CN113398075A - 多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物及其制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

一种多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物、制备该药物组合物的方法及其在制备治疗癌症药物中的用途。该药物组合物包含多西他赛、白蛋白和氨基酸，其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，优选1∶1～20∶1。

Description

多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物及其制备方法及应用
本申请是2016年3月28日提交的、发明名称为“多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物及其制备方法及应用”的中国专利申请201680008550.5的分案申请。
技术领域
本发明属于多西他赛的药物组合物领域，具体涉及多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物及其制备方法及应用，特别涉及稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物及其制备方法及应用。
背景技术
多西他赛属于紫杉烷类药物，其作用机理主要是通过干扰细胞有丝分裂和促使微管装配并阻止微管分拆，由此抑制肿瘤细胞分化，最终导致肿瘤细胞死亡。多西他赛目前已由全球各主要国家批准用于乳腺癌、非小细胞肺癌和前列腺癌等多种适应症的治疗，并且是这些癌症治疗的最常用或标准疗法之一。另外，在之后的临床研究中，多西他赛还广泛用于治疗胃癌、头颈部肿瘤、食管癌、卵巢癌等的研究。日后，将多西他赛用于这些适应症的治疗有望在欧美获得批准。
多西他赛的水溶性较差，目前市售的多西他赛制剂为浓缩输注用液体剂型，常规推荐剂量方案为每3周1次1小时静脉输注75mg/m2，多西他赛注射剂是采用吐温-80作溶剂溶解多西他赛，形成1支药物浓缩液，另同时再配制含13％乙醇的稀释液一支。但是，由于吐温-80具有溶血性，静脉注射时容易引起包括呼吸困难、低血压、血管性水肿、风疹、休克等的过敏反应，故临床给药时需预先施用药物防止过敏。此外，吐温-80黏性大，这给临床使用带来极大不便。
为了解决多西他赛注射液毒副作用等缺陷，CN103830181A报道一种环糊精包合多西他赛冻干脂质体，其利用环糊精包合提高多西他赛稳定性，并通过脂质体微粒系统改善靶向性，降低毒副作用。然而环糊精本身的毒性限制了其应用。CN101773465A报道一种氨基酸稳定聚合物胶束系统，并开发了多西他赛聚合物胶束；结果发现：氨基酸-聚合物胶束的物理外观可稳定5天以上，而无氨基酸的聚合物胶束只能稳定30分钟。然而聚合物胶束本身所使用的高分子聚合物(如mPEG-PLA等)被静脉注射入体内，其降解非常缓慢，甚至长达1年以上；鉴于这些安全隐患，美国FDA还未批准任何多西他赛聚合物胶束产品上市。因此这些微粒系统虽然提高靶向性，降低毒副作用，但都鉴于本身缺陷限制了其应用。
专利申请CN103054798A公开了多西他赛白蛋白纳米粒(ABI-008)，其在多西他赛和白蛋白的组合物中添加柠檬酸(盐)，从而提高了多西他赛白蛋白纳米粒的溶液物理稳定性，使其在重建或再水化之后没有显示沉淀或沉降的现象保持至少达8小时。
然而，对于提高多西他赛的稳定性，除了控制其溶液颗粒物理稳定性之外，更为重要的是降低多西他赛化学降解的情况。目前，现有技术对降低多西他赛的化学降解方面的研究很少，也尚未得到很好的改善方法。
多西他赛本身在不同情况下可经历多种降解，这些降解产物使得多西他赛的活性和/或毒性有相应的变化，甚至对其活性和/或毒性有重大的影响。影响多西他赛降解的因素主要有温度、酸性和碱性溶媒、氧化剂、还原剂和光等。
在碱性、中性或强酸性介质中，多西他赛的主要降解途径之一是7位羟基的差向异构化，其通过逆醛醇反应生成7-表-多西他赛。
Bornique等人(Drug Metabolism and Disposition，Vol.30，No.11，pp.1149-1152，2002.)研究了多西他赛和7-表-多西他赛与重组人细胞色素P4501B1(hCYP1B1)的相互作用。hCYP1B1为人肿瘤细胞中常见的细胞色素，其主要与化疗药物(包括多西他赛)的耐药性有关。他们通过体外实验证明了7-表-多西他赛可以使hCYP1B1的活性增加7倍多，从而证实了多西他赛的降解产物7-表-多西他赛可以使多西他赛的活性降低。
CN101415416A公开了通过添加pKa为2.5至4.5的有机酸作为多西他赛降解抑制剂来抑制多西他赛和聚山梨酯80的药物组合物中7-表-多西他赛的产生。
然而，本发明的发明人通过实验证明在多西他赛和白蛋白的组合物中加入酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸或其他pKa为2.5至4.5的有机酸等物质并不能有效抑制7-表-多西他赛的产生，甚至出现7-表-多西他赛生成增多的现象。这表明上述物质导致所述组合物的化学稳定性变差，影响最终制剂的安全性。
CN103054798A公开了在多西他赛和白蛋白的组合物中添加柠檬酸(盐)等稳定剂。所述稳定剂虽然提高了多西他赛白蛋白纳米粒的溶液的物理稳定性，但没有提及其对抑制7-表-多西他赛产生的作用。
但通过实验证明：常规的稳定剂(例如柠檬酸(盐)等)并不总能有效地抑制7-表-多西他赛的产生，有时甚至出现其产生更快的现象。在存储过程中，所产生的7-表-多西他赛远远超出2.0％，给临床用药的安全性带来隐患。
