时提取植物甾醇和多糖的技术问题。
本发明的技术方案为：
一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，包括以下制备步骤：
(1)火龙果茎粉末制备：
1)取新鲜火龙果茎，打浆，得到火龙果茎浆料；
2)将火龙果茎浆料与低共熔溶剂溶液按固液比为100-120:1(g/L)混合均匀，得到混合物；
3)混合物超声提取，离心分离，收集得到沉淀物；
4)将沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎粉末；
(2)植物甾醇和多糖联合提取：取火龙果茎粉末，置于亚临界水反应釜中，按照固液比1:50-75(g/mL)加入去离子水，提取温度为165-180℃，超声功率为180-200W，控制压力为7-10MPa，提取时间为25-35min，离心分离，收集上清液；
(3)植物甾醇和多糖分离：将上清液于离心式膜蒸馏装置中进行单向分馏，浓缩倍数为原体积1/6-1/4倍，分别收集膜两侧的溶液，得到过膜溶液和未过膜浓缩液；
(4)植物甾醇纯化：将步骤(3)得到的过膜溶液，按照料液比为1：9-12(g/mL)加入环己酮-乙酸乙酯混合液，结晶，得到植物甾醇；
(5)多糖纯化：将步骤(3)得到的未过膜浓缩液进行两次醇沉，得到第二沉淀物，将第二沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎多糖。
本发明的步骤(2)中，以亚临界流体萃取火龙果茎粉末，通过升温加压，使水的温度介于沸点之上、亚临界温度以下而仍保持液体状态，此称为亚临界水；在亚临界状态下，水的介电常数会降低，进而表现出类似于有机溶剂的特性，使许多弱极性的成分能溶解到亚临界水中。本发明用亚临界水作为提取介质，同时从火龙果茎浆中提取植物甾醇和多糖，提高了植物甾醇和多糖的提取率，大大减少溶剂的使用，更加安全环保。
本发明所述步骤2)中，低共熔溶剂溶液的制备方法为：将脯氨酸、1,4-丁二醇和乳酸按摩尔比为2.0-2.5:3.0-3.5:1-1.5的比例混合均匀，得到三元低共熔溶剂；所得三元低共熔溶剂与蒸馏水按质量比为7:3(w/w)的比例混合，得到低共熔溶剂溶液。本发明以低共熔溶剂溶液与火龙果茎浆料混合，不仅可以除去维生素、色素、重金属、农药残留等杂质和有害成分，而且不影响植物甾醇和多糖的提取；相较传统处理方法，本发明的原料处理过程更加安全、环保，同时也为后续植物甾醇、多糖的制备提高提取率和纯度奠定基础。
本发明所述步骤3)中，在55-65℃下超声提取60-80min。当超声提取的温度低于55℃时，提取的效率低，但是温度超过65℃时，温度过高会使得溶剂汽化，减少溶剂与原料的接触，降低提取率，不利于提取有效成分和除杂，同时温度过高会破坏有效成分结构，影响后续得率。
为了获得更好的分离效果，本发明所述步骤3)和(2)中，离心分离的条件均优选为：转速为6000-8000rpm/min，时间为15-20min。
本发明所述步骤(3)中，单向分馏的条件为：按进料流速0.76-0.93mbar、450-650rpm/min、3-5滴/s条件，并在预热温度40-50℃和冷凝面温度6-10℃的恒定条件下进行。单向分馏参数设置不合理，多糖和植物甾醇分离不彻底，某些分子量低的寡糖或者单糖容易通过膜混入植物甾醇中，降低植物甾醇的纯度，因此为了将多糖和植物甾醇彻底分离，提高植物甾醇的纯度，单向分馏的各参数必须合理设置。
本发明所述步骤(4)中，环己酮和乙酸乙酯的体积比为1:1。为了获得高纯度的植物甾醇，纯化的溶剂非常重要，特别是以火龙果茎为底物提取的植物甾醇，本发明以环己酮和乙酸乙酯复配溶剂对植物甾醇进行纯化，能够提高植物甾醇的纯度，而且效率高。
为了获得高纯度的植物甾醇，本发明所述步骤(4)中，结晶温度为-5-5℃、结晶时间为4-6h。
本发明所述步骤(5)中，两次醇沉具体为：向步骤(3)得到的未过膜浓缩液中按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中静置20-24h进行第一次醇沉，过滤得到第一沉淀物；向第一沉淀物中加入去离子水，加热溶解后过滤去除不溶物，再按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中放置12-16h进行第二次醇沉，过滤得到第二沉淀物。
由于采用上述技术方案，本发明的有益效果为：
本发明以火龙果茎为原料，原料易得，通过本发明方法，可以同时提取植物甾醇和多糖，大大提升了火龙果茎的附加价值，充分利用资源，而且通过本发明方法制备的“植物甾醇具有高纯度、多糖具有高得率和高含量”的优势。
