CN113599512A

CN113599512A - 免疫组合物

Info

Publication number: CN113599512A
Application number: CN202110468680.XA
Authority: CN
Inventors: 冷治湘; 苏柏栩; 谌伯纲
Original assignee: Guoguang Biotechnology Co ltd
Current assignee: Guoguang Biotechnology Co ltd
Priority date: 2020-05-04
Filing date: 2021-04-28
Publication date: 2021-11-05
Anticipated expiration: 2041-04-28
Also published as: US20210353742A1; EP3916005A2; TWI797603B; KR20210135423A; JP2021176840A; JP7170783B2; CN113599512B; US11904013B2; SG10202104508YA; EP3916005A3; TW202142557A

Abstract

本申请提供一种免疫组合物、SARS‑CoV‑2疫苗及载体。所述免疫组合物包含重组蛋白或编码所述重组蛋白的核酸分子，所述重组蛋白包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及由多核苷酸所编码的与SEQ ID NO:1‑4具有至少80％同源性的任何多肽所组成的组，其中所述重组蛋白含有IgG1 Fc蛋白片段，所述IgG1 Fc蛋白片段具有至少六个氨基酸的长度。SARS‑CoV‑2疫苗包含所述重组蛋白或编码所述重组蛋白的核酸分子。所述载体包含编码所述重组蛋白的核酸分子。经由上述免疫组合物、SARS‑CoV‑2疫苗及载体，可以诱导针对SARS‑CoV‑2病毒的中和抗体产生。

Description

免疫组合物

技术领域

本申请涉及一种免疫组合物，尤其是一种用于针对冠状病毒的免疫组合物。

背景技术

新冠肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)为一种由严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,以下简称SARS-CoV-2)所引起的传染性疾病。由于SARS-CoV-2在全世界快速传播，并且让世界卫生组织(WorldHealth Organization,WHO)在2020年1月30日宣告有全球性健康紧急事件发生，使得SARS-CoV-2所引发的健康紧急事件已经引起严重关注。因此，为了应付新冠肺炎的准备来开发有效的疫苗在当前为一种急迫需要。

SARS-CoV-2为一种正链单链RNA病毒，其属于网巢病毒目中冠状病毒科家族的正冠状病毒子家族的乙型冠状病毒属(betacoronavirus,beta-CoVs)((2018).Arch.Virol.163,2601–2631)。严重急性呼吸道综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸道综合征冠状病毒(MERS-CoV)也属于beta-CoVs(N Engl J Med.2003May 15；348(20):1967-76.；N Engl J Med.2012Nov 8；367(19):1814-20)。特别是，SARS-CoV和SARS-CoV-2都是通过位于病毒外膜上的棘蛋白(spike protein)中的受体结合域(receptor-bindingdomain,RBD)与细胞上的血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)交互作用的调节作用，使其能够进入宿主细胞中。

发明内容

为了开发出一种针对新冠肺炎的疫苗，本申请的目的即提供一种免疫组合物，其包含重组蛋白或是编码所述重组蛋白的核酸分子，所述重组蛋白包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及由多核苷酸所编码的与SEQ ID NO:1-4具有至少80％同源性的任何多肽所组成的组，其中所述重组蛋白含有IgG1Fc蛋白片段，所述IgG1Fc蛋白片段具有至少六个氨基酸的长度。

如上所述的免疫组合物，其中所述IgG1 Fc蛋白片段具有十二至十八个氨基酸的长度。

如上所述的免疫组合物，其中所述重组蛋白与分泌信号肽融合。

如上所述的免疫组合物，进一步包含免疫化合物、佐剂、药学上可接受的载体、稳定剂或保存剂。

为达上述目的及其他目的，本申请提供一种SARS-CoV-2疫苗，其包含：重组蛋白或是编码所述重组蛋白的核酸分子，所述重组蛋白包括一段序列，所述序列选自由SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及由多核苷酸所编码的与SEQ ID NO:1-4具有至少80％同源性的任何多肽所组成的组，其中所述重组蛋白含有IgG1 Fc蛋白片段，所述IgG1 Fc蛋白片段具有至少六个氨基酸的长度。

如上所述的疫苗，其中所述IgG1 Fc蛋白片段具有十二至十八个氨基酸的长度。

如上所述的疫苗，其中所述重组蛋白与SARS-CoV-2的核壳磷蛋白(nucleocapsidphosphoprotein protein)、包膜蛋白(envelope protein)或膜蛋白(membrane protein)融合。

如上所述的疫苗，其中由所述核酸分子编码的重组蛋白与SARS-CoV-2的核壳磷蛋白、包膜蛋白或膜蛋白融合。

如上所述的疫苗，进一步包含免疫化合物、佐剂、药学上可接受的载体、稳定剂或保存剂。

为达上述目的及其他目的，本申请提供一种载体，其包含核酸分子，所述核酸分子编码重组蛋白，所述重组蛋白包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及由所述多核苷酸所编码的与SEQ ID NO:1-4具有至少80％同源性的任何多肽所组成的组，其中所述重组蛋白含有IgG1 Fc蛋白片段，所述IgG1 Fc蛋白片段具有至少六个氨基酸的长度。

如上所述的载体，其中由所述核酸分子编码的重组蛋白与SARS-CoV-2的核壳磷蛋白、包膜蛋白或膜蛋白融合。

如上所述的载体，其中所述载体选自由杆状病毒、痘疮病毒、禽痘病毒、腺病毒、甲病毒、棒状病毒和疱疹病毒所组成的组。

如上所述的载体，其中所述载体为杆状病毒。

为达上述目的及其他目的，本申请提供一种免疫组合物，其包含核酸分子，所述核酸分子包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8及SEQ IDNO:9所组成的组。

