CN113476358A - 一种积雪草活性物质的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种积雪草活性物质的提取方法,所述提取方法具体包括以下步骤:(Ⅰ)取积雪草原料进行处理得到积雪草粉末;(Ⅱ)取水、含有氨基的提取助剂以及步骤(Ⅰ)得到的积雪草粉末混合得到提取液进行浸提,最后得到积雪草活性物质,其中,所述含有氨基的提取助剂选自甜菜碱、三乙醇胺或尿素中的一种或多种组合。与现有技术相比,本发明提高了积雪草活性物质的提取效率,且添加的提取助剂为化妆品常规原料,用量少,在成品中含量少,无需分离,提取后的固体可直接用化妆品的生产。
Description
技术领域
本发明涉及生物提取技术领域,具体涉及一种积雪草活性物质的提取方法。
背景技术
积雪草为伞形科植物积雪草的干燥全草,又称落得打、崩大碗、半边钱,在我国作为药用植物使用已经有二千余年历史,为《中国药典》收载的常用中药。国内积雪草资源十分丰富,几乎遍布长江流域以南地区。积雪草具有清热利湿、解毒消肿之功效,适用于湿热黄疸、中暑腹泻、痈肿疮毒、跌打损伤。同时,积雪草也被广泛用于食材,比如用于凉茶,新鲜的积雪草叶片也可当作果汁来饮用。积雪草还对皮肤创伤有治疗作用,可以起到抗衰老、美白、抗氧化、修护皮肤损伤等美容护肤功效。
积雪草的药理及其他作用与它的化学成分即活性物质是密不可分的。积雪草的化学成分十分复杂,其主要成分有三萜类、多炔烯烃类黄酮类和挥发油类。积雪草的化学成分中,三萜皂苷及其皂苷元是生物活性研究较深入的一大类组分,积雪草原草中含有大量三萜酸和三萜皂苷(主要为积雪草酸和积雪草苷)。积雪草酸是积雪草中含量较高的乌苏烷型五环三萜酸。研究表明积雪草酸具有治疗皮肤创伤、抗抑郁、抗阿尔茨海默病以及保肝、保护心脑血管和诱导肿瘤细胞凋亡等多种作用。资料表明,积雪草酸是积雪草苷在胃肠道内代谢的活性形式,给药时用积雪草酸来代替积雪草苷,则使作用更直接,另外积雪草酸还可以制备一系列的衍生物,均具有活性作用。
传统的从积雪草中直接提取活性物质一般采用溶剂提取法,往往萃取时间长,需要使用大量溶剂,而且活性物质的提取率较低,含量不是很高。
发明内容
本发明的目的就是提供一种积雪草活性物质的提取方法,增加了积雪草活性物质的提取效率,且添加的提取助剂为化妆品常规原料,用量少,在成品中含量少,无需分离,提取后的固体可直接用化妆品的生产。
本发明的目的通过以下技术方案实现:
一种积雪草活性物质的提取方法,所述提取方法具体包括以下步骤:
(Ⅰ)取积雪草原料进行处理得到积雪草粉末;
(Ⅱ)取水、含有氨基的提取助剂以及步骤(Ⅰ)得到的积雪草粉末混合得到提取液进行浸提,最后得到积雪草活性物质,其中,所述含有氨基的提取助剂选自甜菜碱、三乙醇胺或尿素中的一种或多种组合。
步骤(Ⅰ)中,处理过程具体为:将积雪草原料依次进行粉碎、过筛、干燥和恒重。
步骤(Ⅱ)中,含有氨基的提取助剂的用量为积雪草粉末重量的0.1-30%。
当含有氨基的提取助剂为甜菜碱时,甜菜碱的用量为积雪草粉末重量的0.1-30%。
当含有氨基的提取助剂为三乙醇胺时,三乙醇胺的用量为积雪草粉末重量的0.1-20%。
当含有氨基的提取助剂为尿素时,尿素的用量为积雪草粉末重量的0.1-15%。
步骤(Ⅱ)中,水和积雪草粉末的液料比为19:1(mL/g)。
步骤(Ⅱ)中,采用恒温水浴法进行浸提,浸提的温度为80℃,浸提的时间为0-1h,但不为0。
步骤(Ⅱ)中,浸提完成后,待提取液冷却至室温后,进行过滤得到滤液,再浓缩滤液得到积雪草活性物质。
步骤(Ⅱ)中,浸提完成后,待提取液冷却至室温后,离心并进行浓缩得到积雪草活性物质。
本发明以传统的水浸提法为基础(这种方法以水为溶剂,对物质进行加热或煮沸,有效成分溶解在水中,最后分离出对湿和热均稳定的物质),添加合适的含有氨基的提取助剂(为化妆品和食品领域中常用的添加剂),之后通过离心或过滤,得到积雪草活性物质,有效提高活性物质的提取效率。在提取过程中,提取助剂上的氨基发挥以下作用:1,氢键作用。能够与细胞壁、细胞膜上的羟基作用形成氢键,促进多酚结构的溶出。2.氨基具有正电性。氨基能够与带有负电荷的纤维素等结合,改变其电性。类似于共晶提取的原理。本发明根据助剂的种类不同,添加不同用量的助剂,可得到积雪草活性物质最大的得率,该法具有操作简单,提取率高,工艺流程中的控制条件也较易满足等特点。
附图说明
图1为对比案例1和实施案例5、6、17-19中不同用量的甜菜碱对积雪草活性物质提取得率的关系图;
图2为对比案例1和实施案例10、11、20、21中不同用量的三乙醇胺对积雪草活性物质提取得率的关系图;
图3为对比案例1和实施案例14-16中不同用量的尿素对积雪草活性物质提取得率的关系图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
对比案例1
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的清液,取用20mL的提取液(即上文的清液),移取至已知重量的表面皿上,放入80℃烘箱内烘干3h后,放入干燥中降温后3h后恒重,称量测定积雪草活性物质的重量为0.1866g,并计算得到积雪草活性物质的得率为18.66%,如图1、2、3所示。
积雪草活性物质得率的测定方法:取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水,在80℃恒温下搅拌1h,反应结束后,将积雪草粉末滤掉得清液。取用20mL的提取液(即上文的清液),移取至已知重量的表面皿上,放入80℃烘箱内烘干3h后,放入干燥中降温后3h后恒重,称量为X,计算公式如下(该公式是X×((10+190)/20)/10×100%简化得到的,190mL去离子水的质量看做是190g):
积雪草活性物质的得率=X×100%
对比案例2
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,在70℃恒温下搅拌3h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定积雪草活性物质的重量为0.1783g,并计算得到积雪草活性物质的得率为17.83%。
实施案例3
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.01g甜菜碱(占积雪草粉末重量0.1%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.2351g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为23.41%。
