CN113311084B - 用于刑侦领域的毛发毒品质控品及其快速制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开用于刑侦领域的毛发毒品质控品及其快速制备方法，制备方法：选取无毒品史、且3个月内未使用过任何药品的健康人的毛发；将毒品标准品溶于溶剂中得到毒品标准溶液；将毛发浸泡在毒品标准溶液中，然后将盛有毒品标准溶液的容器进行水浴加热；将水浴后浸泡有毛发的毒品标准溶液冷却至室温，取出吸附有毒品的毛发，并依次用水和丙酮冲洗毛发表面的液体，室温下晾干后即制备得到毛发毒品质控品；毛发毒品质控品为采用上述方法所制备的质控品。本发明具有制备过程简单、耗时短、成本低，且不需要使用浓酸，所制备得到的毛发毒品质控品可以满足刑侦领域有关毛发检验需求，也可满足对毛发毒品免疫分析仪的检验需求，同时本发明的方法快速便捷，可以随制随用。
Description
技术领域
本发明涉及毒品质控品的制备技术领域。具体地说是用于刑侦领域的毛发毒品质控品及其快速制备方法。
背景技术
在刑侦领域及司法实践中，毛发相比于血液、尿液等人体组织而言，更容易取得。通过分析当事人毛发中是否存在毒品，以及毒品的含量来判断当事人的吸毒情况是当前刑侦领域及司法实践中的一种重要手段。质控品具有可靠性高、可比性强、计量可溯源性等优点，在实验室认可、能力验证以及实验室质量控制等领域得到了广泛地应用。法庭科学领域对人毛发中毒品含量的分析过程中，由于得到的检材通常具有基质复杂、干扰因素多等特点，往往需要通过借助基质质控品才能得到较为可靠的检测结果。
在法庭科学领域中，技术人员常规操作是采用标准品加入到空白血液、空白尿液混匀制备成一定浓度的质控样本，而毛发的结构特点与血液尿液不同，因而不能按照常规方法制备。因此，目前在刑侦领域中，毛发毒品质控品严重缺乏，导致毛发毒品的分析数据缺乏可比性和溯源性，常常会出现鉴定结论相互矛盾、需要重复鉴定等问题。专利CN112345658A提供了一种人毛发中有机毒物分析质控品及其制备方法，该专利提供的毛发毒品质控品的制备方法具有制备过程复杂、耗时时间长(至少需要两周的时间)，且需要消耗浓盐酸等缺点；另外，该专利所制备得到的毛发毒品质控品对保存条件要求较为严格，不利于推广使用。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品及其快速制备方法，以弥补当前毛发毒品质控品的技术短缺、解决现有技术中毛发毒品质控品的制备过程复杂、耗时长、不易保存等问题。
为解决上述技术问题，满足毛发毒品免疫分析仪的检验需求，本发明研究制备了甲基苯丙胺、吗啡、氯胺酮3种毒品的毛发质控品，并提供如下技术方案：
用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，包括如下步骤：
步骤A、毛发准备：选取无毒品史、且3个月内未使用过任何药品的健康人的毛发；
步骤B、毒品标准溶液的配置：将毒品标准品溶于溶剂中得到毒品标准溶液；
步骤C、毒品的吸附：将毛发放入盛有毒品标准溶液的容器中，使毛发浸泡在毒品标准溶液中，然后将盛有毒品标准溶液的容器进行水浴加热；
步骤D：将水浴后浸泡有毛发的毒品标准溶液冷却至室温，取出吸附有毒品的毛发，并依次用水和丙酮冲洗毛发表面的液体，室温下晾干后即制备得到毛发毒品质控品。该制备方法具有制备过程简单、耗时短、成本低，且不需要使用浓酸，所制备得到的毛发毒品质控品可以满足刑侦领域对毛发毒品免疫分析仪的检验需求，同时本发明的方法由于快速便捷，也可以随制随用。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，在步骤A中，将所选毛发剪碎成小段，每小段毛发的长度为3-5cm，有利于毛发在毒品标准溶液中浸泡吸附毒品。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，在步骤B中，所述毒品为甲基苯丙胺、吗啡或氯胺酮，所述毒品标准品是所述毒品浓度为1mg/mL的甲醇溶液；所述溶剂为尿素水溶液，所述尿素水溶液中尿素的浓度为5mg/mL；所述毒品标准溶液中毒品的浓度为1.0ug/mL。尿素可作为一种促渗剂，其渗透作用原理是具有轻微的角质层溶解作用，促进角蛋白的水合，增加角质层对水的摄取，本发明采用浓度为5mg/mL的尿素溶液配置毒品标准溶液，可使毒品能够更好的吸附到毛发上，制备得到的质控品更稳定，当毒品标准溶液中毒品的浓度为1.0ug/mL时，既能保证毒品充分的吸附到毛发上，又不会导致毒品的浪费。