CN113527396B - 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 - Google Patents
一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113527396B CN113527396B CN202010305754.3A CN202010305754A CN113527396B CN 113527396 B CN113527396 B CN 113527396B CN 202010305754 A CN202010305754 A CN 202010305754A CN 113527396 B CN113527396 B CN 113527396B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- formula
- compound shown
- compound
- reaction
- post
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title abstract description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title abstract description 9
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 title abstract description 6
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 title abstract description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims abstract description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 237
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 129
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 128
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical group ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 105
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 92
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 64
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 58
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 53
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 51
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical group C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical compound B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 33
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 32
- 238000010791 quenching Methods 0.000 claims description 30
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 28
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 claims description 28
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 28
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 26
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 23
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 22
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 22
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 21
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 21
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 19
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 claims description 17
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 16
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 15
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 13
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 claims description 11
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 10
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 8
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 claims description 8
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 8
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 claims description 8
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical group OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 150000004292 cyclic ethers Chemical group 0.000 claims description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- AFVDZBIIBXWASR-UHFFFAOYSA-N (e)-1,3,5-hexatriene Chemical compound C=CC=CC=C AFVDZBIIBXWASR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002825 nitriles Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims 2
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 claims 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 abstract description 7
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 abstract description 4
- DZMOLBFHXFZZBF-UHFFFAOYSA-N prop-2-enyl dihydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OCC=C DZMOLBFHXFZZBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 abstract description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 78
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 33
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 20
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 15
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 14
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 13
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 12
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 11
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 11
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 9
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 9
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 9
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 8
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 6
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 6
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- LJCZNYWLQZZIOS-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl chloride Chemical compound ClC(=O)OCC(Cl)(Cl)Cl LJCZNYWLQZZIOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 5
- QPUYECUOLPXSFR-UHFFFAOYSA-N 1-methylnaphthalene Chemical compound C1=CC=C2C(C)=CC=CC2=C1 QPUYECUOLPXSFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 amino- Chemical class 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 4
- PYGSKMBEVAICCR-UHFFFAOYSA-N hexa-1,5-diene Chemical group C=CCCC=C PYGSKMBEVAICCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 4
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 4
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 4
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- MUALRAIOVNYAIW-UHFFFAOYSA-N binap Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C(=C2C=CC=CC2=CC=1)C=1C2=CC=CC=C2C=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MUALRAIOVNYAIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 3
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 3
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 3
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 3
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 238000005858 glycosidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000006257 total synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N triethylsilane Chemical compound CC[SiH](CC)CC AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 1
- XXKHCFPQYSMGCI-LJQANCHMSA-N (3r)-3-hydroxyicosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)CC(O)=O XXKHCFPQYSMGCI-LJQANCHMSA-N 0.000 description 1
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DUWXVMIEMVFNGD-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethoxymethyl)naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(OC)OC)=CC=C21 DUWXVMIEMVFNGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJKVFARRVXDXAD-UHFFFAOYSA-N 2-naphthaldehyde Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C=O)=CC=C21 PJKVFARRVXDXAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910018072 Al 2 O 3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008233 Toll-Like Receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010060804 Toll-Like Receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 125000000746 allylic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000011914 asymmetric synthesis Methods 0.000 description 1
- GWAOFSOXGNJTAQ-UHFFFAOYSA-N benzyl phosphono hydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1=CC=CC=C1 GWAOFSOXGNJTAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 229940032077 cervical cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000012839 conversion disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- NQGIJDNPUZEBRU-UHFFFAOYSA-N dodecanoyl chloride Chemical compound CCCCCCCCCCCC(Cl)=O NQGIJDNPUZEBRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003602 elastase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 1
- SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N hepatitis b vaccine Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1N=CN=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 SPSXSWRZQFPVTJ-ZQQKUFEYSA-N 0.000 description 1
- 229940124736 hepatitis-B vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229940124590 live attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229940023012 live-attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940124735 malaria vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- JDAKPBBWYIWXJF-UHFFFAOYSA-N n,n-diethyl-1,5-dihydro-2,4,3-benzodioxaphosphepin-3-amine Chemical compound C1OP(N(CC)CC)OCC2=CC=CC=C21 JDAKPBBWYIWXJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N ruthenium(2+) Chemical compound [Ru+2] YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- XHFLOLLMZOTPSM-UHFFFAOYSA-M sodium;hydrogen carbonate;hydrate Chemical class [OH-].[Na+].OC(O)=O XHFLOLLMZOTPSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- USFPINLPPFWTJW-UHFFFAOYSA-N tetraphenylphosphonium Chemical compound C1=CC=CC=C1[P+](C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 USFPINLPPFWTJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H23/00—Compounds containing boron, silicon, or a metal, e.g. chelates, vitamin B12
