CN113528356A - 一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用 - Google Patents
一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113528356A CN113528356A CN202110946255.7A CN202110946255A CN113528356A CN 113528356 A CN113528356 A CN 113528356A CN 202110946255 A CN202110946255 A CN 202110946255A CN 113528356 A CN113528356 A CN 113528356A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- trichoderma
- solid
- tea
- fermentation
- tea leaves
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 title claims abstract description 81
- 239000007787 solid Substances 0.000 title claims abstract description 61
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 241001122767 Theaceae Species 0.000 title 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims abstract description 90
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 11
- 241000303709 Trichoderma guizhouense Species 0.000 claims abstract description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 51
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 51
- 241000209094 Oryza Species 0.000 claims description 24
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 7
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 6
- 241000223260 Trichoderma harzianum Species 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 241000499912 Trichoderma reesei Species 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 10
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 4
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 abstract 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 33
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 12
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001460073 Trichoderma asperellum Species 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 2
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 2
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 2
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 235000006092 Stevia rebaudiana Nutrition 0.000 description 1
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 241001304120 Trichoderma pseudokoningii Species 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000443 biocontrol Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000010815 organic waste Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000001863 plant nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G17/00—Cultivation of hops, vines, fruit trees, or like trees
- A01G17/005—Cultivation methods
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W30/00—Technologies for solid waste management
- Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Botany (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Tea And Coffee (AREA)
Abstract
本发明提供了一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用，属于生物工程领域。本发明所述木霉菌剂是将贵州木霉NJAU 4742接种到固体培养基中浅盘发酵3天以上获得；所述的固体培养基为重量百分比为60％～100％的茶渣和0％～40％的米糠，含水量为60％～70％，木霉孢子数量达到鲜重1.9×109cfu/g；将该方法生产的木霉菌种稀释190倍应用到茶叶育苗上，对茶苗生根有显著的促进效应，实现了茶产业的有机循环。
Description
技术领域
本发明属于生物工程领域，涉及一种利用茶渣固体发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用。
背景技术
木霉属真菌是一类重要的根际促生真菌，其凭借重寄生作用、抗生作用和竞争作用等多种机制产生的良好生防效应已经成为生物有机类肥料的重要开发对象。研究表明，固体发酵比液体发酵更能提高木霉菌种孢子数量和货架期。木霉菌种固体发酵包括木霉菌种的液体培养、固体原料的选择与处理和固体发酵环境的控制等技术。目前，已经有部分学者对木霉菌种固体发酵做了一些研究，如中国专利CN105586279公开了利用作物秸秆发酵木霉固体菌种；CN104059860A公开了利用麦麸和锯木屑固体发酵拟康氏木霉；CN109628321B公开利用甜叶菊渣固体发酵木霉。上述报道的木霉菌种发酵技术涉及到了对原料调整pH的步骤，如果能够寻得一种无需调控pH的原料将极大地节约生产成本。
茶渣是指茶叶在生产加工以及深加工、销售、饮用过程中产生的固体有机废弃物，主要包括茶叶深加工过程中经浸泡提取后的废弃茶叶、销售过程产生的滞销粗老茶和加工过程产生的副茶(约占成品茶总产量的10％)。茶叶加工厂挑剩的茶末、茶梗以及数量众多口感不好被淘汰的夏秋茶也属于茶渣范畴。根据现有的报道表明，茶渣自身含有非常丰富的营养物质,氮含量达4.77％、碳含量达50.2％,并富含磷、钙、钾等多种微量元素，并且5种常规重金属含量均在安全范围以内。如何实现茶渣资源的有效利用也具有重要意义。
发明内容
针对上述现有技术存在的不足，本申请旨在提供一种利用茶渣固体发酵的固体木霉菌剂及其应用，本发明所述的固体发酵木霉菌剂对茶叶育苗过程中的促生效果。
本发明的目的可通过以下技术方案实现：
本发明提供一种利用茶渣固体发酵的固体木霉菌剂，将贵州木霉NJAU4742接种到固体培养基中浅盘发酵3天以上获得；所述的固体培养基为重量百分比为60％～100％的茶渣和0％～40％的米糠，含水量为60％～70％。
本发明所述的贵州木霉NJAU4742为现有已知菌株(如专利201810768488.0中公开)，分类命名为贵州木霉(Trichoderma guizhouense)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2016年04月11日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC NO.12166。
本发明所述的茶渣可以为任意茶叶的茶渣，在一些实施例中是经过烘干处理后含水量小于10％，粒径小于5mm的任意茶叶的茶渣。
在一些具体的实施例中，所述的固体培养基为重量百分比为60％～80％的茶渣和20％～40％的米糠；更具体的为重量百分比为70％的茶渣和30％的米糠。
在一些具体的实施例中，所述的固体培养基的含水量为65％。
在一些具体的实施例中，浅盘发酵的厚度为3～6cm；更具体为3cm。
在一些具体的实施例中，接种量为10％～20％；更具体为15％。
在一些具体的实施例中，发酵时间为3～5天；更具体为4天。
在一些具体的实施例中，发酵温度为26～28℃。
本发明所述的固体培养基可以按照本领域的常规方法制备，在一种具体的实例中，为配方量的茶渣和米糠调节含水量60％～70％后灭菌即可。灭菌方法可以为本领域的常规方法，例如固体灭菌罐115℃灭菌30分钟。
本发明还提供所述的固体木霉菌剂制备的木霉菌液。
在一些实例中，所述木霉菌液的制备方法为本发明所述的固体木霉菌剂按照1：(8～10)的比例添加无菌水，摇床培养25～35分钟后获得。
本发明还提供所述的固体木霉菌剂或木霉菌液在茶叶育苗中的应用。
在一些实施例中，当用于茶叶育苗中时，所述的固体木霉菌剂或木霉菌液的用量为木霉菌1×107～1×108cfu/ml基质，即每毫升基质中木霉菌为1×107～1×108cfu；优选为1×107cfu/ml基质。
