CN113302204A

CN113302204A - 用于治疗癌症的抗tigit抗体的给药方案

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Publication number: CN113302204A
Application number: CN201980087763.5A
Authority: CN
Inventors: M·蔡; E·K·查尔塔什; J·A·希利; M·拉拉; T·R·李; K·玛亚瓦拉; R·A·普雷多尤; S·M·G·威廉姆斯; Z·曾
Original assignee: MERCK
Current assignee: Merck Sharp and Dohme BV
Priority date: 2018-11-05
Filing date: 2019-11-04
Publication date: 2021-08-24
Also published as: WO2020096915A1; EP3877418A4; JP2022512851A; BR112021008582A8; CA3118964A1; EP3877418A1; MX2021005236A; BR112021008582A2; US20210403557A1; AU2019375409A1; KR20210091209A

Abstract

本发明涉及可用于治疗癌症的抗TIGIT抗体的给药方案。特别地，本发明涉及在组合疗法中的所述给药方案，所述组合疗法包括施用程序性死亡1蛋白(PD‑1)或程序性死亡配体1(PD‑L1)的抗体和抗TIGIT抗体。

Description

用于治疗癌症的抗TIGIT抗体的给药方案

相关申请

本申请要求于2018年11月5日提交的美国临时专利申请号62/755805的权益，其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明涉及可用于治疗癌症的抗TIGIT抗体的给药方案。特别地，本发明涉及在组合疗法中的所述给药方案，所述组合疗法包括施用针对程序性死亡1蛋白(PD-1)或程序性死亡配体1(PD-L1)的抗体和抗TIGIT(具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)抗体。

背景技术

PD-1被认为是在免疫调节和外周耐受的维持中的重要分子。PD-1在初始(naive)T、B和NKT细胞上适度表达，并通过在淋巴细胞、单核细胞和骨髓细胞上的T/B细胞受体信号传导上调(1)。

PD-1、PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)的两种已知配体在各种组织中出现的人癌症中表达。在例如卵巢癌、肾癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌和黑色素瘤的大样本集中，显示PD-L1表达与不良预后相关，并且无论后续治疗如何，都会降低总存活(2-13)。类似地，发现肿瘤浸润淋巴细胞上的PD-1表达标记乳腺癌和黑色素瘤中功能失调的T细胞(14-15)并与肾癌的不良预后相关(16)。因此，已提出表达PD-L1的肿瘤细胞与表达PD-1的T细胞相互作用以减弱T细胞激活和对免疫监视的逃避，从而导致对肿瘤的免疫应答受损。几种抑制PD-1和其配体PD-L1和PD-L2之一或两者之间相互作用的单克隆抗体已被批准用于治疗癌症。派姆单抗是有效的人源化免疫球蛋白G4(IgG4)mAb，其对与程序性细胞死亡1(PD 1)受体结合具有高特异性，因而抑制其与程序性细胞死亡配体1(PD-L1)和程序性细胞死亡配体2(PD-L2)的相互作用。根据临床前体外数据，派姆单抗对PD-1具有高亲和力和强效受体阻断活性。

(派姆单抗)适用于治疗多种适应症的患者。

TIGIT(具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)是一种主要在激活的T细胞和NK细胞上表达的免疫调节受体。TIGIT也称为VSIG9、VSTM3和WUCAM。其结构显示了一个细胞外免疫球蛋白结构域、一个1型跨膜区和两个ITIM基序。TIGIT构成共刺激网络的一部分，所述网络由T细胞上的正向(CD226)和负向(TIGIT)免疫调节受体以及APC上表达的配体(CD155和CD112)组成。TIGIT结构的一个重要特征是在其细胞质尾部结构域中存在基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM)。与PD-1和CTLA-4一样，TIGIT细胞质区域中的ITIM结构域预计会募集酪氨酸磷酸酶，例如SHP-1和SHP-2，随后用T细胞受体(TCR)亚基上的基于免疫受体酪氨酸的激活基序(ITAM)去磷酸化酪氨酸残基。因此，通过肿瘤细胞或TAMS表达的受体配体CD155和CD112连接TIGIT可有助于抑制TCR信号传导和T细胞激活，这对于建立有效的抗肿瘤免疫至关重要。因此，TIGIT特异性拮抗剂抗体可以抑制CD155和CD112诱导的T细胞应答的抑制并增强抗肿瘤免疫。WO2016/028656和WO2017/030823中已经描述了抗TIGIT抗体。

选择抗TIGIT抗体单药疗法或抗PD-1或抗PD-L1疗法的组合疗法的给药方案取决于多种因素，包括实体的血清或组织更新率、症状水平、实体的免疫原性、抗药抗体终点和被治疗个体中目标细胞、组织或器官的可及性以及安全性。抗药物抗体的形成可潜在地混淆治疗剂量下的药物暴露，并为随后的输注相关毒性做好准备。此外，抗TIGIT和/或抗PD-1/抗PD-L1治疗可导致免疫刺激和影响安全性的细胞因子释放的可能性。

发明内容

本发明提供了一种用于治疗患者癌症的方法，其包括施用2.1mg–700mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体。在一个实施方式中，所述方法任选地包括与抗PD-1或抗PD-L1抗体共同施用。在一个实施方式中，共同配制所述抗TIGIT抗体和所述抗PD-1抗体。在进一步的实施方式中，个体的肿瘤细胞是PD-L1表达阳性的。在一个实施方式中，所述抗PD-1抗体阻断PD-1与PD-L1和PD-L2的结合。本发明还提供包含2.1mg至700mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体和200mg派姆单抗或派姆单抗变体的药物组合物。

本发明的一个方面提供了用于在患者中治疗癌症的方法，其包括向所述患者施用2.1mg至700mg包含重链和轻链的抗TIGIT抗体，其中所述轻链包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR，和所述重链包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR。

在所述方法的各种实施方式中，通过静脉输注施用所述抗TIGIT抗体。

在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约2.1mg至约700mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约2.1mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约7mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约21mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约70mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约200mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约210mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用约700mg所述抗TIGIT抗体。

在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用2.1mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用7mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用21mg抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用70mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用200mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用210mg所述抗TIGIT抗体。在所述方法的各种实施方式中，向所述患者施用700mg所述抗TIGIT抗体。

在所述方法的各种实施方式中，在第1天向所述患者施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。例如，治疗的持续时间为数周或数月。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区。在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23。在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且所述轻链包含SEQ ID NO:22。在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含SEQ ID NO:22。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体是31C6变体。

在所述方法的各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含与SEQ ID NO:25具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的重链可变区。在所述方法的各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且所述轻链包含与SEQ IDNO:24具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的轻链可变区。在所述方法的各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含与SEQ ID NO:25具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的重链可变区，和所述轻链包含与SEQ ID NO:24具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的轻链可变区。

在所述方法的各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链与SEQ ID NO:23具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性。在所述方法的各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且所述轻链与SEQ ID NO:22具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性。在所述方法的各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链与SEQ ID NO:23具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性，和所述轻链与SEQ ID NO:22具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同施用。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同配制。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段特异性地结合人PD-1并阻断人PD-L1与人PD-1的结合。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段还阻断人PD-L2与人PD-1的结合。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)SEQID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR。在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是31C6变体，其包含：(a)SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ IDNO:6、7和8的重链CDR。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5。例如，所述抗PD-1抗体是派姆单抗。在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是派姆单抗变体。在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是纳武单抗。在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、度伐利尤单抗或阿维单抗。

在所述方法的各种实施方式中，在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次。在所述方法的各种实施方式中，在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是包含重链和轻链的人源化抗PD-1抗体，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR；所述抗TIGIT抗体是包含重链和轻链的人源化抗TIGIT抗体，其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区；所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

在所述方法的各种实施方式中，所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5；所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:23，所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。

在所述方法的各种实施方式中，在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次，在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

在所述方法的各种实施方式中，在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次，在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，每三周施用一次。

在所述方法的各种实施方式中，在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次，在第1天通过静脉输注以700mg施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

在所述方法的各种实施方式中，在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以700mg施用所述抗TIGIT抗体，每三周施用一次。

在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与2.1mg至700mg抗TIGIT抗体共同配制。例如，将200mg抗PD-1抗体与200mg抗TIGIT抗体共同配制。

在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与实施方式中描述的一定量的抗TIGIT抗体共同配制。在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与7mg抗TIGIT抗体共同配制。在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与21mg抗TIGIT抗体共同配制。在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与70mg抗TIGIT抗体共同配制。在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与210mg抗TIGIT抗体共同配制。在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与200mg抗TIGIT抗体共同配制。在所述方法的各种实施方式中，将200mg抗PD-1抗体与700mg抗TIGIT抗体共同配制。

在所述方法的各种实施方式中，所述癌症选自实施例中描述的部分A或部分B中公开的癌症。在所述方法的各种实施方式中，所述癌症选自以下中的至少一种：NSCLC、结直肠癌、宫颈癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、上皮癌、输卵管癌或原发性腹膜癌。例如，所述癌症是NSCLC。在各种实施方式中，所述受试者或患者患有癌症并表达至少一种乳腺癌基因(例如BRCA)。在各种实施方式中，发现来自所述受试者的癌症或样本具有至少一种乳腺癌基因(BRCA)的水平或表达所述至少一种BRCA。在各种实施方式中，所述至少一种BRCA基因是BRCA1或BRCA2。在一个实施方式中，所述癌症是BRCA阴性的。例如，所述癌症(例如乳腺癌和卵巢癌)是BRCA阴性癌症。在一个实施方式中，所述癌症是BRCA阳性的。

在各种实施方式中，所述方法进一步包括施用(i)卡铂和培美曲塞(5-取代的吡咯并[2,3-d]嘧啶)的组合或(ii)卡铂和紫杉醇的组合。

在所述方法的各种实施方式中，所述个体之前没有用抗PD-1或抗PD-L1疗法治疗过，或者在接受之前的抗PD-1或抗PD-L1疗法时被确认为是进展性的。

本发明的一个方面提供了一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。在各种实施方式中，所述药物组合物包含约2.1mg至约700mg 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。在各种实施方式中，所述31C6抗体包含2.1mg至700mg抗TIGIT抗体31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。

在各种实施方式中，所述药物组合物包含2.1mg抗TIGIT抗体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含7mg抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含21mg抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含70mg抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含200mg抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。在所述方法的各种实施方式中，所述药物组合物包含210mg抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。在所述方法的各种实施方式中，所述药物组合物包含700mg抗TIGIT 31C6抗体或抗原结合片段或31C6变体。

本发明的一个方面提供了一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、200mg 31C6抗体或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

在所述方法的各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区。在各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。在各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

在各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQID NO:23。在各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，并且所述轻链包含SEQ IDNO:22。在各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQID NO:23，和所述轻链包含SEQ ID NO:22。

在各种实施方式中，所述31C6抗体是31C6变体。

在各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含与SEQID NO:25具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的重链可变区。在各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，所述轻链包含与SEQ ID NO:24具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的轻链可变区。在各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含与SEQ ID NO:25具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的重链可变区，和所述轻链包含与SEQ ID NO:24具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性的轻链可变区。

在各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，其中所述重链与SEQ ID NO:23具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性。在各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且所述轻链与SEQ ID NO:22具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性。在各种实施方式中，所述31C6变体包含重链和轻链，并且其中所述重链与SEQ ID NO:23具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性，和所述轻链与SEQ ID NO:22具有80％、85％、90％、95％或99％的序列同一性。

在各种实施方式中，配制所述抗TIGIT抗体以使其与派姆单抗或派姆单抗变体共同施用。

在各种实施方式中，所述抗TIGIT抗体与派姆单抗或派姆单抗变体共同配制。

在各种实施方式中，所述派姆单抗或其派姆单抗变体包含：(a)SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR。在各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是31C6变体，其包含：(a)SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR。

在各种实施方式中，所述派姆单抗或派姆单抗变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区。

在各种实施方式中，所述派姆单抗或派姆单抗变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5。例如，所述抗PD-1抗体是派姆单抗。在各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是派姆单抗变体。在各种实施方式中，所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

在各种实施方式中，配制所述派姆单抗或派姆单抗变体以用于静脉输注。

在各种实施方式中，所述派姆单抗或派姆单抗变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR；并且所述a31C6抗体是包含重链和轻链的人源化抗TIGIT抗体，其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQID NO:26、27和28的轻链CDR。

在各种实施方式中，所述派姆单抗或派姆单抗变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区；并且所述31C6抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

在各种实施方式中，所述派姆单抗或派姆单抗变体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5；并且所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。本发明的一个方面提供了一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、2.1至700mg 31C6抗体或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

本发明的一个方面提供了药物组合物，其包含400mg派姆单抗或派姆单抗变体、2.1至700mg 31C6抗体或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

在各种实施方式中，所述药物组合物包含2.1mg 31C6抗体或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含7mg 31C6抗体或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含21mg 31C6抗体或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含70mg 31C6抗体或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含200mg 31C6抗体或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含210mg 31C6抗体或31C6变体。在各种实施方式中，所述药物组合物包含700mg 31C6抗体或31C6变体。

在所述药物组合物的各种实施方式中，所述31C6抗体或31C6变体包含重链和轻链，其中所述轻链包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR，和所述重链包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR。

在所述药物组合物的各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

在所述药物组合物的各种实施方式中，所述31C6抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。

本发明的一个方面提供一种用于治疗癌症的试剂盒，其包含本文所述的任何的药物组合物。在各种实施方式中，所述组合物进一步包含使用说明书。

附图说明

图1.将来自单药疗法和组合疗法组的31C6抗TIGIT抗体药代动力学数据汇总生成的图。使用标称采样时间绘制算术平均浓度。

图2A和2B.分别显示了根据RECIST v1.1的研究者评估(在基线处有可测量疾病和≥1次可评估的基线后成像评估的患者中评估，(31C6单药疗法的n＝25，且31C6与派姆单抗的组合疗法的n＝41))而得的目标病变与基线相比具有最佳百分比变化的受试者的瀑布(waterfall)图。每个条形(bar)代表一个单独的受试者。组合疗法的数据包括最初分配到所述组合的32个患者和从单药疗法过渡转移(crossed over)而来的9个患者。对于31C6单药疗法，25％显示任何下降，4％显示≥-30％的下降。对于31C6和派姆单抗组合疗法，32％显示任何下降，24％显示≥-30％的下降。

图3A和3B.分别显示了受试者的图，所述图显示了基于RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。线长代表至研究治疗的最后一剂的时间。显示了每个患者到达最佳响应和随后的PD或死亡的时间，以先发生的为准。仅包括那些具有≥1次基线后成像评估的患者。*代表那些从单药疗法过渡转移到组合疗法的患者。组合疗法包括最初分配到组合疗法的32个患者和从31C6单药疗法过渡转移而来的9个患者。

图4显示了PD-1初始NSCLC患者的图，所述图显示了基于RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。

图5A和5B显示了PD-1难治性NSCLC患者的图，所述图显示了基于RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。如实施例2所述，向所述患者施用200mg 31C6抗体单药疗法(图5A)或200mg 31C6抗体和200mg派姆单抗的组合疗法(图5B)。