在寻求可以抑制7-表-多西他赛生成的方法的过程中，难题之一在于：在多西他赛白蛋白纳米粒存储过程中，由于白蛋白多肽结构中存在大量氢键，不利于多西他赛稳定而加速逆醛醇反应，从而导致7位羟基的差向异构化，使得7-表-多西他赛杂质形成并稳定增长。
因此，找到可以抑制多西他赛的药物组合物中7-表-多西他赛生成的方法是本领域亟待解决的问题。
发明内容
针对现有技术的缺点，根据本发明的一个方面，其提供多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，其具有增强的稳定性，所述药物组合物包括：
多西他赛，
白蛋白，和
氨基酸，
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1。
根据本发明的另一方面，其提供上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，其中氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1。
根据本发明的另一方面，其提供上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，其中所述药物组合物还包括蛋白结构展开剂。
根据本发明的另一方面，其提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法。
根据本发明的另一方面，其提供包含上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的制剂，所述制剂还包含药学上可接受的载体和/或辅料。
根据本发明的另一方面，其提供上述药物组合物或上述制剂在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
根据本发明的再一个方面，其提供治疗癌症的方法，所述方法包括向需要其的个体给药有效量的上述药物组合物或上述制剂。
根据本发明的再一个方面，其提供上述药物组合物或上述制剂，其用于治疗癌症。
发明人惊讶地发现，选择氨基酸类物质加入能够使得多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物长时间稳定，显著抑制了所述药物组合物中7-表-多西他赛的生成。根据本发明的实施方案，在多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中加入氨基酸可使得将所述组合物储存24个月(例如在2-8℃下)之后，7-表-多西他赛的含量仍然能保持在1％以下。特别地，当所用氨基酸为精氨酸时，在甚至储存30个月(例如在2-8℃下)之后，7-表-多西他赛的含量优选仅为1％以下，例如约0.98％、约0.83％、约0.75％、约0.72％或更低。
附图说明
图1为实施例1-c的组合物治疗非小细胞肺癌细胞A549的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型的药效结果图。
具体实施方式
药物组合物及其制备方法
本发明的一个实施方案提供多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，所述药物组合物包括：
多西他赛，
白蛋白，和
氨基酸，
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1。
本发明进一步的实施方案提供上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，其中氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1。
本发明进一步的实施方案提供上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，所述药物组合物还包括蛋白结构展开剂，所述蛋白结构展开剂包括，例如巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种。其中，白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，例如90∶1～＞0∶1、80∶1～＞0∶1、70∶1～＞0∶1、60∶1～＞0∶1、50∶1～＞0∶1、40∶1～＞0∶1、30∶1～＞0∶1、20∶1～＞0∶1或10∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1。
本发明进一步的实施方案提供上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，所述药物组合物为纳米颗粒悬浮液，所述悬浮液中多西他赛的浓度至少为1mg/ml，所述悬浮液中纳米颗粒粒径不大于200nm。
本发明的另一实施方案提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用含氨基酸的水溶液溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白氨基酸溶液；
3)将蛋白结构展开剂添加到步骤2)所得的白蛋白氨基酸溶液中，进行孵育反应；其中，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1；白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1。
本发明的另一实施方案提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用含氨基酸的水溶液溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白氨基酸溶液；
3)将步骤2)所得的白蛋白氨基酸溶液进行孵育反应；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1。
