CN113358728A - 一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器制备及方法 - Google Patents

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CN113358728A CN202110611618.1A CN202110611618A CN113358728A CN 113358728 A CN113358728 A CN 113358728A CN 202110611618 A CN202110611618 A CN 202110611618A CN 113358728 A CN113358728 A CN 113358728A
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王辉
熊本海
杨亮
戴鼎震
石芳权
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Abstract

本发明公开了一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的制备，包括以下步骤：单壁碳纳米管(SWNT)的羧化过程：将单壁碳纳米管放置在浓硝酸和浓硫酸体积比为1:3的混合溶液6小时；用足够的Milli‑Q纯化水冲洗SWNT，直至水的pH达到中性；将处理后的SWNT放入真空炉中，并在80℃下加热60分钟；1mg SWNT溶解超声处理均匀的分散到2mL二甲基甲酰胺溶液中。优点在于：通过使用本发明的生物传感器，可以有效的对奶牛血钙含量进行检测，相比于现有奶牛血钙检测方法其具有精度高，检测速度快，对于生产中引发的奶牛瘤胃鼓气、真胃变位、子宫内膜炎、乳房炎等疾病的监测提供有力的数据参考，通过生物传感器的使用有效的对奶牛的血钙含量进行长期监测。

Description

一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器制备及方法
技术领域
本发明涉及生物传感器领域，具体是指一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器制备及方法。
背景技术
钙在动物生命过程有血液凝固，神经传导、细胞膜通透性、肌肉收缩、酶活性、激素释放等多种生理功能。围产期奶牛会非泌乳阶段到泌乳阶段的转变，体内钙会从胎儿向乳腺转变，面临从生理、消化、代谢等方面的巨大改变。在分娩前，奶牛每天只需要摄入约30g钙(15g粪尿损失和15g胎儿发育)，可通过胃肠道的吸收满足需要；分娩后大量泌乳导致奶牛体内血钙的大量流失，维持奶牛钙平衡需要50g/d，但是奶牛分娩前后的食欲和消化功能会降低，如果奶牛不能及时补充、维持钙代谢的平衡时，会引起血钙的降低。
奶牛血浆缺钙会引起营养代谢疾病产乳热，其特征为低钙、侧卧、意识下降、反刍停止，最终昏迷。随着奶牛产奶量的不断提高，围产期奶牛患低血钙症和产乳热的发生率不断也提高，超过50％的经产奶牛在泌乳开始时，难以适应大量乳钙合成需求而引起血钙的降低，出现低血钙症。引起的奶牛产后瘫痪会增加奶牛患子宫炎、酮病、胎衣不下、真胃移位和子宫脱出等疾病的风险，进而降低奶牛产奶量和使用年限，导致牛的死淘率大量增加，给养殖业带来损失。
血钙浓度监测是产乳热诊断的最基本方法。当血钙浓度低于2.0mmol/L则被诊断为亚临床产乳热，当血钙低于1.5mmol/L时，则被诊断为临床产乳热。也有研究以血钙低于2.12mmol/L作为亚临床低血钙的标准，而临床低血钙是血钙浓度低于1.4mmol/L。亚临床低血钙通常不表现临床低血钙所有的临床症状，容易被兽医和管理人员忽略。但亚临床低血钙奶牛的血钙不足，机体的肌肉活动会受到影响，容易导致奶牛瘤胃鼓气、真胃变位、子宫内膜炎、乳房炎等疾病，因此也需要引起重视。而血钙浓度的最低值一般出现在产后12至24h，因此该时间段采集奶牛血液进行血钙的监测可更好地反应奶牛的低血钙程度；现有技术中对于奶牛血钙含量检测的精度不够准确，对于血钙监测的方法不够完善，容易导致因低血钙监测的不利引发后续奶牛疾病，对生产造成较大影响，因此，亟待研发一种用于奶牛血钙浓度检测、监测的优化方法。
发明内容
本发明解决的问题是对于在奶牛血钙检测方面的不足，提供一种精确、有效的奶牛血液中血钙的监测以及浓度检测的方法。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的制备，包括以下步骤：
(1)单壁碳纳米管(SWNT)的羧化过程：将单壁碳纳米管放置在浓硝酸和浓硫酸体积比为1:3的混合溶液6小时；用足够的Milli-Q纯化水冲洗SWNT，直至水的pH达到中性；将处理后的SWNT放入真空炉中，并在80℃下加热60分钟；1mg SWNT溶解超声处理均匀的分散到2mL二甲基甲酰胺溶液中。
(2)裸玻碳电极放置在0.3μm和0.05μm的Al2O3粉中进行打磨，祛除表面杂质、使表面平整，用去离子水和乙醇清洗超声清洗打磨后的玻碳电极表面；
(3)将抛光的玻碳电极浸入乙醇与3-氨丙基三乙氧基硅烷溶液配比19:1的混合溶液中30分钟，取出后用足够的超纯水冲洗；
(4)在玻碳电极表面滴涂3μL单壁碳纳米管溶液，在60℃的恒温箱中退火30分钟，然后高纯水冲洗掉表面附着力差的单壁碳纳米管残留物；