图6显示了难治性卵巢癌患者的图，所述图显示了基于RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。数据汇编了实施例1的部分A(31C6单药疗法)和部分B(31C6和派姆单抗的组合疗法)所述的治疗结果。

图7显示了PD-1初始乳腺癌患者的图，所述图显示了基于每个RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。如实施例2所述，用200mg 31C6和派姆单抗(200mg)的组合疗法来治疗患者。

图8显示了PD-1初始CRC乳腺癌患者的图，所述图显示了基于RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。如实施例2所述，用200mg 31C6和派姆单抗(200mg)的组合疗法来治疗患者。

图9A和9B显示了宫颈癌患者的图，所述显示了基于RECIST v1.1的研究者评估的治疗持续时间和响应。如实施例2所述，向所述患者施用200mg(图9A)或700mg(图9B)31C6抗体与200mg派姆单抗的组合疗法。

具体实施方式

缩写.在本发明的详细描述和实施例中，将使用以下缩写：

ADA 抗药抗体

AE 不良事件

ALT 丙氨酸转氨酶

ANC 嗜中性粒细胞绝对计数

aPTT 激活部分凝血活酶时间

ASaT 所有治疗的受试者

ASCO 美国临床肿瘤学会

AST 天冬氨酸转氨酶

AUC 曲线下面积

BCG 卡介苗

β-hCG β人绒毛膜促性腺激素

BOR 最佳总体响应

BID 每天两次，每次一剂

CBR 临床获益率

CDR 互补决定区

CHO 中国仓鼠卵巢

Cmax 最大浓度

Cmin 最小浓度

CNS 中枢神经系统

CR 完全响应

CRF 病例报告表

CSF 集落刺激因子

CSR 临床研究报告

CT 计算机断层扫描

CTCAE 不良事件的常用术语标准

CTLA-4 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4

D 逐步降低至下一个较低剂量

DCR 疾病控制率

DFS 无疾病存活率

DILI 药物诱导的肝损伤

DLT 剂量限制性毒性

DNA 脱氧核糖核酸

DOR 响应持续时间

DSDR 疾病持续稳定率

DU 不可接受的毒性剂量

ECG 心电图

ECI 临床感兴趣的事件

ECOG 东方肿瘤合作组织

eCRF 电子病例报告表

EMA 欧洲药品管理局

FAS 全分析集

ELISA 酶联免疫测定

FBR 未来生物医学研究

FFPE 福尔马林固定，石蜡包埋

FR 骨架区

FSH 促卵泡激素

G3 CTCAE(不良事件分级量表)等级3

GCP 良好临床规范

GFR 肾小球滤过率

GGT γ-谷氨酰转肽酶

HBsAg 乙型肝炎表面抗原

HCV 丙型肝炎病毒

HIV 人免疫缺陷病毒

HRT 激素替代疗法

IB 《研究者手册》

ICF 知情同意书

ICH 国际协调会议

iCPD iRECIST确认的疾病进展

IEC 独立伦理委员会

Ig 免疫球蛋白

IgG 免疫球蛋白G

IHC 免疫组织化学或免疫组织化学的

IL 白细胞介素

IM 肌肉内的

INR 国际标准化比率

IO 肿瘤免疫剂

irAE 免疫相关不良事件

IRB 机构审查委员会

iRECIST 用于基于免疫疗法的改良RECIST 1.1

irRC 免疫相关响应标准

iSD iRECIST疾病稳定

iUPD iRECIST未确认的疾病进展

IV 静脉内的

IVRS 互动式语音响应系统

IWRS 综合网络响应系统

LDH 乳酸脱氢酶

LFT 肝功能测试

mAb 单克隆抗体

MASCC 多国癌症支持治疗协会

MRI 磁共振成象

mRNA 信使核糖核酸

MSD Merck Sharp&Dohme Corp.，Merck&Co.,Inc.的子公司

MSI 微卫星不稳定性

MTD 最大耐受剂量

mTPI 修正毒性概率区间

NCBI 国家生物技术信息中心

NCI 国家癌症研究所

NK 自然杀伤

NOAEL 未观察到不良反应水平

NSAID 非甾体抗炎药

NSCLC 非小细胞肺癌

ORR 客观响应率

OS 总存活

OTC 非处方药

PBMC 外周血单核细胞

PD 疾病进展

PD-1 程序性死亡1

PD-L1 程序性细胞死亡1配体1

PD-L2 程序性细胞死亡1配体2

PFS 无进展的存活

PK 药代动力学

PNA 肺炎

PP 按试验方案

PR 部分响应

PT 凝血酶原时间

PTT 部分凝血活酶时间

Q2W 每两周一剂

Q3W 每三周一剂

QD 每天一剂

RECIST 实体瘤的响应评估标准

1.1 版本1.1

RNA 核糖核酸

RP2D 推荐的2期剂量

SAE 严重不良事件

SAP 统计分析计划

SD 疾病稳定

SGOT 血清谷草转氨酶

SGPT 血清谷丙转氨酶

SNP 单核苷酸多态性

SoA 活性时间表

sSAP 补充统计分析计划

TCR T细胞受体

TIGIT 具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体

TNBC 三阴性乳腺癌

TNF 肿瘤坏死因子

TSH 促甲状腺激素

ULN 正常值上限

VH 免疫球蛋白重链可变区

VK 免疫球蛋白κ轻链可变区

WOCBP 有生育潜力的女性

I.定义

为了可以更容易地理解本发明，下文具体定义了某些技术和科学术语。除非在本文件的其他地方特别定义，否则本文使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。

如本文所用，包括所附权利要求，单数形式的词，例如“一个(这种(a/an)”、和“所述(the)”包括其对应的复数参考，除非上下文另有明确规定。

如本文所用，“31C6变体”是指包含重链和轻链序列的单克隆抗体(如下文和WO2016/028656所述，WO2016/028656通过引用整体并入)，所述重链和轻链序列除了以下之外，与31C6中的重链和轻链序列基本相同：具有位于轻链CDR之外的位置处的三个、两个或一个保守氨基酸置换和位于重链CDR之外的六个、五个、四个、三个、两个或一个保守氨基酸置换，例如变体位置位于FR区或恒定区，并且任选地具有重链的C末端赖氨酸残基的缺失。换言之，31C6和31C6变体包含相同的CDR序列，但由于在其全长轻链和重链序列中分别在不超过三个或六个其他位置处具有保守氨基酸置换而彼此不同。31C6变体在以下特性方面与31C6基本相同：对人TIGIT的结合亲和力和阻断人TIGIT与人CD155和人CD112结合的能力。

当“施用”用于动物、人、实验对象、细胞、组织、器官或生物流体，其是指外源药物、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、受试者、细胞、组织、器官或生物流体的接触。细胞的治疗包括试剂与细胞的接触，以及试剂与流体的接触，其中流体与细胞接触。术语“受试者”包括任何生物体，优选动物，更优选哺乳动物(例如大鼠、小鼠、狗、猫、兔)，且最优选人。

如本文所用，术语“抗体”是指表现出所需生物学或结合活性的任何形式的抗体。因此，其以最广泛的意义使用，且具体涵盖但不限于单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、人源化和全人抗体、嵌合抗体和驼峰化单域抗体。“亲本抗体”是通过在修饰抗体以用于用于预期用途(例如人源化抗体以使其用作人治疗剂)之前将免疫系统暴露于抗原而获得的抗体。

一般而言，基本抗体结构单元包含四聚体。每个四聚体包含两对相同的多肽链，每对具有一条“轻”链(约25kDa)和一条“重”链(约50-70kDa)。每条链的氨基末端部分包含主要负责抗原识别的约100至110个或更多个氨基酸的可变区。重链的羧基末端部分可定义主要负责效应子功能的恒定区。通常，人轻链分为κ和λ轻链。此外，人重链通常分为μ、δ、γ、α或ε，并将抗体的同种型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在轻链和重链内，可变区和恒定区由约12个或更多个氨基酸的“J”区连接，重链还包括约10个或更多个氨基酸的“D”区。一般参见Fundamental Immunology，第7章(Paul,W.,ed.,2^nd ed.Raven Press,N.Y.(1989)。

每个轻/重链对的可变区形成抗体结合位点。因此，一般而言，完整抗体具有两个结合位点。除了双功能或双特异性抗体外，两个结合位点通常是相同的。

通常，重链和轻链两者的可变域均包含三个高变区，也称为互补决定区(CDR)，它们位于相对保守的骨架区(FR)内。CDR通常由骨架区对齐，从而能够与特定表位结合。通常，从N末端到C末端，轻链和重链可变域均包含FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。氨基酸至每个结构域的分配通常遵循以下的定义：Sequences of Proteins of Immunological Interest,Kabat等；National Institutes of Health,Bethesda,Md.；第5版；NIH公布号91-3242(1991)；Kabat(1978)Adv.Prot.Chem.32:1-75；Kabat等，(1977)J.Biol.Chem.252:6609-6616；Chothia等，(1987)J Mol.Biol.196:901-917或Chothia等，(1989)Nature 342:878-883。

如本文所用，除非另有说明，“抗体片段”或“抗原结合片段”是指抗体的抗原结合片段，即保留通过全长抗体与抗原特异性地结合的能力的抗体片段，例如保留一个或多个CDR区的片段。抗体结合片段的实例包括但不限于Fab、Fab'、F(ab')₂和Fv片段；双体；线性抗体；单链抗体分子，例如sc-Fv；由抗体片段形成的纳米抗体和多特异性抗体。

“特异性地结合”特定目标蛋白的抗体是与其他蛋白相比表现出优先结合该目标的抗体，但这种特异性不要求绝对结合特异性。如果抗体的结合决定了样本中目标蛋白的存在，例如不会产生不希望的结果(例如假阳性)，则认为所述抗体对其预期目标具有“特异性”。可用于本发明的抗体或其结合片段将以比非目标蛋白的亲和力大至少两倍、优选大至少十倍、更优选大至少20倍和最优选大至少100倍的亲和力与目标蛋白结合。如本文所用，据说如果抗体与包含给定氨基酸序列(例如成熟人PD-1或人PD-L1分子的氨基酸序列)的多肽结合但不与缺少该序列的蛋白结合，则所述抗体与包含该序列的多肽特异性地结合。

如本文所用，“卡铂”是指具有广谱抗肿瘤特性的第二代铂化合物。参见美国专利号10,421,770、8,377,888和6,770,653。卡铂包含与两个氨基团和环丁烷-二羧基残基复合的铂原子。该试剂在细胞内被激活以形成活性铂复合物，该复合物与亲核基团(例如DNA中富含GC的位点)结合，从而诱导链内和链间DNA交联，以及DNA-蛋白交联。这些卡铂诱导的DNA和蛋白效应导致细胞凋亡和细胞生长抑制。该试剂具有与其母体化合物顺铂的杀肿瘤活性相似的杀肿瘤活性，但其更稳定且毒性更小。也可施用卡铂类似物以用于癌症治疗。参见美国专利号6548541B1。

“嵌合抗体”是指一种抗体，其中重链和/或轻链的一部分与源自特定物种(例如人)或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的对应序列相同或同源，而所述链的其余部分与源自另一物种(例如小鼠)或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的对应序列以及此类抗体的片段相同或同源，只要它们表现出所需的生物活性。

如本文针对诸如PD-1拮抗剂或TIGIT拮抗剂之类的药剂所使用的“共同施用”是指施用这些药剂以具有重叠的治疗活性，并且不一定是将这些药剂同时施用于受试者。所述药剂在施用前可以或可以不物理组合。在一个实施方式中，将所述药剂同时或约同时施用于受试者。例如，包含在不同小瓶中的抗PD-1抗体和抗TIGIT抗体药物产品，当在液体溶液中时，可以混合到同一个静脉输注袋或注射装置中，并同时施用于患者。

如本文所用，“共同配制的(co-formulated/coformulated)”或“共制剂(co-formulation/coformulation)”是指至少两种不同的抗体或其抗原结合片段，其被配制在一起并作为组合产品储存在单个小瓶或容器中(例如注射装置)，而不是单独配制和储存，然后在施用前混合或单独施用。在一个实施方式中，共制剂包含两种不同的抗体或其抗原结合片段。

药代动力学“稳态”是一个时间段，在其内由于多次给药而导致的药物浓度的任何累积已被最大化且在每次后续剂量被施用后全身药物暴露被认为是均匀的；在派姆单抗的特定情况下，在施用后约16周时和之后达到稳态。

AUC、Cavg和Cmin是其施用后人体全身暴露于药物(例如派姆单抗)的药代动力学指标，通常被认为是药物功效的驱动因素。AUC和Cavg代表给药间隔内的平均暴露量，但单位不同。“Cmin”代表在给药间隔结束时(就在下一次给药之前)观察到的最小或最低(谷)药物浓度。

“Cmax,ss”是施用后不久观察到的最大或最高(峰)药物浓度。在通过静脉输注施用的派姆单抗的特定情况下，峰值浓度在输注结束后立即出现。Cmax,ss是通常被视为安全性驱动因素的指标。

“人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白蛋白序列的抗体。如果在小鼠、小鼠细胞或源自小鼠细胞的杂交瘤中产生，人抗体可能包含鼠碳水化合物链。类似地，“小鼠抗体”或“大鼠抗体”指分别仅包含小鼠或大鼠免疫球蛋白序列的抗体。

“人源化抗体”是指包含来自非人(例如鼠)抗体以及人抗体的序列的抗体形式。此类抗体包含源自非人免疫球蛋白的最少序列。一般而言，人源化抗体将包含基本上所有的至少一个、通常两个可变域，其中所有或基本上所有的高变环对应于非人免疫球蛋白的那些和所有或基本上所有的FR区是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体任选地还将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区。必要时将前缀“hum”、“hu”或“h”添加到抗体克隆名称中以区分人源化抗体和亲本啮齿动物抗体。啮齿动物抗体的人源化形式通常包含与亲本啮齿动物抗体相同的CDR序列，尽管可以出于增加亲和力、增加人源化抗体的稳定性的原因或其他原因包括某些氨基酸置换。

“抗肿瘤响应”当指用治疗方案(例如本文所述的组合疗法)治疗的癌症患者时，意为至少一种积极的治疗效果，如例如癌细胞数量减少、肿瘤大小减小、癌细胞浸润到外周器官中的速率降低，肿瘤转移或肿瘤生长的速率降低，或无进展存活。可以通过多种方式衡量癌症的积极治疗效果(参见W.A.Weber,J.Null.Med.50:1S-10S(2009)；Eisenhauer等，同上)。在一些实施方式中，使用RECIST 1.1标准、二维irRC或一维irRC评估对本文所述组合疗法的抗肿瘤响应。在一些实施方式中，抗肿瘤响应是SD、PR、CR、PFS或DFS中的任一个。“二维irRC”是指在以下中描述的一组标准：Wolchok JD等，Guidelines for the evaluationof immune therapy activity in solid tumors:immune-related response criteria，Clin Cancer Res.2009；15(23):7412–7420。这些标准利用目标病变的二维肿瘤测量值，所述测量值是通过将每个病变的最长直径和最长垂直直径(cm²)相乘获得的。“生物治疗剂”是指生物分子，例如抗体或融合蛋白，其在支持肿瘤维持和/或生长或抑制抗肿瘤免疫应答的任何生物途径中阻断配体/受体信号。生物治疗剂的类别包括但不限于针对VEGF、EGFR、Her2/neu、其他生长因子受体、CD20、CD40、CD-40L、CTLA-4、OX-40、4-1BB和ICOS的抗体。“CBR”或“临床受益率”是指CR+PR+持久SD。

