CN113545999A - 局部用化妆品组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于局部施用至使用者的皮肤的组合物，所述组合物提供了许多皮肤益处。所述组合物包含维生素和附加成分的独特组合，共同作用以增加皮肤紧实度和减少皱纹。

Description

局部用化妆品组合物

技术领域

本发明一般涉及用于减少皮肤上的细纹和皱纹的化妆品皮肤护理组合物。

背景技术

皮肤是人体的最大器官，具有多种功能。它提供了抵御大量环境因素的保护，提供了先天性和适应性免疫防御，负责维生素D的产生，并且用作接触的感应器官。皮肤外观是老化过程的可观察的关键标志，皱纹是老化的自然组成部分。当人年轻时，皮肤是紧固的并会回弹，但是当人变老时，皮肤会失去其紧固度。随着年龄的增长，皮肤变薄、变干、弹性变小，更不可能保护其免受损伤。这导致了皮肤上的皱纹、褶皱和细纹。

大量不可避免的环境因素也造成了皱纹的出现。例如，暴露于紫外(UV)线下会提高细胞内氧化应激水平并增加更早产生皱纹的机会。UV线会分解形成皮肤的结缔组织并为皮肤提供类支架的支撑的胶原蛋白和弹性蛋白。环境暴露可以加速胶原蛋白和弹性蛋白的分解，导致皮肤变得更脆弱、缺乏弹性。

随着年龄的增长，皮肤的厚度、弹性、胶原蛋白含量和修复能力减少。真皮层的纤维细胞基体恶化，并且皮肤回弹的能力减弱。当皮肤经受环境污染和永久运动的压力时，皮肤产生永久性皱纹，并持续加深。

在年老时，皮肤外观对情感健康、心理健康和心理幸福感很重要。防止或减缓皮肤老化是皮肤健康产业中最重要的难题。在近些年，对于用于改善外观和皮肤状态的化妆品组合物和化妆方法的需求大幅增长。消费者不断寻找处理皮肤的皱纹、褶皱和沟的“抗老化”产品。因此，需要给皮肤提供抗老化益处的新的局部用产品。

发明内容

本公开提供了处理皱纹和细纹并使皮肤组织紧实的新的化妆品皮肤护理组合物。该组合物使用了成分的组合，所述成分用于增加皮肤紧实度并抑制诱导皱纹的氧化应激。该组合物包括维生素C、白藜芦醇、维生素E和乙酰基六肽-8，可以直接施用至使用者的皮肤，或添加到使用者现在的皮肤护理产品中。

本公开的一些方面涉及调节对象的皮肤以改善皮肤状况或外观的方法。在一些方面，该方法包括将包含有效量的抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8的组合物局部施用至对象的皮肤。在一些方面，该组合物用于改善皮肤状况或外观，改善皮肤状况或外观选自增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、减少细纹和/或皱纹的出现、减少皮肤松弛、改善皮肤紧固度、改善皮肤紧实度、减少时间性老化和光老化的皮肤症状、使皮肤年轻和/或使皮肤有活力、改善皮肤肌理、改善皮肤屏障修复、改善皮肤轮廓的外观、使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小、增加皮肤细胞代谢、提高皮肤弹性、减少和/或处理色素沉着过度、使皮肤色素减退最小化、改善肤色、恢复皮肤光泽、减少氧化应激和/或减少皮肤自由基含量。

在一些实施方案中，用于改善皮肤状况或外观的组合物包含抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8。在一些方面，组合物包含0.2重量％至20重量％的抗坏血酸、0.1重量％至10重量％的维生素E、0.05重量％至5重量％的白藜芦醇和0.00001重量％至0.01重量％的乙酰基六肽-8。在一些实例中，组合物还包含甘油。在一些实施方案中，甘油以组合物的1重量％至10重量％的量。在一些方面，组合物还包含表面活性剂、乳化剂、缓冲剂、防腐剂、增溶剂、湿润剂、润肤剂、皮肤调理剂、抗微生物剂、稳定剂和消泡剂中的一种或多于一种。在一些实施方案中，组合物还包含有效量的水、PEG-8、柠檬酸钠、乙氧基二甘醇、PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20(PPG-5-Ceteth-20)、苯氧乙醇、辛甘醇、氯苯甘醚、EDTA、二甲基硅油和环五聚二甲基硅氧烷中的一种或多于一种。

在一些实例中，组合物包含1重量％至95重量％的水。在其他实例中，组合物包含45重量％至85重量％的水。在一些实例中，组合物包含1.5重量％至30重量％的PEG-8。在一些实施方案中，组合物包含0.1重量％至20重量％的乙氧基二甘醇。在一些实施方案中，组合物包含0.05重量％至10重量％的PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20。在一些方面，组合物包含0.01重量％至5重量％的辛甘醇。在一些方面，组合物包含0.1重量％至5重量％的苯氧乙醇。在一些实例中，组合物包含0.1重量％至5重量％的柠檬酸钠。在一些实例中，组合物包含0.01重量％至0.5重量％的氯苯甘醚。在一些实施方案中，组合物包含0.01重量％至1重量％的EDTA。在一些方面，组合物包含0.2重量％至20重量％的抗坏血酸。在一些方面，组合物包含5重量％至15重量％的抗坏血酸。在一些实施方案中，组合物包含0.1重量％至10重量％的维生素E。在一些实施方案中，组合物包含0.1重量％至1重量％的的维生素E。在一些实例中，组合物包含0.05重量％至5重量％的白藜芦醇。在一些实例中，组合物包含0.1重量％至1重量％的白藜芦醇。

在一些实施方案中，将组合物直接施用至对象的皮肤。在一些方面，向对象现在的皮肤护理产品中添加组合物，并将本文公开的组合物和皮肤护理产品的组合直接施加至对象的皮肤。本公开的一些方面涉及用于制备定制的皮肤护理组合物，其包括向对象现在的皮肤护理产品中添加预定量的组合物，该组合物包含抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8。在一些实施方案中，将组合物添加至现在的皮肤护理产品中将给予现在的皮肤护理产品以下能力或改善现在的皮肤护理产品在以下方面的功效：增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、减少细纹和/或皱纹的出现、减少皮肤松弛、改善皮肤紧固度、改善皮肤紧实度、减少时间性老化和光老化的皮肤症状、使皮肤年轻和/或使皮肤有活力、改善皮肤肌理、改善皮肤屏障修复、改善皮肤轮廓的外观、使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小、增加皮肤细胞代谢、提高皮肤弹性、减少和/或处理色素沉着过度、使皮肤变色最小化、改善肤色、恢复皮肤光泽、减少氧化应激和/或减少皮肤自由基含量。

本公开的一些方面涉及改善皮肤状况或外观，其包括将本文公开的任何一种组合物施用至有需要的皮肤。在一些方面，将本文公开的任何一种组合物施用至皮肤，并将该组合物留在皮肤上，或在一段时间后从皮肤上除去。在一些方面，本文公开的组合物用于处理和/或减少皱纹。在一些方面，本文公开的组合物用于处理和/或减少皮肤变色。在一些方面，本文公开的组合物用于改善肤色。

在一些方面，将本发明的组合物配制为局部皮肤用组合物。组合物可以配制为局部皮肤用组合物，其在使用期间每天施用至少1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次或多于7次。在本发明的一些方面，组合物可以储存稳定。还考虑可以例如根据所需组合物的类型，选择组合物的溶解度以实现所需结果。在一些实施方案中，将组合物直接施用至皮肤。在一些实施方案中，将组合物添加至对象现在的皮肤护理产品中。然后可以将组合物分散在对象的皮肤护理产品中而得到的组合直接施用至使用者的皮肤。

在非限制性方面，可以将组合物配制为pH为约6至约9。在一些方面，pH可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14。组合物可以包括单甘油酯、甘油二酯或甘油三酯。非限制性实例包括短链、中链和长链单甘油酯、甘油二酯或甘油三酯。在一些方面，示例性甘油三酯是中链甘油三酯(例如辛酸癸酸甘油三酯)。组合物还可以包含防腐剂。防腐剂的非限制性实例包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的混合物。在一些实施方案中，组合物不含对羟基苯甲酸酯。

在一些实施方案中，将组合物添加至对象现在的皮肤产品中以提供混合物，并将混合物直接施用至对象的皮肤。可以以分配有预先测量量的组合物的包装形式来提供组合物。例如，可以在具有滴管型分配器的瓶中提供组合物，所述滴管型分配器输送预先测量量的组合物。可以将预先测量量的组合物添加至对象现在的皮肤护理产品中。在一些方面，预先测量量可以是1mL，例如可以添加至1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、10mL、15mL、20mL、30mL、40mL、50mL、100mL、200mL或250mL的对象现在的皮肤护理产品中。

本发明的组合物还可以包含以下附加成分的任意一种、任意组合或全部：水、调理剂、保湿剂、结构化剂、润肤剂、增黏剂、增塑剂、表面活性剂、乳化剂、着色剂、防腐剂、pH调节剂、还原剂、芳香剂、发泡剂、鞣剂、收敛剂、抗菌剂、除臭剂、止汗剂、增白剂、黏合剂、UV吸收剂、UV反射剂、增稠剂、去角质剂、含硅化合物、精油、维生素、药物成分、抗氧化剂、抗微生物剂、或这些成分的任意组合或这些成分的混合物。在某些方面，组合物可以包含在之前句子中确定的这些附加成分中的至少二种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或全部。这些附加成分的非限制性实例在本说明书全文确定，并通过引用并入本章节。这类成分的量以组合物的重量或体积计可以为0.0001％至99.9％，或者是在如本说明书其它章节中所公开的范围之间的任何整数或范围，其通过引用并入本段。

还考虑了在本说明书全文中所公开的组合物可以用作免洗或洗去型组合物。举例来说，免洗型组合物可以是局部施用至皮肤并在皮肤上保留一段时间(例如，至少5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟、20分钟或30分钟，或至少1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时或24小时，或者一夜或全天)的组合物。或者，洗去型组合物可以是将要施用于皮肤然后在一段时间内，如小于5分钟、4分钟、3分钟、2分钟或1分钟，(例如用水)从皮肤去除或洗去的产品。

在一些情况下，在对皮肤施用组合物之前，将第二皮肤护理组合物施用至皮肤。在一些情况下，在对皮肤施用组合物之前，将多于一种皮肤护理组合物施用至皮肤。在一些情况下，在对皮肤施用组合物之前，将组合物与第三皮肤护理组合物组合。在一些情况下，第三皮肤护理组合物影响皮肤状况或外观。在一些情况下，第三皮肤护理组合物不影响皮肤状况或外观。

预期对于本发明的任何方法或组合物，可以实施本说明书中所讨论的任何实施方案，反之亦然。此外，本发明的组合物可以用于实现本发明的方法。

在本发明的上下文中，描述了至少以下20个方面。方面1包括了调节对象的皮肤以改善皮肤状况或外观的方法。该方法包括向对象的皮肤局部施用包含有效量的抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8的组合物。方面2取决于方面1，其中改善皮肤状况或外观选自增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、减少细纹和/或皱纹的出现、减少皮肤松弛、改善皮肤紧固度、改善皮肤紧实度、减少时间性老化和光老化的皮肤症状、使皮肤年轻和/或使皮肤有活力、改善皮肤肌理、改善皮肤屏障修复、改善皮肤轮廓的外观、使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小、增加皮肤细胞代谢、提高皮肤弹性、减少和/或处理色素沉着过度、使皮肤变色最小化、改善肤色、恢复皮肤光泽、减少氧化应激和减少皮肤自由基含量。方面3取决于方面1和2中任一项，其中组合物包含0.2重量％至20重量％的抗坏血酸、0.1重量％至10重量％的维生素E、0.05重量％至5重量％的白藜芦醇和0.00001重量％至0.01重量％的乙酰基六肽-8。方面4取决于方面1至3中任一项，其中组合物还包含甘油。方面5取决于方面4，其中甘油以1重量％至10重量％的量提供。方面6取决于方面1至5中任一项，其中组合物还包含表面活性剂、乳化剂、缓冲剂、防腐剂、增溶剂、湿润剂、润肤剂、皮肤调理剂、抗微生物剂、稳定剂和消泡剂中的一种或多于一种。方面7取决于方面1至6中任一项，其中组合物还包含有效量的水、PEG-8、柠檬酸钠、乙氧基二甘醇、PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20、苯氧乙醇、辛甘醇、氯苯甘醚、EDTA、二甲基硅油和环五聚二甲基硅氧烷中的一种或多于一种。方面8取决于方面1至7中任一项，其中组合物包含1重量％至95重量％的水、1.5重量％至30重量％的PEG-8、0.1重量％至20重量％的乙氧基二甘醇、0.05重量％至10重量％的PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20和0.01重量％至5重量％的辛甘醇。方面9取决于方面1至8中任一项，其中组合物包含0.1重量％至5重量％的苯氧乙醇、0.1重量％至5重量％的柠檬酸钠、0.01重量％至0.5重量％的氯苯甘醚和0.01重量％至1重量％的EDTA。方面10取决于方面1至9中任一项，其中组合物包含0.2重量％至20重量％的抗坏血酸。方面11取决于方面1至10中任一项，其中组合物包含5重量％至15重量％的抗坏血酸。方面12取决于方面1至11中任一项，其中组合物包含0.1重量％至10重量％的维生素E。方面13取决于方面1至12中任一项，其中组合物包含0.1重量％至1重量％的维生素E。方面14取决于方面1至13中任一项，其中组合物包含0.05重量％至5重量％的白藜芦醇。方面15取决于方面1至14中任一项，其中组合物包含0.1重量％至1重量％的白藜芦醇。方面16取决于方面1至15中任一项，其中组合物包含45重量％至85重量％的水。方面17取决于方面1至16中任一项，其中将组合物直接施用至对象的皮肤。方面18取决于方面1至16中任一项，其中将组合物添加到对象现在的皮肤护理产品中。方面19包括一种用于制备定制的皮肤护理组合物的方法。该方法包括向对象现在的皮肤护理产品中添加预定量的组合物，所述组合物包含抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8。方面20取决于方面19，其中将组合物添加到现在的皮肤护理产品中将给予现在的皮肤护理产品以下能力或改善现在的皮肤护理产品在以下方面的功效，即增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、减少细纹和/或皱纹的出现、减少皮肤松弛、改善皮肤紧固度、改善皮肤紧实度、减少时间性老化和光老化的皮肤症状、使皮肤年轻和/或使皮肤有活力、改善皮肤肌理、改善皮肤屏障修复、改善皮肤轮廓的外观、使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小、增加皮肤细胞代谢、提高皮肤弹性、减少和/或处理色素沉着过度、使皮肤变色最小化、改善肤色、恢复皮肤光泽、减少氧化应激和/或减少皮肤自由基含量。

