CN113373157A - Gf14c基因在提高水稻耐盐抗性中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用。所述的基因为GF14C基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基‑第802位碱基序列所示。本发明首次从水稻品种BC‑10中成功克隆到提高水稻耐盐抗性的基因‑GF14C基因，利用Camv35S启动子构建超表达GF14C基因的水稻转化载体。该载体转化水稻后能显著提高GF14C基因的表达量，伴随着表达量的提高，转化植株的耐盐抗性有明显的提高，在盐胁迫条件下，GF14C的过量表达转基因植株比对照平均提高19％的存活率。因此，GF14C是在盐胁迫中发挥正向调控作用的防卫基因。本发明超表达GF14C基因的技术可以应用于水稻的基因遗传工程育种，并能够应用于生产实践中，提高水稻的耐盐抗性，从而保障目前粮食短缺的情况下水稻的生产安全。

Description

GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用

技术领域：

本发明属于水稻领域，具体涉及GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用。

背景技术：

目前世界人口数量呈累积性增加，而耕地面积却不断减少，粮食安全问题日益突出。水稻是主要的粮食作物，在生长过程中又常常因为遭遇极端天气、干旱、盐碱等恶劣种植环境而导致减产，因此，提高水稻在逆境条件下的产量是保障粮食安全的关键。

土壤盐碱化是在农业发展之前就存在的问题，并且随着灌溉等农业活动的增加，土壤盐碱化越来越严重。目前，全球约143亿亩的土地受到盐分胁迫，并且这一数字仍然随着时间而增加。土壤含盐量高，加大了土壤溶液浓度，使水稻吸水困难，种子发芽和幼苗生长都受到影响；水稻生长吸收不到足够的水分，甚至被盐水吸掉自身的水分，同时，水稻在吸收水分和养料的时期吸收大量盐类会引起中毒，降低生活能力、抑制生长、推迟发育，甚至死亡。在我国沿海地区，大量海岸线附近的土地因为含盐量高，不能进行水稻生产。培育水稻耐盐品种，是扩大水稻种植面积、提高水稻在盐碱地中的产量，进而保证粮食安全的关键途径。

水稻的耐盐性是多基因控制的复杂性状，很难进行常规育种，详细解析水稻耐盐的分子调控机理，挖掘功能基因，进行耐盐分子育种是水稻耐盐育种取得突破的关键。过去二十多年，在植物耐盐方面取得的最重要进展是挖掘到耐盐相关的SOS(Salt OverlySensitive)基因SOS1、SOS2和SOS3。但是，对于植物是如何感知盐胁迫信号并进行信号转导、如何调控、调控了哪些盐胁迫相关基因的表达等科学问题依旧不清楚。

发明内容：

本发明的目的编码提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的基因在提高水稻耐盐抗性中的应用，所述的提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

所述的基因为GF14C基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基-第802位碱基序列所示。应当理解，考虑到密码子的简并性，在不改变氨基酸序列的前提下，对上述编码基因的核苷酸序列进行修改，也属于本发明的保护范围内。

优选，是用于水稻的基因遗传工程育种。

优选，是在水稻中超表达上述提高水稻耐盐抗性的基因从而提高水稻耐盐抗性。

本发明首次从水稻品种BC-10中成功克隆到提高水稻耐盐抗性的基因-GF14C基因，利用Camv35S启动子构建超表达GF14C基因的水稻转化载体。该载体转化水稻后能显著提高GF14C基因的表达量，伴随着表达量的提高，转化植株的耐盐抗性有明显的提高，在盐胁迫条件下，GF14C的过量表达转基因植株比对照提高19％的存活率。因此，GF14C是在盐胁迫中发挥正向调控作用的防卫基因。本发明超表达GF14C基因的技术可以应用于水稻的基因遗传工程育种，并能够应用于生产实践中，提高水稻的耐盐抗性，从而保障目前粮食短缺的情况下水稻的生产安全。