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，在步骤B中，所述毒品标准溶液的体积与所述毛发的质量之比为0.02-0.03mL/mg，且所述毒品标准溶液将所述毛发浸没。毒品在毛发上的吸附效果最好，若毛发过多，则单位质量毛发的毒品吸附不充分，若毒品标准溶液过多，则会导致毒品的浪费。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，在步骤C中，水浴温度为50-70℃，水浴时间为5-24h。此温度下毒品吸附速率最快，吸附效果最好，水浴时间在5-24h时，毒品吸附即已达饱和，水浴时间过长则会延长制备时长，降低制备效率。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，在步骤D中，所述水和所述丙酮的体积均与所述毒品标准溶液的体积相同。选择与用于浸泡毛发的毒品标准溶液等体积的水和丙酮进行淋洗，可将毛发表面的尿素和毒品冲淋干净而又不至于将吸附在毛发内部的毒品冲洗掉。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，在步骤A中，将所选毛发剪碎成小段，每小段毛发的长度为3-5cm；
在步骤B中，所述毒品为甲基苯丙胺、吗啡或氯胺酮，所述毒品标准品是所述毒品浓度为1mg/mL的甲醇溶液；所述溶剂为尿素水溶液，所述尿素水溶液中尿素的浓度为5mg/mL；所述毒品标准溶液中毒品的浓度为1.0ug/mL；所述毒品标准溶液的体积与所述毛发的质量之比为0.03mL/mg；
在步骤C中，水浴温度为50℃，水浴时间为24h；
在步骤D中，所述水和所述丙酮的体积均与所述毒品标准溶液的体积相同。
一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法所制备的毛发毒品质控品。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品，所述毛发毒品质控品的拟定值为10ng/mg±0.5ng/mg；所述毛发毒品质控品在使用时，采用研磨法提取处理、液质法UPLC-MS/MS检验。
上述用于刑侦领域的毛发毒品质控品，研磨法提取处理方法为：精确称取20mg毛发在研磨管内，分别用3mL超纯水和3mL丙酮混旋清洗30s，滤除清洗液后加入1mL甲醇，振荡混匀；使用球磨仪在3000r/min的频率下研磨3min，且在三分钟内每半分钟一个周期，包括20秒研磨和10秒的静置；超声处理2h，取研磨液500μL置于离心管中，以7000r/min的速率离心5min，取上清液经0.22μm有机膜过滤，得到滤液；
液质法UPLC-MS/MS检验条件：
色谱条件：色谱柱为Phenomenex Kinetex Bighenyl，流动相A为含1mmol/L甲酸铵的0.1％甲酸-水、流动相B为乙腈，流速为0.4mL/min，进样量为1μL，柱温35℃；洗脱模式为6min梯度洗脱模式：0.0-1.0min，5％B；1.0-1.1min，5％-20％B；1.1-4.0min，20％-95％B；4.0-5.0min，95％B；5.0-5.1min，95％-5％B；5.1-6.0min，5％B；
质谱条件：采用电喷雾离子源正离子扫描模式ESI+，多反应监测扫描模式MRM；离子源电压IS：5500V；离子源温度TEM：550℃；气帘气CUR：35MPa；雾化器GS1：55MPa；辅助气GS2：60MPa。
本发明的技术方案取得了如下有益的技术效果：
(1)本发明提供的用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法具有制备过程简单、耗时短、成本低，且不需要使用浓酸等优点，所制备得到的毛发毒品质控品可以满足当前刑侦领域对毛发检验和毛发毒品免疫分析仪的检验需求，同时本发明的方法由于快速便捷，也可以随制随用。