有益效果本发明提供了一种利用茶渣固体发酵木霉菌剂及其制备方法，以茶渣为主要原料进行固体发酵木霉菌剂，不仅有效的解决茶渣的资源化利用问题，且生产出来的木霉菌种孢子数量获得显著的提升，可以达到鲜重1.9×109cfu/g FW。将其运用到茶叶育苗当中，通过观察茶苗的生长长势以及各项指标的检测，得出发酵的木霉菌种对茶苗有较好的促生效果，同时实现了茶渣在茶叶种植中的循环利用。此外，还具有以下具体优点：
1)利用茶渣固体发酵木霉菌种无需对原料进行调整pH，便于操作同时也节约成本。
2)茶渣发酵的木霉菌种能显著地促进茶苗的生长，在株高、茎粗等方面均有显著体现，实现了茶渣的资源化利用。
附图说明
图1不同固体原料载体对木霉菌种固体发酵的影响。
图2茶叶添加不同米糠比例对木霉菌种固体发酵的影响。
图3不同浅盘发酵厚度对木霉菌种固体发酵的影响。
图4不同浅盘发酵接种量对木霉菌种固体发酵的影响。
图5不同浅盘发酵时间对木霉菌种固体发酵的影响。
图6直接施用木霉菌种对扦插茶苗的影响。
图7木霉菌种对茶苗的盆栽促生效果图。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
若无特别说明，以下实施例中所用原料如下：
菌种：贵州木霉NJAU 4742(Trichoderma guizhou NJAU 4742)由南京农业大学资源与环境科学学院植物营养课题组实验室保存。保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2016年04月11日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC NO.12166。
发酵原料：酸解氨基酸、茶渣、米糠。酸解氨基酸由江阴联业生物科技有限公司友情提供，游离氨基酸含量为15％，游离氢离子浓度为3M，也可通过购买方式获得。茶渣由禾瑞升(浙江)生物科技有限公司友情提供，可通过购买方式获得，米糠由市场采购获得。
实施例1木霉菌剂固体发酵
1、木霉菌种液体培养
将贵州木霉NJAU 4742经过PDA固体培养基活化后接种至PDA液体培养基，经过170r/min，28℃条件下液体发酵培养4d获得贵州木霉NJAU 4742液体菌液。
2、固体培养基筛选
固体培养基设置5个处理，分别为处理1：100％茶渣(调pH)；处理2:25％茶渣+25％米糠+50％秸秆；处理三：30％茶渣+70％秸秆；处理四：70％茶渣+30％米糠；处理五(不调pH)：100％茶渣。贵州木霉NJAU 4742最适固体发酵初始pH为2.5-3.0，利用酸解氨基酸液调节上述前4个处理pH为2.5-3.0(加入酸解氨基酸的比例为6.6％)，处理五不调pH，五个处理均调节含水量为65％。115℃灭菌30分钟冷却后接种15％上述获得的贵州木霉NJAU 4742液体菌液，室温下浅盘(物料厚度3cm)固体发酵4天。木霉孢子数量统计：取5g木霉固体培养菌种，在45ml无菌水中稀释，利用涡旋混合器充分混匀，采用血球计数板法测定孢子浓度。如图1所示，不同物料组合对木霉发酵的孢子数量具有一定的影响。茶渣添加30％的米糠发酵效果优于其他处理，孢子数量达到7.75×108cfu/g FW。纯茶渣(不调PH)处理孢子数量达到7.25×108cfu/g FW，纯茶渣(调PH)处理孢子数量达到6.75×108cfu/g FW，表明纯茶渣也适用于木霉菌种固体发酵。相比纯茶渣处理，茶渣添加33％米糠对木霉菌种孢子数有显著的影响，茶渣调节pH值对木霉的生长没有显著的促进作用，而茶渣添加秸秆则不生长木霉。上述结果表明本发明所述的米糠作为茶渣固体发酵木霉菌种的载体，具有显著的效果。
3、固体培养基添加比例
固体培养基添加比例设置5个处理，分别为处理1：100％茶渣；处理2：90％茶渣+10％米糠；处理3：80％茶渣+20％米糠:处理4：70％茶渣+30％米糠；处理5:60％茶渣+40％米糠。含水量、灭菌方式、接种量以及培养条件同2.2，五个处理均不调pH值。如图2所示，本发明所述的茶渣添加不同比例的米糠对木霉发酵的孢子数量具有显著的影响。特别是茶渣添加30％的米糠发酵效果显著优于其他处理，孢子数量达到鲜重8.75×108cfu/g FW。
4、浅盘发酵厚度
浅盘发酵物料厚度设置5个处理，分别为2、3、4、5和6cm。物料为70％茶渣+30％米糠。含水量、灭菌方式、接种量、温度、湿度以及培养时间同2.2，五个处理均不调pH值。如图3所示，本发明所述的浅盘发酵物料厚度对木霉发酵孢子数量具有显著的影响。特别是3cm物料厚度具有显著的优势效果。
5、浅盘发酵接种量
浅盘发酵接种量设置5个处理，分别为5％、10％、15％、20％和25％。物料为70％茶渣+30％米糠，物料厚度为3cm。含水量、灭菌方式、温度、湿度以及培养时间同2.2，五个处理均不调pH值。如图4所示，本发明所述浅盘发酵物料接种比例对木霉发酵孢子数量具有显著的影响。为了节约工业生产成本，优选15％为接种比例。
6、浅盘发酵培养时间
浅盘发酵接种量设置5个处理，分别为2、3、4、5和6天。物料为70％茶渣+30％米糠，接种量为15％。含水量、灭菌方式、温度、湿度以及物料厚度同2.5。如图5所示，本发明所述浅盘发酵时间对木霉发酵孢子数量具有显著的影响。为了节约时间生产成本，优选4天为发酵时间。
实施例2直接施用木霉菌种对扦插茶苗的影响
茶叶扦插育苗基质为草炭：红壤土：蛭石：珍珠岩＝30:30:20:20，在该基质中添加0cfu/ml、6×107cfu/ml、12×107cfu/ml、18×107cfu/ml和24×107cfu/ml的木霉菌种分别定义为CK处理、T1处理、T2处理、T3处理和T4处理。由图6可得，随着木霉添加量的增加，大面积扦插苗叶片枯萎，扦插切面发黑，扦插苗的成活率也呈现递减的趋势。因此，在扦插苗中直接添加木霉菌种，会严重降低茶叶扦插苗的成活率，这可能由于木霉腐生特性导致扦插苗切面受到了破坏。