得到的提取物为含有用来辅助浸提的提取助剂和积雪草活性物质的固体混合物,由于提取助剂为化妆品等中常见的添加物,不影响积雪草活性物质的使用效果,所以无需将提取助剂从固体混合物中分离出来,积雪草活性物质的得率为提取物的重量减去提取助剂的重量,积雪草原料中含有的大量的纤维素以及水不溶物质已经在过滤或离心中被分离出去。积雪草活性物质含量的测试步骤为:在浸提完成后,分离不含固体粉末的清液。从每份不同助剂、不同比例添加量的实验组(即实施案例3-21,对比案例1-2参照该计算公式进行修改)中,取用20mL的提取液(即上文的清液),移取至已知重量的表面皿上,放入80℃烘箱内烘干3h后,放入干燥中降温,后称量直至恒重X。积雪草活性物质的得率为Y,计算公式如下:Y=(X--Z/10)×100%,其中,10为积雪草粉末的克数,Z为添加的含有氨基的提取助剂的克数,若在实际应用时,可根据实际添加的积雪草粉末的质量、所取的水的质量、移取的提取液的质量等对计算公式中的数值进行修改。
实施案例4
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.1g甜菜碱(占积雪草粉末重量1%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.2473g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为23.73%。
实施案例5
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.5g甜菜碱(占积雪草粉末重量5%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3100g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为26.00%,如图1所示。
实施案例6
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入3g甜菜碱(占积雪草粉末重量30%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.5435g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为24.35%,如图1所示。
实施案例7
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.5g甜菜碱(占积雪草粉末重量5%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行离心,含积雪草活性物质的上层清液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3413g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为29.13%。
实施案例8
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.01g三乙醇胺(占积雪草粉末重量0.1%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.2433g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为24.23%。
实施案例9
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.1g三乙醇胺(占积雪草粉末重量1%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.2659g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为25.59%。
实施案例10
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.5g三乙醇胺(占积雪草粉末重量5%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3301g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为28.01%,如图2所示。
实施案例11
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入2g三乙醇胺(占积雪草粉末重量20%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.4821g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为28.21%,如图2所示。
实施案例12
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.01g尿素(占积雪草粉末重量0.1%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.2483g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为24.73%。
实施案例13
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.1g尿素(占积雪草粉末重量1%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.2642g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为25.42%。
实施案例14
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入0.5g尿素(占积雪草粉末重量5%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3103g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为26.03%,如图3所示。
实施案例15