除非另有说明，本文所用的“CDR”或“CDRs”是指免疫球蛋白可变区中的互补决定区，其使用Kabat编号系统定义。

“化学治疗剂”是可用于治疗癌症的化合物。化学治疗剂的类别包括但不限于烷化剂、抗代谢物、激酶抑制剂、纺锤体毒植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、光敏剂、抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)、抗孕酮、雌激素受体下调剂(ERD)、雌激素受体拮抗剂、促黄体激素释放激素激动剂、抗雄激素、芳香酶抑制剂、EGFR抑制剂、VEGF抑制剂和抑制与异常细胞增殖或肿瘤生长有关的基因表达的反义寡核苷酸。可用于本发明的治疗方法的化学治疗剂包括细胞生长抑制剂和/或细胞毒剂。如本文所用，“Chothia”意为描述于以下中的抗体编号系统：Al-Lazikani et al.,JMB 273:927-948(1997)。

“包含(comprising)”或其变体(例如“comprise”、“comprises”或“comprisedof”)在整个说明书和权利要求中以包含的意义使用，即，指定所述特征的存在但不排除可实质上增强本发明的任何实施方式的操作或效用的进一步特征的存在或添加，除非上下文由于明确表达的语言或必要的暗示而另有要求。

“保守修饰变体”或“保守置换”是指用具有相似特征(例如电荷、侧链大小、疏水性/亲水性、骨架构象和刚性等)的其他氨基酸置换蛋白中的氨基酸，从而可以在不改变蛋白的生物活性或其他所需特性(例如抗原亲和力和/或特异性)的情况下进行频繁改变。本领域技术人员认识到，一般而言，多肽的非必需区域中的单个氨基酸置换基本上不改变生物活性(参见例如Watson等(1987)Molecular Biology of the Gene,The Benjamin/Cummings Pub.Co.，第224页(第4版))。此外，结构或功能相似的氨基酸的置换不太可能破坏生物活性。示例性保守置换示于下表1中。

表1.示例性保守氨基酸置换

原始残基	保守置换
		Ala(A)	Gly；Ser
Arg(R)	Lys；His
		Asn(N)	Gln；His
Asp(D)	Glu；Asn
		Cys(C)	Ser；Ala
Gln(Q)	Asn
		Glu(E)	Asp；Gln
Gly(G)	Ala
		His(H)	Asn；Gln
Ile(I)	Leu；Val
		Leu(L)	Ile；Val
Lys(K)	Arg；His
		Met(M)	Leu；Ile；Tyr
Phe(F)	Tyr；Met；Leu
		Pro(P)	Ala
Ser(S)	Thr
		Thr(T)	Ser
Trp(W)	Tyr；Phe
		Tyr(Y)	Trp；Phe
Val(V)	Ile；Leu

在整个说明书和权利要求书中使用的“基本上由……组成(consistsessentially of)”和其变体(例如“consist essentially of”或“consistingessentially of”)表示包括任何所列举的元素或元素组，以及任选地包括与所列举的元素具有相似或不同特性且不会实质性地改变指定给药方案、方法或组合物的基本或新颖特性的其他元素。作为一个非限制性实例，基本上由所列举的氨基酸序列组成的PD-1拮抗剂还可包含一个或多个氨基酸，包括一个或多个氨基酸残基的置换，所述置换不实质性地影响结合化合物的特性。

“DCR”或“疾病控制率”是指CR+PR+SD。

“诊断性抗PD-L单克隆抗体”是指与某些哺乳动物细胞的表面上表达的指定PD-L(PD-L1或PDL2)的成熟形式特异性地结合的mAb。成熟PD-L缺少预分泌前导序列(也称为前导肽)。除非另有说明或从上下文可以明显看出，否则术语“PD-L”和“成熟PD-L”在本文中可互换使用，且应理解为表示相同的分子。

如本文所用，诊断性抗人PD-L1 mAb或抗hPD-L1 mAb是指特异性地结合成熟人PD-L1的单克隆抗体。成熟人PD-L1分子由以下序列的氨基酸19-290组成：

MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERTHLVILGAILLCLGVALTFIFR LRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLEET(SEQID NO:32).

可用作福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)的肿瘤组织切片中的PD-L1表达的免疫组织化学(IHC)检测的诊断性mAb的诊断性抗人PD-L1 mAb的具体实例是抗体20C3和抗体22C3，其描述于WO2014/100079中。下表2提供了抗体22C3的特征。据报道另一抗人PD-L1mAb可用于IHC检测FFPE组织切片中的PD-L1表达(Chen,B.J.等，Clin Cancer Res 19:3462-3473(2013))是可从Sino Biological,Inc.(中华人民共和国北京；产品目录号10084-R015)公开获得的兔抗人PD-L1)。

表2.单克隆抗体MEB037.22C3(22C3)的特征

如本文所用，“PD-L1”或“PD-L2”表达是指细胞表面上指定PD-L蛋白、或细胞或组织内指定PD-L mRNA的任何可检测的表达水平。PD-L蛋白表达可在肿瘤组织切片的IHC测定中使用诊断性PD-L抗体或通过流式细胞术检测。

或者，可以使用特异性地结合所需PD-L目标(例如PD-L1或PD-L2)的结合剂(例如，抗体片段、亲和体等)通过PET成像来检测肿瘤细胞的PD-L蛋白表达。用于检测和测量PD-LmRNA表达的技术包括RT-PCR、实时定量RT-PCR、RNAseq和Nanostring平台(J.Clin.Invest.2017；127(8):2930–2940)。

已经描述了几种方法来量化肿瘤组织切片IHC检测中的PD-L1蛋白表达。参见例如Thompson,R.H.等，PNAS 101(49)；17174-17179(2004)；Thompson,R.H.等，Cancer Res.66:3381-3385(2006)；Gadiot,J.等，Cancer 117:2192-2201(2011)；Taube,J.M.等，SciTransl Med 4,127ra37(2012)；和Toplian,S.L.等，New Eng.J Med.366(26):2443-2454(2012)。参见US 20170285037，其描述了病理学家使用的15苏木精和伊红染色。

一种方法采用PD-L1表达阳性或阴性的简单二元终点，阳性结果定义为表现出细胞表面膜染色组织学证据的肿瘤细胞百分比。如果肿瘤组织切片至少占总肿瘤细胞的1％，则将其计为PD-L1表达阳性。

在另一种方法中，肿瘤组织切片中的PD-L1表达在肿瘤细胞以及浸润性免疫细胞(主要包括淋巴细胞)中进行量化。显示膜染色的肿瘤细胞和浸润性免疫细胞的百分比分别量化为<5％、5至9％，然后以10％的增量增加至100％。免疫浸润中的PD-L1表达用一种称为调整炎症评分(AIS)的半定量测量值报告，其是通过将膜染色细胞的百分比乘以浸润强度来确定的，浸润强度分级为无(0)、轻度(1分，罕见淋巴细胞)、中度(2分，淋巴组织细胞聚集体对肿瘤的局灶性浸润)或重度(3分，弥漫性浸润)。如果AIS≥5，则将肿瘤组织切片计为免疫浸润的PD-L1表达阳性。

PD-L mRNA表达水平可以与定量RT-PCR中经常使用的一种或多种参考基因的mRNA表达水平进行比较。

在一些实施方式中，确定由恶性细胞和/或由肿瘤内浸润免疫细胞引起的PD-L1表达水平(蛋白和/或mRNA)在与由适当的对照引起的PD-L1表达(蛋白和/或mRNA)水平比较的基础上是“过表达”或升高的。例如，对照PD-L1蛋白或mRNA表达水平可以是在相同类型的非恶性细胞或来自匹配的正常组织的切片中量化的水平。在一些优选的实施方式中，如果样本中的PD-L1蛋白(和/或PD-L1mRNA)比对照大至少10％、20％或30％，则确定肿瘤样本中的PD-L1表达升高。

“肿瘤比例评分(TPS)”是指以任何强度(弱、中或强)在细胞膜上表达PD-L1的肿瘤细胞的百分比。线性部分或完全细胞膜染色被理解为PD-L1阳性。

“单核炎症密度评分(MIDS)”是指浸润或邻近肿瘤的表达PD-L1的单核炎症细胞(MIC)(肿瘤巢和邻近支持基质内的大小淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞)的数量相比于肿瘤细胞总数量的比率。MIDS以0至4的等级记录，0＝无；1＝存在，但少于每100个肿瘤细胞一个MIC(<1％)；2＝至少每100个肿瘤细胞一个MIC，但少于每10个肿瘤细胞一个MIC(1-9％)；3＝至少每10个肿瘤细胞一个MIC，但MIC少于肿瘤细胞(10-99％)；4＝至少与肿瘤细胞一样多的MIC(≥100％)。

“组合阳性评分(CPS)”是指肿瘤巢和相邻支持基质(分子)内PD-L1阳性肿瘤细胞和PD-L1阳性单核炎症细胞(MIC)的数量相比于肿瘤细胞的总数量(分母；即PD-L1阳性和PD-L1阴性肿瘤细胞的数量)的比率。任何强度的PD-L1表达都被认为是阳性的，即弱(1+)、中度(2+)或强(3+)。

“PD-L1表达阳性”是指至少1％的肿瘤比例评分、单核炎症密度评分或组合阳性评分；AIS≥5；与适当的对照相比，恶性细胞和/或肿瘤内浸润的免疫细胞引起的PD-L1表达(蛋白和/或mRNA)水平升高。

“DSDR”或“疾病持续稳定率”是指SD≥23周。如本文所用，“骨架区”或“FR”是指不包括CDR区的免疫球蛋白可变区。

如本文所用，“Kabat”是指由Elvin A.Kabat开创的免疫球蛋白排列和编号系统((1991)Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public HealthService,National Institutes of Health,Bethesda,Md)。

“抗TIGIT抗体”是指与人TIGIT特异性地结合的单克隆抗体。人TIGIT包含氨基酸序列：

MRWCLLLIWA QGLRQAPLAS GMMTGTIETT GNISAEKGGS IILQCHLSST TAQVTQVNWEQQDQLLAICN ADLGWHISPS FKDRVAPGPG LGLTLQSLTV NDTGEYFCIY HTYPDGTYTGRIFLEVLESSVAEHGARFQI PLLGAMAATL VVICTAVIVV VALTRKKKAL RIHSVEGDLRRKSAGQEEWS PSAPSPPGSCVQAEAAPAGL CGEQRGEDCA ELHDYFNVLS YRSLGNCSFF TETG(SEQ ID NO:33)；另参见Genbank登录号NP_776160.2(SEQ ID NO:33)的氨基酸残基25-244(SEQ ID NO:33的氨基酸残基1-24对应于前导肽)。

“微卫星不稳定性(MSI)”是指与肿瘤中DNA错配修复缺陷相关的基因组不稳定性形式。参见Boland等，Cancer Research 58,5258-5257,1998。在一个实施方式中，可以使用五个国家癌症研究所(NCI)推荐的微卫星标志物BAT25(GenBank登录号9834508)、BAT26(GenBank登录号9834505)、D5S346(GenBank登录号181171)、D2S123(GenBank登录号187953)、D17S250(GenBank登录号177030)来进行MSI分析。可以使用其他标记，例如BAT40、BAT34C4、TGF-β-RII和ACTC。用于MSI分析的市售试剂盒包含例如Promega MSI多重PCR测定。

“高频微卫星不稳定性”或“高微卫星不稳定性(MSI-H)”是指是否五个NCI标志物中的两个或多个显示不稳定或≥30-40％的总标志物显示不稳定性(即具有插入/缺失突变)。

“低频微卫星不稳定性”或“微卫星不稳定性低(MSI-L)”是指是否五个NCI标志物中的一个显示不稳定或<30-40％的总标志物显示不稳定性(即具有插入/缺失突变)。

如本文所用，“非MSI-H结直肠癌”是指微卫星稳定(MSS)和低频MSI(MSI-L)结直肠癌。

“微卫星稳定(MSS)”是指是否五个NCI标志物中没有一个显示不稳定(即具有插入/缺失突变)

“熟练错配修复(pMMR)结直肠癌”是指通过IHC在CRC肿瘤标本中引起的MMR蛋白(MLH1、PMS2、MSH2和MSH6)的正常表达。10种用于MMR分析的市售试剂盒包含Ventana MMRIHC测定。

“错配修复缺陷(dMMR)结直肠癌”是指通过IHC在CRC肿瘤标本中引起的一种或多种MMR蛋白(MLH1、PMS2、MSH2和MSH6)的低表达。

如本文所用，“单克隆抗体”或“mAb”或“Mab”是指基本同质的抗体的群体，即构成该群体的抗体分子在氨基酸序列上有15个相同，除了可能是少量存在的可能的天然发生的突变之外。相比之下，常规(多克隆)抗体制剂通常包括在其可变域中具有不同氨基酸序列的多种不同抗体，尤其是其CDR，其通常对不同表位具有特异性。修饰语“单克隆”表示从20个基本同质的抗体群体中获得的抗体的特征，其不应被理解为需要通过任何特定方法产生抗体。例如，根据本发明使用的单克隆抗体可以通过Kohler等(1975)Nature 256:495首先描述的杂交瘤方法来制备，或者可以通过重组DNA方法来制备(参见例如美国专利号4,816,567)。也可以使用例如Clackson et al.(1991)Nature 352:624-628和Marks et al.(1991)J.Mol.Biol.222:581-597中描述的技术来将“单克隆抗体”从噬菌体抗体库中分离出来。另参见Presta(2005)J.Allergy Clin.Immunol.116:731。

当“无响应患者”指代对使用本文所述的组合疗法的治疗的特定抗肿瘤响应时，其意为患者未表现出抗肿瘤响应。

“ORR”或“客观响应率”在一些实施方式中是指CR+PR，并且ORR_(第24周)是指在抗癌治疗24周后使用irRECIST在队列中的每个患者中测量的CR和PR。“患者”或“受试者”是指需要治疗或参与临床试验、流行病学研究或用作对照的任何单个受试者，包括人和哺乳动物兽患者，例如牛、马、狗和猫。

“PD-1拮抗剂”是指阻断癌细胞上表达的PD-L1与免疫细胞(T细胞、B细胞或NKT细胞)上表达的PD-1结合并且优选还阻断癌细胞上表达的PD-L2与免疫细胞上表达的PD-1。PD-1及其配体的替代名称或同义词包括：PD-1的PDCD1、PD1、CD279和SLEB2；PD-L1的PDCD1L1、PDL1、B7H1、B7-4、CD274和B7-H；PD-L2的PDCD1L2、PDL2、B7-DC、Btdc和CD273。在治疗人类个体的本发明的任何治疗方法、药物和用途中，PD-1拮抗剂阻断人PD-L1与人PD-1的结合，并且优选阻断人PD-L1和PD-L2两者与人PD-1的结合。人PD-1氨基酸序列可在NCBI基因座编号：NP_005009中找到。人PD-L1和PD-L2氨基酸序列分别可在NCBI基因座编号：NP_054862和NP_079515中找到。