本发明的另一实施方案提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白溶液；
3)将蛋白结构展开剂添加到步骤2)所得的白蛋白溶液中，进行孵育反应；其中，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，在浓缩液中加入氨基酸，其中氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1。
本发明的另一实施方案提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白溶液；
3)将步骤2)所得的白蛋白溶液进行孵育反应；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，在浓缩液中加入氨基酸，其中氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1。
本发明的另一实施方案提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，得到白蛋白溶液；
3)将氨基酸和蛋白结构展开剂添加到步骤2)所得的白蛋白溶液中，进行孵育反应；其中，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1；白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1。
本发明的另一实施方案提供制备上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白溶液，然后加入氨基酸；
3)将步骤2)所得的白蛋白溶液进行孵育反应；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1。
由上述实施方案可知，在制备本发明的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物时，氨基酸可以在制备纳米粒之前加入，也可以在制备好纳米粒后再加入。在本发明的组合物的制备过程中，只要使得氨基酸能与多西他赛白蛋白纳米粒混合的任何方法均可实现本发明的效果。本发明所列的上述各方法仅仅是主要的几种方法而已，在不背离本发明的精神下，依据所述方法进行合理调整所得的其它方法均属本发明的保护范围。
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。
如本文中使用的术语“多西他赛”在本领域中还被称作“泰索帝(Taxotere)”或多西紫杉醇，本申请所述“多西他赛”包括多西他赛化合物本身及其衍生物或类似物。多西他赛的衍生物或类似物包括但不限于在结构上与多西他赛相似的化合物或与多西他赛处于同一通用化学种类的化合物，如紫杉烷类。在一些实施方案中，多西他赛的衍生物或类似物保持与多西他赛相似的生物学、药理学、化学和/或物理学形式(包括，例如功能性)。多西他赛的衍生物或类似物的实例包括紫杉醇和卡巴他赛。此外，如本文中使用的术语“多西他赛”还包括其结晶形式和无定形形式，以及无水物(anhydrate)、水合物形式(例如半水合物、二水合物和三水合物等)和溶剂合物形式(例如醇合物)。
如本文中使用的术语“白蛋白”包括重组白蛋白和血清白蛋白中的一种或多种，所述血清白蛋白包括非人动物(例如牛)血清白蛋白和人血清白蛋白，优选为人血清白蛋白。
如本文中使用的术语“氨基酸”包括极性碱性氨基酸(例如精氨酸或赖氨酸)、非极性氨基酸(例如脯氨酸)、极性中性氨基酸(例如半胱氨酸)、极性酸性氨基酸(例如谷氨酸)中的至少一种，优选精氨酸。
如本文中使用的术语“蛋白结构展开剂”是指可以打开白蛋白疏水键区域的物质，其利于多西他赛与白蛋白结合；凡是具有此效果的物质，均可实现本发明的目的。所述“蛋白结构展开剂”包括但不限于巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸和二硫苏糖醇中的一种或多种。
在一优选的实施方案中，所述药物组合物为纳米颗粒悬浮液，所述悬浮液中多西他赛的浓度至少为1mg/ml，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、25、30、35、40或50mg/ml，所述悬浮液中纳米颗粒粒径不大于200nm，例如150、100、95、90、85、80、75、70、65、60、55或50nm。所述纳米颗粒粒径和多西他赛浓度可以为上述粒径值或浓度值构成的任意范围。
本发明的药物组合物在暴露于某些条件(如延长的贮存、升高的温度或稀释用于肠胃外施用)时保留期望的治疗效果，并且保持物理上和/或化学上稳定。
所述“物理上稳定”是指包含本发明的药物组合物的冻干粉制剂在复溶或再水化之后，在至少约8小时内基本没有显示沉淀或沉降的现象，优选在约24小时内，更优选在48小时内，特别优选在96小时内基本没有显示沉淀或沉降的现象。
所述“化学上稳定”是指将本发明的药物组合物在常规储存条件下药物组合物或活性化合物的化学结构或组成是稳定的，优选在2～8℃的条件下贮存至少24个月，甚至多达30个月后，7-表-多西他赛的百分比含量≤1.0％。
药物制剂和治疗方法
本发明的另一实施方案提供制剂，其包含治疗有效量的上述多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物以及药学上可接受的载体和/或辅料。所述制剂优选为冻干粉制剂。
本发明的另一实施方案提供本发明的药物组合物或制剂在制备用于治疗或预防细胞增殖异常性疾病或病症的药物中的用途，所述细胞增殖异常性疾病或病症优选是癌症，所述癌症包括前列腺癌、结肠癌、乳腺癌、头颈癌、胰腺癌、肺癌和卵巢癌。