实施例3木霉菌种盆栽促生效应
盆栽试验材料为一年生带根扦插苗(根长2cm，须根较少)，基质为：草炭：红壤土：蛭石：珍珠岩＝30:30:20:20。盆栽试验设置1个空白对照和4个木霉梯度处理，分别是空白对照处理CK；T1：1×108cfu/ml；T2：5×107cfu/ml；T3：1×107cfu/ml；T4：5×106cfu/ml。盆栽试验方法具体操作为将扦插苗移栽到24孔穴盘中，培养一周左右后开始分五次浇木霉菌液。木霉菌液的制备为将发酵好的固体木霉菌种按照1:9的比例添加无菌水(即稀释十倍)，放入摇床30min，过滤后使用。
由图7和表1可知，浇菌完成培育45天以后，相比对照处理，施入木霉菌种对茶苗各项生物量指标均有显著的差异，其中随着施用木霉菌种量的减少根长和地上部鲜重呈现递减的趋势并达到显著性差异，株高、茎粗没有达到显著性差异，添加木霉的四个处理各项指标均显著高于空白对照。T1、T2和T3之间在根长、株高、茎粗、叶绿素、地上部和地下部鲜重均无明显差异，而比T4效果更佳，且明显优于CK组。为了节约成本，优选菌种的施用量为T3，即1×107cfu/ml。由于本发明制备的木霉菌种数量为1.9×109cfu/ml FW，所以施用量为稀释190倍。该结果对本发明木霉菌种产品在茶叶育苗生产中具有重要的指导意义。
表1不同处理对茶苗生物量的影响
注：CK:空白对照处理；T1:1×108cfu/ml；T2:5×107cfu/ml；T3:1×107cfu/ml；T4:5×106cfu/ml
Claims (10)
1.一种利用茶渣固体发酵的固体木霉菌剂，其特征在于，将贵州木霉NJAU4742接种到固体培养基中浅盘发酵3天以上获得；所述的固体培养基为重量百分比为60％～100％的茶渣和0％～40％的米糠，含水量为60％～70％。
2.根据权利要求1所述的固体木霉菌剂，其特征在于，所述的固体培养基为重量百分比为60％～80％的茶渣和20％～40％的米糠；优选为重量百分比为70％的茶渣和30％的米糠；优选的，所述的固体培养基的含水量为65％。
3.根据权利要求1所述的固体木霉菌剂，其特征在于，浅盘发酵的厚度为3～6cm；优选为3cm。
4.根据权利要求1所述的固体木霉菌剂，其特征在于，接种量为10％～20％；优选为15％。
5.根据权利要求1所述的固体木霉菌剂，其特征在于，发酵时间为3～5天；优选为4天；优选的发酵温度为26-28℃。
6.根据权利要求1所述的固体木霉菌剂，其特征在于，所述的固体培养基的制备为配方量的茶渣和米糠调节含水量60％～70％后灭菌即可。
7.权利要求1～6任一项所述的木霉菌剂制备的木霉菌液。
8.权利要求7所述的木霉菌液的制备方法，其特征在于，权利要求1～6任一项所述的木霉菌剂按照1：(8～10)的比例添加无菌水，摇床培养25～35分钟后获得。
9.权利要求1～6任一项所述的木霉菌剂或权利要求7所述的木霉菌液在茶叶育苗中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的固体木霉菌剂或木霉菌液的用量为木霉菌1×107～1×108cfu/ml基质；优选为1×107cfu/ml基质。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110946255.7A CN113528356B (zh) | 2021-08-17 | 2021-08-17 | 一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110946255.7A CN113528356B (zh) | 2021-08-17 | 2021-08-17 | 一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113528356A true CN113528356A (zh) | 2021-10-22 |
| CN113528356B CN113528356B (zh) | 2023-02-17 |
Family
ID=78122625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110946255.7A Active CN113528356B (zh) | 2021-08-17 | 2021-08-17 | 一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113528356B (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109628321A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-04-16 | 南京农业大学 | 一种利用甜叶菊渣固体发酵木霉菌种及其制备方法 |
| CN111394257A (zh) * | 2020-03-20 | 2020-07-10 | 南京农业大学 | 一种利用菌菇渣和生鲜牛粪定向发酵制备哈茨木霉菌种的方法 |
| CN111826327A (zh) * | 2020-08-06 | 2020-10-27 | 清远一生自然生物研究院有限公司 | 一株耐受高浓度茶渣的短小芽孢杆菌bp-09及其应用 |
| CN112586596A (zh) * | 2020-12-08 | 2021-04-02 | 广东省农业科学院动物科学研究所 | 一种提高茶渣营养价值的固态发酵方法 |
