CN113491670B - 一种兽用解毒口服液及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种兽用解毒口服液及其制备方法，步骤包括：称取药材原料，经除杂、粉碎、过筛得到原料粉末；加入水加热，恒温浸泡，得到药效溶液；待药效溶液自然冷却，调节pH值至酸性，加入复合酶，恒温搅拌酶解，再进行酶灭活处理，得到酶解溶液；加入铁苋菜发酵提取液以及海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液；熬制、过滤、离心得上清液，再经二次过滤、灌装、灭菌，即得兽用解毒口服液。该兽用解毒口服液采用酶解后的中药药材为主料，并加入有铁苋菜发酵提取液和海带发酵提取液作为药效补充剂，使得该兽用解毒口服液在禽畜疾病的治疗效果以及治疗周期上得到明显改善，尤其是针对法氏囊病病毒，解毒效果突出，同时有助于促进禽畜的生长发育。

Description

一种兽用解毒口服液及制备方法
技术领域
本发明涉及兽药技术领域，具体涉及一种兽用解毒口服液及制备方法。
背景技术
法氏囊病病毒(IBD)为传染性法氏囊病毒，属于呼肠孤病毒科，主要症状为羽毛蓬松，采食量减少，畏寒，精神萎靡，缩头，闭眼，不愿走动，伏地昏睡，排泄白色和水样稀粪，个别粪便带血，眼窝凹陷，脱水，最后衰弱死亡。这种病毒不仅能通过呼吸道和消化道传染，还能通过鸟卵进行传染，某些昆虫也能带毒传播，传播能力较强。并且，该病毒的抵抗力强，在60℃经90分钟仍不能灭活，在-20℃可生存3年之久，在pH值12的强碱环境中保持30℃以上1小时方能杀死。
针对法氏囊病病毒，目前有采用中药治疗解毒的方法：蒲公英200克、大青叶200克、板蓝根200克、双花100克、黄芩100克、黄柏100克、甘草100克、藿香50克、生石膏50克。但是，该中药药物治疗效果一般，且治疗周期长。
发明内容
本发明的目的在于提供一种兽用解毒口服液及制备方法，其解决了现有治疗法氏囊病的药物存在的治疗效果一般且治疗周期长的问题。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的：
一种兽用解毒口服液的制备方法，步骤包括：
(1)称取药材原料，经除杂、粉碎、过筛得到原料粉末；
(2)往原料粉末中加入6-10倍量的水加热至60-80℃，并恒温浸泡30-50min，得到药效溶液；
(3)待药效溶液自然冷却至45-55℃时，调节pH值至酸性，加入复合酶，恒温搅拌酶解1-5h，再升温至70-90℃进行酶的灭活处理，得到酶解溶液；
(4)往酶解溶液中加入占溶液重量1-10％的铁苋菜发酵提取液以及1-8％的海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液；
(5)将混合溶液熬制、过滤、离心得上清液，再经二次过滤、灌装、灭菌，即得兽用解毒口服液。
进一步改进在于，所述药材原料按重量百分比由板蓝根30-40％、金银花30-40％、大青叶10-20％、黄芪10-20％组成。
进一步改进在于，所述复合酶由纤维素酶和果胶酶组成，且其中纤维素酶的酶活为(16-22)×104U/g，果胶酶的酶活为(2-5)×104U/g。
进一步改进在于，所述铁苋菜发酵提取液通过以下步骤制得：
(1)取铁苋菜新鲜的茎，使用去离子水清洗干净，置于50-70℃温度下烘干至恒重，再切成1-10cm长的段，然后加入含有4-8wt％乙醇的水溶液，浸泡1-2h；
(2)将浸泡后的铁苋菜取出打浆，再加1-3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为(1.5-4)×106cfu/g，再加入占总体系0.5-0.8wt％的玉米糖浆，控制温度为40-50℃，发酵12-18h，得铁苋菜发酵液；
(3)将铁苋菜发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得铁苋菜发酵提取液。
进一步改进在于，所述海带发酵提取液通过以下步骤制得：
(1)取新鲜海带，除杂粉碎后用含有3-5wt％乙醇、0.5-1.5wt％氯化钠、0.5-1.2wt％柠檬酸的水溶液浸泡1-2h；
(2)将浸泡后的海带取出，用流水冲洗后打浆，再加1-3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为(1.5-4)×106cfu/g，再加入占总体系0.5-0.8wt％的玉米糖浆，控制温度为40-50℃，发酵6-24h，得海带发酵液；