在一个实施方案中，本发明的组合物可以是可药用的或可化妆用的，或可以具有舒适的触觉性质。“可药用的”、“可化妆用的”和/或“舒适的触觉性质”描述了具有令皮肤感觉舒适的特定的触觉性质的组合物(例如，不是太水或太油的组合物、具有丝滑质地的组合物、非黏性或发黏的组合物等)。可药用的或可化妆用的还可以涉及组合物的乳脂状或润滑性能，或组合物的水分保留性能。

“局部施用”是指将组合物施用至皮肤表面上。这类组合物一般为皮肤病学上可接受的，这是因为当施用到皮肤时，其不具有异常毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等。可以将本发明的局部皮肤用组合物配制为达到目标溶解度，以避免在施用至皮肤后明显滴落。短语“减少细纹和/或皱纹的出现”是指减少面部细纹和皱纹，脸颊、前额上的面部皱纹，眼睛之间的垂直皱纹，眼睛上方的横向皱纹，和嘴巴周围的木偶纹，特别是很深的皱纹或褶皱的显著性；减少和/或减轻细纹和/或皱纹的出现和/或深度；和/或改善眼眶下的细纹和/或眶周细纹的出现。

术语“约”或“大约”定义为本领域普通技术人员所理解的接近于。在一个非限制性实施方案中，该术语定义为10％以内，优选5％以内，更优选1％以内，最优选0.5％以内。

术语“基本上”及其变体是指10％以内、5％以内、1％以内或0.5％以内的范围。

术语“抑制”或“减少”或这些术语的任何变体包括为了达到预期结果的任何可测量的减少或完全的抑制。术语“促进”或“增加”或这些术语的任何变体包括为了达到预期结果的胶原蛋白的任何可测量的增加或生产。

作为本说明书和/或权利要求中使用的术语，术语“有效的”表示适于实现希望的、期望的或预期的结果。

当在权利要求和/或说明书中与术语“包含”、“包括”、“含有”或“具有”或这些术语的任何变体的一起使用时，要素前面不使用数量词可以表示“一个”，但是其也符合“一个或更多个”、“至少一个”和“一个或多于一个”的意思。

如本说明书和权利要求所使用的，单词“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是包括性的或开放式的，并且不排除附加的、未列举的要素或方法步骤。

组合物和使用它们的方法可以“包含”本说明书全文所公开的成分或步骤中的任一个、“主要由其组成”或“由其组成”。关于短语“基本上由……组成”，本发明组合物和方法的基本和新的性质是组合物含有抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8。组合物和方法的另一种新的性质是用组合物提高胶原蛋白的生产的用途。

如本文所述，术语“皱纹”是皮肤上的褶痕、脊、折痕、沟、深坑、坑或凹陷区域，其可以是由习惯性的面部表情、由于衰老、晒伤、吸烟、水分摄取不足以及各种其他因素引起的胶原蛋白和/或弹性蛋白的流失。皱纹可以从很深的折痕至细纹。本文预期了出现在身体的任何一部分上的皱纹，特别是对象的额头或脖子上的皱纹。可以根据本公开进行处理的皱纹包括但不限于眉头沟、鱼尾纹、鼻唇沟、眼下或眉间的一种或多于一种纹及其组合。

如本文使用的，“处理”表示暂时或永久地改善皮肤的状况或外观。当对皮肤施用组合物时，组合物可以逆转胶原蛋白的流失、增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、减少细纹和/或皱纹的出现、减少皮肤松弛、改善皮肤紧固度、改善皮肤紧实度、减少时间性老化和光老化的皮肤症状、使皮肤年轻和/或使皮肤有活力、改善皮肤肌理、改善皮肤屏障修复、改善皮肤轮廓的外观、使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小、增加皮肤细胞代谢、提高皮肤弹性、减少和/或处理色素沉着过度、使皮肤变色最小化、改善肤色、恢复皮肤光泽、减少氧化应激和/或减少皮肤自由基含量。

本发明的其它目的、特征和优点通过下面的详细描述将会变得明显。然而，应理解详细的描述和实施例在表明本发明的具体实施方案时仅以举例说明的方式给出。另外，预期通过该详细描述，本发明的精神和范围内的变化和修改对于本领域技术人员将会变得明显。

附图说明

以下附图形成本说明书的一部分，并被包含以进一步证实本发明的特定方面。通过参照一个或多于一个这些附图结合本文所提供的具体实施方案的详细说明可以更好地理解本发明。

图1显示了研究计划表，其中评价本文公开的组合物对人皮肤的抗老化活性的影响。计划表中描述了计划的产品应用和外植体取样日期。

图2是描述沿真皮-表皮连接的胶原蛋白IV染色的定量的柱状图。

图3A至3C是用胶原蛋白IV抗体对皮肤外植体免疫染色的图像。图3A表示第0天的空白批次。图3B表示第9天的空白批次。图3C表示第9天的批次P。

具体实施方式

如上所述，本发明提供了用于减少或逆转皱纹和其他与衰老相关的标志的外观的方法和组合物。皮肤起皱和松弛或松动是影响皮肤外观的两个主要因素。在眶周、眉间、前额和口周区域的面部表情肌肉涉及各种表情，包括微笑、皱眉、眯眼和撅嘴。这些肌肉的活动对其覆盖的皮肤施加了比在面部其他区域更大的物理应力。当这些肌肉在皮肤下方收缩，然后放松并回到其原来的放松长度时，皱纹就形成了。覆盖的皮肤还可以缩短和回弹，但是肌肉不可以。因此，当肌肉收缩时，皮肤倾向于变屈、回折并形成皱纹。本文公开的组合物包含祛纹组分以抵消老化相关的皮肤疲软和起皱。组合物还包含抗氧化剂，以保护皮肤免于由紫外光和其他环境因素引起的氧化应激。在以下章节中描述本发明的这些和其他非限制性方面。

A.活性成分

抗坏血酸，也称为维生素C，是具有抗氧化活性的必需营养素。抗坏血酸包含羟基，所述羟基可以给出氢原子以猝灭自由基化合物。得到的抗坏血酸根相对稳定，并且可以恢复成抗坏血酸。抗坏血酸也在胶原蛋白的合成和维持中起着作用。

维生素E是表示八种结构相关的抗氧化化合物的术语，所述抗氧化化合物表现出自由基清除能力。这些化合物包括四种生育酚化合物和四种三烯生育酚化合物。这些化合物包含羟基，所述羟基可以给出一个氢原子以猝灭自由基化合物。得到的维生素E自由基化合物相对稳定，并可以通过与维生素C反应恢复成维生素E。

白藜芦醇是在葡萄皮中天然存在的抗氧化化合物。就像维生素C和维生素E一样，白藜芦醇可以猝灭自由基化合物。

乙酰基六肽-8(也称作六元胜肽-3)是一种合成肽，因其祛皱能力而备受吹捧。据称乙酰基六肽-8通过限制面部肌肉收缩来祛纹。就像大部分肽一样，乙酰基六肽-8具有持水性和皮肤恢复能力。

B.成分的量

预期本发明的组合物可以包含任意量的本说明书所讨论的成分。该组合物还可以包含任意数目的在本说明书全文中所描述的附加成分的组合(例如，颜料或附加的化妆品或药物成分)。可以改变组合物中成分的浓度。例如，在非限制性实施方案中，组合物可以独立地包含以下组分、主要由以下组分组成或由以下组分组成：例如至少约0.0001％、0.0002％、0.0003％、0.0004％、0.0005％、0.0006％、0.0007％、0.0008％、0.0009％、0.0010％、0.0011％、0.0012％、0.0013％、0.0014％、0.0015％、0.0016％、0.0017％、0.0018％、0.0019％、0.0020％、0.0021％、0.0022％、0.0023％、0.0024％、0.0025％、0.0026％、0.0027％、0.0028％、0.0029％、0.0030％、0.0031％、0.0032％、0.0033％、0.0034％、0.0035％、0.0036％、0.0037％、0.0038％、0.0039％、0.0040％、0.0041％、0.0042％、0.0043％、0.0044％、0.0045％、0.0046％、0.0047％、0.0048％、0.0049％、0.0050％、0.0051％、0.0052％、0.0053％、0.0054％、0.0055％、0.0056％、0.0057％、0.0058％、0.0059％、0.0060％、0.0061％、0.0062％、0.0063％、0.0064％、0.0065％、0.0066％、0.0067％、0.0068％、0.0069％、0.0070％、0.0071％、0.0072％、0.0073％、0.0074％、0.0075％、0.0076％、0.0077％、0.0078％、0.0079％、0.0080％、0.0081％、0.0082％、0.0083％、0.0084％、0.0085％、0.0086％、0.0087％、0.0088％、0.0089％、0.0090％、0.0091％、0.0092％、0.0093％、0.0094％、0.0095％、0.0096％、0.0097％、0.0098％、0.0099％、0.0100％、0.0200％、0.0250％、0.0275％、0.0300％、0.0325％、0.0350％、0.0375％、0.0400％、0.0425％、0.0450％、0.0475％、0.0500％、0.0525％、0.0550％、0.0575％、0.0600％、0.0625％、0.0650％、0.0675％、0.0700％、0.0725％、0.0750％、0.0775％、0.0800％、0.0825％、0.0850％、0.0875％、0.0900％、0.0925％、0.0950％、0.0975％、0.1000％、0.1250％、0.1500％、0.1750％、0.2000％、0.2250％、0.2500％、0.2750％、0.3000％、0.3250％、0.3500％、0.3750％、0.4000％、0.4250％、0.4500％、0.4750％、0.5000％、0.5250％、0.0550％、0.5750％、0.6000％、0.6250％、0.6500％、0.6750％、0.7000％、0.7250％、0.7500％、0.7750％、0.8000％、0.8250％、0.8500％、0.8750％、0.9000％、0.9250％、0.9500％、0.9750％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％或其中可导的任何范围的在本说明书全文和权利要求所提及的至少一种成分。在非限制性方面，百分比可以按整个组合物的重量或体积进行计算。本领域普通技术人员会理解，给定组合物中的浓度可以根据成分的添加、替换和/或减少而改变。

C.载体

本发明的组合物可以包含或被并入到所有类型的载体和载剂中。载体和载剂可以是药学或皮肤病学上可接受的载体和载剂。载体和载剂的非限制性实例包括水、甘油、醇、油、含硅化合物、硅酮化合物和蜡。变体和其它合适的载体对于熟练技术人员是明显的，并且适用于本发明。在一些方面，化合物、成分和试剂的浓度和组合以这样的方式进行挑选，即使得组合物是化学相容的并且不形成从完成的产物中沉淀出来的复合物。

D.结构

本发明的组合物可以构造或配制成各种不同的形式。非限制性实例包括乳液(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅胶、硅胶包水、油包水包油、硅胶包水包油的乳液)、霜、润肤露、溶液(水溶液或者水-乙醇溶液)、无水基底(例如口红和散粉)、凝胶、面膜、磨砂膏、身体乳、撕拉式面膜和软膏。变体和其它结构对于技术人员是明显的，并且适用于本发明。