借由如上所述的免疫组合物、疫苗及载体，可以诱导针对SARS-CoV-2病毒的中和抗体产生，并且用于对抗新冠肺炎。

附图说明

图1示出RBD-Fc的氨基酸序列(SEQ ID NO:1)。

图2示出S2△TM-Fc的氨基酸序列(SEQ ID NO:2)。

图3示出S1-Fc的氨基酸序列(SEQ ID NO:3)。

图4示出S△TM-Fc的氨基酸序列(SEQ ID NO:4)。

图5示出分泌信号肽的氨基酸序列(SEQ ID NO:5)。

图6示出RBD-Fc、S2△TM-Fc、S1-Fc和S△TM-Fc的DNA凝胶电泳图像。

图7示出被病毒感染的细胞增生趋势。

图8示出蛋白质印迹法(Western Blot)分析图像中的感染后第三天、第四天及第五天的疫苗候选物表达量。(A)RBD-Fc；(B)S2△TM-Fc；(C)S1-Fc；(D)S△TM-Fc。

图9示出已纯化疫苗候选物的SDS-PAGE(左)和蛋白质印迹法分析(右)的图像。箭头指出所表达蛋白的预期位置。(A)RBD-Fc；(B)S2△TM-Fc；(C)S1-Fc；(D)S△TM-Fc；(S)样本液体；(FT)流经液体；(W)清洗液体；(E)洗脱液。

图10示出血清中的中和抗体效价，所述血清来自于已免疫化的小鼠的血液样本。

图11示出以来自于已免疫化的小鼠其针对新冠肺炎病毒的抗血清进行病毒蚀斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)的结果。

图12示出SARS-CoV-2的核壳磷蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO:10)、包膜蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO:11)或膜蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO:12)。

图13示出RBD-Fc的DNA序列(SEQ ID NO:6)。

图14示出S2△TM-Fc的DNA序列(SEQ ID NO:7)。

图15示出S1-Fc的DNA序列(SEQ ID NO:8)。

图16示出S△TM-Fc的DNA序列(SEQ ID NO:9)。

附图标记：

无

具体实施方式

为帮助了解本公开的目的、特征及功效，提供用于详细描述本公开的实施例及附图。

疫苗候选物的表达

首先，设计四个疫苗候选物的DNA序列，所述DNA序列分别编码重组蛋白RBD-Fc、重组蛋白S2△TM-Fc、重组蛋白S1-Fc和重组蛋白S△TM-Fc。图13示出RBD-Fc的DNA序列。图14示出S2△TM-Fc的DNA序列。图15示出S1-Fc的DNA序列。图16示出S△TM-Fc的DNA序列。

疫苗候选物是根据SARS-CoV-2棘蛋白(spike protein)(存取编号：NC_045512)的氨基酸序列所设计的。在此，RBD-Fc代表SARS-CoV-2的棘蛋白的受体结合域与IgG1重链恒定区2和重链恒定区3(Fc蛋白)融合，RBD-Fc的氨基酸序列在图1中示出；S2△TM-Fc代表SARS-CoV-2的棘蛋白的跨膜蛋白缺失的S2次单元与Fc蛋白融合，S2△TM-Fc的氨基酸序列在图2中示出；S1-Fc代表SARS-CoV-2的棘蛋白的S1次单元与Fc蛋白融合，S1-Fc的氨基酸序列在图3中示出；S△TM-Fc代表SARS-CoV-2的跨膜蛋白缺失的棘蛋白与Fc蛋白融合，S△TM-Fc的氨基酸序列在图4中示出。基于疫苗生产的目的，所有疫苗候选物的构建体皆与分泌信号肽(secreted signal peptide)融合，分泌信号肽位于重组蛋白的N端，Fc序列位于重组蛋白的C端。分泌信号肽的氨基酸序列在图5中示出。然而，在其他实施例中，分泌信号肽并非必要。

其次，上述四个疫苗候选物的DNA序列分别转殖到pFastBac 1载体中。在其他实施例中，所述载体可以选自痘疮病毒(vaccinia virus)、禽痘病毒(avipoxvirus)、腺病毒(adenovirus)、甲病毒(alphavirus)、棒状病毒(rhabdovirus)、疱疹病毒(herpesvirus)或其他已知适合的载体系统。

四个分别含有各个上述疫苗候选物DNA序列的pFastBac 1载体被转化(transformed)到大肠杆菌菌株DH10Bac中，用以产生含有上述四个疫苗候选物的DNA序列的重组Bacmid DNA。重组Bacmid DNA通过PCR分析鉴别。如图6所示，M表示分子量标记，数字“1”、“2”及“3”表示大肠杆菌菌株的编号，上述重组Bacmid DNA由上述大肠杆菌菌株中获得，RBD-Fc、S2△TM-Fc、S1-Fc和S△TM-Fc的理论重组Bacmid DNA大小分别为3,809bps、4,700bps、5,159bps和6,743bps。经确定的RBD-Fc、S2△TM-Fc、S1-Fc和S△TM-Fc的重组Bacmid DNA大小则分别为3,900bps、4,800bps、5,200bps和6,800bps，其与上述理论重组Bacmid DNA大小相对应。上述重组Bacmid DNA转化及PCR分析是根据Bac-to-Bac^TM杆状病毒表达系统用户指引(Bac-to-Bac^TMBaculovirus Expression System USER GUIDE)进行。

接着，分别将含有各个上述四个疫苗候选物的DNA序列的重组Bacmid DNA转染(transfected)到秋行军虫(S.frugiperda)细胞中(sf9细胞)用于杆状病毒生产。杆状病毒由DNA序列鉴别。上述重组Bacmid DNA的转染是根据Bac-to-Bac^TM杆状病毒表达系统用户指引进行。

最后，以分别具有0.1、0.001和0.0001的病毒感染复数(multiplicity ofinfection,MOI)的含有上述四个疫苗候选物DNA序列的杆状病毒感染sf9细胞持续五天，被病毒感染的细胞增生趋势于图7中示出。在感染后的第三天、第四天及第五天的时间点，收集被感染的sf9细胞以确认疫苗候选物的表达量，通过蛋白质印迹法检测在被感染的sf9细胞中合成的蛋白，结果示于图8，通过蛋白质基准点位置和以千道尔顿(kilodaltons,kda)表示的蛋白质大小指出，55kda(A:RBD-Fc)的重组蛋白、110kda(B:S2△TM-Fc)的重组蛋白、130kda(C:S1-Fc)的重组蛋白和170kda(D:S△TM-Fc)的重组蛋白部分为细胞中主要合成的蛋白。上述的蛋白质印迹法分析根据参考文献“A Guide to Polyacrylamide GelElectrophoresis and detection(Bio-Rad)”进行。

