CN113461680B - 4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种4‑羟基香豆素氮杂靛红衍生物及其制备方法和应用，以4‑羟基香豆素和氮杂靛红以及二溴丁烷或二溴己烷为原料，于非质子有机溶剂中在NaH作用下加热合成。本发明利用氮杂靛红这一类靛红衍生物与4‑羟基香豆素拼合进行药物设计与合成，获得一种新型4‑羟基香豆素氮杂靛红衍生物，并对其进行抗凝血活性实验，验证了该化合物具有良好的抗凝血活性。

Description

4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药化学领域，具体涉及4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
香豆素即苯并α-吡喃酮，可看作邻羟基肉桂酸的内酯，广泛分布于芸香科、伞形科、菊科等药用植物中，少数来源于微生物，1868年由W.H.Perkin首次人工合成。香豆素及其衍生物是一类重要的有机杂环化合物，多数具有明显的抗凝结、抗癌症及抗HIV等生物活性；其次，由于分子中存在C＝C双键、C＝O双键及内酯结构，因此香豆素类化合物在可见光范围内具有很强的荧光性，可作为激光染料和非线性光学生色团，是很好的荧光增白剂、激光染料、荧光探针及非线性光学材料。近年来香豆素类化合物被广泛应用在香料工业、医药工业及农药工业等方面，广大科研工作者对一系列结构新颖、具有学术价值和应用前景的香豆素类化合物进行了大量的研究。
靛红(isatin)，又名吲哚醌，是一种重要的天然产物，广泛分布于动植物和人体内。在爵床科植物马蓝(Baphicacanthus cusia(Neea)Bremek)、十字花科植物菘蓝(Isatisindigotica Fort.)等植物以及微生物的代谢产物中都发现有靛红存在。靛红及其衍生物具有多种生物活性，其在抗肿瘤、抗病毒、神经保护等方面的活性非常有意义。5-氮杂靛红或7-氮杂靛红是靛红的生物电子等排体，具有非常优异的生物学性能和成药潜力。
单独的氮杂靛红几乎不具有抗凝血活性，而香豆素虽然具有抗凝血效果，但是效果不佳，还有待提高。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物及其制备方法和应用，所述衍生物具有更高的抗凝血活性，可用于抗凝血药物制备。
本发明是通过以下技术方案来实现：
4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物，其结构式如式(a)、式(b)、式(c)或式(d)所示：
Figure BDA0003139186990000021
所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物的制备方法，以4-羟基香豆素和氮杂靛红以及二溴丁烷或二溴己烷为原料，于非质子有机溶剂中在NaH作用下加热合成。
优选的，4-羟基香豆素与1，4-二溴丁烷或1，6-二溴己烷的投料摩尔比为1:(0.5～0.75)。
优选的，4-羟基香豆素与氮杂靛红的摩尔比为1:(1～1.5)。
优选的，非质子有机溶剂为DMF。
优选的，包括如下步骤：
(1)将4-羟基香豆素和氮杂靛红加入非质子性溶剂中，并加入NaH，搅拌均匀，后再加入二溴丁烷或二溴乙烷，加热至60℃-100℃反应2-6小时；
(2)反应结束后纯化得到目标产物。
进一步的，步骤(1)中，搅拌在室温下进行。
进一步的，步骤(2)中，反应结束后加入水淬灭反应，再进行纯化。
进一步的，纯化具体是：向反应液中加入乙酸乙酯萃取，所得有机相使用无水硫酸钠干燥后经减压浓缩、过滤、柱层析分离提纯、干燥得到目标产物。
所述的4-羟基香豆素氮杂靛红在制备抗凝血药物中的应用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
本发明利用氮杂靛红这一类靛红衍生物与4-羟基香豆素拼合进行药物设计与合成，获得一种新型4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物，并对其进行抗凝血活性实验，验证了该化合物具有良好的抗凝血活性，对凝血的延长时间与单独的4-羟基香豆素和7-氮杂靛红显著提高，虽然7-氮杂靛红不能延长凝血时间，但是却能促进4-羟基香豆素对凝血的影响，使-羟基香豆素氮杂靛红衍生物对凝血延长时间进一步提高，4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物具有较强的开发应用前景，可望能进一步发展成为用于抗凝血作用药物的制备。
本发明采用“一锅多步”的方法制备4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物，实验步骤少，操作简单，转化率高。操作安全性高，反应条件温和，可实现反应原料的充分利用，适用于工业化生产。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。
本发明所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物，其结构式如式(a)、式(b)、式(c)或式(d)所示：
Figure BDA0003139186990000041
本发明的技术方案是以4-羟基香豆素、氮杂靛红和1，4-二溴丁烷或1，6-二溴己烷为原料，在催化剂催化下于有机溶剂中加热合成。
本发明提供的所述化合物的合成路线如下所示：
Figure BDA0003139186990000042
其中，n＝2或3；当X＝N时，Y＝C，为7-氮杂靛红；当Y＝N时，X＝C，为5-氮杂靛红。