E.附加成分

除了本发明人所公开的成分的组合之外，组合物还可以包含附加成分，例如化妆品成分和药物活性成分。这些附加成分的非限制性实例在以下子章节中进行描述。

1.化妆品成分

CTFA国际化妆品成分词典和手册(2004和2008)描述了多种可以在本发明的上下文中使用的非限制性化妆品成分。这些成分种类的实例包括：芳香剂(人造的和天然的；例如葡萄糖酸、苯氧乙醇和三乙醇胺)、染料和着色成分(例如Blue 1、Blue 1Lake、Red 40、二氧化钛、D&C蓝色4号、D&C绿色5号、D&C橙色4号、D&C红色17号、D&C红色33号、D&C紫色2号、D&C黄色10号和D&C黄色11号)、调味剂/芳香剂(例如，甜叶菊(Stevia rebaudiana)提取物和薄荷醇)、吸附剂、润滑剂、溶剂、保湿剂(包括例如润肤剂、湿润剂、成膜剂、闭塞剂和影响皮肤天然保湿机制的试剂)、拒水剂、紫外吸收剂(物理和化学吸收剂，例如对氨基苯甲酸(“PABA”)和相应的PABA衍生物、二氧化钛、氧化锌等)、精油、维生素(例如A、B、C、D、E和K)、微量金属(例如锌、钙和硒)、抗刺激物(例如类固醇和非-固醇类抗炎药)、植物提取物(例如芦荟(Aloe vera)、柑橘、黄瓜提取物、银杏(Ginkgo biloba)、人参和迷迭香)、抗菌剂、抗氧化剂(例如BHT和生育酚)、螯合剂(例如乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸四钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、pH调节剂(例如氢氧化钠和柠檬酸)、吸收剂(例如淀粉辛烯琥珀酸铝、高岭土、玉米淀粉、燕麦淀粉、环糊精、滑石和沸石)、皮肤漂白和增白剂(例如氢醌和烟酰胺乳酸盐/酯)、湿润剂(例如山梨醇、脲、甲基葡糖醇聚醚-20、浮游生物提取物和甘露醇)、剥离剂、阻水剂(例如氢氧化钠镁/铝硬脂酸盐)、皮肤调节剂(例如芦荟提取物、尿囊素、没药醇、神经酰胺、聚二甲基硅氧烷、透明质酸、生物糖胶-1、乙基己基甘油、戊二醇、氢化聚癸烯、辛基十二烷基油酸酯和甘草酸二钾)。这些附加成分中一些的非限制性实例在以下子章节中提供。

a.UV吸收和/或反射剂

可以与本发明的组合物组合使用的UV吸收和/或反射剂包含化学和物理防晒物质。可以使用的化学防晒物质的非限制性实例包括对氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、戊基二甲醇PABA酯和辛基二甲醇PABA酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、乙基二羟基丙醇PABA酯、二苯甲酮(氧苯酮、磺异苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1到二苯甲酮-12)、肉桂酸盐/酯(甲氧基肉桂酸辛酯(桂皮酸酯))、对-甲氧基肉桂酸异戊酯、肉桂酸辛基甲氧基肉桂酸酯、西诺沙酯、二异丙基肉桂酸甲酯、甲氧基肉桂酸DEA盐、二异丙基肉桂酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水杨酸酯(均甲基水杨酸酯、水杨酸苄酯、乙二醇水杨酸酯、异丙基苄醇水杨酸酯等)、邻氨基苯甲酸盐/酯、尿刊酸乙酯、原膜散酯、水杨酸异辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奥克立林、辛基三嗪酮、棓酰棓酸三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、含二羟基丙酮的指甲花醌、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亚甲基丙二酸脂聚二甲基硅氧烷、对苯二亚甲基二莰酮磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠、二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸己酯、双二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸酯、双苯并

唑基苯基乙基己基亚氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亚甲基双苯并三唑基四甲基丁基苯酚和双乙基己基氧苯酚甲氧苯基三嗪、4-甲基苯亚甲基莰酮和4-甲氧基肉桂酸异戊酯。物理防晒物质的非限制性实例包括高岭土、滑石、凡士林和金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。

b.保湿剂

可以与本发明的组合物一起使用的保湿剂的非限制性实例包含氨基酸、硫酸软骨素、双甘油、赤藓糖醇、果糖、葡萄糖、甘油、甘油聚合物、乙二醇、1,2,6-己三醇、蜂蜜、透明质酸、氢化蜂蜜、氢化淀粉水解物、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露醇、天然保湿因子、PEG-15丁二醇、聚甘油山梨醇、吡咯烷酮羧酸的盐、PCA钾、丙二醇、糖类同分异构体、葡糖醛酸钠、PCA钠、山梨醇、蔗糖、海藻糖、脲和木糖醇。

其它实例包括乙酰化羊毛脂、乙酰化羊毛脂醇、丙氨酸、藻类提取物、翠叶芦荟、翠叶芦荟提取物、翠叶芦荟凝胶、药蜀葵提取物、杏子(杏，Prunus armeniaca)仁油、精氨酸、精氨酸天冬氨酸酯、山金车(Arnica montana)提取物、天冬氨酸、鳄梨(酪梨，Perseagratissima)油、屏障鞘脂、丁醇、蜂蜡、山萮醇、β-谷甾醇、白桦(垂枝桦，Betula alba)树皮提取物、琉璃苣(Borago officinalis)提取物、假叶树(Ruscus aculeatus)提取物、丁二醇、金盏花(Calendula officinalis)提取物、金盏花油、小烛树(Euphorbia cerifera)蜡、菜籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、小豆蔻(Elettaria cardamomum)油、巴西棕榈(Coperniciaerifera)蜡、胡萝卜(Daucus carota sativa)油、蓖麻(Ricinus communis)油、神经酰胺、地蜡、十六/十八醇聚氧乙烯(5)醚、十六/十八醇聚氧乙烯(12)醚、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇辛酸酯、十六醇聚氧乙烯(20)醚、十六醇聚氧乙烯(24)醚、鲸蜡醇乙酸酯、鲸蜡醇辛酸酯、鲸蜡醇棕榈酸酯、洋甘菊((白花春黄菊，Anthemis nobilis)油、胆固醇、胆固醇酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、柠檬酸、鼠尾草(欧丹参，Salvia sclarea)油、可可(Theobromacacao)脂、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、椰子(Cocos nucifera)油、胶原蛋白、胶原蛋白氨基酸、玉米(Zea mays)油、脂肪酸、油酸癸酯、聚二甲基硅氧烷共聚醇、聚二甲基硅氧烷醇、己二酸二辛酯、琥珀酸二辛酯、二聚季戊四醇六辛酸酯/六癸酸酯、DNA、赤藓糖醇、乙氧基二乙二醇、亚油酸乙酯、蓝桉油、夜来香(月见草，Oenothera biennis)油、脂肪酸、斑点老鹳草油、葡萄糖胺、葡糖谷氨酸酯、谷氨酸、甘油聚氧乙烯(26)醚、甘油、丙三醇、二硬脂酸甘油酯、羟基硬脂酸甘油酯、月桂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、豆蔻酸甘油酯、油酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯SE、甘氨酸、乙二醇硬酯酸酯、乙二醇硬酯酸酯SE、葡糖氨基葡聚糖、葡萄(Vitis vinifera)籽油、榛子(美洲榛，Corylus americana)坚果油、榛子(欧洲榛，Corylusamericana)坚果油、己二醇、透明质酸、红花(Carthamus tinctorius)油、氢化蓖麻油、氢化椰油酸甘油酯、氢化椰子油、氢化羊毛脂、氢化卵磷脂、氢化棕榈油甘油酯、氢化棕榈仁油、氢化大豆油、氢化牛脂酸甘油酯、氢化植物油、水解胶原蛋白、水解弹性蛋白、水解葡糖氨基葡聚糖、水解角蛋白、水解大豆蛋白、羟基化羊毛脂、羟基脯氨酸、硬脂酸异鲸蜡醇酯、异鲸蜡醇硬脂酰基硬脂酸酯、油酸异癸酯、异硬脂酸异丙酯、羊毛脂酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、异硬脂酰胺DEA、异硬脂酸、异硬脂醇乳酸酯、异硬脂醇新戊酸酯、茉莉(素方花，Jasminum officinale)油、霍霍巴(Buxus chinensis)油、巨藻、石栗(Aleurites moluccana)坚果油、乳酰胺MEA、羊毛脂醇聚氧乙烯(16)醚、羊毛脂醇聚氧乙烯(10)醚乙酸酯、羊毛脂、羊毛脂酸、羊毛脂醇、羊毛脂油、羊毛脂蜡、薰衣草(Lavandulaangustifolia)油、卵磷脂、柠檬(Citrus medica limonum)油、亚油酸、亚麻酸、澳洲坚果油、麦芽糖醇、母菊(Chamomilla recutita)油、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基硅烷醇PCA、矿物油、貂油、黄褐色被孢霉油、肉豆蔻醇乳酸酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯、肉豆蔻醇丙酸酯、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛基月桂醇、辛基月桂醇肉豆蔻酸酯、辛基月桂醇硬脂酰基硬脂酸酯、羟基硬脂酸辛酯、棕榈酸辛酯、水杨酸辛酯、硬脂酸辛酯、油酸、橄榄(Oleaeuropaea)油、橙(Citrus aurantium dulcis)油、棕榈(Elaeis guineensis)油、棕榈酸、泛硫乙胺、泛醇、泛醇基乙基醚、石蜡、PCA、桃(Prunus persica)仁油、花生(Arachishypogaea)油、PEG-8C12-18酯、PEG-15椰油烷基胺、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-60甘油异硬脂酸酯、PEG-5甘油硬脂酸酯、PEG-30甘油硬脂酸酯、PEG-7氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG40失水山梨醇全油酸酯、PEG-5大豆甾醇、PEG-10大豆甾醇、PEG-2硬脂酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-50硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-150硬脂酸酯、十五内酯、胡椒薄荷(辣薄荷，Mentha piperita)油、凡士林、磷脂、浮游生物提取物、多氨基酸多糖缩合物、聚甘油(3)二异硬脂酸酯、聚季铵盐(24)、聚山梨醇酯(20)、聚山梨醇酯(40)、聚山梨醇酯(60)、聚山梨醇酯(80)、聚山梨醇酯(85)、肉豆蔻酸钾、棕榈酸钾、丙二醇、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇月桂酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙二醇硬脂酸酯SE、PVP、吡哆醇二棕榈酸酯、视黄醇、视黄醇棕榈酸酯、米(稻，Oryza sativa)糠油、RNA、迷迭香(Rosmarinus officinalis)油、玫瑰油、红花(Carthamus tinctorius)油、鼠尾草(Salvia officinalis)油、檀香(Santalum album)油、丝氨酸、精华蛋白、芝麻(Sesamum indicum)油、牛油果(Butyrospermum)脂、蚕丝粉、软骨素硫酸钠、透明质酸钠、乳酸钠、棕榈酸钠、PCA钠、聚谷氨酸钠、可溶胶原、失水山梨醇月桂酸酯、失水山梨醇油酸酯、失水山梨醇棕榈酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、失水山梨醇硬脂酸酯、山梨醇、大豆(Glycine soja)油、鞘脂、角鲨烷、角鲨烯、硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯、硬脂酸、硬脂氧基聚二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷、硬脂醇、硬脂醇甘草亭酸酯、硬脂醇庚酸酯、硬脂醇硬脂酸酯、向日葵(Helianthus annuus)籽油、甜杏仁(Prunus amygdalus dulcis)油、合成蜂蜡、生育酚、乙酸生育酚酯、生育酚亚油酸酯、三山嵛精、十三烷醇新戊酸酯、十三烷醇硬脂酸酯、三乙醇胺、三硬脂酸精、脲、植物油、水、蜡、小麦(Triticum vulgare)胚芽油和依兰(Cananga odorata)油。

c.抗氧化剂

附加的抗氧化剂可以与本发明的抗坏血酸和维生素E结合使用。抗氧化剂的非限制性实例包括乙酰半胱氨酸、抗坏血酸多肽、抗坏血酸二棕榈酸酯、抗坏血酸甲基硅烷醇果胶酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、BHA、BHT、叔丁基氢醌、半胱氨酸、半胱氨酸HCI、二戊基氢醌、二叔丁基氢醌、二鲸蜡醇硫代二丙酸酯、二油基生育酚甲基硅烷醇、抗坏血酸硫酸酯二钠、二硬脂醇硫代二丙酸酯、双十三烷醇硫代二丙酸酯、没食子酸月桂酯、异抗坏血酸、抗坏血酸酯、阿魏酸乙酯、阿魏酸、没食子酸酯、氢醌、巯基乙酸异辛酯、曲酸、抗坏血酸镁、抗坏血酸磷酸酯镁、甲基硅烷醇抗坏血酸酯、天然植物抗氧化剂例如绿茶或葡萄籽提取物、去甲二氢愈创木酸、没食子酸辛酯、苯巯基乙酸、磷酸抗坏血酸酯生育酚酯钾、亚硫酸钾、没食子酸丙酯、醌、迷迭香酸、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、异抗坏血酸钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、超氧化物歧化酶、巯基乙酸钠、山梨醇缩糠醛、硫二甘醇、亚硫基二乙酰胺、硫二乙酸、巯基乙酸、硫代乳酸、硫代水杨酸、生育酚聚氧乙烯(5)醚、生育酚聚氧乙烯(10)醚、生育酚聚氧乙烯(12)醚、生育酚聚氧乙烯(18)醚、生育酚聚氧乙烯(50)醚、生育酚、托可索伦、乙酸生育酚酯、亚油酸生育酚酯、烟酸生育酚酯、琥珀酸生育酚酯和亚磷酸三(壬基酚)酯。

d.结构化剂

在其它非限制性方面，本发明的组合物可以包含结构化剂。在某些方面，结构化剂帮助向组合物提供流变学特征以有助于组合物的稳定性。在其它方面，结构化剂还可以起乳化剂或表面活性剂的作用。结构化剂的非限制性实例包括硬脂酸、棕榈酸、硬脂醇、鲸蜡醇、山嵛醇、硬脂酸、棕榈酸、具有平均约1个到约21个亚乙基氧单元的硬脂醇的聚乙二醇醚、具有平均约1个到约5个亚乙基氧单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚及其混合物。

e.乳化剂

乳化剂可以降低相间界面张力并改善乳液的配制和稳定性。乳化剂可以是非离子的、阳离子的、阴离子的和两性离子的乳化剂(参见McCutcheon's(1986)；美国专利第5011681号；4421769号；3755560号)。非限制性实例包括甘油酯、丙二醇酯、丙二醇的脂肪酸酯、聚丙二醇的脂肪酸酯、山梨醇的酯、失水山梨醇酐酯、羧酸共聚物、葡萄糖的酯和醚、乙氧基化的酯、乙氧基化的醇、磷酸烷基酯、聚氧乙烯脂肪醚磷酸酯、脂肪酸酰胺、酰基乳酸酯、脂肪酸盐、TEA硬脂酸酯、DEA油醇聚氧乙烯(3)醚磷酸酯、聚乙二醇20失水山梨醇单月桂酸酯(聚山梨醇酯(20))、聚乙二醇5大豆甾醇、硬脂醇聚氧乙烯(2)醚、硬脂醇聚氧乙烯(20)醚、硬脂醇聚氧乙烯(21)醚、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、C12-13链烷醇聚醚-3、PPG-2甲基葡萄糖醚二硬脂酸酯、PPG-2鲸蜡醇聚醚-20、双-PEG/PPG-20/20二甲硅酮、鲸蜡醇聚氧乙烯(10)醚、聚山梨醇酯(80)、鲸蜡醇磷酸酯、鲸蜡醇磷酸酯钾、二乙醇胺鲸蜡醇磷酸酯、聚山梨醇酯(60)、甘油硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、花生醇、花生醇葡糖苷及其混合物。

f.含有硅酮的化合物

在非限制性方面，含硅酮的化合物包括分子主链由交替的硅和氧原子与连接在硅原子上的侧基组成的聚合物产品家族中的任意成员。通过改变-Si-O-链的长度、侧基和交联，硅酮可以合成为各种各样的材料。它们的稠度可以从液体到凝胶到固体改变。