疫苗候选物的生产

准备sf9细胞，sf9细胞在insect-XPRESS无蛋白培养基(insect-XPRESS Protein-free media(Lonza Ltd))中，27℃环境下，生长到3.5～5×10⁶细胞/mL的密度。sf9细胞被具有0.1～0.0001的病毒感染复数(MOI)的含有上述四个疫苗候选物DNA序列的杆状病毒表达载体感染，用以生产疫苗候选物。在感染sf9细胞期间，疫苗候选物在杆状病毒多角体蛋白启动子的转录控制下生产疫苗候选物。sf9细胞在感染后72～96小时通过以6,000x g离心15分钟被收取。sf9细胞的悬浮液储存在4℃环境中。

疫苗候选物RBD-Fc的纯化

在此实施例中，将纯化RBD-Fc，RBD-Fc为非变性的且适于作为将进行蛋白A亲和性层析(protein A affinity chromatography)的用于人类用途的冠状病毒疫苗成分。将使用下列流程来从被重组杆状病毒感染的sf9细胞中纯化出RBD-Fc。

根据上述“疫苗候选物的表达”流程，准备2L的含有RBD-Fc的受感染sf9细胞的培养液，被感染的sf9细胞的初始细胞浓度为1.0x 10⁶细胞/mL，sf9细胞接着被感染持续三天，直到sf9细胞中的被感染细胞浓度达到4.0x 10⁶细胞/mL(存活率40-60％,MOI＝0.1)。受感染sf9细胞的培养液以9,000x g离心20分钟，以获得上清，以过滤器(0.22μm的孔径)过滤所述上清以获得样本液体。

准备填有20mL蛋白A树脂(Eshmuno A,Merck Millipore)的pharmacia XK 16/40管柱，并将其安装到AKTA纯化层析系统上。上述样本液体以20mL/分钟的流速(精确度(PreC)：0.30Mpa)加入到管柱中，收集流经的液体。在将上述样本液体倒入到管柱中后，以PBS(pH 7.3)进一步清洗管柱，直到清洗液体在280nm的UV吸光值返回到基线。流经管柱的清洗液体也被收集。在清洗管柱之后，将作为洗脱液的柠檬酸溶液(0.3M)倒入管柱中以获得与蛋白A结合的含有RBD-Fc的洗脱液。

由于杂质蛋白也会流经管柱进到洗脱液中，因此将先前含有RBD-Fc的洗脱液再一次利用大约5倍管柱体积的100mM柠檬酸(pH 3.0)从蛋白A树脂管柱中洗脱出，并且所述洗脱液以1M Tris-HCl(pH 9.0)中和。样本液体、流经液体、清洗液体和洗脱液通过SDS-PAGE分析如下。将样本液体、流经液体、清洗液体和洗脱液中的蛋白置于存在有2％的十二烷基硫酸钠和5％的β-巯基乙醇的沸水浴中持续10分钟以打断(disrupte)蛋白质，接着通过SDS-PAGE(存在有0.1％SDS的10％的聚丙烯酰胺凝胶)分析样本液体、流经液体、清洗液体和洗脱液中的蛋白，最后以考马斯蓝(Coomassie blue)染色。SDS-PAGE分析是根据参考文献“A Guide to Polyacrylamide Gel Electrophoresis and detection(Bio-Rad)”进行。

S2△TM-Fc、S1-Fc和S△TM-Fc的纯化以与RBD-Fc纯化流程相同的流程进行。

四个疫苗候选物的纯化结果如图9所示。纯化的疫苗候选物通过上述流程获得。

在其他实施例中，其他已知的蛋白质纯化技术也可以应用于纯化上述疫苗候选物。

来自于已免疫化的小鼠其针对SARS-CoV-2病毒的抗血清的病毒蚀斑减少溶斑抑制中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)

首先，准备十二组C57BL/6小鼠(7周大，雌性，重量为18～22克)，每组含有十只小鼠，通过肌肉内注射20μg的疫苗候选物(溶于50μl的PBS)使五组小鼠被免疫化三次；通过肌肉内注射20μg的疫苗候选物(溶于50μl的PBS，PBS中含有作为佐剂的氢氧化铝)使五组小鼠被免疫化三次；一组小鼠被肌肉内注射含有氢氧化铝的50μl的PBS三次；一组小鼠仅被肌肉内注射50μl的PBS三次。上述免疫化条件在表1中列出。

表1

*佐剂的量为500μg/剂

其次，在免疫化的时间点，第1、6及7组的小鼠被采血以检测中和抗体效价。结果示出于图10中，被施用RBD-Fc和佐剂的第7组小鼠具有较高抗体效价。

最后，将十二组单层vero E6细胞预先接种于一24孔板中的12孔内作为实验组。将获自上述被免疫化三次的12组小鼠的0.1mL的测试血清分别与100PFU/0.1mL的SARS-CoV-2病毒(由台湾大学医学院医学检验暨生物技术学系Sui-Yuan Chang教授提供)混合，并且于37℃培养60分钟。接着，十二组SARS-CoV-2病毒和测试血清的混合物分别加入十二组实验组中。同时，设立用于各个检验的十二组阳性对照孔(vero E6细胞与100PFU的SARS-CoV-2病毒在不加入上述血清的条件下于37℃环境中共同培养60分钟)作为阳性对照组，以确定上述细胞单层的感染度。随后，去除十二个实验组和十二个阳性对照组中的培养基，接着将覆盖培养基(overlay medium)加入十二个实验组和十二个阳性对照组中。具有十二个实验组和十二个阳性对照组的24孔板在37℃、5％的CO₂中持续培养六天，并且在第六天计算病毒蚀斑。病毒蚀斑减少中和试验的结果示于图11中，其证实当实验组含有与Fc蛋白融合的RBD结构域时(第1、3-5、7和9-10组)，可以有效地诱导针对SARS-CoV-2病毒的中和抗体产生，含有与Fc蛋白融合的RBD结构域及佐剂的实验组的功效更好，并且与Fc蛋白融合的S2△TM-Fc及佐剂的组合也可以诱导针对SARS-CoV-2病毒的中和抗体产生。