附图说明
图1为本发明实施例2火龙果茎多糖单糖组成图谱；
图2为本发明实施例2火龙果茎多糖电镜扫描图。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，包括以下制备步骤：
(1)低共熔溶剂溶液制备：低共熔溶剂溶液的制备方法为：将脯氨酸、1,4-丁二醇和乳酸按摩尔比为2.0:3.0:1.5的比例混合均匀，得到三元低共熔溶剂；所得三元低共熔溶剂与蒸馏水按质量比为7:3(w/w)的比例混合，得到低共熔溶剂溶液；
(2)火龙果茎粉末制备：
1)取新鲜火龙果茎，打浆，得到火龙果茎浆料；
2)将火龙果茎浆料与低共熔溶剂溶液按固液比为120:1(g/L)混合均匀，得到混合物；
3)混合物在65℃下超声提取60min，以8000rpm/min转速离心分离15min，收集得到沉淀物；
4)将沉淀物放入超声辅助真空冷冻干燥机冷冻干燥，得到火龙果茎粉末；
(3)植物甾醇和多糖联合提取：取火龙果茎粉末，置于亚临界水反应釜中，按照固液比1:75(g/mL)加入去离子水，提取温度为165℃，超声功率为200W，控制压力为7MPa，提取时间为35min，以6000rpm/min转速离心分离20min，收集上清液；
(4)植物甾醇和多糖分离：将上清液于离心式膜蒸馏装置中，按进料流速0.93mbar、450rpm/min、3滴/s条件，并在预热温度50℃和冷凝面温度6℃的恒定条件下进行单向分馏，浓缩倍数为原体积1/6倍，分别收集膜两侧的溶液，得到过膜溶液和未过膜浓缩液；
(5)植物甾醇纯化：将步骤(4)得到的过膜溶液，按照料液比为1:12(g/mL)加入环己酮-乙酸乙酯(体积比为1:1)混合液，在-5℃温度下结晶4h，得到植物甾醇；
(6)多糖纯化：将向步骤(4)得到的未过膜浓缩液中按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中静置24h进行第一次醇沉，过滤得到第一沉淀物；向第一沉淀物中加入去离子水，加热溶解后过滤去除不溶物，再按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中放置12h进行第二次醇沉，过滤得到第二沉淀物，得到第二沉淀物，将第二沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎多糖。
实施例2
一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，包括以下制备步骤：
(1)低共熔溶剂溶液制备：低共熔溶剂溶液的制备方法为：将脯氨酸、1,4-丁二醇和乳酸按摩尔比为2.3:3.3:1.2的比例混合均匀，得到三元低共熔溶剂；所得三元低共熔溶剂与蒸馏水按质量比为7:3(w/w)的比例混合，得到低共熔溶剂溶液；
(2)火龙果茎粉末制备：
1)取新鲜火龙果茎，打浆，得到火龙果茎浆料；
2)将火龙果茎浆料与低共熔溶剂溶液按固液比为110:1(g/L)混合均匀，得到混合物；
3)混合物在60℃下超声提取70min，以7000rpm/min转速离心分离18min，收集得到沉淀物；
4)将沉淀物放入超声辅助真空冷冻干燥机冷冻干燥，得到火龙果茎粉末；
(3)植物甾醇和多糖联合提取：取火龙果茎粉末，置于亚临界水反应釜中，按照固液比1:65(g/mL)加入去离子水，提取温度为175℃，超声功率为190W，控制压力为8MPa，提取时间为30min，以7000rpm/min转速离心分离18min，收集上清液；
(4)植物甾醇和多糖分离：将上清液于离心式膜蒸馏装置中，按进料流速0.85mbar、550rpm/min、4滴/s条件，并在预热温度45℃和冷凝面温度8℃的恒定条件下进行单向分馏，浓缩倍数为原体积1/5倍，分别收集膜两侧的溶液，得到过膜溶液和未过膜浓缩液；
(5)植物甾醇纯化：将步骤(4)得到的过膜溶液，按照料液比为1:10(g/mL)加入环己酮-乙酸乙酯(体积比为1:1)混合液，在0℃温度下结晶5h，得到植物甾醇；
(6)多糖纯化：将向步骤(4)得到的未过膜浓缩液中按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中静置22h进行第一次醇沉，过滤得到第一沉淀物；向第一沉淀物中加入去离子水，加热溶解后过滤去除不溶物，再按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中放置14h进行第二次醇沉，过滤得到第二沉淀物，得到第二沉淀物，将第二沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎多糖，其单糖组成图谱见图1，电镜扫描图见图2。