(3)将海带发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得海带发酵提取液。
本发明还提供了一种兽用解毒口服液，所述兽用解毒口服液通过上述所述方法制备而成。
本发明的有益效果在于：该兽用解毒口服液采用酶解后的中药药材为主料，并加入有铁苋菜发酵提取液和海带发酵提取液作为药效补充剂，使得该兽用解毒口服液在禽畜疾病的治疗效果以及治疗周期上得到明显改善，尤其是针对法氏囊病病毒，解毒效果突出，同时有助于促进禽畜的生长发育。
具体实施方式
下面结合实施例对本申请作进一步详细描述，有必要在此指出的是，以下具体实施方式只用于对本申请进行进一步的说明，不能理解为对本申请保护范围的限制，该领域的技术人员可以根据上述申请内容对本申请作出一些非本质的改进和调整。
各实施例中所用中药材购自安徽亳州中药材市场，所用生物酶均由诺维信(中国)生物技术有限公司生产。
实施例1
一种兽用解毒口服液的制备方法，步骤包括：
步骤一：称取药材原料，经除杂、粉碎、过筛得到原料粉末，药材原料按重量百分比由板蓝根30％、金银花30％、大青叶20％、黄芪20％组成；
步骤二：往原料粉末中加入6倍量的水加热至60℃，并恒温浸泡50min，得到药效溶液；
步骤三：待药效溶液自然冷却至45℃时，调节pH值至5.0，加入复合酶，恒温搅拌酶解1h，再升温至70℃进行酶的灭活处理，得到酶解溶液，其中，复合酶由纤维素酶和果胶酶组成，且其中纤维素酶的酶活为22×104U/g，果胶酶的酶活为5×104U/g；
步骤四：往酶解溶液中加入占溶液重量1％的铁苋菜发酵提取液以及8％的海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液；
铁苋菜发酵提取液通过以下步骤制得：(1)取铁苋菜新鲜的茎，使用去离子水清洗干净，置于50℃温度下烘干至恒重，再切成1cm长的段，然后加入含有4wt％乙醇的水溶液，浸泡2h；(2)将浸泡后的铁苋菜取出打浆，再加1倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为1.5×106cfu/g，再加入占总体系0.5wt％的玉米糖浆，控制温度为40℃，发酵18h，得铁苋菜发酵液；(3)将铁苋菜发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得铁苋菜发酵提取液。
海带发酵提取液通过以下步骤制得：(1)取新鲜海带，除杂粉碎后用含有3wt％乙醇、0.5wt％氯化钠、0.5wt％柠檬酸的水溶液浸泡2h；(2)将浸泡后的海带取出，用流水冲洗后打浆，再加1倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为1.5×106cfu/g，再加入占总体系0.5wt％的玉米糖浆，控制温度为40℃，发酵24h，得海带发酵液；(3)将海带发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得海带发酵提取液。
步骤五：将混合溶液熬制、过滤、离心得上清液，再经二次过滤、灌装、灭菌，即得兽用解毒口服液。
实施例2
一种兽用解毒口服液的制备方法，步骤包括：
步骤一：称取药材原料，经除杂、粉碎、过筛得到原料粉末，药材原料按重量百分比由板蓝根35％、金银花35％、大青叶15％、黄芪15％组成；
步骤二：往原料粉末中加入8倍量的水加热至70℃，并恒温浸泡40min，得到药效溶液；
步骤三：待药效溶液自然冷却至50℃时，调节pH值至6，加入复合酶，恒温搅拌酶解3h，再升温至80℃进行酶的灭活处理，得到酶解溶液，其中，复合酶由纤维素酶和果胶酶组成，且其中纤维素酶的酶活为19×104U/g，果胶酶的酶活为3.5×104U/g；
步骤四：往酶解溶液中加入占溶液重量5％的铁苋菜发酵提取液以及4％的海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液；
铁苋菜发酵提取液通过以下步骤制得：
(1)取铁苋菜新鲜的茎，使用去离子水清洗干净，置于60℃温度下烘干至恒重，再切成5cm长的段，然后加入含有6wt％乙醇的水溶液，浸泡1.5h；
(2)将浸泡后的铁苋菜取出打浆，再加2倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为2.5×106cfu/g，再加入占总体系0.6wt％的玉米糖浆，控制温度为45℃，发酵15h，得铁苋菜发酵液；
(3)将铁苋菜发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得铁苋菜发酵提取液。