此外，用于SARS-CoV-2的SARS-CoV-2重组蛋白片段也可以被设计成与RBD、S1蛋白、S2蛋白或棘蛋白具有至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的相似度；用于SARS-CoV-2的Fc蛋白片段也可以被设计成具有至少六个氨基酸的长度，并且较佳地具有在12至18个氨基酸之间的长度。Fc蛋白片段的长度。Fc蛋白片段的长度可以是6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18个氨基酸。

图12示出SARS-CoV-2的核壳磷蛋白(nucleocapsid phosphoprotein protein)、包膜蛋白(envelope protein)和膜蛋白(membrane protein)。为了新冠肺炎疫苗的应用，SARS-CoV-2的核壳磷蛋白、包膜蛋白和膜蛋白也能够被设计成新冠肺炎疫苗的一部分，即SARS-CoV-2的核壳磷蛋白、包膜蛋白和膜蛋白可以与上述疫苗候选物融合。

如在本文中所使用的，两个氨基酸序列之间的“同源性百分比(percenthomology)”是使用在参考文献(Karlin and Altschul,Proc,Natl.Acad.Sci.USA87:2264-2268,1990)中描述的，并且如参考文献(Karlin and Altschul,Proc,Natl.Acad.Sci.USA90:5873-5877,1993)进行修改的算法来确定的。这种算法整合于参考文献(Altschul etal.,J.Mol.Biol.215:403-410,1990)的NBLAST和XBLAST程序中。BLAST蛋白质搜索以XBLAST程序执行，分数＝50，字长度＝3，以获得与参考多肽同源的氨基酸序列。为了用于比对目的的间隔对准，使用在参考文献(Altschul et al.,Nucleic Acids Res.25:3389-3402,1997)中描述的间隔的BLAST。当使用NBLAST和XBLAST程序时，使用各别程序的除错参数(例如，XBLAST和NBLAST)。见www.ncbi.nlm.nih.gov网站。

如上所述，与Fc蛋白融合的SARS-CoV-2重组蛋白诱导针对SARS-CoV-2病毒的中和抗体产生，并且其可以被用于作为针对新冠肺炎的疫苗(COVID-19)。

当本公开已经以具体实施例的方式描述，本领域技术人员可以在不脱离在权利要求中说明的本公开的范围和精神情况下，进行多种修改和变体。

<110> 国光生物科技股份有限公司

<120> 免疫组合物

<130>

<150> US 63/019,442

<151> 2020-05-04

<160> 12

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 458

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 重组棘蛋白

<400> 1

Asn Ile Thr Asn Leu Cys Pro Phe Gly Glu Val Phe Asn Ala Thr Arg

1 5 10 15

Phe Ala Ser Val Tyr Ala Trp Asn Arg Lys Arg Ile Ser Asn Cys Val

20 25 30

Ala Asp Tyr Ser Val Leu Tyr Asn Ser Ala Ser Phe Ser Thr Phe Lys

35 40 45

Cys Tyr Gly Val Ser Pro Thr Lys Leu Asn Asp Leu Cys Phe Thr Asn

50 55 60

Val Tyr Ala Asp Ser Phe Val Ile Arg Gly Asp Glu Val Arg Gln Ile

65 70 75 80

Ala Pro Gly Gln Thr Gly Lys Ile Ala Asp Tyr Asn Tyr Lys Leu Pro

85 90 95

Asp Asp Phe Thr Gly Cys Val Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp

100 105 110

Ser Lys Val Gly Gly Asn Tyr Asn Tyr Leu Tyr Arg Leu Phe Arg Lys

115 120 125

Ser Asn Leu Lys Pro Phe Glu Arg Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln

130 135 140

Ala Gly Ser Thr Pro Cys Asn Gly Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe

145 150 155 160

Pro Leu Gln Ser Tyr Gly Phe Gln Pro Thr Asn Gly Val Gly Tyr Gln

165 170 175

Pro Tyr Arg Val Val Val Leu Ser Phe Glu Leu Leu His Ala Pro Ala

180 185 190

Thr Val Cys Gly Pro Lys Lys Ser Thr Asn Leu Val Lys Asn Lys Cys

195 200 205

Val Asn Phe Asn Phe Asn Gly Leu Thr Gly Thr Gly Gly Gly Ser Gly

210 215 220

Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Thr Cys Pro Pro Cys

225 230 235 240

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

245 250 255

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

260 265 270

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

275 280 285

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

290 295 300

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

305 310 315 320

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

325 330 335

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

340 345 350

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

355 360 365

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

370 375 380

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<210> 2

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<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 重组棘蛋白

<400> 2

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1 5 10 15

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cggcaaggag tacaagtgca aggtgtcaaa caaggctctg cccgccccaa tcgagaagac 2160

