CN113384682A - 蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药领域，公开了埃及金蝎蝎毒来源多肽Smp43在制备抗肿瘤药物中的应用，所述肿瘤包括肝癌、肺癌、食管癌、乳腺癌和胰腺癌，且没有明显的毒副作用。所述抗肿瘤药物的给药方式为注射。本发明首次公开了蝎毒多肽Smp43的新的医药用途，即可用于制备抗肿瘤药物，给治疗肿瘤提供了一种新的途径和手段。蝎毒多肽Smp43不仅可以单独作为抗肿瘤的生物治疗药物，还有望结合其他治疗方式来抑制肿瘤。

Description

蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物的应用

技术领域

本发明涉及蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物中的应用，属于医药领域，特别涉及蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

根据国际癌症研究机构(IARC)和世界卫生组织(WHO)的报告和统计，癌症已成为最大的公共问题之一，严重威胁着人类健康和生命安全。在全球范围内、肺癌、结直肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌、前列腺癌、宫颈癌和非霍奇金淋巴瘤导致的死亡率位居前十位。传统的化学疗法和放射疗法被广泛地用于治疗肿瘤具有许多缺点，如对正常细胞的有害副作用(缺乏特异性)、成功率低和复发风险高，并且随着药物使用时间的延长，肿瘤细胞易产生抗药性。因此，非常需要开发用于癌症诊断和治疗的新的安全有效的策略。这些替代方法之一是使用衍生自包括蝎子在内的动物毒液的抗癌肽。

蝎毒是由蛋白质(酶和肽)和非蛋白质(无机盐，脂质，核苷酸，游离氨基酸和水)产生的混合物由毒腺进行防御和捕获猎物。先前的各种研究揭示了蝎子粗毒液和某些纯化的肽 (如埃博毒素、玛格毒素、炭疽毒素和氯毒素等)通过不同的作用机理对癌细胞有效。目前已经分离和鉴定的蝎毒多肽有Chlorotoxin、Iberiotoxin、Margatoxin、Charybdotoxin、BmK AGAP-SYPU2、Bengalin和BmKn-2等。这是一类具有生理活性功能的多肽，已报道具有抗菌、抗病毒、降血压、降血糖等重要作用。由于其分子量小、易于吸收，可广泛应用于保健品和药物的开发。

Smp43是从埃及蝎(Scorpio maurus palmatus)的毒液中鉴定出来的一种新颖的阳离子抗菌肽，其对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌以及真菌均具有显著的抑制活性。目前为止，多肽 Smp43在抑制癌症，尤其是实体肿瘤方面的研究鲜有报道。因此，针对现有技术的不足，提供一种蝎毒多肽Smp43在制备抑制多种癌细胞增殖作用的应用甚为必要。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明目的是提供蝎毒多肽Smp43在制备抑制肿瘤生长的药物中的应用，研制和寻求新型高效低毒的抗肿瘤药物。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物中的应用，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

来源于埃及蝎的抗癌肽Smp43，其序列为Gly Val Trp Asp Trp Ile Lys Lys ThrAla Gly Lys Ile Trp Asn Ser Glu Pro Val Lys Ala Leu Lys Ser Gln Ala Leu AsnAla Ala Lys Asn Phe Val Ala Glu Lys Ile Gly Asp Thr Pro Ser(GVWDWIKKTAGKIWNSEPVKALKSQALNAAKNFVAEKIGA TPS)(SEQ ID No.1)。所述抗癌肽Smp43由43个氨基酸组成的线性肽，分子量4654.81道尔顿，等电点10.68。

所述抗癌肽Smp43可以采用本领域技术人员已知的方法(例如固相合成方法)制备得到，以及可以采用本领域已知的分离纯化方法(例如高效液相色谱法)分离纯化。

本发明提供蝎毒多肽Smp43在制备肿瘤细胞系增殖活力药物中的应用，所述蝎毒多肽 Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

进一步地，所述肿瘤细胞系为肺癌、肝癌、结直肠癌、食管癌、乳腺癌和胰腺癌肿瘤细胞系。

采用MTT法，检测多肽Smp43体外抑制肿瘤细胞增殖能力的作用，随着Smp43浓度的升高，抑制了HepG2、A549、H460、MDA-MB-231、MDA-MB-435s、PANC-1和Kyse-150 细胞，半数抑制浓度IC50值分别为2.579μM/L(A549)、7.228μM/L(H460)、28.34μM/L (MDA-MB-231)、33.70μM/L(MDA-MB-435s)、35.07μM/L(PANC-1)和6.806μM/L (Kyse-150)。通过肿瘤细胞克隆形成实验，Smp43能显著抑制HepG2和A549细胞的克隆增殖活性。