本发明的另一实施方案提供本发明的药物组合物或制剂在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，所述癌症包括前列腺癌、结肠癌、乳腺癌、头颈癌、胰腺癌、肺癌和卵巢癌。
本发明的另一实施方案提供治疗或预防细胞增殖异常性疾病或病症的方法，其包括向需要其的个体给药治疗有效量的本发明的药物组合物或制剂。所述细胞增殖异常性疾病或病症优选是癌症，所述癌症优选为上述所列的具体癌症。
本发明中“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅料、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。
在本发明的制剂中可使用的药学上可接受的载体包括但不限于无菌液体，例如水和油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当所述制剂通过静脉内给药时，水是示例性载体。还可以使用生理盐水和葡萄糖及甘油水溶液作为液体载体，特别是用于注射液。适合的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽糖、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。所述制剂还可以视需要包含少量的湿润剂、乳化剂或pH缓冲剂。口服制剂可以包含标准载体，如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。适合的药学上可接受的载体的实例如在Remington’s Pharmaceutical Sciences(1990)中所述。
所述制剂可以系统地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过注射、静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内或经皮给药；或通过口服、含服、经鼻、透粘膜、局部、以眼用制剂的形式或通过吸入给药。
对于这些给药途径，可以适合的剂型给药所述制剂。
所述剂型包括但不限于喷雾剂、洗剂、软膏剂、混悬剂、可注射溶液剂、混悬液型注射剂、乳浊液型注射剂、酏剂、糖浆剂或冻干粉制剂。
如本文中所使用的术语“治疗有效量”指被给药后会在一定程度上缓解所治疗病症的一或多种症状的药物组合物/制剂的量。
可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。
所给药的本发明的药物组合物/制剂的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、药物组合物/制剂的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约50mg，例如约0.01至约10mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约3500mg/日，例如约0.7mg/日至约700mg/日。在一些情况下，不高于前述范围的下限的剂量水平可以是足够的，而在其它情况下，仍可在不引起任何有害副作用的情况下采用较大剂量，条件是首先将所述较大剂量分成数个较小剂量以在一整天中给药。
除非另外说明，否则如本文中所使用，术语“治疗”意指逆转、减轻、抑制这样的术语所应用的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状的进展，或预防这样的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状。
如本文所使用的“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物9例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
本发明的药物组合物的有益效果：
1、通过添加氨基酸能显著抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中的7-表-多西他赛杂质的生成，提高了多西他赛纳米粒药物组合物的稳定性，特别是化学稳定性，同时延长了多西他赛纳米粒药物组合物的贮存时间，降低了施用时的副作用或毒性，并且可以减小对机体的刺激性，改善临床耐受性；
2、本发明的药物组合物的制备方法简单；
3、本发明可用于前列腺癌、结肠癌、乳腺癌、头颈癌、胰腺癌、肺癌(特别是非小细胞肺癌)和卵巢癌等多种癌症的治疗，具有广泛市场应用前景，并且本发明的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的治疗效果优于市售多西他赛注射液。
实施例
下面给出实施例以对本发明作进一步说明。有必要在此指出的是以下实施例不能理解为对本发明保护范围的限制，如果本领域熟练技术人员根据上述本发明的内容对本发明的技术方案作出一些非实质性的改进和调整，所得技术方案仍属于本发明的保护范围。
在本申请实施例中所使用的市售多西他赛注射液的浓度为40mg/ml。实施例中所述“多西他赛”为多西他赛(即多西紫杉醇)化合物本身。
实施例1
向1500mg多西他赛中加入100ml乙醇，超声溶解后得到有机相。用注射用水稀释人血清白蛋白，以配制人血清白蛋白的6mg/ml溶液。将500mg谷胱甘肽加入到1250ml的6mg/ml人血清白蛋白溶液中，将该溶液在约70℃的水浴中孵育6分钟后，得到水相。将上述有机相在1,000转/分钟(rpm)的高速剪切下均匀分散至上述水相中，将所得体系转移到超滤浓缩装置中(PALL，100KD膜包)，超滤浓缩，得到浓度为6mg/ml的多西他赛浓缩液，其中多西他赛白蛋白纳米粒的平均粒径为103nm(Malvern Nano-ZS90)。
将上述多西他赛白蛋白纳米粒浓缩液分成3份，分别以以下比例加入精氨酸：
1-a.精氨酸与多西他赛的质量比为0.5∶1；