附图说明：

图1是PHQSN载体图谱；

图2是转基因植株中GF14C基因表达水平检测，其中CK表示野生型丽江新团黑谷，OX-4、OX-9、OX-12、OX-15是转基因植株；

图3是在高盐处理的第4天过表达GF14C基因会使水稻植株的离子渗透率降低；

图4是过表达GF14C基因使水稻植株在高盐处理下的存活率增加，其中CK表示野生型丽江新团黑谷，OX-4、OX-9、OX-12、OX-15是转基因植株；

图5是过表达GF14C基因使水稻植株的耐盐抗性增强，其中CK表示野生型丽江新团黑谷，OX-4、OX-9、OX-12、OX-15是转基因植株。

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：

1.GF14C基因的克隆，超表达载体构建

取水稻品种BC-10的叶片，用TriZol Reagent(Invitrogen公司，其货号为：15596026)提取叶片总RNA，采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测总RNA的纯度及量，取1μg的总RNA做起始逆转录反应，所采用的逆转录酶为PrimeScript(TAKARA公司)，逆转录反应的步骤参考该逆转录酶的使用说明。以逆转录产物为模板，采用引物F:CGGAATTC(EcoR1酶切位点)CGCCACCGAAGTAATCCCTT和R:GAAGATCT(BglII酶切位点)CCAATAACATGCGGAGCCAT进行PCR扩增，PCR所用的聚合酶为KOD FX(Toyobo公司)。反应体系为50uL，按照KOD FX的说明书配制PCR反应体系。反应条件为：94℃5min；94℃30sec，60℃30sec，68℃60sec，35个循环；68℃10min。PCR扩增获得约843bp的片段。采用琼脂糖凝胶电泳回收该片段后，用EcoR1和BglII对PCR片段和pHQSN载体(载体图如图1所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示)分别进行双酶切，酶切后分别回收目标片段和载体片段，用T4连接酶(NEB公司)16℃连接16小时，连接体系为：T4连接酶1uL，10Xbuffer 1uL，GF14C基因酶切片段6ul(200ng)，pHQSN载体酶切片段2uL(50ng)。取1uL连接产物，用电击法转化到大肠杆菌DH5α中，转化产物涂布卡那霉素抗性的LB固体培养基。37℃培养过夜，挑10个单克隆进行提取质粒，酶切鉴定。选择两个阳性克隆进行测序检测，测序发现，扩增片段序列全长843个碱基，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，包含一个开放阅读框，为771个碱基，即为GF14C基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基-第802位碱基序列所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。并获得携带有GF14C基因的超表达载体pHQSN，命名为：超表达载体pHQSN-OX，其是将GF14C基因片段插入到超表达载体pHQSN的Camv35S启动子下游的EcoR1和BglII的酶切位点之间。

2、GF14C基因的转化

采用农杆菌EHA105介导的遗传转化方法将超表达载体pHQSN-OX转入水稻品种丽江新团黑谷中。转化原代(T0代)通过PCR及定量PCR检测(GF14CqF(ACTGCTGCAGAATCTAAGGTG)和GF14CqR(CCAGAGCAATATCCTGAGCA)引物(产物长度是145bp))，从DNA水平和RNA水平鉴定阳性转化植株。阳性植株自交得到转基因1代(T1代)株系，每个株系选择10株经PCR检测为阳性的植株繁种，得到T2代植株，T2代株系再进行PCR检测，找到来源于不同T0代植株的T2代纯合株系4个(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)。对4个株系的幼苗叶片进行荧光定量PCR，检测目标基因GF14C的表达量，以野生型结果为对照。