从图1可知，实施例2得到的火龙果茎多糖由甘露糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖等9种单糖组成，本实施例制备得到的火龙果茎多糖清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50分别为2.3mg/mL和1.2mg/mL，具有较高的抗氧化活性。
从图2可看到实施例2得到的火龙果茎多糖形貌呈碎片状，大小和形状不均匀。火龙果茎多糖由许多表面颗粒的块状组成，类似于利用酸溶液提取的海带多糖。
实施例3
一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，包括以下制备步骤：
(1)低共熔溶剂溶液制备：低共熔溶剂溶液的制备方法为：将脯氨酸、1,4-丁二醇和乳酸按摩尔比为2.5:3.5:1的比例混合均匀，得到三元低共熔溶剂；所得三元低共熔溶剂与蒸馏水按质量比为7:3(w/w)的比例混合，得到低共熔溶剂溶液；
(2)火龙果茎粉末制备：
1)取新鲜火龙果茎，打浆，得到火龙果茎浆料；
2)将火龙果茎浆料与低共熔溶剂溶液按固液比为100:1(g/L)混合均匀，得到混合物；
3)混合物在55℃下超声提取80min，以6000rpm/min转速离心分离20min，收集得到沉淀物；
4)将沉淀物放入超声辅助真空冷冻干燥机冷冻干燥，得到火龙果茎粉末；
(3)植物甾醇和多糖联合提取：取火龙果茎粉末，置于亚临界水反应釜中，按照固液比1:50(g/mL)加入去离子水，提取温度为180℃，超声功率为180W，控制压力为10MPa，提取时间为25min，以8000rpm/min转速离心分离15min，收集上清液；
(4)植物甾醇和多糖分离：将上清液于离心式膜蒸馏装置中，按进料流速0.76mbar、650rpm/min、5滴/s条件，并在预热温度40℃和冷凝面温度10℃的恒定条件下进行单向分馏，浓缩倍数为原体积1/4倍，分别收集膜两侧的溶液，得到过膜溶液和未过膜浓缩液；
(5)植物甾醇纯化：将步骤(4)得到的过膜溶液，按照料液比为1:12(g/mL)加入环己酮-乙酸乙酯(体积比为1:1)混合液，在5℃温度下结晶6h，得到植物甾醇；
(6)多糖纯化：将向步骤(4)得到的未过膜浓缩液中按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中静置20h进行第一次醇沉，过滤得到第一沉淀物；向第一沉淀物中加入去离子水，加热溶解后过滤去除不溶物，再按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中放置16h进行第二次醇沉，过滤得到第二沉淀物，得到第二沉淀物，将第二沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎多糖。
试验例1
1、植物甾醇纯度测量方法：称取10mgβ-谷甾醇标准品，用乙酸酐溶解并定容至10mL，依次吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0m L溶液置于5mL容量瓶中，用乙酸酐定容至5mL，将已定容的标准液移到小试管中，加入0.1mL浓硫酸，震荡，反应10min后，在波长660nm处测定不同浓度标准液的吸光值，空白管以乙酸酐替代β-谷甾醇标准液，其余步骤均相同。以β-谷甾醇标准液浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。采用标准曲线法测定植物甾醇含量，按下列公式进一步计算火龙果茎中植物甾醇含量。
植物甾醇含量＝C×V/m
式中：C为标准曲线计算得样品植物甾醇浓度，mg/mL；V为测定液样品的体积，mL；m为称取的火龙果茎粉末样品的质量，g。
2、火龙果茎多糖得率和含量的计算方法：
(1)火龙果茎多糖得率(％)＝(多糖质量/火龙果茎粉末质量)×100％。
(2)采用蒽酮—硫酸法，测得的吸光度值通过葡萄糖标准曲线换算样品中多糖浓度，按照下列公式进一步计算火龙果茎多糖含量：
火龙果茎多糖含量(mg/g)＝(C×V×n)/(m×1000)
式中，C为标准曲线计算得样品多糖浓度，μg/mL；V为多糖溶液体积，mL；n为稀释倍数；m为火龙果茎粉末质量，g。
表1低共熔溶剂溶液组成对植物甾醇纯度和火龙果茎多糖得率的影响