为了实现上述合成路线，本发明的合成包括如下步骤：
(1)向反应器中按投料比加入4-羟基香豆素、氮杂靛红，与非质子性溶剂混合均匀，加入与4-羟基香豆素等物质的量NaH，室温下搅拌反应30分钟，后再加入二溴丁烷或二溴乙烷加热60℃-100℃反应2-6小时，4-羟基香豆素、氮杂靛红和二溴丁烷或二溴己烷的摩尔比为1:(1～1.5):(0.5～0.75)。反应过程中使用薄层色谱追踪，及时监测反应的进行程度。
(2)反应结束加入适量水淬灭反应，加入适量乙酸乙酯萃取，合并有机相，使用无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，减压干燥得到目标产物。
上述步骤(1)中，4-羟基香豆素与氮杂靛红的投料摩尔比范围优选为1:(1～1.5)，进一步优选为1:1.1。
上述步骤(1)中，4-羟基香豆素与1，4-二溴丁烷或1，6-二溴己烷的投料摩尔比范围优选为1:(0.5～0.75)，进一步优选为1:0.6。
上述步骤(1)中，非质子有机溶剂优选为DMF。
上述步骤(1)中，反应时间优化为4小时。
上述步骤(1)中，反应温度优化为80℃。
实施例1
化合物(a)的制备
Figure BDA0003139186990000051
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、5-氮杂靛红162.9mg(1.1mmoL)，于15mL DMF中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入154μL(1mmoL)1，6-二溴己烷。加热80℃反应4小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物156.1mg，收率39.8％。
化合物(a)：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ
(ppm):8.53(1H,s),8.51(1H,t),7.64(1H,d),7.45(1H,t),7.22((1H,t),7.22(1H,d),6.84(1H,d),5.18(1H,s),3.81(2H,m),3.77(2H,t).1.51(2H,m),1.32(2H,m),1.23(2H,m)1.09(2H,m)；13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ
(ppm):182.3,166.6,160.4,158.1,153.3,152.3,151.3,150.5,126.3,123.4,121.3,115.7,114.4,114.2,108.2,84.0,63.8,40.7,28.4,25.4,25.0,23.7.
实施例2
化合物(a)的制备
Figure BDA0003139186990000061
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、5-氮杂靛红177.7mg(1.2mmoL),于15mL四氢呋喃中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入200μL(1.3mmoL)1,6-二溴己烷。加热60℃反应6小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物134.5mg，收率34.3％。
实施例3
化合物(a)的制备
Figure BDA0003139186990000062
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、5-氮杂靛红192.6mg(1.3mmoL),于15mL乙腈中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入185μL(1.2mmoL)1,6-二溴己烷。加热70℃反应6小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物145.9mg，收率37.2％
实施例4
化合物(b)的制备
Figure BDA0003139186990000071
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、7-氮杂靛红163.9mg(1.1mmoL),于15mLDMF中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入154μL(1mmoL)1，6-二溴己烷。加热90℃反应4小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物151.8mg，收率38.7％。
化合物(b)：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):
8.07(1H,d),7.64(1H,d),7.52(1H,d),7.45(1H,t),7.22(1H,d),6.54(1H,t),5.18(1H,s),3.91(2H,t),3.77(2H,t),1.51(2H,m),1.32(2H,m),1.23(2H,m),1.09(2H,m)；13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ
(ppm):182.3,166.6,161.5,160.4,158.1,154.2,150.5,132.6,126.3,123.4,121.3,116.0,114.8,114.4,114.2,84.0,63.8,40.7,28.4,25.4,25.0.