荧光定量PCR鉴定GF14C基因在转基因植株中过表达效果程序如下：

取PCR检测阳性的转基因植株(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)三叶期幼苗叶片进行总RNA提取采用的试剂为TriZol Reagent(Invitrogen公司，其货号为：15596026)，根据该试剂的说明书的步骤进行，并用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测总RNA的纯度及量，取1μg的总RNA做起始逆转录反应，所采用的逆转录酶为PrimeScript(Takara公司)，逆转录反应的步骤参考该逆转录酶的使用说明。以逆转录产物为模板，采用引物GF14CqF(ACTGCTGCAGAATCTAAGGTG)和GF14CqR(CCAGAGCAATATCCTGAGCA)引物对检测GF14C基因的表达情况，采用水稻持家基因EF1a基因的EF1aqF(TTTCACTCTTGGTGTGAAGCAGAT)和EF1aqR(GACTTCCTTCACGATTTCATCGTAA)引物对检测水稻EF1a基因的表达作为内参，以野生型丽江新团黑谷作为对照。检测结果见图2。结果证明4个转基因植株系相对于野生型，GF14C基因的表达量提高。

3.GF14C基因超表达转基因植株耐盐抗性鉴定

把上述纯合的4个超表达转基因T2代株系(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)和野生型丽江新团黑谷植株的种子，在49℃环境下放置96h打破休眠，放置室温之后浸水36h，在30℃环境下萌发48h，选择发芽状态一致的种子播种到水培板，在培养箱中用木村营养液培养10天至3叶期之后。倒掉营养液，注入新的氯化钠浓度是120mmol/L的木村培养液。在处理前(0h)和处理后(2d、3d、4d)取叶片进行离子渗透率检测。继续在培养箱中培养7天之后，将培养液换回不含氯化钠的营养液。恢复生长10天后，统计存活率并且拍照。实验进行3次生物学重复。

结果如图3显示，在高盐处理的第4d，GF14C超表达转基因植株离子渗透率显著低于野生型对照，符合植物在逆境下的自我保护机制。同时如图4和图5显示，在野生型植株的存活率是0的盐胁迫条件下，4个GF14C超表达体系(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)的植株存活率分别是13％、16％、21％与26％。证明GF14C基因过表达转基因植株高盐抗性明显高于野生型。

综上所述，水稻品种BC-10的基因GF14C是水稻耐盐抗性的功能基因，超表达基因GF14C的转基因植株，其耐盐抗性有明显的提高。

序列表

<110> 广东省农业科学院水稻研究所

<120> GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 843

<212> DNA

<213> 水稻(Oryza sativa)

<400> 1

cgccaccgaa gtaatccctt aattggtcaa aatgtctcgg gaggagaatg tctacatggc 60

caagctggcc gagcaggctg aaaggtatga ggagatggtt gagtacatgg agaaggttgc 120

aaagactgta gatgtggaag agctcactgt tgaggagcgc aacctcttgt ctgttgctta 180

caagaatgtg attggtgccc gccgtgcctc ctggcgtatt gtctcatcca ttgaacagaa 240

ggaggagggt cgtggcaatg aggaacatgt tactctgatc aaggagtacc gtggcaagat 300

tgaagctgag ctgagcaaga tttgcgatgg tatcctgaag ttgcttgact cacaccttgt 360

gccctcatct actgctgcag aatctaaggt gttttacctc aagatgaagg gtgattacca 420

caggtacctt gcggaattta agactggtgc cgagagaaag gaagctgctg agagcacaat 480

ggtggcttac aaggctgctc aggatattgc tctggcggat cttgctccca cccatcccat 540

aaggcttgga ctggcactta acttctctgt gttctactac gagattctaa actctccaga 600

caaggcttgc aaccttgcta agcaggcgtt tgacgaagcc atctccgagt tggataccct 660

cggggaggag tcttacaagg acagcacttt gatcatgcag ctcctgaggg acaacttgac 720

cctctggacc tctgacctca cggaggacgg tggtgatgag gtgaaagaag cctccaaggg 780

cgacgcctgc gagggccagt aaaatgggaa gatcgatcga tcgatggctc cgcatgttat 840

tgg 843

<210> 2

<211> 256

<212> PRT

<213> 水稻(Oryza sativa)