可以在本发明的上下文中使用的含硅酮的化合物包含在本说明书中所描述的或本领域普通技术人员已知的那些。非限制性实例包括硅油(例如挥发性和非挥发性油)、凝胶和固体。在一些方面，含硅的化合物包含硅油，例如聚有机硅氧烷。聚有机硅氧烷的非限制性实例包含聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚硅酮-11、苯基聚三甲基硅氧烷、聚三甲基硅氨基二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷或它们的混合物和其它任何给定比例的有机硅氧烷材料，以根据预期的应用(例如，对特定区域例如皮肤、毛发或眼睛)达到期望的稠度和应用特征。“挥发性硅油”包含具有低气化热的硅油，即通常低于约50卡每克硅油。挥发性硅油的非限制性实例包含：环聚二甲基硅氧烷，例如Dow Corning 344Fluid、DowCorning 345Fluid、Dow Corning 244Fluid和Dow Corning 245Fluid、Volatile Silicon7207(康涅狄格州丹伯里的Union Carbide Corp.)；低黏度聚二甲基硅氧烷，即黏度大约为50cst或更低的聚二甲基硅氧烷(例如聚二甲基硅氧烷，例如Dow Corning 200-0.5cstFluid)。Dow Corning Fluid可以从密歇根州米德兰的Dow Corning Corporation购得。在CTFA化妆品成分词典第三版中(通过引用并入)，环聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷分别被描述为环状二甲基聚硅氧烷化合物和用三甲基硅氧基单元封端的完全甲基化的线性硅氧烷混合物。可以在本发明的上下文中使用的其它非限制性挥发性硅油包含从纽约州沃特福德的General Electric Co.，Silicone Products Div.和密歇根州艾德里安的StaufferChemical Co.的SWS Silicones Div.获得的那些。

g.去角质剂

去角质剂包含去除皮肤外表面上的死皮肤细胞的成分。去角质剂可以通过机械、化学和或其他方式起作用。机械去角质剂的非限制性实例包括研磨剂，例如浮石、二氧化硅、织物、纸、贝壳、珠、固体晶体、固体聚合物等。化学去角质剂的非限制性实例包括酸和酶去角质剂。可用作去角质剂的酸包括但不限于乙醇酸、乳酸、柠檬酸、α羟基酸、β羟基酸等。本领域技术人员已知的其他去角质剂也可考虑为在本发明的范围内有用。

h.精油

精油包括来自药草、花、树和其它植物的油。这些油一般以植物细胞间微小的液滴存在，并可以通过本领域技术人员已知的若干方法(例如，蒸气蒸馏、脂吸法(即通过使用脂肪萃取)、浸渍、溶剂萃取或机械压榨)进行提取。当这些类型的油暴露于空气时，其趋于挥发(即挥发性油)。因此，虽然许多精油是无色的，但是随着时间它们可以氧化并且颜色变得更深。精油不溶于水，但溶于醇、醚、非挥发油(植物油)和其他有机溶剂。在精油中发现的一般物理特征包括从约160℃到240℃变化的沸点和从约0.759到约1.096的密度。

精油一般通过发现油的植物来命名。例如，玫瑰油或薄荷油分别来自玫瑰或薄荷植物。可以在本发明的上下文中使用的精油的非限制性实例包括芝麻油、澳洲坚果油、茶树油、月见草油、西班牙鼠尾草油、西班牙迷迭香油、芫荽油、百里香油、多香果油、玫瑰油、茴香油、香脂花油、香柠檬油、玫瑰木油、香柏油、甘菊油、鼠尾草油、香紫苏油、丁香油、柏木油、桉油、茴香油、海茴香油、乳香油、香叶油、姜油、葡萄柚油、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、柠檬油、柠檬草油、梨莓油、橘子油、甘牛至油、没药油、橙花油、橙皮油、广藿香油、胡椒油、黑胡椒油、苦橙叶油、松油、奥图玫瑰油、迷迭香油、檀香油、绿薄荷油、甘松油、香根草油、冬青油或依兰依兰。还预期本领域技术人员已知的其它精油在本发明的上下文中有用。

i.增稠剂

包括增稠剂或凝胶剂在内的增稠剂，包括可以增加组合物黏度的物质。增稠剂包括可以增加组合物黏度而基本上不改变组合物内活性成分功效的那些。增稠剂还可以增加本发明的组合物的稳定性。在本发明的一些方面，增稠剂包括氢化聚异丁烯、三羟基硬脂酸甘油酯、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物或其混合物。

可以在本发明的环境下使用的另外的增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和胶。羧酸聚合物的实例包括含有一种或多于一种衍生自丙烯酸的单体的交联化合物、经取代的丙烯酸和这些丙烯酸和经取代的丙烯酸的盐和酯，其中所述交联剂含有两个或多余两个碳-碳双键，并衍生自多元醇(参见美国专利第5087445号；第4509949号；第2798053号；CTFA国际化妆品成分词典，第四版，1991，第12和80页)。市售羧酸聚合物的实例包括卡波姆，其为丙烯酸与蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的均聚物(例如，购自B.F.Goodrich的CARBOPOL^TM900系列)。

交联的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子型和非离子型聚合物。实例描述于美国专第5100660号、第4849484号、第4835206号、第4628078号、第4599379号)。

聚丙烯酰胺聚合物(包括非离子的聚丙烯酰胺聚合物，其包括取代支化的或未支化的聚合物)的非限制性实例包括聚丙烯酰胺、异构烷烃和月桂聚醚-7、丙烯酰胺和经取代的丙烯酰胺与丙烯酸和经取代的丙烯酸的多嵌段共聚物。

多糖的非限制性实例包括纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、乙酸丙酸羧酸纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、微晶纤维素、纤维素硫酸钠及其混合物。其他实例为烷基取代的纤维素，其中纤维素聚合物的羟基被羟烷基化(优选地羟乙基化或羟丙基化)以形成羟烷基化的纤维素，其然后用C10-C30直链或支链烷基基团通过醚键进行进行进一步改性。一般这些聚合物为C10-C30直链或带支链的醇与羟烷基纤维素的醚。其它有用的多糖包括硬葡聚糖类，其包含每三个单元具有一个(1-6)连接的葡萄糖的(1-3)连接的葡萄糖单元的直链。

本发明可以使用的胶的非限制性实例包括阿拉伯树胶、琼脂、藻胶、藻酸、藻酸铵、支链淀粉、藻酸钙、角叉菜胶钙、肉毒碱、角叉菜胶、糊精、明胶、结冷胶、瓜尔豆胶、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、锂蒙脱石、透明质酸、水合硅石、羟丙基壳聚糖、羟丙基瓜尔胶、卡拉亚胶、巨藻、刺槐角豆胶、纳豆胶、藻酸钾、角叉菜胶钾、藻酸丙二醇酯、菌核胶、羧甲基葡聚糖钠、角叉菜胶钠、黄蓍胶、黄原胶及其混合物。

j.防腐剂

可以在本发明的环境下使用的防腐剂的非限制性实例包含季铵盐防腐剂(例如聚季铵盐-1和苄烷铵卤化物(例如苯扎氯铵(“BAC”)和苯扎溴铵))、对羟基苯甲酸酯(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、苯氧基乙醇、苄醇、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫汞撒或其组合。

k.润肤剂

有用的润肤剂包括以下：(a)硅油及其修饰物，例如线性和环状聚二甲基础氧烷；氨基、烷基、烷芳基和芳基硅油；(b)脂肪和油，包括天然脂肪和油例如荷荷巴油、大豆油、葵花油、米糠油、鳄梨油、杏仁油、橄榄油、芝麻油、桃仁油、蓖麻油、椰子油、貂油；可可脂肪油；牛油、猪油；通过使上述油氢化获得的氢化油；以及合成单甘油酯、甘油二酯和甘油三酯，例如肉豆蔻酸甘油酯和2-乙基己酸甘油酯；(c)蜡，例如巴西蜡棕榈、鲸蜡、蜂蜡、羊毛脂及其衍生物；(d)疏水性植物提取物；(e)烃类，例如液状石蜡、凡士林、微晶蜡、纯地蜡、鲨烯、姥鲛烷和矿物油；(f)高级脂肪酸，例如月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、山萮酸、亚油酸、亚麻油酸、亚麻酸、羊毛酸、异硬脂酸、花生四烯酸和多不饱和脂肪酸(PUFA)；(g)高级醇，例如月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇、油醇、二十二醇、胆固醇和2-己基癸醇；(h)酯，例如辛酸十六酯、合成油脂剂、十六烷基乳酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、油酸癸酯、异硬脂酸酯、单硬脂酸甘油酯、甘油二硬脂酸酯、甘油三硬脂酸酯、烷醇乳酸酯、柠檬酸酯和醇酒石酸酯；(i)精油及其提取物，例如薄荷提取物、茉莉提取物、樟脑提取物、白杉木提取物、苦橙皮提取物、ryu提取物、松节油、肉桂提取物、佛手柑提取物、蜜柑提取物、菖蒲提取物、松树提取物、薰衣草提取物、月桂提取物、丁香提取物、罗汉柏提取物、桉树提取物、柠檬提取物、七瓣莲提取物、百里香提取物、椒样薄荷提取物、玫瑰精油、鼠尾草提取物、芝麻油、姜油、罗勒提取物、杜松提取物、柠檬草提取物、迷迭香提取物、紫檀提取物、鳄梨提取物、葡萄提取物、葡萄籽油、没药提取物、黄瓜提取物、豆瓣菜提取物、金盏花提取物、接骨木花提取物、天竺葵提取物、菩提花提取物、苋菜提取物、海藻提取物、银杏提取物、西洋参提取物、胡萝卜提取物、瓜拉那提取物、茶树精油、荷荷巴油、紫草提取物、燕麦提取物、可可提取物、橙花精油、香草提取物、绿茶提取物、薄荷油、芦荟提取物、薄荷脑、桉叶素、丁香酚、柠檬醛、香茅提取物、冰片提取物、芳樟醇、香叶醇、月见草提取物、樟脑、麝香草酚、盘龙参酚(Spirantol)、蒎烯(penene)、柠檬烯和萜油；(j)脂类，例如胆固醇、神经酰胺、蔗糖酯和假神经酰胺，如欧洲专利说明书第556957号中所描述的；(k)维生素、矿物质和皮肤营养物，例如维生素A、维生素E和维生素K；维生素烷基酯，包括维生素C烷基酯；镁、钙和牛奶；(l)防晒霜，例如辛基甲氧基肉桂酸(Parsol MCX)和丁基甲氧基苯甲酰甲烷(Parsol1789)；(l)磷脂；(m)多羟基醇，例如甘油和丙二醇；和多元醇，例如聚乙二醇；(n)抗老化组合物，例如α-羟基酸、β-羟基酸；和(o)前述任意一种组分的混合物等。

l.增黏剂

合适的增黏剂的实例包括但不限于脂肪族烃树脂、芳香族改性脂肪烃树脂、氢化聚环戊二烯树脂、环戊二烯树脂、松香、松香酯、木松香、木松香酯、塔罗油松香、塔罗油松香酯、多萜、芳香族改性多萜、萜烯酚、芳香改性氢化聚环戊二烯树脂、氢化脂肪族树脂、氢化脂肪族芳香树脂、氢化萜烯和改性的萜烯、氢化松香酸、氢化松香酯、聚异戊二烯、部分或完全氢化的聚异戊二烯、聚丁二烯、部分或完全氢化的聚丁二烯等。一些引用的例子证明了这一点，增黏剂可以是完全或部分氢化的。增黏剂也可以是非极性的。(非极性表示增黏剂基本上不含具有极性基团的单体。优选，极性基团不存在，然而，如果它们存在，优选以最高为约5重量％，优选最高为约2重量％，更优选最高为约0.5重量％的量存在。)。