(5)在常温条件下，将GCE/SWNT在含有6mmol/L N-羟基琥珀酰亚胺酯1-芘丁酸的二甲基甲酰胺溶液中浸泡60min；
(6)在高湿环境下在GCE/SWNT/Pbase表面滴涂5μL Ca_substante溶液放置在4℃环境中8小时；
(7)将修饰后的电极分别浸入0.1mmol/L的乙醇胺和0.1％吐温20溶液中60分钟，使乙醇胺与未反应的N-羟基琥珀酰亚胺酯1-芘丁酸结合，Tween20与裸露的单壁碳纳米管结合阻碍待测溶液中杂质的吸附；
(8)将50mmol/L的Cazyme溶液滴涂到处理后的电极，使Cazyme与Ca_substrate相互结合，形成GCE/SWNT/DNAzyme。
进一步的，所述电极不限于玻碳电极，且表面修饰不限于单壁碳纳米管，可以是其它导电性好的纳米材料；Ca_substrate固定在电极表面可以通过多种方式，如巯基、氨基、特异性DNA序列；所述Ca_substrate、Cazyme的DNA序列为：
Ca_substrate:
NH2-(CH2)6GCGGTAGAAGG/rA/TATCACTGAGCACTGGG/rA/TAAGCGGTAGAACTCACAATGTATAATGCGCGCATTATACATTGTGAGT
Cazyme:
TCTACCGCTTTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTCAGTGCTCAGTGATTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTTTCTACCGC。
进一步的，对权利要求1中的生物传感器测定钙离子，包括以下步骤：
(1)生物传感器在对血清或牛奶样品测量前计算Rct，用5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl浸泡生物传感器阵列，用EIS测量；
(2)将生物传感器覆盖在真实样品中9分钟，然后用足够的水冲洗以去除残留物；
(3)生物传感器在对血清或牛奶样品测量后计算Rct0，用5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl浸泡生物传感器阵列，用EIS测量；
(4)根据Rct、Rct0计算相对电阻
Figure BDA0003095957710000031
其中，Rct0是GCE/SWNT/DNAzyme检测前在5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl混合溶液的电阻，Rct是GCE/SWNT/DNAzyme检测后在5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl混合溶液的电阻。
进一步的，待测样品溶液pH值会影响钙离子切割GCE/SWNT/DNAzyme表面生物材料的切割速率，影响生物传感器的的相对电阻，为了克服这一不足，将GCE/SWNT/DNAzyme与pH计联合使用构建电化学传感器阵列，对检测数据采用不同的数学模型进行处理。
X矩阵和Y矩阵分别通过以下公式处理：
X＝[1,x1,x2,x1 2,x2 2,x1×x2]
Y＝log10[C]
其中x1和x2分别代表生物传感器GCE/SWNT/DNAzyme检测钙离子的阻抗变化和待测样品溶液中的pH值，C代表钙离子的浓度。
本发明与现有技术相比的优点在于：通过使用本发明的生物传感器，可以有效的对奶牛血钙含量进行检测，相比于现有奶牛血钙检测方法其具有精度高，检测速度快，对于生产中引发的奶牛瘤胃鼓气、真胃变位、子宫内膜炎、乳房炎等疾病的监测提供有力的数据参考，通过生物传感器的使用有效的对奶牛的血钙含量进行长期监测。
附图说明
图1是本发明对血钙浓度检测步骤示意图。
图2是玻碳电极表面修饰不同材料的过程。
图3是玻碳电极表面修饰不同材料的过程。
图4是不同pH下生物传感器检测钙离子的相对电阻变化(pH值vs.Ca2+浓度(μmol/L):4.0-5,4.0-10,4.0-25,4.0-50,4.0-100,4.0-500,4.0-1000,4.0-5000,4.0-10000,4.0-25000；5.0-5,5.0-10,5.0-25,5.0-50,5.0-100,5.0-500,5.0-1000,5.0-5000,5.0-10000,5.0-25000；6.0-5,6.0-10,6.0-25,6.0-50,6.0-100,6.0-500,6.0-1000,6.0-5000,6.0-10000,6.0-25000；6.5-5,6.5-10,6.5-25,6.5-50,6.5-100,6.5-500,6.5-1000,6.5-5000,6.5-10000,6.5-25000；7.0-5,7.0-10,7.0-25,7.0-50,7.0-100,7.0-500,7.0-1000,7.0-5000,7.0-10000,7.0-25000；7.4-5,7.4-10,7.4-15,7.4-25,7.4-100,7.4-2507.4-750,7.4-2500,7.4-7500；7.5-5,7.5-10,7.5-25,7.5-50,7.5-100,7.5-500,7.5-1000,7.5-5000,7.5-10000,7.5-25000.)。
图5是高斯过程分布预测值和真实值。
具体实施方式
下面结合附图来进一步说明本发明的具体实施方式。
DNA序列
Ca_substrate:
NH2-(CH2)6GCGGTAGAAGG/rA/TATCACTGAGCACTGGG/rA/TAAGCGGTAGAACTCACAATGTATAATGCGCGCATTATACATTGTGAGT
Cazyme:
TCTACCGCTTTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTCAGTGCTCAGTGATTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTTTCTACCGC。
一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的制备，包括以下步骤：参照附图2的步骤图；
(1)单壁碳纳米管(SWNT)的羧化过程：将单壁碳纳米管放置在浓硝酸和浓硫酸体积比为1:3的混合溶液6小时；用足够的Milli-Q纯化水冲洗SWNT，直至水的pH达到中性；将处理后的SWNT放入真空炉中，并在80℃下加热60分钟；1mg SWNT溶解超声处理均匀的分散到2mL二甲基甲酰胺溶液中。
(2)裸玻碳电极放置在0.3μm和0.05μm的Al2O3粉中进行打磨，祛除表面杂质、使表面平整，用去离子水和乙醇清洗超声清洗打磨后的玻碳电极表面；
(3)将抛光的玻碳电极浸入乙醇与3-氨丙基三乙氧基硅烷溶液配比19:1的混合溶液中30分钟，取出后用足够的超纯水冲洗；
(4)在玻碳电极表面滴涂3μL单壁碳纳米管溶液，在60℃的恒温箱中退火30分钟，然后高纯水冲洗掉表面附着力差的单壁碳纳米管残留物；
(5)在常温条件下，将GCE/SWNT在含有6mmol/L N-羟基琥珀酰亚胺酯1-芘丁酸的二甲基甲酰胺溶液中浸泡60min；
(6)在高湿环境下在GCE/SWNT/Pbase表面滴涂5μL Ca_substante溶液放置在4℃环境中8小时；
(7)将修饰后的电极分别浸入0.1mmol/L的乙醇胺和0.1％吐温20溶液中60分钟，使乙醇胺与未反应的N-羟基琥珀酰亚胺酯1-芘丁酸结合，Tween20与裸露的单壁碳纳米管结合阻碍待测溶液中杂质的吸附；
(8)将50mmol/L的Cazyme溶液滴涂到处理后的电极，使Cazyme与Ca_substrate相互结合，形成GCE/SWNT/DNAzyme。
进一步的，所述电极不限于玻碳电极，且表面修饰不限于单壁碳纳米管，可以是其它导电性好的纳米材料；Ca_substrate固定在电极表面可以通过多种方式，如巯基、氨基、特异性DNA序列；所述Ca_substrate、Cazyme的DNA序列为：
Ca_substrate:
NH2-(CH2)6GCGGTAGAAGG/rA/TATCACTGAGCACTGGG/rA/TAAGCGGTAGAACTCACAATGTATAATGCGCGCATTATACATTGTGAGT
Cazyme:
TCTACCGCTTTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTCAGTGCTCAGTGATTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTTTCTACCGC。
进一步的，对权利要求1中的生物传感器测定钙离子，包括以下步骤：参照附图3的对比图，
(1)生物传感器在对血清或牛奶样品测量前计算Rct，用5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl浸泡生物传感器阵列，用EIS测量；
(2)将生物传感器覆盖在真实样品中9分钟，然后用足够的水冲洗以去除残留物；
(3)生物传感器在对血清或牛奶样品测量后计算Rct0，用5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl浸泡生物传感器阵列，用EIS测量；
(4)根据Rct、Rct0计算相对电阻
Figure BDA0003095957710000051
其中，Rct0是GCE/SWNT/DNAzyme检测前在5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl混合溶液的电阻，Rct是GCE/SWNT/DNAzyme检测后在5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl混合溶液的电阻。
进一步的，待测样品溶液pH值会影响钙离子切割GCE/SWNT/DNAzyme表面生物材料的切割速率，影响生物传感器的的相对电阻，为了克服这一不足，将GCE/SWNT/DNAzyme与pH计联合使用构建电化学传感器阵列，对检测数据采用不同的数学模型进行处理。
X矩阵和Y矩阵分别通过以下公式处理：
X＝[1,x1,x2,x1 2,x2 2,x1×x2]
Y＝log10[C]
其中x1和x2分别代表生物传感器GCE/SWNT/DNAzyme检测钙离子的阻抗变化和待测样品溶液中的pH值，C代表钙离子的浓度。参照附图4，高斯过程回归(GPR)是一种基于严格统计学习理论的机器学习回归方法。对高维、有限样本、非线性等复杂问题的适应性，得到了广泛的应用。数据集
Figure BDA0003095957710000061
回归模型如下：
y＝f(x)+ε
其中，f(x)表示未知回归函数，ε高斯噪声的均值。
从函数空间的观点来看，高斯过程完全由其均值函数m(x)和协方差函数c(x,x′)来指定，其定义如下：
m(x)＝E[f(x)]
C(x,x′)＝E[(f(x)-m(x))(f(x′)-m(x′)]
那么，高斯过程可以表示为：
f(x)～GP(m(x),C(x,x′))
通常，数据被标准化，然后输出观测值遵循高斯分布，如下所示
y～GP(0,C(x,x′))
当一个查询输入x*进来时，训练输出y和测试输出y*的联合分布根据前面的是
Figure BDA0003095957710000062
式中，k*＝[C(x*,x1),…,C(x*,xn)]T.参照附图5，则预测输出(y*)和方差(σ* 2)可以给出:
Figure BDA0003095957710000063
选择X矩阵作为工作空间变量，选择Y矩阵作为响应。交叉验证设为10倍。训练数据集后，RMSE、MSE、MAE和R平方分别为0.23753、0.056421、0.18097和0.96。
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，具体实施方式中所示的也只是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例，实际的结构并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的结构方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
<120> 一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器制备及方法
<130> 2021.8.5
<160> 2
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 81
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gcggtagaag gratatcact gagcactggg rataagcggt agaactcaca atgtataatg 60
cgcgcattat acattgtgag t 81
<210> 2
<211> 87
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
tctaccgctt tgttggaatg gctcatgcca cactcttcag tgctcagtga ttgttggaat 60
ggctcatgcc acactctttt ctaccgc 87

Claims (4)

1.一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的制备，其特征在于，包括以下步骤：
(1)单壁碳纳米管(SWNT)的羧化过程：将单壁碳纳米管放置在浓硝酸和浓硫酸体积比为1:3的混合溶液6小时；用足够的Milli-Q纯化水冲洗SWNT，直至水的pH达到中性；将处理后的SWNT放入真空炉中，并在80℃下加热60分钟；1mg SWNT溶解超声处理均匀的分散到2mL二甲基甲酰胺溶液中。
(2)裸玻碳电极放置在0.3μm和0.05μm的Al2O3粉中进行打磨，祛除表面杂质、使表面平整，用去离子水和乙醇清洗超声清洗打磨后的玻碳电极表面；
(3)将抛光的玻碳电极浸入乙醇与3-氨丙基三乙氧基硅烷溶液配比19:1的混合溶液中30分钟，取出后用足够的超纯水冲洗；
(4)在玻碳电极表面滴涂3μL单壁碳纳米管溶液，在60℃的恒温箱中退火30分钟，然后高纯水冲洗掉表面附着力差的单壁碳纳米管残留物；
(5)在常温条件下，将GCE/SWNT在含有6mmol/L N-羟基琥珀酰亚胺酯1-芘丁酸的二甲基甲酰胺溶液中浸泡60min；
(6)在高湿环境下在GCE/SWNT/Pbase表面滴涂5μL Ca_substante溶液放置在4℃环境中8小时；
(7)将修饰后的电极分别浸入0.1mmol/L的乙醇胺和0.1％吐温20溶液中60分钟，使乙醇胺与未反应的N-羟基琥珀酰亚胺酯1-芘丁酸结合，Tween20与裸露的单壁碳纳米管结合阻碍待测溶液中杂质的吸附；
(8)将50mmol/L的Cazyme溶液滴涂到处理后的电极，使Cazyme与Ca_substrate相互结合，形成GCE/SWNT/DNAzyme。
2.根据权利要求1所述的一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的制备，其特征在于：所述电极不限于玻碳电极，且表面修饰不限于单壁碳纳米管，可以是其它导电性好的纳米材料；Ca_substrate固定在电极表面可以通过多种方式，如巯基、氨基、特异性DNA序列；所述Ca_substrate、Cazyme的DNA序列为：
Ca_substrate:NH2-(CH2)6GCGGTAGAAGG/rA/TATCACTGAGCACTGGG/rA/TAAGCGGTAGAACTCACAATGTATAATGCGCGCATTATACATTGTGAGT