如本文所用，“派姆单抗变体”是指包含中重链和轻链序列的单克隆抗体，所述重链和轻链序列除了以下之外，与派姆单抗中的重链和轻链序列基本相同：在位于轻链CDR外的位置处具有三个、两个或一个保守氨基酸置换，且在位于重链CDR之外具有六个、五个、四个、三个、两个或一个保守氨基酸置换，例如，变体位置位于FR区或恒定区，并且任选地具有重链的C末端赖氨酸残基的缺失。换言之，派姆单抗和派姆单抗变体包含相同的CDR序列，但由于在其全长轻链和重链序列中的分别不超过三个或六个的其他位置处具有保守氨基酸置换而彼此不同。派姆单抗变体在以下特性方面与派姆单抗基本相同：对PD-1的结合亲和力和阻断PD-L1和PD-L2各自与PD-1结合的能力。

如本文所用，术语“培美曲塞”是指名为5-取代的吡咯并[2,3-d]嘧啶的化合物。具体而言，该术语是指对各种癌症(包括非小细胞肺癌和恶性胸膜间皮瘤)显示出抗癌作用的多目标抗叶酸剂。培美曲塞通过抑制参与叶酸代谢的代谢物的活性，对各种癌症(包括非小细胞肺癌和恶性胸膜间皮瘤)显示出抗癌作用。也可以使用培美曲塞类似物和变体。参见PCT公开号WO2014084651A1。

此处使用的“RECIST 1.1响应标准”是指Eisenhauer等，E.A.等，Eur.J Cancer45:228-247(2009)中所示的目标病变或非目标病变的定义，其视测量响应的上下文而定。

“响应患者”当指代对使用本文所述的组合疗法的治疗的特定抗肿瘤响应时，是指表现出抗肿瘤响应的患者。

“持续响应”是指在停止用本文所述的治疗剂或组合疗法治疗后的持续治疗效果。在一些实施方式中，持续响应的持续时间至少与治疗持续时间相同，或至少比治疗持续时间长1.5、2.0、2.5或3倍。

紫杉醇是一种有价值的癌症化学治疗剂，用于治疗多种类型的癌症，包括卵巢癌、乳腺癌和肺癌。紫杉醇是一种源自短叶红豆杉(太平洋紫杉)树皮的天然产物。紫杉醇在有丝分裂期间抑制微管聚合并导致随后的细胞死亡。紫杉醇显示出广泛的杀瘤活性，包括针对乳腺癌、卵巢癌和肺癌的杀瘤活性(McGuire等,1996,N.Engld.J.Med.334:1-6；和Johnson等，1996,J.Clin.Ocol.14:2054-2060)。虽然紫杉醇通常对治疗这些恶性肿瘤有效，但由于最终会产生紫杉醇耐药性，因此通常无法治愈。对紫杉醇的细胞抗性可能包括一些机制，例如P-糖蛋白的表达增强和通过β链中的基因突变或聚合微管内微管蛋白异构体的比例变化而导致的微管蛋白结构的改变(Wahl et al.,1996,Nature Medicine 2:72-79；Horwitz et al.,1993,Natl.Cancer Inst.15:55-61；Haber et al.,1995,J.Biol.Chem.270:31269-31275；and Giannakakou et al.,1997,J.Biol.Chem.272:17118-17125)。一些肿瘤通过未知机制获得紫杉醇抗性。

“组织切片”是指组织样本的单个部分或片，例如从正常组织或肿瘤的样本切下的薄组织切片。

如本文所用，“治疗(treat/treating)”癌症是指向患有癌症或被诊断患有癌症的受试者施用本发明的治疗剂以实现至少一种积极的治疗效果，例如减少癌细胞的数量，减小肿瘤大小，降低癌细胞浸润到外周器官中的速率，或降低肿瘤转移或肿瘤生长的速率。可以通过多种方式衡量癌症的积极治疗效果(参见W.A.Weber,J.Nucl.Med.50:1S-10S(2009))。例如，关于肿瘤生长抑制，根据NCI标准，T/C≤42％是抗肿瘤活性的最低水平。AT/C<10％被认为是高抗肿瘤活性水平，其中T/C(％)＝治疗的肿瘤体积中值/对照肿瘤体积中值×100。在一些实施方式中，使用RECIST 1.1标准或irRC(二维或一维)来评估对本文所述的组合疗法的响应，并且通过本发明的组合实现的治疗是PR、CR、OR、PFS、DFS和OS中的任一种。PFS(也称为“到达肿瘤进展的时间”)表示治疗期间和治疗后癌症不生长的时间长度，包括患者经历CR或PR的时间量，以及患者经历SD的时间量。DFS是指在治疗期间和之后患者保持无病状态的时间长度。OS是指与初始或未经治疗的个体或患者相比预期寿命的延长。在一些实施方式中，对本发明组合的响应是使用RECIST 1.1响应标准评估的PR、CR、PFS、DFS、OR和OS中的任一种。可有效治疗癌症患者的本发明组合的治疗方案可根据诸如患者的疾病状态、年龄和体重以及疗法在受试者中引起抗癌响应的能力等因素而变化。

虽然本发明的任何方面的实施方式可能无法有效地在每个受试者中实现积极的治疗效果，但其应该在通过本领域已知的任何统计测试(例如学生t检验、chi²检验、根据Mann和Whitney的U检验、Kruskal-Wallis检验(H检验)、Jonckheere-Terpstra检验和Wilcoxon检验)确定的统计学显著数量的受试者中实现这些。

术语“治疗方案”和“给药方案(dosing protocol/regimen)”可互换使用以表示本发明组合中每种治疗剂的施用剂量和时间。

当“肿瘤”用于指被诊断患有或怀疑患有癌症的受试者时，其是指任何大小的恶性或潜在恶性肿瘤或组织块，并且包括原发性肿瘤和继发性肿瘤。实体瘤是组织的异常生长或异常块，通常不包含囊肿或液体区域。不同类型的实体瘤以形成它们的细胞类型命名。实体瘤的实例是肉瘤、癌和淋巴瘤。白血病(血液癌)通常不会形成实体瘤(National CancerInstitute,Dictionary of Cancer Terms)。

“肿瘤负荷(tumor burden)”也称为“肿瘤负担(tumor load)”，是指分布在全身的肿瘤物质总量。肿瘤负荷是指全身的癌细胞总数或肿瘤的总大小，包括淋巴结和骨髓。肿瘤负荷可以通过本领域已知的多种方法来确定，如，例如通过在从受试者身上取出肿瘤后例如使用卡尺来测量肿瘤的大小，或在其在体内时使用成像技术(例如超声、骨扫描、计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)扫描)来测量肿瘤的大小。

术语“肿瘤大小”是指肿瘤的总大小，可以用肿瘤的长度和宽度来衡量。肿瘤大小可以通过本领域已知的多种方法确定，如，例如通过在从受试者身上取出肿瘤后例如使用卡尺来测量肿瘤的大小，或在其在体内时使用成像技术(例如骨扫描、超声、CT或MRI扫描)来测量肿瘤的大小。

“一维irRC是指Nishino M,Giobbie-Hurder A,Gargano M,Suda M,Ramaiya NH,Hodi FS.Developing a Common Language for Tumor Response to Immunotherapy:Immune-related Response Criteria using Unidimensional measurements，ClinCancer Res.2013；19(14):3936–3943中描述的一组标准。这些标准利用每个病变的最长直径(cm)。

如本文所用，“可变区”或“V区”是指在不同抗体之间序列可变的IgG链片段。其延伸至轻链中的Kabat残基109和重链中的Kabat残基113。

PD-1拮抗剂和抗TIGIT抗体

可用于本发明所述的治疗方法、药物和用途中的PD-1拮抗剂包括单克隆抗体(mAb)或其抗原结合片段，其与PD-1或PD-L1特异性地结合，优选与人PD-1或人PD-L1特异性地结合。mAb可以是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体，并且可以包含人恒定区。在一些实施方式中，所述人恒定区选自IgGl、IgG2、IgG3和IgG4恒定区，并且在优选实施方式中，所述人恒定区是IgGl或IgG4恒定区。在一些实施方式中，抗原结合片段选自Fab、Fab'-SH、F(ab')2、scFv和Fv片段。可以使用常规细胞培养和回收/纯化技术在CHO细胞中产生抗PD-1或抗PD-L1抗体。

与人PD-1结合并可用于本发明所述的治疗方法、药物和用途中的mAb的实例描述于US7488802、US7521051、US8008449、US8354509、US8168757、WO2004/004771、WO2004/072286、WO2004/056875和US2011/0271358中。可用作本发明所述的治疗方法、药物和用途中的PD-1拮抗剂的特定抗人PD-1mAb包括：派姆单抗(也称为MK-3475)，其为具有WHO DrugInformation，第27卷，第2期，第161-162页(2013)中描述的结构的人源化IgG4 mAb，并且包含表3所示的重链和轻链氨基酸序列；nivolumab(BMS-936558)，其为具有WHO DrugInformation，第27卷，第1期，第68-69页(2013))中描述的结构的人IgG4 mAb，并且包含表3所示的重链和轻链氨基酸序列；WO2008/156712中描述的人源化抗体h409A11、h409A16和h409A17，和正由MedImmune开发的AMP-514。

与人PD-L1结合并且可用于本发明所述的治疗方法、药物和用途中的mAb的实例描述于PCT公开号WO2013/019906和WO2010/077634A1以及美国专利号8383796中。可用作本发明所述的治疗方法、药物和用途中的PD-1拮抗剂的特定抗人PD-L1 mAb包括MPDL3280A、BMS-936559、MEDI4736、MSB0010718C和分别包含WO2013/019906的SEQ ID NO:24和SEQ IDNO:21的重链和轻链可变区的抗体。

可用于本发明所述的治疗方法、药物和用途中的其他PD-1拮抗剂包括与PD-1或PD-L1特异性地结合、优选与人PD-1或人PD-L1特异性地结合的免疫粘附素，例如包含PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分与恒定区(例如免疫球蛋白分子的Fc区)融合的融合蛋白。WO2010/027827和WO2011/066342中描述了与PD-1特异性地结合的免疫粘附分子的实例。可用作本发明所述的治疗方法、药物和用途中的PD-1拮抗剂的特定融合蛋白包括AMP-224(也称为B7-DCIg，其是PD-L2-FC融合蛋白)，并与人PD-1结合。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的一些优选实施方式中，所述PD-1拮抗剂是单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)轻链CDR SEQ ID NO:1、2和3；和(b)重链CDRSEQ ID NO:6、7和8。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的其他优选实施方式中，所述PD-1拮抗剂是单克隆抗体或其抗原结合片段，其与人PD-1特异性地结合并包含(a)包含SEQ ID NO:9或其变体的重链可变区，和(b)包含SEQ ID NO:4或其变体的轻链可变区。重链可变区序列的变体除了以下之外，与参照序列相同：所述重链可变区序列的变体在骨架区中(即在CDR之外)具有至多17个保守氨基酸置换，并且优选地在所述骨架区中具有少于十、九、八、七、六或五个保守氨基酸置换。轻链可变区序列的变体除了以下之外，与参照序列相同：所述轻链可变区序列的变体在所述骨架区中(即在CDR之外)具有至多五个保守氨基酸置换，并且优选地在所述骨架区中具有少于四个、三个或两个保守氨基酸置换。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的另一个优选实施方式中，所述PD-1拮抗剂是与人PD-1特异性地结合的单克隆抗体，并且包含(a)含有SEQ ID NO:10的重链和(b)含有SEQ ID NO:5的轻链。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的又一优选实施方式中，所述PD-1拮抗剂是与人PD-1特异性地结合，并且包含(a)含有SEQ ID NO:12的重链和(b)含有SEQ ID NO:11的轻链。

在上述所有治疗方法、药物和用途中，所述PD-1拮抗剂抑制PD-L1与PD-1的结合，优选地还抑制PD-L2与PD-1的结合。在上述治疗方法、药物和用途的一些实施方式中，所述PD-1拮抗剂是与PD-1或PD-L1特异性地结合并阻断PD-L1与PD-1的结合的单克隆抗体或其抗原结合片段。在一个实施方式中，所述PD-1拮抗剂是包含重链和轻链的抗PD-1抗体，其中所述重链和所述轻链分别包含SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:5中的氨基酸序列。

下表3提供了用于本发明所述的治疗方法、药物和用途的示例性抗PD-1mAb的氨基酸序列列表。

表3.示例性PD-1抗体序列

本发明中使用的抗TIGIT抗体可以是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体，并且可以包含人恒定区。在一些实施方式中，所述人恒定区选自IgGl、IgG2、IgG3和IgG4恒定区，并且在优选实施方式中，所述人恒定区是IgGl或IgG4恒定区。

在一个实施方式中，所述抗TIGIT抗体是31C6。在另一个实施方式中，所述抗TIGIT抗体是31C6变体。所述31C6抗体是包含两条重链和两条轻链的单克隆抗体，其中每条重链包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列，和每条轻链包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列。

31C6:包含以下氨基酸序列的轻链免疫球蛋白:

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASEHIYSYLSWYQQKPGKVPKLLIYNAKTLAEGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQHHFGSPLTFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:22)；和包含以下氨基酸序列的重链免疫球蛋白：

EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSYVMHWVRQAPGQGLEWIGYIDPYNDGAYAQKFQGRVTLTSDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGPYGWYFDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:23)；或包含以下氨基酸序列的轻链免疫球蛋白可变域：

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASEHIYSYLSWYQQKPGKVPKLLIYNAKTLAEGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQHHFGSPLTFGQGTRLEIK(SEQ ID NO:24(CDR用下划线表示))；或包含以下氨基酸序列的重链免疫球蛋白可变域：

EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSYVMHWVRQAPGQGLEWIGYIDPYNDGAYAQKFQGRVTLTSDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGPYGWYFDVWGQGTTV TVSS(SEQ ID NO:25(CDR用下划线表示))；或包含以下CDR：

CDR-L1:RASEHIYSYLS(SEQ ID NO:26)；CDR-L2:NAKTLAE(SEQ ID NO:27)；

CDR-L3:QHHFGSPLT(SEQ ID NO:28)；

CDR-H1:SYVMH(SEQ ID NO:29)；

CDR-H2:YIDPYNDGAKYAQKFQG(SEQ ID NO:30)；和CDR-H3：GGPYGWYFDV(SEQ ID NO:31)。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的一些优选实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含：(a)SEQ ID NO:26、30、27和28的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的其他优选实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含(a)含有SEQ ID NO:25或其变体的重链可变区，和(b)含有SEQ ID NO:24或其变体的轻链可变区。所述重链可变区序列的变体除了以下之外，与参照序列相同：在所述骨架区中(即在CDR之外)具有至多17个保守氨基酸置换，并且优选地在所述骨架区中具有少于十、九、八、七、六或五个保守氨基酸置换。轻链可变区序列的变体除了以下之外，与参照序列相同：在所述骨架区中(即在CDR之外)具有至多五个保守氨基酸置换，并且优选地在所述骨架区中具有少于四、三或两个保守氨基酸置换。此类变体地实例示于国际专利公开号WO2016/028656中(参见例如国际专利公开号WO2016/028656的SEQ ID NO:124-133和149-150)。