(2)本发明将毛发毒品质控品剪成3-5cm的小段有利于毛发在毒品标准溶液中浸泡吸附毒品；尿素可作为一种促渗剂，其渗透作用原理是尿素具有轻微的角质层溶解作用，可以促进角蛋白的水合，从而增加角质层对水的摄取；本发明采用浓度为5mg/mL的尿素溶液配置毒品标准溶液，可使毒品能够更好的吸附到毛发上，制备得到的质控品更稳定；当毒品标准溶液中毒品的浓度为1.0ug/mL时，既能保证毒品充分的吸附到毛发上，又不会导致毒品的浪费；当毒品标准溶液的体积与毛发的质量之比为0.02-0.03mL/mg时，毒品在毛发上的吸附效果最好，若毛发过多，则毒品吸附不充分，过毒品标准溶液过多，则会导致毒品的浪费。
(3)本发明将毛发在毒品标准溶液吸附时的水浴温度控制在50-70℃、水浴时间控制在5-24h，此温度下毒品吸附速率最快，吸附效果最好，水浴时间在5-24h时，毒品吸附即可以达到饱和，而水浴时间过长则会延长制备时长，降低制备效率。在用水和丙酮冲洗毛发时，选择与用于浸泡毛发的毒品标准溶液等体积的水和丙酮进行淋洗，可将毛发上的尿素和毒品冲淋干净而又不至于将吸附在毛发上的毒品冲洗掉。
(4)本发明制备的毛发毒品质控品中毒品的吸附牢固性较强，且在室温下保存具有较好的长期稳定性；同时，采用本发明的制备方法制备所得到的毛发毒品质控品具有较好的均一性，解决了之前缺乏相应的毛发基质质控品的问题，制备出了具有统一溯源、统一量值、统一规范的甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毒品的人毛发毒品质控品，使得各个企业送检的毛发毒品检测装置可以获得统一的计量溯源，从而保证了检验结果的公正性和权威性。
具体实施方式
1实验部分
1.1仪器与试剂
(1)仪器：Shimadzu 30A UPLC超高压液相色谱仪(日本岛津公司)；Q-TRAP 5500串联质谱联用仪(美国AB SCIEX公司)；纯水仪(美国MILLIPORE公司)；AUW120D电子天平(日本岛津公司)；台式高速冷冻离心机(德国SiGMA公司)；球磨仪(北京万孚智能科技有限公司)。
(2)标准品：1mg/mL的甲基苯丙胺(MA)甲醇溶液、吗啡标准品(购至美国Supelco公司)、氯胺酮。
(3)试剂：甲酸、甲酸铵(色谱纯，赛默飞世尔科技(中国)有限公司)；甲醇、乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)。
(4)毛发样品：空白毛发取自3个月以来未使用过任何药品的健康人头发。
1.2毒品质控品的制备
精选空白毛发一定量，剪成3-5cm左右的小段，浸泡于一定浓度的毒品尿素溶液中，并将其置于热水浴中孵育一段时间。取出毛发，依次用超纯水和丙酮冲洗毛发表面残液，于室温下晾干备用。
1.3提取方法
使用电子天平准确称取20mg头发在研磨管内，分别用3mL超纯水和3mL丙酮混旋清洗各30s，滤除清洗液后加入1mL甲醇，振荡混匀。使用球磨仪在3000r/min的频率下研磨3min(三分钟内每半分钟一个周期，包括20秒研磨和10秒的静置)，超声处理2h，取研磨液500μL置于离心管中，以7000r/min离心5min，取上清液经0.22μm有机膜过滤，滤液待UPLC-MS/MS分析。
1.4色谱-质谱条件
1.4.1色谱条件
选用Phenomenex Kinetex Bighenyl(100×2.1mm，1.7μm)色谱柱；含1mmol/L甲酸铵的0.1％甲酸-水(A相，即1000mL流动相A中含有1mL甲酸和1mmol甲酸铵)和乙腈(B相)作为流动相，流速0.4mL/min，进样量为1μL，柱温35℃。采用6min梯度洗脱模式：0.0-1.0min，5％B；1.0-1.1min，5％-20％B；1.1-4.0min，20％-95％B；4.0-5.0min，95％B；5.0-5.1min，95％-5％B；5.1-6.0min，5％B，具体见下表：
| 时间(min) | 流速(mL/min) | A相(V％) | B相(V％) |
| 0.0-1.0 | 0.4 | 95 | 5 |
| 1.0-1.1 | 0.4 | 95-80 | 5-20 |
| 1.1-4.0 | 0.4 | 80-5 | 20-95 |
| 4.0-5.0 | 0.4 | 5 | 95 |
| 5.0-5.1 | 0.4 | 5-95 | 95-5 |
| 5.1-6.0 | 0.4 | 95 | 5 |
1.4.2质谱条件
采用电喷雾离子源正离子扫描模式ESI+，多反应监测扫描模式MRM；离子源电压IS：5500V；离子源温度TEM：550℃；气帘气CUR：35MPa；雾化器GS1：55MPa；辅助气GS2：60MPa。采集参数见表1。
表1
Note:*quantitative ion
2结果与讨论
2.1浸泡溶液的比较
本发明技术人员比较了甲醇和水、尿素溶液的浸泡效果。尿素可作为一种促渗剂，其渗透作用原理是尿素具有轻微的角质层溶解作用，可以促进角蛋白的水合，从而增加角质层对水的摄取。试验人员分别用甲醇和纯水、尿素溶液配制1.0ug/mL的3种毒品的混标浸泡液4mL，取50mg剪至3-5cm空白毛发，浸泡5h。按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，结果具体见表2。从表2中可见，尿素的浸泡效果最佳，优于纯水，浸泡效果最差的是甲醇，且甲醇对每一种毒品的浸泡效果与纯水相比其差别均在10倍以上，这表明甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮这三种毒品采用尿素溶液来浸泡毛发，并且比较不同浓度的尿素溶液，以5mg/mL尿素溶液制备效果较好。
表2
2.2室温下浸泡时间的比较
采用5mg/mL尿素溶液配制1.0ug/mL的甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毒品的混标浸泡液16mL，并分别分成4等份；分别取50mg剪至3-5cm的毛发浸泡到混标浸泡液中，浸泡时间分别为2h、5h、24h、43h。按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，不同浸泡时间下所制备的质控品中各毒品的含量检测结果具体见表3。从表3可知，甲基苯丙胺、吗啡、氯胺酮在0-5h内，浓度呈上升状态，甲基苯丙胺、氯胺酮在5h时已达饱和，吗啡在24h达饱和，浸泡到43h也无明显升高。因此在确定3种毒品的浸泡时间时，甲基苯丙胺和氯胺酮需要至少5h，吗啡至少浸泡24h。
表3
| 浸泡时间 | 甲基苯丙胺的含量 | 吗啡的含量 | 氯胺酮的含量 |
| 2h | 0.92ng/mg | 1.36ng/mg | 1.42ng/mg |
| 5h | 5.16ng/mg | 3.45ng/mg | 6.98ng/mg |
| 24h | 5.23ng/mg | 4.76ng/mg | 6.92ng/mg |
| 43h | 4.90ng/mg | 4.48ng/mg | 6.48ng/mg |
2.3浸泡辅助方式的比较
采用纯水配制1.0ug/mL的甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毒品的混标浸泡液8mL，等分成2份；分别取50mg剪至3-5cm的毛发浸泡到2份混标浸泡液中，1份超声浸泡2小时，另1份不超声浸泡2h。按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，定量结果见表4。从表中结果可见，超声的浸泡结果(促进分子分离)并没有优于无超声的浸泡结果，反而浸泡效果明显不如无超声的浸泡结果。因此，本发明采用无超声浸泡方法。
表4
| 辅助方式 | 甲基苯丙胺的含量 | 吗啡的含量 | 氯胺酮的含量 |
| 超声 | 0.015ng/mg | 0.05ng/mg | 0.32ng/mg |
| 无超声 | 0.92ng/mg | 1.36ng/mg | 1.42ng/mg |
2.4浸泡温度的优化
采用浓度为5mg/mL的尿素溶液配制3种毒品1.0ug/mL的混标浸泡液15mL，等分成3等份，分别取50mg剪至3-5cm的毛发浸泡到混标浸泡液中，并分别置于25℃、50℃、70℃水浴下浸泡5h。按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，定量检测结果具体见表5。从表中结果可见，50℃浸泡效果最好，70℃的浸泡效果次之。因此，选择50℃为浸泡温度。通过温度的优化，可以有效缩短浸泡时间。
表5
| 不同浸泡温度 | 室温(25℃) | 50℃ | 70℃ |
| 甲基苯丙胺的含量 | 8.735ng/mg | 9.858ng/mg | 9.587ng/mg |
| 吗啡的含量 | 3.793ng/mg | 7.598ng/mg | 6.927ng/mg |
| 氯胺酮的含量 | 2.173ng/mg | 10.212ng/mg | 9.930ng/mg |