catctccaag gccaagggcc agccaaggga acctcaggtc tacactctgc caccttcaag 2220

agaggaaatg accaagaacc aggtctccct gacttgcctg gtgaagggct tctacccttc 2280

agacatcgct gtggagtggg aatccaacgg acagcccgag aacaactaca agaccactcc 2340

cccagtgctg gacagcgacg gttctttctt cctgtacagc aagctgaccg tcgacaagtc 2400

taggtggcag cagggcaacg tcttctcttg ctcagtgatg cacgaagctc tgcacaacca 2460

ctacactcag aagtccctga gcctgtctcc tggcaagtaa ctcgaggcat gcggtaccaa 2520

gcttgtcgag aagtactaga ggatcataat cagccatacc acatttgtag aggttttact 2580

tgctttaaaa acctcccaca cctcccctga acctgaaaca taaatgatgc atgtgtggta 2640

ctgtatgcag ctatatgtac attagcatag catcacaatt cacaataagg catttttcca 2700

tgcattccag tgtgatggtc cagctcatca tgtactatca gttgatcaga tcatgctgac 2760

ctagaatccg aaccgatagt gatc 2784

<210> 8

<211> 3636

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 重组棘蛋白

<400> 8

aagaaattta ctgttttcgt aacagttttg taataaaaaa acctataaat attccggatt 60

attcataccg tcccaccatc gggcgcggat cccggtccga agcgcgcgga attcatgctg 120

ctggtcaacc agagccacca gggattcaac aaggagcaca cttccaagat ggtgagcgct 180

atcgtgctgt acgtcctgct cgctgctgct gctcactctg ctttcgctgc tgacgtcaac 240

ctcaccacta ggacccagct gcctcccgct tacaccaact cattcactag gggtgtgtac 300

taccctgaca aggtgttcag atccagcgtc ctgcactcca ctcaggacct gttcctgccc 360

ttcttcagca acgtcacctg gttccacgct atccacgtgt ccggcaccaa cggaactaag 420

aggttcgaca acccagtcct gcctttcaac gacggcgtgt acttcgcctc taccgagaag 480

tcaaacatca tcagaggttg gatcttcggc accactctgg actccaagac tcagagcctg 540

ctgatcgtca acaacgctac caacgtggtc atcaaggtgt gcgagttcca gttctgcaac 600

gaccctttcc tgggagtcta ctaccacaag aacaacaagt cttggatgga gtcagagttc 660

cgcgtctact cttcagccaa caactgcact ttcgagtacg tgtctcagcc cttcctgatg 720

gacctggaag gcaagcaggg caacttcaag aacctgcgcg agttcgtgtt caagaacatc 780

gacggttact tcaagatcta ctccaagcac acccctatca acctggtccg tgacctgccc 840

cagggtttca gcgctctgga gcctctggtg gacctgccca tcggcatcaa catcacccgc 900

ttccagactc tgctggctct gcaccgttcc tacctgactc caggcgactc cagctctgga 960

tggactgctg gtgctgctgc ttactacgtg ggctacctgc agcctaggac cttcctgctg 1020

aagtacaacg aaaacggaac catcacagac gctgtggact gcgctctgga cccactgtcc 1080

gaaaccaagt gcactctgaa gagcttcacc gtggagaagg gcatctacca gacttctaac 1140

ttcagggtcc agccaaccga atcaatcgtg agattcccca acatcactaa cctgtgccca 1200

ttcggagagg tcttcaacgc cacccgtttc gcttccgtgt acgcctggaa caggaagaga 1260

atctctaact gcgtggctga ctactcagtc ctgtacaact cagcctcctt cagcaccttc 1320

aagtgctacg gtgtgtctcc tactaagctg aacgacctgt gcttcaccaa cgtgtacgct 1380

gactcattcg tcatcagggg cgacgaggtg agacagatcg ctcccggaca gactggcaag 1440

atcgccgact acaactacaa gctgccagac gacttcaccg gttgcgtcat cgcctggaac 1500

tccaacaacc tggacagcaa agtgggtggc aactacaact acctgtaccg cctgttccgt 1560

aagtccaacc tgaagccatt cgagagggac atctctactg aaatctacca ggctggctca 1620

accccttgca acggcgtcga gggattcaac tgctacttcc cactgcagag ctacggattc 1680

cagcctacta acggcgtggg ataccagccc tacagagtgg tcgtgctgtc cttcgaactg 1740

ctgcacgccc cagctactgt gtgcggacct aagaagagca ccaacctggt gaagaacaag 1800

tgcgtcaact tcaacttcaa cggtctgacc ggtactggcg tcctgaccga gtctaacaag 1860

aagttcctgc cattccagca gttcggtcgc gacatcgctg acactaccga cgccgtgcgt 1920

gacccacaga ccctggaaat cctggacatc actccatgct ctttcggagg tgtgtcagtc 1980

atcactcctg gcaccaacac ttcaaaccag gtggccgtcc tgtaccagga cgtcaactgc 2040

accgaggtgc ctgtcgccat ccacgctgac cagctgaccc ccacttggcg cgtctactca 2100

accggttcca acgtgttcca gactcgtgct ggctgcctga tcggagccga gcacgtgaac 2160

aactcctacg aatgcgacat ccccatcgga gctggtatct gcgcctccta ccagacccaa 2220

actaacagcc cacgcagggc tcgcggcgga agcggtggct ctggaggttc aggcggatcc 2280

ggtggcagca cttgcccacc ttgcccagct ccagaactgc tgggaggtcc aagcgtgttc 2340

ctgttccctc ctaagcctaa ggacaccctg atgatctccc gtacccctga ggtcacttgc 2400

gtcgtggtcg acgtgagcca cgaggacccc gaagtcaagt tcaactggta cgtggacggc 2460

gtggaagtcc acaacgctaa gaccaagccc cgcgaggaac agtacaactc cacttaccgt 2520

gtggtcagcg tgctgaccgt cctgcaccag gactggctga acggaaagga atacaagtgc 2580

aaggtctcta acaaggccct gcctgctccc atcgaaaaga ctatctcaaa ggctaagggt 2640

cagcccaggg agccacaggt gtacaccctg cctccctcta gagaggaaat gaccaagaac 2700

caggtctcac tgacttgcct ggtgaaggga ttctacccat ccgacatcgc cgtggagtgg 2760

gaaagcaacg gtcagcctga gaacaactac aagaccactc cacctgtcct ggactctgac 2820

ggttcattct tcctgtactc taagctgact gtggacaagt cacgttggca gcagggcaac 2880