在本发明所述的治疗方法、药物和用途的另一个优选实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含(a)含有SEQ ID NO:23的重链和(b)包含SEQ ID NO:22的轻链。在本发明所述的治疗方法、药物和用途的另一个优选实施方式中，所述抗TIGIT抗体包含(a)含有SEQ ID NO:25的重链可变区和(b)含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

在一个实施方式中，所述抗PD-1或抗TIGIT抗体或抗原结合片段包含重链恒定区，例如人恒定区，例如γ1、γ2、γ3或γ4人重链恒定区或其变体。在另一个实施方式中，所述抗PD-1或抗TIGIT抗体或抗原结合片段包含轻链恒定区，例如人轻链恒定区，例如λ或κ人轻链区或其变体。作为示例而非限制，所述人重链恒定区可以是γ1，和所述人轻链恒定区可以是κ。在另一个实施方式中，所述人重链恒定区可以是γ4，和所述人轻链恒定区可以是κ。在一个替代实施方式中，所述抗体的Fc区是具有Ser228Pro突变的γ4(Schuurman,J等，Mol.Immunol.38:1-8,2001)。

在一些实施方式中，不同的恒定结构域可以附加至源自本文提供的CDR的人源化V_L和V_H区。例如，如果本发明的抗体(或片段)的特定预期用途需要改变效应子功能，则可以使用除人IgGl之外的重链恒定结构域，或者可以使用杂交IgGl/IgG4。例如，可以使用例如人IgG4恒定结构域。本发明包括含有IgG4恒定结构域的抗PD-1抗体或抗TIGIT抗体及其抗原结合片段的用途。在一个实施方式中，所述IgG4恒定结构域可以不同于对应于EU系统中的位置228和KABAT系统中的位置241的位置处的初始人IgG4恒定结构域(Swiss-Prot登录号P01861.1)，其中将初始Ser108替换为Pro以防止可干扰适当的链内二硫键形成的Cys106和Cys109(对应于EU系统中的位置Cys 226和Cys 229以及KABAT系统中的位置Cys 239和Cys 242)之间潜在的链间二硫键。参见Angal等(1993)Mol.Imunol.30:105。

方法、用途和药物

一方面，本发明提供了一种用于在患者中治疗癌症的方法，其包括施用2.1mg至700mg抗TIGIT抗体，其中所述抗TIGIT抗体包含：(a)SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR，和(b)SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR。一方面，所述抗TIGIT抗体通过静脉输注施用。在另一方面，本发明提供了一种用于在患者中治疗癌症的方法，其包括将2.1mg至700mg抗TIGIT抗体与抗PD-1或抗PD-L1抗体共同施用，其中所述抗TIGIT抗体包含：(a)SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR。在一个实施方式中，所述抗PD-1抗体阻断PD-1与PD-L1和PD-L2的结合。在一个实施方式中，施用2.1mg至700mg所述抗TIGIT抗体。在各种实施方式中，施用2.1mg、7mg、21mg、70mg、200mg、210mg或700mg所述抗TIGIT抗体。在另一个实施方式中，施用200-700mg所述抗TIGIT抗体。在另一个实施方式中，施用200-700mg所述抗TIGIT抗体。在另一个实施方式中，施用200mg或210mg所述抗TIGIT抗体。一方面，所述抗TIGIT抗体通过静脉输注施用。在另一方面，所述抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体通过静脉输注施用。在另一个实施方式中，所述抗TIGIT抗体和抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体均通过静脉输注施用。

在进一步的方面，本发明提供一种用于在患者中治疗癌症的方法，其包括通过静脉输注向个体施用包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体的组合物。在另一方面，本发明提供了一种用于在患者中治疗癌症的方法，其包括通过静脉输注向个体施用包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和210mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体的组合物。在一个实施方式中，所述组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200-700mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体。在一个实施方式中，所述组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和700mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体。

在另一个实施方式中，本发明提供一种包含抗TIGIT抗体的药物，其用于与抗PD-1或抗PD-L1抗体组合以治疗癌症，其中以2.1mg至700mg施用所述抗TIGIT抗体。在一个实施方式中，所述抗TIGIT抗体通过静脉输注施用。在另一个实施方式中，本发明提供了一种用于治疗癌症的包含抗TIGIT抗体和抗PD-1抗体的药物。在一个实施方式中，所述药物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体。在另一个实施方式中，所述药物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和700mg 31C6或31C6变体。

在另一个实施方式中，本发明提供了抗TIGIT抗体和抗PD-1或抗PD-L1抗体在制备用于在个体中治疗癌症的药物中的用途。在一个实施方式中，所述药物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200mg抗TIGIT抗体31C6或31C6变体。在另一方面，所述药物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体和700mg 31C6或31C6变体。在又一个实施方式中，本发明提供了抗TIGIT抗体在制备用于在个体中治疗癌症的药物中的用途，其中所述抗TIGIT抗体以2.1mg与200mg所述抗PD-1抗体共同施用。在一个实施方式中，所述抗TIGIT抗体和所述抗PD-1抗体各自通过静脉输注施用。

在前述方法、药物和用途中，在一个实施方式中，所述抗PD-1抗体和所述抗TIGIT抗体共同配制。在一个实施方式中，具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200mg抗体31C6或31C6变体的共同配制的产品用于静脉输注。在一个实施方式中，具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和300mg抗体31C6或31C6变体的共同配制的产品用于静脉输注。在一个实施方式中，具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和400mg抗体31C6或31C6变体的共同配制的产品用于静脉输注。在另一个实施方式中，具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和500mg抗体31C6或31C6变体的共同配制的产品用于静脉输注。在另一个实施方式中，具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和600mg抗体31C6或31C6变体的共同配制的产品用于静脉输注。在另一个实施方式中，具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和700mg抗体31C6或31C6变体的共同配制的产品用于静脉输注。

本发明还提供了一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、200mg抗体31C6或31C6变体、和一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一个实施方式中，所述药物组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、300mg抗体31C6或31C6变体、和一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一个实施方式中，所述药物组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、400mg抗体31C6或31C6变体、和一种或多种药学上可接受的赋形剂。在另一个实施方式中，所述药物组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、500mg抗体31C6或31C6变体、和一种或多种药学上可接受的赋形剂。在进一步的实施方式中，所述药物组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、600mg抗体31C6或31C6变体、和一种或多种药学上可接受的赋形剂。在进一步的实施方式中，所述药物组合物包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、700mg抗体31C6或31C6变体、和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

在上述方法、药物和用途中，在另一个实施方式中，所述抗PD-1或抗PD-L1抗体和抗TIGIT抗体共同施用。在一个实施方式中，在第1天通过静脉输注共同施用200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次。在一个实施方式中，在第1天通过静脉输注共同施用200mg派姆单抗或派姆单抗变体和300mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次。在一个实施方式中，在第1天通过静脉输注共同施用200mg派姆单抗或派姆单抗变体和400mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次。在另一个实施方式中，在第1天通过静脉输注共同施用200mg派姆单抗或派姆单抗变体和500mg 31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次。在另一个实施方式中，在第1天通过静脉输注共同施用200mg派姆单抗或派姆单抗变体和600mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次。在另一个实施方式中，在第1天通过静脉输注共同施用200mg派姆单抗或派姆单抗变体和700mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次。

在上述方法、药物和用途中，在一个实施方式中，在第1天施用400mg派姆单抗或派姆单抗变体，然后在其后每六周施用一次，并在第1天施用200mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每两周施用一次，每次通过静脉输注。在一个实施方式中，在第1天施用400mg派姆单抗或派姆单抗变体，然后在其后每六周施用一次，并在第1天施用300mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次，每次通过静脉输注。在一个实施方式中，在第1天施用400mg派姆单抗或派姆单抗变体，然后在其后每六周施用一次，并在第1天施用400mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次，每次通过静脉输注。在另一个实施方式中，在第1天施用400mg派姆单抗或派姆单抗变体，然后在其后每六周施用一次，并在第1天施用500mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次，每次通过静脉输注。在另一个实施方式中，在第1天施用400mg派姆单抗或派姆单抗变体，然后在其后每六周施用一次，并在第1天施用600mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次，每次通过静脉输注。在另一个实施方式中，在第1天施用400mg派姆单抗或派姆单抗变体，然后在其后每六周施用一次，并在第1天施用700mg抗体31C6或31C6变体，然后在其后每三周施用一次，每次通过静脉输注。

可以通过本发明所述的抗体、组合物和方法来治疗的癌症包括但不限于：心脏的：肉瘤(血管肉瘤，纤维肉瘤，横纹肌肉瘤，脂肪肉瘤)，粘液瘤，横纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺的：支气管癌(鳞状细胞，未分化小细胞，未分化大细胞，腺癌)，肺泡(细支气管)癌，支气管腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，软骨瘤错构瘤，间皮瘤；胃肠道的：食道(鳞状细胞癌，腺癌，平滑肌肉瘤，淋巴瘤)，胃(癌，淋巴瘤，平滑肌肉瘤)，胰腺(导管腺癌，胰岛素瘤，胰高血糖素瘤，胃泌素瘤，类癌瘤，血管活性肠肽瘤)，小肠(腺癌，淋巴瘤，类癌瘤，卡波氏肉瘤，平滑肌瘤，血管瘤，脂肪瘤，神经纤维瘤，纤维瘤)，大肠(腺癌，管状腺瘤，绒毛状腺瘤，错构瘤，平滑肌瘤)，结直肠；泌尿生殖道：肾脏(腺癌，维尔姆斯瘤[肾母细胞瘤]，淋巴瘤，白血病)，膀胱和尿道(鳞状细胞癌，移行细胞癌，腺癌)，前列腺(腺癌，肉瘤)，睾丸(精原细胞瘤，畸胎瘤，胚胎癌，畸胎瘤，绒毛膜癌，肉瘤，间质细胞癌，纤维瘤，纤维腺瘤，腺瘤样肿瘤，脂肪瘤)；肝脏：肝癌(肝细胞癌)，胆管癌，肝母细胞瘤，血管肉瘤，肝细胞腺瘤，血管瘤；骨：成骨肉瘤(骨肉瘤)，纤维肉瘤，恶性纤维组织细胞瘤，软骨肉瘤，尤文氏肉瘤，恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)，多发性骨髓瘤，恶性巨细胞瘤脊索瘤，骨软骨瘤(骨软骨性外生骨疣)，良性软骨瘤，良性软骨瘤骨瘤和巨细胞瘤；神经系统：颅骨(骨瘤，血管瘤，肉芽肿，黄瘤，畸形骨炎)，脑膜(脑膜瘤，脑膜肉瘤，胶质瘤病)，脑(星形细胞瘤，成神经管细胞瘤，胶质瘤，室管膜瘤，生殖细胞瘤[松果体瘤]，多形性胶质母细胞瘤，少突胶质母细胞瘤，神经鞘瘤，视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤)，脊髓神经纤维瘤，脑膜瘤，神经胶质瘤，肉瘤)；妇科的：子宫(子宫内膜癌)，宫颈(宫颈癌，癌前宫颈发育不良)，卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类癌]，颗粒鞘细胞瘤，支持细胞瘤，无性细胞瘤，恶性畸胎瘤)，外阴(鳞状细胞癌，上皮内癌，腺癌，纤维肉瘤，黑色素瘤)，阴道(透明细胞癌，鳞状细胞癌，葡萄状肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)，输卵管(癌)，乳腺；血液学：血液(髓系白血病)[急性和慢性]，急性淋巴细胞白血病，慢性淋巴细胞白血病，骨髓增生性疾病，多发性骨髓瘤，骨髓增生异常综合征)；淋巴系造血肿瘤，包括白血病，急性淋巴细胞白血病，慢性淋巴细胞白血病，急性淋巴细胞白血病，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤,霍奇金淋巴瘤,非霍奇金淋巴瘤,毛发细胞淋巴瘤，套细胞淋巴瘤，骨髓瘤和伯克特淋巴瘤；骨髓系造血肿瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病，骨髓增生异常综合征和早幼粒细胞白血病；间叶源性肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和外周神经系统肿瘤，包括星形细胞瘤，神经母细胞瘤，神经胶质瘤和神经鞘瘤；和其他肿瘤，包括黑色素瘤，皮肤(非黑色素瘤)癌，间皮瘤(细胞)，精原细胞瘤，畸胎癌，骨肉瘤，异色瘤，角化瘤，甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。在一个实施方式中，前述癌症是晚期的、不可切除的或转移性的。在一个实施方式中，所述患者对抗PD-1或抗PD-L1疗法是难治的。

在一个实施方式中，可以通过本发明所述的抗体、组合物和方法来治疗的癌症包括但不限于：肺癌、胰腺癌、结肠癌、结直肠癌、髓性白血病、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、慢性粒单核细胞白血病、甲状腺癌、骨髓增生异常综合征、膀胱癌、表皮癌、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌、头颈癌、卵巢癌、脑癌、间叶源性癌症、肉瘤、四癌、神经母细胞瘤、肾癌、肝癌、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤和甲状腺未分化癌。

在另一个实施方式中，可以通过本发明所述的抗体、组合物和方法来治疗的癌症包括但不限于：头颈部鳞状细胞癌、胃癌、胃和/或胃-食管连接部的腺癌、肾癌细胞癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌和结直肠癌。在一个实施方式中，所述结直肠癌、所述胃癌、所述胃和/或胃-食管连接部(GEJ)的腺癌或所述子宫内膜癌是非高微卫星不稳定性(非MSI-H)或熟练错配修复(pMMR)。在一个实施方式中，患有头颈部鳞状细胞癌的所述患者是抗PD-1或抗PD-L1治疗难治的。在一个实施方式中，所述结直肠癌是不可切除的或转移性的(IV期)。

在另一个实施方式中，可以通过本发明所述的抗体、组合物和方法来治疗的癌症包括血液恶性肿瘤，但不限于：经典霍奇金淋巴瘤(cHL)，弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)，转化的DLBCL、灰色区淋巴瘤，双打击淋巴瘤，原发性纵隔B细胞淋巴瘤(PMBCL)或惰性非霍奇金淋巴瘤(iNHL)(例如滤泡性淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤或小淋巴细胞淋巴瘤)。在一个实施方式中，霍奇金淋巴瘤患者是抗D-1或抗PD-L1治疗难治的。

在进一步的实施方式中，可以通过本发明所述的抗体、组合物和方法来治疗的癌症包括选自以下的癌症：肾细胞癌，肾盂、输尿管、膀胱或尿道的尿路上皮癌，黑色素瘤，胃癌，GEJ腺癌，非小细胞肺癌和膀胱癌。在一个实施方式中，前述癌症是晚期的、不可切除的或转移性的。

在一个实施方式中，所述非小细胞肺癌是晚期或IV期的。在另一个实施方式中，所述黑色素瘤是晚期或III期的。在一个实施方式中，所述患者对抗PD-1或抗PD-L1疗法是难治的。

在一个实施方式中，使用具有派姆单抗或派姆单抗变体和31C6或31C6变体的共同配制的产品。在进一步的实施方式中，使用具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和200mg31C6或31C6变体的共同配制的产品。在另一个实施方式中，使用具有200mg派姆单抗或派姆单抗变体和700mg 31C6或31C6变体的共同配制的产品。

在进一步的实施方式中，所述癌症是非小细胞肺癌，并且所述患者缺乏肿瘤激活表皮生长因子受体(EGFR)或快速加速纤维肉瘤(B-Raf)突变的B亚型，并且缺乏间变性淋巴瘤激酶(ALK)或c-ros癌基因1(ROS1)基因重排。在进一步的实施方式中，所述癌症是非小细胞肺癌，并且所述肿瘤具有鳞状组织学。

所述组合疗法还可以包含一种或多种另外的治疗剂。所述另外的治疗剂可以是例如化学治疗剂、生物治疗剂、免疫原性剂(例如减毒癌细胞，肿瘤抗原，抗原呈递细胞(例如用肿瘤衍生的抗原或核酸脉冲的树突细胞)，免疫刺激细胞因子(例如IL-2、IFNα2、GM-CSF)和用编码免疫刺激细胞因子的基因(例如但不限于GM-CSF)转染的细胞)。所述另外的治疗剂的具体剂量和给药方案可进一步变化，并且最佳剂量、给药方案和施用途径将根据所使用的具体治疗剂来确定。

化学治疗剂的实例包括烷化剂如噻替哌和环磷酰胺；烷基磺酸盐，例如白消安、丙硫丹和哌硫丹；氮丙啶类，例如苯并多巴、碳醌、美托多巴、乌多巴；乙烯亚胺和甲基三聚氰胺，包括三乙胺、三亚乙基三聚氰胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基三聚氰胺；醋酸菌素(尤其是布拉他辛和布拉他西酮)；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；苔藓抑素；卡司他丁；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；隐藻素(特别是隐藻素1和隐藻素8)；多拉司他丁；倍癌霉素(包括合成类似物KW-2189和CBI-TMI)；软珊瑚醇(eleutherobin)；胰蛋白酶抑制剂；嗜血素；海绵抑素；氮芥类，例如苯丁酸氮芥、氯萘嗪、胆磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、甲氯乙胺、盐酸甲氯乙胺、美法仑、新恩比兴(novembichin)、苯乙酮、泼尼莫司汀、曲磷酰胺、尿嘧啶芥；硝基脲类，如卡莫司汀、氯唑菌素、福替莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷尼莫司汀；抗生素，例如烯二炔抗生素(例如加利车霉素，尤其是加利车霉素γ1I和加利车霉素phiI1，参见例如Agnew,Chem.Intl.Ed.Engl.,33:183-186(1994)；加利车霉素，包括加利车霉素A；双膦酸盐如氯膦酸盐；埃斯佩拉霉素(esperamicin)；以及新制癌素发色团和相关的色蛋白烯二炔抗生素发色团)，阿克拉霉素(aclacinomysins)，放线菌素，红霉素，氮丝氨酸，博来霉素，仙人掌霉素，角霉素，长春红霉素，卡西诺霉素，去甲红霉素，更生霉素，柔红霉素，去托霉素，6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸，多柔比星(包括吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯啉-多柔比星和脱氧多柔比星)，表柔比星，依柔比星，伊达比星，马塞莱霉素，丝裂霉素(例如丝裂霉素C)，霉酚酸，诺加霉素，橄榄霉素，培洛霉素，泊非霉素，嘌呤霉素，三铁阿霉素，罗多比星，链黑菌素，链脲菌素，杀结核菌素，乌苯美司，新制癌菌素，佐柔比星；抗代谢物，例如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，例如地蝶呤、甲氨蝶呤、蝶呤、曲美沙酯；嘌呤类似物，例如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫胺嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，例如阿西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、多西氟尿苷、依西他滨、氟尿苷；雄激素，例如卡甾酮、丙酸屈莫他酮、表甾烷醇、美皮司坦、睾酮内酯；抗肾上腺素，例如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，例如弗洛林酸；乙酰丙酮；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；烯尿嘧啶；安吖啶；贝司他韦；比生群；依达沙酯；去脂胺；地美可辛；亚丝醌；依佛嘧辛；依利醋铵；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯硝胺；美登素类化合物，例如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；硝氨吖啶；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛氧蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；雷佐生；根瘤菌素；四唑呋喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢霉烯(尤其是T-2毒素、藜芦素A、杆孢菌素A和蛇形菌素)；聚氨酯；长春地辛；达卡巴嗪；甘露醇氮芥；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加胞嘧啶；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替哌；紫杉烷，例如紫杉醇和多西他赛；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，例如顺铂和卡铂；长春碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；诺凡酮；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨基蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄酸，例如视黄酸；卡培他滨；以及任何上述物质的药学上可接受的盐、酸或衍生物。还包括用于调节或抑制对肿瘤的激素作用的抗激素剂，例如抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、三昔芬、酮昔芬、LY117018、奥那普利司通和托瑞米芬(法瑞斯顿)；抑制芳香酶(调节肾上腺中雌激素的产生)的芳香酶抑制剂如，例如4(5)-咪唑、氨基鲁米特、醋酸甲地孕酮、依西美坦、福美坦、法卓唑、伏洛唑、来曲唑和阿那曲唑；和抗雄激素药，例如氟他胺、尼鲁他胺、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及任何上述物质的药学上可接受的盐、酸或衍生物。

本发明所述的组合疗法中的每种治疗剂可以根据标准药学实践单独施用或在包含治疗剂和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和稀释剂的药物(本文也称为药物组合物)中施用，根据标准药学实践。

本发明所述的组合疗法中的每种治疗剂可以同时施用(即在相同药物中)、同时施用(即在单独的药物中以任何顺序一个接一个地施用)或以任何顺序按序施用。当所述组合疗法中的治疗剂为不同剂型(一种剂为片剂或胶囊而另一种剂为无菌液体)且/或以不同的给药方案施用时(例如至少每天施用的化学治疗剂和施用频率较低(例如每周一次、每两周一次或每三周一次)的生物治疗剂)，按序施用特别有用。

在一些实施方式中，在施用所述抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体之前施用所述抗TIGIT抗体，而在其他实施方式中，在施用所述抗PD-1之后施用所述抗TIGIT抗体抗体或抗PD-L1抗体。在另一个实施方式中，所述抗TIGIT抗体与所述抗PD-15抗体或抗PD-L1抗体同时施用。

在一些实施方式中，所述组合疗法中的至少一种治疗剂使用与当所述药剂用作治疗相同癌症的单药疗法时通常采用的相同剂量方案(治疗的剂量、频率和持续时间)来施用。在其他实施方式中，与将所述药剂用作单药疗法时相比，所述患者在所述组合疗法中接受更低总量的至少一种所述治疗剂，例如更小剂量、更低频率的剂量和/或更短的治疗持续时间。

本发明所述的组合疗法中的每种小分子治疗剂可以口服或肠胃外施用，包括静脉内、肌肉内、腹膜内、皮下、直肠、局部和经皮施用途径。本发明所述的组合疗法可以在手术之前或之后使用以去除肿瘤，并且可以在放射治疗之前、期间或之后使用。

在一些实施方式中，将本发明所述的组合疗法施用于之前未用生物治疗剂或化学治疗剂治疗的患者，即初始治疗患者。在其他实施方式中，将所述组合疗法施用于在之前用生物治疗剂或化学治疗剂治疗后未能实现持续响应的患者，即经历过治疗的患者。

本发明所述的组合疗法通常用于治疗大到足以通过触诊或通过本领域众所周知的成像技术(例如MRI、超声或CAT扫描)发现的肿瘤。本发明所述的组合疗法可以是施用于患有癌症的人类患者，所述患者对PD-L1和PD-L2之一或两者测试呈阳性，并且优选地对PD-L1表达测试呈阳性。在一些优选的实施方式中，使用诊断性抗人PD-L1抗体或其抗原结合片段在IHC测定中对从所述患者身上取出的肿瘤样本的FFPE或冷冻组织切片来检测PD-L1表达。通常，在开始使用所述抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体和抗TIGIT抗体进行治疗之前，所述患者的医生会下令进行诊断测试以确定从所述患者身上取出的肿瘤组织样本中的PD-L1表达，但可以设想，医生可以在治疗开始后的任何时间订购第一次或随后的诊断测试，例如在完成一个治疗周期之后。在一个实施方式中，所述PD-L1表达通过PD-L1 IHC 22C3 pharmDx测定来测量。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的单核炎症密度评分≥2。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的单核炎症密度评分≥3。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的单核炎症密度评分≥4。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的肿瘤比例评分≥1％。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的肿瘤比例评分20≥10％。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的肿瘤比例评分≥20％。在另一个实施方式中，所述患者的PD-L1表达的肿瘤比例评分≥30％。在进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分≥1％。在进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分在1％和20％之间。在进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分≥2％。在进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分≥5％。在又一个进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分≥10％。在进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分≥15％。在又一个进一步的实施方式中，所述患者的PD-L1表达的综合阳性评分≥20％。

在本发明的一个优选实施方式中，所述组合疗法中的抗PD-1抗体是纳武单抗，其以选自以下的剂量静脉内施用：1mg/kg Q2W、2mg/kg Q2W、3mg/kg Q2W、5mg/kg Q2W、10mg/kg Q2W、1mg/kg Q3W、2mg/kg Q3W、3mg/kg Q3W、5mg/kg Q3W和10mg/kg Q3W。

在本发明的另一个优选实施方式中，所述组合疗法中的抗PD-1抗体是派姆单抗，或派姆单抗变体，其在液体药物中以选自以下的剂量施用：1mg/kg Q2W、2mg/kg Q2W、3mg/kg Q2W、5mg/kg Q2W、10mg/kg Q2W、1mg/kg Q3W、2mg/kg Q3W、3mg/kg Q3W、5mg/kg Q3W、10mg/kg Q3W和任何这些剂量的固定剂量等价物，即例如200mg Q3W。在一些实施方式中，派姆单抗作为液体药物提供，其包含在pH 5.5的10mM组氨酸缓冲液中的25mg/ml派姆单抗、7％(w/v)蔗糖、0.02％(w/v)聚山梨醇酯80。在其他实施方式中，派姆单抗作为液体药物提供，其包含约125至约200mg/mL派姆单抗或其抗原结合片段；约10mM组氨酸缓冲液；约10mML-甲硫氨酸或其药学上可接受的盐；约7％(w/v)蔗糖；和约0.02％(w/v)聚山梨醇酯80。

在本发明的一些实施方式中，每四或六周向所述患者施用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段一次，持续12周或更长时间。在其他实施方式中，每六周向所述患者施用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段一次，持续16周或更长时间、18周或更长时间、20周或更长时间、24周或更长时间、28周或更长、30周或更长、32周或更长、36周或更长、40周或更长、42周或更长、44周或更长、48周或更长、52周或更长、54周或更长、56周或更长、60周或更长、64周或更长、66周或更长、68周或更长、72周或更长、76周或更长、78周或更长、80周或更长、84周或更长、88周或更长时间，或90周或更长时间。在其他实施方式中，每六周以400mg施用所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段。

在一些实施方式中，选定剂量的派姆单抗通过IV输注施用。在一个实施方式中，选定剂量的派姆单抗通过静脉输注在25至40分钟或约30分钟的时间段内施用。

在一些实施方式中，所述患者用所述组合疗法治疗至少24周，例如八个长为3周的周期。在一些实施方式中，使用所述组合疗法的治疗持续到所述患者表现出PD或CR的证据为止。

本公开所述的药学上可接受的赋形剂包括例如溶剂、填充剂、缓冲剂、张力调节剂和防腐剂(参见例如Pramanick et al.,Pharma Times,45:65-77,2013)。在一些实施方式中，所述药物组合物可包含用作溶剂、填充剂、缓冲剂和张力调节剂中的一种或多种的赋形剂(例如盐水中的氯化钠可用作水性载体和张力调节剂两者)。本公开所述的药物组合物适合肠胃外施用。

在一些实施方式中，所述药物组合物包含水性载体作为溶剂。合适的载体包括例如无菌水、盐水溶液、磷酸盐缓冲盐水和林格氏溶液。在一些实施方式中，所述组合物是等渗的。

所述药物组合物可包含填充剂。当所述药物组合物在施用前被冻干时，填充剂特别有用。在一些实施方式中，所述填充剂是保护剂，其有助于在冷冻或喷雾干燥和/或储存期间稳定和防止所述活性剂降解。合适的填充剂是糖类(单糖、二糖和多糖)，例如蔗糖、乳糖、海藻糖、甘露醇、山梨糖醇、葡萄糖和棉子糖。

所述药物组合物可包含缓冲剂。缓冲剂控制pH值以抑制所述活性剂在加工、储存和任选的重构过程中的降解。合适的缓冲剂包括例如包含乙酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐或硫酸盐的盐。其他合适的缓冲液包括例如氨基酸，例如精氨酸、甘氨酸、组氨酸和赖氨酸。所述缓冲剂可以进一步包含盐酸或氢氧化钠。在一些实施方式中，所述缓冲剂将所述组合物的pH值维持在4至9的范围内。在一些实施方式中，所述pH值大于(下限)4、5、6、7或8。在一些实施方式中，所述pH值小于(上限)9、8、7、6或5。即，所述pH在约4至9的范围内，其中下限小于上限。

所述药物组合物可包含张力调节剂。合适的张力调节剂包括例如葡萄糖、甘油、氯化钠、甘油和甘露醇。

所述药物组合物可包含防腐剂。合适的防腐剂包括例如抗氧化剂和抗微生物剂。然而，在优选的实施方式中，所述药物组合物在无菌条件下制备并且在单次使用的容器中，因此不需要包含防腐剂。

在一些实施方式中，包含抗PD-1抗体作为PD-1拮抗剂的药物可以作为液体制剂提供或通过在使用前用注射用无菌水重构冻干粉末来制备。WO 2012/135408描述了适用于本发明的包含派姆单抗的液体和冻干药物的制备。在一些实施方式中，在玻璃小瓶中提供包含派姆单抗的药物，所述玻璃小瓶包含在4ml溶液中的约100mg派姆单抗。每1mL溶液包含25mg派姆单抗，并且其被配制成：L-组氨酸(1.55mg)、聚山梨醇酯80(0.2mg)、蔗糖(70mg)和注射用水，USP。所述溶液需要稀释以用于IV输注。

在一些实施方式中，包含所述抗TIGIT抗体的药物可作为液体制剂提供或通过在使用前用无菌注射用水重构冻干粉末来制备。在一个实施方式中，所述液体制剂包含约10-100mg/mL抗TIGIT抗体；约7％(w/v)蔗糖；约0.02％(w/v)聚山梨醇酯80；约pH 5.8-6.0下的约10mM L-组氨酸缓冲液；和约10mM至约15mM L-甲硫氨酸。