2.5浸泡饱和量的比较
采用浓度为5mg/mL的尿素溶液配制甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毒品1.0ug/mL的混标浸泡液20mL，各取1.2mL分别浸泡40mg、60mg、80mg、100mg毛发，并置于50℃下浸泡5h。按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，分别检测毛发的吸附总量以及单位质量的毛发吸附量，其检测结果分别见表6和表7。从表6和表7的结果中可见，同一浸泡液量下，随着浸泡毛发量的增多，浸入毛发的毒品总量在增多，但单位毛发的吸附量有一定的下降。其中，甲基苯丙胺随着浸泡毛发量的增多，单位毛发的吸附量下降明显，而吗啡和氯胺酮随着浸泡毛发量的增大其单位毛发的吸附量有微弱的减少。这说明浸泡液与固体毛发量比例控制在0.02-0.03mL/mg。在这一条件下一方面可保证单位毛发量浸入毒品可达到一个最佳饱和状态，另一方面也能减少毒品标准品的使用量。
表6
| 不同毛发添加量组 | 40mg组 | 60mg组 | 80mg组 | 100mg组 |
| 甲基苯丙胺总吸附量 | 399.28ng | 553.86ng | 663.44ng | 775.5ng |
| 吗啡总吸附量 | 304.08ng | 457.74ng | 605.68ng | 737ng |
| 氯胺酮总吸附量 | 403.92ng | 568.14ng | 753.84ng | 930.1ng |
表7
| 不同毛发添加量组 | 40mg组 | 60mg组 | 80mg组 | 100mg组 |
| 甲基苯丙胺单位吸附量 | 9.982ng/mg | 9.231ng/mg | 8.293ng/mg | 7.755ng/mg |
| 吗啡单位吸附量 | 7.602ng/mg | 7.629ng/mg | 7.571ng/mg | 7.37ng/mg |
| 氯胺酮单位吸附量 | 10.098ng/mg | 9.469ng/mg | 9.423ng/mg | 9.301ng/mg |
2.6单标和混标浸泡比较
采用浓度为5mg/mL的尿素溶液配制甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮的1.0ug/mL的混标浸泡液和3种毒品1.0ug/mL的单标浸泡液各2mL，取40mg毛发浸泡，置于50℃下浸泡5h。按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，定量检测结果具体见表8。从表8的结果中可以看出，单标浸泡液较混标浸泡液的毒品吸附量有一定提高，推测是因为不同毒品的毛发吸附位点有少量的竞争位点。
表8
| 浸泡液 | 混标 | 甲基苯丙胺单标 | 氯胺酮单标 | 吗啡单标 |
| 甲基苯丙胺的含量 | 9.858ng/mg | 10.33ng/mg | -- | -- |
| 吗啡的含量 | 7.598ng/mg | -- | -- | 9.515ng/mg |
| 氯胺酮的含量 | 10.212ng/mg | -- | 10.47ng/mg | -- |
2.7质控品制备方法的考察
综上，一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的快速制备方法，其具体操作包括如下步骤：
步骤A、毛发准备：选取无毒品史、且3个月内未使用过任何药品的健康人的毛发，并剪碎成小段，每小段毛发的长度为3-5cm；
步骤B、毒品标准溶液的配置：分别取甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毒品标准品，即1mg/mL的甲基苯丙胺甲醇溶液、1mg/mL的吗啡甲醇溶液和1mg/mL的氯胺酮甲醇溶液；用浓度为5mg/mL的尿素水溶液配置成毒品含量为1.0ug/mL的单标浸泡液；
步骤C、毒品的吸附：将100mg毛发放入盛有3mL毒品单标浸泡液的容器中，使毛发浸泡在毒品单标浸泡液中，然后将盛有毒品单标浸泡液的容器进行水浴加热；所述毒品标准溶液的体积与所述毛发的质量之比为0.03mL/mg；水浴温度为50℃，水浴时间为24h；
步骤D：将水浴后浸泡有毛发的毒品单标浸泡液冷却至室温，取出吸附有毒品的毛发，并依次用水和丙酮冲洗毛发表面的液体，所用水和丙酮的体积与毒品单标浸泡液的体积相同，晾干后即制备得到毛发毒品质控品。
按1.3和1.4的方法进行处理，并单点法定量测定质控品中各毒品的含量，其定量的检测结果见表9。从表9中可以看出，当浸泡的毛发量固定时，50℃温度下经24h浸泡后，3种毒品的吸收率均在30％以上。
表9
| 不同毒品毛发质控品 | 甲基苯丙胺 | 氯胺酮 | 吗啡 |
| 毛发上毒品的吸附量 | 10.49ng/mg | 10.21ng/mg | 9.98ng/mg |
| 吸收率 | 34.9％ | 34.0％ | 33.2％ |
3.毛发质控品的质量评价
按照2.7毛发毒品质控品的制备方法制备甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毒品的毛发质控品，且毛发质控品的拟定值为10ng/mg±0.5ng/mg，将达到拟定值的毛发作为毛发质控品备用。对该批次毛发质控品进行吸附牢固性、稳定性及均一性测试，以评价其作为质控品的质量。
3.1吸附牢固性测试
从甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毛发质控品中，每种随机选取20mg毛发，分别用3mL纯水和3mL丙酮浸泡振荡混旋30s清洗，取出清洗液进样，计算洗液中的各毒品的总量，并通过与20mg毛发中的毒品的总量相比，得到清洗液中毒品的洗脱率，不同毒品毛发质控品用水和丙酮清洗后的洗脱结果如表10所示。从表10中可以看出，纯水不易将毛发质控品上吸附的毒品洗出，而丙酮则可以使其有一些溶出，但在可接受范围。因此，采用本发明所制备的甲基苯丙胺、吗啡和氯胺酮3种毛发质控品其毒品吸附性比较牢固，不易被洗脱。
表10
| 清洗溶剂 | 洗脱率(甲基苯丙胺) | 洗脱率(氯胺酮) | 洗脱率(吗啡) |
| 纯水 | 1.8％ | 0.9％ | 0.7％ |
| 丙酮 | 2.2％ | 1.5％ | 1.3％ |
3.2短期稳定性检验
将一批10ng/mg±0.5ng/mg毛发质控品保存在实验室环境下25℃±5℃(湿度小于30％)条件下，在第0天，第3天，第7天从不同毒品的毛发质控品中，随机抽取其中20mg进行检测定量，计算RSD值，其RSD值的计算结果均未超过3％(具体见表11)，说明3种毒品毛发质控品的短期稳定性较好。
表11
| 不同毒品毛发质控品 | 0天 | 3天 | 7天 | 均数 | RSD |
| 甲基苯丙胺含量 | 10.43ng/mg | 10.38ng/mg | 10.12ng/mg | 10.31ng/mg | 0.01614 |
| 氯胺酮含量 | 9.98ng/mg | 10.24ng/mg | 10.46ng/mg | 10.23ng/mg | 0.02349 |
| 吗啡含量 | 9.83ng/mg | 10.18ng/mg | 10.42ng/mg | 10.14ng/mg | 0.029251 |
3.3长期稳定性检验
将一批10ng/mg±0.5ng/mg毛发质控品保存实验室环境下25℃±5℃(湿度小于30％)条件下，分别在第0天，第30天和第60天从不同毒品的毛发质控品中，随机抽取其中20mg进行检测定量，计算RSD值，其RSD值的计算结果均未超过3％(具体见表12)，说明3种毒品毛发质控品的长期稳定性较好。
表12
| 不同毒品毛发质控品 | 0天 | 30天 | 60天 | 均数 | RSD |
| 甲基苯丙胺含量 | 10.43ng/mg | 10.18ng/mg | 10.02ng/mg | 10.21ng/mg | 0.020 |
| 氯胺酮含量 | 9.98ng/mg | 10.41ng/mg | 10.33ng/mg | 10.24ng/mg | 0.022 |
| 吗啡含量 | 9.83ng/mg | 9.98ng/mg | 10.40ng/mg | 10.07ng/mg | 0.029 |
3.4均一性实验
取一批10ng/mg±0.5ng/mg毛发质控品，从不同毒品的毛发质控品中，随机选取其中20mg毛发进行定量检验，平行3份，进行检测定量，计算RSD值，其RSD值的计算结果均未超过3％(具体见表13)，说明采用本发明的方法制备得到的毒品毛发质控品其均一性较好。
表13
| 不同毒品毛发质控品 | 样品1 | 样品2 | 样品3 | 均数 | RSD |