本发明提供蝎毒多肽Smp43在制备抑制人原代肝癌细胞细胞活力药物中的应用，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

采用ATP法，随着蝎毒多肽Smp43浓度的升高，抑制了原代肝癌细胞的增殖，IC50为18.10μM。

本发明提供蝎毒多肽Smp43在制备干扰肿瘤细胞膜稳定性药物中的应用，所述蝎毒多肽 Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

Smp43处理后，HepG2和A549细胞的生长活性受到抑制，细胞发生肿胀，变形甚至破裂，而对照细胞形态正常。采用扫描电子显微镜仪器在15kv下观察药物处理后的A549细胞，结果显示Smp43处理后的A549细胞出现明显的孔形成。这种显著的形态学变化意味着细胞骨架的改变或损伤，表明多肽破坏了细胞膜的稳定性。

本发明提供蝎毒多肽Smp43在制备辅助抗肿瘤药物穿膜的药物中的应用，所述蝎毒多肽 Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

通过扫描电子显微镜观察蝎毒多肽Smp43处理后细胞膜的完整性。未经处理的HepG2 细胞表面光滑，细胞扩散形态正常，而Smp43处理的HepG2细胞细胞膜粗糙或不均一，细胞膜上形成的孔，说明Smp43发挥穿膜作用。

本发明提供蝎毒多肽Smp43在制备抑制肿瘤细胞迁移以及侵袭活性药物中的应用，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

采用划痕实验观察到蝎毒多肽Smp43对于肝癌细胞HepG2在24h迁移率有显著抑制作用。

本发明提供蝎毒多肽Smp43的在制备抑制体内肿瘤生长药物中的应用，所述蝎毒多肽 Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

利用裸鼠移植瘤模型研究发现，Smp43在2mg/kg剂量下有效抑制了肿瘤生长，与对照组相比，给药18d后，分离肿瘤组织，根据统计结果肿瘤重量和肿瘤体积分别减少了65.01％和60.44％，且对于小鼠体重无显著影响。体内实验结果表明Smp43具有很强的体内抗癌作用。

进一步的，如上所述应用，所述抗肿瘤药物的给药方式为注射、粘膜给药、或腔道给药。

更进一步地，经注射给药，包括静脉注射、皮下注射、腔内注射等；粘膜给药，如鼻腔给药；腔道给药，如经直肠给药，局部起效或经吸收全身发挥作用。上述给药途径优选的是经静脉给药。

如上所述应用，所述蝎毒多肽Smp43包括蝎毒多肽Smp43的多肽物、截断物、类似物、组合物和药学上可接受的载体。

抗癌肽作用机制可以为膜裂解机制和非膜裂解机制。癌细胞膜表面一些阴离子成分的特异性表达，包括磷脂酰丝氨酸、O-糖基化黏蛋白、唾液酸神经节苷脂和肝素等。因而，抗癌肽能够通过靶向破坏癌细胞的膜系统而造成不可逆的杀伤作用，却不损伤正常组织细胞。

抗癌肽的膜裂解作用机制主要有以下3种，分别是“桶板模型”、“毡毯模型”和“环孔模型”。抗癌肽的作用机制除了改变癌细胞膜通透性以外，还可以与癌细胞内源靶标相互作用，进而诱导癌细胞的死亡。

常见的非膜裂解机制包括：(1)诱导肿瘤细胞凋亡；一般来说凋亡分为内源性凋亡即线粒体途径和外源性性调控即死亡受体途径；(2)干扰细胞周期；细胞周期是细胞生命活动的基本过程，其依赖于各级调控因子的精确调控，大量研究报道抗癌肽可以阻滞癌细胞于不同时期，进而抑制癌细胞增殖；(3)增加钙离子内流；(4)破坏溶酶体；(5)抑制核酸合成； (6)促进肿瘤细胞自噬；(7)激活肿瘤免疫；(8)抑制肿瘤血管生成等。