gtgttctctt gctcagtcat gcacgaagct ctgcacaacc actacaccca gaagtccctg 2940

agcctgtctc ctggcaagta actcgaggca tgcggtacca agcttgtcga gaagtactag 3000

aggatcataa tcagccatac cacatttgta gaggttttac ttgctttaaa aaacctccca 3060

cacctccccc tgaacctgaa acataaaatg aatgcaattg ttgttgttaa cttgtttatt 3120

gcagcttata atggttacaa ataaagcaat agcatcacaa atttcacaaa taaagcattt 3180

ttttcactgc attctagttg tggtttgtcc aaactcatca atgtatctta tcatgtctgg 3240

atctgatcac tgcttgagcc taggagatcc gaaccagata agtgaaatct agttccaaac 3300

tattttgtca tttttaattt tcgtattagc ttacgacgct acacccagta cccatctatt 3360

ttgtcactct tccctaaata atccttaaaa actccatttc cacccctccc agttcccaac 3420

taattttgtc cgcccacaca ggggcatttt tcttcctgtt atgtgaattc ctgcagcccg 3480

ggaggatcca ctaagttcta gagcggccgc cacgcggtgg agctccggct tttgttgccg 3540

gttactggag ggtcagttgc gcgcttagac gtatcatggg tcgtagctgt tatcgctggc 3600

gtgcacctgc acgagctatg aggaggagga gactta 3636

<210> 9

<211> 4545

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 重组棘蛋白

<400> 9

aagaatttta ctgttttcgt aacagttttg taataaaaaa acctataaat attccggatt 60

attcataccg tcccaccatc gggcgcggat cccggtccga agcgcgcgga attcatgctg 120

ctggtgaacc agtcccacca gggattcaac aaggagcaca ctagcaagat ggtctctgct 180

atcgtgctgt acgtcctgct ggctgctgct gctcacagcg ccttcgctgc cgacgtgaac 240

ctcaccacta ggacccagct gcctcccgct tacaccaact ctttcactag gggtgtctac 300

tacccagaca aggtgttcag atccagcgtc ctgcacagca ctcaggacct gttcctgcct 360

ttcttctcta acgtgacctg gttccacgcc atccacgtct ccggtaccaa cggcactaag 420

cgcttcgaca acccagtcct gcctttcaac gacggcgtgt acttcgcttc aaccgaaaag 480

tccaacatca tccgtggatg gatcttcggt accactctgg acagcaagac tcagtctctg 540

ctgatcgtga acaacgccac caacgtggtc atcaaggtct gcgagttcca gttctgcaac 600

gaccccttcc tgggagtgta ctaccacaag aacaacaagt catggatgga gtccgagttc 660

cgcgtgtact cttcagctaa caactgcact ttcgagtacg tcagccagcc attcctgatg 720

gacctggaag gaaagcaggg taacttcaag aacctgaggg agttcgtgtt caagaacatc 780

gacggttact tcaagatcta cagcaagcac acccccatca acctggtgag agacctgcca 840

cagggattct ctgctctgga acccctggtc gacctgccaa tcggtatcaa catcacccgc 900

ttccagactc tgctggctct gcaccgttcc tacctgactc ctggcgactc cagctctgga 960

tggactgctg gagctgctgc ttactacgtg ggatacctgc agccaaggac cttcctgctg 1020

aagtacaacg agaacggtac catcactgac gccgtggact gcgctctgga cccactgtca 1080

gaaaccaagt gcactctgaa gtccttcacc gtcgagaagg gtatctacca gactagcaac 1140

ttcagggtcc agcctaccga atctatcgtg agattcccaa acatcactaa cctgtgccct 1200

ttcggcgagg tgttcaacgc caccagattc gcttccgtct acgcctggaa caggaagaga 1260

atcagcaact gcgtggctga ctactctgtc ctgtacaaca gcgcctcttt ctcaaccttc 1320

aagtgctacg gcgtgtcacc tactaagctg aacgacctgt gcttcaccaa cgtgtacgcc 1380

gactccttcg tcatcagggg agacgaggtg agacagatcg ctcctggcca gactggaaag 1440

atcgccgact acaactacaa gctgcccgac gacttcaccg gttgcgtgat cgcttggaac 1500

agcaacaacc tggactctaa ggtcggtggc aactacaact acctgtaccg cctgttccgt 1560

aagagcaacc tgaagccctt cgagagggac atcagcactg aaatctacca ggccggatct 1620

accccatgca acggtgtgga aggcttcaac tgctacttcc ctctgcagtc ttacggtttc 1680

cagcccacta acggtgtcgg ctaccagcca tacagagtgg tcgtgctgag cttcgagctg 1740

ctgcacgccc ctgctactgt gtgcggtccc aagaagtcta ccaacctggt gaagaacaag 1800

tgcgtcaact tcaacttcaa cggcctgacc ggaactggtg tgctgaccga atcaaacaag 1860

aagttcctgc ctttccagca gttcggccgc gacatcgctg acaccactga cgccgtccgt 1920

gacccacaga ccctggagat cctggacatc actccttgct cattcggagg tgtgtccgtc 1980

atcactcccg gaaccaacac ttccaaccag gtggctgtcc tgtaccagga cgtgaactgc 2040

actgaggtgc ctgtggctat ccacgctgac cagctgaccc caacttggcg cgtctactca 2100

accggctcca acgtgttcca gactcgtgct ggttgcctga tcggcgccga gcacgtcaac 2160

aacagctacg aatgcgacat ccctatcggc gctggaatct gcgcctctta ccagacccag 2220

actaacagcc cccgcagggc taggtctgtg gcttcccaga gcatcatcgc ttacaccatg 2280

tcactgggtg ctgaaaactc cgtcgcctac agcaacaact ctatcgccat cccaaccaac 2340

ttcactatct cagtcaccac tgagatcctg cctgtgagca tgaccaagac ttctgtcgac 2400

tgcactatgt acatctgcgg cgacagcacc gaatgctcta acctgctgct gcagtacggt 2460

tccttctgca cccagctgaa ccgtgctctg actggcatcg ccgtggagca ggacaagaac 2520

actcaggaag tgttcgctca ggtcaagcag atctacaaga ccccacctat caaggacttc 2580

ggcggattca acttctccca gatcctgcca gacccttcaa agccctccaa gcgcagcttc 2640

atcgaagacc tgctgttcaa caaggtgacc ctggccgacg ctggattcat caagcagtac 2700

ggagactgcc tgggtgacat cgccgctcgt gacctgatct gcgctcagaa gttcaacggt 2760

ctgaccgtcc tgcccccact gctgactgac gagatgatcg cccagtacac ttcagccctg 2820