Figure BDA0003232528240000071
Figure BDA0003232528240000081
注：表1中不同小写字母分别表示不同低共熔溶剂溶液组成下差异显著(p值<0.05)。另外，表1中，各组除低共熔溶剂溶液组成不同外，其余同实施例2。
从表1可知，低共熔溶剂处理火龙果茎浆料对后续植物甾醇纯度和火龙果茎多糖得率、含量影响很大，对于低共熔溶剂溶液组成，各组分的配比改变或者组分更改，后续制备得到的植物甾醇纯度降低，火龙果茎多糖得率和含量也会降低。由此可知，为了获得高纯度的植物甾醇纯度和高得率、高含量的火龙果茎多糖，低共熔溶剂组分配比和选择极为重要。
表2超声功率对植物甾醇纯度和火龙果茎多糖得率的影响
Figure BDA0003232528240000082
Figure BDA0003232528240000091
注：表2中不同小写字母分别表示不同超声功率下差异显著(p值<0.05)。另外，表2中，各组除超声功率不同外，其余同实施例2。
从表2可知，制备火龙果茎粉末时，超声功率在一定范围内，能够为后续植物甾醇纯化、火龙果茎多糖得率和含量奠定基础，超声功率过高或者过低，都不利于植物甾醇后续纯化、提高火龙果茎多糖得率和含量。
表3超声温度对植物甾醇纯度和火龙果茎多糖得率的影响
Figure BDA0003232528240000092
注：表3中不同小写字母分别表示不同超声温度下差异显著(p值<0.05)。另外，表3中，各组除超声温度不同外，其余同实施例2。
从表3可知，在制备火龙果茎粉末，超声提取时，提取的温度过高过低，都不利于植物甾醇纯度和火龙果茎多糖得率、含量的提高。
表4纯化溶剂对植物甾醇纯度的影响
Figure BDA0003232528240000093
Figure BDA0003232528240000101
注：表4中不同小写字母分别表示不同纯化溶剂组成下差异显著(p值<0.05)。另外，表4中，各组除纯化溶剂组成不同外，其余同实施例2。
从表4可知，在对植物甾醇纯化时，纯化溶剂的组成对于植物甾醇纯度有协同作用，其配比及组成不可替代。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。

Claims (8)

1.一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于，包括以下制备步骤：
(1)火龙果茎粉末制备：
1)取新鲜火龙果茎，打浆，得到火龙果茎浆料；
2)将火龙果茎浆料与低共熔溶剂溶液按固液比为100-120:1(g/L)混合均匀，得到混合物；
3)混合物超声提取，离心分离，收集得到沉淀物；
4)将沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎粉末；
(2)植物甾醇和多糖联合提取：取火龙果茎粉末，置于亚临界水反应釜中，按照固液比1:50-75(g/mL)加入去离子水，提取温度为165-180℃，超声功率为180-200W，控制压力为7-10MPa，提取时间为25-35min，离心分离，收集上清液；
(3)植物甾醇和多糖分离：将上清液于离心式膜蒸馏装置中进行单向分馏，浓缩倍数为原体积1/6-1/4倍，分别收集膜两侧的溶液，得到过膜溶液和未过膜浓缩液；
(4)植物甾醇纯化：将步骤(3)得到的过膜溶液，按照料液比为1:9-12(g/mL)加入环己酮-乙酸乙酯混合液，结晶，得到植物甾醇；
(5)多糖纯化：将步骤(3)得到的未过膜浓缩液进行两次醇沉，得到第二沉淀物，将第二沉淀物冷冻干燥，得到火龙果茎多糖。
2.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤2)中，低共熔溶剂溶液的制备方法为：将脯氨酸、1,4-丁二醇和乳酸按摩尔比为2.0-2.5:3.0-3.5:1-1.5的比例混合均匀，得到三元低共熔溶剂；所得三元低共熔溶剂与蒸馏水按质量比为7:3(w/w)的比例混合，得到低共熔溶剂溶液。
3.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤3)中，在55-65℃下超声提取60-80min。
4.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤3)和(2)中，离心分离的条件均为：转速为6000-8000rpm/min，时间为15-20min。
5.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，单向分馏的条件为：按进料流速0.76-0.93mbar、450-650rpm/min、3-5滴/s条件，并在预热温度40-50℃和冷凝面温度6-10℃的恒定条件下进行。