本文所述的药物可以作为试剂盒提供，所述试剂盒包含第一容器和第二容器以及包装说明书。所述第一容器包含至少一剂量的包含PD-1拮抗剂的药物，所述第二容器包含2.1-700mg包含所述抗TIGIT抗体的药物，和包含关于使用所述药物治疗癌症患者的说明书的包装说明书(package insert/label)。所述第一容器和所述第二容器可以由相同或不同的形状(例如小瓶、注射器和瓶)和/或材料(例如塑料或玻璃)构成。所述试剂盒可以进一步包含可用于施用所述药物的其他材料，例如稀释剂、过滤器、IV袋和管线、针头和注射器。在所述试剂盒的一些优选实施方式中，所述PD-1拮抗剂是抗PD-1抗体并且所述说明书指出所述药物旨在用于治疗患有癌症的患者，所述患者通过IHC测定对PD-L1表达测试呈阳性。

本发明的这些和其他方面(包括下文列出的示例性具体实施方式)将从本文包含的教导中明显得出。

本发明的示例性特定实施方式

1.一种用于在患者中治疗癌症的方法，其包括向所述患者施用2.1mg至700mg包含重链和轻链的抗TIGIT抗体，其中所述轻链包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR，和所述重链包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR。

2.根据实施方式1所述的方法，其中通过静脉输注施用所述抗TIGIT抗体。

3.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用2.1mg所述抗TIGIT抗体。

4.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用7mg所述抗TIGIT抗体。

5.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用21mg所述抗TIGIT抗体。

6.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用70mg所述抗TIGIT抗体。

7.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用200mg所述抗TIGIT抗体。

8.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用210mg所述抗TIGIT抗体。

9.根据实施方式1所述的方法，其中向所述患者施用700mg所述抗TIGIT抗体。

10.根据实施方式1至9中任一项所述的方法，其中在第1天向所述患者施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

11.根据实施方式1至10中任一项所述的方法，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

12.根据实施方式1至11中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含SEQ ID NO:22。

13.根据实施方式1至10中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体是31C6变体。

14.根据实施方式1至13中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同施用。

15.根据实施方式1至13中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同配制。

16.根据实施方式14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段与人PD-1特异性地结合并阻断人PD-L1与人PD-1的结合。

17.根据实施方式16所述的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段还阻断人PD-L2与人PD-1的结合。

18.根据实施方式17所述的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR。

19.根据实施方式18所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区。

20.根据实施方式19所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5。

21.根据实施方式17所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

22.根据实施方式17所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗变体。

23.根据实施方式14所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

24.根据实施方式14所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、度伐利尤单抗或阿维单抗。

25.根据实施方式18-24中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次。

26.根据实施方式18-24中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次。

27.根据实施方式14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是包含重链和轻链的人源化抗PD-1抗体，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR；并且所述抗TIGIT抗体是包含重链和轻链的人源化抗TIGIT抗体，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR。

28.根据实施方式14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区；所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

29.根据实施方式14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5；所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:23，所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。

30.根据实施方式27-29中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

31.根据实施方式27-29中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，每三周施用一次。

32.根据实施方式27-29中任一项所述的方法，其中200mg抗PD-1抗体与200mg抗TIGIT抗体共同配制。

33.根据实施方式1至32中任一项所述的方法，其中所述癌症选自：NSCLC、结直肠癌、胃癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、上皮癌、输卵管癌或原发性腹膜癌。

34.根据实施方式33所述的方法，其中所述癌症是NSCLC。

35.根据实施方式34的方法，其进一步包括施用(i)卡铂和培美曲塞的组合或(ii)卡铂和紫杉醇的组合。

36.根据实施方式1至35中任一项所述的方法，其中所述个体之前没有用抗PD-1或抗PD-L1疗法治疗过，或在接受之前的抗PD-1或抗PD-L1疗法时被确认为是进展性的。

37.一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、200mg 31C6或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

38.包含重链和轻链的抗TIGIT抗体在制备用于在受试者/患者中治疗癌症的药物中的用途，其中所述轻链包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR，并且所述重链包含SEQ IDNO:29、30和31的重链CDR。

39.根据实施方式38所述的用途，其中所述抗TIGIT抗体被配制成用于静脉输注和/或通过静脉输注施用。

40.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用2.1mg所述抗TIGIT抗体。

41.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用7mg所述抗TIGIT抗体。

42.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用21mg所述抗TIGIT抗体。

43.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用70mg所述抗TIGIT抗体。

44.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用200mg所述抗TIGIT抗体。

45.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用210mg所述抗TIGIT抗体。

46.根据实施方式38或39所述的用途，其中向所述患者施用700mg所述抗TIGIT抗体。

47.根据实施方式38至46中任一项所述的用途，其中在第1天向所述患者施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

48.根据实施方式1至10中任一项所述的用途，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

49.根据实施方式38至48中任一项所述的用途，其中所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含SEQ ID NO:22。

50.根据实施方式38至47中任一项所述的用途，其中所述抗TIGIT抗体是31C6变体。

51.根据实施方式38至50中任一项所述的用途，其中所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同施用。

52.根据实施方式38至50中任一项所述的用途，其中所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同配制。

53.根据实施方式51或52所述的用途，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段与人PD-1特异性地结合并阻断人PD-L1与人PD-1的结合。

54.根据实施方式53所述的用途，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段还阻断人PD-L2与人PD-1的结合。

55.根据实施方式54所述的用途，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR。

56.根据实施方式55所述的用途，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区。

57.根据实施方式56所述的用途，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5。

58.根据实施方式51至54中任一项所述的用途，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

59.根据实施方式51至54中任一项所述的用途，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗变体。

60.根据实施方式51或52所述的用途，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

61.根据实施方式14所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、度伐利尤单抗或阿维单抗。

62.根据实施方式55-58中任一项所述的用途，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次。

63.根据实施方式55-58中任一项所述的用途，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次。

64.根据实施方式51或52所述的用途，其中所述抗PD-1抗体是包含重链和轻链的人源化抗PD-1抗体，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR；所述抗TIGIT抗体是包含重链和轻链的人源化抗TIGIT抗体，其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR。

65.根据实施方式51或52所述的用途，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区；所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

66.根据实施方式51或52所述的用途，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5；所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:23，所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。

67.根据实施方式64至66中任一项所述的用途，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以200mg施用所述TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

68.根据实施方式64至66中任一项所述的用途，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，每三周施用一次。

69.根据实施方式64至66中任一项所述的用途，其中200mg抗PD-1抗体与200mg抗TIGIT抗体共同配制。

70.根据实施方式38至69中任一项所述的用途，其中所述癌症选自：NSCLC、结直肠癌、胃癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、上皮癌、输卵管癌或原发性腹膜癌。

71.根据实施方式70所述的用途，其中所述癌症是NSCLC。

72.根据实施方式38至71中任一项所述的用途，其进一步包括(i)卡铂和培美曲塞的组合或(ii)卡铂和紫杉醇的组合的用途。

73.根据实施方式38至72中任一项所述的用途，其中所述个体之前没有用抗PD-1或抗PD-L1疗法治疗过，或在接受之前的抗PD-1或抗PD-L1疗法时被确认为是进展性的。

一般方法

分子生物中的标准方法描述于Sambrook,Fritsch和Maniatis(1982&1989第2版，2001的第3版)Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press,Cold Spring Harbor,NY；Sambrook和Russell(2001)MolecularCloning,第3版,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY；Wu(1993)Recombinant DNA，第217卷，Academic Press,San Diego,CA中。标准方法也出现在Ausbel等(2001)Current Protocols in Molecular Biology，第1-4卷，John Wiley andSons,Inc.New York,NY中，其描述了细菌细胞中的克隆和DNA诱变(第1卷)、哺乳动物细胞和酵母中的克隆(第2卷)、糖缀合物和蛋白表达(第3卷)以及生物信息学(第4卷)。

描述了蛋白纯化方法，其包括免疫沉淀、色谱、电泳、离心和结晶(Coligan等，(2000)Current Protocols in Protein Science,第1卷,John Wiley and Sons,Inc.,NewYork)。描述了化学分析、化学修饰、翻译后修饰、融合蛋白的产生、蛋白糖基化(参见例如Coligan等，(2000)Current Protocols in Protein Science，第2卷，John Wiley andSons,Inc.,New York；Ausubel等，(2001)Current Protocols in Molecular Biology，第3卷，John Wiley and Sons,Inc.,NY,NY，第16.0.5-16.22.17页；Sigma-Aldrich,Co.(2001)Products for Life Science Research,St.Louis,MO，第45-89页，Amersham PharmaciaBiotech(2001)BioDirectory,Piscataway,N.J.，第384-391页)。描述了多克隆和单克隆抗体的生产、纯化和片段化(Coligan等，(2001)Current Protcols in Immunology，第1卷，John Wiley and Sons,Inc.,New York；Harlow and Lane(1999)Using Antibodies,ColdSpring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY；Harlow and Lane，同上)。可使用用于表征配体/受体相互作用的标准技术(参见例如Coligan等，(2001)CurrentProtocols in Immunology，第4卷，John Wiley,Inc.,New York)。可制备单克隆、多克隆和人源化抗体(参见例如Sheperd和Dean(编辑)(2000)Monoclonal Antibodies,OxfordUniv.Press,New York,NY；Kontermann and Dubel(编辑)(2001)Antibody Engineering,Springer-Verlag,New York；Harlow和Lane(1988)Antibodies A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,NY，第139-243页；Carpenter等，(2000)J.Immunol.165:6205；He等，(1998)J.Immunol.160:1029；Tang等，(1999)J.Biol.Chem.274:27371-27378；Baca等，(1997)J.Biol.Chem.272:10678-10684；Chothia等，(1989)Nature 342:877-883；Foote和Winter(1992)J.Mol.Biol.224:487-499；美国专利号6,329,511)。

人源化的替代是使用显示在噬菌体上的人抗体库或转基因小鼠中的人抗体库(Vaughan等，(1996)Nature Biotechnol.14:309-314；Barbas(1995)Nature Medicine 1:837-839；Mendez等，(1997)Nature Genetics 15:146-156；Hoogenboom和Chames(2000)Immunol.Today 21:371-377；Barbas等，(2001)Phage Display:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,New York；Kay等，(1996)Phage Display of Peptides and Proteins:A Laboratory Manual,Academic Press,SanDiego,CA；de Bruin等，(1999)Nature Biotechnol.17:397-399)。

抗原的纯化不是产生抗体所必需的。动物可以用带有感兴趣抗原的细胞进行免疫。然后可以从免疫动物中分离脾细胞，脾细胞可以与骨髓瘤细胞系融合以产生杂交瘤(参见例如Meyaard等，(1997)Immunity 7:283-290；Wright等，(2000)Immunity 13:233-242；Preston等，同上；Kaithamana等，(1999)J.Immunol.163:5157-5164)。

抗体可以与例如小药物分子、酶、脂质体、聚乙二醇(PEG)缀合。抗体可用于治疗、诊断、试剂盒或其他目的，包括与例如染料、放射性同位素、酶或金属(例如胶体金)偶联的抗体(参见例如Le Doussal等，(1991)J.Immunol.146:169-175；Gibellini等，(1998)J.Immunol.160:3891-3898；Hsing和Bishop(1999)J.Immunol.162:2804-2811；Everts等，(2001)J.Immunol.168:883-889)。

可用流式细胞术方法，包括荧光激活细胞分选(FACS)(参见例如Owens等，(1994)Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice，John Wiley和Sons,Hoboken,NJ；Givan(2001)Flow Cytometry，第2版；Wiley-Liss,Hoboken,NJ；Shapiro(2003)Practical Flow Cytometry,John Wiley和Sons,Hoboken,NJ)。可获得适用于修饰核酸的荧光试剂，包括核酸引物和探针、多肽和抗体，例如用作诊断试剂(MolecularProbesy(2003)Catalogue,Molecular Probes,Inc.,Eugene，或；Sigma-Aldrich(2003)Catalogue,St.Louis,MO)。

描述了免疫系统组织学的标准方法(参见例如Muller-Harmelink(编辑)(1986)Human Thymus:Histopathology and Pathology,Springer Verlag,New York,NY；Hiatt等，(2000)Color Atlas of Histology,Lippincott,Williams和Wilkins,Phila,PA；Louis等，(2001)Basic Histology:Text and Atlas,McGraw-Hill,New York,NY)。

提供用于确定例如抗原片段、前导序列、蛋白折叠、功能结构域、糖基化位点和序列比对的软件包和数据库(参见例如GenBank,Vector

Suite(Informax,Inc,Bethesda,MD)；GCG Wisconsin Package(Accelrys,Inc.,San Diego,CA)；

(TimeLogic Corp.,Crystal Bay,Nevada)；Menne等，(2000)Bioinformatics 16:741-742；Menne等，(2000)Bioinformatics Applications Note 16:741-742；Wren等，(2001)Comput.Methods Programs Biomed.68:177-181；von Heijne(1983)Eur.J.Biochem.133:17-21；von Heijne(1986)Nucleic Acids Res.14:4683-4690)。

实施例

实施例1：抗TIGIT抗体在晚期实体瘤中的临床研究

本研究是一项针对抗TIGIT抗体31C6单药疗法(部分A，组1)和31C6与派姆单抗(部分A，组2)组合的多位点、开放标签、剂量递增研究。本研究的部分B是剂量确认期，其在31C6抗体用作单药疗法和与派姆单抗组合使用时估计31C6抗体的推荐的2期剂量。在非随机研究设计中的部分B中评估了31C6抗体作为单药疗法和与派姆单抗组合使用时在晚期实体瘤参与者中的抗肿瘤活性。部分B使用1:1随机研究设计在程序性死亡1(PD-1)治疗初始(naive)癌症的参与者中评估了2剂31C6抗体的组合。

在本研究的部分A期间，受试者被分配到2个治疗组之一中：

组1：作为单药疗法的的31C6(通过静脉输注(IV)每3周(Q3W)施用递增剂量2.1mg、7mg、21mg、70mg、210mg和700mg)。

组2：31C6(通过IV每3周(Q3W)施用递增剂量2.1mg、7mg、21mg、70mg、210mg和700mg)与派姆单抗(200mg Q3W)组合。

部分A包括患有转移性实体瘤的成人，所述转移性实体瘤没有临床有效的治疗，所述成人根据RECIST和ECOG PS 0-1具有可测量的疾病；如果先前的CTLA-4、PD-1或PD-L1抑制剂治疗未因AE中断治疗，则允许所述治疗。剂量递增遵循经修改的毒性概率区间设计，其目标剂量限制毒性率为～30％。派姆单抗以200mg Q3W给药。抗TIGIT 31C6抗体以2.1mg至700mg给药。抗TIGIT抗体和派姆单抗给药35个周期或直到出现进展、无法耐受的毒性、或研究者或患者决定为止。在剂量递增期间，每个剂量至少需要3个患者。在14个患者接受任何剂量水平的治疗后，完成剂量递增和确认。主要终点是作为单药疗法和与派姆单抗组合的抗TIGIT抗体31C6的安全性和耐受性，以确定各自推荐的2期剂量(RP2D)。次要终点是作为单药疗法和与派姆单抗组合的抗TIGIT抗体31C6的PK，与抗TIGIT抗体31C6给与的派姆单抗的PK，以及作为单药疗法和与派姆单抗一起的抗TIGIT抗体31C6的ORR(RECIST v1.1，研究者评估)。