所述蝎毒多肽Smp43靶向肝癌HepG2细胞，破坏癌细胞膜通透性并且与细胞内源靶标相互作用诱导细胞凋亡发挥体内外抗癌作用，限制癌细胞迁移。根据蝎毒多肽Smp43的作用机制，其对肝癌具有抗癌作用，那么其对其他肿瘤也能够发挥类似的抗癌作用，因此本发明蝎毒多肽Smp43能够起到抑制肺癌、结直肠癌、食管癌、乳腺癌和胰腺癌的作用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明采用人肝癌、肺癌、食管癌、乳腺癌和胰腺癌细胞进行体外肿瘤细胞和荷瘤裸鼠试验，结果表明蝎毒多肽Smp43具有良好的抗肿瘤效果，可抑制多种类型的肿瘤细胞的增殖和迁移作用，并且抑制了荷瘤小鼠肿瘤的生长，且没有明显的毒副作用。该蝎毒多肽Smp43 具有结构简单、人工合成方便、活性强且对正常细胞选择性的有益特点。蝎毒多肽Smp43不仅可以单独作为抗肿瘤的生物治疗药物，还有望结合其他治疗方式来抑制肿瘤。

附图说明

图1为本发明实施例1蝎毒多肽HPLC纯化Smp43的鉴定结果；

图2为实施例1蝎毒多肽Smp43的质谱鉴定结果；

图3为实施例2蝎毒多肽Smp43对HepG2(人肝癌细胞)、A549(人肺腺癌细胞)、NCI-H460 (人大细胞肺癌细胞)、MDA-MB-231(人乳腺癌细胞)、MDA-MB-435s(人乳导管癌细胞)、PANC-1(人胰腺癌细胞)和Kyse-150(人食管癌细胞)细胞增殖活性影响的统计图；

图4为实施例2蝎毒多肽Smp43孵育肺癌A549和肝癌HepG2细胞后的细胞形态学的照片；

图5为实施例2蝎毒多肽Smp43抑制癌A549和肝癌HepG2细胞克隆形成的照片；

图6为实施例2蝎毒多肽Smp43抑制癌A549和肝癌HepG2细胞克隆形成的统计图；

图7为实施例2蝎毒多肽Smp43对人原代肝癌细胞细胞活力影响的统计图；

图8为实施例2蝎毒多肽Smp43干扰肝癌HepG2细胞的细胞膜的扫描电镜照片；

图9为实施例2测定蝎毒多肽Smp43对肝癌HepG2细胞凋亡影响的流式图；

图10为实施例2流式细胞术测定蝎毒多肽Smp43对肝癌HepG2细胞凋亡影响的统计图；

图11为实施例2细胞划痕实验检测蝎毒多肽Smp43对肝癌HepG2细胞迁移活性影响的照片；

图12为实施例2蝎毒多肽Smp43对肝癌HepG2细胞迁移活性划痕实验的统计图；

图13为实施例3蝎毒多肽Smp43对肝癌HepG2细胞接种的荷瘤裸鼠皮下肿瘤生长的抑制作用。

具体实施方式

本发明所述的一种埃及蝎抗癌肽Smp43由43个氨基酸组成的线性肽，分子量4654.81 道尔顿，等电点10.68。其氨基酸序列为：Gly Val Trp Asp Trp Ile Lys Lys ThrAla Gly Lys Ile Trp Asn Ser Glu Pro Val Lys Ala Leu Lys Ser Gln Ala Leu AsnAla Ala Lys Asn Phe Val Ala Glu Lys Ile Gly Asp Thr Pro Ser(GVWDWIKKTAGKIWNSEPVKALKSQALNAAKNFVAEKIGATPS) (SEQ ID No.1)。

抗癌肽Smp43可以：经注射给药，包括静脉注射、皮下注射、腔内注射等；粘膜给药，如鼻腔给药；腔道给药，如经直肠给药，局部起效或经吸收全身发挥作用。上述给药途径优选的是经静脉给药。

现结合附图与具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1，蝎毒多肽Smp43的制备：

1、蝎毒多肽Smp43的制备方法：根据抗癌肽Smp43氨基酸序列用自动多肽合成仪合成多肽。二硫键的形成采用空气氧化法，具体为在烧瓶中将多肽溶解按照0.1mg/ml于0.1％醋酸溶液中后用氢氧化铵滴定成pH 7.8，然后室温搅拌过夜。通过HPLC反相C18柱层析脱盐、纯化。纯化时A液体为0.1％TFA+100％CH₃CN，B液为0.1％TFA+100％H₂O，B液浓度梯度为25min 28-53％，检测波长为220nm，多肽出现在第13.5分钟。结果如图1所示，多肽出峰时间为第13.5分钟，峰面积为1340176，峰高为66089。