6.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，环己酮和乙酸乙酯的体积比为1:1。
7.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，结晶温度为-5-5℃、结晶时间为4-6h。
8.如权利要求1所述从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，两次醇沉具体为：向步骤(3)得到的未过膜浓缩液中按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中静置20-24h进行第一次醇沉，过滤得到第一沉淀物；向第一沉淀物中加入去离子水，加热溶解后过滤去除不溶物，再按照体积比1:3(v/v)加入体积分数95％乙醇并在冰水中放置12-16h进行第二次醇沉，过滤得到第二沉淀物。
CN202110991560.8A 2021-08-27 2021-08-27 一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法 Active CN113603803B (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110991560.8A CN113603803B (zh) 2021-08-27 2021-08-27 一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法
NL2029555A NL2029555B1 (en) 2021-08-27 2021-10-29 Method for simultaneously extracting phytosterols and polysaccharides from pitaya stems

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110991560.8A CN113603803B (zh) 2021-08-27 2021-08-27 一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113603803A true CN113603803A (zh) 2021-11-05
CN113603803B CN113603803B (zh) 2022-12-23

Family

ID=78309465

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110991560.8A Active CN113603803B (zh) 2021-08-27 2021-08-27 一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN113603803B (zh)
NL (1) NL2029555B1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115057949A (zh) * 2022-07-22 2022-09-16 广西壮族自治区农业科学院 从火龙果茎中提取的活性多糖类化合物及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102250198A (zh) * 2011-05-18 2011-11-23 浙江农星生物科技有限公司 一种从火龙果茎中提取植物甾醇的方法
CN108553938A (zh) * 2018-05-22 2018-09-21 江苏农牧科技职业学院 一种亚临界水萃取牡丹籽甾醇的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106349404A (zh) * 2016-08-24 2017-01-25 海南北纬十八度果业有限公司 一种火龙果果茎果胶及其制备方法和应用
CN108324606B (zh) * 2017-03-01 2020-11-24 齐鲁工业大学 一种火龙果茎提取物及其制备方法和应用
CN109160955A (zh) * 2018-11-05 2019-01-08 贺州学院 火龙果果皮提取多糖的方法