<400> 2

Met Ser Arg Glu Glu Asn Val Tyr Met Ala Lys Leu Ala Glu Gln Ala

1 5 10 15

Glu Arg Tyr Glu Glu Met Val Glu Tyr Met Glu Lys Val Ala Lys Thr

20 25 30

Val Asp Val Glu Glu Leu Thr Val Glu Glu Arg Asn Leu Leu Ser Val

35 40 45

Ala Tyr Lys Asn Val Ile Gly Ala Arg Arg Ala Ser Trp Arg Ile Val

50 55 60

Ser Ser Ile Glu Gln Lys Glu Glu Gly Arg Gly Asn Glu Glu His Val

65 70 75 80

Thr Leu Ile Lys Glu Tyr Arg Gly Lys Ile Glu Ala Glu Leu Ser Lys

85 90 95

Ile Cys Asp Gly Ile Leu Lys Leu Leu Asp Ser His Leu Val Pro Ser

100 105 110

Ser Thr Ala Ala Glu Ser Lys Val Phe Tyr Leu Lys Met Lys Gly Asp

115 120 125

Tyr His Arg Tyr Leu Ala Glu Phe Lys Thr Gly Ala Glu Arg Lys Glu

130 135 140

Ala Ala Glu Ser Thr Met Val Ala Tyr Lys Ala Ala Gln Asp Ile Ala

145 150 155 160

Leu Ala Asp Leu Ala Pro Thr His Pro Ile Arg Leu Gly Leu Ala Leu

165 170 175

Asn Phe Ser Val Phe Tyr Tyr Glu Ile Leu Asn Ser Pro Asp Lys Ala

180 185 190

Cys Asn Leu Ala Lys Gln Ala Phe Asp Glu Ala Ile Ser Glu Leu Asp

195 200 205

Thr Leu Gly Glu Glu Ser Tyr Lys Asp Ser Thr Leu Ile Met Gln Leu

210 215 220

Leu Arg Asp Asn Leu Thr Leu Trp Thr Ser Asp Leu Thr Glu Asp Gly

225 230 235 240

Gly Asp Glu Val Lys Glu Ala Ser Lys Gly Asp Ala Cys Glu Gly Gln

245 250 255

<210> 3

<211> 9928

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

agagatagat ttgtagagag agactggtga tttcagcgtg tcctctccaa atgaaatgaa 60

cttccttata tagaggaagg tcttgcgaag gatagtggga ttgtgcgtca tcccttacgt 120

cagtggagat atcacatcaa tccacttgct ttgaagacgt ggttggaacg tcttcttttt 180

ccacgatgct cctcgtgggt gggggtccat ctttgggacc actgtcggca gaggcatctt 240

gaacgatagc ctttccttta tcgcaatgat ggcatttgta ggtgccacct tccttttcta 300

ctgtcctttt gatgaagtga cagatagctg ggcaatggaa tccgaggagg tttcccgata 360

ttaccctttg ttgaaaagtc tcaatagccc tttggtcttc tgagactgta tctttgatat 420

tcttggagta gacgagagtg tcgtgctcca ccatgttatc acatcaatcc acttgctttg 480

aagacgtggt tggaacgtct tctttttcca cgatgctcct cgtgggtggg ggtccatctt 540

tgggaccact gtcggcagag gcatcttgaa cgatagcctt tcctttatcg caatgatggc 600

atttgtaggt gccaccttcc ttttctactg tccttttgat gaagtgacag atagctgggc 660

aatggaatcc gaggaggttt cccgatatta ccctttgttg aaaagtctca atagcccttt 720

ggtcttctga gactgtatct ttgatattct tggagtagac gagagtgtcg tgctccacca 780

tgttgggccc ggcgcgccaa gcttgcatgc ctgcaggtcc ccagattagc cttttcaatt 840

tcagaaagaa tgctaaccca cagatggtta gagaggctta cgcagcaggt ctcatcaaga 900

cgatctaccc gagcaataat ctccaggaaa tcaaatacct tcccaagaag gttaaagatg 960

cagtcaaaag attcaggact aactgcatca agaacacaga gaaagatata tttctcaaga 1020

tcagaagtac tattccagta tggacgattc aaggcttgct tcacaaacca aggcaagtaa 1080

tagagattgg agtctctaaa aaggtagttc ccactgaatc aaaggccatg gagtcaaaga 1140

ttcaaataga ggacctaaca gaactcgccg taaagactgg cgaacagttc atacagagtc 1200

tcttacgact caatgacaag aagaaaatct tcgtcaacat ggtggagcac gacacacttg 1260

tctactccaa aaatatcaaa gatacagtct cagaagacca aagggcaatt gagacttttc 1320

aacaaagggt aatatccgga aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttta 1380

ttgtgaagat agtggaaaag gaaggtggct cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa 1440

aggccatcgt tgaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga 1500

ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg 1560

atatctccac tgacgtaagg gatgacgcac aatcccacta tccttcgcaa gacccttcct 1620

ctatataagg aagttcattt catttggaga gaacacgggg gactctagaa catggatccc 1680

tacagggtaa atttctagtt tttctccttc attttcttgg ttaggaccct tttctctttt 1740

tatttttttg agctttgatc tttctttaaa ctgatctatt ttttaattga ttggttatgg 1800

tgtaaatatt acatagcttt aactgataat ctgattactt tatttcgtgt gtctatgatg 1860

atgatgatag ttacagaacc gtcgacggat ccccgggaat tctaagagga gtccaccatg 1920

gtagatctga ctagtgttaa cgctagccac caccaccacc accacgtgtg aattacaggt 1980

gaccagctcg aatttccccg atcgttcaaa catttggcaa taaagtttct taagattgaa 2040

tcctgttgcc ggtcttgcga tgattatcat ataatttctg ttgaattacg ttaagcatgt 2100

aataattaac atgtaatgca tgacgttatt tatgagatgg gtttttatga ttagagtccc 2160

gcaattatac atttaatacg cgatagaaaa caaaatatag cgcgcaaact aggataaatt 2220

atcgcgcgcg gtgtcatcta tgttactaga tcgggaatta aactatcagt gtttgacagg 2280

atatattggc gggtaaacct aagagaaaag agcgtttatt agaataacgg atatttaaaa 2340

gggcgtgaaa aggtttatcc gttcgtccat ttgtatgtgc atgccaacca cagggttccc 2400

ctcgggatca aagtactttg atccaacccc tccgctgcta tagtgcagtc ggcttctgac 2460

gttcagtgca gccgtcttct gaaaacgaca tgtcgcacaa gtcctaagtt acgcgacagg 2520

ctgccgccct gcccttttcc tggcgttttc ttgtcgcgtg ttttagtcgc ataaagtaga 2580

atacttgcga ctagaaccgg agacattacg ccatgaacaa gagcgccgcc gctggcctgc 2640

tgggctatgc ccgcgtcagc accgacgacc aggacttgac caaccaacgg gccgaactgc 2700

acgcggccgg ctgcaccaag ctgttttccg agaagatcac cggcaccagg cgcgaccgcc 2760

cggagctggc caggatgctt gaccacctac gccctggcga cgttgtgaca gtgaccaggc 2820

tagaccgcct ggcccgcagc acccgcgacc tactggacat tgccgagcgc atccaggagg 2880

ccggcgcggg cctgcgtagc ctggcagagc cgtgggccga caccaccacg ccggccggcc 2940

gcatggtgtt gaccgtgttc gccggcattg ccgagttcga gcgttcccta atcatcgacc 3000

gcacccggag cgggcgcgag gccgccaagg cccgaggcgt gaagtttggc ccccgcccta 3060

ccctcacccc ggcacagatc gcgcacgccc gcgagctgat cgaccaggaa ggccgcaccg 3120

tgaaagaggc ggctgcactg cttggcgtgc atcgctcgac cctgtaccgc gcacttgagc 3180

gcagcgagga agtgacgccc accgaggcca ggcggcgcgg tgccttccgt gaggacgcat 3240

tgaccgaggc cgacgccctg gcggccgccg agaatgaacg ccaagaggaa caagcatgaa 3300

accgcaccag gacggccagg acgaaccgtt tttcattacc gaagagatcg aggcggagat 3360

gatcgcggcc gggtacgtgt tcgagccgcc cgcgcacgtc tcaaccgtgc ggctgcatga 3420

aatcctggcc ggtttgtctg atgccaagct ggcggcctgg ccggccagct tggccgctga 3480

agaaaccgag cgccgccgtc taaaaaggtg atgtgtattt gagtaaaaca gcttgcgtca 3540

tgcggtcgct gcgtatatga tgcgatgagt aaataaacaa atacgcaagg ggaacgcatg 3600

aaggttatcg ctgtacttaa ccagaaaggc gggtcaggca agacgaccat cgcaacccat 3660

ctagcccgcg ccctgcaact cgccggggcc gatgttctgt tagtcgattc cgatccccag 3720

ggcagtgccc gcgattgggc ggccgtgcgg gaagatcaac cgctaaccgt tgtcggcatc 3780

gaccgcccga cgattgaccg cgacgtgaag gccatcggcc ggcgcgactt cgtagtgatc 3840

gacggagcgc cccaggcggc ggacttggct gtgtccgcga tcaaggcagc cgacttcgtg 3900

ctgattccgg tgcagccaag cccttacgac atatgggcca ccgccgacct ggtggagctg 3960

gttaagcagc gcattgaggt cacggatgga aggctacaag cggcctttgt cgtgtcgcgg 4020

gcgatcaaag gcacgcgcat cggcggtgag gttgccgagg cgctggccgg gtacgagctg 4080

cccattcttg agtcccgtat cacgcagcgc gtgagctacc caggcactgc cgccgccggc 4140

acaaccgttc ttgaatcaga acccgagggc gacgctgccc gcgaggtcca ggcgctggcc 4200

gctgaaatta aatcaaaact catttgagtt aatgaggtaa agagaaaatg agcaaaagca 4260

caaacacgct aagtgccggc cgtccgagcg cacgcagcag caaggctgca acgttggcca 4320

gcctggcaga cacgccagcc atgaagcggg tcaactttca gttgccggcg gaggatcaca 4380

ccaagctgaa gatgtacgcg gtacgccaag gcaagaccat taccgagctg ctatctgaat 4440

acatcgcgca gctaccagag taaatgagca aatgaataaa tgagtagatg aattttagcg 4500

gctaaaggag gcggcatgga aaatcaagaa caaccaggca ccgacgccgt ggaatgcccc 4560

atgtgtggag gaacgggcgg ttggccaggc gtaagcggct gggttgtctg ccggccctgc 4620

aatggcactg gaacccccaa gcccgaggaa tcggcgtgac ggtcgcaaac catccggccc 4680

ggtacaaatc ggcgcggcgc tgggtgatga cctggtggag aagttgaagg ccgcgcaggc 4740

cgcccagcgg caacgcatcg aggcagaagc acgccccggt gaatcgtggc aagcggccgc 4800

tgatcgaatc cgcaaagaat cccggcaacc gccggcagcc ggtgcgccgt cgattaggaa 4860

gccgcccaag ggcgacgagc aaccagattt tttcgttccg atgctctatg acgtgggcac 4920

ccgcgatagt cgcagcatca tggacgtggc cgttttccgt ctgtcgaagc gtgaccgacg 4980

agctggcgag gtgatccgct acgagcttcc agacgggcac gtagaggttt ccgcagggcc 5040

ggccggcatg gccagtgtgt gggattacga cctggtactg atggcggttt cccatctaac 5100

cgaatccatg aaccgatacc gggaagggaa gggagacaag cccggccgcg tgttccgtcc 5160

acacgttgcg gacgtactca agttctgccg gcgagccgat ggcggaaagc agaaagacga 5220

cctggtagaa acctgcattc ggttaaacac cacgcacgtt gccatgcagc gtacgaagaa 5280

ggccaagaac ggccgcctgg tgacggtatc cgagggtgaa gccttgatta gccgctacaa 5340

gatcgtaaag agcgaaaccg ggcggccgga gtacatcgag atcgagctag ctgattggat 5400

gtaccgcgag atcacagaag gcaagaaccc ggacgtgctg acggttcacc ccgattactt 5460

tttgatcgat cccggcatcg gccgttttct ctaccgcctg gcacgccgcg ccgcaggcaa 5520

ggcagaagcc agatggttgt tcaagacgat ctacgaacgc agtggcagcg ccggagagtt 5580

caagaagttc tgtttcaccg tgcgcaagct gatcgggtca aatgacctgc cggagtacga 5640

tttgaaggag gaggcggggc aggctggccc gatcctagtc atgcgctacc gcaacctgat 5700

cgagggcgaa gcatccgccg gttcctaatg tacggagcag atgctagggc aaattgccct 5760

agcaggggaa aaaggtcgaa aaggtctctt tcctgtggat agcacgtaca ttgggaaccc 5820

aaagccgtac attgggaacc ggaacccgta cattgggaac ccaaagccgt acattgggaa 5880

ccggtcacac atgtaagtga ctgatataaa agagaaaaaa ggcgattttt ccgcctaaaa 5940

ctctttaaaa cttattaaaa ctcttaaaac ccgcctggcc tgtgcataac tgtctggcca 6000

gcgcacagcc gaagagctgc aaaaagcgcc tacccttcgg tcgctgcgct ccctacgccc 6060

cgccgcttcg cgtcggccta tcgcggccgc tggccgctca aaaatggctg gcctacggcc 6120

aggcaatcta ccagggcgcg gacaagccgc gccgtcgcca ctcgaccgcc ggcgcccaca 6180

tcaaggcacc ctgcctcgcg cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga cacatgcagc 6240

tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg 6300

gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg gcgcagccat gacccagtca cgtagcgata 6360

gcggagtgta tactggctta actatgcggc atcagagcag attgtactga gagtgcacca 6420

tatgcggtgt gaaataccgc acagatgcgt aaggagaaaa taccgcatca ggcgctcttc 6480

cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc 6540

tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat 6600

gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt 6660

ccataggctc cgcccccctg acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg 6720

aaacccgaca ggactataaa gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc 6780

tcctgttccg accctgccgc ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt 6840

ggcgctttct catagctcac gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa 6900

gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta 6960

tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa 7020

caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa 7080

ctacggctac actagaagga cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt 7140

cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt 7200

ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat 7260

cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat 7320

gcattctagg tactaaaaca attcatccag taaaatataa tattttattt tctcccaatc 7380

aggcttgatc cccagtaagt caaaaaatag ctcgacatac tgttcttccc cgatatcctc 7440

cctgatcgac cggacgcaga aggcaatgtc ataccacttg tccgccctgc cgcttctccc 7500

aagatcaata aagccactta ctttgccatc tttcacaaag atgttgctgt ctcccaggtc 7560

gccgtgggaa aagacaagtt cctcttcggg cttttccgtc tttaaaaaat catacagctc 7620

gcgcggatct ttaaatggag tgtcttcttc ccagttttcg caatccacat cggccagatc 7680

gttattcagt aagtaatcca attcggctaa gcggctgtct aagctattcg tatagggaca 7740

atccgatatg tcgatggagt gaaagagcct gatgcactcc gcatacagct cgataatctt 7800

ttcagggctt tgttcatctt catactcttc cgagcaaagg acgccatcgg cctcactcat 7860

gagcagattg ctccagccat catgccgttc aaagtgcagg acctttggaa caggcagctt 7920

tccttccagc catagcatca tgtccttttc ccgttccaca tcataggtgg tccctttata 7980

ccggctgtcc gtcattttta aatataggtt ttcattttct cccaccagct tatatacctt 8040

agcaggagac attccttccg tatcttttac gcagcggtat ttttcgatca gttttttcaa 8100

ttccggtgat attctcattt tagccattta ttatttcctt cctcttttct acagtattta 8160

aagatacccc aagaagctaa ttataacaag acgaactcca attcactgtt ccttgcattc 8220

taaaacctta aataccagaa aacagctttt tcaaagttgt tttcaaagtt ggcgtataac 8280

atagtatcga cggagccgat tttgaaaccg cggtgatcac aggcagcaac gctctgtcat 8340

cgttacaatc aacatgctac cctccgcgag atcatccgtg tttcaaaccc ggcagcttag 8400

ttgccgttct tccgaatagc atcggtaaca tgagcaaagt ctgccgcctt acaacggctc 8460

tcccgctgac gccgtcccgg actgatgggc tgcctgtatc gagtggtgat tttgtgccga 8520

gctgccggtc ggggagctgt tggctggctg gtggcaggat atattgtggt gtaaacaaat 8580

tgacgcttag acaacttaat aacacattgc ggacgttttt aatgtactga attaacgccg 8640

aattaattcg ggggatctgg attttagtac tggattttgg ttttaggaat tagaaatttt 8700

attgatagaa gtattttaca aatacaaata catactaagg gtttcttata tgctcaacac 8760

atgagcgaaa ccctatagga accctaattc ccttatctgg gaactactca cacattatta 8820

tggagaaact cgagcttgtc gatcgacaga tccggtcggc atctactcta tttctttgcc 8880

ctcggacgag tgctggggcg tcggtttcca ctatcggcga gtacttctac acagccatcg 8940

gtccagacgg ccgcgcttct gcgggcgatt tgtgtacgcc cgacagtccc ggctccggat 9000

cggacgattg cgtcgcatcg accctgcgcc caagctgcat catcgaaatt gccgtcaacc 9060

aagctctgat agagttggtc aagaccaatg cggagcatat acgcccggag tcgtggcgat 9120

cctgcaagct ccggatgcct ccgctcgaag tagcgcgtct gctgctccat acaagccaac 9180

cacggcctcc agaagaagat gttggcgacc tcgtattggg aatccccgaa catcgcctcg 9240

ctccagtcaa tgaccgctgt tatgcggcca ttgtccgtca ggacattgtt ggagccgaaa 9300

tccgcgtgca cgaggtgccg gacttcgggg cagtcctcgg cccaaagcat cagctcatcg 9360

agagcctgcg cgacggacgc actgacggtg tcgtccatca cagtttgcca gtgatacaca 9420

tggggatcag caatcgcgca tatgaaatca cgccatgtag tgtattgacc gattccttgc 9480

ggtccgaatg ggccgaaccc gctcgtctgg ctaagatcgg ccgcagcgat cgcatccata 9540

gcctccgcga ccggttgtag aacagcgggc agttcggttt caggcaggtc ttgcaacgtg 9600

acaccctgtg cacggcggga gatgcaatag gtcaggctct cgctaaactc cccaatgtca 9660

agcacttccg gaatcgggag cgcggccgat gcaaagtgcc gataaacata acgatctttg 9720

tagaaaccat cggcgcagct atttacccgc aggacatatc cacgccctcc tacatcgaag 9780

ctgaaagcac gagattcttc gccctccgag agctgcatca ggtcggagac gctgtcgaac 9840

ttttcgatca gaaacttctc gacagacgtc gcggtgagtt caggcttttt catatctcat 9900

tgccccccgg gatctgcgaa agctcgag 9928

Claims (4)

1.编码提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的基因在提高水稻耐盐抗性中的应用，所述的提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的基因为GF14C基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基-第802位碱基序列所示。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，是用于水稻的基因遗传工程育种。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，是在水稻中超表达编码提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的基因从而提高水稻耐盐抗性。

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