| 甲基苯丙胺含量 | 10.43ng/mg | 10.48ng/mg | 10.26ng/mg | 10.39ng/mg | 0.011 |
| 氯胺酮含量 | 9.98ng/mg | 10.38ng/mg | 10.26ng/mg | 10.20ng/mg | 0.020 |
| 吗啡含量 | 9.83ng/mg | 10.08ng/mg | 10.36ng/mg | 10.09ng/mg | 0.026 |
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本专利申请权利要求的保护范围之中。
Claims (5)
1.一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的使用方法，其特征在于，所述毛发毒品质控品的制备方法，包括如下步骤：
步骤A、毛发准备：选取无毒品史、且3个月内未使用过任何药品的健康人的毛发；
步骤B、毒品标准溶液的配置：将毒品标准品溶于溶剂中得到毒品标准溶液；
在步骤B中，所述毒品为甲基苯丙胺、吗啡或氯胺酮；所述毒品标准品是所述毒品浓度为1 mg/mL的甲醇溶液；所述溶剂为尿素水溶液，所述尿素水溶液中尿素的浓度为5 mg/mL；所述毒品标准溶液中所述毒品的浓度为1.0 ug/mL；所述毒品标准溶液的体积与所述毛发的质量之比为0.02-0.03 mL/mg，且所述毒品标准溶液将所述毛发浸没；
步骤C、毒品的吸附：将毛发放入盛有毒品标准溶液的容器中，使毛发浸泡在毒品标准溶液中，然后将盛有毒品标准溶液的容器进行水浴加热；水浴温度为50-70℃，水浴时间为5-24 h；
步骤D、将水浴后浸泡有毛发的毒品标准溶液冷却至室温，取出吸附有毒品的毛发，并依次用水和丙酮冲洗毛发表面的液体，室温下晾干后即制备得到毛发毒品质控品；
所述毛发毒品质控品在使用时，采用研磨法提取处理、液质法UPLC-MS/MS检验；
研磨法提取处理方法为：精确称取20 mg毛发在研磨管内，分别用3 mL超纯水和3 mL丙酮混旋清洗30 s，滤除清洗液后加入1 mL甲醇，振荡混匀；使用球磨仪在3000 r/min的频率下研磨3 min，且在三分钟内每半分钟一个周期，包括20秒研磨和10秒的静置；超声处理2h，取研磨液500 μL置于离心管中，以 7000 r/min 的速率离心5 min，取上清液经0.22 μm有机膜过滤，得到滤液；
液质法UPLC-MS/MS检验条件：
色谱条件：色谱柱为Phenomenex Kinetex Bighenyl，流动相A为含1 mmol/L甲酸铵的0.1% 甲酸-水、流动相B为乙腈，流速为0.4 mL/min，进样量为1 μL，柱温35 ℃；洗脱模式为6 min梯度洗脱模式：0.0-1.0 min，5% B；1.0-1.1 min，5%-20% B；1.1-4.0 min，20%-95%B；4.0-5.0 min，95% B；5.0-5.1 min，95%-5% B；5.1-6.0 min，5% B；
质谱条件：采用电喷雾离子源正离子扫描模式ESI+，多反应监测扫描模式MRM；离子源电压IS：5500 V；离子源温度TEM：550℃；气帘气CUR：35 MPa；雾化器GS1：55 MPa；辅助气GS2：60 MPa。
2.根据权利要求1所述的一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的使用方法，其特征在于，在步骤A中，将所选毛发剪碎成小段，每小段毛发的长度为3-5 cm。
3.根据权利要求1所述的一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的使用方法，其特征在于，在步骤D中，所述水和所述丙酮的体积均与所述毒品标准溶液的体积相同。
4.根据权利要求1所述的一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的使用方法，其特征在于，在步骤B中，所述毒品标准溶液的体积与所述毛发的质量之比为0.03 mL/mg；在步骤C中，水浴温度为50℃，水浴时间为24 h。
5.根据权利要求1所述的一种用于刑侦领域的毛发毒品质控品的使用方法，其特征在于，所述毛发毒品质控品的拟定值为10 ng/mg±0.5ng/mg。
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