实施例5
化合物(b)的制备
Figure BDA0003139186990000072
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、7-氮杂靛红207.4mg(1.4mmoL),于15mL乙腈中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入154μL(1mmoL)1,6-二溴己烷。加热80℃反应2小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物138.8mg，收率35.4％。
实施例6
化合物(b)的制备
Figure BDA0003139186990000081
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、7-氮杂靛红177.7mg(1.2mmoL),于15mL四氢呋喃中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入185μL(1.2mmoL)1,6-二溴己烷。加热60℃反应6小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物123.9mg，收率31.6％。
实施例7
化合物(c)的制备
Figure BDA0003139186990000082
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、5-氮杂靛红162.9mg(1.1mmoL),于15mLDMF中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入143μL(1.2mmoL)1，4-二溴丁烷。加热60℃反应4小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物138.7mg，收率38.1％。
化合物(c)：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.07(1H,d),7.64(1H,d),7.52(1H,d),7.45(1H,t),7.22(1H,m),7.22(1H,d),6,54(1H,t),5.18(1H,s),3.91(2H,t),3.77(2H,t),1.51(2H,m),1.32(2H,m)；13C-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):182.3,166.6,161.5,160.4,158.1,154.2,150.5,132.6,126.3,123.4,121.3,116.0,114.4,114.2,84.0,63.5,40.7,25.8,21.8.
实施例8
化合物(c)的制备
Figure BDA0003139186990000091
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、5-氮杂靛红177.7mg(1.2mmoL),于15mL四氢呋喃中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入155μL(1.3mmoL)1，4-二溴丁烷。加热60℃反应5小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物124.9mg，收率34.3％。
实施例9
化合物(c)的制备
Figure BDA0003139186990000101
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、5-氮杂靛红192.6mg(1.3mmoL),于15mL乙腈中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入167μL(1.4mmoL)1，4-二溴丁烷。加热70℃反应3小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物113.6mg，收率31.2％。
实施例10
化合物(d)的制备
Figure BDA0003139186990000102
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、7-氮杂靛红162.9mg(1.1mmoL),于15mL DMF中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入119μL(1mmoL)1,4-二溴丁烷。加热90℃反应6小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物132.2mg，收率36.3％。
化合物(d)：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.53(1H,s),8.51(1H,d),7.64(1H,d),7.45(1H,t),7.22(1H,t),7.22(1H,d),6.84(1H,d),5.18(1H,s),3.81(2H,t),3.77(2H,t),1.51(2H,m),1.32(2H,m)；13C-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):182.3,166.6,160.4,158.1,153.3,152.3,151.5,150.5,126.3,123.4,121.3,115.7,114.4,114.2,108.2,84.0,63.5,40.7,25.8,21.8.
实施例11
化合物(d)的制备
Figure BDA0003139186990000111
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、7-氮杂靛红192.6mg(1.3mmoL),于15mL乙腈中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入119μL(1mmoL)1,4-二溴丁烷。加热80℃反应4小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物122.7mg，收率33.7％。
实施例12
化合物(d)的制备
Figure BDA0003139186990000112
于50mL圆底烧瓶中，加入4-羟基香豆素162mg(1mmoL)、7-氮杂靛红177.7mg(1.2mmoL),于15mL四氢呋喃中混合均匀，加入NaH 24mg(1mmoL)，室温下搅拌反应30分钟后再加入143μL(1.2mmoL)1,4-二溴丁烷。加热60℃反应5小时，用薄层色谱监控反应，反应完全后，停止加热，撤去冷凝装置。加水淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后经减压浓缩，过滤，柱层析分离提纯，干燥得到目标化合物126.7mg，收率34.8％。
实施例13
研究化合物(a)和化合物(d)对小鼠凝血时间的影响：
本实施例中所述实验对象为ICR小鼠，体重18～22g，由西安交通大学医学院动物实验中心提供。
实验操作：取雄性ICR小鼠，选基础生理凝血时间在40～160s者用于实验，根据基础凝血时间随机分为5组，每组10只，空白组按0.1mL/10g灌胃生理盐水，其余各组均按等体积灌胃相应的药液，分别给化合物(a)和化合物(d)低剂量50mg/kg、中剂量100mg/kg、高剂量200mg/kg和阿司匹林50mg/kg，每天给药1次，连续给药7d。小鼠于末次给药前禁食不禁水12h，于末次给药后1h按毛细管法测小鼠凝血时间(末次给药后1h，用长10cm、内径1mm的玻璃毛细管插入小鼠眼内眦后静脉丛中，深约4～5mm，轻轻转动，自血液注满开始计时，取出毛细管平放于桌上，每隔约15s折断一端约0.5cm，并缓慢向左右拉开，观察折断处出现凝血丝所需时间)。
结果见表1，与空白组比较，化合物(a)和化合物(d)能显著延长小鼠凝血时间，而7-氮杂靛红单独不能延长凝血时间，4-羟基香豆素单独使用虽然能延长凝血时间，但是延长时间有限。将剂量换算为摩尔当量，4-羟基香豆素摩尔当量为0.25mol，化合物(a)剂量为50mg/kg时摩尔当量为0.13mol，化合物(a)剂量为100mg/kg时摩尔当量为0.255mol，化合物(d)剂量为50mg/kg时摩尔当量为0.14mol，化合物(d)剂量为100mg/kg时摩尔当量为0.27mol，从表1可以看出，使用相同摩尔当量的药物时，化合物(a)和化合物(d)对凝血的延长时间与单独的4-羟基香豆素和7-氮杂靛红显著提高，说明虽然7-氮杂靛红不能延长凝血时间，但是却能促进4-羟基香豆素对凝血的影响，使4-羟基香豆素对凝血延长时间进一步提高，阳性药阿司匹林也能显著延长小鼠凝血时间。
表1化合物(a)(d)对小鼠凝血时间的影响(Mean±SD，n＝10)
组别 剂量(mg/kg) 凝血时间(s)
空白 - 109.64±30.79
4-羟基香豆素 40 151.35±33.21
7-氮杂靛红 40 98.49±22.20
阿司匹林 40 192.54±36.98
化合物(a) 50 152.35±37.33
化合物(a) 100 201.47±42.76
化合物(a) 200 264.79±40.35
化合物(d) 50 141.74±39.67
化合物(d) 100 184.81±43.49
化合物(d) 200 255.19±40.37
实施例14
研究化合物(a)和化合物(d)对小鼠尾出血时间的影响：
实验操作：雄性ICR小鼠50只，随机分为5组，每组10只，给药方法和剂量同实施例13。各组动物禁食12h，然后分别给药1次。于灌胃后57～59min，将小鼠置于固定器中，使其尾部垂直，至灌胃后第60min，在尾尖处剪断鼠尾，每隔30s用滤纸轻吸尾尖血液，直至吸不出血液，记录断尾至出血停止时间间隔，即为出血时间。
结果见表2，与空白组比较，化合物(a)和化合物(d)能显著延长小鼠尾尖出血时间。而7-氮杂靛红单独不能延长延长小鼠尾尖出血时间，4-羟基香豆素单独使用虽然能延长小鼠尾尖出血时间，但是延长时间有限。将剂量换算为摩尔当量，4-羟基香豆素摩尔当量为0.25mol，化合物(a)剂量为50mg/kg时摩尔当量为0.13mol，化合物(a)剂量为100mg/kg时摩尔当量为0.255mol，化合物(d)剂量为50mg/kg时摩尔当量为0.14mol，化合物(d)剂量为100mg/kg时摩尔当量为0.27mol，从表2可以看出，使用相同摩尔当量的药物时，化合物(a)和化合物(d)对出血的延长时间与单独的4-羟基香豆素和7-氮杂靛红显著提高，说明虽然7-氮杂靛红不能延长出血时间，但是却能促进4-羟基香豆素对出血的影响，使4-羟基香豆素对出血延长时间进一步提高，阳性药阿司匹林也能显著延长小鼠尾尖出血时间。
表2化合物(a)(d)对小鼠尾尖出血时间的影响(Mean±SD，n＝10)
组别 剂量(mg/kg) 出血时间(min)
空白 - 3.78±1.89
4-羟基香豆素 40 5.52±2.01
7-氮杂靛红 40 3.28±1.30
阿司匹林 40 9.04±3.52
化合物(a) 50 6.56±3.24
化合物(a) 100 8.85±3.73
化合物(a) 200 12.17±4.03
化合物(d) 50 6.47±3.19
化合物(d) 100 8.91±3.82
化合物(d) 200 11.47±4.15
实施例15
研究化合物(a)和化合物(d)对小鼠凝血功能的影响：
研究化合物(a)和化合物(d)对小鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血激酶时间(APTT)的影响：雄性ICR小鼠50只，随机分为5组，每组10只，给药方法和剂量同实施例13。动物每天给药1次，连续给药7d。小鼠末次给药前禁食不禁水12h，于末次给药1h后摘眼球取血，取血约0.9mL，加入装有0.1mL 3.8％枸橼酸钠抗凝剂的试管中，混匀，3000r/m离心15min，得贫血小板血浆(platelet poor plasma，PPP)，置冰浴中备用。用凝固比浊法测定TT、PT和APTT。
研究化合物(a)和化合物(d)对血浆复钙时间(PRT)的影响：雄性ICR小鼠50只，随机分为5组，每组10只，给药方法、剂量、周期及取血方法同实施例13，血液与抗凝剂混匀后1000r/min离心10min，得富血小板血浆(platelet rich plasma，PRP)，置冰浴中备用。酶标板置37℃水面上，每孔加入混合血浆100μL，温育1min，迅速加入37℃预温0.025moL/L氯化钙溶液100μL立即混匀，加氯化钙时开动秒表，每隔10s以钢丝轻轻向上挑动，至生成固体细丝即纤维蛋白终止计时，重复以上操作2次，自加钙至纤维蛋白形成的时间即为PRT。
研究结果见表3，与空白组比较，化合物(a)和化合物(d)能延长TT、APTT、PRT，但对PT作用不明显，阳性药阿司匹林能显著延长TT、PT、PRT和APTT。而7-氮杂靛红单独能延长TT和APTT，对PT、PRT没有延长作用，4-羟基香豆素单独使用能延长TT、PRT，对PT和APTT没有延长作用，以摩尔量计算，化合物(a)和化合物(d)对TT、APTT、PRT的延长作用明显优于单独的7-氮杂靛红和4-羟基香豆素。
表3化合物(a)和化合物(d)对小鼠凝血功能的影响(Mean±SD，n＝10)
Figure BDA0003139186990000151
Figure BDA0003139186990000161
综上所述，本发明的一类4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物可作为抗凝血候选药物，并进一步进行临床前研究。

Claims (7)

1.4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物，其特征在于，其结构式如式(a)、式(b)、式(c)或式(d)所示：
Figure FDA0003623482050000011
2.权利要求1所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物的制备方法，其特征在于，以4-羟基香豆素和氮杂靛红以及二溴丁烷或二溴己烷为原料，于非质子有机溶剂中在NaH作用下加热合成；非质子有机溶剂为DMF、四氢呋喃或乙腈。
3.根据权利要求2所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物的制备方法，其特征在于，4-羟基香豆素与1，4-二溴丁烷或1，6-二溴己烷的投料摩尔比为1:(0.5～0.75)。
4.根据权利要求2所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物的制备方法，其特征在于，4-羟基香豆素与氮杂靛红的摩尔比为1:(1～1.5)。
5.根据权利要求2所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将4-羟基香豆素和氮杂靛红加入非质子性溶剂中，并加入NaH，搅拌均匀，后再加入二溴丁烷或二溴乙烷，加热至60℃-100℃反应2-6小时；
(2)反应结束后纯化得到目标产物；
步骤(2)中，反应结束后加入水淬灭反应，再进行纯化；纯化具体是：向反应液中加入乙酸乙酯萃取，所得有机相使用无水硫酸钠干燥后经减压浓缩、过滤、柱层析分离提纯、干燥得到目标产物。
6.根据权利要求5所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，搅拌在室温下进行。
7.权利要求1所述的4-羟基香豆素氮杂靛红衍生物在制备抗凝血药物中的应用。
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