m.着色剂

本发明的组合物还含有至少一种化妆品可接受的着色剂，例如颜料和染料。合适的颜料的实例包括但不限于无机颜料、有机颜料、色淀、珠光颜料、虹彩或光学可变颜料及其混合物。颜料应理解为表示无机或有机、白色或有色颗的颗粒。在本发明的范围内，所述颜料可以任选地进行表面处理，但不限于例如硅酮、全氟化合物、卵磷脂和氨基酸的处理。

n.表面活性剂

在本发明的组合物中作为表面活性剂组分有用的表面活性剂包括非离子、阴离子、阳离子和两性(两性离子)表面活性剂，并可以互相组合使用。

o.pH调节剂

pH调节剂包括无机和有机酸和碱，特别是氨水、柠檬酸、磷酸、乙酸、氢氧化钠、乳酸、乙酰丙酸、乙醇酸、酒石酸、苹果酸、吡咯烷酮羧酸(PCA)、琥珀酸、柠檬酸、谷氨酸、2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)和三乙醇胺(TEA)。

p.还原剂

合适的还原剂包括但不限于硫脲、硫代硫酸盐(如钠盐)、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、硼氢化物和次磷酸盐、抗坏血酸及其盐、酯和衍生物(如棕榈酸抗坏血酸酯和抗坏血酸多肽)以及生育酚及其盐、酯及其衍生物(如盐酸生育酚酯)。其他还原剂列于INCI手册的第1655–56页。

q.芳香剂

本文公开的组合物可以任选地包含芳香剂。可能的芳香剂的实例包括天然油或天然衍生材料，以及合成芳香剂，例如烃、醇、醛、酮、酯、内酯、醚、腈和多官能团化合物。天然油的非限制性实例包括以下物质：罗勒(Ocimum basilicum)油、月桂(Pimento acris)油、香蜂草(Monarda didyma)油、香柠檬(Citrus aurantium bergamia)油、小豆蔻(Elettariacardamomum)油、大西洋雪松(Cedrus atlantica)油、洋甘菊(Anthemis nobilis)油、肉桂(Cinnamomum cassia)油、香茅(Cymbopogon nardus)油、鼠尾草(Salvia sclarea)油、丁香(Eugenia caryophyllus)油、丁香叶(Eufenia caryophyllus)油、油莎豆油、柏树(Cupressus sempervirens)油、柠檬桉油、斑点老鹳草油、生姜(Zingiber officinale)油、葡萄柚(Citrus grandis)油、榛子(Corylus avellana)果油、素馨(Jasminum officinale)油、杜松子油、杜松焦油、北美圆柏油、奇异果(Actinidia chinensis)水、杂熏衣草(Lavandula hybrida)油、薰衣草(Lavandula angustifolia)油、薰衣草(Lavandulaangustifolia)水、柠檬(Citrus medica limonum)油、柠檬草(Cymbopogon schoenanthus)油、酸橙(Citrus aurantifolia)油、椴树(Tilia cordata)油、椴树(Tilia cordata)水、蜜橘(Citrus nobilis)油、肉豆蔻(Myristica fragrans)油、柑橘(Citrus aurantiumdulcis)花油、柑橘(Citrus aurantium dulcis)油、柑橘(Citrus aurantium dulcis)水、广藿香(Pogostemon cablin)油、薄荷(Menthe piperita)油、薄荷(Menthe peperita)水、迷迭香(Rosmarinus officinalis)油、玫瑰油、玫瑰(Rosa damascena)提取物、玫瑰(Rosamultiflora)提取物、紫檀(Aniba rosaeodora)提取物、鼠尾草(Salvia officinalis)油、檀香(Santalum album)油、留兰香(Menthe viridis)油、茶树(Melaleuca alternifolia)油和依兰依兰(Cananga odorata)油。合成烃芳香剂的一些非限制性实例包括石竹烯、β-法尼烯、柠檬烯、α-蒎烯和β-蒎烯。合成醇芳香剂的一些非限制性实例包括檀香、香茅醇、芳樟醇、苯乙醇和α-松油醇(R═H)。合成醛芳香剂的一些非限制性实例包括2-甲基十一碳烯醛、柠檬醛、己基肉桂醛、异环柠檬醛、铃兰醛和10-十一碳烯醛。合成酮芳香剂的一些非限制性实例包括喀什米尔香氛、α-紫罗酮、龙涎酮E、乙酰基二聚异常戊烯、麝香酮和吐纳麝香。合成酯芳香剂的一些非限制性实例包括乙酸苄酯、4-叔丁基环己基乙酸酯(顺式和反式)、乙酸柏木酯、乙酸三环癸烯酯、醋酸异冰片酯和α-乙酸松油酯(R＝乙酰基)。合成内酯芳香剂的一些非限制性实例包括香豆素、茉莉内酯、muskalactone和桃醛。合成醚芳香剂的一些非限制性实例包括降龙涎香醚、花药和佳乐麝香。合成腈芳香剂的一些非限制性实例包括肉桂腈和gernonitrile。最后，合成多官能化合物的芳香剂的一些非限制性实例包括水杨酸戊酯、异丁香酚、二氢茉莉酮酸甲酯、天芥菜精、新铃兰醛和香草醛。

r.发泡剂

发泡剂包括例如月桂基硫酸钠、月桂酰基肌氨酸钠、烷基磺基琥珀酸钠、椰子油脂肪酸单甘醇磺酸钠、α-烯基磺酸钠、N-酰氨基酸盐如N-麸胺酸、2-烷基-N-羧甲基-N-羟乙基咪唑鎓甜菜碱、麦芽糖醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、脂肪酸双乙醇酰胺、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油和聚氧乙烯脂肪酸酯。这些发泡剂可以单独使用或它们中的两种或多于两种组合使用。

s.鞣剂

合适的鞣剂包括但不限于α-羟基醛和酮、甘油醛和相关的醇醛、各种吲哚、咪唑及其衍生物，以及各种认可的着色剂。其他合适的鞣剂包括但不限于丙酮醛、甘油醛、赤藓酮糖、四氧嘧啶、2,3-二羟基琥珀酸、2,3-二甲氧基琥珀酸醛、2-氨基-3-羟基-琥珀二醛和2-苄氨基-3-羟基琥珀二醛。

t.收敛剂

合适的收敛剂包括但不限于柠檬酸铝、乳酸铝、白桦提取物、咖啡提取物、月见草提取物、葡萄提取物、散沫花提取物、常春藤提取物、柠檬提取物、金缕梅提取物、铵和钾明矾、三聚磷酸铝、甘氨酸铝和酚硫酸铝、尿囊素氯羟铝、尿囊素羟铝、硬脂酸铝、硫酸铝和柠檬酸铝、磷酸钠铝、钠明矾、乳酸氯羟化铝钠、乳酸钙、氯化钙、半水硫酸钙、乳酸铝钠、醋酸锌、氯化锌、硫酸锌、乳酸锌、锌沸石、苯酚磺酸锌及其组合。提取物是指整个水果、豆类和/或植物，或这些水果、豆类和/或植物的选择成分。

u.防腐剂

合适的防腐剂包括但不限于对羟苯甲酸、苯氧乙醇、邻苯基苯酚、脱氢乙酸甲基、乙基、丙基或丁基酯或其盐、对甲酚、间甲酚、对氯间二甲苯酚、薄荷油、紫锥花、美洲血根草、辣椒、茶树精油、管香蜂草、矮木丛、刺荨麻(stinging metal)、月桂、没药、豆科灌木树皮、美洲花椒、金盏花、甘菊、莫匹罗星、硫酸新霉素、杆菌肽、多粘菌素B、左旋氧氟沙星、四环素(盐酸金霉素、盐酸土霉素和盐酸四环素)、克林霉素磷酸酯、硫酸庆大霉素、苯扎氯铵、苄索氯铵、己基间苯二酚、甲苄索氯铵、苯酚、季铵化合物、三氯卡班(triclocarbon)、三氯生和茶树油。

v.除臭剂和止汗剂

合适的除臭剂和止汗剂包括但不限于锌盐，例如硫酸锌和氯化锌、甘氨酸盐如甘氨酸铝锆、氢氯酸铝、四氯氢铝锆、碳酸锌、邻苯基苯酚和季铵化合物如二甲基苄基氯化铵和氯化六烃季铵。

w.增白剂

皮肤增白剂的实例包括但不限于对苯二酚、曲酸、甘草和/或其衍生物、抗坏血酸和/或其衍生物、熊果苷、熊果提取物、光果甘草及其衍生物、小科藻科提取物、紫苏提取物、椰子果肉提取物和/或其他脱色剂。

x.抗微生物剂

抗微生物剂的实例包括但不限于3,4,4′-三氯碳酰替苯胺(三氯卡班)；3,4,4′-三氟甲基-4,4′-二氯碳酰替(卤卡班)；5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；碘丙炔丁基氨基甲酸酯；8-羟基喹啉；8-羟基喹啉柠檬酸；8-羟基喹啉硫酸盐；4-氯-3,5-二甲苯酚(氯二甲苯酚)；2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇；重氮烷基脲；布康唑；制真菌素；特康唑；呋喃妥因；非那吡啶；阿昔洛韦；克霉唑；氯二甲苯酚；洗必太；咪康唑；特康唑；尼泊金丁酯；羟苯乙酯；对羟基苯甲酸甲酯；甲基氯异塞唑晽酮；甲基二氢噻唑；1,3-二(羟甲基)-5,5-二甲基海因和3-碘-2-丙炔基丁基氨基甲酸酯的混合物；羟基喹啉；EDTA；焦磷酸钠EDTA；对羟基苯甲酸酯；烷基吡啶化合物；可可磷脂酰PG-氯化二铵；葡萄糖酸氯己定；葡萄糖醛酸氯己定；醋酸氯己定；羟乙基磺酸盐氯己定；盐酸氯己定；苯扎氯铵；苄索氯铵；聚亚己基双胍；及其混合物。

2.药物成分

还预期药物活性剂对本发明的组合物是有用的。药物活性剂的非限制性实例包括抗粉刺剂、用于处理酒渣鼻的试剂、止痛剂、麻醉剂、肛门直肠药、抗组胺药、包括非甾族消炎药在内的消炎剂、抗生素、抗菌剂、抗病毒素、抗微生物剂、抗癌活性剂、抗疥螨剂、灭虱剂、抗肿瘤药、防汗药、止痒剂、抗牛皮癣药、抗脂溢剂、生物活性蛋白质和多肽、烧伤处理剂、烧灼剂、脱色剂、脱毛剂、尿布疹处理剂、酶、毛发生长刺激剂、包括DFMO及其盐和类似物在内的毛发生长抑制剂、止血剂、角质分离剂、口疮处理剂、唇疱疹处理剂、牙科或牙周处理剂、光敏感活性剂、皮肤保护剂/屏障剂、包括激素和皮质激素的类固醇、晒伤处理剂、遮光剂、经皮活性剂、鼻活性剂、阴道活性剂、疣处理剂、创伤处理剂、创伤愈合剂等。

F.试剂盒

还预期用于本发明的某些方面的试剂盒。例如，本发明的组合物可以包括在试剂盒内。试剂盒可以包括容器。容器可以包括瓶子、金属管、层压管、塑料管、分配器、高压容器、屏障容器、袋、分室、口红容器、压缩容器、能够保存化妆品组合物的化妆品盘或其它类型的容器如注射或吹塑成型的塑料容器，其中保存分散体或组合物或期望的瓶子、分配器或包装。试剂盒和/或容器在其表面可包含标记。例如，标记可以是字词、短语、缩写、图片或符号。

所述容器可以分配预定量的组合物。在其他实施方案中，可以挤压容器(例如金属、层压或塑料管)以分配期望量的组合物。组合物可以分配为喷雾、气溶胶、液体、流体或半固体。容器可以具有喷雾、抽吸机构或挤压机构。试剂盒还可以包含使用试剂盒组分以及使用任何包含于容器内的组合物的说明书。说明书可以包括如何施用、使用和保存组合物的说明。

实施例

列出了以下实施例以说明本发明的优选实施方案。本领域技术人员应理解，以下实施例中所公开的技术代表本发明人发现的在本发明的实践中发挥良好作用的技术，并因此可以被认为为其实践建立优选的模式。然而，根据本公开，本领域技术人员应理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，在所公开的具体实施方案中可以做许多改变，并仍获得类似或相似的结果。

本文所公开和要求保护的所有组合物和方法根据本公开可以不需要过多实验即而做出和实现。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员明显的是，在不脱离本发明的构思、精神和范围的情况下，可以对所述组合物和方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中进行改变。更具体地，明显地，化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的构思、范围和概念内。

胶原蛋白是缔结组织的主要成分之一，有助于保持皮肤看起来年轻。胶原蛋白是人身体中最丰富的蛋白质，占约其蛋白质组成的三分之一。当胶原蛋白水平变高，皮肤更紧实、更光滑和更柔软。人的胶原蛋白的产生在二十岁后开始下降，此时胶原蛋白的产生以约每年1％的速率下降，皮肤逐渐变得更薄、更脆弱。随着年龄增加，嘴巴和眼睛周围开始形成细纹，前额的皱纹开始出现。

实施例1

(示例性制剂)

具有本文公开的成分的制剂被制备为局部皮肤用组合物。在一些情况下，局部皮肤用组合物可以制备为安瓿、精华液、霜、乳液、凝胶和凝胶乳液。表1中的制剂是作为安瓿制备的局部皮肤组合物的实施例。

表1-示例性制剂^

成分	％浓度(以重量计)
		水	65.2
聚乙二醇-8(PEG-8)	15.0
		抗坏血酸	10.0
甘油	3.0
		柠檬酸钠	2.5
乙氧基二甘醇	2.0
		PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20	1.0
苯氧乙醇	0.65
		1,2-辛二醇	0.2
生育酚	0.2
		氯苯甘醚	0.16
白藜芦醇	0.1
		EDTA二钠	0.05
赋形剂*	适量

^制剂可以通过在70℃至75℃加热下在烧杯中混合所述成分直到均匀来制备。然后，可以将制剂冷却到标准室温(20℃至25℃)。此外，如果需要，可以添加额外的成分，例如以改变为皮肤提供益处的组合物或成分的流变性质。

*可以添加赋形剂，例如以改变组合物的流变性能。或者，可以改变水的量，只要组合物中水的量为至少40重量/重量％，优选60重量/重量％至90重量/重量％。

实施例2

胶原蛋白产生的研究

如上所述，增加的胶原蛋白水平与各种积极的皮肤效果之间有联系。胶原蛋白IV是胶原蛋白的子型，其是基膜的结构组分，所述基膜是细胞外基质层，作为皮肤细胞的附着点。胶原蛋白IV有助于在成年人中维持基膜的连接、紧实和紧固功能，并且是细胞行为的重要调节物。

根据图1中所示的计划表，评估如本文公开的组合物(下文也称为产品P)在体外条件下对人皮肤胶原蛋白IV的产生的影响。在第0天、第2天、第4天和第7天施用产品。在第0天和第9天对皮肤外植体进行取样。

外植体制备-在来自64岁的白人女性的腹部整形术上制备九(9)个人的皮肤外植体，其平均直径为12mm(±1mm)(参考:P2206-AB64，phototype II)。在37℃、湿度5％-CO₂气氛下，在BEM培养基(BIO-EC的外植体培养基)中保存外植体。

外植体分配-外植体分配成三批，如下表1所示。

表2-外植体分配

批次	名称	处理	外植体编号	取样时间
					T0	整形术对照	-	3	第0天
T	对照批	-	3	第9天
					P	产品	P	3	第9天

产品应用-在第0天(D0)、第3天(D3)、第4天(D4)和第7天(D7)，以2μL/外植体(2mg/cm²)局部施用产品P并使用小铲铺开。除了培养基的更换，对照外植体T不接受任何处理。在D1、D3、D4和D7，培养基更新一半(1ml/孔)。根据研究计划，调整处理天数以适应工作日的计划表。

取样-在第0天(D0)，收集来自批次T0的3种外植体并切割成2部分：一半固定在福尔马林缓冲溶液中，另一半在-80℃下冷冻。在第9天，收集每批的3种外植体并与第0天相同的方式处理。

组织学切片-在福尔马林缓冲溶液中固定24小时后，使用Leica PEARL自动脱水机使样本脱水并在石蜡中浸渍。然后使用Leica EG 1160包埋机使样本被石蜡包埋。使用Leica RM 2125Minot型显微镜用薄片切片机实现5μm厚的石蜡包埋的甲醛固定切片，然后将该部分置于

Plus玻璃片上。使用Leica DMLB或BX43 Olympus显微镜实现显微镜观察.使用Olympus DP72相机和Cell^D数据存储软件将图片数字化。

细胞活力的对照-根据Masson三色法，即Goldner三色法对石蜡切片染色后，评估真皮和表皮结构的细胞活力。使用CellD软件模块测量表皮厚度。

胶原蛋白IV免疫染色-用单克隆抗胶原蛋白IV抗体(Dako,ref.M0785,CloneCIV22)在冰冻切片上进行胶原蛋白IV免疫染色，在PBS-BSA0.3％-Tween 20(0.05％)中以1:50稀释，在室温下孵育1小时，使用AlexaFluor488(Lifetechnologies,ref.A11001)显示。用碘化丙啶对细胞核进行复染。使用自动载玻片处理系统(Dako,AutostainerPlus)进行染色并通过显微镜的观察进行评估。

胶原蛋白IV的结果-在相关批次中沿真皮-表皮连接处胶原蛋白IV染色的定量示于图2。胶原胶原蛋白IV染色的可视化示于图3。在第0天，沿真皮-表皮连接处，在空白批次T0上的胶原蛋白IV的染色相当清楚。在第9天，沿真皮-表皮连接处，在空白批次TJ9上的胶原蛋白IV的表达相当清楚。与批次TJ9相比，该产品诱导了胶原蛋白IV表达的增加。产品的抗老化活性可以部分地归因于其刺激胶原蛋白IV表达的能力。

实施例3

其他分析

可以用于确定在本说明书全文和权利要求中所公开的包含所述成分的组合的任一成分、或成分的任意组合或组合物的功效的分析，可以通过本领域普通技术人员已知的方法确定。以下是可以在本发明的上下文中使用的非限制性测定。应认识到，可以使用其它测试程序，包括例如客观程序和主观程序。

弹性蛋白刺激分析：弹性蛋白是结缔组织蛋白，其帮助皮肤在伸展或收缩后恢复形状。弹性蛋白也是在需要储存机械能的位置使用的重要负载蛋白。弹性蛋白是由许多可溶性弹性蛋白原蛋白分子在由赖氨酰氧化酶催化的反应中连接而成。可以通过直接ELISA夹心法在培养的人成纤维细胞中监测弹性蛋白分泌和弹性蛋白纤维，并使用Meso ScaleDiscovery系统SECTOR 2400成像系统进行分析。

层黏连蛋白和纤连蛋白刺激分析：层黏连蛋白和纤连蛋白是真皮-表皮连接(DEJ)(也称为基膜)中主要的蛋白质。DEJ位于真皮和表皮连结之间，形成叫做网脊的指状突出。表皮细胞从真皮的血管中接收其养分。网脊增大暴露于这些血管和所需养分的表皮的表面积。DEJ提供两种组织室的黏连，并控制皮肤的结构完整性。层黏连蛋白和纤连蛋白是位于DEJ中的两种结构糖蛋白。考虑到将细胞保持在一起的胶，真皮成纤维细胞分泌层黏连蛋白和纤维黏连蛋白以帮助促进表皮细胞到DEJ的细胞内和细胞间黏连。

层黏连蛋白和纤连蛋白的分泌可以通过定量在培养的人成纤维细胞的细胞上清液中的层黏连蛋白和纤连蛋白来监测，培养的人成纤维细胞用含或不含1.0％最终浓度的测试成分的培养基处理3天。培养之后，在酶联免疫吸附测试(ELISA)中，可以使用针对每种蛋白质的免疫荧光抗体来测定层黏连蛋白和纤连蛋白含量。

ORAC分析：还可以通过测量这种成分或组合物的抗氧化活性来分析本说明书公开的活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一种的氧自由基吸收(或吸收率)能力(ORAC)。抗氧化活性说明减少氧化试剂(氧化剂)的能力。该分析定量抑制氧化剂，例如已知导致损害细胞(例如皮肤细胞)的氧自由基的活动的程度及时长。可通过本领域普通技术人员已知的方法(参见美国专利公布第2004/0109905号和第2005/0163880号，以及可商购获得的试剂盒例如Zen-Bio ORAC抗氧化分析试剂盒(#AOX-2))来确定本说明书公开的活性成分、成分组合或具有所述组合的组合物中的任一种的ORAC值。Zen-Bio ORAC抗氧化测定试剂盒测定了由于AAPH(2,2'-偶氮双-2-甲基丙脒二盐酸盐)分解获得的过氧自由基的形成，荧光素荧光随时间的损失。作为水溶性维生素E的rolox以剂量依赖的方式作为抑制荧光素衰变的阳性对照。

基质金属蛋白酶1活性(MMP1)分析：体外基质金属蛋白酶(MMP)抑制分析。MMP是胞外蛋白酶，其凭借广泛的底物特异性在许多正常和疾病状态起作用。MMP1底物包含胶原蛋白IV。分子探针Enz/Chek白明胶酶/胶原酶分析试剂盒(#E12055)利用荧光明胶底物来检测MMP1蛋白酶活性。在溶蛋白性裂解后，显示亮绿色荧光，并可以使用荧光酶标仪监测亮绿色荧光以测量酶活性。

将来自Invitrogen的Enz/Chek白明胶酶/胶原酶分析试剂盒(#E12055)设计为体外分析以测量MMP1酶活性。可以分析说明书中公开的活性成分、任意一种成分的组合、或具有所述组合的组合物。该分析依赖于纯净的MMP1酶降解荧光明胶底物的能力。一旦底物被MMP1特异地裂解，则显示亮绿色荧光，并可以使用荧光酶标仪观测亮绿色荧光。在纯净的酶和底物存在或不存的条件下孵育测试物质以确定其蛋白酶抑制能力。

环氧合酶(COX)分析：体外环氧合酶-1和环氧合酶-2(COX-1、COX-2)抑制分析。COX是展现环氧合酶和过氧化物酶两者活性的双功能酶。环氧合酶活性将花生四烯酸转化为过氧化氢内过氧化物(前列腺素G2；PGG2)，过氧化物酶组分将内过氧化物(前列腺素H2；PGH2)还原为相应的醇、前列腺素、血栓素和环前列腺素的前体。该COX抑制剂筛选分析测量环氧合酶的过氧化物酶组分。过氧化物酶活性通过监测氧化的N,N,N',N'-四甲基-对苯二胺(TMPD)的出现比色地进行分析。该抑制筛选分析包含COX-1和COX-2酶两者，以筛选同工酶特异性抑制剂。可以使用比色COX(绵羊)抑制剂筛选分析(#760111，Cayman Chemical)来分析本说明书中所公开的每一种活性成分、任一种成分的组合、或具有所述组合的组合物对纯化的环氧合酶(COX-1或COX-2)活性的影响。根据制造商的使用说明，纯化的酶、血红素和测试提取物可以在分析缓冲液中混合，并在室温下摇晃孵育15分钟。孵育之后，可以加入花生四烯酸和比色底物以开始反应。颜色变化可以通过在590nm读取的比色板进行评估。COX-1或COX-2活性的抑制百分比可以通过与未经处理的对照物比较来计算，以确定测试提取物抑制纯化酶活性的能力。

脂肪氧合酶(LO)分析：体外的脂肪氧合酶(LO)抑制分析。LO是非血红素的含铁的加双氧酶，其催化分子氧加成到脂肪酸。亚油酸盐/酯和花生四烯酸盐/酯是植物和动物中LO的主要底物。然后，花生四烯酸可以转换为羟基二十三烯(HETE)酸衍生物，其随后转换为白三烯，有效的炎症介质。该分析通过测量利用花生四烯酸培养的脂肪氧合酶(5-LO、12-LO或15-LO)产生的氢过氧化物提供一种精确的和方便的用于筛选脂肪氧合酶抑制剂的方法。可以使用比色LO抑制剂筛选试剂盒(#760700，Cayman Chemical)来确定本说明书中所公开的活性成分、任意一种成分的组合、或具有所述组合的组合物中的每一种抑制酶活性的能力。纯化的15-脂肪氧合酶和试验成分可以在分析缓冲液中混合，并在室温下摇晃培育10分钟。培育之后，可以加入花生四烯酸开始反应，混合物可以在室温下再培育另外10分钟。可以加入比色底物终止催化，颜色变化可以通过在490nm测定的荧光板进行评估。脂肪氧合酶活性的抑制百分比可以通过与未处理的对照物对比来计算，以确定说明书中所公开的每种活性成分、任意一种成分的组合、或具有所述组合的组合物抑制纯净酶活性的能力。

弹性蛋白酶分析：来自Molecular Probes(俄勒冈州尤金，美国)的

弹性蛋白酶分析(试剂盒#E-12056)可以用作体外酶抑制分析以测量本说明书中所公开的活性成分、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物中每一种的弹性蛋白酶活性的抑制。EnzChek试剂盒含有可溶的牛颈韧带弹性蛋白，其可用染料标记以使共轭物的荧光淬灭。非荧光的底物可以被弹性蛋白酶或其他蛋白酶消化以产生高度荧光的片段。产生的荧光增强可以用荧光酶标仪进行监测。来自弹性蛋白底物的消化产物在约505nm处具有吸收最大值，在约515nm处具有荧光发射最大值。当使用EnzChek弹性蛋白酶分析试剂盒用于筛选弹性蛋白酶抑制剂时，可以将肽、N-甲氧基琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Val-氯甲基酮用作选择性的、共同的弹性蛋白酶抑制剂。

控油分析：用于测量皮脂腺中皮脂分泌的减少和/或皮脂腺中皮脂产生的减少的分析可以通过使用本领域普通技术人员已知的标准技术进行分析。在一种情况中，可以使用前额。可以将本说明书中所公开的活性成分、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物中的每一种，每天一次或两次施用到前额的一部分，持续设定的天数(例如1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天或多于14天)，而前额的其他部分不用所述组合物处理。在设定的天数期满后，皮脂分泌可以通过将细吸油纸施用到经处理的和未经处理的前额皮肤上进行分析。这是通过首先用湿的和干的布从经处理的和未经处理的区域去除所有皮脂完成的。然后将吸油纸施用到经处理的和未经处理的前额区域，并且围绕前额放置橡皮筋以轻轻地将吸油纸压到皮肤上。2小时后，可以移去吸油纸，使其干燥，然后进行透照。颜色越深的吸油纸对应于越多的皮脂分泌(或颜色较浅的吸油纸对应于减少的皮脂分泌)。

红斑分析：测量皮肤发红减少的分析可以使用Minolta Chromometer进行评估。皮肤红斑可以通过在对象的前臂施用0.2％的十二烷基硫酸钠溶液来诱发。该区域用封闭的贴片保护24小时。24小时后，除去贴片，可以使用Minolta Chroma Meter的a^*值对刺激诱发的发红进行评估。a^*值测量肤色在红色区域的变化。读数后立即用本说明书公开的活性成分、任意一种成分的组合或含有所述组合的组合物中的每一种来处理区域。可以定期进行重复测量以确定制剂减少发红和刺激的能力。

皮肤水分/水合分析：皮肤水分/水合的益处可以通过利用以Nova Dermal PhaseMeter进行的阻抗测量进行测量。阻抗计测量皮肤水分含量的变化。皮肤外层具有不同的电性质。当皮肤干燥时，其导电性很差。当其变得较为滋润时，产生增加的导电性。因此，皮肤阻抗(与导电性有关)的变化可以用于评价皮肤水合的变化。该仪器可以根据仪器说明对每个测试日进行校准。还可以对温度和相对湿度进行标记。对对象可以进行如下评估：测量前使样品可以在限定湿度(例如30％至50％)和温度(例如68℃至72℃)的室内进行平衡。在脸的每一侧获取三个单独阻抗读数，并对其进行记录并取平均分。阻抗计可以使用T5设定，其对施用到脸上每五秒的阻抗值取平均分。变化可以以统计学方差和显著性进行报告。根据该方法可以分析本说明书中公开的活性成分、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物的每一种。

皮肤清透度和雀斑与老年斑减少的分析：使用Minolta Chromometer评估皮肤清透度和雀斑与老年斑的减少。可以使用Minolta Chroma Meter的a*值评估肤色变化，以确定由于产品处理引起刺激的可能性。a*值测量肤色在红色区域的变化。这用于确定本说明书中公开的活性成分、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物中的每一种是否诱导刺激。测量可以在脸的每一侧进行并进行平均，作为左边脸和右边脸的值。皮肤清透度也可以使用Minolta Meter进行测量。测量是Minolta Meter的a*、b和L值的组合，并与皮肤的亮度有关，而且很好地对应皮肤的光滑度和水合。皮肤测定如上进行。在一个非限制性方面，皮肤清透度可以描述为L/C，其中C是色度并定义为(a²+b²)^1/2。

皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和肤色分析：皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和肤色可以用临床评分技术进行评估。例如，皮肤干燥的临床评分可以通过五点标准Kligman量表进行确定：(0)皮肤是柔软和湿润的；(1)皮肤呈现正常而没有可见的干燥；(2)皮肤触摸感觉轻微干燥而没有可见的剥落；(3)皮肤感觉干燥、粗糙并且具有一些鳞屑的发白的外观；以及(4)皮肤感觉非常干燥、粗糙并且具有有鳞屑的发白的外观。评估可以由两个临床医师独立进行并取平均分。

肤色临床评分分析：肤色的临床评分可以通过十点模拟数值量表来实施：(10)平滑均匀的皮肤、粉红棕的颜色。手持放大镜检查时没有暗的、发红的或有脱皮的斑块。皮肤的细微纹理摸上去非常均匀；(7)不用放大镜观察到均匀的肤色。没有脱皮区域，但是有由于色素淀积或红斑引起的轻微变色。没有直径大于1cm的变色；(4)轻易地注意到皮肤变色和不均匀的纹理。少量脱皮。皮肤的某些区域摸上去粗糙；以及(1)不均匀的皮肤着色和纹理。多个区域的脱皮和变色，色素减退型、发红的或黑色的斑点。大面积的直径超过1cm的不均匀着色。评估可以由两个临床医师独立进行并取平均分。

皮肤光滑度的临床评分分析：皮肤光滑度的临床评分可以通过十点模拟数值量度进行分析：(10)平滑的，皮肤是湿润的和光亮的，手指划过表面时没有阻力；(7)一定程度平滑的，微小的阻力；(4)粗糙的、可见地改变的，摩擦时有摩擦力；和(1)粗糙的、片状的、不均匀的表面。评估可以由两个临床医师独立进行并取平均分。

用Packman等人(1978)公开的方法进行的皮肤光滑度和皱纹减少的分析：皮肤平滑度和皱纹的减少也可以通过使用Packman等人(1978)公开的方法进行可视化评估。例如，每个对象就诊时，对每个对象的外表面线(SFL)的深度、浅度和总数量都可以进行认真的评分和记录。通过将数量因子乘以深度/宽度/长度因子得到数字的分数。获得眼睛区域和嘴巴区域(左侧和右侧)的分数，加到一起作为总的皱纹分数。

用Hargens Ballistometer进行的皮肤紧实度分析：皮肤紧实度可以用HargensBallistometer进行测量，其是通过使小物体落在皮肤上并记录前两个反弹峰来评估皮肤弹性和紧致度的装置。Ballistometry是使用相对钝的尖端(4平方毫米-接触面积)的小的轻量探针。探针轻轻地穿透进入皮肤，获得取决于皮肤外层性质的测量值，所述皮肤外层包括角质层和外表皮以及部分真皮层。

用Gas Bearing Electrodynamometer进行的皮肤柔软度/柔韧性分析：皮肤柔软度/柔韧性可以使用Gas Bearing Electrodynamometer进行评估，其为测量皮肤应力/应变性质的仪器。皮肤的黏弹性与皮肤保湿有关。可以通过用双面胶将探针黏附在皮肤表面实现对脸颊区域预设位点的测量。大约3.5gm的力平可以行施加于皮肤表面，精确地测量皮肤的位移。然后可以计算皮肤的柔韧性，并以DSR(动态弹簧刚度，以gm/mm计)表示。

用复制品进行的纹路和皱纹的显现分析：皮肤上纹路和皱纹的显现可以使用复制品进行评估，所述复制品是皮肤表面的印模。可以使用如硅橡胶的材料。复制品可以通过图像分析进行分析。纹路和皱纹可见性的变化可以通过利用硅复制品形成对象的脸并用计算机图像分析系统分析复制品图像进行客观地定量。复制品可以从眼睛区域和颈部区域获得，并用数码相机以低角度入射照明进行拍摄。数字图像可以用图像处理程序进行分析。

用表面光度仪/记录针进行的皮肤表面轮廓分析：皮肤表面轮廓可以通过使用表面光度仪/记录针的方法进行测量。这包括穿过复制品表面闪光或拖动记录针穿过复制品表面。记录针的垂直位移通过距离传感器可以录入计算机，并且在扫描复制品的一定距离后，皮肤轮廓的截面分析可以以二维曲面产生。该扫描可以沿着固定的轴重复任意次数以产生模拟的皮肤3-D图像。使用记录针技术可以获得十个随机的复制品截面，并组合产生平均值。感兴趣的值包括Ra，其为通过积分相对于平均轮廓高度的轮廓高度计算得到的所有粗糙度(高度)值的算术平均数。Rt，其为最高峰和最低谷之间的最大垂直距离，以及Rz，其为平均峰振幅减去平均峰高度。数值以用mm为单位标定的数值给出。设备应在每次使用前通过扫描已知数值的金属标准品进行归一化。Ra值可以通过下式计算：R_a＝归一化粗糙度；lm＝横向(扫描)长度；以及y＝轮廓位置相对于平均轮廓高度(x轴)的绝对值。

MELANODERM^TM分析：在其它非限制性方面，可以通过使用皮肤类似物例如MELANODERMTM来评价说明书中公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有所述组合的组合物中每一种的功效。黑素细胞，皮肤类似物中细胞的一种，当暴露于L-二羟苯基丙氨酸(L-DOPA)(黑色素的前体)时被明显地着色。皮肤类似物MELANODERM^TM可以如下处理：用包含说明书中公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有所述组合的组合物中的每一种的各种基质来处理，或仅用基质来处理作为对照。或者，未处理的皮肤类似物样品可以用作对照物。

丝聚合蛋白的产生：可测定在角质形成细胞中由于本说明书中所公开的活性成分、任意一种成分组合或具有所述组合的组合物中每一种的丝聚合蛋白产生的变化。丝聚合蛋白是皮肤中天然保湿因子(NMF)的前体。增加的NMF提高了皮肤中的水分含量。使用分析角质形成细胞裂解物中的丝聚合蛋白浓度的生物测试来确定在经处理和未经处理的角质形成细胞中的丝聚合蛋白的产生。可用于量化丝聚合蛋白产生的生物分析的非限制性实例为

SIMONE^TM蛋白质免疫印迹法。对于每个样品，使正常的人表皮角质形成细胞(NHEK)在来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的含有钙的EPI-200–Mattek

生长培养基中生长。在处理之前，在37℃下5％的CO₂中，使NHEK在生长培养基中孵育过夜。然后将NHEK在含有1％测试化合物/提取物的生长培养基或不含化合物/提取物(阴性对照)的生长培养基中孵育24小时至36小时。然后可将NHEK清洗、收集并于冰或更冷的物体上储存直至用裂解缓冲液和超声在冰上裂解。可确定样品的蛋白质浓度并用于使样品归一化。裂解物可在-80℃下存储直至在定量分析中使用。

Simon^TM蛋白质免疫印迹法使用定量的免疫印迹免疫分析技术，该技术使用了对丝聚合蛋白特异的抗体来定量检测样品中的丝聚合蛋白。将细胞样品裂解并对蛋白质浓度进行归一化。然后可以加载归一化的样品和分子量标准品，并使用毛细管电泳在变性的蛋白质分离凝胶上运行。将凝胶中的蛋白质固定并使用对聚丝蛋白特异的初代抗体进行免疫杂交。然后可将固定的蛋白质和与初代抗体结合的酶联检测抗体免疫杂交。然后可向固定的蛋白质中添加化学发光底物溶液以使化学发光显色与在固定化中结合的丝聚合蛋白的量成比例。在特定的时间终止化学发光显色，可测定化学发光信号的强度并与阳性对照和阴性对照比对。

闭合蛋白的产生：可测定由于本说明书中所公开的活性成分、任意一种成分的组合的或具有所述组合的组合物中的每一种而导致的在角质形成细胞中闭合蛋白产生的变化。闭合蛋白是对于紧密连结的形成和皮肤水分屏障功能重要的蛋白质。在经处理和未经处理的角质形成细胞中如何确定闭合蛋白产生的非限制性实例是通过使用分析在角质形成细胞裂解物中的闭合蛋白浓度的生物分析。通过使用

Simon^TM蛋白质免疫印迹法进行该生物分析。对于样品，在37℃下和5％的CO₂中，来自LifeTechnologies的人表皮角质形成细胞(HEKa)(C-005-5C)在来自Life Technologies的EPILIFE^TM生长培养基(M-EP-500-CA)中生长24小时，Epilife生长培养基含有钙，并补充有来自Life Technologies的Keratinocyte Growth Supplement(HKGS)(S-101-5)。然后使用测试化合物/提取物、作为阴性对照的无化合物/提取物或作为阳性对照的1mM的CaCl₂，使HEKa在生长培养基中孵育24小时至48小时。然后将HEKa清洗、收集并于冰或更冷的物体上储存直至使用裂解缓冲液和超声在冰上裂解。可确定样品的蛋白质浓度并用于使样品归一化。裂解物在-80℃下存储直至在生物测试中使用。

SimonTM蛋白质免疫印迹法生物分析使用定量的蛋白质免疫印迹分析技术，该技术使用了对闭合蛋白特异的抗体来定量检测样品中的闭合蛋白。将细胞样品裂解并对蛋白质浓度进行归一化。然后加载归一化的样品和分子量标准品，并使用毛细管电泳在变性的蛋白质分离凝胶上运行。然后固定凝胶中的蛋白质并使用对闭合蛋白特异的初代抗体进行免疫杂交。将经固定的蛋白质和与初代抗体结合的酶联检测抗体免疫杂交。然后向经固定的蛋白质中添加化学发光底物溶液以使化学发光显色与在固定化中结合的闭合蛋白的量成比例。可在特定的时间终止化学发光显色，可测定化学发光信号的强度并与阳性对照和阴性对照比对。

角质形成细胞单层渗透性：可测量由于本说明书中所公开的活性成分、任意一种成分组合或具有该组合的组合物每一种而导致的角质形成细胞单层的渗透性变化。角质形成细胞单层的渗透性是皮肤屏障的完整性的量度。作为非限制性实例，可使用Millipore(ECM642)的体外血管渗透性测定法(Vascular Permeability assay)来确定经处理和未经处理的角质形成细胞中的角质形成细胞单层的渗透性。该测定分析了内皮细胞吸附、输送和渗透。简略来说，来自Life Technologies的成人表皮角质形成细胞(C-005-5C)可被接种到在收集孔内的多孔胶原蛋白涂覆的膜上。在37℃下和5％的CO₂中，角质形成细胞在来自Life Technologies的Epilife生长培养基(M-EP-500-CA)中培养24小时，Epilife生长培养基含有钙，并补充以来自Life Technologies的Keratinocyte Growth Supplement(HKGS)(S-101-5)。该培养时间使得细胞形成单层并封闭膜孔。然后将培养基替换成含有(测试样品)或不含有(未经处理的对照)测试化合物/提取物的新鲜培养基，该角质形成细胞在37℃下和5％的CO₂中孵育另外48小时。在存在/不存在测试化合物/提取物的培育之后，为了测定角质形成细胞单层渗透性，培养基被替换成含有高分子量异硫氰酸荧光素(FITC)-Dextran的新鲜的培养基，该角质形成细胞在37℃下和5％的CO₂中培养另外4小时。在4小时的孵育期间，FITC可以以与单层膜的渗透性成比例的速率穿过该角质形成细胞单层和多孔膜进入收集孔。在4小时的孵育后，可测定细胞活力和收集孔中FITC的含量。对于FITC含量，收集孔中的培养基被收集，并且在520nm处激发时在480nm(Em)处测定培养基的荧光。与未经处理的对照相比，渗透率百分比和变化百分比可以通过以下等式确定：渗透率百分比＝((测试样品的Ex/Em平均值)/未经处理的对照的Ex/Em平均值)×100；变化百分比＝测试样品的渗透率百分比-未处理的对照的渗透率百分比。