海带发酵提取液通过以下步骤制得：
(1)取新鲜海带，除杂粉碎后用含有4wt％乙醇、1wt％氯化钠、0.9wt％柠檬酸的水溶液浸泡1.5h；
(2)将浸泡后的海带取出，用流水冲洗后打浆，再加1-3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为2.5×106cfu/g，再加入占总体系0.6wt％的玉米糖浆，控制温度为45℃，发酵18h，得海带发酵液；
(3)将海带发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得海带发酵提取液。
步骤五：将混合溶液熬制、过滤、离心得上清液，再经二次过滤、灌装、灭菌，即得兽用解毒口服液。
实施例3
一种兽用解毒口服液的制备方法，步骤包括：
步骤一：称取药材原料，经除杂、粉碎、过筛得到原料粉末，药材原料按重量百分比由板蓝根40％、金银花40％、大青叶10％、黄芪10％组成；
步骤二：往原料粉末中加入10倍量的水加热至80℃，并恒温浸泡30min，得到药效溶液；
步骤三：待药效溶液自然冷却至55℃时，调节pH值至5.5，加入复合酶，恒温搅拌酶解5h，再升温至90℃进行酶的灭活处理，得到酶解溶液，其中，复合酶由纤维素酶和果胶酶组成，且其中纤维素酶的酶活为16×104U/g，果胶酶的酶活为2×104U/g；
步骤四：往酶解溶液中加入占溶液重量10％的铁苋菜发酵提取液以及1％的海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液；
铁苋菜发酵提取液通过以下步骤制得：
(1)取铁苋菜新鲜的茎，使用去离子水清洗干净，置于70℃温度下烘干至恒重，再切成10cm长的段，然后加入含有8wt％乙醇的水溶液，浸泡1h；
(2)将浸泡后的铁苋菜取出打浆，再加3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为4×106cfu/g，再加入占总体系0.8wt％的玉米糖浆，控制温度为50℃，发酵12h，得铁苋菜发酵液；
(3)将铁苋菜发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得铁苋菜发酵提取液。
海带发酵提取液通过以下步骤制得：
(1)取新鲜海带，除杂粉碎后用含有5wt％乙醇、1.5wt％氯化钠、01.2wt％柠檬酸的水溶液浸泡1h；
(2)将浸泡后的海带取出，用流水冲洗后打浆，再加3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为4×106cfu/g，再加入占总体系0.8wt％的玉米糖浆，控制温度为50℃，发酵6h，得海带发酵液；
(3)将海带发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得海带发酵提取液。
步骤五：将混合溶液熬制、过滤、离心得上清液，再经二次过滤、灌装、灭菌，即得兽用解毒口服液。
对比例1
一种兽用解毒口服液的制备方法，其步骤与实施例2基本相同，唯一区别在于：步骤四中，往酶解溶液中加入占溶液重量9％的铁苋菜发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液。
对比例2
一种兽用解毒口服液的制备方法，其步骤与实施例2基本相同，唯一区别在于：步骤四中，往酶解溶液中加入占溶液重量9％的海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液。
一、药毒性试验
取实施例2制得的兽用解毒口服液，对其进行急性和长期毒性试验如下：
(1)急性毒性试验
进行小鼠灌胃给药急性毒性试验，因限于药物浓度和给药剂量无法增加，未能测出灌胃给药的半数致死量LD50，测得小鼠最大耐受量为260mL口服液/kg体重，相当于合理给药日用量(2mL口服液/kg体重)的130倍。给药14天后仍健康活泼，无一死亡，14天尸检未见内脏器官有异常改变，说明该解毒口服液动物急性给药安全。
(2)长期毒性试验
进行小鼠灌胃给药3周，日用量为10mL口服液/kg体重，停药2周，均未见明显的毒性反应。一般情况和行为表现均无异常变化；小鼠的体重及生长情况良好，未见明显异常情况发生；血液学、血液生化学、主要脏器器官系数等指标测定，与正常对照组比较无显著性变化；系统尸检和病理组织学检查未见明显病理性损害。说明该解毒口服液动物长期给药安全。
二、药效试验
(1)试验对象：250只10日龄健康的海兰蛋鸡(购自湛江市晋盛牧业科技有限公司)。喂养20日，期间饲料为不含任何抗菌药物的全价雏鸡料，自由饮水、采食，20日后进入试验，期间不用任何菌苗、疫苗及药物。