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。本发明提供的中间体以烯丙基磷酸配体为MPLA中磷酸基团来源，Nap为保护基，在后续操作中均可以方便的除去；合成的该中间体路线短，总收率明显增加。为MPLA的合成和放大提供了基础。
Description
技术领域
本发明涉及一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。
背景技术
MPLA是来自于革兰氏阴性细菌细胞壁中的内毒素(LPS)的最内层脂质体(lipidA)部分，单磷酰脂质A(Monophosphoryl Lipid A，以下简称MPL)。Lipid A是一个两亲结构，也是革兰氏阴性细菌具有毒性和免疫原性的关键结构，能引起机体的免疫反应。因此可将其作为佐剂添加在疫苗中以增加疫苗的免疫原性；一般来说，减毒活疫苗虽然免疫原性较强，但毒性也较大，可能会有致病风险；而无毒性的灭活疫苗，免疫原性较弱。佐剂的添加，可增强灭活疫苗的免疫原性，且不会对体质较弱者带来致病风险。同时减少抗原的使用量，增加疫苗供应量。MPL为铝盐之外的首个FDA通过的人用新型免疫佐剂物质。MPL作用于toll-like受体4(TLR4)，具有强免疫原性、机制明确、毒性小的优点。而现有的铝盐佐剂机制不明确，在注射部位发生红肿，疼痛的概率相比MPL大，且铝盐佐剂无法产生特异性细胞免疫。已有多个采用MPL佐剂系统的新疫苗品种在国内外获得上市，如乙肝疫苗Fendrix，宫颈癌疫苗Cerivix，带状疱疹疫苗Shingrix以及疟疾疫苗Mosquirix。并有二十余个处于临床阶段。
由于来源于不同细菌或同一细菌不同血清型的MPL其结构不同，基本差别在于脂肪链的数量/连接位置和脂肪链碳链长度，例如本专利合成的结构如下图所示；
n1和n3独立地为10、12或14，n2和n4独立地为8、10或12。
现有MPL来源依赖生物发酵提取，成本昂贵，且提取过程中，脂多糖糖类异质性问题难以解决，极易引发纯度问题，带来使用安全隐患。而基于特殊理化性质及复杂结构，化学方法合成MPL极为困难，难以替代生物发酵。已有的MPL及其Lipid A类似物的全合成报道也仅限于毫克级别，通常提供磷酸基团的配体一般为焦磷酸苄酯(di-O-benzyloxy(N,N-diisopropylamino)phosphine)或邻亚二甲苯基N,N-二乙基亚磷酰胺(N,N-diethyl-1,5-dihydro-3H-2,4,3-benzodioxaphosphepin-3-amine)作为磷酸基的来源，使用Bn为永久性保护基。以上这些保护基最后都必须使用氢化条件才能脱除。例如现有文献制备类似的lipid A及其衍生物时，使用苄基，需要用Pd/C在大气压或氢气加压条件下反应10-20h，杂质多，收率在45％-68％之间。且纯化方式复杂，有提到需要使用再生纤维素过滤并超声除去催化剂；再使用DEAE-纤维素离子交换树脂分离，需要使用多个不同组分的混合溶剂作为流动相冲出产物。再反复分液浓缩得到终产物。(见ref 1：Alla Zamyatina,HaraldSekljic,Helmut Brade.Synthesis and purity assessment of tetra-and pentaacyllipid A of Chlamydiacontaining(R)-3-hydroxyicosanoic acid.Tetrahedron 60(2004)12113–12137。Ref 2：Kaustabh K.Maiti,Michael DeCastro,Abu-Baker M.Abdel-Aal El-Sayed.Chemical Synthesis and Proinflammatory Responses ofMonophosphoryl Lipid A Adjuvant Candidates.Eur.J.Org.Chem.2010,80–91)。
目前MPL类似物的全合成报道的合成路线均较长；除了使用的苄基保护基在后期脱保护时难以完全除去之外；为避免反应中产生副反应，通常需要一些临时性的保护基，导致涉及多个保护基，需要反复保护脱保护；并且在已报道的文献中四个脂肪链的链接连接次序各有不同，或在糖苷化后再连接四个脂肪链(0+4)，或3+1的方法，脂肪链连接选择性不强，或位阻较大，糖苷化时选择性较低等问题。([1]J.AM.CHEM.SOC.2007,129,5200-5216；[2]WO 2013072768；[3]The chemical record,Vol6,333-343(2006))
由此可见，在目前的文献报道中，氢化的结果并不理想，收率低，杂质多，反应时间长(一般大于20h)，纯化条件繁琐复杂，难以规模化生产满足商业需求。
因此，目前急需一种路线短，总收率较高的新的制备方法，从而能够大量合成MPLA。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是为了克服现有的疫苗佐剂MPLA制备方法缺乏的缺陷，而提供了一种疫苗佐剂MPLA的中间体、合成及应用。本发明合成的该中间体路线短，总收率明显增加。采用该MPLA的关键中间体，在脱保护后即可得到MPLA，为MPLA的合成和放大提供了基础。
本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题的。
本发明提供了一种如式4所示的化合物的制备方法，其包括以下步骤：
步骤(1)，在有机溶剂中，在四氮唑存在下，将如式3所示的化合物与烯丙基配体进行磷酸化反应，得到混合物1；所述的烯丙基配体为己二烯-N,N-二异丙基亚磷酰胺(CAS号126429-21-8)；
步骤(2)，将所述的混合物1与氧化剂进行氧化反应，得到所述的如式3所示的化合物即可；其中，n1为10、12或14，n2为8、10或12；
在某一方案中，n1为10、12或14(例如10或12)，n2为10。
所述的磷酸化反应和所述的氧化反应的操作和反应条件可为本领域该类磷酸化反应和氧化反应中常规的操作和反应条件；本发明中优选如下：
步骤(1)中，所述的有机溶剂可为腈类溶剂(例如乙腈)。所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式3所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为5g/L-200g/L(例如40g/L-60g/L，又例如50g/L)。
步骤(1)中，所述的四氮唑与所述的如式3所示的化合物的摩尔比可为1:1-10:1(例如3:1-5:1)。
步骤(1)中，所述的烯丙基配体与所述的如式3所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如1:1-3:1，又例如1.5:1-2:1)。
步骤(1)中，所述的磷酸化反应的温度可为-10℃至50℃(例如10℃至30℃)。
步骤(1)中，所述的磷酸化反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，一般以所述的如式3所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的磷酸化反应的时间优选0.1-4h(例如0.5h-2h)。
步骤(2)中，所述的氧化剂可为间氯过氧苯甲酸(mCPBA)。较佳地，所述的氧化剂可为卤代烷烃类溶剂的溶液形式(例如所述的氧化剂与所述的卤代烷烃类溶剂的质量体积比可为0.01g/L-0.05g/L)。所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷。
步骤(2)中，所述的氧化剂与所述的如式3所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如2:1-3:1，又例如2.5:1-3:1)。
步骤(2)中，所述的氧化反应的温度可为-80℃至10℃(例如-40℃至-10℃)。
步骤(2)中，所述的氧化反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，所述的氧化反应的时间优选0.1-4h(例如0.5h-2h)。
步骤(2)中，所述的氧化反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的氧化反应结束后，淬灭，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可。所述的淬灭可采用饱和硫代硫酸钠水溶液。所述的洗涤可采用饱和碳酸氢钠溶液。所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的填料可为硅胶。所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯(石油醚:乙酸乙酯的体积比＝8:1)。
所述的如式4所示的化合物的制备方法中，还可包括以下步骤：在有机溶剂中，在硼烷(BH3)、路易斯酸和H2O存在下，将如式2所示的化合物进行如下所示的选择性还原开环反应，得到所述的如式3所示的化合物即可；n1和n2的定义均如上所述；
所述的选择性还原开环反应的操作和反应条件可为本领域该类选择性还原开环反应中常规的操作和反应条件；本发明中优选如下：
所述的选择性还原开环反应中，所述的有机溶剂可为环醚类溶剂，所述的环醚类溶剂可为四氢呋喃(THF)。所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式2所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为10g/L-200g/L(例如50g/L-150g/L，又例如100g/L)。
所述的硼烷可为络合物的形式，例如BH3·Me3N和/或BH3·THF。
所述的硼烷与所述的如式2所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如3.5:1-4.5:1，又例如3.9:1)。
所述的路易斯酸可为AlCl3。
所述的硼烷与所述的路易斯酸的摩尔比可为1:1-1:3(例如1:1-1:2，又例如1:1.5)。
所述的H2O与所述的如式2所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如1.5:1-2.5:1，又例如1.9:1)。
所述的选择性还原开环反应的温度可为-10℃-50℃(例如10℃-30℃)。
所述的选择性还原开环反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，一般以所述的如式2所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的选择性还原开环反应的时间优选0.1-4h(例如0.5h-2h)。
所述的选择性还原开环反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的选择性还原开环反应结束后，淬灭，萃取，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可。所述的淬灭可采用加水和盐酸溶液(例如1M HCl)。所述的萃取的溶剂可为卤代烷烃类溶剂(例如二氯甲烷)。所述的洗涤可采用饱和碳酸氢钠溶液。所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的填料可为硅胶。所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯(石油醚:乙酸乙酯的体积比＝10:1)。
所述的如式4所示的化合物的制备方法中，还可包括以下步骤：在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式19B所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式2所示的化合物即可；n1和n2的定义均如上所述；
所述的酯化反应的操作和反应条件可为本领域该类酯化反应中常规的操作和反应条件；本发明中优选如下：
所述的酯化反应中，所述的有机溶剂可为卤代烷烃类溶剂，所述的卤代烷烃类溶剂可为二氯甲烷和/或三氯甲烷。所述的有机溶剂的用量可不做具体限定，以不影响反应即可；例如，所述的如式1所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比可为5g/L-200g/L(例如60g/L-150g/L，又例如100g/L)。
所述的催化剂可为本领域该类反应中常规的催化剂，例如有机碱，优选4-二甲氨基吡啶(DMAP)、三乙胺和吡啶中的一种或多种，较佳地为DMAP。
所述的缩合剂可为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、二环己基碳二亚胺(DCC)和N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)中的一种或多种，例如1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐。
所述的缩合剂与所述的如式1所示的化合物的摩尔比可为1:1-5:1(例如1:1-3:1，又例如1.2:1-2:1)。
所述的催化剂与所述的缩合剂的摩尔比可为0.01:1-1:1(例如0.01:1-0.5:1，又例如0.05:1)。
所述的如式19B所示的化合物与所述的如式1所示的化合物的摩尔比可为1:1-3:1(例如1:1-2.5:1，又例如1.2:1)。
所述的酯化反应的温度可为-10℃-50℃(例如10℃-30℃)。
所述的酯化反应的进程可通过本领域常规的手段进行监控(例如TLC、HPLC或LCMS)，一般以所述的如式1所示的化合物消失或含量不再减少时为反应终点；所述的酯化反应的时间优选1-24h(例如2h-12h)。
所述的酯化反应的后处理可为本领域常规的后处理，例如包括以下步骤：所述的酯化反应结束后，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可。所述的洗涤可依次采用卤代烷烃类溶剂(例如二氯甲烷)、饱和碳酸氢钠溶液。所述的分离纯化优选柱层析分离，所述的柱层析分离的填料可为硅胶，所述的柱层析分离的洗脱剂可为石油醚与乙酸乙酯(石油醚:乙酸乙酯的体积比＝10:1)。
本发明还提供了一种如式4、式3、式2所示的化合物；
某一方案中，所述的如式4所示的化合物为如下任一化合物：
某一方案中，所述的如式3所示的化合物为如下任一化合物：
某一方案中，所述的如式2所示的化合物为如下任一化合物：
本发明提供了一种如上所述的如式3所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在硼烷(BH3)、路易斯酸和H2O存在下，将如式2所示的化合物进行如下所示的选择性还原开环反应，得到所述的如式3所示的化合物即可；n1和n2的定义均如上所述；
所述的如式3所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如上所述。
本发明提供了一种如上所述的如式2所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式19B所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式2所示的化合物即可；n1和n2的定义均如上所述；
所述的如式2所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如上所述。
本发明中，如无特殊说明，室温指10-30℃；“h”是指小时；“过夜反应”是指反应8-16小时。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：本发明以烯丙基磷酸配体为MPLA中磷酸基团来源，Nap为保护基，在后续操作中均可以方便的除去；合成的该中间体路线短，总收率明显增加。为MPLA的合成和放大提供了基础。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
化合物18-a系列实施例
原料化合物1的制备
向加入2-脱氧-1-氧-(1,1-二甲基乙基)二甲基硅烷基-2-[(2,2,2-三氯乙氧基)羰基]氨基-3,4,6-三乙酰基-β-D-葡萄糖(10g，16.8mmol)的反应瓶中缓慢加入胍啶盐酸盐缓冲溶液(100mL,pH＝8)，室温搅拌3.5h,TLC检测原料消耗完后，反应液用阳离子树脂中和，过滤浓缩，用二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液萃取产物,收集有机层浓缩得到2-脱氧-1-氧-(1,1-二甲基乙基)二甲基硅烷基-2-[(2,2,2-三氯乙氧基)羰基]氨基-β-D-葡萄糖(1-1,8.23g)。
在反应瓶中将1-1与2-(二甲氧基甲基)-萘(5.1g，25mmol，1.5eq)溶解在50mL乙腈中，加入樟脑磺酸(0.39g，1.69mmol，0.1eq)，室温下搅拌4h反应，加入三乙胺至中性，反应液用二氯甲烷与饱和碳酸氢钠溶液萃取，分液。有机相干燥旋干后得到黄色固体物。粗品过硅胶砂芯漏斗(PE:EA＝5:1)得到产物1(浅黄色固体，6.97g)，两步收率为68.3％。
化合物1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96–7.50(m,7H),5.72(s,1H),5.17(d,J＝6.3Hz,1H),4.88(d,J＝7.7Hz,1H),4.73(q,J＝12.0Hz,2H),4.36(dd,J＝10.5,5.0Hz,1H),4.13–4.01(m,1H),3.86(t,J＝10.3Hz,1H),3.70–3.58(m,1H),3.52(td,J＝9.7,5.0Hz,1H),3.47–3.35(m,1H),2.96(s,1H),0.94(d,J＝8.2Hz,9H),0.20–0.08(m,6H).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ154.54,134.52,133.78,132.87,128.41,128.29,127.75,126.69,126.41,126.07,123.93,101.97,96.33,95.30,81.52,74.85,70.71,68.68,66.20,60.73,26.94,25.59,17.90,-4.14,-5.26.