Cazyme:TCTACCGCTTTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTCAGTGCTCAGTGATTGTTGGAATGGCTCATGCCACACTCTTTTCTACCGC。
3.一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的检测方法，其特征在于，对权利要求1中的生物传感器测定钙离子，包括以下步骤：
(1)生物传感器在对血清或牛奶样品测量前计算Rct，用5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl浸泡生物传感器阵列，用EIS测量；
(2)将生物传感器覆盖在真实样品中9分钟，然后用足够的水冲洗以去除残留物；
(3)生物传感器在对血清或牛奶样品测量后计算Rct0，用5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl浸泡生物传感器阵列，用EIS测量；
(4)根据Rct、Rct0计算相对电阻
Figure FDA0003095957700000021
其中，Rct0是GCE/SWNT/DNAzyme检测前在5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl混合溶液的电阻，Rct是GCE/SWNT/DNAzyme检测后在5mmol/L[Fe(CN)6]4-/3-和0.1mol/L的KCl混合溶液的电阻。
4.根据权利要求3所述的一种用于奶牛产乳热钙浓度检测生物传感器的检测方法，其特征在于：待测样品溶液pH值会影响钙离子切割GCE/SWNT/DNAzyme表面生物材料的切割速率，影响生物传感器的的相对电阻，为了克服这一不足，将GCE/SWNT/DNAzyme与pH计联合使用构建电化学传感器阵列，对检测数据采用不同的数学模型进行处理。
X矩阵和Y矩阵分别通过以下公式处理：
X＝[1，x1，x2，x1 2，x2 2，x1×x2]
Y＝log10[C]
其中x1和x2分别代表生物传感器GCE/SWNT/DNAzyme检测钙离子的阻抗变化和待测样品溶液中的pH值，C代表钙离子的浓度。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114264712A (zh) * 2021-12-24 2022-04-01 清华大学 基于石墨烯场效应晶体管的miRNA检测方法及应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102262122A (zh) * 2011-06-21 2011-11-30 温州大学 一种基于单壁碳纳米管的超灵敏dna生物传感器及制备方法和应用
CN104569087A (zh) * 2014-11-06 2015-04-29 河南赛沃思生物科技有限公司 一种dna/氧化亚铜复合材料、生物传感器、制备方法和应用
WO2019033881A1 (zh) * 2017-08-14 2019-02-21 南京农业大学 一种细胞传感器、其制备方法以及利用该细胞传感器评价抗氧化能力的方法
CN111239196A (zh) * 2020-01-19 2020-06-05 重庆文理学院 一种基于dna水凝胶的铅离子检测设备及其制备和检测方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102262122A (zh) * 2011-06-21 2011-11-30 温州大学 一种基于单壁碳纳米管的超灵敏dna生物传感器及制备方法和应用
CN104569087A (zh) * 2014-11-06 2015-04-29 河南赛沃思生物科技有限公司 一种dna/氧化亚铜复合材料、生物传感器、制备方法和应用
WO2019033881A1 (zh) * 2017-08-14 2019-02-21 南京农业大学 一种细胞传感器、其制备方法以及利用该细胞传感器评价抗氧化能力的方法
CN111239196A (zh) * 2020-01-19 2020-06-05 重庆文理学院 一种基于dna水凝胶的铅离子检测设备及其制备和检测方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HUI WANG等: "Electrochemical device based on nonspecific DNAzyme for the high-accuracy determination of Ca2+ with Pb2+ interference", 《BIOELECTROCHEMISTRY》 *
王辉: "农田土壤和灌溉水中重金属检测关键技术研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)信息科技辑》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114264712A (zh) * 2021-12-24 2022-04-01 清华大学 基于石墨烯场效应晶体管的miRNA检测方法及应用

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