透明质酸的产生：可测定由于本说明书中所公开的每种活性成分、任意一种成分的组合或具有所述组合的组合物的每一种而导致的人真皮成纤维细胞中的透明质酸产生的变化。HA是与基质结构的稳定性有关的多糖，并且与向组织和细胞提供膨压有关。作为一个非限制性实例，可以使用来自R&D Systems(DY3614)的Hyaluronan DuoSet ELISA试剂盒确定在经处理和未经处理的成人真皮成纤维(HDFa)细胞中的HA的产生。在该分析中，为产生试样，在处理之前，在37℃和10％CO₂下在饥饿培养基中(含0.15％的牛胎儿血清和1％的青霉素链霉素溶液的Dulbecco氏改良Eagle培养基)孵育由Cascade Biologics获得的次融合的HDFa细胞(C-13-5C)72小时。之后使用含有测试化合物、阳性对照(来自Sigma-Aldrich的佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(P1585)和衍生自来自Sigma-Aldrich的生长因子的血小板(P3201))的新鲜的饥饿培养基或无添加剂的新鲜的饥饿培养基培养该细胞24小时。然后收集培养基并在-80℃下冷冻直至在ELISA测试中使用。

简而言之，该ELISA分析采用定量的三明治酶免疫分析技术，因此对HA特异的捕获抗体可以预先涂覆在微孔板上。将标准品、来自经处理和未经处理的细胞的培养基移液至微孔板中，以使存在的任意HA被固定化抗体结合。洗去所有未结合的物质后，向孔中添加对HA特异的酶联检测抗体。冲洗以去除所有未结合的抗体-酶试剂之后，向孔中添加底物溶液，使得颜色能够与最初步骤中结合的HA的量成比例的显现。在特定的时间终止颜色显现，颜色的强度可以使用酶标仪在450nm处测量。

透明质酸酶活性的抑制：可测定由于本说明书中所公开的活性成分、任意一种成分的组合或具有该组合的组合物的每一种而导致的透明质酸酶活性的变化。透明质酸酶是分解HA的酶。HA是与基质结构的稳定性有关的多糖，并且与向组织和细胞提供膨压有关。作为一个非限制性实例，可以使用由Sigma-Aldrich方案#EC 3.2.1.35改良的体外方案测定透明质酸活性。简略来说，向含有测试化合物或对照的微孔板反应孔中添加来自Sigma-Aldrich的1-S型透明质酸(H3506)。可使用鞣酸作为阳性对照抑制剂，对照的酶不添加测试化合物，含有测试化合物或阳性对照但不含透明质酸酶的孔可以用作背景阴性对照。在添加底物(HA)之前，孔在37℃下孵育10分钟。添加底物，反应在37℃下孵育45分钟。然后，将每个反应溶液的一部分转移在乙酸钠和pH为3.75的乙酸的溶液中并轻轻混合，以终止该部分反应(终止孔)。在将一部分反应溶液加入到终止孔中之后，终止孔和反应孔应该都含有相同体积的溶液。反应孔和终止孔均在室温下培养10分钟。然后测量反应孔和终止孔在600nm处的吸光度。抑制率可以使用以下公式来计算：抑制剂(或对照)活性＝(在600nm处的抑制剂终止孔的吸光度-在600nm处的抑制剂反应孔的吸光度)；初始活性＝在600nm处的对照酶吸光度；抑制百分数＝[(初始活性/抑制剂活性)×100]-100。

过氧化物酶体增殖剂-激活受体γ(PPAR-γ)的活性：可测定由于本说明书中所公开的活性成分、成分组合的任一种或具有该组合的组合物的的每一种而导致的PPAR-γ活性变化。PPAR-γ是对皮脂产生关键的受体。作为一个非限制性实例，使用分析测试化合物或组合物抑制配体结合的能力的生物测试来测定PPAR-γ的活性。简略来说，使用购自LifeTechnologies的荧光小分子Pan-PPAR配体FLUORMONE^TM Pan-PPAR Green(PV4894)来确定测试的化合物或组合物是否能够抑制配体结合至PPAR-γ。样品孔包括PPAR-γ和荧光配体，以及测试化合物或组合物(测试)；参考抑制剂；罗格列酮(阳性对照)；或者无测试化合物(阴性对照)。孔被培养设定的一段时间以使得配体有机会与PPAR-γ结合。然后可测量每个样品孔的荧光偏振，并与阴性对照孔比对以确定测试化合物或组合物的抑制百分比。

细胞因子阵列：人表皮角质形成细胞被培养至70％至80％的融合度。吸出板中的培养基并加入0.025％的胰蛋白酶/EDTA。当细胞变得丰满时，轻轻地敲打培养皿以释放细胞。从培养皿中去除含有胰蛋白酶/EDTA的细胞并中和。将细胞在180xg下离心5分钟以形成细胞团粒。吸出上清液。在EPILIFE^TM培养基(Cascade Biologics)中再悬浮获得的球状物。该细胞以约10％至20％的融合度被接种到6孔板中。在细胞变为约80％融合度之后吸出培养基，将1.0ml的EPILIFE^TM、佛波醇13-豆蔻酸12-乙酸酯(“PMA”)(已知的炎症诱导剂)和测试组合物稀释物加入到两个重复的孔(即1.0％(100μl的100×储备液)和0.1％(10μl的100×储备液)的测试组合物稀释为终体积1ml的EpiLife生长培养基中)。轻轻地搅拌培养基以确保充分混合。另外，在存在或不存在额外的PMA的情况下，向对照孔中添加1.0ml的EPILIFE^TM。在定量给料之后，将板在37±1℃和5.0±1％CO₂中培养约5小时。培育5小时后，将所有培养基收集在锥形管中并在-70℃冷冻。

为了分析，将16-垫杂交腔室连接到16-垫FAST载玻片上，该载玻片一式三份，具有16种抗细胞因子抗体和实验对照(Whatman BioSciences)，并将载玻片置于FASTFrame(每帧4个载玻片)中进行处理。在室温下，使用70ml S&S蛋白质阵列阻断缓冲剂(WhatmanSchleicher and Scheull)将阵列阻断15分钟。移除阻断缓冲剂，并向每个阵列添加70ml各自的上清液试样。在轻微振动下，阵列在室温下培养3小时。使用TBS-T将阵列清洗3次。使用70ml混合型抗体处理阵列，混合型抗体含有一种对应于每个阵列捕捉抗体的生物素化的抗体。在轻微振动下，阵列在室温下孵育1小时。使用TBS-T将阵列清洗3次。在轻微振动下，在室温下使用70ml含有链霉亲和素-Cy5轭合物的溶液培养1小时。使用TBS-T将阵列清洗3次，在去离子水中快速冲洗并干燥。

载玻片可以在Perkin-Elmer ScanArray 4000共焦荧光成像系统中成像。使用Imaging Research ArrayVision软件可以保存并分析阵列图像。简言之，通过去除背景信号确定斑点强度。可以对来自每个样品条件的重复斑点进行平均，然后与适合的对照对比。

内皮细胞管形成：内皮细胞管的形成和血管生成及毛细血管形成有关。毛细血管形成和血管生成可以导致皮肤发红和红斑痤疮。在存在或不存在测试提取物和化合物的情况下，在细胞培养系统中，使用具有预成型的初代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的毛细管破坏测试可以确定内皮细胞形成管的能力。

简略来说，将HUVEC在细胞外基质进行体外培养，其刺激连接物和内皮细胞的管状形态生成以形成毛细管状的内腔结构。这些体外形成的毛细血管在许多方面与人血管毛细血管相似。毛细管测试是基于该现象的，并用于评价潜在的脉管系统靶向试剂。

在5％CO₂、37℃下，HUVEC培养物在细胞培养器中生长。用于HUVEC的完整培养基为内皮管细胞基础培养基(EBM)，其补充有2％的牛胎儿血清(FBS)、12μg/ml的牛脑提取物、1μg/ml的皮质醇和1μg/ml的GA-1000(庆大霉素-两性霉素B)。在第3代至第8代之间的HUVEC培养物可以用于所有的分析测试。

用荧光试剂Calcein AM预标记HUVEC，并将其接种于使用其完全生长培养基的细胞外基质涂覆的96孔培养板中。在形态生成过程之后约4小时，形成内皮毛细管。然后，作为处理条件，对形成的毛细管培养物施用50μl体积的设定剂量的测试试剂。可以向未处理对照组加入测试试剂的载剂。索坦(Sutent)是FDA认证的抗血管生成药物，可以包括其一个浓度作为测定性能的对照。在处理后约六小时，通过显微镜检查每个孔中的内皮小管形态、使其成像，可以定量分析处理条件下的毛细管破坏活性。每个测试条件可以在两个孔中进行，包括对照。

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本文所公开和要求保护的所有组合物和/或方法可以根据本公开可以不需要过度实验即可做出和实施。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选的实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员明显的是，可以对所述组合物和/或方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序进行改变，而不脱离本发明的构思、精神和范围。更具体地，明显的是化学上和生理上都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的构思、范围和概念内。

Claims (20)

1.包含有效量的抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8的组合物在制备用于调节对象的皮肤以改善皮肤状况或外观的制剂中的用途，其中所述组合物局部施用至对象的皮肤。

2.根据权利要求1所述的用途，其中改善皮肤状况或外观选自逆转胶原蛋白的流失；增加胶原蛋白的产生；增加弹性蛋白的产生；减少细纹和/或皱纹的出现；减少皮肤松弛；改善皮肤紧固度；改善皮肤紧实度；减少时间性老化和光老化的皮肤症状；使皮肤年轻和/或使皮肤有活力；改善皮肤肌理；改善皮肤屏障修复；改善皮肤轮廓的外观；使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小；增加皮肤细胞代谢；提高皮肤弹性；减少和/或处理色素沉着过度；使皮肤变色最小化；改善肤色；恢复皮肤光泽；减少氧化应激和减少皮肤自由基含量。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含：

0.2重量％至20重量％的抗坏血酸；

0.1重量％至10重量％的维生素E；

0.05重量％至5重量％的白藜芦醇；和

0.00001重量％至0.01重量％的乙酰基六肽-8。

4.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物还包含甘油。

5.根据权利要求4所述的用途，其中所述甘油以1重量％至10重量％的量提供。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物还包含表面活性剂、乳化剂、缓冲剂、防腐剂、增溶剂、湿润剂、润肤剂、皮肤调理剂、抗微生物剂、稳定剂和消泡剂中的一种或多于一种。

7.根据权利要求1所述的用途，其中组合物还包含有效量的水、PEG-8、柠檬酸钠、乙氧基二甘醇、PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20、苯氧乙醇、辛甘醇、氯苯甘醚、EDTA、二甲基硅油和环五聚二甲基硅氧烷中的一种或多于一种。

8.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物还包含

1重量％至95重量％的水；

1.5重量％至30重量％的PEG-8；

0.1重量％至20重量％的乙氧基二甘醇；

0.05重量％至10重量％的PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20；和

0.01重量％至5重量％的辛甘醇。

9.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物还包含

0.1重量％至5重量％的苯氧乙醇；

0.1重量％至5重量％的柠檬酸钠；

0.01重量％至0.5重量％的氯苯甘醚；和

0.01重量％至1重量％的EDTA。

10.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含0.2重量％至20重量％的抗坏血酸。

11.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含5重量％至15重量％的抗坏血酸。

12.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含0.1重量％至10重量％的维生素E。

13.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含0.1重量％至1重量％的维生素E。

14.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含0.05重量％至5重量％的白藜芦醇。

15.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含0.1重量％至1重量％的白藜芦醇。

16.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含45重量％至85重量％的水。

17.根据权利要求1所述的用途，其中将所述组合物直接施用至对象的皮肤。

18.根据权利要求1所述的用途，其中将所述组合物添加至对象现在的皮肤护理产品中。

19.一种用于制备定制的皮肤护理组合物的方法，其包括向对象现在的皮肤护理产品中添加预定量的组合物，所述组合物包含抗坏血酸、维生素E、白藜芦醇和乙酰基六肽-8。

20.根据权利要求19所述的方法，其中将组合物添加到现在的皮肤护理产品中将给予现在的皮肤护理产品以下能力或改善现在的皮肤护理产品在以下方面的功效：增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、减少细纹和/或皱纹的出现、减少皮肤松弛、改善皮肤紧固度、改善皮肤紧实度、减少时间性老化和光老化的皮肤症状、使皮肤年轻和/或使皮肤有活力、改善皮肤肌理、改善皮肤屏障修复、改善皮肤轮廓的外观、使疲劳和/或应激的皮肤症状达到最小、增加皮肤细胞代谢、提高皮肤弹性、减少和/或处理色素沉着过度、使皮肤变色最小化、改善肤色、恢复皮肤光泽、减少氧化应激和/或减少皮肤自由基含量。

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