2、分子量测定采用快原子轰击质谱法(Fast atom bombardment massspectrometry， FAB-MS)，以甘油：间硝基苄醇：二甲亚砜(1:1:1，V:V:V，体积比)为底物，Cs+作为轰击粒子，电流为1μA，发射电压为25Kv。结果如图2所示，在多肽的多电荷峰质谱图中，观察到三个较为明显的质峰分别为1552.85[M+3H]3+，1164.95[M+4H]4+，932.10[M+5H]5+， 776.95[M+6H]6+，运用公式n电荷峰＝[分子量+n·H]/n，预测分子量分别为4658.55，4659.8， 4660.5和4661.7道尔顿，而多肽实际分子量为4654.81道尔顿。

3、纯化的蝎毒多肽Smp43用高效液相色谱(HPLC)方法鉴定其纯度，等电聚焦电泳测定等电点，用自动氨基酸测序仪测定氨基酸序列结构。

蝎毒多肽Smp43是埃及蝎蝎毒中鉴定到的一种线性多肽，分子量4654.81道尔顿，等电点10.68。其氨基酸序列为：Gly Val Trp Asp Trp Ile Lys Lys Thr Ala Gly LysIle Trp Asn Ser Glu Pro Val Lys Ala Leu Lys Ser Gln Ala Leu Asn Ala Ala LysAsn Phe Val Ala Glu Lys Ile Gly Asp Thr Pro Ser(GVWDWIKKTAGKIWNSEPVKALKSQALNAAKNFVAEKIGATPS)(SEQ ID No.1)。

实施例2，蝎毒多肽Smp43的体外抗肿瘤实验：

1.体外抑制多种肿瘤细胞增殖能力(MTT法)

取对数生长期的7种肿瘤细胞(包括HepG2、A549、H460、MDA-MB-231、MDA-MB-435s、PANC-1和Kyse-150细胞)，用0.25％的胰酶消化后，加入相应的完全培养基终止消化并重悬细胞，计数并调整细胞悬液的浓度至10×10⁴个/ml，然后加入96孔板中，每孔100μL。将培养板置于恒温37℃、5％CO₂的细胞培养箱中培养。培养12小时后，细胞完全贴壁，吸出废旧培养液，用不同浓度的蝎毒多肽Smp43分别处理肿瘤细胞24h后，将MTT溶液与基础培养基以1:10的比例配制混悬液，移弃培养基并加入MTT，于37℃、CO₂含量为5％的细胞培养箱孵育4h，弃去含有MTT的培养液，加入200μL DMSO后于微型振荡器上振荡15分钟。使用多功能酶标仪在490nm波长下读取吸光度值(OD)，并计算细胞存活率[存活率＝(给药组OD-空白组OD)]/(对照组OD-空白组OD)×100％]和IC50值。空白组不含细胞，仅包含等量MTT检测试剂。

如图3所示，随着Smp43浓度的升高，抑制了HepG2、A549、H460、MDA-MB-231、 MDA-MB-435s、PANC-1和Kyse-150细胞，半数抑制浓度IC50值分别为2.579μM/L(A549)、 7.228μM/L(H460)、28.34μM/L(MDA-MB-231)、33.70μM/L(MDA-MB-435s)、35.07μM/L (PANC-1)和6.806μM/L(Kyse-150)。

2.对肝癌细胞HepG2和肺癌细胞A549的细胞形态学影响

取对数生长期的HepG2和A549细胞，用0.25％的胰酶消化后，加入相应的完全培养基终止消化并重悬细胞，计数并调整细胞悬液的浓度至10×10⁴个/ml，然后加入96孔板中，每孔100μL。将培养板置于恒温37℃、5％CO₂的细胞培养箱中培养。培养12小时后，细胞完全贴壁，吸出废旧培养液，加入含有不同浓度蝎毒多肽Smp43的基础培养基，以BSA为对照组，将培养板置于恒温37℃、5％CO₂的细胞培养箱中培养24h，到时间后在倒置显微镜下观察并拍摄细胞形态。

如图4所示，蝎毒多肽Smp43处理后，HepG2和A549细胞的生长活性受到抑制，细胞发生肿胀，变形甚至破裂，而对照细胞形态正常。

3.体外抑制肝癌细胞HepG2和肺癌肿瘤细胞A549克隆形成

取对数生长期的的HepG2和A549细胞，用0.25％的胰酶消化并吹打成单个细胞。细胞计数，并用培养基调整细胞浓度。将细胞悬液稀释为每孔100个细胞的梯度密度接种于含2mL 培养基的六孔板中，并轻轻摇动，使细胞分散均匀。将蝎毒多肽Smp43按照1倍IC50浓度加入培养基中。将培养板置于恒温37℃、5％CO₂的细胞培养箱中培养2周。当培养孔中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去培养液，用PBS洗3次。加入4％多聚甲醛室温固定细胞15分钟，然后弃去多聚甲醛，用PBS洗3次，每次5分钟。加入适量结晶紫，染色30分钟后吸去染液，然后用清水洗去染色液，空气干燥。用酶联免疫斑点分析仪拍摄培养板照片并计数细胞克隆数目。结果如图5和图6所示，蝎毒多肽Smp43能显著抑制HepG2和A549 细胞的克隆增殖活性。

4.体外抑制人原代肝癌细胞细胞活力(ATP法)

取自肝癌病人的原代肝癌细胞计数并调整细胞悬液的浓度至10×10⁴个/ml，然后加入96 孔板中，每孔100μL。将培养板置于恒温37℃、5％CO₂的细胞培养箱中培养24小时后，用不同浓度的蝎毒多肽Smp43分别处理肿瘤细胞24h，接着离心弃去上清，每孔加入100μL CellTiter-Lumi^TM发光法检测试剂，室温震荡2min充分裂解细胞。接着室温继续孵育10min 后，使用多功能酶标仪读取发光值，即为荧光素酶催化的发光单位(RLU)，并计算细胞抑制率[抑制率＝(1-(给药组RLU-空白组RLU))/(对照组RLU-空白组RLU)×100％]和IC50值。如图7所示，随着蝎毒多肽Smp43浓度的升高，抑制了原代肝癌细胞的增殖，IC50 为18.10μM。空白组不含细胞，仅包含等量发光检测试剂。

5.扫描电子显微镜测定穿膜能力

将HepG2细胞以1×10⁵细胞/mL的密度接种在12孔板上的玻璃盖玻片上，培养基中含有 10％的FBS。然后将播种的盖玻片在37℃、含5％二氧化碳的大气中培养24小时。然后将肽溶液添加到每个孔中，然后再培养24小时。以含有不含肽的细胞的盖玻片作为对照。细胞用4％多聚甲醛(PFA)固定在PBS中，用PBS广泛洗涤并用一系列分级乙醇/水溶液脱水。在临界点干燥和镀金后，用扫描电子显微镜仪器在15kv下观察样品。研究通过扫描电子显微镜 (SEM)观察蝎毒多肽Smp43处理后细胞膜的完整性。Smp43的功能像是破坏膜中的裂解肽，其中大多数表现出明显的孔形成。如图8所示，对照细胞显示为光滑的纺锤形，但是Smp43 处理24小时的细胞出现坏死，并且细胞膜塌陷并被破坏。

6.流式细胞技术测定细胞凋亡影响

取对数生长期的HepG2细胞，用0.25％的胰酶消化后，加入相应的完全培养基终止消化并重悬细胞，计数并调整细胞悬液的浓度至10×10⁴个/ml，然后加入6孔板中，每孔20×10⁴个细胞。药物处理24h后，收集细胞。Annexin V可以识别并标记处于凋亡早期的细胞膜，碘化丙啶(PI)只能通过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此为了验证Smp43是否诱导HepG2 细胞发生凋亡，利用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒来检测各组细胞的凋亡率。Smp43 作用HepG2细胞24h后，流式细胞仪检测结果显示Smp43可以诱导HepG2细胞凋亡。从结果中可见，与对照组(10.72％)比较，2.5μM，5μM和10μM药物处理组细胞凋亡率分别显著增加到27.91％，49.77％和85.82％，说明Smp24药物对细胞凋亡具有诱导作用(见图9和图10)。

7.细胞划痕实验测定抑制迁移能力

用记号笔在12孔板的每个孔的底部画两道平行线，将HepG2细胞铺入12孔板，汇合度达到70％，静置于37℃，5％CO₂细胞培养箱中培养24h后细胞密度90％以上。取一把经过酒精灯灼烧处理后的铁尺，待其冷却后，放置于孔上，用手固定后，用带有200μL的枪头的移液器顺着铁尺在孔中划线，每个孔画一条线。画完后，弃上清培养基，沿壁添加1mL 1×PBS，清洗划痕时产生的漂浮细胞，清洗大约1-3次，添加1mL 1％血清含量的DMEM培养基，在倒置显微镜下拍下0h的划痕状态，固定拍摄划痕和事先记号笔画好的交叉处，将细胞静置放于37℃，5％CO₂培养箱中培养。每隔12小时拍照。收集之前拍摄的图片，用Image J分析图片，获得各个组的细胞移动速率，取平均值后，将实验组与空白对照相除，获得实验组/对照组的比值，观察细胞的移动速率在不同时间段被抑制的状况。划痕实验检测结果如图 11和图12所示，表明蝎毒多肽Smp43对于肝癌细胞HepG2在24h迁移率有抑制作用。