ctggctggta ccatcacttc tggatggacc ttcggtgctg gtgctgctct gcagatccca 2880

ttcgctatgc agatggccta ccgtttcaac ggaatcggtg tgacccagaa cgtcctgtac 2940

gaaaaccaga agctgatcgc taaccagttc aacagcgcca tcggcaagat ccaggacagc 3000

ctgtcatcca ctgcctctgc tctgggaaag ctgcaggacg tcgtgaacca gaacgcccag 3060

gctctgaaca ccctggtgaa gcagctgagc tctaacttcg gagctatctc atccgtcctg 3120

aacgacatcc tgtctcgcct ggacaaggtg gaggccgaag tccagatcga ccgcctgatc 3180

actggtcgtc tgcagtcact gcagacctac gtgactcagc agctgatcag ggccgctgaa 3240

atcagagcct ccgctaacct ggccgctacc aagatgtcag agtgcgtgct gggacagtcc 3300

aagcgtgtcg acttctgcgg caagggatac cacctgatgt cattcccaca gtccgctcct 3360

cacggcgtcg tgttcctgca cgtgacctac gtccctgccc aggagaagaa cttcaccact 3420

gcccccgcta tctgccacga cggcaaggct cacttcccta gggaaggagt gttcgtctca 3480

aacggtaccc actggttcgt gactcagaga aacttctacg agccccagat catcaccact 3540

gacaacactt tcgtctccgg caactgcgac gtcgtgatcg gaatcgtgaa caacaccgtc 3600

tacgaccccc tgcagccaga actggactca ttcaaggagg aactggacaa gtacttcaag 3660

aaccacacct ccccagacgt ggacctgggc gacatctcag gaatcaacgc ttccgtcgtg 3720

aacatccaga aggagatcga ccgcctgaac gaagtcgcca agaacctgaa cgagagcctg 3780

atcgacctgc aggagctggg caagtacgaa cagtacatca agtggcctgg tggctctgga 3840

ggttcaggcg gatccggtgg cagcggaggt tcaacctgcc ctccctgccc tgctccagag 3900

ctgctgggcg gaccttctgt gttcctgttc ccacctaagc ccaaggacac cctgatgatc 3960

agccgtaccc cagaagtgac ttgcgtcgtg gtcgacgtct ctcacgagga ccctgaagtc 4020

aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtccacaacg ctaagaccaa gcctcgcgag 4080

gaacagtaca actcaactta ccgtgtggtc tccgtgctga ccgtcctgca ccaggactgg 4140

ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtg tcaaacaagg ccctgcctgc tcccatcgaa 4200

aagactatct ccaaggccaa gggacagcct agggagcccc aggtctacac cctgccccca 4260

tcaagagagg aaatgaccaa gaaccaggtc tccctgactt gcctggtgaa gggtttctac 4320

ccctcagaca tcgctgtgga gtgggaatcc aacggccagc cagaaaacaa ctacaagacc 4380

actcctcccg tgctggactc agacggctcc ttcttcctgt acagcaagct gactgtcgac 4440

aagtctcgct ggcagcaggg aaacgtgttc tcttgctcag tcatgcacga ggctctgcac 4500

aaccactaca cccagaagtc cctgagcctg tctcccggca agtaa 4545

<210> 10

<211> 419

<212> PRT

<213> 冠状病毒(Coronavirus)

<400> 10

Met Ser Asp Asn Gly Pro Gln Asn Gln Arg Asn Ala Pro Arg Ile Thr

1 5 10 15

Phe Gly Gly Pro Ser Asp Ser Thr Gly Ser Asn Gln Asn Gly Glu Arg

20 25 30

Ser Gly Ala Arg Ser Lys Gln Arg Arg Pro Gln Gly Leu Pro Asn Asn

35 40 45

Thr Ala Ser Trp Phe Thr Ala Leu Thr Gln His Gly Lys Glu Asp Leu

50 55 60

Lys Phe Pro Arg Gly Gln Gly Val Pro Ile Asn Thr Asn Ser Ser Pro

65 70 75 80

Asp Asp Gln Ile Gly Tyr Tyr Arg Arg Ala Thr Arg Arg Ile Arg Gly

85 90 95

Gly Asp Gly Lys Met Lys Asp Leu Ser Pro Arg Trp Tyr Phe Tyr Tyr

100 105 110

Leu Gly Thr Gly Pro Glu Ala Gly Leu Pro Tyr Gly Ala Asn Lys Asp

115 120 125

Gly Ile Ile Trp Val Ala Thr Glu Gly Ala Leu Asn Thr Pro Lys Asp

130 135 140

His Ile Gly Thr Arg Asn Pro Ala Asn Asn Ala Ala Ile Val Leu Gln

145 150 155 160

Leu Pro Gln Gly Thr Thr Leu Pro Lys Gly Phe Tyr Ala Glu Gly Ser

165 170 175

Arg Gly Gly Ser Gln Ala Ser Ser Arg Ser Ser Ser Arg Ser Arg Asn

180 185 190

Ser Ser Arg Asn Ser Thr Pro Gly Ser Ser Arg Gly Thr Ser Pro Ala

195 200 205

Arg Met Ala Gly Asn Gly Gly Asp Ala Ala Leu Ala Leu Leu Leu Leu

210 215 220

Asp Arg Leu Asn Gln Leu Glu Ser Lys Met Ser Gly Lys Gly Gln Gln

225 230 235 240

Gln Gln Gly Gln Thr Val Thr Lys Lys Ser Ala Ala Glu Ala Ser Lys

245 250 255

Lys Pro Arg Gln Lys Arg Thr Ala Thr Lys Ala Tyr Asn Val Thr Gln

260 265 270

Ala Phe Gly Arg Arg Gly Pro Glu Gln Thr Gln Gly Asn Phe Gly Asp

275 280 285

Gln Glu Leu Ile Arg Gln Gly Thr Asp Tyr Lys His Trp Pro Gln Ile

290 295 300

Ala Gln Phe Ala Pro Ser Ala Ser Ala Phe Phe Gly Met Ser Arg Ile

305 310 315 320

Gly Met Glu Val Thr Pro Ser Gly Thr Trp Leu Thr Tyr Thr Gly Ala

325 330 335

Ile Lys Leu Asp Asp Lys Asp Pro Asn Phe Lys Asp Gln Val Ile Leu

340 345 350

Leu Asn Lys His Ile Asp Ala Tyr Lys Thr Phe Pro Pro Thr Glu Pro

355 360 365

Lys Lys Asp Lys Lys Lys Lys Ala Asp Glu Thr Gln Ala Leu Pro Gln

370 375 380

Arg Gln Lys Lys Gln Gln Thr Val Thr Leu Leu Pro Ala Ala Asp Leu

385 390 395 400

Asp Asp Phe Ser Lys Gln Leu Gln Gln Ser Met Ser Ser Ala Asp Ser

405 410 415

Thr Gln Ala

<210> 11

<211> 75

<212> PRT

<213> 冠状病毒(Coronavirus)