1-b.精氨酸与多西他赛的质量比为1∶1；和
1-c.精氨酸与多西他赛的质量比为20∶1。
然后分别将上述含精氨酸的混合溶液通过0.22μm的无菌滤头过滤除菌，使用冻干机冷冻干燥48h即可。
将冻干后样品用生理盐水复溶，将复溶后的样品在室温下放置8小时无沉淀出现，表明本发明的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物具有物理上稳定性，测定粒径：1-a的平均粒径为103nm，1-b的平均粒径为102nm，1-c的平均粒径为104nm，并测定多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质增长的趋势。
实施例2
向150mg多西他赛中加入10ml乙醇，超声溶解后得到有机相。用注射用水溶解牛血清白蛋白固体，配制成牛血清白蛋白的6mg/ml溶液。将200mg谷胱甘肽和3750mg脯氨酸加入到1250ml的含6mg/ml牛血清白蛋白的溶液中，将溶液在约60℃的水浴中孵育6分钟后，得到水相。将上述有机相在1,000转/分钟(rpm)的高速剪切下均匀分散至上述水相中，将所得体系转移到超滤浓缩装置中(PALL，100KD膜包)，超滤浓缩，得到浓度为6mg/ml的多西他赛浓缩液，其中脯氨酸终浓度为3mg/ml，脯氨酸与多西他赛质量比为约0.5∶1。
多西他赛白蛋白纳米粒的平均粒径为113nm(Malvern Nano-ZS90)。将制备的浓缩液通过0.22μm的无菌滤头过滤除菌，使用冻干机冷冻干燥48h即可。将冻干后样品用生理盐水复溶，将复溶后的样品在室温下放置8小时无沉淀出现，表明本发明的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物具有物理上的稳定性。
实施例3
向150mg多西他赛中加入10ml乙醇，超声溶解后得到有机相。用注射用水溶解重组人血清白蛋白与牛血清白蛋白固体(1∶1w/w)，配制成重组人血清白蛋白与牛血清白蛋白的10mg/ml溶液。将50mg谷胱甘肽加入到450ml的上述含10mg/ml重组人血清白蛋白与牛血清白蛋白的溶液中，将该溶液在60℃的水浴中孵育6分钟后，得到水相。将上述有机相在1,000转/分钟(rpm)高速剪切下均匀分散至上述水相中，将所得体系转移到超滤浓缩装置中(PALL，100KD膜包)，超滤浓缩，得到浓度为6mg/ml的多西他赛浓缩液。此后，向该浓缩液中加入脯氨酸，使得脯氨酸与多西他赛的质量比为1∶1。多西他赛白蛋白纳米粒的平均粒径为110nm(Malvern Nano-ZS90)。将制备的浓缩液通过0.22μm的无菌滤头过滤除菌，使用冻干机冷冻干燥48h即可。将冻干后样品用生理盐水复溶，将复溶后的样品在室温下放置8小时无沉淀出现，表明本发明的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物具有物理上的稳定性。
实施例4
除将乙醇替换为叔丁醇，谷胱甘肽替换为乙酰半胱氨酸，精氨酸替换为赖氨酸(赖氨酸与多西他赛质量比为1，即1∶1)之外，其余制备过程与实施例1一致，得到多西他赛白蛋白纳米粒的粒径为124nm。
实施例5
除将乙醇替换为丙酮和叔丁醇(1∶1v/v)的混合物，谷胱甘肽替换为巯基乙醇，精氨酸替换为半胱氨酸(半胱氨酸与多西他赛质量比为1，即1∶1)之外，其余制备过程与实施例1一致，得到多西他赛白蛋白纳米粒的粒径为132nm。
实施例6
除将谷胱甘肽替换为二硫苏糖醇和巯基乙醇(1∶1w/w)的混合物，精氨酸替换为精氨酸和脯氨酸的混合物(精氨酸和脯氨酸质量比为1∶1，氨基酸混合物与多西他赛的质量比为1，即1∶1)，浓缩后多西他赛的浓度为1mg/ml之外，其余制备过程与实施例1一致，得到多西他赛白蛋白纳米粒的粒径为200nm。
实施例7
除不添加谷胱甘肽，精氨酸替换为谷氨酸(谷氨酸与多西他赛的质量比为1∶1)之外，其余制备过程与实施例1一致，得到多西他赛白蛋白纳米粒的粒径为183nm。
实施例8
除不添加谷胱甘肽，脯氨酸替换为谷氨酸(谷氨酸与多西他赛的质量比为1∶1)之外，其余制备过程与实施例2一致，得到多西他赛白蛋白纳米粒的粒径为196nm。
对比例1
将150mg的多西他赛加入50ml的西林瓶中，加入10ml的乙醇，超声溶解后得到有机相。用注射用水稀释人血清白蛋白浓溶液(200mg/ml)，以配制成6mg/ml溶液，并将50mg谷胱甘肽加入到125ml的含6mg/ml人血清白蛋白的溶液中，在80℃的水浴中孵育6分钟后，将有机相在1,000转/分钟(rpm)的高速剪切下均匀分散至水相中，将产生的体系转移到超滤浓缩装置中(PALL，100KD膜包)，超滤浓缩，得到浓度为10mg/ml的多西他赛浓缩液，然后加入酒石酸(盐)，使得最终溶液pH达7.0，多西他赛浓度为6mg/ml，酒石酸(盐)浓度为100mM(参考专利申请CN103054798A的优选比例)；将最终样品溶液通过0.22μm的无菌滤头过滤除菌，使用冻干机冷冻干燥48h即可。
对比例2
除将酒石酸替换为柠檬酸，并将其最终浓度设置为100mM(参考专利申请CN103054798A的优选比例)之外，其余与对比例1一致。
对比例3
除将酒石酸替换为柠檬酸钠，并将其最终浓度设置为100mM(参考专利申请CN103054798A的优选比例)之外，其余与对比例1一致。
对比例4
除不添加任何氨基酸之外，其余与实施例1一致。
试验例1储存稳定性
在2-8℃下放置不同时间后(见表1)，向实施例1-8和对比例1-4的产品中加入适量0.9％氯化钠溶液，分散均匀后精密量取约300μl，将其置于2ml离心管中，精密加入乙腈约600μl，漩涡振荡30秒后，经固相萃取，将所得萃取溶液过滤以进行7-表-多西他赛含量的检测。
采用HPLC测定7-表-多西他赛百分比含量：柱Spherisorb RP18 4.6x250nm，粒径5μm；流动相：溶液A＝乙腈：水(2∶3，V/V)，溶液B＝乙腈；前70分钟使用溶液A进行洗脱，然后使用10％溶液A和90％溶液B洗脱20分钟；流速为1ml/min；检测波长227nm，进样量20μl。
在2-8℃下存储后，多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛在HPLC图谱中峰面积百分增量如表1中所示。
表1、7-表-多西他赛含量的增长情况
(增长量％＝第N月峰面积％-起始0天峰面积％)
Figure BDA0003121459880000151
Figure BDA0003121459880000161
注1：多西他赛白蛋白纳米粒组合物稳定性的可接受极限(即7-表-多西他赛的最高含量)一般为“7-表-多西他赛的百分比含量≤1.0％”；
注2：N/A表示没有进行检测。
实验结果显示，在本申请实施例中制备的多西他赛白蛋白纳米粒组合物中添加精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、谷氨酸或者其组合形式均可以有效抑制多西他赛的降解，降低差向异构体7-表-多西他赛的含量增长。表1还显示，加入pKa为2.5至4.5的有机酸(盐)并不能抑制差向异构体7-表-多西他赛的含量增长。
上述试验中，如本发明的实验例1-a、1-b和1-c所示，采用精氨酸作为杂质抑制剂的效果最佳：可以在2～8℃的条件下贮存至少24个月，甚至可达30个月。
试验例2储存稳定性
在不加入精氨酸或加入质量比为80∶1的精氨酸∶多西他赛下制备得到多西他赛与白蛋白的组合物，其中7-表-多西他赛的百分比含量参考试验例1的方法进行测定，其在HPLC图谱中峰面积百分比含量与时间的关系如表2中所示。从表2可以看出，当精氨酸与多西他赛比例为80时，在30个月内(在2-8℃下存储)，组合物中7-表-多西他赛的含量增长被抑制。
表2、7-表-多西他赛含量增长情况
(增长量％＝第N月峰面积％-起始0天峰面积％)
Figure BDA0003121459880000171
由试验例1和2可见，本申请实施例中制备的各个多西他赛白蛋白纳米粒具有良好的物理和化学稳定性，不易降解，在常规储存运输后的杂质少，由所述杂质所导致的毒性和副作用也必然会减小。
试验例3抗肿瘤活性
采用人非小细胞肺癌细胞A549的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型中的药效验证实验，以证明本申请中所制备的组合物在癌症治疗上的应用。
筛选合格的A549的BALB/c成瘤动物30只，将其随机分为3组，每组10只，分别为给予空白生理盐水组、市售多西他赛注射液组(20mg/kg)和本发明实施例1-c的多西他赛白蛋白纳米粒组(20mg/kg)，通过尾静脉注射，连续4周。给药期间每天2次观察动物的一般临床症状，每周进行2次体重和瘤径测量，结束后称量肿瘤重量。根据肿瘤体积大小相对于时间绘制曲线以评价药效结果。
药效结果见图1。如图1显示，本发明实施例1-c的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物在非小细胞肺癌细胞A549的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型中有显著抑制肿瘤生长的疗效，同时本发明实施例1-c的多西他赛白蛋白纳米粒组合物的效果优于市售多西他赛注射液。
试验例4抗肿瘤活性
利用本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物进行在人非小细胞肺癌细胞A549的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型中的药效验证实验，以证明本申请中所制备的组合物在癌症治疗上的应用。
筛选合格的A549的BALB/c成瘤动物30只，将其随机分为3组，每组10只，分别为给予空白生理盐水组、市售多西他赛注射液组(16mg/kg)、本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒组(13.6mg/kg)。通过尾静脉注射，连续4周。给药期间每天2次观察动物的一般临床症状，每周进行2次体重和瘤径测量。
药效结果见表3，本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物在非小细胞肺癌A549的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型中均有显著抑制肿瘤生长的疗效。给药21天时，实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒组合物的抑瘤率为112％(给药剂量为13.6mg/kg)，市售多西他赛注射液的抑瘤率为99％(给药剂量为16mg/kg)，由此可见，本发明的多西他赛白蛋白纳米粒给药剂量小，抑瘤率大，治疗效果明显优于市售多西他赛注射液，具备优异的治疗人非小细胞肺癌的效果。
表3、对人非小细胞肺癌细胞A549裸鼠皮下移植瘤的疗效
Figure BDA0003121459880000181
试验例5抗肿瘤活性
利用本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物进行在人卵巢癌细胞SK-OV-3的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型中的药效验证实验，以证明本申请中所制备的组合物在癌症治疗上的应用。
筛选合格的SK-OV-3的BALB/c成瘤动物50只，随机分为5组，每组10只，分别为给予空白生理盐水组、市售多西他赛注射液组1(9.9mg/kg)、市售多西他赛注射液组2(16mg/kg)、本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒组1(8.5mg/kg)、本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒组2(13.6mg/kg)。通过尾静脉注射，连续4周。给药期间每天2次观察动物的一般临床症状，每周进行2次体重和瘤径测量。