CN112022765B (zh) * 2020-09-10 2022-09-20 广州善合化工有限公司 一种火龙果提取液的制备方法及由其制备得到的火龙果提取液和应用
CN112029009B (zh) * 2020-09-30 2022-10-04 海南北纬十八度食品加工有限公司 一种火龙果花多糖的制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102250198A (zh) * 2011-05-18 2011-11-23 浙江农星生物科技有限公司 一种从火龙果茎中提取植物甾醇的方法
CN108553938A (zh) * 2018-05-22 2018-09-21 江苏农牧科技职业学院 一种亚临界水萃取牡丹籽甾醇的方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
彭超等: "溶剂结晶法分离纯化植物甾醇", 《粮食与油脂》 *
李国胜等: "响应面法优化亚临界水提取火龙果茎多糖", 《福建农业学报》 *
梁少华主编: "《植物油料资源综合利用》", 31 December 2019, 东南大学出版社 *
欧岳姣等: "响应面法优化火龙果茎甾醇的提取及纯化工艺研究", 《生物资源》 *
陈素娥等: "超声辅助低共熔溶剂法提取葡萄皮中残留农药", 《食品研究与开发》 *
马若影等: "亚临界水提取红心火龙果茎多糖及其抗氧化活性", 《食品工业科技》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115057949A (zh) * 2022-07-22 2022-09-16 广西壮族自治区农业科学院 从火龙果茎中提取的活性多糖类化合物及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN113603803B (zh) 2022-12-23
NL2029555B1 (en) 2023-03-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101704867B (zh) 一种柚皮苷或橙皮苷的制备方法
CN101348529B (zh) 一种枸杞多糖的提取分离方法
CN102936292B (zh) 一种高抗氧化活性枸杞多糖的制备方法
CN106905440A (zh) 一种银耳多糖提取的新方法
US10835552B2 (en) Method for preparing linseed polysaccharide having antiviral activity and immunological activity, and use of the linseed polysaccharide
CN115260334B (zh) 一种桑叶多糖的复合提取工艺
CN102391385A (zh) 一种霍山石斛中生物活性多糖的提取、纯化方法
CN102212144A (zh) 一种从紫花苜蓿干草中制备纯多糖的方法
CN101544998A (zh) 一种茶多糖的分离纯化制备方法及抗肿瘤活性
CN113603803B (zh) 一种从火龙果茎中同时提取植物甾醇和多糖的方法
CN115894732A (zh) 一种基于双水相溶剂系统的枸杞多糖提取方法
CN107286264A (zh) 大枣营养物质分离的深加工方法
CN107759709A (zh) 一种黄精多糖的提取方法
CN104844721B (zh) 一种茶树菇多糖的提取分离方法
CN104592412A (zh) 一种提取板栗多糖的方法
CN103980730A (zh) 一种高纯度火龙果色素的制备方法
CN112778394A (zh) 一种刺梨果渣中蔷薇酸提取物的制备方法
CN104744601A (zh) 一种阿魏菇多糖提取与纯化的方法
CN112442136A (zh) 一种银耳功能性成分的提取方法
CN109043117B (zh) 一种酸性澳洲坚果糖蛋白及其生产方法
CN105566512A (zh) 一种柿果果胶的提取方法
CN102964407B (zh) 一种从土茯苓中提取落新妇苷的方法及其制成的落新妇苷
CN105362346A (zh) 一种从厚朴皮中制备高纯度厚朴总酚的方法
CN111592578B (zh) 山茶粕中的茶皂素提取工艺及其在氨基酸洁面皂中的应用
CN114668790A (zh) 一种超声辅助低共熔溶剂法提取蒲公英抗炎成分的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant