CN113413400A - 用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于皮肤治疗制剂技术领域,公开了用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,本发明提供了用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,包括植物乳杆菌NumRes8、鼠李糖乳杆菌HN001、木耳多糖、长双歧杆菌BB536、大豆皂苷、丁酸梭菌JC10390;该微生物复合制剂通过调节患者免疫反应来改善患者的生活质量,有效缓解特应性皮炎患者的症状,且里面涉及的原料容易获得,成本低,对人体无副作用,为特应性皮炎的治疗和干预提供新的方案。
Description
技术领域
本发明涉及皮肤治疗制剂技术领域,更具体地,涉及用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂。
背景技术
特应性皮炎是一种慢性、复发性、炎症性皮肤病,临床以反复发作的慢性湿疹样皮疹为主要表现,伴有显著的皮肤干燥和瘙痒。由于患者常合并过敏性鼻炎、哮喘等其他特应性疾病,故被认为是一种系统性疾病。
特应性皮炎的特征为患者或其家族中可见明显的“特应性”特点:①容易罹患哮喘、过敏性鼻炎、湿疹的家族性倾向;②对异种蛋白过敏;③血清中IgE高;④血液嗜酸性粒细胞增多。典型的特应性皮炎具有特定的湿疹临床表现和上述四个特点。又称异位性皮炎、特应性湿疹、Besnier体质性痒疹或遗传过敏性湿疹。临床分三期:婴儿期呈急性或亚急性湿疹状;儿童期及青年期则为亚急性或慢性湿疹状。
目前关于特应性皮炎的治疗药物分为以下几类:1、糖皮质激素,例如环孢素、硫唑嘌呤;它在体内具有调节糖类、脂肪和蛋白质的合成和代谢作用,最重要的是可以在过敏性疾病中发挥抑制免疫应答和抗过敏的效应;2、免疫抑制剂,利用免疫抑制剂可以调节和抑制免疫信号传导过程中钙调磷酸酶的活性,从而抑制活化T淋巴细胞核因子必需的基因转录,进而抑制在免疫反应中对细胞因子如IL-3、IL-4、GM-CSF等的诱导表达,最终发挥免疫抗炎作用;3、中医药如培土清心方也用于治疗特应性皮炎;4、生物制剂如重组人干扰素γ(IFN-γ)、IL-4受体拮抗剂等。上述几类治疗药物可能存在副作用,例如长时间使用糖皮质激素会导致皮肤萎缩、加重感染等情况,免疫抑制剂的使用、生物制剂的使用可能导致体内产生其他未知的影响
目前为止,特应性皮炎目前还无法治愈,可严重影响生存质量,但是有效且规范的治疗能缓解症状,减少复发;因此对于特应性皮炎的日常治疗管理和干预具有积极的意义。
发明内容
本发明为了克服现有技术中存在的上述问题,首先提供了用于治疗特应性皮炎的微生物制剂。
本发明的目的通过以下技术方案实现:
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,包括植物乳杆菌NumRes8、鼠李糖乳杆菌HN001、木耳多糖、长双歧杆菌BB536、大豆皂苷、丁酸梭菌JC10390。
特应性皮炎属于过敏性疾病的范畴,近年来关于特应性皮炎的研究机制发现:超过80%的特应性皮炎患者伴有特异性IgE水平增高,进一步的,分析这一现象背后的原因,特应性皮炎的发生涉及到免疫反应的多个环节,皮肤抗原呈递细胞如朗格汉斯细胞、树突细胞对过敏原的摄取和提呈,肥大细胞和嗜酸性粒细胞过量募集,导致角质形成细胞过度产生炎症介质和细胞因子,Th17/Th22平衡失调,但总的来说,核心的机制是以Th2型反应为主导的免疫异常;在此过程中,一些免疫炎症因子如IL-4、IL-5和IL-13的产生加剧了Th2型反应,从而导致皮肤屏障受损;另外,由于Th2型细胞因子的大量表达,CD4+T细胞与B细胞在细胞因子IL-4的作用下相互作用,是的分泌特异性IgE的浆细胞产生,从而导致IgE水平升高。
现有研究表明,益生菌的摄入有助于缓解或者预防过敏性疾病,但是具体的益生菌是通过何种方式起到预防和治疗过敏性疾病的作用目前还没有确切的结论,另外,益生菌参与调节宿主机体的免疫系统与益生菌本身的基因组和宿主机体的基因组以及环境和益生菌的剂量都有很大的关系,并且还有宿主个体差异性,因此,针对具体种类的过敏性疾病,需要通过大量的研究,并经过统计得出具有治疗、辅助治疗、缓解过敏性疾病的具体微生物的种类。
本发明上述微生物复合制剂中,植物乳杆菌NumRes8可以减少动物血液中IL-4、IL-5的量,从而缓解皮肤的过敏反应程度;木耳多糖能够抑制炎症细胞因子如IL-4的释放,同时还能够抑制IgE抗体产生,从而减轻过敏反应;长双歧杆菌BB536能够提高皮肤组织IFN-γ的表达量,且能抑制IL-4、IL-5的分泌;鼠李糖乳杆菌HN001能够降低血清中IgE的水平;大豆皂苷有助于增强皮肤组织IFN-γ的表达,从而抵抗引起的皮肤瘙痒;丁酸梭菌JC10390有助于提高皮肤组织中IL-10、IFN-γ的表达,从而刺激Th1型免疫反应,调节Th1/Th2免疫平衡。
优选的,所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,由以下份数的各物质组成:
优选的,所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂中植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.1~3.8×1012个/g。
优选的,所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂中鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为2.5~3.1×1012个/g。
优选的,所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂中长双歧杆菌BB536的灭活菌量为3.5~4.8×1011个/g。
优选的,所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂中丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为1.5~2.8×109个/g。
优选的,所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂的剂型是液体剂型、气体剂型和固体剂型。
本发明上述微生物复合制剂能够通过口服给药,或者粘膜给药的方式给药,从而用于治疗和/或辅助治疗和/或预防特应性皮炎。
因此,本发明还提供上述微生物复合制剂在制备治疗和/或缓解和/或预防特应性皮炎的药物中的应用。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
本发明提供了用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,包括植物乳杆菌NumRes8、鼠李糖乳杆菌HN001、木耳多糖、长双歧杆菌BB536、大豆皂苷、丁酸梭菌JC10390;上述微生物复合制剂中,植物乳杆菌NumRes8可以减少动物血液中IL-4、IL-5的量,从而缓解皮肤的过敏反应程度;木耳多糖能够抑制炎症细胞因子如IL-4的释放,同时还能够抑制IgE抗体产生,从而减轻过敏反应;长双歧杆菌BB536能够提高皮肤组织IFN-γ的表达量,且能抑制IL-4、IL-5的分泌;鼠李糖乳杆菌HN001能够降低血清中IgE的水平;大豆皂苷有助于增强皮肤组织IFN-γ的表达,从而抵抗引起的皮肤瘙痒;丁酸梭菌JC10390有助于提高皮肤组织中IL-10、IFN-γ的表达,从而刺激Th1型免疫反应,调节Th1/Th2免疫平衡。
该微生物复合制剂通过调节患者免疫反应来改善患者的生活质量,有效缓解特应性皮炎患者的症状,且里面涉及的原料容易获得,成本低,对人体无副作用,为特应性皮炎的治疗和干预提供新的方案。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是,对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明,但并不构成对本发明的限定。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实验例中所使用的试验方法如无特殊说明,均为常规方法;所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,由以下份数的各物质组成:2份植物乳杆菌NumRes8、1份鼠李糖乳杆菌HN001、2份木耳多糖、3份长双歧杆菌BB536、1份大豆皂苷、1份丁酸梭菌JC10390。
其中,植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.5×1012个/g;鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为2.5×1012个/g;长双歧杆菌BB536的灭活菌量为3.5×1011个/g;丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为2.0×109个/g。
实施例2
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,由以下份数的各物质组成:3份植物乳杆菌NumRes8、2份鼠李糖乳杆菌HN001、1份木耳多糖、2份长双歧杆菌BB536、1份大豆皂苷、1份丁酸梭菌JC10390。
其中,植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.1×1012个/g;鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为2.8×1012个/g;长双歧杆菌BB536的灭活菌量为4.0×1011个/g;丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为1.5×109个/g。
实施例3
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,由以下份数的各物质组成:4份植物乳杆菌NumRes8、1份鼠李糖乳杆菌HN001、1份木耳多糖、3份长双歧杆菌BB536、0.5份大豆皂苷、0.5份丁酸梭菌JC10390。
其中,植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.1×1012个/g;鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为3.1×1012个/g;长双歧杆菌BB536的灭活菌量为4.0×1011个/g;丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为2.8×109个/g。
实施例4
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,由以下份数的各物质组成:2份植物乳杆菌NumRes8、1份鼠李糖乳杆菌HN001、1份木耳多糖、4份长双歧杆菌BB536、1份大豆皂苷、1份丁酸梭菌JC10390。
其中,植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.8×1012个/g;鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为3.0×1012个/g;长双歧杆菌BB536的灭活菌量为3.5×1011个/g;丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为2.5×109个/g。
实施例5
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,由以下份数的各物质组成:3份植物乳杆菌NumRes8、2份鼠李糖乳杆菌HN001、2份木耳多糖、2份长双歧杆菌BB536、0.5份大豆皂苷、0.5份丁酸梭菌JC10390。
其中,植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.5×1012个/g;鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为3.1×1012个/g;长双歧杆菌BB536的灭活菌量为4.8×1011个/g;丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为2.8×109个/g。
对比例1
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,配方与实施例2基本相同,唯一不同的是,本对比例中,所用的植物乳杆菌的菌株为植物乳杆菌L-137。
对比例2
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,配方与实施例2基本相同,唯一不同的是,本对比例中,所用的长双歧杆菌的菌株为长双歧杆菌E4。
对比例3
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,配方与实施例2基本相同,唯一不同的是,本对比例中,所用的鼠李糖乳杆菌的菌株为鼠李糖乳杆菌LGG。
对比例4
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,配方与实施例2基本相同,唯一不同的是,本对比例中,不含有木耳多糖。
对比例5
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,配方与实施例2基本相同,唯一不同的是,本对比例中,不含有大豆皂苷。
对比例6
用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,配方与实施例2基本相同,唯一不同的是,本对比例中,将木耳多糖替换为桑黄多糖。
实验例
一、动物实验
1、实验动物:SPF6周龄雄性小鼠。
2、实验设计:实验小鼠正常喂食和饲养,实验共计4周,第一周为小鼠适应期,第二周开始,干预组可以根据实际配方灌胃(0.1mL/kg体重),空白组,模型组灌胃等量的无菌生理盐水,阳性药物组灌胃等量的Keto药物溶液(1mg/kg体重),直至实验结束。
小鼠造模实验参考现有技术,步骤为:造模之前利用剃毛器将小鼠背部皮肤毛发剃去,大小为长2.5cm×宽1.5cm。利用丙酮和橄榄油以4:1比例配制成基础液,然后利用DNFB和基础液配制0.5%和0.2%的DNFB致敏药物,第3周开始进行造模,造模的第1d,利用25μL浓度为0.5%的DNFB药物对小鼠背部皮肤以及右耳进行涂抹致敏,之后第5、8、11、14d利用20μL浓度为0.2%的DNFB溶液涂抹小鼠背部皮肤及右耳诱发特应性皮炎,空白组小鼠涂抹等量的基础液。造模结束后利用异氟烷麻醉小鼠并处死,小鼠血液在室温下以5600r/min离心15min收集血清,并取下小鼠背部皮肤,进行匀浆用于免疫炎症因子的检测。
3、小鼠耳朵肿胀程度测定
小鼠处死后,经过专门培训的人员利用电子游标卡尺对小鼠右耳中间部位的厚度进行测量,并记录。
4、免疫炎症因子的测定:根据现有试剂盒进行操作。
二、实验结果
1、特应性皮炎小鼠耳朵肿胀程度的影响
实验结果如表1,从表1中可以看出,本发明采用的技术方案的具体实施方式(实施例1到实施例5)均有较为显著的缓解小鼠耳朵肿胀程度的作用,相比较与对比例1到对比例3,本发明所采用的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、丁酸梭菌和长双歧杆菌均为特定的种类,其他种类的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌对于小鼠耳朵肿胀并无缓解作用,这也说明了对于特应性皮炎,需要筛选特殊的益生菌的种类。
另外,相比较于对比例4到对比例6,可以看出,木耳多糖、大豆皂苷对于进一步缓解小鼠耳朵的肿胀程度起到显著的促进作用,且其他多糖,例如桑黄多糖不具备与木耳多糖相同的缓解作用。
表1
2、特应性皮炎小鼠免疫炎症指标的影响
结果如表2,从表2可以看出,本发明采用的技术方案的具体实施方式(实施例1到实施例5)均有较为显著的降低Th2免疫反应相关的炎症因子(IL-4和IL-5)的作用,且实施例的配方使得炎症因子的水平下降至与阳性药物相当,甚至比阳性药物组更低的水平,表明本发明的配方可用于治疗和/或缓解和/或辅助治疗特应性皮炎。
对比例4到对比例6的数据表明了木耳多糖能够抑制炎症细胞因子如IL-4的释放,同时还能够抑制IgE抗体产生,从而减轻过敏反应;大豆皂苷有助于增强皮肤组织IFN-γ的表达。另外,本发明的配方也显著降低了IgE的水平,提升了IFN-γ的表达,从而提高了Th1型免疫反应的能力。
表2
分组 | IL-4(pg/mL) | IL-5(pg/mL) | IgE(pg/mL) | IFN-γ(pg/mg) |
实施例1 | 2.8±0.1 | 3.8±0.2 | 17.1±0.1 | 98±1.6 |
实施例2 | 2.6±0.2 | 3.6±0.1 | 16.5±0.2 | 105±1.5 |
实施例3 | 2.7±0.2 | 3.7±0.3 | 16.8±0.3 | 100±2.1 |
实施例4 | 2.8±0.3 | 3.8±0.2 | 16.9±0.1 | 82±1.6 |
实施例5 | 3.0±0.2 | 4.0±0.2 | 17.0±0.2 | 85±1.5 |
对比例1 | 5.2±0.1 | 5.5±0.1 | 18.5±0.2 | 88±2.3 |
对比例2 | 5.1±0.2 | 5.2±0.3 | 18.4±0.1 | 86±2.0 |
对比例3 | 5.3±0.1 | 5.6±0.2 | 18.7±0.3 | 90±1.9 |
对比例4 | 5.6±0.3 | 5.8±0.2 | 19.0±0.2 | 89±1.8 |
对比例5 | 5.3±0.2 | 5.5±0.3 | 18.6±0.2 | 95±2.2 |
对比例6 | 5.5±0.3 | 5.7±0.1 | 18.8±0.1 | 91±2.5 |
空白组 | 4.3±0.2 | 4.4±0.2 | 17.8±0.2 | 110±1.5 |
模型组 | 5.8±0.1 | 6.1±0.2 | 20.2±0.2 | 80±2.0 |
阳性药物组 | 2.7±0.2 | 3.8±0.3 | 17.5±0.3 | 94±1.8 |
Claims (8)
1.用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,其特征在于,包括植物乳杆菌NumRes8、鼠李糖乳杆菌HN001、木耳多糖、长双歧杆菌BB536、大豆皂苷、丁酸梭菌JC10390。
3.根据权利要求2所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,其特征在于,植物乳杆菌NumRes8的灭活菌量为3.1~3.8×1012个/g。
4.根据权利要求2所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,其特征在于,鼠李糖乳杆菌HN001的灭活菌量为2.5~3.1×1012个/g。
5.根据权利要求2所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,其特征在于,长双歧杆菌BB536的灭活菌量为3.5~4.8×1011个/g。
6.根据权利要求2所述的用于治疗特应性皮炎的微生物复合制剂,其特征在于,丁酸梭菌JC10390的灭活菌量为1.5~2.8×109个/g。
7.根据权利要2所述微生物复合制剂,其特征在于,制剂的剂型是液体剂型、气体剂型和固体剂型。
8.权利要求1至7任一项所述微生物复合制剂在制备治疗和/或缓解和/或预防特应性皮炎的药物中的应用。
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