原料化合物23的制备
参考如下参考文献中方法进行制备化合物23，并使用相同方法测定ee值：BelmaHasdemir,Hülya Onar,/>Asymmetric synthesis of long chainβ-hydroxy fatty acid methyl esters as new elastase inhibitors.Tetrahedron:Asymmetry.(23)2012,1100-1105。文献标题不规范，已修改
步骤(1)化合物22的制备
将米氏酸(64.8g，0.45mol)和吡啶(48mL)溶于CH2Cl2(100mL)中，在0℃下加入月桂酰氯(21，65.6g，0.3mol)。室温搅拌2.5小时。原料完全消耗后，用1M HCl(100mL)和水(100mL)洗涤。有机层干燥过滤并浓缩。将其溶于甲醇(250mL)回流过夜。中间体消耗完后浓缩并通过Al2O3柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝2∶1)，得到淡黄色固体22(59.3g，77％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.70(3H,d,J＝1.5),3.42(2H,s),2.50(2H,t,J＝7.4),1.28(18H,s),0.90(3H,t,J＝6.6).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ202.51,167.58,137.67,128.96,128.15,125.25,52.02,48.84,42.90,31.92,29.62,29.47,29.38,29.35,29.01,23.43,22.68,21.31,14.04.
步骤(2)化合物23的制备
钌催化剂的制备：将180mg(R)-Ru(OAc)2(BINAP)(二乙酸根[(R)-(+)-2,2'-二(二苯基膦基)-1,1'-联萘基]钌(II)，cas号：325146-81-4)溶于CH2Cl2(5mL)，加入1.42N HCl(0.35mL)，室温下搅拌1小时后旋干备用。
将化合物22(15g)与制备好的钌催化剂溶于甲醇(50mL)。H2(1.5MPa)条件下65℃搅拌6h。原料完全完后，将反应液浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)，得到化合物23(白色固体，15g，98％，ee值＝98.7％))。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.01(1H,dq,J＝11.8,4.0),3.71(3H,s),2.90(1H,d,J＝4.0),2.46(2H,ddd,J＝25.4,16.4,6.1),1.26(18H,s),0.88(3H,t,J＝6.8).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.41,67.99,51.63,41.18,36.57,31.89,29.60,29.56,29.51,29.32,25.47,22.65,14.05.
对化合物23的制备进行反应条件筛选：
底物与催化剂比例(S/C)与ee值的关系：以S/C＝300催化剂量50℃大约4-6h反应完全，收率达到95％以上。为减少催化剂的使用，尝试了每20g底物，180mg催化剂的反应(S/C>300)，收率仅为71％。
将化合物22(20g)与制备好的180mg钌催化剂溶于甲醇(50mL)。H2(1.5MPa)条件下65℃搅拌6h。原料完全完后，将反应液浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)，得到化合物3(白色固体，10.7g，71％，ee值＝92.3％)。
对以上不同条件下的产物ee值进行分析，催化剂较少，收率下降的同时ee值也仅为92％。而S/C＝300的几批产物，ee值均在98％以上。
实施例1化合物24的制备
将化合物23(10g，39mmol,1eq)与2-萘甲醛(18.14g，116mmol,3eq)溶于THF(100mL)，冰浴下加入TMSOTf(6.88g，31mmol,0.8eq)，(TMS)2O(37.68g，232mmol,6eq)和Et3SiH(15.7g，135mmol,3.5eq)。0℃下反应1.5小时，将反应液用CH2Cl2(150mL)稀释，并用饱和NaHCO3洗涤。将有机层旋干并重结晶(得到甲基萘，室温下是白色固体)(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)，过滤以除去杂质(甲基萘)。收集滤液(含化合物24)并旋干，得到淡黄色油状液体的粗产物24，无需纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)0.89(3H,t，J6.7),1.27–1.64(18H,m),2.35(2H,dd,J 8.4)2.49(1H,dd,J15.0,5.3),2.62(1H,dd,J15.0,7.3),3.68(3H,s),3.88(1H,m),4.54(2H,m),7.25–7.35(7H,m).
实施例2化合物20的制备
将实施例1中制备得到的化合物24溶于THF-H2O溶液(5：1，100mL)，加入氢氧化锂水溶液(9.41g，224mmol，94mL)，回流12h。原料消失后，冷却至室温，加入1.5M HCl水溶液淬灭至pH值为7。将混合物用CH2Cl2(150mL)稀释，用饱和NaHCO3洗涤。有机相干燥并旋干。硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)得到化合物20(11.6g，两步收率77.9％，无色糖浆)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.00(1H,s,OH),7.85(4H,dd,J＝14.5,10.8),7.53(3H,d,J＝4.2),4.85–4.71(2H,m,NapCH2O),4.08–3.94(1H,m,H-3),2.76(1H,dd,J＝15.2,6.9,H-2),2.64(1H,dd,J＝15.2,4.3,H-2),1.84–1.58(2H,m,H-4),1.57–1.31(18H,m),1.00(3H,t,J＝6.0).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ177.86,135.86,133.38,133.10,128.20,128.00,127.76,126.57,126.10,125.99,125.89,75.94,71.71,39.81,34.37,32.05,29.77,29.71,29.48,25.27,22.82,14.26.
实施例3化合物2的制备
将化合物19-A(5g,11.7mmol)与EDC·HCl(2.25g,11.7mmol，1.2eq)溶于CH2Cl2(50mL)，室温搅拌15min后加入化合物1(5.93g,9.8mmol)和DMAP(0.06g,0.5mmol，0.05eq)，室温下搅拌10h反应完，反应液依次用CH2Cl2(100mL)和饱和NaHCO3(60mL)洗涤。分液干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物2-a(8.6g,86.7％，无色糖浆)。TOF-MS:m/z:1036.46[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.91(1H,s),7.82(3H,dt,J 9.3,4.9),7.54(1H,d,J 8.5),7.50–7.44(2H,m),5.65(1H,s,NapCH),5.40–5.29(2H,m,H-3,NH),5.17(1H,dd,J 12.2,6.2,lipid-H-3),4.88(1H,d,J 7.8,H-1),4.69(2H,dd,J 48.4,12.0,Troc),4.34(1H,dd,J10.5,4.9,H-6),3.84(1H,t,J 10.3,H-6),3.75(1H,t,J 9.4,H-4),3.62(1H,dd,J 16.8,7.7,H-2),3.54(1H,td,J 9.7,5.0,H-5),2.57(2H,ddd,J 20.5,15.2,6.3),2.12(2H,t,J7.4),1.56–1.41(4H,m),1.32–1.13(34H,m),0.92–0.85(15H,m),0.11(6H,d,J 8.6).
δC(101MHz,CDCl3)173.41,170.19,154.12,134.29,133.71,132.85,128.38,128.11,127.67,126.47,126.16,125.81,123.73,101.76,96.82(C-1),95.31,78.95(C-4),74.66,71.14(C-3),69.98,68.72(C-6),66.47(C-5),59.11(C-2),39.26,34.31,33.83,31.93,29.63,29.50,29.35,29.29,29.06,25.53,25.07,24.93,22.69,17.88,14.13,-4.21,-5.29.
实施例4化合物3-a的制备
将化合物2-a(2g,1.97mmol)溶于THF(20mL)，依次在冰浴条件下加入BH3·Me3N(0.57g,7.69mmol，3.9eq)，AlCl3(1.52g,11.4mmol)，H2O(69mg,3.83mmol，1.9eq)反应液在室温下搅拌1.5h。加水(20mL)、1M HCl溶液(20mL)淬灭，反应液用CH2Cl2(30mL)分液，干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物3-a(1.72g,86％，无色油状液体)。TOF-MS:m/z:1038.52[M+Na]+.
δH(400MHz,CDCl3)7.85–7.75(4H,m),7.46(3H,dd,J 7.7,4.0),5.37(1H,d,J 9.2,NH),5.15(1H,s,lipid-H-3),5.03(1H,t,J 9.7,H-3),4.81–4.71(4H,m,H-1,NapCH2,Troc),4.63(1H,d,J 11.9,Troc),3.81(2H,qd,J 10.5,3.8,H-6),3.69(1H,t,J 9.8,H-4),3.65–3.54(2H,m,H-2,H-5),3.47(1H,s,OH),2.62–2.48(2H,m,lipid-H-2),2.28(2H,t,J7.3,lipid’-H-2),1.57(4H,s,lipid’-H-3,lipid-H-4),1.25(34H,s),0.88(15H,s),0.12(6H,d,J 17.5).
δC(101MHz,CDCl3)174.35,171.77,154.27,135.54,133.29,133.02,128.20,127.89,127.71,126.29,126.11,125.88,125.56,96.50(C-1),75.91(C-3),74.72(C-5),74.61,73.73,70.96,70.19(C-4),70.01(C-6),60.43,57.85(C-2),40.10,34.58,34.50,31.94,29.65,29.56,29.52,29.37,29.30,29.14,25.61,25.16,24.99,22.71,21.06,17.93,14.21,14.14,-4.06,-5.28.
实施例5化合物4的制备
(1)
将化合物3-a(0.5g,0.489mmol)与四氮唑(102mg,1.45mmol,3eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(己二烯-N,N-二异丙基亚磷酰胺，0.24g,0.978mmol,2eq)，室温下反应40min后原料消耗完。
-40℃下将mCPBA(211mg,1.22mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入上述反应体系，缓慢升至-10℃，40min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-a(0.53g,92％)。TOF-MS:m/z:1198.67[M+Na]+.
δH(400MHz,CDCl3)7.85–7.77(4H,m),7.50–7.44(3H,m),5.90–5.73(2H,m,CH2＝CH-CH2O-),5.41–5.16(6H,m,NH,lipid-H-3,CH2＝CH-CH2O-),4.97(1H,d,J 7.9,H-1),4.79-4.63(4H,td,J12.3,12.4,12.0,Troc,Nap-CH2),4.49–4.38(5H,m,H-4,CH2＝CH-CH2O-),3.85(1H,d,J 9.6,H-6),3.75(1H,d,J 5.4,H-6),3.72–3.65(1H,m,H-5),3.50–3.40(1H,m,H-2),2.64–2.60(2H,m),2.28(2H,t,J7.4),1.58(4H,br,J 7.3),1.25(34H,s),0.91–0.86(15H,m),0.13(6H,d,J 19.2).