| CN112745151A (zh) * | 2021-01-11 | 2021-05-04 | 南京农业大学 | 一种含芽孢杆菌与木霉菌复合生物有机肥及其制备方法 |
-
2021
- 2021-08-17 CN CN202110946255.7A patent/CN113528356B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109628321A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-04-16 | 南京农业大学 | 一种利用甜叶菊渣固体发酵木霉菌种及其制备方法 |
| CN111394257A (zh) * | 2020-03-20 | 2020-07-10 | 南京农业大学 | 一种利用菌菇渣和生鲜牛粪定向发酵制备哈茨木霉菌种的方法 |
| CN111826327A (zh) * | 2020-08-06 | 2020-10-27 | 清远一生自然生物研究院有限公司 | 一株耐受高浓度茶渣的短小芽孢杆菌bp-09及其应用 |
| CN112586596A (zh) * | 2020-12-08 | 2021-04-02 | 广东省农业科学院动物科学研究所 | 一种提高茶渣营养价值的固态发酵方法 |
| CN112745151A (zh) * | 2021-01-11 | 2021-05-04 | 南京农业大学 | 一种含芽孢杆菌与木霉菌复合生物有机肥及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113528356B (zh) | 2023-02-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103992184A (zh) | 一种生物有机肥 | |
| CN103382139A (zh) | 一种双孢菇培养基质 | |
| CN110157624B (zh) | 一种基于自动化种曲机的淡紫拟青霉规模化生产方法 | |
| CN102432355A (zh) | 香蕉茎秆有机肥及其制备方法 | |
| CN102531712A (zh) | 利用醋糟生产的防病育苗基质及其生产方法 | |
| CN109320355B (zh) | 一种改良设施土壤盐渍化的生物活性调理剂及其应用 | |
| CN105481486B (zh) | 利用秸秆和滤泥生产木霉生物有机肥的方法及获得的产品 | |
| CN115181675A (zh) | 一种贵州木霉菌促生伴侣溜曲霉及其应用 | |
| CN108203352A (zh) | 一种餐厨垃圾有机肥的制作方法 | |
| CN112794738A (zh) | 一种富硒茶专用菌肥及其制备方法和应用 | |
| CN114702357B (zh) | 一种高活性复合微生物肥料及其制备方法 | |
| CN110591937B (zh) | 防控番茄青枯病的拮抗放线菌和生物有机肥及方法、用途 | |
| CN109355197B (zh) | 用于促进盐碱地苜蓿生长的促生菌及其微生物有机肥料 | |
| CN110218657B (zh) | 一株长枝木霉md30及其研制的生物有机肥 | |
| CN111642326A (zh) | 一种杏鲍菇液体菌种的母种培养方法 | |
| CN108624512B (zh) | 固体发酵基质、制备方法及培养菌根生物制剂的方法 | |
| CN116724855A (zh) | 一种含木霉菌与芽孢杆菌的草莓育苗、栽培基质配方及其应用 | |
| CN110791459A (zh) | 一株用于防控连作百合土传枯萎病的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| CN113151011B (zh) | 一种拟康氏木霉固态发酵的方法及其应用 | |
| CN113528356B (zh) | 一种利用茶渣发酵的固体木霉菌剂及其在茶叶育苗中的应用 | |
| CN110229757A (zh) | 一株有效促进作物生长的桔绿木霉js84及其研制的生物有机肥 | |
| CN112680373B (zh) | 一种胶质芽孢杆菌及使用其固态发酵制备生物有机肥的方法 | |
| CN104860731A (zh) | 一种提高樱桃番茄口感品质的生物有机肥的制备方法 | |
| CN112063552B (zh) | 防治芦笋枯萎病的微生物菌剂、制备方法及其应用 | |
| CN113881601A (zh) | 一种原位高效复合根瘤菌群的筛选方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231023 Address after: No.1 Weigang, Xuanwu District, Nanjing, Jiangsu, 211225 Patentee after: NANJING AGRICULTURAL University Patentee after: Nanjing Fuguo Biotechnology Co.,Ltd. Address before: No.1 Weigang, Xuanwu District, Nanjing, Jiangsu, 211225 Patentee before: NANJING AGRICULTURAL University |