药效结果见表4，本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物在卵巢癌SK-OV-3的BALB/c裸鼠皮下移植瘤肿瘤模型中具有显著抑制肿瘤生长的疗效。给药18天时，本发明实施例7的多西他赛白蛋白纳米粒组合物的抑瘤率为65％(给药剂量为8.5mg/kg)，市售多西他赛注射液的抑瘤率为55％(给药剂量为9.9mg/kg)；当本发明实施例7的药物组合物给药剂量为13.6mg/kg，市售多西他赛注射液给药剂量为16mg/kg时，给药18天时其抑瘤率均为87％。由以上实验数据可见，本发明的组合物在用量比市售多西他赛注射液更小下，具有更好或相当的抑瘤效果。这说明本发明的多西他赛白蛋白纳米粒具备优异的治疗人卵巢癌的效果。
表4、对人卵巢癌细胞SK-OV-3裸鼠皮下移植瘤的疗效
Figure BDA0003121459880000191
尽管本发明通过之前的具体实施例得到说明，但应当理解，不应将其解释为受此限制。本发明涵盖之前公开的一般方面，并且本领域技术人员可在不背离本发明的精神和范围的情况下进行多种修饰或改变本发明的各种细节。因此，本说明书仅为说明的目的，而非为限制的目的。

Claims (21)

1.多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括：
多西他赛，
白蛋白，和
氨基酸，
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述氨基酸为所述药物组合物中唯一的稳定剂。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述氨基酸抑制所述药物组合物中的7-表-多西他赛杂质的生成。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物任选地含有蛋白结构展开剂，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸中的一种或多种，其中，白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选为50∶1～＞0∶1。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为纳米颗粒悬浮液，所述悬浮液中多西他赛的浓度至少为1mg/ml，所述悬浮液中纳米颗粒粒径不大于200nm。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述白蛋白包括重组白蛋白和血清白蛋白(如非人动物血清白蛋白和人血清白蛋白)中的一种或多种，优选为血清白蛋白，更优选为人血清白蛋白。
8.制备如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用含氨基酸的水溶液溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，得到白蛋白氨基酸溶液；
3)将蛋白结构展开剂添加到步骤2)所得的白蛋白氨基酸溶液中，进行孵育反应；其中，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
所述稳定性增强是由所述氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质的生成而获得的；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1；白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸。
9.制备如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，当不含有蛋白结构展开剂时，所述方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用含氨基酸的水溶液溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，得到白蛋白氨基酸溶液；
3)将步骤2)所得的白蛋白氨基酸溶液进行孵育反应；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
所述稳定性增强是由所述氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质的生成而获得的；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸。
10.制备如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，得到白蛋白溶液；
3)将蛋白结构展开剂添加到步骤2)所得的白蛋白溶液中，进行孵育反应；其中，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，在浓缩液中加入氨基酸，其中氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
所述稳定性增强是由所述氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质的生成而获得的；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸。