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入1g尿素(占积雪草粉末重量10%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3206g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为22.06%,如图3所示。
实施案例16
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入1.5g尿素(占积雪草粉末重量15%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3406g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为19.06%,如图3所示。
实施案例17
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入1g甜菜碱(占积雪草粉末重量10%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3601g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为26.01%,如图1所示。
实施案例18
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入1.5g甜菜碱(占积雪草粉末重量15%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.4004g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为25.04%,如图1所示。
实施案例19
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入2g甜菜碱(占积雪草粉末重量20%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.4708g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为27.08%,如图1所示。
实施案例20
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入1g三乙醇胺(占积雪草粉末重量10%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.3811g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为28.11%,如图2所示。
实施案例21
一种积雪草活性物质的提取方法,包括以下步骤:
1.使用粉碎机,将积雪草原料依次粉碎处理,过筛,干燥,恒重,得到积雪草粉末。
2.取干净250mL烧瓶,加入10.0g积雪草粉末,再加入190mL去离子水得到提取液,加入1.5g三乙醇胺(占积雪草粉末重量15%)在80℃恒温下搅拌1h,提取结束。
3.将提取结束的提取液进行过滤,将积雪草粉末滤掉得到含积雪草活性物质的滤液,取20mL浓缩,测定提取物的重量为0.4401g,扣除提取助剂的重量,计算得到积雪草活性物质的得率为29.01%,如图2所示。
比较对比案例1、2以及实施案例3-21,可发现,将含有氨基的提取助剂与水、积雪草粉末混合,可促进积雪草活性物质的提取,提高积雪草活性物质的得率,并且根据提取助剂的种类不同(可为甜菜碱、三乙醇胺和尿素),添加不同用量的提取助剂(用量为积雪草粉末用量的1-30%),可得到积雪草活性物质最大的得率。
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改,并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此,本发明不限于上述实施例,本领域技术人员根据本发明的揭示,不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,所述提取方法具体包括以下步骤:
(Ⅰ)取积雪草原料进行处理得到积雪草粉末;
(Ⅱ)取水、含有氨基的提取助剂以及步骤(Ⅰ)得到的积雪草粉末混合得到提取液进行浸提,最后得到积雪草活性物质,其中,所述含有氨基的提取助剂选自甜菜碱、三乙醇胺或尿素中的一种或多种组合。
2.根据权利要求1所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,步骤(Ⅰ)中,处理过程具体为:将积雪草原料依次进行粉碎、过筛、干燥和恒重。
3.根据权利要求1所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,步骤(Ⅱ)中,含有氨基的提取助剂的用量为积雪草粉末重量的0.1-30%。
4.根据权利要求3所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,当含有氨基的提取助剂为甜菜碱时,甜菜碱的用量为积雪草粉末重量的0.1-30%。
5.根据权利要求3所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,当含有氨基的提取助剂为三乙醇胺时,三乙醇胺的用量为积雪草粉末重量的0.1-20%。
6.根据权利要求3所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,当含有氨基的提取助剂为尿素时,尿素的用量为积雪草粉末重量的0.1-15%。
7.根据权利要求1所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,步骤(Ⅱ)中,水和积雪草粉末的液料比为19:1(mL/g)。
8.根据权利要求1所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,步骤(Ⅱ)中,采用恒温水浴法进行浸提,浸提的温度为80℃,浸提的时间为0-1h。
9.根据权利要求1所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,步骤(Ⅱ)中,浸提完成后,待提取液冷却至室温后,进行过滤得到滤液,再浓缩滤液得到积雪草活性物质。
10.根据权利要求1所述的一种积雪草活性物质的提取方法,其特征在于,步骤(Ⅱ)中,浸提完成后,待提取液冷却至室温后,离心并进行浓缩得到积雪草活性物质。
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