δC(101MHz,CDCl3)173.57,170.37,153.95,135.65,133.27,132.98,132.27,132.21,132.14,128.09,127.87,127.68,126.23,126.05,125.81,125.65,118.56,118.40,95.63(C-1),95.32,74.59,74.12(C-5),74.06(C-4),73.61,72.42(C-3),70.06,68.70(C-6),68.62,68.56,68.46,68.41,58.67(C-2),39.59,34.51,34.24,31.92,29.66,29.64,29.57,29.52,29.35,29.20,25.61,25.17,25.07,22.69,22.57,17.93,14.12,-4.15,-5.25.
(2)
将化合物3-a(0.5g,0.489mmol)与四氮唑(102mg,1.45mmol,3eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(0.18g,0.73mmol,1.5eq)，室温下反应2h后原料未消耗完，补加0.5eq烯丙基配体，30min后原料消耗完。-40℃下将mCPBA(211mg,1.22mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入反应体系，缓慢升至-10℃，30min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-a(0.49g,84.7％)。
(3)
将化合物3-a(0.5g,0.489mmol)与四氮唑(171mg,2.45mmol,5eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(0.24g,0.978mmol,2eq)，室温下反应40min后原料消耗完，-40℃下将mCPBA(211mg,1.22mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入反应体系，缓慢升至-10℃，40min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-a(0.474g,82.3％)。
实施例6化合物5-a的制备
将化合物4-a(0.8g,0.68mmol)溶于THF(24mL)，–40℃加入稀释于15mL吡啶的HF/pyridine(2.4mL,65–70％)。缓慢升至室温反应12h，反应液用NaHCO3(40mL)淬灭，加入CH2Cl2(50mL)分液，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)得化合物5-a(0.657g,91％，白色固体)。TOF-MS:m/z:1084.48[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.85–7.77(4H,m),7.51–7.44(3H,m),5.91–5.65(2H,m,CH2＝CH-CH2O-),5.61(1H,d,J 9.4,NH),5.42–5.26(3H,m,H-1,CH2＝CH-CH2O-),5.23–5.09(4H,m,H-3,CH2＝CH-CH2O-,lipid-H-3),4.80-4.69(4H,m,Troc,Nap-CH2),4.45–4.40(3H,m,H-4,CH2＝CH-CH2O-),4.36–4.27(2H,m,CH2＝CH-CH2O-),4.25–4.19(1H,m,H-5),4.01–3.94(1H,m,H-2),3.84–3.75(2H,m,H-6),2.60(2H,ddd,J 21.4,16.2,6.3),2.24(2H,t,J 7.6),1.56(4H,d,J 7.0),1.25(34H,s),0.88(6H,t,J 6.8).
δC(101MHz,CDCl3)173.38,170.76,154.31,135.19,133.23,133.04,132.28,132.22,132.09,132.02,128.23,127.92,127.70,126.67,126.15,125.95,125.81,118.66,118.38,95.37,91.50(C-1),74.65,73.63(C-4),70.82(C-3),69.90,69.57,69.52(C-5),68.67,68.61,68.47,68.40,68.35(C-6),54.27(C-2),39.10,34.46,34.15,31.92,29.64,29.57,29.53,29.36,29.32,29.18,25.18,25.01,22.69,14.12.
实施例7化合物6-a的制备
将化合物5-a(1.3g,1.22mmol)溶于超干(dry)CH2Cl2(20mL)，N2保护下加入2,2,2-三氟-N-苯乙酰亚胺氯(1.52g,7.32mmol，6eq)与DBU(371mg,2.44mmol，2eq)，室温反应30mins。将反应液浓缩柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15:1with 0.1％Et3N)得到化合物6-a(1.11g,74％，无色糖浆)。TOF-MS:m/z:1255.48[M+Na]+。
实施例8化合物7的制备
(1)
将化合物1(3.39g,5.58mmol)与化合物20(4.29g,11.16mmol,2eq)加入反应瓶，加入40mL二氯甲烷后，冰浴下加入EDC·HCl(2.14g,11.16mmol,2eq)与DMAP(135mg,1.1mmol,0.2eq)，室温搅拌3h后化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后重结晶纯化(二氯甲烷：甲醇＝1：12)得到化合物7(5.08g,93.5％)。TOF-MS:m/z:994.41[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.81(1H,s),7.76–7.61(7H,m),7.48–7.35(5H,m),7.30(1H,d,J8.4),5.50(1H,s,NapCH),5.39(1H,t,J 9.9,H-3),5.24(1H,d,J 9.1,NH),4.84(1H,d,J7.8,H-1),4.67–4.62(3H,m,NapCH2,-OCH2CCl3),4.52(1H,d,J 11.8,-OCH2CCl3),4.31(1H,dd,J 10.4,4.7,H-6),3.85–3.81(1H,m,Lipid-H-3),3.78(1H,d,J 10.3,H-6),3.71(1H,t,J 9.5,H-4),3.67–3.60(1H,m,H-2),3.53(1H,td,J9.5,5.1,H-5),2.74(1H,dd,J 14.9,6.0,Lipid-H-2),2.55(1H,dd,J 14.8,5.6,Lipid-H-2),1.54(2H,m,Lipid-H-4),1.27(18H,s),0.91(12H,s),0.13(6H,d,J 12.0).
δC(101MHz,CDCl3)171.82,154.36,136.11,134.41,133.85,133.41,133.13,132.99,128.53,128.28,128.23,128.11,127.88,127.85,126.60,126.51,126.31,126.20,126.04,125.96,125.91,123.85,101.88,97.14(C-1),79.18(C-4),75.73(C-6),74.88,71.39(C-3),71.28,68.91(C-6),66.76(C-5),60.64,59.29(C-2),39.77,34.71,32.15,29.87,29.86,29.80,29.77,29.58,25.74,25.45,22.92,21.28,18.08,14.43,14.37,-3.98,-5.08.
(2)
将EDC·HCl(1.087g,5.67mmol,1.2eq)，化合物20(2.18g,5.67mmol,1.2eq)加入反应瓶，加入25mL二氯甲烷，室温搅拌15min后加入化合物1(2.87g,4.72mmol)，DMAP(29mg,0.237mmol,0.05eq)，反应12h化合物1未消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(2.72g,59.23％)。
(3)
将EDC·HCl(1.81g,9.44mmol,2eq)，化合物20(2.54g,6.6mmol,1.4eq)加入反应瓶，加入25mL二氯甲烷，室温搅拌15min后加入化合物1(2.87g,4.72mmol)，DMAP(29mg,0.237mmol,0.05eq)，反应12h化合物1未消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(3.27g,71.2％)。
(4)
将EDC·HCl(2.65g,13.8mmol,2eq)，化合物20(5.33g,13.8mmol,2eq)加入反应瓶，加入50mL二氯甲烷，室温搅拌15min后加入化合物1(4.12g,6.78mmol)，DMAP(170mg,1.39mmol,0.2eq)，反应12h化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(5.22g,79.1％)。
(5)
将化合物1(3.39g,5.58mmol)与化合物20(4.29g,11.16mmol,2eq)加入反应瓶，加入40mL二氯甲烷后，冰浴下加入EDC·HCl(2.14g,11.16mmol,2eq)与DMAP(135mg,1.1mmol,0.2eq)，室温搅拌3h后化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝7：1)得到化合物7(4.71g,86.7％)。
(6)
将化合物1(3.39g,5.58mmol)与化合物20(4.29g,11.16mmol,2eq)加入反应瓶，加入40mL二氯甲烷后，冰浴下加入EDC·HCl(2.14g,11.16mmol,2eq)与DMAP(135mg,1.1mmol,0.2eq)，室温搅拌3h后化合物1消耗完。加入饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤分液，干燥过滤旋干后重结晶纯化(二氯甲烷：甲醇＝1：8)得到化合物7(3.93g,72.4％)。
实施例9化合物8的制备
化合物7(6g,6.16mmol)溶于二氯甲烷(60mL)，加入醋酸(12mL,2V)和锌粉(6g,1V)(V是指质量当量)，室温剧烈搅拌2h反应完，依次用饱和碳酸氢钠(60mL)，饱和食盐水(60mL)洗涤。分液干燥浓缩后得到化合物8(5.3g)。TOF-MS:m/z:821.134[M+Na]+。直接用于下一步反应。
实施例10化合物9的制备
(1)
将实施例9中制备得到的化合物8溶于二氯甲烷(100mL)，冰浴下加入FmocCl(3.2g,12.36mmol,2eq)，DIPEA(1.6g,12.36mmol,2eq)，室温下搅拌2h反应完，加入饱和食盐水(100mL)洗涤，分液干燥旋干后重结晶(二氯甲烷：甲醇＝1：10)得到化合物9(5.6g,89.1％)。TOF-MS:m/z:1042.7[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.83(1H,s),7.78–7.65(7H,m),7.64–7.44(5H,m),7.40(6H,ddd,J 15.3,9.7,5.3),7.32–7.24(3H,m),5.53(1H,s,NapCH),5.44(1H,t,J 9.4,H-3),4.97(1H,d,J 8.7,NH),4.91(1H,d,J 7.2,H-1),4.63(1H,d,J 11.8,Fmoc-CH2),4.51(1H,d,J 11.8,,Fmoc-CH2),4.32(1H,br,H-6),4.28(2H,d,J 6.5,NapCH2),4.17(1H,d,J 6.4,,Fmoc-CH),3.82(2H,s,H-6,Lipid-H-3),3.78–3.71(1H,m,H-4),3.67(1H,d,J 8.9,H-2),3.58(1H,br,H-5),2.70(1H,dd,J 14.8,6.3),2.50(1H,dd,J 14.8,5.5),1.55–1.37(2H,m),1.29–0.96(18H,m),0.91–0.81(12H,m),0.09(6H,d,J 13.5).