(2)试验过程：将250只雏鸡随机分为空白组(不接种毒株，不使用药物)；阳性组(接种毒株，不使用药物)；给药组A(接种毒株，用实施例2制得的药物进行给药)；给药组B(接种毒株，用对比例1制得的药物进行给药)；给药组C(接种毒株，用对比例2制得的药物进行给药)，共5组，每组50只。
其中，在接种毒株时，均用传染性法氏囊病毒毒株(毒号：BC-6/85，购自中国兽药监察所)按0.5ml/羽(空白组除外)接种，接种方式为滴鼻、点眼、经口内服同时进行，并在接种前称重。所有接种的蛋鸡在24h后，陆续出现精神萎靡，不愿走动，伏地昏睡，采食量下降、排泄白色和水样稀粪等症状，说明接种均成功。给药方式均为在饮水中添加，按每只0.8ml添加，集中饮用，一日2次，连用5天。
(3)试验结果：对各组蛋鸡进行检测，包括：①死亡率：在试验期间，鸡只出现法氏囊病的典型症状并死亡，尸体剖检有典型特征性病变，确定死亡数，根据每组死亡数计算死亡率。②有效率：在试验期间，临床症状明显好转，采食、饮水基本正常，粪便基本正常；剖检有少量尿酸盐沉着，法氏囊大小、色泽基本正常均判定为有效，据此计算有效率。③治愈率：在试验期间，用药后鸡只精神活泼，采食、饮水正常，羽毛有光泽，粪便正常；剖检无尿酸盐沉着，法氏囊大小、色泽正常均判定为治愈，据此计算治愈率。④增重率：根据开始时及试验结束时每只蛋鸡体重，计算每只蛋鸡的增重率，以空白组为基准，计算每组试验鸡的平均相对增重率。所有结果统计得到下表：
从上表可以看出，本发明制得的兽用解毒口服液(给药组A),其针对法氏囊病的治疗有效率达到100％，治愈率达到96％，死亡率为0，且增重率基本接近健康蛋鸡，效果显著。而通过对比给药组B和给药组C可以看出，仅采用铁苋菜发酵提取液和海带发酵提取液中的一种药效补充剂时，药效一般，与本发明方案差异明显。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (2)

1.一种兽用解毒口服液的制备方法，其特征在于，所述口服液用于治疗法氏囊病，口服液中加入有铁苋菜发酵提取液和海带发酵提取液作为药效补充剂，使其在禽畜疾病的治疗效果以及治疗周期上得到改善，同时促进禽畜的生长发育，制备步骤包括：
(1)称取药材原料，经除杂、粉碎、过筛得到原料粉末，所述药材原料按重量百分比由板蓝根30-40％、金银花30-40％、大青叶10-20％、黄芪10-20％组成；
(2)往原料粉末中加入6-10倍量的水加热至60-80℃，并恒温浸泡30-50min，得到药效溶液；
(3)待药效溶液自然冷却至45-55℃时，调节pH值至酸性，加入复合酶，恒温搅拌酶解1-5h，再升温至70-90℃进行酶的灭活处理，得到酶解溶液，所述复合酶由纤维素酶和果胶酶组成，且其中纤维素酶的酶活为(16-22)×104U/g，果胶酶的酶活为(2-5)×104U/g；
(4)往酶解溶液中加入占溶液重量1-10％的铁苋菜发酵提取液以及1-8％的海带发酵提取液，搅拌均匀得混合溶液；
所述铁苋菜发酵提取液通过以下步骤制得：①取铁苋菜新鲜的茎，使用去离子水清洗干净，置于50-70℃温度下烘干至恒重，再切成1-10cm长的段，然后加入含有4-8wt％乙醇的水溶液，浸泡1-2h；②将浸泡后的铁苋菜取出打浆，再加1-3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为(1.5-4)×106cfu/g，再加入占总体系0.5-0.8wt％的玉米糖浆，控制温度为40-50℃，发酵12-18h，得铁苋菜发酵液；③将铁苋菜发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得铁苋菜发酵提取液；
所述海带发酵提取液通过以下步骤制得：①取新鲜海带，除杂粉碎后用含有3-5wt％乙醇、0.5-1.5wt％氯化钠、0.5-1.2wt％柠檬酸的水溶液浸泡1-2h；②将浸泡后的海带取出，用流水冲洗后打浆，再加1-3倍质量的清水稀释，接种嗜酸乳杆菌至含量为(1.5-4)×106cfu/g，再加入占总体系0.5-0.8wt％的玉米糖浆，控制温度为40-50℃，发酵6-24h，得海带发酵液；③将海带发酵液先均质，再离心取上清液，最后灭菌即得海带发酵提取液；
(5)将混合溶液熬制、过滤、离心得上清液，再经二次过滤、灌装、灭菌，即得兽用解毒口服液。
2.一种兽用解毒口服液，其特征在于，所述兽用解毒口服液通过权利要求1所述方法制备而成。
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