<400> 11

Met Tyr Ser Phe Val Ser Glu Glu Thr Gly Thr Leu Ile Val Asn Ser

1 5 10 15

Val Leu Leu Phe Leu Ala Phe Val Val Phe Leu Leu Val Thr Leu Ala

20 25 30

Ile Leu Thr Ala Leu Arg Leu Cys Ala Tyr Cys Cys Asn Ile Val Asn

35 40 45

Val Ser Leu Val Lys Pro Ser Phe Tyr Val Tyr Ser Arg Val Lys Asn

50 55 60

Leu Asn Ser Ser Arg Val Pro Asp Leu Leu Val

65 70 75

<210> 12

<211> 222

<212> PRT

<213> 冠状病毒(Coronavirus)

<400> 12

Met Ala Asp Ser Asn Gly Thr Ile Thr Val Glu Glu Leu Lys Lys Leu

1 5 10 15

Leu Glu Gln Trp Asn Leu Val Ile Gly Phe Leu Phe Leu Thr Trp Ile

20 25 30

Cys Leu Leu Gln Phe Ala Tyr Ala Asn Arg Asn Arg Phe Leu Tyr Ile

35 40 45

Ile Lys Leu Ile Phe Leu Trp Leu Leu Trp Pro Val Thr Leu Ala Cys

50 55 60

Phe Val Leu Ala Ala Val Tyr Arg Ile Asn Trp Ile Thr Gly Gly Ile

65 70 75 80

Ala Ile Ala Met Ala Cys Leu Val Gly Leu Met Trp Leu Ser Tyr Phe

85 90 95

Ile Ala Ser Phe Arg Leu Phe Ala Arg Thr Arg Ser Met Trp Ser Phe

100 105 110

Asn Pro Glu Thr Asn Ile Leu Leu Asn Val Pro Leu His Gly Thr Ile

115 120 125

Leu Thr Arg Pro Leu Leu Glu Ser Glu Leu Val Ile Gly Ala Val Ile

130 135 140

Leu Arg Gly His Leu Arg Ile Ala Gly His His Leu Gly Arg Cys Asp

145 150 155 160

Ile Lys Asp Leu Pro Lys Glu Ile Thr Val Ala Thr Ser Arg Thr Leu

165 170 175

Ser Tyr Tyr Lys Leu Gly Ala Ser Gln Arg Val Ala Gly Asp Ser Gly

180 185 190

Phe Ala Ala Tyr Ser Arg Tyr Arg Ile Gly Asn Tyr Lys Leu Asn Thr

195 200 205

Asp His Ser Ser Ser Ser Asp Asn Ile Ala Leu Leu Val Gln

210 215 220

Claims

1.一种免疫组合物，其特征在于，包含：

重组蛋白，其包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及由多核苷酸所编码的与SEQ ID NO:1-4具有至少80％同源性的任何多肽所组成的组，其中所述重组蛋白含有IgG1 Fc蛋白片段，所述IgG1 Fc蛋白片段具有至少六个氨基酸的长度；或

编码所述重组蛋白的核酸分子。

2.根据权利要求1所述的免疫组合物，其特征在于，所述IgG1 Fc蛋白片段具有十二至十八个氨基酸的长度。

3.根据权利要求1所述的免疫组合物，其特征在于，所述重组蛋白与分泌信号肽融合。

4.根据权利要求1所述的免疫组合物，其特征在于，进一步包含免疫化合物、佐剂、药学上可接受的载体、稳定剂或保存剂。

5.一种新冠肺炎疫苗，其特征在于，包含：

编码所述重组蛋白的核酸分子。

6.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于，所述IgG1 Fc蛋白片段具有十二至十八个氨基酸的长度。

7.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于，所述重组蛋白与SARS-Co V-2的核壳磷蛋白、SARS-CoV-2的包膜蛋白或SARS-CoV-2的膜蛋白融合。

8.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于，由所述核酸分子编码的重组蛋白与SARS-CoV-2的核壳磷蛋白、SARS-CoV-2的包膜蛋白或SARS-CoV-2的膜蛋白融合。

9.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于，进一步包含免疫化合物、佐剂、药学上可接受的载体、稳定剂或保存剂。

10.一种载体，其特征在于，包含核酸分子，所述核酸分子编码重组蛋白，所述重组蛋白包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4及由所述多核苷酸所编码的与SEQ ID NO:1-4具有至少80％同源性的任何多肽所组成的组，其中所述重组蛋白含有IgG1 Fc蛋白片段，所述IgG1 Fc蛋白片段具有至少六个氨基酸的长度。

11.根据权利要求10所述的载体，其特征在于，由所述核酸分子编码的重组蛋白与SARS-CoV-2的核壳磷蛋白、SARS-CoV-2的包膜蛋白或SARS-Co V-2的膜蛋白融合。

12.根据权利要求10所述的载体，其特征在于，所述载体选自由杆状病毒、痘疮病毒、禽痘病毒、腺病毒、甲病毒、棒状病毒和疱疹病毒所组成的组。

13.根据权利要求12所述的载体，其特征在于，所述载体为杆状病毒。

14.一种免疫组合物，其特征在于，包含：

核酸分子，其包括一段序列，所述序列选自由SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8及SEQ ID NO:9所组成的组。