δC(101MHz,CDCl3)155.78,143.79,141.23,135.92,134.24,133.63,133.17,132.87,132.78,128.31,128.05,127.92,127.86,127.63,127.04,126.34,126.26,126.06,125.93,125.81,125.69,125.15,123.64,119.96,101.65,97.14(H-1),79.00(H-4),75.62(H-6),71.25(H-3),71.19,68.76(H-6),67.19,66.60(H-5),58.98(H-2),47.04,39.74,34.53,31.92,29.61,29.53,29.34,25.49,25.16,22.69,17.86,14.14,-4.21,-5.36.
(2)
化合物7(6g,6.16mmol)溶于二氯甲烷(60mL)，加入醋酸(12mL,2V)和锌粉(6g,1V)，室温剧烈搅拌2h反应完，依次用饱和碳酸氢钠(60mL)，饱和食盐水(60mL)。分液干燥浓缩后得到化合物8(5.3g)。将其溶于二氯甲烷(100mL)，冰浴下加入FmocCl(3.2g,12.36mmol,2eq)，DIPEA(1.6g,12.36mmol,2eq)，室温下搅拌2h反应完，加入饱和食盐水(100mL)洗涤，分液干燥旋干后重结晶(甲醇，5V)得到化合物9(4.91g,78.1％)。
实施例11化合物10的制备
将化合物9(1.5g,1.47mmol)与分子筛(1.5g)溶于超干CH2Cl2(60mL)，N2保护下–78℃加入三乙基硅烷(0.55mL,3.67mmol,2.5eq)与PhBCl2(0.76mL,5.88mmol)，反应液在–78℃搅拌1h。反应结束后加入甲醇(6mL)淬灭，三乙胺调pH～8。将反应液过滤后饱和NaHCO3(10mL)洗涤。干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝6:1)得到化合物10(1.2g,80.1％，无色油状液体)。TOF-MS:m/z:1044.45[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.75–7.73(1H,m),7.70(7H,dd,J 14.7,5.4),7.66(2H,d,J5.3),7.62(2H,d,J 5.8),7.53(1H,d,J 3.9),7.44–7.38(6H,m),7.30–7.25(3H,m),5.32(1H,t,J 9.8,H-3),4.93(1H,d,J9.3,NH),4.79(1H,d,J 6.6,H-1),4.73(2H,q,J 11.7,NapCH2),4.57(2H,dd,J 24.5,11.7,Fmoc-CH2),4.24(2H,d,J 7.1,Lipid-NapCH2),4.17–4.10(1H,m,Fmoc-CH),3.85-3.80(2H,s,H-6,Lipid-H-3),3.74(1H,d,J 3.9,H-4),3.73–3.69(1H,m,H-6),3.60(1H,dd,J 18.4,9.4,H-2),3.49(1H,d,J 8.3,H-5),2.55(1H,dd,J15.6,7.1),2.39(1H,dd,J 15.5,4.9),1.55–1.39(2H,m),1.22–1.06(18H,m),0.87–0.82(12H,m),0.08(6H,d,J 13.4).
δC(101MHz,CDCl3)172.00,155.84,143.86,141.23,135.99,135.05,133.23,133.15,132.98,132.92,128.26,128.04,127.95,127.87,127.69,127.65,127.04,126.67,126.29,126.14,126.00,125.97,125.87,125.79,125.74,125.22,119.96,96.66(H-1),75.72(H-4),75.28(H-5),74.64(H-3),71.47(Fmoc-CH2),67.24(Lipid-NapCH2),62.00(H-6),58.48(H-2),53.46,47.06(Fmoc-CH),39.74,34.19,31.96,29.67,29.65,29.62,29.60,29.38,25.52,25.15,22.73,17.90,14.17,-4.07,-5.25.
实施例12化合物11的制备
(1)
在反应瓶中加入受体化合物10(606mg,0.593mmol)，给体化合物6-a(1.1g,0.89mmol,1.5eq)分子筛(600mg)，N2条件下加入超干CH2Cl2(10mL)，在-20℃下加入二氯甲烷稀释100倍的TfOH(10μL,0.12mmol，0.2eq)，–20℃下搅拌40min；加入甲醇(5mL)淬灭，三乙胺调pH至8。反应液用CH2Cl2(35mL)和饱和NaHCO3(10mL)洗涤。有机相干燥浓缩，经柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到糖苷化产物11-a(1.03g,84％)。TOF-MS:m/z 2088.14[M+Na]+。
δH(400MHz,CDCl3)7.80–7.21(29H,m),5.89–5.68(2H,m,diallyl),5.48(1H,d,J7.0,NH’),5.37(1H,t,J 9.6,H-3’),5.32–5.10(6H,m,H-3,lipid-H-3,diallyl),4.87(1H,d,J 9.1,NH),4.80(1H,d,J 7.7,H-1’),4.74(1H,d,J 3.3,H-1),4.70(4H,d,J 12.8,Troc,Nap),4.64(2H,d,J 3.3,Nap-CH2),4.53(2H,dd,J 29.1,11.9,Fmoc),4.45(1H,s,H-4’),4.43–4.31(5H,m,H-4,diallyl),4.24(2H,d,J 6.8,acceptor-lipid-Nap),4.16–4.11(1H,m,Fmoc-CH),4.07(1H,d,J 10.3,H-6),3.83(2H,d,J 10.2,H-6,acceptor-lipid-H-3’),3.72(2H,dd,J 10.3,6.0,H-6’),3.65–3.54(3H,m,H-2,H-5,H-5’),3.41(1H,dd,J 17.7,8.4,H-2’),2.61(2H,t,J 6.6),2.50(1H,dd,J 15.6,7.1),2.35(1H,dd,J 15.8,5.1),2.28(2H,t,J 7.4),1.59(6H,d,J7.7),1.42(4H,ddd,J 14.5,10.8,6.1),1.32–1.21(52H,m),0.86(18H,dd,J 14.9,7.8),0.15–0.05(6H,m).
δC(101MHz,CDCl3)δ172.65,170.83,169.04,154.72,152.94,142.82,140.16,134.94,134.60,134.29,132.19,132.15,132.08,131.91,131.84,131.82,131.29,131.22,131.13,131.06,129.85,127.80,127.12,127.06,126.93,126.85,126.79,126.62,126.60,126.55,125.97,125.32,125.17,125.10,125.02,124.90,124.85,124.78,124.70,124.67,124.61,124.18,118.86,117.44,117.27,99.00(C-1’),95.53(C-1),94.38,75.08(C-5’),74.58(C-5)73.71(C-3),73.43(C-4’),73.31(C-4),73.11,73.05,72.96,72.91,72.60,71.37(C-3’),70.37,69.10,67.55(C-6),67.49(C-6’),67.34,67.28,66.14,64.51,57.32(C-2),55.78(C-2’),46.00,38.78,38.64,33.50,33.41,33.13,30.89,28.67,28.63,28.61,28.59,28.54,28.51,28.31,28.17,24.54,24.15,24.07,24.03,21.66,18.16,16.82,13.12,13.10,-4.91,-6.31.
(2)
将化合物6-a(50mg,0.04mmol)与化合物10(51mg,0.049mmol,1.2eq)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(0.25mg,0.00167mmol，0.05eq)。1h后化合物6-a(给体)消耗完，化合物10(受体)未消耗完。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(49mg,58.5％)。由于产物11-a与受体10极性接近，与给体6-a极性相差较大。因此，当受体10过量时，虽然反应转化率基本相当，但分离收率较低。
(3)
将化合物6-a(100mg,0.081mmol，1.2eq)与化合物10(69mg,0.067mmol)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(0.5mg,0.0033mmol，0.05eq)。1h后给体受体均未消耗完，延长反应时间无变化。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(58mg,0.0278mmol，41.7％)。
(4)
将化合物6-a(200mg,0.162mmol，1.5eq)与化合物10(110mg,0.107mmol)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(0.8mg,0.0053mmol，0.05eq)。1h后给体受体均未消耗完，延长反应时间无变化。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(107mg,48.2％)。
(5)
将化合物6-a(200mg,0.162mmol，1.5eq)与化合物10(110mg,0.107mmol)投入反应瓶，氮气保护加入1mL超干二氯甲烷，-20℃加入稀释100倍的TfOH(2.43mg,0.0162mmol，0.15eq)。1h后给体消耗完，。加甲醇淬灭三乙胺调为中性。柱色谱纯化(甲苯：乙酸乙酯＝12：1)得到化合物11-a(192mg,86.48％)。TOF-MS:m/z:2088.14[M+Na]+。
实施例13化合物12-a的制备
在反应瓶中将化合物11-a(860mg,0.029mmol)溶于CH2Cl2(10mL)，N2条件下加入锌粉(2.7g，40mmol)和醋酸(2.7mL，45mmol)室温下搅拌2h，反应结束后过滤，滤液用甲苯共沸旋干并柱层析(PE:EA＝6:1)得到化合物12-a。TOF-MS:m/z 1912.06[M+Na]+。
实施例14化合物13-a(MPL-8)的制备
将实施例13中制备得到的化合物12-a溶于超干DCM(10mL)，N2置换于-10℃下加入EDC·HCl(2g,10.43mmol)和脂肪链19-A(1.48g,3.47mmol)，反应搅拌12h后旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物13-a(680mg,71％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z2323.15[M+Na]+。
实施例15化合物14-a的制备
在反应瓶中将化合物13-a(580mg,0.252mmol)溶于DMF(12mL)，N2条件下加入三乙胺(12mL,86mmol)，室温搅拌过夜，将反应液旋干经柱层析纯化(PE:EA＝6:1)得到化合物14-a。TOF-MS:m/z2030.2[M+Na]+。
实施例16化合物15-a的制备
将实施例15中制备得到的化合物14-a溶于超干CH2Cl2(5mL)，N2置换于室温下加入EDC·HCl(295mg,1.53mmol)和脂肪链20(296mg,0.77mmol)，反应液在室温下搅拌12h，旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝5:1)得到化合物15-a(480mg,收率78％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z 2468.4[M+Na]+。
实施例17化合物16-a的制备
将化合物15-a(300mg，0.123mmol)溶于THF(10mL)，–40℃下加入溶于吡啶(9mL)的HF/Py(3mL，65-70％)溶液。升温至室温并搅拌过夜。反应结束后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，加入氯仿萃取多次。将有机层干燥过滤并浓缩，通过C18填料纯化(CH3CN，MeOH/EA＝8:1，MeOH依次洗脱)得到16-a(0.214g，75％，白色固体)。
δH(600MHz,CDCl3)7.77–7.24(28H,m),6.28(1H,d,J 9.5,NH),6.22(1H,d,J 7.4,NH’),5.77–5.70(1H,m,allyl),5.67–5.59(1H,m,allyl),5.44–5.31(3H,m,H-3,H-1’,H-3’),5.22–5.03(6H,m,allyl,H-1,lipid-H-3),4.99(1H,t,J 5.8,lipid-H-3),4.67–4.57(5H,m,Nap),4.52–4.42(3H,m,Nap),4.35–4.21(5H,m,H-4’,diallyl),4.17(1H,td,H-2),4.05(1H,d,J 7.2,H-5),3.87(1H,d,J 11.7,H-6’),3.80–3.74(3H,m,lipid-H-3*2,H-6’),3.67–3.56(4H,m,H-4’,H-6*2,H-5’),3.32–3.28(1H,m,H-2’),3.27(1H,t,J 11.6,7.7,H-4),2.55–2.43(3H,m),2.28–2.11(9H,m),1.45–1.37(8H,m),1.22–1.10(108H,m),0.80(18H,dt,J 7.0,5.1).