实施例3，蝎毒多肽Smp43的体内抗肿瘤实验：

所有的动物研究均在南方医科大学校内伦理委员对实验动物进行人道治疗的指导下进行的。麻醉后6～8周龄裸小鼠，经侧腹皮下注射5×10⁶个HepG2细胞于磷酸盐缓冲液中。植入约2～3周后待小鼠肿瘤体积达到100mm³时，进行蝎毒多肽Smp43干预，18天后处死小鼠，并从小鼠体内解剖肿瘤并称重。每周测量肿瘤体积和小鼠体重。肿瘤体积按0.5×长×宽²的公式计算。如图13所示裸鼠移植瘤模型研究发现：Smp43在2mg/kg剂量下有效抑制了肝癌细胞HepG2接种后的裸鼠皮下肿瘤生长，与对照组相比，给药18d后，荷瘤小鼠大体照片如图13A所示，分离的肿瘤组织如图13C所示，根据统计结果肿瘤重量和肿瘤体积分别减少了65.01％(图13B)和60.44％(图13D)，且对于小鼠体重无显著影响(图13E)。体内实验结果表明Smp43具有很强的抗癌作用。

综上所述，通过化学合成方法获得的埃及蝎抗癌多肽Smp43具有良好的抗肿瘤效果，能够抑制多种类型的肿瘤细胞的增殖，并且抑制了荷瘤小鼠肿瘤的生长，且没有明显的毒副作用。蝎毒多肽Smp43通过靶向肝癌HepG2细胞，破坏癌细胞膜通透性并且与细胞内源靶标相互作用诱导细胞凋亡发挥体内外抗癌作用，并且能够限制癌细胞迁移。根据蝎毒多肽Smp43 的作用机制，其对肝癌HepG2具有抗癌作用，其对其他肿瘤也能够发挥类似的抗癌作用，因此本发明蝎毒多肽Smp43能够起到抑制肺癌、结直肠癌、食管癌、乳腺癌和胰腺癌的作用。蝎毒多肽Smp43具有结构简单、人工合成方便、活性强且对正常细胞选择性的有益特点。其不仅可以单独作为抗肿瘤的生物治疗药物，还有望结合其他治疗方式来抑制肿瘤。

本发明并不局限于上述实施方式，如果对本发明的各种改动或变型不脱离本发明的精神和范围，倘若这些改动和变型属于本发明的权利要求和等同技术范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变动。

序列表

<110> 南方医科大学

<120> 蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物中的应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 43

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

Gly Val Trp Asp Trp Ile Lys Lys Thr Ala Gly Lys Ile Trp Asn Ser

1 5 10 15

Glu Pro Val Lys Ala Leu Lys Ser Gln Ala Leu Asn Ala Ala Lys Asn

20 25 30

Phe Val Ala Glu Lys Ile Gly Ala Thr Pro Ser

35 40

Claims (10)

1.蝎毒多肽Smp43在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.蝎毒多肽Smp43在制备肿瘤细胞系增殖活力药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞系为肺癌、肝癌、结直肠癌、食管癌、乳腺癌和胰腺癌肿瘤细胞系。

4.蝎毒多肽Smp43在制备抑制人原代肝癌细胞细胞活力药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

5.蝎毒多肽Smp43在制备干扰肿瘤细胞膜稳定性药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

6.蝎毒多肽Smp43在制备辅助抗肿瘤药物穿膜的药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

7.蝎毒多肽Smp43在制备抑制肿瘤细胞迁移以及侵袭活性药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

8.蝎毒多肽Smp43在制备抑制体内肿瘤生长药物中的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

9.根据权利要求1-8任一项所述的应用，其特征在于，所述抗肿瘤药物的给药方式为注射、粘膜给药、或腔道给药。

10.根据权利要求1-9任一项所述的应用，其特征在于，所述蝎毒多肽Smp43包括蝎毒多肽Smp43的多肽物、截断物、类似物、组合物和药学上可接受的载体。

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