部分B是与派姆单抗组合的31C6的剂量确认。此外，扩展队列评估了作为单药疗法和与派姆单抗组合使用的31C6的抗肿瘤功效。本研究的扩展部分对患有以下癌症的受试者开放：

-PD-1/PD-L1抑制剂治疗难治性NSCLC，

-PD-1/PD-L1抑制剂初始NSCLC，

-结直肠癌

-乳腺癌

-卵巢上皮癌、输卵管癌或原发性腹膜癌。

本研究的部分A的基线特征示于下表中：基线特征：表4(数据截止日期：2018年8月16日)

表4.基线特征(数据截止日期：2018年8月16日)

表5.基线特征(数据截止日期：2018年8月16日)

结果：

在这项首次人体研究中，作为单药疗法和与派姆单抗(200mg)组合给出的31C6抗TIGIT抗体在所有测试剂量下均具有良好的耐受性和可控的安全性。剂量发现在没有DLT的情况下完成，并且没有与治疗相关的死亡。图1列出了来自单药疗法和组合疗法组的PK数据。对于单药疗法的患者的部署如下：2个接受治疗，32个中断治疗(27个具有疾病进展，2个由医生决定和3个停药(withdrawl))。十三(13)个患者转而接受派姆单抗组合疗法。

对于抗TIGIT 31C6和派姆单抗的组合，每个预定剂量水平都完成了剂量递增。没有观察到DLT。对接受组合疗法的患者的部署如下：7个接受治疗，27个中断治疗(25个具有疾病进展，1个由医生决定和1个停药)。不良事件总结如下：

表6：不良事件总结

表7：治疗相关不良事件：

此外，在经过大量预处理的多种肿瘤类型的群体中观察到了有希望的抗肿瘤活性，特别是对于组合疗法。具体而言，仅31C6单药疗法观察到3％ORR和35％DCR，而对于31C6和派姆单抗的组合疗法，观察到19％ORR和47％DCR。在从单药疗法过渡转移到组合疗法的患者中观察到了响应。图2A和图2B列出了目标病变相对于基线的最佳百分比变化(RECISTv1.1，研究者评估)。图3A和图3B列出了治疗持续时间和响应的图表(RECIST v1.1，研究者评估)。抗肿瘤活性的总结(RECIST v1.1，研究者评估)如下：

表8：抗肿瘤活性

在一个患有BRCA野生型卵巢癌的75岁女性患者中观察到部分响应。该患者之前接受过4个化疗线，并且之前没有接受过抗PD-1或抗PD-L1疗法。患者接受过31C6抗TIGIT抗体2.1mg单药疗法(其记录了每个RECIST的PD)，然后过渡转移到2.1mg 31C6抗TIGIT抗体加200mg派姆单抗的组合疗法。在过渡转移的9周后观察到部分响应。具体而言，肿瘤体积减少了85％，所有病变(肠系膜沉积物、淋巴结(主动脉旁的、髂骨的、宫颈的))的大小都减少了。响应持续进行13个月。因皮疹中断治疗。

实施例2

I期研究的部分B

如上文实施例1所述的I期研究的部分B的设计如下：

表9：I期研究的部分B的设计

此外，正在寻求以下组合：

31C6+派姆单抗+卡铂和紫杉醇(Taxol)用于鳞状PD1初始NSCLC中；31C6+派姆单抗+卡铂用于非鳞状PD1初始NSCLC中；31C6+派姆单抗+卡铂和紫杉醇用于鳞状PD1初始NSCLC中结果：

安全性概述

截至2019年9月，观察到31C6和派姆单抗的副作用特征与单独的派姆单抗相当。31C6单药疗法与31C6和派姆单抗的组合疗法之间的不良反应率相似。肾上腺功能不全和输液反应的发生率高于派姆单抗反射性交感神经营养不良(RSD)。参见概览表10。

表10.肾上腺功能不全和输液反应的概述

据观察，被施用例如200mg的剂量的患者具有与部分A数据中的之前的观察一致的线性清除率值(200mg：CL＝0.49L/天和t1/2＝9.9天；700mg：CL＝0.48L/天和t1/2＝9.4天)。还分析了PK变异性并显示出一致的结果(CL中的CV＝46％)

功效

在部分B中测试的不同患者组中分析了抗肿瘤活性。PD-1初始NSCLC

在初始NSCLC患者中观察到响应，并且所述响应显示于图4和表11中(RECISTv1.1，研究者评估)。ORR数据显示，尽管收录了具有所有PD-L1水平和更先进的治疗线的患者，但31C6和派姆单抗的组合仍高于对照。在收录于KN-010中已接受了一个或多个之前的治疗线的NSCLC受试者中，TPS≥1％，且ORR是18％。

表11.研究者根据RECIST1.1确定的PD-1初始NSCLC中的最佳总体响应

KN-010:100％的患者的TPS≥1,29％的患者是3L+

派姆单抗+31C6:52％的患者的TPS≥1,60％的受试者是3L+

此外，获得了显示研究者根据RECIST1.1确定的用31C6抗体(200mg)单药疗法或31C6(200mg)和派姆单抗(200m)的组合疗法治疗的PD-1难治性NSCLC受试者中的最佳响应的数据。参见表12。在未选择的PD1难治性NSCLC中观察到单药疗法活性，还观察到显著的ORR结果。注意到单药疗法响应包括CR。31C6抗体(200mg)的单药疗法结果的ORR与组合疗法的结果相似。

表12.研究者根据RECIST1.1确定的仅用31C6或用其与派姆单抗的组合疗法治疗的PD-1难治性NSCLC受试者中的最佳总体响应

83％的接受31C6治疗的PD-1难治性NSCLC受试者是3L+。

仅用31C6(200mg)或用其与派姆单抗(200mg)的组合疗法治疗的PD-1难治性NSCLC受试者中的响应持续时间数据示于表13和图5A和5B中。

表13.用31C6(200mg)+派姆单抗治疗的PD-1难治性NSCLC受试者的响应持续时间

卵巢癌

卵巢癌患者组(部分A和部分B)的功效数据的概述示于图6和表14中。在PD1初始卵巢癌(对铂基疗法具有抗性)受试者组中，观察到ORR是19％(n＝27)。在PD-L1阳性肿瘤中观察到额外的富集(CPS1，ORR 40％)。到达响应的平均时间是3.5+/-2.3个月，中位DOR是4.1-11.2+个月。

表14.研究者根据RECIST1.1确定的卵巢癌患者的最佳总体响应

派姆单抗+31C6：(74％的受试者是3L+)；三个确认的响应者均是3L+，所有响应者是BRCA阴性。

在剂量递增中观察到卵巢癌受试者(总共7个)中的2个客观响应后，在部分B(n＝20)的一个队列的铂耐药的卵巢癌患者中测试了初步功效。在用31C6抗体和派姆单抗(部分A和部分B)组合疗法治疗的卵巢癌受试者中，ORR是19％(5/27)，DOR是4.2-11.4+个月。在27个卵巢癌患者中，有14个受试者有PD-L1数据。在用31C6抗体治疗的卵巢癌患者的PD-L1阳性(CPS1)肿瘤中，观察到ORR是40％(2/5)，相比于在用派姆单抗单药疗法治疗的PD-L1+卵巢癌受试者中，ORR是14％。值得注意的是，本研究中的所有卵巢响应者均是BRCA阴性。因此，基于功效和耐受性，但不受任何特定疗法或机制的限制，31C6抗体单药疗法以及31C6抗体和派姆单抗的组合疗法可代表这一具有极高的未满足需求的群体中非常有吸引力的无化疗治疗选择。

乳腺癌

这项研究没有一线患者，因此所有经受2L+、PD-1/L-1的患者都被允许入组。在那些患者中，确定了以下特征：1个DLT(发热性中性粒细胞减少症)，且10个患者中有7个仍在接受研究。治疗中断的患者具有以下特征：1个患者为临床PD，2个患者出现AE[PNA(不相关)和G3 LFT升高(io(即31C6抗体和派姆单抗)+培美曲塞)相关]。在本研究中，10个参与研究的患者进行了扫描，所有患者仅进行了1次扫描(7个SD、2个PR、1个PD)。该乳腺癌研究的数据示于图7和表15中。

表15.用31C6(200mg)和派姆单抗治疗的PD-1初始乳腺癌患者的数据

CRC乳腺癌患者的随附数据示于图8和表16中。

表16.用31C6(200mg)和派姆单抗治疗的PD-1初始CRC乳腺癌患者的数据

宫颈癌

在数据截止时，分别有7个和8个患者以200mg和700mg的剂量继续接受研究。数据示于图9A和9B以及表17中。在这个早期时间点，在200mg 31C6与派姆单抗的组合治疗组和700mg 31C6与派姆单抗的组合治疗组之间没有功效或安全性方面的重大差异。

表17.随机分配到200mg或700mg 31C6抗体和派姆单抗的宫颈癌患者的数据

综上所述，观察到抗体31C6单药疗法具有良好的耐受性。任何副作用都是可以容忍的，且31C6抗体与派姆单抗组合中观察到的副作用特征与派姆单抗单药疗法中观察到的结果相似。在剂量和PK数据方面，观察到31C6抗体的半衰期约为10天。观察到正常的PK变异性，且观察到的ADA发生率是10-20％。虽然许多剂量显示出良好的结果，但200mg的初步RP2D仍然是有利的。数据显示在整个给药间隔期间保持抗体治疗的暴露。初步数据显示，在随机剂量比较中，200mg和700mg 31C6抗体的安全性/有效性相当。在良好的功效数据中，观察到用31C6抗体作为单药疗法以及用31C6抗体和派姆单抗的组合疗法治疗NSCLC(PD-1初始和PD-1难治性)患者和卵巢癌患者有显著的临床功效信号。最重要的是，有证据表明使用31C6抗体(作为单药疗法和组合疗法的一部分)的治疗在每种测试的癌症中都具有抗肿瘤活性。例如，在PD-1难治性NSCLC患者中观察到单药疗法的抗肿瘤活性。数据包括用31C6单药疗法链和重链中的113治疗的患者的CR。

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本文引用的所有参考文献通过引用并入，如同每个单独的出版物、数据库条目(例如Genbank序列或GeneID条目)、专利申请或专利被明确地和单独地指明通过引用并入一样。根据37C.F.R.§1.57(b)(1)，申请人旨在通过本通过引用并入的声明涉及每个单独的出版物、数据库条目(例如Genbank序列或GeneID条目)、专利申请或专利，其中的每一个都根据37 C.F.R.§1.57(b)(2)被明确标识，即使这样的引用并不紧邻通过引用并入的专用声明。在说明书中包含通过引用并入的专门声明(如果有的话)不会以任何方式削弱通过引用并入的一般声明。本文对参考文献的引用并不旨在承认该参考文献是相关的现有技术，其也不构成对这些出版物或文献的内容或日期的任何承认。如果参考文献为要求保护的术语提供的定义与本说明书中提供的定义相冲突，则应使用本说明书中提供的定义来解释要求保护的发明。

Claims

2.根据权利要求1所述的方法，其中通过静脉输注施用所述抗TIGIT抗体。

3.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用2.1mg所述抗TIGIT抗体。

4.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用7mg所述抗TIGIT抗体。

5.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用21mg所述抗TIGIT抗体。

6.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用70mg所述抗TIGIT抗体。

7.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用200mg所述抗TIGIT抗体。

8.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用210mg所述抗TIGIT抗体。

9.根据权利要求1所述的方法，其中向所述患者施用700mg所述抗TIGIT抗体。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中在第1天向所述患者施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含SEQ ID NO:22。

13.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体是31C6变体。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同施用。

15.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT抗体与抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体或其抗原结合片段共同配制。

16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段与人PD-1特异性地结合并阻断人PD-L1与人PD-1的结合。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段还阻断人PD-L2与人PD-1的结合。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含：(a)SEQID NO:1、2和3的轻链CDR和(b)SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区。

20.根据权利要求18所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区。

21.根据权利要求17所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

22.根据权利要求17所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗变体。

23.根据权利要求14所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

24.根据权利要求14所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗、度伐利尤单抗或阿维单抗。

25.根据权利要求18-24中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次。

26.根据权利要求18-24中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次。

27.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体是包含重链和轻链的人源化抗PD-1抗体，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:6、7和8的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:1、2和3的轻链CDR；并且所述抗TIGIT抗体是包含重链和轻链的人源化抗TIGIT抗体，并且其中所述重链包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:29、30和31的重链CDR，和所述轻链包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR。

28.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:4的轻链可变区；并且所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

29.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:10，和所述轻链包含SEQ ID NO:5；并且所述抗TIGIT抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。

30.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

31.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗TIGIT抗体，每三周施用一次。

32.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以200mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每三周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以700mg施用所述抗TIGIT抗体，然后在其后每三周施用一次。

33.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中在第1天通过静脉输注以400mg施用所述抗PD-1抗体，然后在其后每六周施用一次，并且在第1天通过静脉输注以700mg施用所述抗TIGIT抗体，每三周施用一次。

34.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中将200mg抗PD-1抗体与200mg抗TIGIT抗体共同配制。

35.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中将200mg抗PD-1抗体与700mg抗TIGIT抗体共同配制。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述癌症选自：NSCLC、宫颈癌、结直肠癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、上皮癌、输卵管癌或原发性腹膜癌。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述癌症是NSCLC。

38.根据权利要求1至37中任一项所述的方法，所述方法进一步包括施用卡铂和培美曲塞的组合或(ii)卡铂和紫杉醇的组合。

39.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中个体之前没有用抗PD-1或抗PD-L1疗法治疗过，或在接受之前的抗PD-1或抗PD-L1疗法时被确认为是进展性的。

40.一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、200mg 31C6抗体或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

41.一种药物组合物，其包含200mg派姆单抗或派姆单抗变体、2.1至700mg 31C6抗体或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

42.一种药物组合物，其包含400mg派姆单抗或派姆单抗变体、2.1至700mg 31C6抗体或31C6变体、和药学上可接受的赋形剂。

43.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含2.1mg所述31C6抗体或31C6变体。

44.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含7mg所述31C6抗体或31C6变体。

45.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含21mg所述31C6抗体或31C6变体。

46.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含70mg所述31C6抗体或31C6变体。

47.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含200mg所述31C6抗体或31C6变体。

48.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含210mg所述31C6抗体或31C6变体。

49.根据权利要求41或42所述的药物组合物，其包含700mg所述31C6抗体或31C6变体。

50.根据权利要求40-49中任一项所述的药物组合物，其中所述31C6抗体或31C6变体包含重链和轻链，其中所述轻链包含SEQ ID NO:26、27和28的轻链CDR，和所述重链包含SEQID NO:29、30和31的重链CDR。

51.根据权利要求40-49中任一项所述的药物组合物，其中所述31C6抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:25的重链可变区，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:24的轻链可变区。

52.根据权利要求40-49中任一项所述的药物组合物，其中所述31C6抗体包含重链和轻链，并且其中所述重链包含SEQ ID NO:23，和所述轻链包含含有SEQ ID NO:22的轻链可变区。

53.一种用于治疗癌症的试剂盒，其包含根据权利要求40-52所述的任何的药物组合物和使用说明书。