δC(151MHz,CDCl3)173.28,172.55,170.87,170.29,169.85,168.98,135.06,134.48,133.92,132.31,132.23,132.19,132.10,131.96,131.90,131.86,131.22,131.17,131.11,131.06,127.15,127.09,127.05,126.91,126.83,126.66,126.57,125.46,125.41,125.36,125.24,125.06,124.99,124.93,124.88,124.85,124.82,124.73,124.64,124.61,117.45,117.30,98.02(C-1’),90.43(C-1),75.46(C-4),74.52,73.50,73.23,73.09,72.86(C-5’),72.51(C-3),71.64(C-3’),70.60(C-5),70.36,69.75,69.33,67.55(C-4’),67.51,67.28(C-6’),67.24,66.43(C-6),59.37,55.37(C-2’),51.48(C-2),41.01,40.61,38.95,38.86,33.63,33.54,33.40,33.34,30.92,28.64,28.56,28.35,28.21,24.17,24.06,23.89,21.67,13.09.
实施例18化合物17-a的制备
(1)
将化合物16-a(240mg，0.103mmol)，PPh3(25mg,0.095mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入THF(10mL)，TEA(125μL,0.9mmol),HCOOH(75μL,1.957mmol),Pd(Ph3)4(25mg,0.02mmol，0.2eq)。25℃反应5h未反应完全，继续反应12h后原料消失，MS显示有未脱完的allyl，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOH with 0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with0.1％TEA依次洗脱，得到化合物17-a(184mg，79.65％)。
(2)
将化合物16-a(240mg，0.103mmol)，PPh3(50mg,0.190mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入THF(10mL)，TEA(250μL,1.8mmol),HCOOH(150μL,3.914mmol),Pd(Ph3)4(50mg,0.043mmol，0.4eq)。25℃反应1.5h后反应完全，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOHwith 0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with 0.1％TEA得到化合物17-a(225mg，97.4％)。TOF-M:m/z:2248.76[M-H]+。
由于每分子含有两当量allyl，当PPh3及其它试剂达到常规的用量(例如PPh3与allyl的摩尔比为0.9:1-1.1:1左右)时，即可高收率的得到化合物17。
实施例19化合物18-a的制备
(1)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(1.1g,4.84mmol,220eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声60min后结束反应。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-a(25mg，67.6％)。(由于DDQ大大超出了常规用量，在投料规模较小的情况下，虽然反应收率可达理论值，但是大量残留的DDQ影响了后处理纯化的收率)
(2)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(10mg,0.044mmol,2eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声60min后结束反应。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-a(17mg，45.9％)。如(4)，通过延长反应时间，可大大提高收率。
(3)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(40mg,0.177mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声60min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-a(29mg，78.4％)。如(4)，通过延长反应时间，可大大提高收率。
(4)
将化合物17-a(50mg,0.022mmol)与DDQ(40mg,0.177mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(5mL)。30℃超声80min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-a(35.8mg，95.26％，HPLC纯度：98.5％)。TOF-MS:m/z:1689.36[M-H]+。
化合物18-b系列实施例
实施例20化合物13-b的制备
在反应瓶中将11-a(400mg,0.194mmol)溶于CH2Cl2(5mL)，N2条件下加入锌粉1.2g)和醋酸(1.2mL)室温下搅拌2h，反应结束后过滤，滤液用甲苯共沸旋干并柱层析(PE:EA＝6:1)得到化合物12-a(经MS验证TOF-MS:m/z 1915.49[M+Na]+)
将化合物12-a溶于超干DCM(5mL)，N2置换于-10℃下加入EDC·HCl(0.892g,4.656mmol)和脂肪链19-C(749mg,1.552mmol)(cas:93390-37-5)，反应搅拌12h后旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物13-b(722.7mg,63.4％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z 2380.26[M+Na]+。
实施例21化合物14-b的制备
在反应瓶中将化合物13-b(600mg,0.254mmol)溶于DMF(12mL)，N2条件下加入三乙胺(12mL)，室温搅拌过夜，将反应液旋干经柱层析纯化(PE:EA＝6:1)得到化合物14-b(经MS验证)。TOF-MS:m/z2158.02[M+Na]+。
实施例22化合物15-b的制备
将化合物14-b溶于超干CH2Cl2(5mL)，N2置换于室温下加入EDC·HCl(390.35mg,2.036mmol)和脂肪链20(390.7mg,1.016mmol)，反应液在室温下搅拌12h，旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝5:1)得到化合物15-b(504mg,79.3％无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z2524.56[M+Na]+。
实施例23化合物16-b的制备
将化合物15-b(500mg，0.2mmol)溶于THF(18mL)，–40℃下加入溶于吡啶(15mL)的HF/Py(5mL，65-70％)溶液。升温至室温并搅拌过夜。反应结束后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，加入氯仿萃取多次。将有机层干燥过滤并浓缩，通过C18填料纯化(CH3CN，MeOH/EA＝8:1,MeOH)得到16-b(0.351g，73.5％，白色固体)。TOF-MS:m/z 2410.34[M+Na]+。
实施例24化合物17-b的制备
将化合物16-b(470mg，0.196mmol)，PPh3(90mg,0.370mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入THF(20mL)，TEA(490μL,3.5mmol),HCOOH(290μL,7.8mmol),Pd(Ph3)4(90mg,0.08mmol)。25℃反应1.5h后反应完全，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOH with0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with 0.1％TEA得到化合物17-b(428mg，94.3％)。TOF-M:m/z:2330.16[M+Na]+。
实施例25化合物18-b的制备
将化合物17-b(90mg,0.039mmol)与DDQ(71mg,0.312mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(10mL)。30℃超声80min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-b(65mg，95.26％)。TOF-MS:m/z:1745.47[M-H]+。HPLC纯度：97.5％。
化合物18-c系列实施例
实施例26化合物2-c的制备
将化合物19-B(cas:163310-36-9)(2.613g,5.93mmol)与EDC·HCl(1.136g,5.93mmol，1.2eq)溶于CH2Cl2(25mL)，室温搅拌15min后加入化合物1(3g,4.94mmol)和DMAP(0.03g,0.247mmol，0.05eq)，室温下搅拌10h反应完，反应液依次用CH2Cl2(50mL)和饱和NaHCO3(30mL)洗涤。分液干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物2-c(4.29g,84.3％，无色糖浆)。TOF-MS:m/z:1052.7[M+Na]+。
实施例27化合物3-c的制备
将化合物2-c(1g,0.97mmol)溶与THF(10mL)，依次在冰浴条件下加入BH3·Me3N(0.28g,3.783mmol，3.9eq)，AlCl3(0.76g,5.7mmol)，H2O(35mg,1.92mmol，1.9eq)反应液在室温下搅拌1.5h。加水(10mL)、1M HCl溶液(10mL)淬灭，反应液用CH2Cl2(15mL)分液，干燥浓缩后经硅胶柱色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物3-c(0.882g,87.6％，无色油状液体)。TOF-MS:m/z:1059.42[M+Na]+.
实施例28化合物4-c的制备
将化合物3-c(0.5g,0.482mmol)与四氮唑(102mg,1.45mmol,3eq)溶于超干乙腈(10mL)，加入烯丙基配体(己二烯-N,N-二异丙基亚磷酰胺，0.236g,0.964mmol,2eq)，室温下反应40min后原料消耗完。-40℃下将mCPBA(207.9mg,1.205mmol,2.5eq)溶于超干二氯甲烷(15mL)，加入上述反应体系，缓慢升至-10℃，40min反应完加饱和硫代硫酸钠溶液(20mL)淬灭，饱和碳酸氢钠洗涤(40mL)，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1)得化合物4-c(0.537g,93.3％)。TOF-MS:m/z:1214.8[M+Na]+.