11.制备如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，当不含有蛋白结构展开剂时，所述方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白溶液；
3)将步骤2)所得的白蛋白溶液进行孵育反应；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，在浓缩液中加入氨基酸，其中氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
所述稳定性增强是由所述氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质的生成而获得的；
所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1。
12.制备如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，得到白蛋白溶液；
3)将氨基酸和蛋白结构展开剂添加到步骤2)所得的白蛋白溶液中，进行孵育反应；其中，所述蛋白结构展开剂包括巯基乙醇、谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、二硫苏糖醇中的一种或多种；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
所述稳定性增强是由所述氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质的生成而获得的；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1；白蛋白与蛋白结构展开剂的质量比不大于100∶1，即为100∶1～＞0∶1，优选50∶1～＞0∶1，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸。
13.制备如权利要求1-7中任一项所述的药物组合物的方法，其特征在于，当不含有蛋白结构展开剂时，所述方法包括以下步骤：
1)将多西他赛溶于有机溶剂中，所述有机溶剂优选乙醇、叔丁醇、丙酮中的一种或多种，得到有机相；
2)用注射用水溶解白蛋白或稀释白蛋白溶液，获得白蛋白溶液，然后加入氨基酸；
3)将步骤2)所得的白蛋白溶液进行孵育反应；
4)将步骤1)所得有机相加入到步骤3)孵育反应后所得的溶液中，在加入的同时剪切，即得多西他赛的白蛋白纳米颗粒稀溶液；
5)将步骤4)所得的溶液进行超滤浓缩，得到稳定性增强的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物；
所述稳定性增强是由所述氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中7-表-多西他赛杂质的生成而获得的；
其中，白蛋白与多西他赛的质量比不大于50，即为50∶1～＞0∶1，优选50∶1～1∶1，更优选20∶1～1∶1；氨基酸与多西他赛的质量比不小于0.5，即为≥0.5∶1，优选0.5∶1～80∶1，更优选不小于1，即为≥1∶1，优选1∶1～20∶1，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，优选精氨酸。
14.一种包含权利要求1-7中任一项所述的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的制剂，其特征在于，所述制剂还包含药学上可接受的载体和/或辅料。
15.一种包含根据权利要求8-13中任一项所述方法制备的多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的制剂，其特征在于，所述制剂还包含药学上可接受的载体和/或辅料。
16.根据权利要求14或15所述的制剂，其特征在于，所述制剂为可注射溶液剂、可注射混悬剂、可注射乳浊剂型、冻干粉制剂，优选冻干粉制剂。
17.权利要求1-7中任一项所述的药物组合物、权利要求8-13中任一项所述的方法制备的药物组合物或权利要求14-16中任一项所述制剂在制备用于治疗或预防细胞增殖异常性疾病或病症的药物中的用途。
18.权利要求1-7中任一项所述的药物组合物、权利要求8-13中任一项所述的方法制备的药物组合物或权利要求14-16中任一项所述制剂在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，其特征在于，所述癌症包括前列腺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、头颈癌、胰腺癌、肺癌和卵巢癌。
19.氨基酸在抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中的7-表-多西他赛杂质生成中的用途，优选地，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，所述氨基酸更优选为精氨酸。
20.氨基酸在提高多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物的稳定性中的用途，其特征在于，通过添加氨基酸抑制多西他赛白蛋白纳米粒药物组合物中的7-表-多西他赛杂质生成而提高稳定性；优选地，所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、半胱氨酸以及谷氨酸中的至少一种，所述氨基酸更优选为精氨酸。
21.根据权利要求19或20所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物是权利要求1-7中任一项所述的药物组合物，或根据权利要求8-13中任一项所述的方法制备的药物组合物。
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