实施例29化合物5-c的制备
将化合物4-c(1.5g,1.26mmol)溶于THF(45mL)，–40℃加入稀释于30mL吡啶的HF/pyridine(4.8mL,65–70％)。缓慢升至室温反应12h，反应液用NaHCO3(80mL)淬灭，加入CH2Cl2(100mL)分液，干燥旋干硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)得化合物5-c(1.26g,93.4％，白色固体)。TOF-MS:m/z:1100.53[M+Na]+。
实施例30化合物6-c的制备
将化合物5-c(1.3g,1.21mmol)溶于超干CH2Cl2(20mL)，N2保护下加入2,2,2-三氟-N-苯乙酰亚胺氯(1.50g,7.24mmol，6eq)与DBU(368mg,2.42mmol，2eq)，室温反应30mins。将反应液浓缩柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15:1with 0.1％Et3N)得到化合物6-c(1.19g,79％，无色糖浆)。TOF-MS:m/z:1271.65[M+Na]+。
实施例31化合物11-c的制备
在反应瓶中加入受体化合物10(700mg,0.684mmol)，给体化合物6-c(1.28g,1.026mmol,1.5eq)分子筛(600mg)，N2条件下加入超干CH2Cl2(10mL)，在-20℃下加入二氯甲烷稀释100倍的TfOH(20μL,0.137mmol，0.2eq)，–20℃下搅拌40min；加入甲醇(5mL)淬灭，三乙胺调pH至8。反应液用CH2Cl2(35mL)和饱和NaHCO3(10mL)洗涤。有机相干燥浓缩，经柱层析纯化(PE:EA＝10:1)得到糖苷化产物11-c(1.27g,89％)。TOF-MS:m/z 2104.9[M+Na]+。
实施例32化合物12-c的制备
在反应瓶中将11-c(500mg,0.24mmol)溶于CH2Cl2(5mL)，N2条件下加入锌粉1.5g)和醋酸(15mL)室温下搅拌2h，反应结束后过滤，滤液用甲苯共沸旋干并柱层析(PE:EA＝6:1)得到化合物12-c(经MS验证TOF-MS:m/z 1929.5[M+Na]+)。
实施例33化合物13-c的制备
将化合物12-c溶于超干DCM(5mL)，N2置换于-10℃下加入EDC·HCl(1.1g,5,76mmol)和脂肪链19-A(819mg,1.92mmol)，反应搅拌12h后旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝10:1)得到化合物13-c(441mg,79.4％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z 2338.23[M+Na]+。
实施例34化合物14-c的制备
在反应瓶中将化合物13-c(600mg,0.259mmol)溶于DMF(12mL)，N2条件下加入三乙胺(12mL)，室温搅拌过夜，将反应液旋干经柱层析纯化(PE:EA＝6:1)得到化合物14-c(经MS验证)。TOF-MS:m/z2115.9[M+Na]+。
实施例35化合物15-c的制备
将化合物14-c溶于超干CH2Cl2(5mL)，N2置换于室温下加入EDC·HCl(397.2mg,2.072mmol)和脂肪链20(398.4mg,1.036mmol)，反应液在室温下搅拌12h，旋干柱层析纯化(甲苯/乙酸乙酯＝5:1)得到化合物15-c(518.8mg,81.4％,无色透明糖浆)。TOF-MS:m/z2482.47[M+Na]+。
实施例36化合物16-c的制备
将化合物15-c(400mg，0.162mmol)溶于THF(18mL)，–40℃下加入溶于吡啶(12mL)的HF/Py(4mL，65-70％)溶液。升温至室温并搅拌过夜。反应结束后加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，加入氯仿萃取多次。将有机层干燥过滤并浓缩，通过C18填料纯化(CH3CN，MeOH/EA＝8:1,MeOH)得到16-c(0.293g，76.9％，白色固体)。TOF-MS:m/z 2368.26[M+Na]+。
实施例37化合物17-c的制备
将化合物16-c(459mg，0.196mmol)，PPh3(90mg,0.370mmol)加入反应瓶中，氮气保护后加入THF(20mL)，TEA(490μL,3.5mmol),HCOOH(290μL,7.8mmol),Pd(Ph3)4(90mg,0.08mmol)。25℃反应1.5h后反应完全，旋干过C18柱:CH3CN with 0.1％TEA,MeOH with0.1％TEA,CH2Cl2/MeOH with 0.1％TEA得到化合物17-c(405mg，91.5％)。TOF-MS:m/z2288.05[M+Na]+。
实施例38化合物18-c的制备
将化合物17-c(100mg,0.044mmol)与DDQ(80mg,0.353mmol，8eq)加入反应瓶中，氮气保护下加入干燥CHCl3(10mL)。30℃超声80min后反应完全。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液旋干。向旋干的反应瓶中加入乙腈，倒入C18填料的柱色谱中脱色纯化。待过量DDQ完全除去，CH2Cl2:MeOH＝3:1得到终产品化合物18-c(68mg，91.5％)。TOF-MS:m/z:1703.4[M-H]+。HPLC纯度：96.5％
对比实施例1
将化合物17(50mg,0.022mmol)与Pd(400mg)加入氢化釜中，溶于THF：H2O＝4:1(20mL),1MPa,30℃反应24h。加入一滴三乙胺淬灭，将反应液过滤旋干。使用C18填料的柱色谱中脱色纯化得到终产品化合物18(12mg，32.4％)。通过TLC板层显示，原料有剩余，杂质点多，延长时间原料未减少。收率和纯度明显差于上述实施例。
由上可见，(1)本发明使用烯丙基配体在后续避免了氢化反应，用四三苯基膦的条件1.5h即可反应完。同样使用C18填料柱简单脱色后即可得到终产品。避免了现有技术中采用氢化脱苄基保护基带来的杂质多，收率较低，且纯化方式复杂的问题。具有明显更优的效果。
(2)与现有技术需要使用钯碳氢化反应20h以上，再反复过滤过离子柱色谱，收率较低(仅能达到50％左右)相比较，本发明使用Nap保护基的方法简化了操作，优化后，脱保护步骤收率可达到91.5％以上，纯度达到97％(测定方法参照：HPLC-ELSD法测定BLP25脂质体疫苗中MPL的含量，中国药事2012年第26卷第5期，王明娟，王琰，胡昌勤)。
Claims (16)
1.一种如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：
步骤(1)，在有机溶剂中，在四氮唑存在下，将如式3所示的化合物与烯丙基配体进行磷酸化反应，得到混合物1；所述的烯丙基配体为己二烯-N,N-二异丙基亚磷酰胺；
步骤(2)，将所述的混合物1与氧化剂进行氧化反应，得到所述的如式4所示的化合物即可；其中，n1为10、12或14，n2为8、10或12；
步骤(1)中，所述的有机溶剂为腈类溶剂；
步骤(1)中，所述的如式3所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为5g/L-200g/L；
步骤(1)中，所述的四氮唑与所述的如式3所示的化合物的摩尔比为1:1-10:1；
步骤(1)中，所述的烯丙基配体与所述的如式3所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
步骤(1)中，所述的磷酸化反应的温度为-10℃至50℃；
步骤(2)中，所述的氧化剂为间氯过氧苯甲酸；
步骤(2)中，所述的氧化剂为卤代烷烃类溶剂的溶液形式；
步骤(2)中，所述的氧化剂与所述的如式3所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
步骤(2)中，所述的氧化反应的温度为-80℃至10℃；
2.如权利要求1所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
步骤(2)中，所述的氧化反应的后处理包括以下步骤：所述的氧化反应结束后，淬灭，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可；
或，n1为10、12或14，n2为10。
3.如权利要求2所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
步骤(1)中，所述的有机溶剂为乙腈；
或，步骤(1)中，所述的如式3所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为40g/L-60g/L；
或，步骤(1)中，所述的四氮唑与所述的如式3所示的化合物的摩尔比为3:1-5:1；
或，步骤(1)中，所述的烯丙基配体与所述的如式3所示的化合物的摩尔比为1:1-3:1；
或，步骤(1)中，所述的磷酸化反应的温度为10℃至30℃；
或，步骤(2)中，当所述的氧化剂为卤代烷烃类溶剂的溶液形式时，所述的氧化剂与所述的卤代烷烃类溶剂的质量体积比为0.01g/L-0.05g/L；
或，步骤(2)中，当所述的氧化剂为卤代烷烃类溶剂的溶液形式时，所述的卤代烷烃类溶剂为二氯甲烷；
或，步骤(2)中，所述的氧化剂与所述的如式3所示的化合物的摩尔比为2:1-3:1；
或，步骤(2)中，所述的氧化反应的温度为-40℃至-10℃；
或，步骤(2)中，当所述的氧化反应的后处理包括以下步骤：所述的氧化反应结束后，淬灭，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可，所述的淬灭采用饱和硫代硫酸钠水溶液；
或，步骤(2)中，当所述的氧化反应的后处理包括以下步骤：所述的氧化反应结束后，淬灭，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可，所述的洗涤采用饱和碳酸氢钠溶液；
或，步骤(2)中，当所述的氧化反应的后处理包括以下步骤：所述的氧化反应结束后，淬灭，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可，所述的分离纯化为柱层析分离，所述的柱层析分离的填料为硅胶；所述的柱层析分离的洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯。
4.如权利要求1所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，在有机溶剂中，在硼烷、路易斯酸和H2O存在下，将如式2所示的化合物进行如下所示的选择性还原开环反应，得到所述的如式3所示的化合物即可；n1和n2的定义均如权利要求1或2所述；
所述的选择性还原开环反应中，所述的有机溶剂为环醚类溶剂；
所述的如式2所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为10g/L-200g/L；
所述的硼烷为络合物的形式；
所述的硼烷与所述的如式2所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
所述的路易斯酸为AlCl3；
所述的硼烷与所述的路易斯酸的摩尔比为1:1-1:3；
所述的H2O与所述的如式2所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
所述的选择性还原开环反应的温度为-10℃-50℃；
5.如权利要求4所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的选择性还原开环反应的后处理包括以下步骤：所述的选择性还原开环反应结束后，淬灭，萃取，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可。
6.如权利要求5所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的选择性还原开环反应中，所述的环醚类溶剂为四氢呋喃；
或，所述的如式2所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为50g/L-150g/L；
或，所述的硼烷为BH3·Me3N和/或BH3·THF；
或，所述的硼烷与所述的如式2所示的化合物的摩尔比为3.5:1-4.5:1；
或，所述的硼烷与所述的路易斯酸的摩尔比为1:1-1:2；
或，所述的H2O与所述的如式2所示的化合物的摩尔比为1.5:1-2.5:1；
或，所述的选择性还原开环反应的温度为10℃-30℃；
或，所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的淬灭采用加水和盐酸溶液；
或，所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的萃取的溶剂为卤代烷烃类溶剂；
或，所述的选择性还原开环反应的后处理中，洗涤采用饱和碳酸氢钠溶液；
或，所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的分离纯化为柱层析分离。
7.如权利要求6所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的萃取的溶剂为二氯甲烷；
或，所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的柱层析分离的填料为硅胶；
或，所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的柱层析分离的洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯。
8.如权利要求7所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的选择性还原开环反应的后处理中，所述的柱层析分离的洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯的体积比＝10:1。
9.如权利要求4所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式19B所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式2所示的化合物即可；n1和n2的定义均如权利要求4所述；
所述的酯化反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂；
所述的如式1所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为5g/L-200g/L；
所述的催化剂为有机碱；
所述的缩合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺和N,N'-二异丙基碳二亚胺中的一种或多种；
所述的缩合剂与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
所述的催化剂与所述的缩合剂的摩尔比为0.01:1-1:1；
所述的如式19B所示的化合物与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-3:1；
所述的酯化反应的温度为-10℃-50℃；
10.如权利要求9所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的酯化反应的后处理包括以下步骤：所述的酯化反应结束后，洗涤，干燥，过滤，浓缩，分离纯化，即可。
11.如权利要求10所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的酯化反应中，所述的卤代烷烃类溶剂为二氯甲烷和/或三氯甲烷；
或，所述的如式1所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为60g/L-150g/L；
或，所述的催化剂为4-二甲氨基吡啶、三乙胺和吡啶中的一种或多种；
或，所述的缩合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐；
或，所述的缩合剂与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-3:1；
或，所述的催化剂与所述的缩合剂的摩尔比为0.01:1-0.5:1；
或，所述的如式19B所示的化合物与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-2.5:1；
或，所述的酯化反应的温度为10℃-30℃；
或，所述的酯化反应的后处理中，所述的洗涤依次采用卤代烷烃类溶剂、饱和碳酸氢钠溶液；或，所述的酯化反应的后处理中，所述的分离纯化为柱层析分离。
12.如权利要求11所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的催化剂为4-二甲氨基吡啶；
或，所述的酯化反应的后处理中，所述的卤代烷烃类溶剂为二氯甲烷；
或，所述的酯化反应的后处理中，所述的柱层析分离的填料为硅胶；
或，所述的酯化反应的后处理中，所述的柱层析分离的洗脱剂为石油醚与乙酸乙酯。
13.如权利要求12所述的如式4所示的化合物的制备方法，其特征在于，
所述的酯化反应的后处理中，所述的柱层析分离的洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯的体积比＝10:1。
14.一种如式4、式3、式2所示的化合物；
其中，n1和n2的定义均如权利要求1或2所述。
15.如权利要求14所述的如式4、式3、式2所示的化合物，其特征在于，其中，
所述的如式4所示的化合物为如下任一化合物：
所述的如式3所示的化合物为如下任一化合物：
所述的如式2所示的化合物为如下任一化合物：
16.一种如式3、式2所示的化合物的制备方法，其特征在于，
其中，所述的如式3所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在硼烷、路易斯酸和H2O存在下，将如式2所示的化合物进行如下所示的选择性还原开环反应，得到所述的如式3所示的化合物即可；n1和n2的定义均如权利要求14或15所述；
所述的选择性还原开环反应中，所述的有机溶剂为环醚类溶剂；
所述的如式2所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为10g/L-200g/L；
所述的硼烷为络合物的形式；
所述的硼烷与所述的如式2所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
所述的路易斯酸为AlCl3；
所述的硼烷与所述的路易斯酸的摩尔比为1:1-1:3；
所述的H2O与所述的如式2所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
所述的选择性还原开环反应的温度为-10℃-50℃；
所述的如式3所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如权利要求5-13中任一项所述；
其中，所述的如式2所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：
在有机溶剂中，在缩合剂和催化剂存在下，将如式1所示的化合物与如式19B所示的化合物进行如下所示的酯化反应，得到所述的如式2所示的化合物即可；n1和n2的定义均如权利要求14或15所述；
所述的酯化反应中，所述的有机溶剂为卤代烷烃类溶剂；
所述的如式1所示的化合物与所述的有机溶剂的质量体积比为5g/L-200g/L；
所述的催化剂为有机碱；
所述的缩合剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、二环己基碳二亚胺和N,N'-二异丙基碳二亚胺中的一种或多种；
所述的缩合剂与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-5:1；
所述的催化剂与所述的缩合剂的摩尔比为0.01:1-1:1；
所述的如式19B所示的化合物与所述的如式1所示的化合物的摩尔比为1:1-3:1；
所述的酯化反应的温度为-10℃-50℃；
所述的如式2所示的化合物的制备方法中的反应条件和操作如权利要求10-13中任一项所述。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010305754.3A CN113527396B (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010305754.3A CN113527396B (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113527396A CN113527396A (zh) | 2021-10-22 |
| CN113527396B true CN113527396B (zh) | 2024-02-02 |
Family
ID=78123299
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010305754.3A Active CN113527396B (zh) | 2020-04-17 | 2020-04-17 | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113527396B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1192216A (zh) * | 1995-06-05 | 1998-09-02 | 卫材株式会社 | 用于治疗和预防内毒素血症的取代的脂多糖 |
| CN101238140A (zh) * | 2005-08-31 | 2008-08-06 | 卫材R&D管理有限公司 | 脂质a类似物的制造方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6417172B1 (en) * | 1995-06-05 | 2002-07-09 | Eisai Co., Ltd. | Prevention and treatment of pulmonary bacterial infection or symptomatic pulmonary exposure to endotoxin by inhalation of antiendotoxin drugs |
| WO2009035528A2 (en) * | 2007-09-07 | 2009-03-19 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Synthetic lipid a derivative |
-
2020
- 2020-04-17 CN CN202010305754.3A patent/CN113527396B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1192216A (zh) * | 1995-06-05 | 1998-09-02 | 卫材株式会社 | 用于治疗和预防内毒素血症的取代的脂多糖 |
| CN101238140A (zh) * | 2005-08-31 | 2008-08-06 | 卫材R&D管理有限公司 | 脂质a类似物的制造方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Chemical Synthesis and Proinflammatory Responses of Monophosphoryl LipidA Adjuvant Candidates;Kaustabh K. Maiti等;Eur. J. Org. Chem.;80–91 * |
| Dioxane-type（2-naphthyl）methylene acetals of glycosides and their hydrogenolytic transformation into 6-O- and 4-O-(2-naphthyl) methyl (NAP) ethers;Borbas, A等;Tetrahedron;第58卷(第28期);5723-5732 * |
| Synthesis of ceramidated GLA-60 derivatives"，Tsuyoshi Nakamura;Tsuyoshi Nakamura等;Carbohydrate Research;第337卷;1343–1349 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113527396A (zh) | 2021-10-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018333065B2 (en) | Technologies for oligonucleotide preparation | |
| WO2014059938A1 (zh) | 一种利拉列汀重要中间体的制备方法 | |
| EP2970184A1 (en) | Compounds and uses thereof for the modulaton of hemoglobin | |
| CN108341828B (zh) | 用于制备艾日布林的方法及其中间体 | |
| KR100970434B1 (ko) | 아데포비어 디피복실의 정제방법 | |
| CN102459275A (zh) | 制备吗啡烷和吗啡酮化合物的方法 | |
| CN115028670A (zh) | 一种n-乙酰基-d-半乳糖胺三聚体前体的制备方法 | |
| CN113527396B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| KR20080103603A (ko) | 트레할로스 화합물 및 그 화합물을 함유하는 의약 | |
| CN113527386B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527384B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527050B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527382B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| CN113527397B (zh) | 一种疫苗佐剂mpla的中间体、合成及应用 | |
| TWI445711B (zh) | 肝適能製備的改良方法 | |
| CN102351869B (zh) | 一种溴化甲基纳曲酮的制备方法 | |
| CN115286674A (zh) | 一种阳离子脂质体及其制备方法 | |
| WO2020010560A1 (zh) | 一种亚磷酰胺类化合物、其制备方法及应用 | |
| CN117362375A (zh) | 用于合成3d-mpl的中间体、其制备方法及其应用 | |
| TW201722982A (zh) | 一種胺己基乳糖－三氮壬烷三醋酸鍵結物之合成方法 | |
| JP2008519060A (ja) | １３−デオキシアントラサイクリン類を調製するための組成物及び方法 | |
| CN113248415B (zh) | 一种abt-737关键中间体的制备方法以及abt-737的制备方法 | |
| CN114805231B (zh) | 一种p-NH2-Bn-NOTA的合成方法 | |
| CN111116655B (zh) | 一种高光学纯度替诺福韦苄酯膦酰胺前体药物的制备方法 | |
| CN114195784A (zh) | 帕博西尼有关物质及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |