BR112021008582A2 - regime de dosagem de anticorpo anti-tigit para tratamento de câncer - Google Patents

Abstract

REGIME DE DOSAGEM DE ANTICORPO ANTI-TIGIT PARA TRATAMENTO DE CÂNCER. A presente invenção se refere a regimes de dosagem de um anticorpo anti- TIGIT útil para o tratamento de câncer. Em particular, a invenção se refere ao regime de dosagem em uma terapia de combinação que compreende administrar um anticorpo de uma proteína de Morte Programada 1 (PD-1) ou Ligante de Morte Programada 1 (PD-L1) e um anticorpo anti-TIGIT.

Description

REGIME DE DOSAGEM DE ANTICORPO ANTI-TIGIT PARA TRATAMENTO DE CÂNCER PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido de Patente Provisório nº US 62/755805, depositado em 5 de novembro de 2018, que é incorporado a título de referência à presente invenção em sua totalidade.

CAMPO DA INVENÇÃO

[002] A presente invenção refere-se a regimes de dosagem de um anticorpo anti-TIGIT útil para o tratamento de câncer. Em particular, a invenção se refere ao regime de dosagem em uma terapia de combinação que compreende administrar um anticorpo direcionado a uma proteína de Morte Programada 1 (PD-1) ou Ligante de Morte Programada 1 (PD-L1) e um anticorpo anti-TIGIT (imunoreceptor de células T com domínios Ig e ITIM).

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[003] PD-1 é reconhecida como uma importante molécula na regulação imunológica e na conservação de tolerância periférica. PD-1 é moderadamente expressa em células T, B e NKT naive e regulada de modo crescente por sinalização de receptor de células T/B em linfócitos, monócitos e células mieloides (1).

[004] Dois ligantes conhecidos para PD-1, PD-L1 (B7-H1) e PD-L2 (B7-DC), são expressos em cânceres humanos que surgem em vários tecidos. Em grandes conjuntos de amostra de, por exemplo, câncer de ovário, renal, colorretal, pancreático, de fígado e melanoma, mostrou-se que a expressão de PD-L1 estava correlacionada a um prognóstico ruim e sobrevivência geral reduzida independentemente de tratamento subsequente (2-13). De modo similar, constatou-se que a expressão de PD-1 em linfócitos infiltrados em tumor marca células T disfuncionais em câncer de mama e melanoma (14-15) e está correlacionada a um prognóstico ruim em câncer renal (16). Desse modo, foi proposto que células tumorais que expressam PD-L1 interagem com células T que expressam PD-1 para atenuar ativação de células T e evasão de monitoramento imunológico, contribuindo, desse modo, para uma resposta imunológica prejudicada contra o tumor. Diversos anticorpos monoclonais que inibem a interação entre PD-1 e um ou ambos dentre seus ligantes PD-L1 e PD- L2 foram aprovados para tratar câncer. Pembrolizumabe é um potente mAb de imunoglobulina G4 (IgG4) humanizado com alta especificidade de ligação com o receptor de morte celular programada 1 (PD 1), inibindo, desse modo, sua interação com ligante de morte celular programada 1 (PD-L1) e ligante de morte celular programada 2 (PD-L2). Com base em dados pré-clínicos in vitro, pembrolizumabe tem alta afinidade e potente atividade de bloqueio de receptor para PD-1. Keytruda® (pembrolizumabe) é indicado para o tratamento de pacientes por meio de diversas indicações.

[005] TIGIT (imunoreceptor de células T com domínios Ig e ITIM) é um receptor imunomodulador expresso essencialmente em células T e células NK ativadas. TIGIT também é conhecido como VSIG9; VSTM3; e WUCAM. Sua estrutura mostra um domínio de imunoglobulina extracelular, uma região transmembranar do tipo 1 e dois motivos ITIM. TIGIT forma parte de uma rede coestimulatória que consiste em receptores imunomoduladores positivos (CD226) e negativos (TIGIT) em células T, e ligantes expressos em APCs (CD155 e CD112). Um recurso importante na estrutura de TIGIT é a presença de um motivo de inibição de imunoreceptor com base em tirosina (ITIM) em seu domínio caudal citoplásmico. Assim como com PD-1 e CTLA- 4, é previsto que o domínio de ITIM na região citoplásmica de TIGIT recrute tirosina fosfatases, tais como SHP-1 e SHP-2, e subsequente desfosforilação de resíduos de tirosina com nos motivos de ativação de imunoreceptor com base em tirosina (ITAM)

em subunidades de receptor de células T (TCR). Portanto, ligação de TIGIT por ligantes de receptor CD155 e CD112 expressos por células tumorais ou TAMS pode contribuir para a supressão de sinalização de TCR e ativação de células T, que é essencial para formar imunidade antitumoral eficaz. Desse modo, um anticorpo antagonista específico para TIGIT pode inibir a supressão induzida por CD155 e CD112 de respostas de células T e aprimorar imunidade antitumoral. Os anticorpos anti-TIGIT foram descritos em WO2016/028656 e WO2017/030823.

[006] A seleção de um regime de dosagem para uma monoterapia com anticorpo anti-TIGIT ou terapia de combinação com terapia anti-PD-1 ou anti- PD-L1 depende de diversos fatores, incluindo a taxa de turnover de soro ou tecido da entidade, o nível de sintomas, a imunogenicidade da entidade, pontos finais de anticorpo antifármaco e a acessibilidade das células, tecido ou órgão-alvo no indivíduo sendo tratado, bem como segurança. A formação de anticorpos antifármaco pode confundir potencialmente exposições de fármaco em doses terapêuticas, e resultar em toxicidades subsequentes relacionadas à infusão. Além disso, o tratamento com anti-TIGIT e/ou anti-PD-1/anti-PD-L1 pode resultar em estímulo imunológico e no potencial para liberação de citocina que afeta a segurança.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[007] A invenção fornece um método para tratar câncer em um paciente que compreende administrar 2,1 mg a 700 mg de um anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou variante de 31C6. Em uma modalidade, o método compreende, de modo opcional, a coadministração com um anticorpo anti-PD-1 ou anti-PD-L1. Em uma modalidade, o anticorpo anti-TIGIT e o anticorpo anti-PD-1 são coformulados. Em uma modalidade adicional, as células tumorais do indivíduo tem expressão positiva de PD-L1. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 bloqueia a ligação de PD-1 a PD-L1 e PD-L2. A invenção também fornece uma composição farmacêutica que compreende 2,1 mg a 700 mg de anticorpo anti- TIGIT 31C6 ou uma variante de 31C6, e 200 mg de pembrolizumabe ou variante de pembrolizumabe.

[008] Um aspecto da invenção fornece um método para tratar câncer em um paciente que compreende administrar ao paciente 2,1 mg a 700 mg de um anticorpo anti-TIGIT que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia leve compreende CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e a cadeia pesada compreende CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31.

[009] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT é administrado por infusão intravenosa.

[0010] Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 2,1 mg a cerca de 700 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 2,1 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 7 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 21 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 70 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 200 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 210 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente cerca de 700 mg do anticorpo anti-TIGIT.

[0011] Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 2,1 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 7 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 21 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 70 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 200 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 210 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, são administrados ao paciente 700 mg do anticorpo anti-TIGIT.

[0012] Em várias modalidades do método, é administrado ao paciente o anticorpo anti-TIGIT no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas. Por exemplo, a duração do tratamento é de semanas ou meses.

[0013] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

[0014] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22.

[0015] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT é uma variante de 31C6.

[0016] Em várias modalidades do método, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:25. Em várias modalidades do método, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO: 24. Em várias modalidades do método, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO: 24.

[0017] Em várias modalidades do método, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:23. Em várias modalidades do método, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:22. Em várias modalidades do método, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:22.

[0018] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT é coadministrado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

[0019] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-TIGIT é coformulado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

[0020] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, se liga especificamente a PD-1 humano e bloqueia a ligação de PD-L1 humano a PD-1 humano.

[0021] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, também bloqueia a ligação de PD-L2 humana a PD-1 humano.

[0022] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de 31C6 que compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8.

[0023] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4.

[0024] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:5. Por exemplo, o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumabe. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de pembrolizumabe. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é nivolumabe. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-L1 é atezolizumabe, durvalumabe ou avelumabe.

[0025] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas. Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas.

[0026] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3; e o anticorpo anti-TIGIT é um anticorpo anti-TIGIT humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28.

[0027] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:

24.

[0028] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO: 5; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 22.

[0029] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a uma dose de 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

[0030] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a uma dose de 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 uma vez a cada três semanas.

[0031] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a uma dose de 700 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

[0032] Em várias modalidades do método, o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a uma dose de 700 mg por infusão intravenosa no Dia 1 uma vez a cada três semanas.

[0033] Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 2,1 mg a 700 mg de anticorpo anti-TIGIT. Por exemplo, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 200 mg de anticorpo anti-TIGIT.

[0034] Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com uma quantidade de anticorpo anti-TIGIT descrita nos Exemplos. Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 7 mg de anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 21 mg de anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 70 mg de anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 210 mg de anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 200 mg de anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades do método, 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 700 mg de anticorpo anti-TIGIT.

[0035] Em várias modalidades do método, o câncer é selecionado a partir de um câncer revelado na Parte A ou Parte B descritas nos Exemplos. Em várias modalidades do método, o câncer é pelo menos um a partir do grupo que consiste em: NSCLC, câncer colorretal, câncer cervical, câncer gástrico, câncer de mama, ovário, epitelial, tubo falopiano ou carcinoma peritoneal primário. Por exemplo, o câncer é NSCLC. Em várias modalidades, o indivíduo ou paciente tem um câncer e expressa pelo menos um gene de Câncer de Mama (por exemplo, BRCA). Em várias modalidades, constata-se que o câncer ou uma amostra do indivíduo tem um nível ou expressar pelo menos um gene de Câncer de Mama (BRCA). Em várias modalidades, o pelo menos um gene de BRCA é BRCA1 ou BRCA2. Em uma modalidade, o câncer é BRCA negativo. Por exemplo, o câncer (por exemplo, câncer de mama e câncer de ovário) é um câncer BRCA negativo. Em uma modalidade, o câncer é BRCA positivo.

[0036] Em várias modalidades, o método compreende, ainda, administrar uma combinação de (i) carboplatina e pemetrexede (pirrolo [2,3-d]pirimidina 5- substituído) ou (ii) carboplatina e paclitaxel.

[0037] Em várias modalidades do método, o indivíduo não foi previamente tratado com terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 ou é confirmado progressivo enquanto recebia terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 anterior.

[0038] Um aspecto da invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende 200 mg de pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe, um anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende cerca de 2,1 mg a cerca de 700 mg de anticorpo 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou uma variante de 31C6. Em várias modalidades, o anticorpo 31C6 compreende 2,1 mg a 700 mg de anticorpo anti-TIGIT anticorpo 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou uma variante de 31C6.

[0039] Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 2,1 mg do anticorpo anti-TIGIT. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 7 mg do anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 21 mg do anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 70 mg do anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 200 mg do anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6. Em várias modalidades do método, a composição farmacêutica compreende 210 mg do anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6. Em várias modalidades do método, a composição farmacêutica compreende 700 mg do anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou fragmento de ligação ao antígeno ou variante de 31C6.

[0040] Um aspecto da invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende 200 mg de pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe, 200 mg de anticorpo 31C6 ou uma variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0041] Em várias modalidades do método, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25. Em várias modalidades, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24. Em várias modalidades, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

[0042] Em várias modalidades, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23. Em várias modalidades, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22. Em várias modalidades , o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22.

[0043] Em várias modalidades, o anticorpo 31C6 é uma variante de 31C6.

[0044] Em várias modalidades , a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:25. Em várias modalidades , a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO: 24. Em várias modalidades , a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO: 24.

[0045] Em várias modalidades , a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:23. Em várias modalidades, a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e a cadeia leve compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:22. Em várias modalidades , a variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ

ID NO:23 e a cadeia leve compreende 80%, 85%, 90%, 95% ou 99% de identidade de sequência da SEQ ID NO:22.

[0046] Em várias modalidades, o anticorpo anti-TIGIT é formulado para ser coadministrado com pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe.

[0047] Em várias modalidades, o anticorpo anti-TIGIT é coformulado com pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe.

[0048] Em várias modalidades, o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe do mesmo compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8. Em várias modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de 31C6 que compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8.

[0049] Em várias modalidades, o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4.

[0050] Em várias modalidades, o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:5. Por exemplo, o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumabe. Em várias modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de pembrolizumabe. Em várias modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é nivolumabe.

[0051] Em várias modalidades, o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe é formulada para infusão intravenosa.

[0052] Em várias modalidades , o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3; e o anticorpo a31C6 é um anticorpo anti- TIGIT humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28.

[0053] Em várias modalidades, o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4; e o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

[0054] Em várias modalidades, o pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO: 5; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:

22. Um aspecto da invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo 200 mg de pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe, 2,1 a 700 mg de anticorpo 31C6 ou uma variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0055] Um aspecto da invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo 400 mg de pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe, 2,1 a 700 mg de anticorpo 31C6 ou uma variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0056] Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 2,1 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 7 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 21 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 70 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 200 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 210 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6. Em várias modalidades, a composição farmacêutica compreende 700 mg do anticorpo 31C6 ou variante de 31C6.

[0057] Em várias modalidades da composição farmacêutica, o anticorpo 31C6 ou variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia leve compreende CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e a cadeia pesada compreende CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31.

[0058] Em várias modalidades da composição farmacêutica, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

[0059] Em várias modalidades da composição farmacêutica, o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 22.

[0060] Um aspecto da invenção fornece um kit para tratar câncer que compreende qualquer uma das composições farmacêuticas descritas na presente invenção. Em várias modalidades, a composição compreende, ainda, instruções para uso.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0061] FIG. 1 Uma plotagem gerou agrupamento de dados farmacocinéticos de anticorpo 31C6 anti-TIGIT dos braços de monoterapia e terapia de combinação. Concentrações médias aritméticas plotadas com o uso de tempos de amostragem nominal.

[0062] FIGs. 2A e 2B Cada uma mostra uma plotagem em cascata de indivíduos com melhor percentual de mudança a partir de linha de base em lesões-alvo com base em estimação do investigador por RECIST v1.1 (avaliada em pacientes com doença mensurável na linha de base e ≥1 estimação por imagem após linha de base avaliável (n=25 para monoterapia com 31C6 e n=41 para terapia de combinação de 31C6 com pembrolizumabe)). Cada barra representa um indivíduo individual. Os dados para a terapia de combinação incluem 32 pacientes originalmente alocados para a combinação e 9 que realizaram a transição a partir da monoterapia. Para a monoterapia com 31C6, 25% não mostraram qualquer diminuição e 4% mostraram uma diminuição ≥ - 30%. Para a terapia de combinação de 31C6 e pembrolizumabe, 32% não mostraram qualquer diminuição e 24% mostraram uma diminuição ≥ -30%.

[0063] FIGs. 3A e 3B Cada uma mostra uma plotagem de indivíduos que mostra a duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1. O comprimento de linha representa o tempo para a última dose de tratamento de estudo. Tempo para melhor resposta e PD subsequente ou morte, o que ocorrer primeiro, são mostrados para cada paciente. Apenas aqueles pacientes que tiveram ≥ 1 de estimação por imagem após linha de base são incluídos. * representa aqueles pacientes que realizaram transição de monoterapia para a terapia de combinação. A terapia de combinação inclui 32 pacientes que foram originalmente alocados para a terapia de combinação e 9 que realizaram transição a partir da monoterapia 31C6.

[0064] FIG. 4 mostra uma plotagem de pacientes NSCLC naive PD-1 que mostra a duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1.

[0065] FIGs. 5A e 5B mostram plotagens de pacientes NSCLC refratários PD-1 que mostram a duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1. Os pacientes foram administrados com 200 mg de monoterapia com anticorpo 31C6 (Figura 5A) ou uma terapia de combinação de 200 mg de anticorpo 31C6 e 200 mg de pembrolizumabe (Figura 5B) conforme descrito no Exemplo 2.

[0066] FIG. 6 mostra uma plotagem de pacientes com câncer de ovário refratário que mostra a duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1. Os dados compilam os resultados para tratamento conforme descrito na Parte A (monoterapia com 31C6) e Parte B (para terapia de combinação de 31C6 com pembrolizumabe) do Exemplo 1.

[0067] FIG. 7 mostra uma plotagem de pacientes com câncer de mama naive PD-1 que mostra a duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1. Os pacientes foram tratados com uma terapia de combinação de 200 mg de 31C6 e pembrolizumabe (200 mg),

conforme descrito no Exemplo 2.

[0068] FIG. 8 mostra uma plotagem de pacientes com câncer de mama CRC naive PD-1 que mostra a duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1. Os pacientes foram tratados com uma terapia de combinação de 200 mg de 31C6 e pembrolizumabe (200 mg), conforme descrito no Exemplo 2.

[0069] FIGs. 9A e 9B mostram plotagens de pacientes cervical que mostram duração de tratamento e resposta com base em estimação do investigador por RECIST v1.1. Os pacientes foram administrados com 200 mg (FIG. 9A) ou 700 mg (FIG. 9B) de anticorpo 31C6 em uma terapia de combinação com 200 mg de pembrolizumabe conforme descrito no Exemplo 2.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Abreviações. Ao longo da descrição detalhada e exemplos da invenção, as seguintes abreviações serão utilizadas: ADA Anticorpo antifármaco AE Evento adverso ALT Alanina aminotransferase ANC Contagem absoluta de neutrófilos aPTT Tempo de tromboplastina parcial ativado ASaT Todos os Indivíduos Tratados ASCO Sociedade Americana de Oncologia Clínica AST Aspartato aminotransferase AUC Área sob a curva BCG Bacilo Calmette–Guérin β-hCG β Gonadotrofina coriônica humana BOR Melhor resposta geral BID Uma dose duas vezes ao dia

CBR Taxa de benefício clínico CDR Região determinante de complementariedade CHO Ovário de hamster chinês Cmax Concentração máxima Cmin Concentração mínima CNS Sistema nervoso central CR Resposta completa CRF Formulário de relatório de caso CSF Fator estimulador de colônia CSR Relatório de Estudo Clínico CT Tomografia computadorizada CTCAE Critérios Comuns de Terminologia para Eventos Adversos CTLA-4 Antígeno 4 associado ao linfócito T citotóxico D Desescalada para a próxima dose inferior DCR Taxa de controle de doença DFS Sobrevivência livre de doença DILI Lesão no fígado induzida por fármaco DLT Toxicidade limitante de dose DNA Ácido desoxirribonucleico DOR Duração de resposta DSDR Taxa de Doença Estável Durável DU Dose inaceitavelmente tóxica ECG Eletrocardiograma ECI Evento(s) de interesse clínico ECOG Grupo de Oncologia Cooperativa do Leste eCRF Formulário eletrônico de relatório de caso EMA Agência Europeia de Medicamentos

FAS Conjunto de Análise Completa ELISA Imunoensaio ligado à enzima FBR Pesquisa biomédica futura FFPE Fixado em formalina, embebido em parafina FR Região de arcabouço FSH Hormônio folículo estimulante G3 CTCAE (escala de classificação de evento adverso) grau 3 GCP Boa Prática Clínica GFR Taxa de filtração glomerular GGT Gama glutamil transferase HBsAg Antígeno de superfície da Hepatite B HCV vírus da Hepatite C HIV Vírus da imunodeficiência humana HRT Terapia de substituição hormonal IB Brochura do Investigador ICF Formulário de consentimento informado ICH Conferência Internacional em Harmonização iCPD iRECIST doença progressiva confirmada IEC Comitê de Ética Independente Ig Imunoglobulina IgG Imunoglobulina G IHC Imuno-histoquímica ou imunohistoquímico IL Interleucina IM Intramuscular INR Razão internacional normalizada IO Agente imuno-oncológico irAE Evento adverso imuno-relacionado

IRB Conselho de Revisão Institucional iRECIST RECIST 1.1 modificados para terapêuticos com base em immune irRC Critérios de resposta relacionados a immune iSD iRECIST doença estável iUPD iRECIST doença progressiva não confirmada IV Intravenoso IVRS Sistema de Resposta por Voz Interativa IWRS Sistema Integrado de Resposta da Web LDH Lactato desidrogenase LFT Testes de função do fígado mAb Anticorpo monoclonal MASCC Associação Multinacional de Cuidados e Assistência ao Câncer MRI Imagem por ressonância magnética mRNA Ácido ribonucleico mensageiro MSD Merck Sharp & Dohme Corp., uma subsidiária de Merck & Co., Inc.

MSI Instabilidade de microssatélites MTD Dose máxima tolerada mTPI Intervalo de probabilidade de toxicidade modificada NCBI Centro Nacional de Informações Biotecnológicas NCI National Cancer Institute NK Natural killer NOAEL Nenhum nível de efeito adverso observado NSAID Fármaco anti-inflamatório não esteroidal NSCLC Câncer de pulmão de célula não pequena

ORR Taxa de resposta objetiva OS Sobrevivência geral OTC Isentos de Prescrição PBMC Célula mononuclear de sangue periférico PD Doença progressiva PD-1 Morte Programada 1 PD-L1 Ligante 1 de Morte Celular Programada 1 PD-L2 Ligante 2 de Morte Celular Programada 1 PFS Sobrevivência livre de progressão PK Farmacocinética(s) PNA Pneumonia PP Por-Protocolo PR Resposta parcial PT Tempo de protrombina PTT Tempo de tromboplastina parcial Q2W Uma dose a cada duas semanas Q3W Uma dose a cada três semanas QD Uma dose por dia RECIST Critérios de Avaliação de Resposta em Tumores Sólidos RECIST 1.1 Critérios de Avaliação de Resposta em Tumores Sólidos, versão 1.1 RNA Ácido ribonucleico RP2D Dose recomendada de Fase 2 SAE Evento adverso grave SAP Plano de Análise Estatística SD Doença estável SGOT Transaminase glutâmico-oxalacética de soro

SGPT Transaminase glutâmico-pirúvica de soro SNP Polimorfismo de nucleotídeo único SoA Cronograma de Atividades sSAP Plano de Análise Estatística Suplementar TCR Receptor de células T TIGIT Imunoreceptor de células T com domínios Ig e ITIM TNBC Câncer de mama triplo-negativo TNF Fator de necrose tumoral TSH Hormônio Tireoestimulante ULN Limite superior a normal VH Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina VK Região variável de cadeia leve kappa de imunoglobulina WOCBP Mulher em idade fértil I. DEFINIÇÕES

[0070] A fim de que a invenção possa ser mais prontamente entendida, certos termos técnicos e científicos são especificamente definidos abaixo. A menos que especificamente definido de outra forma neste documento, todos os outros termos técnicos e científicos utilizados na presente invenção têm o significado comumente entendido por um técnico no assunto a quem esta invenção pertence.

[0071] Conforme utilizado na presente invenção, incluindo as reivindicações anexas, as formas no singular de palavras, tais como “um”, “uma”, “a” e “o” incluem suas referências correspondentes no plural, a menos que o contexto indique claramente de outro modo.

[0072] Conforme utilizado na presente invenção, uma “variante de 31C6” significa um anticorpo monoclonal que compreende sequências de cadeia pesada e cadeia leve que são substancialmente idênticas àquelas em 31C6

(conforme descrito abaixo e no WO2016/028656, incorporado a título de referência em sua totalidade), exceto por ter três, duas ou uma substituição de aminoácido conservadora em posições que estão localizadas fora das CDRs de cadeia leve e seis, cinco, quatro, três, duas ou uma substituição de aminoácido conservadora que está localizada fora das CDRs de cadeia pesada, por exemplo, as posições de variante estão localizadas nas regiões FR ou na região constante, e tem, opcionalmente, uma deleção do resíduo de lisina C-terminal da cadeia pesada. Em outras palavras, 31C6 e uma variante de 31C6 compreendem sequências de CDR idênticas, mas diferem uma da outra por ter uma substituição de aminoácido conservadora em não mais do que três ou seis outras posições em suas sequências de cadeia leve e pesada de comprimento total, respectivamente. Uma variante de 31C6 é substancialmente igual a 31C6 em relação às seguintes propriedades: afinidade de ligação ao TIGIT humano e capacidade de bloquear a ligação de TIGIT humano ao CD155 humano e CD112 humano.

[0073] “Administração”, conforme se aplica a um animal, humano, indivíduo experimental, célula, tecido, órgão ou fluido biológico, se refere ao contato de um produto farmacêutico exógeno, terapêutico, agente de diagnóstico ou composição com o animal, humano, indivíduo, célula, tecido, órgão ou fluido biológico. O tratamento de uma célula abrange contato de um reagente com a célula, bem como contato de um reagente com um fluido, em que o fluido está em contato com a célula. O termo “indivíduo” inclui qualquer organismo, de preferência, um animal, de modo mais preferencial, um mamífero (por exemplo, rato, camundongo, cão, gato, coelho) e com máxima preferência, um humano.

[0074] Conforme utilizado na presente invenção, o termo “anticorpo” se refere a qualquer forma de anticorpo que exibe a atividade biológica ou de ligação desejada. Desse modo, é utilizado no sentido mais amplo e abrange, especificamente, mas sem limitação, anticorpos monoclonais (incluindo anticorpos monoclonais de comprimento total), anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos), anticorpos totalmente humanos, humanizados, anticorpos quiméricos e anticorpos de único domínio camelizados. “Anticorpos parentais” são anticorpos obtidos por meio de exposição de um sistema imunológico a um antígeno antes de modificação dos anticorpos para um uso pretendido, tal como humanização de um anticorpo para uso como um terapêutico humano.

[0075] Em geral, a unidade estrutural de anticorpo básica compreende um tetrâmero. Cada tetrâmero inclui dois pares idênticos de cadeias de polipeptídeo, cada par tendo uma cadeia “leve” (cerca de 25 kDa) e uma “pesada” (cerca de 50 a 70 kDa). A porção amino-terminal de cada cadeia inclui uma região variável de cerca de 100 a 110 ou mais aminoácidos essencialmente responsável por reconhecimento de antígeno. A porção carboxi-terminal da cadeia pesada pode definir uma região constante essencialmente responsável por função efetora. Tipicamente, cadeias leves humanas são classificadas como cadeias leves kappa e lambda. Além disso, cadeias pesadas humanas são tipicamente classificadas como mu, delta, gama, alfa ou epsilon, e definem o isótipo de anticorpo como IgM, IgD, IgG, IgA e IgE, respectivamente. Dentro de cadeias leves e pesadas, as regiões variáveis e constantes são unidas por uma região “J” de cerca de 12 ou mais aminoácidos, com a cadeia pesada também incluindo uma região “D” de cerca de 10 mais aminoácidos. Vide, em geral, Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W., ed., 2a ed. Raven Press, N.Y. (1989).

[0076] As regiões variáveis de cada par de cadeia leve/pesada formam o sítio de ligação ao anticorpo. Desse modo, em geral, um anticorpo intacto tem dois sítios de ligação. Exceto em anticorpos bifuncionais ou biespecíficos, os dois sítios de ligação são, em geral, os mesmos.

[0077] Tipicamente, os domínios variáveis de ambas as cadeias pesadas e leves compreendem três regiões hipervariáveis, também denominadas regiões determinantes de complementariedade (CDRs), que estão localizadas dentro de regiões de arcabouço (FR) relativamente conservadas. As CDRs são frequentemente alinhadas pelas regiões de arcabouço, possibilitando ligação com um epítopo específico. Em geral, de N-terminal a C- terminal, both domínios variáveis de cadeias leves e pesadas compreendem FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 e FR4. A atribuição de aminoácidos a cada domínio está, de modo geral, em conformidade com as definições de Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat, et al.; National Institutes of Health, Bethesda, Md. ; 5a ed.; NIH Publ. No. 91 a 3.242 (1991); Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1 a 75; Kabat, et al., (1977) J. Biol. Chem. 252:6.609 a 6.616; Chothia, et al., (1987) J Mol. Biol. 196:901 a 917 ou Chothia, et al., (1989) Nature 342:878 a

883.

[0078] Conforme utilizado na presente invenção, a menos que indicado de outra maneira, “fragmento de anticorpo” ou “fragmento de ligação ao antígeno” se refere a fragmentos de ligação ao antígeno de anticorpos, isto é, fragmentos de anticorpo que retêm a capacidade de se ligar especificamente ao antígeno ligado pelo anticorpo de comprimento total, por exemplo, fragmentos que retêm uma ou mais regiões CDR. Exemplos de fragmentos de ligação ao anticorpo incluem, mas sem limitação, fragmentos Fab, Fab', F(ab')2, e Fv; diacorpos; anticorpos lineares; moléculas de anticorpo de cadeia única, por exemplo, sc-Fv; nanocorpos e anticorpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticorpo.

[0079] Um anticorpo que “se liga especificamente a” uma proteína-alvo especificada é um anticorpo que exibe ligação preferencial com aquele alvo em comparação a outras proteínas, mas essa especificidade não exige especificidade de ligação absoluta. Um anticorpo é considerado “específico” para seu alvo pretendido se sua ligação for determinante da presença da proteína-alvo em uma amostra, por exemplo, sem produzir resultados indesejados, tais como falsos positivos. Anticorpos, ou fragmentos de ligação dos mesmos, úteis na presente invenção se ligarão à proteína-alvo com uma afinidade que é pelo menos duas vezes maior, de preferência, pelo menos dez vezes maior, de modo mais preferencial, pelo menos 20 vezes maior e, com máxima preferência, pelo menos 100 vezes maior do que a afinidade com proteínas não alvo. Conforme utilizado na presente invenção, diz-se que um anticorpo se liga especificamente a um polipeptídeo compreendendo uma determinada sequência de aminoácidos, por exemplo, a sequência de aminoácidos de uma molécula madura de PD-1 humana ou PD-L1 humano, se o mesmo se ligar a polipeptídeos que compreendem aquela sequência, mas não se ligar a proteínas que carecem daquela sequência.

[0080] “Carboplatina”, conforme utilizado na presente invenção, se refere a um composto de platina de segunda geração com um amplo espectro de propriedades antineoplásicas. Vide as Patentes no US.10.421.770, no US.8.377.888 e no US.6.770.653. Carboplatina contém um átomo de platina complexado com dois grupos de amônia e um resíduo de ciclobutano- dicarboxil. Esse agente é ativado de modo intracelular para formar complexos de platina reativos que se ligam a grupos nucleofílicos, tais como sítios ricos em GC em DNA, induzindo, desse modo, reticulações de DNA intrafilamentar e interfilamentar, bem como reticulações de DNA-proteína. Esses efeitos de proteína e DNA induzido por carboplatina resultam em apoptose e inibição de crescimento celular. Esse agente tem atividade tumoricida similar àquela de seu composto parental, cisplatina, mas é mais estável e menos tóxica. Os análogos de carboplatina também podem ser administrados para tratamento de câncer. Vide Patente no U.S. 6548541B1.

[0081] “Anticorpo quimérico” se refere a um anticorpo em que uma porção da cadeia pesada e/ou leve é idêntica a ou homóloga a sequências correspondentes em um anticorpo derivado de uma espécie particular (por exemplo, humana) ou que pertence a uma classe ou subclasse particular de anticorpo, enquanto o restante da cadeia(s) é idêntico a ou homólogo a sequências correspondentes em um anticorpo derivado de outra espécie (por exemplo, camundongo) ou que pertence a outra classe ou subclasse de anticorpo, bem como fragmentos de tais anticorpos, desde que exibam a atividade biológica desejada.

[0082] “Coadministração”, conforme utilizado na presente invenção para agentes, tais como o antagonista de PD-1 ou antagonista de TIGIT, significa que os agentes são administrados de modo a ter atividades terapêuticas sobrepostas, e não necessariamente que os agentes são administrados simultaneamente no indivíduo. Os agentes podem ou não estar em combinação física antes da administração. Em uma modalidade, os agentes são administrados em um indivíduo de maneira simultânea ou praticamente ao mesmo tempo. Por exemplo, os produtos farmacológicos anticorpo anti-PD-1 e anticorpo anti-TIGIT contidos em frascos separados, quando em solução líquida, podem ser misturados na mesma bolsa de infusão intravenosa ou dispositivo de injeção, e administrados simultaneamente no paciente.

[0083] “Coformulado” ou “coformulação” ou “co-formulação” ou “co- formulado”, conforme utilizado na presente invenção, se refere a pelo menos dois anticorpos diferentes ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos que são formulados em conjunto e armazenados como um produto combinado em um único frasco ou vaso (por exemplo, um dispositivo de injeção) em vez de serem formulados e armazenados individualmente e, então, misturados antes da administração ou administrados de forma separada. Em uma modalidade, a coformulação contém dois anticorpos diferentes ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos.

[0084] “Estado estacionário” em farmacocinética é um período de tempo durante o qual qualquer acúmulo de concentrações de fármaco devido a múltiplas doses foi maximizado e exposição de fármaco sistêmica é considerada uniforme após cada dose subsequente administrada; no caso específico de pembrolizumabe, estado estacionário é alcançado em e após aproximadamente 16 semanas de administração.

[0085] AUCss, Cavg,ss e Cmin,ss são medidas farmacocinéticas da exposição sistêmica ao fármaco (por exemplo, pembrolizumabe) em humanos após sua administração, e são tipicamente consideradas fatores de eficácia de fármaco. AUCss e Cavg,ss representam a exposição média ao longo de um intervalo de dosagem, mas diferem em termos de unidades. “Cmin,ss” representa a concentração de fármaco mínima ou mais baixa (vale) observada ao final de um intervalo de dosagem, imediatamente antes de a próxima dose ser administrada.

[0086] “Cmax,ss” é a concentração de fármaco máxima ou mais alta (pico) observada logo após sua administração. No caso específico de pembrolizumabe, que é administrado como infusão intravenosa, a concentração de pico ocorre imediatamente após o término de infusão. Cmax,ss é uma métrica que é tipicamente considerada um fator de segurança.

[0087] “Anticorpo humano” se refere a um anticorpo que compreende apenas sequências de proteína imunoglobulina humana. Um anticorpo humano pode conter cadeias de carboidrato murinas se produzido em um camundongo, em uma célula de camundongo ou em um hibridoma derivado de uma célula de camundongo. De modo similar, “anticorpo de camundongo” ou “anticorpo de rato” se refere a um anticorpo que compreende apenas sequências de imunoglobulina de camundongo ou rato, respectivamente.

[0088] “Anticorpo humanizado” se refere a formas de anticorpos que contêm sequências de anticorpos não humanos (por exemplo, murinos) bem como anticorpos humanos. Tais anticorpos contêm sequência mínima derivada de imunoglobulina não humana. Em geral, o anticorpo humanizado compreenderá substancialmente todos dentre pelo menos um, e tipicamente dois, domínios variáveis, em que todos ou substancialmente todos os loops hipervariáveis correspondem àqueles de uma imunoglobulina não humana e todas ou substancialmente todas as regiões FR são aquelas de uma sequência de imunoglobulina humana. O anticorpo humanizado também compreenderá, de modo opcional, pelo menos uma porção de uma região constante de imunoglobulina (Fc), tipicamente aquela de uma imunoglobulina humana. O prefixo “hum”, “hu” ou “h” é adicionado a designações de clone de anticorpo quando necessário para distinguir anticorpos humanizados de anticorpos de roedores parentais. As formas humanizadas de anticorpos de roedores compreenderão, de modo geral, as mesmas sequências de CDR dos anticorpos de roedores parentais, embora certas substituições de aminoácido possam ser incluídas para aumentar a afinidade, aumentar a estabilidade do anticorpo humanizado, ou para outras razões.

[0089] “Resposta antitumoral” quando se refere a um paciente com câncer tratado com um regime terapêutico, tal como uma terapia de combinação descrita na presente invenção, significa pelo menos um efeito terapêutico positivo, tal como, por exemplo, número reduzido de células cancerosas, tamanho reduzido de tumor, taxa reduzida de infiltração de célula cancerosa em órgãos periféricos, taxa reduzida de metástase tumoral ou crescimento tumoral ou sobrevivência livre de progressão. Efeitos terapêuticos positivos em câncer podem ser medidos de diversas maneiras (Vide, W. A. Weber, J. Null. Med. 50:1S a 10S (2009); Eisenhauer et al., supra). Em algumas modalidades, uma resposta antitumoral a uma terapia de combinação descrita na presente invenção é estimada com o uso de critérios RECIST 1.1, irRC bidimensional ou irRC unidimensional. Em algumas modalidades, uma resposta antitumoral é qualquer uma dentre SD, PR, CR, PFS ou DFS.“irRC bidimensional” se refere ao conjunto de critérios descritos em Wolchok JD, et al. Guidelines for the evaluation of immune therapy activity in solid tumors: immune-related response criteria. Clin Cancer Res. 2009;15(23):7412 a 7420. Esses critérios utilizam medições de tumor bidimensionais de lesões-alvo, que são obtidas multiplicando-se o diâmetro mais longo e o diâmetro perpendicular mais longo (cm2) de cada lesão. “Agente bioterapêutico” significa uma molécula biológica, tal como um anticorpo ou proteína de fusão, que bloqueia sinalização de ligante / receptor em qualquer via biológica que suporta conservação e/ou crescimento de tumor ou suprime a resposta imunológica antitumoral. Classes de agentes bioterapêuticos incluem, mas sem limitação, anticorpos para VEGF, EGFR, Her2/neu, outros receptores de fator de crescimento, CD20, CD40, CD-40L, CTLA-4, OX-40, 4-1BB e ICOS. “CBR” ou “Taxa de Benefício Clínico” significa CR + PR + SD durável.

[0090] “CDR” ou “CDRs”, conforme utilizado na presente invenção, significa região(ões) determinante de complementariedade em uma região variável de imunoglobulina, definida com o uso do sistema de numeração Kabat, a menos que indicado de outro modo.

[0091] “Agente quimioterápico” é um composto químico útil no tratamento de câncer. Classes de agentes quimioterápicos incluem, mas sem limitação, agentes alquilantes, antimetabólitos, inibidores de quinase,

alcaloides de planta de toxina do fuso, antibióticos citóxico/antitumor, inibidores de topisomerase, fotossensibilizantes, antiestrógenos e moduladores seletivos de receptor de estrogênio (SERMs), antiprogesteronas, reguladores decrescentes de receptor de estrogênio (ERDs), antagonistas de receptor de estrogênio, agonistas de hormônio de liberação de hormônio luteinizante, antiandrógenos, inibidores de aromatase, inibidores de EGFR, inibidores de VEGF e oligonucleotídeos antissentido que inibem a expressão de genes implicados em proliferação de célula anormal ou crescimento de tumor. Agentes quimioterápicos úteis nos métodos de tratamento da presente invenção incluem agentes citostáticos e/ou citotóxicos. “Chothia”, conforme utilizado na presente invenção, significa um sistema de numeração de anticorpo descrito em Al-Lazikani et al., JMB 273:927 a 948 (1997).

[0092] “Compreendendo” ou variações, tais como “compreender”, “compreende” ou “compreendido de”, são utilizados ao longo do relatório descritivo e reivindicações em um sentido inclusivo, isto é, para especificar a presença dos recursos estabelecidos, mas não para impedir a presença ou adição de recursos adicionais que podem aprimorar materialmente a operação ou utilidade de qualquer uma das modalidades da invenção, a menos que o contexto exija de outra maneira devido à linguagem expressa ou implicação necessária.

[0093] “Variantes modificadas de modo conservador” ou “substituição conservadora” se refere a substituições de aminoácidos em uma proteína por outros aminoácidos que têm características similares (por exemplo, carga, tamanho de cadeia lateral, hidrofobicidade/hidrofilicidade, conformação de cadeia principal e rigidez, etc.), de modo que as mudanças possam ser feitas frequentemente sem alterar a atividade biológica ou outra propriedade desejada da proteína, tal como afinidade e/ou especificidade de antígeno. Os técnicos no assunto reconhecem que, em geral, substituições de aminoácido únicas em regiões não essenciais de um polipeptídeo não alteram de maneira substancial a atividade biológica (Vide, por exemplo, Watson et al. (1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4a Ed.)). Além disso, é menos provável que substituições de aminoácidos estrutural ou funcionalmente similares prejudiquem a atividade biológica. As substituições conservadoras exemplificativas são estabelecidas na Tabela 1 abaixo. Tabela 1. Substituições de Aminoácido Conservadoras Exemplificativas Resíduo original Substituição conservadora Ala (A) Gly; Ser Arg (R) Lys; His Asn (N) Gln; His Asp (D) Glu; Asn Cys (C) Ser; Ala Gln (Q) Asn Glu (E) Asp; Gln Gly (G) Ala His (H) Asn; Gln Ile (I) Leu; Val Leu (L) Ile; Val Lys (K) Arg; His Met (M) Leu; Ile; Tyr Phe (F) Tyr; Met; Leu Pro (P) Ala Ser (S) Thr Thr (T) Ser Trp (W) Tyr; Phe Tyr (Y) Trp; Phe Val (V) Ile; Leu

[0094] “Consiste essencialmente em” e variações, tais como “consistir essencialmente em” ou “consistindo essencialmente em”, conforme utilizado ao longo do relatório descritivo e reivindicações, indicam a inclusão de quaisquer elementos citados ou grupo de elementos, e a inclusão opcional de outros elementos, de natureza similar ou diferente dos elementos citados, que não mudam materialmente as propriedades básicas ou inovadoras do regime de dosagem, método ou composição especificada. Conforme um exemplo não limitante, um antagonista de PD-1 que consiste essencialmente em uma sequência de aminoácidos citada também pode incluir um ou mais aminoácidos, incluindo substituições de um ou mais resíduos de aminoácido, que não afetam materialmente as propriedades do composto de ligação.

[0095] “DCR” ou “Taxa de Controle de Doença” significa CR + PR + SD.

[0096] “Anticorpo monoclonal anti-PD-L de diagnóstico” significa um mAb que se liga especificamente à forma madura do PD-L designado (PD-L1 ou PDL2) que é expresso na superfície de certas células de mamífero. Uma PD-L madura carece da sequência líder pré-secretora, também denominada como peptídeo líder. Os termos “PD-L” e “PD-L madura” são utilizados de modo intercambiável na presente invenção, e devem ser entendidos como a mesma molécula, a menos que indicado de outro modo ou prontamente evidente a partir do contexto.

[0097] Conforme utilizado na presente invenção, um mAb PD-L1 anti- humano de diagnóstico ou um mAb anti-hPD-L1 se refere a um anticorpo monoclonal que se liga especificamente a PD-L1 humano madura. Uma molécula de PD-L1 humano madura consiste em aminoácidos 19 a 290 da seguinte sequência:

MRIFAVFIFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVY WEMEDKNIIQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRC MISYGGADYKRITVKVNAPYNKINQRILVVDPVTSEHELTCQAEGYPKAEVIWTSSDHQV

LSGKTTTTNSKREEKLFNVTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNER THLVILGAILLCLGVALTFIFRLRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLEET (SEQ ID NO:32).

[0098] Exemplos específicos de mAbs PD-L1 anti-humano de diagnóstico úteis como mAbs de diagnóstico para detecção de imuno-histoquímica (IHC) de expressão PD-L1 em seções de tecido tumoral fixados em formalina, embebidos em parafina (FFPE) são anticorpo 20C3 e anticorpo 22C3, que são descritos em WO2014/100079. A Tabela 2 abaixo fornece características de anticorpo 22C3. Outro mAb PD-L1 anti-humano relatado como útil para detecção de IHC de expressão de PD-L1 em seções de tecido FFPE (Chen, B.J. et al., Clin Cancer Res 19: 3.462 a 3.473 (2013)) é um mAb PD-L1 anti-humano de coelho publicamente disponível junto a Sino Biological, Inc. (Beijing, P.R. China; número catálogo 10084-R015). Tabela 2. Características de anticorpo monoclonal MEB037.22C3 (22C3) Recurso de Sequência de Aminoácidos SEQ ID Anticorpo NO Cadeia Leve CDRL1 KSSQSLLHTSTRKNYLA 13 CDRL2 WASTRES 14 CDRL3 KQSYDVVT 15

DIVMSQSPSSLAVSAGEKVTMTCKSSQSLLHTSTRKN Região Variável YLAWYQ 16 Madura QKPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTI

SSVQAE

DLAVYYCKQSYDVVTFGAGTKLELK Cadeia Pesada CDRH1 Kabat Def'n SYWIH 17 CDRH1 Chothia GYTFTSYWIH 18 Def'n CDRH2 YINPSSGYHEYNQKFID 19 CDRH3 SGWLIHGDYYFDF 20

XVHLQQSGAELAKPGASVKMSCKASGYTFTSYWIH

WIKQRPG Região Variável QGLEWIGYINPSSGYHEYNQKFIDKATLTADRSSSTAY 21 Madura MHLTSL TSEDSAVYYCARSGWLIHGDYYFDFWGQGTTLTVSS, em que X = Q ou pE (piro-glutamato)

[0099] A expressão de “PD-L1” ou “PD-L2”, conforme utilizado na presente invenção, significa qualquer nível detectável de expressão da proteína PD-L designada na superfície celular ou do mRNA PD-L designado dentro de uma célula ou tecido. A expressão de proteína PD-L pode ser detectada com um anticorpo PD-L de diagnóstico em um ensaio IHC de uma seção de tecido tumoral ou por citometria de fluxo.

[00100] Alternativamente, a expressão de proteína PD-L por 5 células tumorais pode ser detectada por imagem PET, utilizando um agente de ligação (por exemplo, fragmento de anticorpo, aficorpo e similares) que se liga especificamente ao alvo de PD-L desejado, por exemplo, PD-L1 ou PD-L2. As técnicas para detectar e medir a expressão de mRNA PD-L incluem RT-PCR, RT- PCR quantitativa em tempo real, RNAseq e a plataforma Nanostring (J. Clin. Invest. 2017;127(8):2.930 a 2.940).

[00101] Diversas abordagens foram descritas para quantificar expressão de proteína PD-L1 em ensaios IHC de seções de tecido tumoral. Vide, por exemplo, Thompson, R. H., et al., PNAS 101 (49); 17.174 a 17.179 (2004); Thompson, R. H. et al., Cancer Res. 66:3.381 a 3.385 (2006); Gadiot, J., et al., Cancer 117:2.192 a 2.201 (2011); Taube, J. M. et al., Sci Transl Med 4, 127ra37 (2012); e Toplian, S. L. et al., New Eng. J Med. 366 (26): 2.443 a 2.454 (2012). Vide US 20170285037 que descreve 15 coloração de Hematoxilina e Eosina utilizada pelo patologista.

[00102] Uma abordagem emprega um ponto final binário simples de positivo ou negativo para expressão de PD-L1, com um resultado positivo definido em termos do percentual de células tumorais que exibe evidência histológica de coloração de membrana na superfície de célula. Uma seção de tecido tumoral é contabilizada como positiva para expressão de PD-L1 se representar pelo menos 1% do total de células tumorais.

[00103] Em outra abordagem, a expressão de PD-L1 na seção de tecido tumoral é quantificada nas células tumorais bem como em células imunológicas infiltrantes, que compreendem predominantemente linfócitos. O percentual de células tumorais e células imunológicas infiltrantes que exibem coloração de membrana é quantificado separadamente como < 5%, 5 a 9% e, então, em 10% de incrementos até 100%. A expressão de PD-L1 no infiltrado imunológico é relatada como uma medição semiquantitativa denominada o índice de inflamação ajustado (AIS), que é determinado multiplicando o percentual de células de coloração de membrana pela intensidade do infiltrado, que é classificado como nenhum (0), leve (índice de 1, linfócitos raros), moderado (índice de 2, infiltração focal de tumor por agregados linfohistiocíticos) ou grave (índice de 3, infiltração difusa). Uma seção de tecido tumoral é contabilizada como positiva para expressão de PD-L1 por infiltrados imunológicos se o AIS for ≥ 5.

[00104] O nível de expressão de PD-L mRNA pode ser comparado aos níveis de expressão de mRNA de um ou mais genes de referência que são frequentemente utilizados em RT-PCR quantitativa.

[00105] Em algumas modalidades, um nível de expressão de PD-L1 (proteína e/ou mRNA) por células malignas e/ou infiltrando-se células imunológicas dentro de um tumor é determinado ser “superexpresso” ou elevado” com base em comparação com o nível de expressão de PD-L1 (proteína e/ou mRNA) por um controle apropriado. Por exemplo, um nível de expressão de mRNA ou proteína PD-L1 de controle pode ser o nível quantificado em células não malignas do mesmo tipo ou em uma seção de um tecido normal compatível. Em algumas modalidades preferenciais, a expressão de PD-L1 em uma amostra tumoral é determinada como elevada se a proteína PD-L1 (e/ou PD-L1 mRNA) na amostra for pelo menos 10%, 20% ou 30% superior a do controle.

[00106] “Índice de Proporção de Tumor (TPS)” se refere ao percentual de células tumorais que expressa PD-L1 na membrana celular em qualquer intensidade (fraca, moderada ou forte). Coloração de membrana celular completa ou parcial linear ou é interpretada como positiva para PD-L1.

[00107] “Índice de densidade inflamatória mononuclear (MIDS)” se refere à razão do número de células inflamatórias mononucleares (MIC) que expressam PD-L1 infiltrantes ou adjacentes ao tumor (linfócitos pequenos e grandes, monócitos e macrófagos dentro dos ninhos de tumor e do estroma de suporte adjacente) em comparação ao número total de células tumorais. O MIDS é registrado em uma escala de 0 a 4 com 0=nenhuma; 1=presente, mas menos do que uma MIC para cada 100 células tumorais (<1%); 2=pelo menos uma MIC para cada 100 células tumorais, mas menos do que uma MIC por 10 células tumorais (1 a 9%); 3=pelo menos uma MIC para cada 10 células tumorais, mas menos MIC do que células tumorais (10 a 99%); 4=número de MIC pelo menos igual ao de células tumorais (≥100%).

[00108] “Índice positivo combinado (CPS)” se refere à razão do número de células tumorais de PD-L1 positivo e células inflamatórias mononucleares (MIC) de PD-L1 positivo dentro dos ninhos de tumor e do estroma adjacente de suporte (numerador) em comparação ao número total de células tumorais (denominador; isto é, o número de células tumorais de PD-L1 positivo e PD-L1 negativa). A expressão de PD-L1 em qualquer intensidade é considerada positiva, isto é, fraca (1+), moderada (2+) ou forte (3+).

[00109] “Expressão de PD-L1 positiva” se refere a um Índice de Proporção de Tumor, Índice de Densidade Inflamatória Mononuclear ou Índice Positivo Combinado de pelo menos 1%; AIS é ≥ 5; ou nível elevado de expressão de PD- L1 (proteína e/ou mRNA) por células malignas e/ou por células imunológicas infiltradas dentro de um tumor em comparação a um controle apropriado.

[00110] “DSDR” ou “Taxa de Doença Estável Durável” significa SD para ≥ 23 semanas.

[00111] “Região de arcabouço” ou “FR”, conforme utilizado na presente invenção, significam as regiões variáveis de imunoglobulina excluindo as regiões CDR.

[00112] “Kabat”, conforme utilizado na presente invenção, significa um alinhamento de imunoglobulina e sistema de numeração lançado por Elvin A. Kabat ((1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5a Ed.

[00113] Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.).

[00114] “Anticorpo anti-TIGIT” significa um anticorpo monoclonal que se liga especificamente ao TIGIT humano. TIGIT humano compreende a sequência de aminoácidos:

MRWCLLLIWA QGLRQAPLAS GMMTGTIETT GNISAEKGGS IILQCHLSST TAQVTQVNWE QQDQLLAICN ADLGWHISPS FKDRVAPGPG LGLTLQSLTV NDTGEYFCIY HTYPDGTYTGRIFLEVLESS VAEHGARFQI PLLGAMAATL VVICTAVIVV

VALTRKKKAL RIHSVEGDLRRKSAGQEEWS PSAPSPPGSC VQAEAAPAGL CGEQRGEDCA ELHDYFNVLS YRSLGNCSFF TETG(SEQ ID NO: 33); Vide também resíduos de aminoácidos 25 a 244 de Genbank Número de Acesso NP_776160.2 (SEQ ID NO: 33) (resíduos de aminoácidos 1 a 24 da SEQ ID NO:33 correspondem a um peptídeo líder).

[00115] “Instabilidade de microssatélites (MSI)” se refere à forma de instabilidade genômica associada a reparo de incompatibilidade de DNA defeituoso em tumores. Vide Boland et al., Cancer Research 58, 5.258 a 5.257,

1998. Em uma modalidade, a análise MSI pode ser realizada utilizando os cinco marcadores de microssatélites recomendados pelo National Cancer Institute (NCI) BAT25 (GenBank no. de acesso 9834508), BAT26 (GenBank no. de acesso

9834505), D5S346 (GenBank no. de acesso 181171), D2S123 (GenBank no. de acesso 187953), D17S250 (GenBank no. de acesso 177030). Marcadores adicionais, por exemplo, BAT40, BAT34C4, TGF-β-RII e ACTC podem ser utilizados. Kits comercialmente disponíveis para análise MSI incluem, por exemplo, o ensaio Promega MSI multiplex PCR.

[00116] “Instabilidade de microssatélites de alta frequência” ou “instabilidade de microssatélites alta (MSI-H)” se refere a se dois ou mais dos cinco marcadores de NCI mostram instabilidade ou ≥30 a 40% do total de marcadores demonstram instabilidade (isto é, têm mutações de inserção/deleção).

[00117] “Instabilidade de microssatélites de baixa frequência” ou “instabilidade de microssatélites baixa (MSI-L)” se refere a se um dos cinco marcadores de NCI mostra instabilidade ou <30 a 40% do total de marcadores exibem instabilidade (isto é, têm mutações de inserção/deleção).

[00118] “Câncer colorretal não MSI-H”, conforme utilizado na presente invenção, se refere a câncer colorretal com microssatélites estáveis (MSS) e MSI de baixa frequência (MSI-L).

[00119] “Microssatélites Estáveis (MSS)” se refere a se nenhum dos cinco marcadores de NCI mostra instabilidade (isto é, têm mutações de inserção/deleção).

[00120] “Câncer colorretal de reparo de incompatibilidade proficiente (pMMR)” se refere à expressão normal de proteínas MMR (MLH1, PMS2, MSH2 e MSH6) em um espécime de tumor CRC por IHC. 10 kits comercialmente disponíveis para análise MMR incluem o ensaio Ventana MMR IHC.

[00121] “Câncer colorretal de reparo de incompatibilidade deficiente (dMMR)” se refere à baixa expressão de uma ou mais proteína(s) MMR (MLH1, PMS2, MSH2 e MSH6) em um espécime de tumor CRC por IHC.

[00122] “Anticorpo monoclonal” ou “mAb” ou “Mab”, conforme utilizado na presente invenção, se refere a uma população de anticorpos substancialmente homogêneos, isto é, as moléculas de anticorpo que compreendem a população são 15 idênticas em sequência de aminoácidos exceto pelas possíveis mutações de ocorrência natural que podem estar presentes em quantidades diminutas. Em contraste, preparações de anticorpo (policlonal) convencionais tipicamente incluem uma variedade de diferentes anticorpos que têm diferentes sequências de aminoácidos em seus domínios variáveis, em particular, suas CDRs, que são frequentemente específicas para diferentes epítopos. O modificador “monoclonal” indica o caráter do anticorpo como sendo obtido a partir de uma 20 população substancialmente homogênea de anticorpos, e não deve ser interpretado como exigindo a produção do anticorpo por qualquer método particular. Por exemplo, os anticorpos monoclonais a serem utilizados em conformidade com a presente invenção podem ser produzidos pelo método hibridoma primeiramente descrito por Kohler et al. (1975) Nature 256: 495, ou podem ser produzidos por métodos de DNA recombinante (Vide, por exemplo, a Patente no U.S.

4.816.567). Os “anticorpos monoclonais” também podem ser isolados a partir de bibliotecas de anticorpo de fago com o uso das técnicas descritas em Clackson et al. (1991) Nature 352: 624 a 628 e Marks et al. (1991) J. Mol. Biol. 222: 581 a 597, por exemplo. Vide também Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116:731.

[00123] “Paciente não responsivo”, quando se refere a uma resposta antitumoral específica ao tratamento com uma terapia de combinação descrita na presente invenção, significa que o paciente não exibiu a resposta antitumoral.

[00124] “ORR” ou “taxa de resposta objetiva” se refere, em algumas modalidades, a CR + PR, e ORR(semana 24) se refere a CR e PR medidas utilizando irRECIST em cada paciente em um coorte após 24 semanas de tratamento anticâncer.“Paciente” ou “indivíduo” se refere a qualquer indivíduo único para quem a terapia é desejada ou que está participando em um teste clínico, estudo epidemiológico ou utilizado como um controle, incluindo pacientes humanos e veterinários mamíferos, tais como gado, cavalos, cães e gatos.

[00125] “Antagonista de PD-1” significa qualquer composto químico ou molécula biológica que bloqueia a ligação de PD-L1 expressa em uma célula cancerosa com PD-1 expressa em uma célula imunológica (células T, células B ou célula NKT) e também bloqueia, de modo preferencial, a ligação de PD-L2 expressa em uma célula cancerosa com a PD-1 expressa em célula imunológica. Nomes alternativos ou sinônimos para PD-1 e seus ligantes incluem: PDCD1, PD1, CD279 e SLEB2 para PD-1; PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 e B7-H para PD-L1; e PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc e CD273 para PD-L2. Em qualquer um dentre o método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção em que um indivíduo humano está sendo tratado, o antagonista de PD-1 bloqueia a ligação de PD-L1 humano a PD-1 humano e bloqueia, de modo preferencial, a ligação de PD-L1 e PD-L2 humanas a PD-1 humano. Sequências de aminoácidos de PD-1 humana podem ser encontradas em NCBI Locus No.: NP_005009. As sequências de aminoácidos de PD-L1 e PD-L2 humana podem ser encontradas em NCBI Locus No.: NP_054862 e NP_079515, respectivamente.

[00126] Conforme utilizado na presente invenção, uma “variante de pembrolizumabe” significa um anticorpo monoclonal que compreende sequências de cadeia pesada e cadeia leve que são substancialmente idênticas àquelas em pembrolizumabe, exceto por ter três, duas ou uma substituição de aminoácido conservadora em posições que estão localizadas fora das CDRs de cadeia leve e seis, cinco, quatro, três, duas ou uma substituição de aminoácido conservadora que está localizada fora das CDRs de cadeia pesada, por exemplo, as posições de variante estão localizadas nas regiões FR ou na região constante, e tem, opcionalmente, uma deleção do resíduo de lisina C-terminal da cadeia pesada. Em outras palavras, pembrolizumabe e uma variante de pembrolizumabe compreendem sequências de CDR idênticas, mas diferem uma da outra por ter uma substituição de aminoácido conservadora em não mais do que três ou seis outras posições em suas sequências de cadeia leve e pesada de comprimento total, respectivamente. Uma variante de pembrolizumabe é substancialmente igual a pembrolizumabe em relação às seguintes propriedades: afinidade de ligação à PD-1 e capacidade de bloquear a ligação de cada uma dentre PD-L1 e PD-L2 à PD-1.

[00127] Conforme utilizado na presente invenção, o termo “pemetrexede” se refere a um composto denominado pirrolo[2,3-d]pirimidina 5-substituído. Especificamente, o termo se refere a um antifolato multialvejado que exibe efeitos anticâncer contra vários cânceres, incluindo câncer de pulmão de célula não pequena e mesotelioma pleural maligno. Pemetrexede exibe efeitos anticâncer contra vários cânceres, incluindo câncer de pulmão de célula não pequena e mesotelioma pleural maligno, inibindo-se a atividade de metabólitos que estão envolvidos em metabolismo de folato. Os análogos e variantes de pemetrexede também podem ser utilizados. Vide a publicação PCT número WO2014084651A1.

[00128] “Critérios de Resposta RECIST 1.1”, conforme utilizado na presente invenção, significam as definições estabelecidas em Eisenhauer et al., E.A. et al., Eur. J Cancer 45:228 a 247 (2009) para lesões-alvo ou lesões não alvo, conforme apropriado com base no contexto em que a resposta está sendo medida.

[00129] “Paciente responsivo” quando se refere a uma resposta antitumoral específica ao tratamento com uma terapia de combinação descrita na presente invenção, significa que o paciente exibiu a resposta antitumoral.

[00130] “Resposta sustentada” significa um efeito terapêutico sustentado após término de tratamento com um agente terapêutico, ou uma terapia de combinação descrita na presente invenção. Em algumas modalidades, a resposta sustentada tem uma duração que é pelo menos igual à duração de tratamento, ou pelo menos 1,5, 2,0, 2,5 ou 3 vezes mais longa do que a duração de tratamento.

[00131] Taxol é um agente quimioterápico contra câncer valioso utilizado para o tratamento de muitos tipos de câncer, incluindo carcinomas de ovário, mama e pulmão. Taxol é um produto natural derivado da casca de Taxus brevafolio (Teixo do pacífico). O taxol inibe a polimerização de microtúbulo durante mitose e resulta em subsequente morte celular. O taxol exibe um amplo espectro de atividade tumoricida incluindo contra câncer de mama, ovário e pulmão (McGuire et al., 1996, N. Engld. J. Med. 334:1 a 6; e Johnson et al., 1996, J. Clin. Ocol. 14:2.054 a 2.060). Embora o taxol seja frequentemente eficaz no tratamento dessas malignidades, normalmente não é curativo devido ao eventual desenvolvimento de resistência ao taxol. A resistência celular ao taxol pode incluir mecanismos, tais como expressão aumentada de P- glicoproteína e alterações em estrutura de tubulina através de mutações genéticas na cadeia beta ou mudanças na razão de isômeros de tubulina dentro do microtúbulo polimerizado (Wahl et al., 1996, Nature Medicine 2:72 a 79; Horwitz et al., 1993, Natl. Cancer Inst. 15:55 a 61; Haber et al., 1995, J. Biol. Chem. 270:31.269 a 31.275; e Giannakakou et al., 1997, J. Biol. Chem. 272:17.118 a 17.125). Alguns tumores adquirem resistência ao taxol através de mecanismos desconhecidos.

[00132] “Seção de Tecido” se refere a uma única parte ou pedaço de uma amostra tecidual, por exemplo, uma fatia fina de tecido cortada de uma amostra de um tecido normal ou de um tumor.

[00133] “Tratar” ou “tratamento” de câncer, conforme utilizado na presente invenção, significa administrar agentes terapêuticos da invenção em um indivíduo que tem câncer, ou diagnosticado com câncer, para alcançar pelo menos um efeito terapêutico positivo, tal como, por exemplo, número reduzido de células cancerosas, tamanho reduzido de tumor, taxa reduzida de infiltração de célula cancerosa em órgãos periféricos, ou taxa reduzida de metástase tumoral ou crescimento de tumor. Efeitos terapêuticos positivos em câncer podem ser medidos de diversas maneiras (Vide, W. A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S a 10S (2009)). Por exemplo, em relação à inibição de crescimento de tumor, de acordo com padrões NCI, um T/C ≦42% é o nível mínimo de atividade antitumoral. Um T/C < 10% é considerado um nível alto de atividade antitumoral, com T/C (%) = volume de tumor mediano do volume de tumor tratado/mediano do controle × 100. Em algumas modalidades, resposta a uma terapia de combinação descrita na presente invenção é estimada com o uso de critérios RECIST 1.1 ou irRC (bidimensional ou unidimensional) e o tratamento alcançado por uma combinação da invenção é qualquer um dentre PR, CR, OR, PFS, DFS e OS. PFS, também denominado “Tempo para Progressão de Tumor” indica a duração de tempo durante e após o tratamento na qual o câncer não cresce, e inclui a quantidade de tempo que pacientes experimentaram uma CR ou PR, bem como a quantidade de tempo que pacientes experimentaram SD. DFS se refere à duração de tempo durante e após o tratamento na qual o paciente permanece livre da doença. OS se refere a um prolongamento na expectativa de vida em comparação a indivíduos ou pacientes naive ou não tratados. Em algumas modalidades, a resposta a uma combinação da invenção é qualquer uma dentre PR, CR, PFS, DFS, OR e OS que é estimada com o uso de critérios de resposta RECIST 1.1. O regime de tratamento para uma combinação da invenção que é eficaz para tratar um paciente com câncer pode variar de acordo com fatores, tais como o estado da doença, idade e peso do paciente, e a capacidade de a terapia desencadear uma resposta anticâncer no indivíduo.

[00134] Embora uma modalidade de qualquer um dentre os aspectos da invenção possa não ser eficaz em alcançar um efeito terapêutico positivo em todo indivíduo, a mesma deve alcançar em um número estatisticamente significativo de indivíduos conforme determinado por qualquer teste estatístico conhecido na arte, tal como o teste t de Student, o teste chi 2, o teste U de acordo com Mann e Whitney, o teste Kruskal-Wallis (H-test), teste Jonckheere- Terpstra e o teste Wilcoxon.

[00135] Os termos “regime de tratamento”, “protocolo de dosagem” e “regime de dosagem” são utilizados de modo intercambiável para se referir à dose e temporização de administração de cada agente terapêutico em uma combinação da invenção.

[00136] “Tumor”, conforme se aplica a um indivíduo diagnosticado ou suspeito de ter câncer, se refere a um neoplasma ou massa de tecido maligna ou potencialmente maligna de qualquer tamanho, e inclui tumores primários e neoplasmas secundários. Um tumor sólido é um crescimento anormal ou massa de tecido que normalmente não contém cistos ou áreas líquidas. Diferentes tipos de tumores sólidos são nomeados para o tipo de células que forma os mesmos. Exemplos de tumores sólidos são sarcomas, carcinomas e linfomas. Leucemias (cânceres do sangue) geralmente não formam tumores sólidos (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).

[00137] “Carga de tumor” também denominada “carga tumoral”, se refere à quantidade total de material tumoral distribuída ao longo do corpo. A carga tumoral se refere ao número total de células cancerosas ou ao tamanho total de tumor(s), ao longo do corpo, incluindo linfonodos e medula óssea. A carga tumoral pode ser determinada por meio de uma variedade de métodos conhecidos na técnica, tais como, por exemplo, medindo-se as dimensões de tumor(s) após remoção do indivíduo, por exemplo, utilizando paquímetros, ou ainda no corpo com a utilização de técnicas de imagem, por exemplo, ultrassom, cintigrafia óssea, tomografia computadorizada (CT) ou imagem por ressonância magnética (MRI).

[00138] O termo “tamanho de tumor” se refere ao tamanho total do tumor que pode ser medido como o comprimento e largura de um tumor. O tamanho de tumor pode ser determinado por meio de uma variedade de métodos conhecidos na técnica, tais como, por exemplo, medindo-se as dimensões de tumor(s) após remoção do indivíduo, por exemplo, utilizando paquímetros, ou ainda no corpo com a utilização de técnicas de imagem, por exemplo, cintigrafia óssea, ultrassom, CT ou MRI.

[00139] “irRC unidimensional” se refere ao conjunto de critérios descritos em Nishino M, Giobbie- Hurder A, Gargano M, Suda M, Ramaiya NH, Hodi FS. Developing a Common Language for Tumor Response to Immunotherapy: Immune-related Response Criteria using Unidimensional measurements. Clin Cancer Res. 2013;19(14):3.936 a 3.943). Esses critérios utilizam o diâmetro mais longo (cm) de cada lesão.

[00140] “Regiões variáveis” ou “região V”, conforme utilizado na presente invenção, significa o segmento de cadeias de IgG que é variável em sequência entre diferentes anticorpos. A mesma se estende para resíduo de Kabat 109 na cadeia leve e 113 na cadeia pesada. ANTAGONISTAS PD-1 E ANTICORPOS ANTI-TIGIT

[00141] Antagonistas PD-1 úteis no método de tratamento,

medicamentos e usos da presente invenção incluem um anticorpo monoclonal (mAb), ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, que se liga especificamente à PD-1 ou PD-L1, e se liga, de modo preferencial, especificamente a PD-1 humano ou PD-L1 humano. O mAb pode ser um anticorpo humano, um anticorpo humanizado ou um anticorpo quimérico, e pode incluir uma região constante humana. Em algumas modalidades, a região constante humana é selecionada a partir do grupo que consiste em regiões constantes IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 e, em modalidades preferenciais, a região constante humana é uma região constante IgG1 ou IgG4. Em algumas modalidades, o fragmento de ligação ao antígeno é selecionado a partir do grupo que consiste em fragmentos Fab, Fab'- SH, F(ab')2, scFv e Fv. O anticorpo anti-PD-1 ou anti-PD-L1 pode ser produzido em células CHO utilizando tecnologias de cultura celular e recuperação/purificação convencionais.

[00142] Exemplos de mAbs que se ligam a PD-1 humano, e úteis no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, são descritos em US7488802, US7521051, US8008449, US8354509, US8168757, WO2004/004771, WO2004/072286, WO2004/056875 e US2011/0271358. mAbs PD-1 anti-humanos específicos úteis como o antagonista de PD-1 no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção incluem: pembrolizumabe (também conhecido como MK-3475), um mAb IgG4 humanizado com a estrutura descrita em WHO Drug Information, Vol. 27, No. 2, páginas 161 a 162 (2013) e que compreende as sequências de aminoácidos de cadeia pesada e leve mostradas na Tabela 3; nivolumabe (BMS-936558), um mAb IgG4 humano com a estrutura descrita em WHO Drug Information, Vol. 27, No. 1, páginas 68 a 69 (2013) e que compreende as sequências de aminoácidos de cadeia pesada e leve mostradas na Tabela 3; os anticorpos humanizados h409A11, h409A16 e h409A17, que são descritos em

WO2008/156712, e AMP-514, que está sendo desenvolvido por MedImmune.

[00143] Exemplos de mAbs que se ligam a PD-L1 humano, e úteis no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, são descritos nas publicações PCT no WO2013/019906 e no W02010/077634 A1 e na Patente no US 8383796. mAbs PD-L1 anti-humanos específicos úteis como o antagonista de PD-1 no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção incluem MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C e um anticorpo que compreende as regiões variáveis de cadeia pesada e cadeia leve da SEQ ID NO:24 e SEQ ID NO:21, respectivamente, do WO2013/019906.

[00144] Outros antagonistas PD-1 úteis no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção incluem uma imunoadesina que se liga especificamente à PD-1 ou PD-L1 e, de modo preferencial, se liga especificamente a PD-1 humano ou PD-L1 humano, por exemplo, uma proteína de fusão contendo a porção extracelular ou de ligação a PD-1 de PD-L1 ou PD- L2 fundida a uma região constante, tal como uma região Fc de uma molécula de imunoglobulina. Exemplos de moléculas de imunoadesão que se ligam especificamente à PD-1 são descritos em WO2010/027827 e WO2011/066342. As proteínas de fusão específicas úteis como o antagonista de PD-1 no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção incluem AMP-224 (também conhecida como B7-DCIg), que é uma proteína de fusão PD-L2-FC e se liga a PD-1 humano.

[00145] Em algumas modalidades preferenciais do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o antagonista de PD-1 é um anticorpo monoclonal, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, que compreende: (a) CDRs de cadeia leve SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesadas SEQ ID NOs: 6, 7 e 8.

[00146] Em outras modalidades preferenciais do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o antagonista de PD-1 é um anticorpo monoclonal, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, que se liga especificamente a PD-1 humano e compreende (a) uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 ou uma variante da mesma, e (b) uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:4 ou uma variante da mesma. Uma variante de uma sequência de região variável de cadeia pesada é idêntica à sequência de referência exceto por ter até 17 substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço (isto é, fora das CDRs) e tem, de modo preferencial, menos de dez, nove, oito, sete, seis ou cinco substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço. Uma variante de uma sequência de região variável de cadeia leve é idêntica à sequência de referência exceto por ter até cinco substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço (isto é, fora das CDRs) e tem, de modo preferencial, menos de quatro, três ou duas substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço.

[00147] Em outra modalidade preferencial do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o antagonista de PD-1 é um anticorpo monoclonal que se liga especificamente a PD-1 humano e compreende (a) uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 10 e (b) uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:5.

[00148] Em ainda outra modalidade preferencial do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o antagonista de PD-1 é um anticorpo monoclonal que se liga especificamente a PD-1 humano e compreende (a) uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 12 e (b) uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:11.

[00149] Em todos dentre o método de tratamento, medicamentos e usos acima, o antagonista de PD-1 inibe a ligação de PD-L1 à PD-1, e também inibe, de modo preferencial, a ligação de PD-L2 à PD-1. Em algumas modalidades do método de tratamento, medicamentos e usos acima, o antagonista de PD-1 é um anticorpo monoclonal, ou um fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, que se liga especificamente à PD-1 ou à PD-L1 e bloqueia a ligação de PD-L1 à PD-1. Em uma modalidade, o antagonista de PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que as cadeias pesada e leve compreendem as sequências de aminoácidos na SEQ ID NO:10 e SEQ ID NO:5, respectivamente.

[00150] A Tabela 3 abaixo fornece uma lista das sequências de aminoácidos de mAbs anti-PD-1 exemplificativos para uso no método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção. Tabela 3. Sequências de Anticorpo PD-1 Exemplificativas Recurso de Sequência de Aminoácidos SEQ ID Anticorpo NO. Cadeia Leve de pembrolizumabe CDR1 RASKGVSTSGYSYLH 1 CDR2 LASYLES 2 CDR3 QHSRDLPLT 3 Região EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWY 4 Variável QQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISS

LEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIK Cadeia EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWY 5 Leve QQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISS

LEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFI FPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQS GNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACE

VTHQGLSSPVTKSFNRGEC Cadeia Pesada de pembrolizumabe CDR1 NYYMY 6 CDR2 GINPSNGGTNFNEKFKN 7 CDR3 RDYRFDMGFDY 8

Região QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWV 9 Variável RQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSST

TTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQG

TTVTVSS Cadeia QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWV 10 Pesada RQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSST

TTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQG TTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFP EPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS SLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPE FLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEV QFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQ

DWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYT Recurso de Sequência de Aminoácidos SEQ ID Anticorpo NO.

LPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPEN NYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVM

HEALHNHYTQKSLSLSLGK Cadeia Leve de Nivolumabe Cadeia EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKP 11 Leve GQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPE

DFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPS DEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNS QESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTH

QGLSSPVTKSFNRGEC Cadeia Pesada de Nivolumabe Cadeia QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVR 12 Pesada QAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSK

NTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSA STKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSW NSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTY TCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVF LFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVD GVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKE YKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEM TKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPV LDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNH YTQKSLSLSLGK

[00151] O anticorpo anti-TIGIT utilizado na invenção reivindicada pode ser um anticorpo humano, um anticorpo humanizado ou um anticorpo quimérico,

e pode incluir uma região constante humana. Em algumas modalidades, a região constante humana é selecionada a partir do grupo que consiste em regiões constantes IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 e, em modalidades preferenciais, a região constante humana é uma região constante IgG1 ou IgG4.

[00152] Em uma modalidade, o anticorpo anti-TIGIT é 31C6. Em outra modalidade, o anticorpo anti-TIGIT é uma variante de 31C6. O anticorpo 31C6 é um anticorpo monoclonal que contém duas cadeias pesadas e duas cadeias leves, em que cada cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 23 e cada cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID NO: 22.

[00153] 31C6: uma imunoglobulina de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos: DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASEHIYSYLSWYQQK

PGKVPKLLIYNAKTLAEGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQHHFGSPLTFGQG

TRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQES VTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 22); e uma imunoglobulina de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos:

EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSYVMHWVRQAPGQGLEWIGYIDPYNDGA YAQKFQGRVTLTSDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGPYGWYFDVWGQGTTV TVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAV LQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELL GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREQ YNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLP

PSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV DKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 23); ou um domínio variável de imunoglobulina de cadeia leve que compreende a sequência de aminoácidos:

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASEHIYSYLSWYQQKPGKVPKLLIYNAKTLAEGV PS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQHHFGSPLTFGQGTRLEIK (SEQ ID NO: 24 (CDRs sublinhadas)); e um domínio variável de imunoglobulina de cadeia pesada que compreende a sequência de aminoácidos:

EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSYVMHWVRQAPGQGLEWIGYIDPYN

DGAYAQKFQGRVTLTSDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGPYGWYFDVWGQGTT V TVSS (SEQ ID NO: 25 (CDRs sublinhadas)); ou que compreende os CDRs: CDR-L1: RASEHIYSYLS (SEQ ID NO: 26); CDR-L2: NAKTLAE (SEQ ID NO: 27); CDR-L3: QHHFGSPLT (SEQ ID NO: 28); CDR-H1: SYVMH (SEQ ID NO: 29); CDR-H2: YIDPYNDGAKYAQKFQG (SEQ ID NO: 30); e CDR-H3: GGPYGWYFDV (SEQ ID NO: 31)

[00154] Em algumas modalidades preferenciais do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o anticorpo anti-TIGIT compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 30, 27 e 28 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31.

[00155] Em outras modalidades preferenciais do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o anticorpo anti-TIGIT compreende (a) uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 ou uma variante da mesma, e (b) uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:24 ou uma variante da mesma. Uma variante de uma sequência de região variável de cadeia pesada é idêntica à sequência de referência exceto por ter até 17 substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço (isto é, fora das CDRs) e tem, de modo preferencial, menos de dez, nove, oito, sete, seis ou cinco substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço. Uma variante de uma sequência de região variável de cadeia leve é idêntica à sequência de referência exceto por ter até cinco substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço (isto é, fora das CDRs) e tem, de modo preferencial, menos de quatro, três ou duas substituições de aminoácido conservadoras na região de arcabouço. Exemplos de tais variantes conforme estabelecido na publicação de patente internacional número WO2016/028656 (Vide, por exemplo, SEQ ID NOs: 124 a 133 e 149 a 150 da publicação de patente internacional número WO2016/028656.

[00156] Em outra modalidade preferencial do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o anticorpo anti-TIGIT compreende (a) uma cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 23 e (b) uma cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:22. Em outra modalidade preferencial do método de tratamento, medicamentos e usos da presente invenção, o anticorpo anti-TIGIT compreende (a) uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO: 25 e (b) uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:24.

[00157] Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 ou anti-TIGIT ou fragmento de ligação ao antígeno compreende uma região constante de cadeia pesada, por exemplo, uma região constante humana, tal como região constante de cadeia pesada humana ƴ1, ƴ2, ƴ3 ou ƴ4 ou de uma variante da mesma. Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD-1 ou anti-TIGIT ou fragmento de ligação ao antígeno compreende uma região constante de cadeia leve, por exemplo, uma região constante de cadeia leve humana, tal como região de cadeia leve humana lambda ou kappa ou variante da mesma. A título de exemplo, e não limitação, a região constante de cadeia pesada humana pode ser ƴ1 e a região constante de cadeia leve humana pode ser kappa. Em outra modalidade, a região constante de cadeia pesada humana pode ser ƴ4 e a região constante de cadeia leve humana pode ser kappa. Em uma modalidade alternativa, a região Fc do anticorpo é ƴ4 com uma mutação Ser228Pro (Schuurman, J et. al., Mol. Immunol. 38: 1 a 8, 2001).

[00158] Em algumas modalidades, diferentes domínios constantes podem ser anexados a regiões VL e VH humanizadas derivadas das CDRs fornecidas na presente invenção. Por exemplo, se um uso pretendido particular de um anticorpo (ou fragmento) da presente invenção necessitar de funções efetoras alteradas, um domínio constante de cadeia pesada diferente de IgG1 humano pode ser utilizado, ou IgG1/IgG4 híbrido pode ser utilizado. Por exemplo, um domínio constante IgG4 humano, por exemplo, pode ser utilizado. A presente invenção inclui o uso de anticorpos anti-PD-1 ou anticorpos anti-TIGIT e fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos que compreendem um domínio constante de IgG4. Em uma modalidade, o domínio constante de IgG4 pode diferir do domínio constante de IgG4 humano nativo (Swiss-Prot No. de Acesso P01861.1) em uma posição que corresponde à posição 228 no sistema EU e posição 241 no sistema KABAT, em que o Ser108 nativo é substituído por Pro, a fim de evitar uma potencial ligação dissulfeto intercadeia entre Cys106 e Cys109 (que corresponde às posições Cys 226 e Cys 229 no sistema EU e posições Cys 239 e Cys 242 no sistema KABAT) que pode interferir em formação de ligação dissulfeto intracadeia apropriada. Vide Angal et al. (1993) Mol. Imunol.30:105. MÉTODOS, USOS E MEDICAMENTOS

[00159] Em um aspecto, a invenção fornece um método para tratar câncer em um paciente que compreende administrar um anticorpo anti-TIGIT a 2,1 mg a 700 mg, em que o anticorpo anti-TIGIT compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31. Em um aspecto, o anticorpo anti-TIGIT é administrado por infusão intravenosa. Em outro aspecto, a invenção fornece um método para tratar câncer em um paciente que compreende coadministrar um anticorpo anti-TIGIT a 2,1 mg a 700 mg com um anticorpo anti-PD-1 ou anti-PD-L1, em que o anticorpo anti-TIGIT compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 bloqueia a ligação de PD-1 a PD-L1 e PD-L2. Em uma modalidade, 2,1 mg a 700 mg do anticorpo anti-TIGIT são administrados. Em várias modalidades, 2,1 mg, 7 mg, 21 mg, 70 mg, 200 mg, 210 mg ou 700 mg do anticorpo anti-TIGIT são administrados. Em outra modalidade, 200 a 700 mg do anticorpo anti-TIGIT são administrados. Em outra modalidade, 200 a 700 mg do anticorpo anti-TIGIT são administrados. Em outra modalidade, 200 mg ou 210 mg do anticorpo anti-TIGIT são administrados. Em um aspecto, o anticorpo anti-TIGIT é administrado por infusão intravenosa. Em outro aspecto, o anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1 é administrado por infusão intravenosa. Em uma modalidade adicional, tanto o anticorpo anti- TIGIT quanto o anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1 são administrados por infusão intravenosa.

[00160] Em um aspecto adicional, a invenção fornece um método para tratar câncer em um paciente que compreende administrar por infusão intravenosa no indivíduo uma composição que compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 mg de anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou de uma variante de 31C6. Em outro aspecto, a invenção fornece um método para tratar câncer em um paciente que compreende administrar por infusão intravenosa no indivíduo uma composição que compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 210 mg de anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou de uma variante de 31C6. Em uma modalidade, a composição compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 a 700 mg de anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou de uma variante de 31C6. Em uma modalidade, a composição compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 700 mg de anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou de uma variante de 31C6.

[00161] Em outra modalidade, a invenção fornece um medicamento que compreende o anticorpo anti-TIGIT para uso em combinação com um anticorpo anti-PD-1 ou anti-PD-L1 para tratar câncer, em que o anticorpo anti-TIGIT é administrado a uma dose de 2,1 mg a 700 mg. Em uma modalidade, o anticorpo anti-TIGIT é administrado por infusão intravenosa. Em outra modalidade, a invenção fornece um medicamento que compreende o anticorpo anti-TIGIT e um anticorpo anti-PD-1 para tratar câncer. Em uma modalidade, o medicamento compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 mg de anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou de uma variante de 31C6. Em outra modalidade, o medicamento compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 700 mg de 31C6 ou de uma variante de 31C6.

[00162] Em uma modalidade ainda adicional, a invenção fornece uso do anticorpo anti-TIGIT e um anticorpo anti-PD-1 ou anti-PD-L1 na fabricação de um medicamento para tratar câncer em um indivíduo. Em uma modalidade, o medicamento compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 mg de anticorpo anti-TIGIT 31C6 ou de uma variante de 31C6. Em outro aspecto, o medicamento compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 700 mg de 31C6 ou de uma variante de 31C6. Em uma modalidade ainda adicional, a invenção fornece uso do anticorpo anti-TIGIT na fabricação de um medicamento para tratar câncer em um indivíduo, em que o anticorpo anti-TIGIT é coadministrado a 2,1 mg com o anticorpo anti-PD-1 a 200 mg. Em uma modalidade, cada um dentre o anticorpo anti-TIGIT e o anticorpo anti-PD-1 é administrado por infusão intravenosa.

[00163] Nos métodos, medicamentos e usos antecedentes, em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 e o anticorpo anti-TIGIT são coformulados. Em uma modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado para infusão intravenosa. Em uma modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 300 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado para infusão intravenosa. Em uma modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 400 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado para infusão intravenosa. Em outra modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 500 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado para infusão intravenosa. Em outra modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 600 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado para infusão intravenosa. Em outra modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 700 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado para infusão intravenosa.

[00164] A invenção também fornece uma composição farmacêutica que compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 200 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em uma modalidade, a composição farmacêutica compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 300 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em uma modalidade, a composição farmacêutica compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 400 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em outra modalidade, a composição farmacêutica compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 500 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em uma modalidade adicional, a composição farmacêutica compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 600 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Em uma modalidade adicional, a composição farmacêutica compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 700 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[00165] Nos métodos, medicamentos e usos antecedentes, em outra modalidade, o anticorpo anti-PD-1 ou anti-PD-L1 e o anticorpo anti-TIGIT são coadministrados. Em uma modalidade, 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são coadministrados no Dia 1 e, então, posteriormente, a cada três semanas por infusão intravenosa. Em uma modalidade, 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 300 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são coadministrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas por infusão intravenosa. Em uma modalidade, 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 400 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são coadministrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas por infusão intravenosa. Em outra modalidade, 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 500 mg de 31C6 ou de uma variante de 31C6 são coadministrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas por infusão intravenosa. Em outra modalidade, 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 600 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são coadministrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas por infusão intravenosa. Em uma modalidade adicional, 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 700 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são coadministrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas por infusão intravenosa.

[00166] Nos métodos, medicamentos e usos antecedentes, em uma modalidade, 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, a cada seis semanas e 200 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada semanas, cada um por infusão intravenosa. Em uma modalidade, 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas e 300 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, cada um por infusão intravenosa. Em uma modalidade, 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas e 400 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente,

uma vez a cada três semanas, cada um por infusão intravenosa. Em outra modalidade, 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas e 500 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, cada um por infusão intravenosa. Em outra modalidade, 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas e 600 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, cada um por infusão intravenosa. Em outra modalidade, 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas e 700 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6 são administrados no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, cada um por infusão intravenosa.

[00167] Os cânceres que podem ser tratados por meio dos anticorpos, composições e métodos da invenção incluem, mas sem limitação: Cardíaco: sarcoma (angiosarcoma, fibrosarcoma, rabdomiosarcoma, liposarcoma), mixoma, rabdomioma, fibroma, lipoma e teratoma; Pulmão: carcinoma broncogênico (célula escamosa, célula pequena não diferenciada, célula grande não diferenciada, adenocarcinoma), carcinoma alveolar (bronquiolar), adenoma brônquico, sarcoma, linfoma, hamartoma condromatoso, mesotelioma; Gastrointestinal: esôfago (carcinoma de células escamosas, adenocarcinoma, leiomiosarcoma, linfoma), estômago (carcinoma, linfoma, leiomiosarcoma), pâncreas (adenocarcinoma ductal, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, tumores carcinoides, vipoma), intestino delgado (adenocarcinoma, linfoma, tumores carcinoides, sarcoma de Karposi, leiomioma, hemangioma,

lipoma, neurofibroma, fibroma), intestino grosso (adenocarcinoma, adenoma tubular, adenoma viloso, hamartoma, leiomioma) colorretal; Trato geniturinário: rim (adenocarcinoma, tumor de Wilm[nefroblastoma], linfoma, leucemia), bexiga e uretra (carcinoma de células escamosas, carcinoma de células transicionais, adenocarcinoma), próstata (adenocarcinoma, sarcoma), testículo (seminoma, teratoma, carcinoma embrionário, teratocarcinoma, coriocarcinoma, sarcoma, carcinoma de células intersticiais, fibroma, fibroadenoma, tumores adenomatoide, lipoma); fígado: hepatoma (carcinoma hepatocelular), colangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiosarcoma, adenoma hepatocelular, hemangioma; osso: sarcoma osteogênico (osteosarcoma), fibrosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, condrosarcoma, sarcoma de Ewing, linfoma maligno (sarcoma de células reticulares), mieloma múltiplo, cordoma de tumor de células gigantes maligno, osteocronfroma (exostoses osteocartilaginosos), condroma benigno, condroblastoma, condromixofibroma, osteoma osteoide e tumores de células gigantes; sistema nervoso: crânio (osteoma, hemangioma, granuloma, xantoma, doença de Paget), meninges (meningioma, meningiosarcoma, gliomatose), cérebro (astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma [pinealoma], glioblastoma multiforme, oligodendroglioma, schwannoma, retinoblastoma, tumores congênitos), neurofibroma da medula espinhal, meningioma, glioma, sarcoma); Ginecológico: útero (carcinoma endometrial), colo do útero (carcinoma cervical, displasia cervical pré-tumor), ovários (carcinoma ovariano [cistadenocarcinoma seroso, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinoma não classificado], tumores de célula granulosa-tecal, tumores de células de Sertoli- Leydig, disgerminoma, teratoma maligno), vulva (carcinoma de células escamosas, carcinoma intraepitelial, adenocarcinoma, fibrosarcoma, melanoma), vagina (carcinoma de células claras, carcinoma de células escamosas, sarcoma botrioide (rabdomiosarcoma embrionário), tubos falopianos (carcinoma), mama; Hematológico: sangue (leucemia mieloide [aguda e crônica], leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crônica, doenças mieloproliferativas, mieloma múltiplo, síndrome mielodisplásica); tumores hematopoiéticos da linhagem linfoide, incluem leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfocítica crônica, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkins, linfoma não Hodgkins, linfoma de células pilosas, linfoma de células do manto, mieloma e linfoma de Burkett; tumores hematopoéticos de linhagem mieloide, incluindo leucemias mielogênicas aguda e crônica, síndrome mielodisplásica e leucemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrosarcoma e rabdomiosarcoma; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astrocitoma, neuroblastoma, glioma e schwannomas; e outros tumores, incluindo melanoma, câncer de pele (não melanoma), mesotelioma (células), seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xeroderma pigmentoso, queratoacantoma, câncer folicular de tireoide e sarcoma Kaposi. Em uma modalidade, os cânceres antecedentes são avançados, irresecáveis ou metastáticos. Em uma modalidade, os pacientes são refratários à terapia anti- PD-1 ou anti-PD-L1.

[00168] Em uma modalidade, cânceres que podem ser tratados por meio dos anticorpos, composições e métodos da invenção incluem, mas sem limitação: câncer de pulmão, câncer pancreático, câncer de cólon, câncer colorretal, leucemias mieloides, leucemia mielogênica aguda, leucemia mielogênica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, câncer de tireoide, síndrome mielodisplásica, carcinoma de bexiga, carcinoma epidermoide, melanoma, câncer de mama, câncer de próstata, cânceres de cabeça e pescoço, câncer de ovário, cânceres no cérebro, cânceres de origem mesenquimal, sarcomas, tetracarcinomas, neuroblastomas, carcinomas renais, hepatomas, linfoma não Hodgkin, mieloma múltiplo e carcinoma de tireoide anaplásico.

[00169] Em outra modalidade, cânceres que podem ser tratados por meio dos anticorpos, composições e métodos da invenção incluem, mas sem limitação: câncer de células escamosas de cabeça e pescoço, câncer gástrico, adenocarcinoma do estômago e/ou junção gastro-esofágico, câncer de célula renal, câncer de tubo falopiano, câncer endometrial, câncer cervical e câncer colorretal. Em uma modalidade, o câncer colorretal, câncer gástrico, adenocarcinoma do estômago e/ou junção gastro-esofágico (GEJ), ou câncer endometrial é instabilidade de microssatélites não alta (non-MSI-H) ou reparo incompatível proficiente (pMMR). Em uma modalidade, o paciente com câncer de células escamosas de cabeça e pescoço é refratário ao tratamento com anti- PD-1 ou anti-PD-L1. Em uma modalidade, o câncer colorretal é irresecável ou metastático (Estágio IV).

[00170] Em outra modalidade, cânceres que podem ser tratados por meio dos anticorpos, composições e métodos da invenção incluem malignidades hematológicas, mas sem limitação: linfoma Hodgkin clássico (cHL), linfoma de grandes células B difuso (DLBCL), DLBCL transformado, linfoma da zona cinzenta, linfoma double hit, linfoma primário de células B do mediastino (PMBCL) ou linfoma não Hodgkin indolente (iNHL) (por exemplo, linfoma folicular, linfoma da zona marginal, linfoma do tecido linfoide associado à mucosa ou linfoma linfocítico de pequenas células). Em uma modalidade, o paciente com linfoma Hodgkin é refratário ao tratamento com anti-D-1 ou anti- PD-L1.

[00171] Em uma modalidade adicional, cânceres que podem ser tratados por meio dos anticorpos, composições e métodos da invenção incluem cânceres selecionados a partir do grupo que consiste em: carcinoma de célula renal, carcinoma urotelial da pelvis renal, ureter, bexiga ou uretra, melanoma, gástrico, adenocarcinoma GEJ câncer de pulmão de célula não pequena e câncer de bexiga. Em uma modalidade, os cânceres antecedentes são avançados, irresecáveis ou metastáticos.

[00172] Em uma modalidade, o câncer de pulmão de célula não pequena é avançado ou de Estágio IV. Em outra modalidade, o melanoma é avançado ou Estágio III. Em uma modalidade, os pacientes são refratários à terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1.

[00173] Em uma modalidade, um produto coformulado com pembrolizumabe ou uma variante de pembrolizumabe e 31C6 ou uma variante de 31C6 é utilizado. Em uma modalidade adicional, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 200 mg de 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado. Em outra modalidade, um produto coformulado com 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe e 700 mg de 31C6 ou de uma variante de 31C6 é utilizado.

[00174] Em uma modalidade adicional, o câncer é câncer de pulmão de célula não pequena, e o paciente carece de receptor de fator de crescimento epidérmico (EGFR) ativador de tumor, ou mutações de isoforma B de fibrosarcoma rapidamente acelerado (B-Raf) e carece de quinase de linfoma anaplásico (ALK) ou rearranjos de gene de c-ros oncogene 1 (ROS1). Em uma modalidade adicional, o câncer é câncer de pulmão de célula não pequena, e o tumor tem uma histologia escamosa.

[00175] A terapia de combinação também pode compreender um ou mais agentes terapêuticos adicionais. O agente terapêutico adicional pode ser, por exemplo, um quimioterápico, um agente bioterapêutico, um agente imunogênico (por exemplo, células cancerosas atenuadas, antígenos tumorais,

células de apresentação de antígeno, tais como células dendríticas pulsadas com antígeno derivado de tumor ou ácidos nucleicos, citocinas de estimulação imunológica (por exemplo, IL-2, IFNα2, GM-CSF), e células transfectadas com genes que codificam citocinas de estimulação imunológica, tais como, mas sem limitação, GM-CSF). A dosagem específica e cronograma de dosagem do agente terapêutico adicional podem variar de modo adicional, e a dose ideal, cronograma de dosagem e via de administração serão determinados com base no agente terapêutico específico que está sendo utilizado.

[00176] Exemplos de agentes quimioterápicos incluem agentes alquilantes, tais como tiotepa e ciclofosfamida; alquil sulfonatos, tais como bussulfano, improssulfano e pipossulfano; aziridinas, tais como benzodopa, carboquona, meturedopa e uredopa; etileniminas e metilamelaminas incluindo altretamina, trietilenomelamina, trietilenofosforamida, trietilenotiofosforamida e trimetilolomelamina; acetogeninas (especialmente bulatacina e bulatacinona); uma camptotecina (incluindo o topotecano análogo sintético); briostatina; calistatina; CC-1065 (incluindo seus análogos sintéticos adozelesina, carzelesina e bizelesina); criptoficinas (particularmente criptoficina 1 e criptoficina 8); dolastatina; duocarmicina (incluindo os análogos sintéticos, KW-2189 e CBI-TMI); eleuterobina; pancratistatina; uma sarcodictina; espongistatina; mostardas nitrogenadas, tais como clorambucil, clornafazina, colofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, cloridrato de óxido de mecloretamina, melfalano, novembichina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, mostarda de uracila; nitrosureias, tais como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, ranimustina; antibióticos, tais como os antibióticos enediina (por exemplo, caliqueamicina, especialmente caliqueamicina gama 1I e caliqueamicina phiI1, Vide, por exemplo, Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33:183 a 186 (1994); dinemicina,

incluindo dinemicina A; bisfosfonatos, tais como clodronato; uma esperamicina; bem como cromóforo neocarzinostatina e cromomoforos de antibiótico de enediina de cromoproteína relacionados), aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, carabicina, caminomicina, carzinofilina, cromomicinas, dactinomicina, daunorubicina, detorubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorubicina (incluindo morfolino- doxorubicina, cianomorfolino-doxorubicina, 2-pirrolino-doxorubicina e deoxidoxorubicina), epirubicina, esorubicina, idarubicina, marcelomicina, mitomicinas, tais como mitomicina C, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, potfiromicina, puromicina, quelamicina, rodorubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorubicina; antimetabólitos, tais como metotrexato e 5-fluorouracil (5-FU); análogos de ácido fólico, tais como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; análogos de purina, tais como fludarabina, 6- mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; análogos de pirimidina, tais como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, dideoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina; andrógenos, tais como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; antiadrenais, tais como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; repositor de ácido fólico, tal como ácido folínico; aceglatona; aldofosfamida glicosídeo; ácido aminolevulínico; eniluracil; ansacrina; bestrabucil; bisantreno; edatraxato; defofamina; demecolcina; diaziquona; elformitina; acetato de eliptínio; uma epotilona; etoglúcido; nitrato de gálio; hidroxiureia; lentinano; lonidamina; maitansinoides, tais como maitansina e ansamitocinas; mitoguazona; mitoxantrona; mopidamol; nitracrina; pentostatina; fenamet; pirarubicina; losoxantrona; ácido podofilínico; 2-etilidrazida; procarbazina; razoxane; rizoxina; sizofuran; espirogermânio; ácido tenuazônico; triaziquona;

2, 2′,2″-triclorotrietilamina; tricotecenos(especialmente T-2 toxina, verracurina A, roridina A e anguidina); uretan; vindesina; dacarbazina; manomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobroman; gacitosina; arabinosídeo (“Ara-C”); ciclofosfamida; tiotepa; taxoides, por exemplo, paclitaxel e doxetaxel; clorambucil; gencitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; análogos de platina, tais como cisplatina e carboplatina; vimblastina; platina; etoposídeo (VP-16); ifosfamida; mitoxantrona; vincristina; vinorelbina; novantrona; teniposídeo; edatrexato; daunomicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; CPT-11; inibidor de topoisomerase RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO); retinoides, tais como ácido retinoico; capecitabina; e sais, ácidos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um citado acima. São também incluídos agentes anti-hormonais que agem para regular ou inibir ação hormonal em tumores, tais como antiestrógenos e moduladores seletivos do receptor de estrogênio (SERMs), incluindo, por exemplo, tamoxifeno, raloxifeno, droloxifeno, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, LY117018, onapristona e toremifeno (Fareston); inibidores de aromatase que inibem a enzima aromatase, que regula a produção de estrogênio nas glândulas adrenais, tais como, por exemplo, 4(5)- imidazois, aminoglutetimida, acetato de megestrol, exemestano, formestano, fadrozol, vorozol, letrozol e anastrozol; e antiandrógenos, tais como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolide e goserelina; e sais, ácidos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um citado acima.

[00177] Cada agente terapêutico em uma terapia de combinação da invenção pode ser administrado sozinho ou em um medicamento (também denominado, na presente invenção, uma composição farmacêutica) que compreende o agente terapêutico e um ou mais carreadores, excipientes e diluentes farmaceuticamente aceitáveis, de acordo com a prática farmacêutica padrão.

[00178] Cada agente terapêutico em uma terapia de combinação da invenção pode ser administrado de maneira simultânea (isto é, no mesmo medicamento), concomitante (isto é, em medicamentos separados administrados um logo após o outro em qualquer ordem) ou sequencial em qualquer ordem. A administração sequencial é particularmente útil quando os agentes terapêuticos na terapia de combinação estão em diferentes formas de dosagem (um agente é um comprimido ou cápsula e outro agente é um líquido estéril) e/ou são administrados em diferentes cronogramas de dosagem, por exemplo, um quimioterápico que é administrado pelo menos uma vez ao dia e um bioterapêutico que é administrado com menos frequência, tal como uma vez por semana, uma vez a cada duas semanas ou uma vez a cada três semanas.

[00179] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-TIGIT é administrado antes de administração do anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1, enquanto, em outras modalidades, o anticorpo anti-TIGIT é administrado após a administração do anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1. Em outra modalidade, o anticorpo anti-TIGIT é administrado de modo concomitante com o anticorpo anti-PD-15 ou anticorpo anti-PD-L1.

[00180] Em algumas modalidades, pelo menos um dos agentes terapêuticos na terapia de combinação é administrado utilizando o mesmo regime de dosagem (dose, frequência e duração de tratamento) que é tipicamente empregado quando o agente é utilizado como monoterapia para tratar o mesmo câncer. Em outras modalidades, o paciente recebe uma quantidade total menor de pelo menos um dos agentes terapêuticos na terapia de combinação do que quando o agente é utilizado como monoterapia, por exemplo, doses menores, doses menos frequentes e/ou duração de tratamento mais curta.

[00181] Cada agente terapêutico de pequena molécula em uma terapia de combinação da invenção pode ser administrado por via oral ou parenteral, incluindo as vias de administração intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutânea, retal, tópica e transdérmica. Uma terapia de combinação da invenção pode ser utilizada antes ou após cirurgia para remoção de um tumor e pode ser utilizada antes, durante ou após a terapia por radiação.

[00182] Em algumas modalidades, uma terapia de combinação da invenção é administrada em um paciente que não foi previamente tratado com um agente bioterapêutico ou quimioterápico, isto é, tratamento naive. Em outras modalidades, a terapia de combinação é administrada em um paciente que não alcançou uma resposta sustentada após terapia anterior com um agente bioterapêutico ou quimioterápico, isto é, é com experiência em tratamento.

[00183] Uma terapia de combinação da invenção é tipicamente utilizada para tratar um tumor que é grande o bastante para ser encontrado por palpação ou por técnicas de imagem bem conhecidas no estado da técnica, tais como MRI, ultrassom ou CAT. Uma terapia de combinação da invenção pode ser administrada em um paciente humano que tem um câncer que testa positivo para uma ou ambas PD-L1 e PD-L2, e testa positivo, de modo preferencial, para expressão de PD-L1. Em algumas modalidades preferenciais, a expressão de PD-L1 é detectada utilizando um anticorpo anti-PD-L1 humano de diagnóstico, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, em um ensaio IHC em uma seção de tecido FFPE ou congelado de uma amostra tumoral removida do paciente. Tipicamente, o médico do paciente prescreverá um teste de diagnóstico para determinar a expressão de PD-L1 em uma amostra de tecido tumoral removida do paciente antes da iniciação do tratamento com o anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1 e anticorpo anti-TIGIT, mas sabe- se que o médico pode prescrever o primeiro teste ou testes subsequentes de diagnóstico a qualquer momento após a iniciação do tratamento, tal como, por exemplo, após a conclusão de um ciclo de tratamento. Em uma modalidade, a expressão de PD-L1 é medida pelo ensaio PD-L1 IHC 22C3 pharmDx. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Densidade Inflamatória Mononuclear para expressão de PD-L1 ≥2. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Densidade Inflamatória Mononuclear para expressão de PD-L1 ≥3. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Densidade Inflamatória Mononuclear para expressão de PD-L1 ≥4. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Proporção de Tumor para expressão de PD-L1 ≥1%. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Proporção de Tumor para expressão de PD-L1 20≥10%. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Proporção de Tumor para expressão de PD-L1 ≥20%. Em outra modalidade, o paciente tem um Índice de Proporção de Tumor para expressão de PD-L1 ≥30%. Em uma modalidade adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD-L1 ≥1%. Em uma modalidade adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD-L1 entre 1 e 20%. Em uma modalidade adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD-L1 ≥ 2%. Em uma modalidade adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD-L1 ≥ 5%. Em uma modalidade ainda adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD-L1 ≥ 10%. Em uma modalidade adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD-L1 ≥ 15%. Em uma modalidade ainda adicional, o paciente tem um Índice Positivo Combinado para expressão de PD- L1 ≥ 20%.

[00184] Em uma modalidade preferencial da invenção, o anticorpo anti-

PD-1 na terapia de combinação é nivolumabe, que é administrado por via intravenosa a uma dose selecionada a partir do grupo que consiste em: 1 mg/kg Q2W, 2 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, 5 mg/kg Q2W, 10 mg Q2W, 1 mg/kg Q3W, 2 mg/kg Q3W, 3 mg/kg Q3W, 5 mg/kg Q3W e 10 mg/kg Q3W.

[00185] Em outra modalidade preferencial da invenção, o anticorpo anti- PD-1 na terapia de combinação é pembrolizumabe, ou uma variante de pembrolizumabe, que é administrada em um medicamento líquido a uma dose selecionada a partir do grupo que consiste em 1 mg/kg Q2W, 2 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, 5 mg/kg Q2W, 10 mg/kg Q2W, 1 mg/kg Q3W, 2 mg/kg Q3W, 3 mg/kg Q3W, 5 mg/kg Q3W, 10 mg/kg Q3W e equivalentes de dose fixa de qualquer uma dentre essas doses, isto é, tais como 200 mg Q3W. Em algumas modalidades, pembrolizumabe é fornecido como um medicamento líquido que compreende 25 mg/mL de pembrolizumabe, 7% (p/v) de sacarose, 0,02% (p/v) de polisorbato 80 em 10 mM de tampão histidina pH 5,5. Em outras modalidades, pembrolizumabe é fornecido como um medicamento líquido que compreende cerca de 125 a cerca de 200 mg/mL de pembrolizumabe, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo; cerca de 10 mM de tampão histidina; cerca de 10 mM de L-metionina, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma; cerca de 7% (p/v) de sacarose; e cerca de 0,02% (p/v) de polisorbato 80.

[00186] Em algumas modalidades da invenção, o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado ao paciente uma vez a cada quatro ou seis semanas durante 12 semanas ou mais. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado ao paciente uma vez a cada seis semanas durante 16 semanas ou mais, 18 semanas ou mais, 20 semanas ou mais, 24 semanas ou mais, 28 semanas ou mais, 30 semanas ou mais, 32 semanas ou mais, 36 semanas ou mais, 40 semanas ou mais, 42 semanas ou mais, 44 semanas ou mais, 48 semanas ou mais, 52 semanas ou mais, 54 semanas ou mais, 56 semanas ou mais, 60 semanas ou mais, 64 semanas ou mais, 66 semanas ou mais, 68 semanas ou mais, 72 semanas ou mais, 76 semanas ou mais, 78 semanas ou mais, 80 semanas ou mais, 84 semanas ou mais, 88 semanas ou mais, ou 90 semanas ou mais. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, é administrado a uma dose de 400 mg a cada seis semanas.

[00187] Em algumas modalidades, a dose selecionada de pembrolizumabe é administrada por infusão IV. Em uma modalidade, a dose selecionada de pembrolizumabe é administrada por infusão IV ao longo de um período de tempo entre 25 e 40 minutos, ou cerca de 30 minutos.

[00188] Em algumas modalidades, o paciente é tratado com a terapia de combinação durante pelo menos 24 semanas, por exemplo, oito ciclos de 3 semanas. Em algumas modalidades, o tratamento com a terapia de combinação continua até o paciente exibir evidência de PD ou uma CR.

[00189] Excipientes farmaceuticamente aceitáveis da presente divulgação incluem, por exemplo, solventes, agentes de volume, agentes tampão, agentes de ajuste de tonicidade e conservantes (Vide, por exemplo, Pramanick et al., Pharma Times, 45:65 a 77, 2013). Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas podem compreender um excipiente que funciona como um ou mais dentre um solvente, um agente de volume, um agente tampão e um agente de ajuste de tonicidade (por exemplo, cloreto de sódio em solução salina pode servir tanto como um veículo aquoso quanto um agente de ajuste de tonicidade). As composições farmacêuticas da presente divulgação são adequadas para administração parenteral.

[00190] Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas compreendem um veículo aquoso como um solvente. Os veículos adequados incluem, por exemplo, água estéril, solução salina, solução salina tamponada com fosfato e solução de Ringer. Em algumas modalidades, a composição é isotônica.

[00191] As composições farmacêuticas podem compreender um agente de volume. Os agentes de volume são particularmente úteis quando a composição farmacêutica deve ser liofilizada antes da administração. Em algumas modalidades, o agente de volume é um protetor que auxilia na estabilização e prevenção de degradação dos agentes ativos durante congelamento ou secagem por aspersão e/ou durante armazenamento. Os agentes de volume adequados são açúcares (mono, di e polissacarídeos), tais como sacarose, lactose, trealose, manitol, sorbital, glicose e rafinose.

[00192] As composições farmacêuticas podem compreender um agente tampão. Os agentes tampão controlam pH para inibir a degradação do agente ativo durante processamento, armazenamento e, opcionalmente, reconstituição. Os tampões adequados incluem, por exemplo, sais que compreendem acetato, citrato, fosfato ou sulfato. Outros tampões adequados incluem, por exemplo, aminoácidos, tais como arginina, glicina, histidina e lisina. O agente tampão pode compreender, ainda, ácido clorídrico ou hidróxido de sódio. Em algumas modalidades, o agente tampão mantém o pH da composição em uma faixa de 4 a 9. Em algumas modalidades, o pH é maior do que (limite inferior) 4, 5, 6, 7 ou 8. Em algumas modalidades, o pH é menor do que (limite superior) 9, 8, 7, 6 ou 5. Ou seja, o pH está na faixa de cerca de 4 a 9 em que o limite inferior é menor do que o limite superior.

[00193] As composições farmacêuticas podem compreender um agente de ajuste de tonicidade. Os agentes de ajuste tonicidade adequados incluem, por exemplo, dextrose, glicerol, cloreto de sódio, glicerina e manitol.

[00194] As composições farmacêuticas podem compreender um conservante. Os conservantes adequados incluem, por exemplo, antioxidantes e agentes antimicrobianos. Entretanto, em modalidades preferenciais, a composição farmacêutica é preparada sob condições estéreis e está em um único recipiente de uso e, desse modo, não necessita de inclusão de um conservante.

[00195] Em algumas modalidades, um medicamento que compreende um anticorpo anti-PD-1 como o antagonista de PD-1 pode ser fornecido como uma formulação líquida ou preparado reconstituindo-se um pó liofilizado com água estéril para injeção antes do uso. O WO 2012/135408 descreve a preparação de medicamentos líquidos e liofilizados que compreendem pembrolizumabe que são adequados para uso na presente invenção. Em algumas modalidades, um medicamento que compreende pembrolizumabe é fornecido em um frasco de vidro que contém cerca de 100 mg de pembrolizumabe em 4 mL de solução. Cada 1 mL de solução contém 25 mg de pembrolizumabe e é formulada em: L- histidina (1,55 mg), polisorbato 80 (0,2 mg), sacarose (70 mg) e Água para Injeção, USP. A solução exige diluição para infusão IV.

[00196] Em algumas modalidades, um medicamento que compreende o anticorpo anti-TIGIT pode ser fornecido como uma formulação líquida ou preparado reconstituindo-se um pó liofilizado com água estéril para injeção antes do uso. Em uma modalidade, a formulação líquida compreende cerca de 10 a 100 mg/mL de anticorpo anti-TIGIT; cerca de 7% (p/v) de sacarose; cerca de 0,02% (p/v) de polisorbato 80; cerca de 10 mM de tampão L-histidina a cerca de pH 5,8 a 6,0; e cerca de 10 mM a cerca de 15 mM de L-metionina.

[00197] Os medicamentos descritos na presente invenção podem ser fornecidos como um kit que compreende um primeiro recipiente e um segundo recipiente e uma bula. O primeiro recipiente contém pelo menos uma dose de um medicamento que compreende um antagonista de PD-1, o segundo recipiente contém 2,1 a 700 mg de um medicamento que compreende o anticorpo anti-TIGIT, e a bula, ou rótulo, que compreende instruções para tratar um paciente com câncer com o uso dos medicamentos. O primeiro e o segundo recipientes podem ser compreendidos do mesmo formato ou formato diferente (por exemplo, frascos, seringas e ampolas) e/ou material (por exemplo, plástico ou vidro). O kit pode compreender, ainda, outros materiais que podem ser úteis na administração dos medicamentos, tais como diluentes, filtros, bolsas e linhas IV, agulhas e seringas. Em algumas modalidades preferenciais do kit, o antagonista de PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 e as instruções estabelecem que os medicamentos se destinam para uso no tratamento de um paciente com câncer que testa positivo para expressão de PD-L1 por meio de um ensaio IHC.

[00198] Esses e outros aspectos da invenção, incluindo as modalidades específicas exemplificativas listadas abaixo, serão evidentes a partir dos ensinamentos contidos na presente invenção.

MODALIDADES ESPECÍFICAS EXEMPLIFICATIVAS DA INVENÇÃO

1. Um método para tratar câncer em um paciente compreendendo administrar ao paciente 2,1 mg a 700 mg de um anticorpo anti-TIGIT compreendendo uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia leve compreende CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e a cadeia pesada compreende CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31.

2. O método da modalidade 1, em que o anticorpo anti-TIGIT é administrado por infusão intravenosa.

3. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 2,1 mg do anticorpo anti-TIGIT.

4. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 7 mg do anticorpo anti-TIGIT.

5. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 21 mg do anticorpo anti-TIGIT.

6. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 70 mg do anticorpo anti-TIGIT.

7. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 200 mg do anticorpo anti-TIGIT.

8. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 210 mg do anticorpo anti-TIGIT.

9. O método da modalidade 1, em que são administrados ao paciente 700 mg do anticorpo anti-TIGIT.

10. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 9, em que é administrado ao paciente o anticorpo anti-TIGIT no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

11. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 10, em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

12. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 11, em que o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22.

13. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 10, em que o anticorpo anti-TIGIT é uma variante de 31C6.

14. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 13, em que o anticorpo anti-TIGIT é coadministrado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1, ou um fragmento de ligação ao antígeno dos mesmos.

15. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 13, em que o anticorpo anti-TIGIT é coformulado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1, ou um fragmento de ligação ao antígeno dos mesmos.

16. O método das modalidades 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, se liga especificamente a PD-1 humano e bloqueia a ligação de PD-L1 humano a PD-1 humano.

17. O método da modalidade 16, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, também bloqueia a ligação de PD-L2 humana a PD-1 humano.

18. O método da modalidade 17, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8.

19. O método da modalidade 18, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4.

20. O método da modalidade 19, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:5.

21. O método da modalidade 17, em que o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumabe.

22. O método da modalidade 17, em que o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de pembrolizumabe.

23. O método da modalidade 14, em que o anticorpo anti-PD-1 é nivolumabe.

24. O método da modalidade 14, em que o anticorpo anti-PD-L1 é atezolizumabe, durvalumabe ou avelumabe.

25. O método de qualquer uma das modalidades 18 a 24, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

26. O método de qualquer uma das modalidades 18 a 24, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a uma dose de 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas.

27. O método das modalidades 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3; e o anticorpo anti-TIGIT é um anticorpo anti-TIGIT humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28.

28. O método das modalidades 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:

24.

29. O método das modalidades 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO: 5; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 22.

30. O método de qualquer uma das modalidades 27-29, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, e o anticorpo anti- TIGIT é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

31. O método de qualquer uma das modalidades 27-29, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas, e o anticorpo anti- TIGIT é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 uma vez a cada três semanas.

32. O método de qualquer uma das modalidades 27-29, em que 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 200 mg de anticorpo anti-TIGIT.

33. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 32, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em: NSCLC, câncer colorretal, câncer gástrico, câncer de mama, câncer cervical, ovário, epitelial, tubo falopiano ou carcinoma peritoneal primário.

34. O método da modalidade 33, em que o câncer é NSCLC.

35. O método da modalidade 34, o método compreende, ainda, administrar uma combinação de (i) carboplatina e pemetrexede ou (ii) carboplatina e paclitaxel.

36. O método de qualquer uma das modalidades 1 a 35, em que o indivíduo não foi previamente tratado com terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 ou é confirmado progressivo enquanto recebia terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 anterior.

37. Uma composição farmacêutica que compreende 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 200 mg de 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

38. Uso de um anticorpo anti-TIGIT compreendendo uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia leve compreende CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e a cadeia pesada compreende CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31 na fabricação de um medicamento para tratar câncer em um indivíduo/paciente.

39. O uso da modalidade 38, em que o anticorpo anti-TIGIT é formulado para e/ou administrado por infusão intravenosa.

40. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente 2,1 mg do anticorpo anti-TIGIT.

41. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente 7 mg do anticorpo anti-TIGIT.

42. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente 21 mg do anticorpo anti-TIGIT.

43. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente 70 mg do anticorpo anti-TIGIT.

44. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente 200 mg do anticorpo anti-TIGIT.

45. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente 210 mg do anticorpo anti-TIGIT.

46. O uso da modalidade 38 ou 39, em que são administrados ao paciente

700 mg do anticorpo anti-TIGIT.

47. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 46 em que é administrado ao paciente o anticorpo anti-TIGIT no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

48. O uso de qualquer uma das modalidades 1 a 10, em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

49. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 48, em que o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQID NO:23 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22.

50. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 47, em que o anticorpo anti-TIGIT é uma variante de 31C6.

51. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 50, em que o anticorpo anti-TIGIT é coadministrado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD- L1, ou um fragmento de ligação ao antígeno dos mesmos.

52. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 50, em que o anticorpo anti-TIGIT é coformulado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1, ou um fragmento de ligação ao antígeno dos mesmos.

53. O uso das modalidades 51 ou 52, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, se liga especificamente a PD-1 humano e bloqueia a ligação de PD-L1 humano a PD-1 humano.

54. O uso da modalidade 53, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, também bloqueia a ligação de PD-L2 humana a PD-1 humano.

55. O uso da modalidade 54, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8.

56. O uso da modalidade 55, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4.

57. O uso da modalidade 56, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:5.

58. O uso de qualquer uma das modalidades 51 a 54, em que o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumabe.

59. O uso de qualquer uma das modalidades 51 a 54, em que o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de pembrolizumabe.

60. O uso da modalidade 51 ou 52, em que o anticorpo anti-PD-1 é nivolumabe.

61. O método da modalidade 14, em que o anticorpo anti-PD-L1 é atezolizumabe, durvalumabe ou avelumabe.

62. O uso de qualquer uma das modalidades 55-58, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas.

63. O uso de qualquer uma das modalidades 55-58, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas.

64. O uso das modalidades 51 ou 52, em que o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3; e o anticorpo anti-TIGIT é um anticorpo anti-TIGIT humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28.

65. O uso das modalidades 51 ou 52, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO:

24.

66. O uso das modalidades 51 ou 52, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO: 5; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 22.

67. O uso de qualquer uma das modalidades 64 a 66, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada três semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então,

posteriormente, uma vez a cada três semanas.

68. O uso de qualquer uma das modalidades 64 a 66, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, posteriormente, uma vez a cada seis semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 uma vez a cada três semanas.

69. O uso de qualquer uma das modalidades 64 a 66, em que 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 200 mg de anticorpo anti-TIGIT.

70. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 69, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em: NSCLC, câncer colorretal, câncer gástrico, câncer de mama, câncer cervical, câncer de ovário, câncer epitelial, câncer no tubo falopiano ou carcinoma peritoneal primário.

71. O uso da modalidade 70, em que o câncer é NSCLC.

72. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 71, compreendendo, ainda, uso de uma combinação de (i) carboplatina e pemetrexede ou (ii) carboplatina e paclitaxel.

73. O uso de qualquer uma das modalidades 38 a 72, em que o indivíduo não foi previamente tratado com terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 ou é confirmado progressivo enquanto recebia terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 anterior.

MÉTODOS GERAIS

[00199] Os métodos padrão em biologia molecular são descritos em Sambrook, Fritsch and Maniatis (1982 & 1989 2a Edição, 2001 3a Edição) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook and Russell (2001) Molecular Cloning, 3a ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Wu (1993) Recombinant DNA, Vol. 217, Academic Press, San Diego, CA). Os métodos padrão também aparecem em Ausbel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vols.1 a 4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY, que descreve clonagem em células bacterianas e mutagênese de DNA (Vol. 1), clonagem em células de mamífero e levedura (Vol. 2), expressão de proteína e glicoconjugados (Vol. 3) e bioinformática (Vol. 4).

[00200] Métodos para purificação de proteína incluindo imunoprecipitação, cromatografia, eletroforese, centrifugação e cristalização são descritos (Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York). Análise química, modificação química, modificação pós-translacional, produção de proteínas de fusão, glicosilação de proteínas são descritos (Vide, por exemplo, Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 2, John Wiley and Sons, Inc., New York; Ausubel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp. 16.0.5 a 16.22.17; Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis, MO; pp. 45 a 89; Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp. 384 a 391). Production, purification, and fragmentation of polyclonal and monoclonal antibodies are described (Coligan, et al. (2001) Current Protcols in Immunology, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow and Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow and Lane, supra). Técnicas padrão para caracterizar interações ligante/receptor estão disponíveis (Vide, por exemplo, Coligan, et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 4, John Wiley, Inc., New York). Anticorpos monoclonais, policlonais e humanizados podem ser preparados (Vide, por exemplo, Sheperd and Dean (eds.) (2000) Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY; Kontermann and Dubel (eds.) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow and Lane (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold

Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, pp. 139 a 243; Carpenter, et al. (2000) J. Immunol. 165:6.205; He, et al. (1998) J. Immunol. 160:1.029; Tang et al. (1999) J. Biol. Chem. 274:27.371 a 27.378; Baca et al. (1997) J. Biol. Chem. 272:10.678 a 10.684; Chothia et al. (1989) Nature 342:877 a 883; Foote and Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487 a 499; Patente no U.S.

6.329.511).

[00201] Uma alternativa à humanização é utilizar bibliotecas de anticorpo humano exibidas em fago ou bibliotecas de anticorpo humano em camundongos transgênicos (Vaughan et al. (1996) Nature Biotechnol. 14:309 a 314; Barbas (1995) Nature Medicine 1:837 a 839; Mendez et al. (1997) Nature Genetics 15:146 a 156; Hoogenboom and Chames (2000) Immunol. Today 21:371 a 377; Barbas et al. (2001) Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York; Kay et al. (1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA; de Bruin et al. (1999) Nature Biotechnol. 17:397 a 399).

[00202] A purificação de antígeno não é necessária para a geração de anticorpos. Animais podem ser imunizados com células que portam o antígeno de interesse. Esplenócitos podem ser, então, isolados dos animais imunizados, e os esplenócitos podem se fundir com uma linhagem de célula de mieloma para produzir um hibridoma (Vide, por exemplo, Meyaard et al. (1997) Immunity 7:283 a 290; Wright et al. (2000) Immunity 13:233 a 242; Preston et al., supra; Kaithamana et al. (1999) J. Immunol. 163:5.157 a 5.164).

[00203] Os anticorpos podem ser conjugados, por exemplo, com pequenas moléculas de fármaco, enzimas, lipossomas, polietilenoglicol (PEG). Os anticorpos são úteis para fins terapêuticos, de diagnóstico, kit ou para outras finalidades, e incluem anticorpos acoplados, por exemplo, a corantes, radioisótopos, enzimas ou metais, por exemplo, ouro coloidal (Vide, por exemplo, Le Doussal et al. (1991) J. Immunol. 146:169 a 175; Gibellini et al., (1998) J. Immunol. 160:3.891 a 3.898; Hsing and Bishop (1999) J. Immunol. 162:2.804 a 2.811; Everts et al. (2002) J. Immunol. 168:883 a 889).

[00204] Métodos para citometria de fluxo, incluindo separador celular ativado por fluorescência (FACS), estão disponíveis (Vide, por exemplo, Owens, et al. (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 2a ed.; Wiley- Liss,Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ). Reagentes fluorescentes adequados para modificar ácidos nucleicos, incluindo iniciadores e sondas de ácido nucleico, polipeptídeos e anticorpos, para uso, por exemplo, como reagentes de diagnóstico, estão disponíveis (Molecular Probesy (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO).

[00205] Métodos padrão de histologia do sistema imunológico são descritos (Vide, por exemplo, Muller- Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY; Hiatt, et al. (2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA; Louis, et al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY).

[00206] Pacotes de software e bancos de dados para determinar, por exemplo, fragmentos antigênicos, sequências líder, enovelamento de proteína, domínios funcionais, sítios de glicosilação e alinhamentos de sequência, estão disponíveis (Vide, por exemplo, GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, et al. (2000) Bioinformatics 16: 741 a 742; Menne, et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16:741 a 742; Wren, et al. (2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68:177 a 181; von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133:17 a 21; von Heijne (1986)

Nucleic Acids Res. 14:4.683 a 4.690).

EXEMPLOS Exemplo 1: Estudos Clínicos de anticorpo anti-TIGIT em tumores sólidos avançados

[00207] Este estudo foi um estudo multissítio, aberto, de dose escalada de monoterapia com anticorpo anti-TIGIT 31C6 (Parte A, Braço 1) e 31C6 em combinação com pembrolizumabe (Parte A, Braço 2) Parte B do estudo é uma fase de confirmação de dose para estimar a dose recomendada de Fase 2 para o anticorpo 31C6 quando utilizado como monoterapia e em combinação com pembrolizumabe. A atividade antitumoral do anticorpo 31C6, quando utilizado como monoterapia e em combinação com pembrolizumabe em participantes com tumores sólidos avançados, foi avaliada na Parte B em um projeto de estudo não randomizado. A Parte B avaliou 2 doses de anticorpo 31C6 em combinação em participantes com câncer não tratado (naive) de morte programada 1 (PD-1) com o uso de um projeto de estudo randomizado 1:1.

[00208] Durante a Parte A do estudo, indivíduos foram alocados para 1 dentre 2 braços de tratamento:

[00209] Braço 1: 31C6 como monoterapia de doses escaladas 2,1 mg, 7 mg, 21 mg, 70 mg, 210 mg e 700 mg a cada 3 semanas (Q3W) por infusão intravenosa (IV).

[00210] Braço 2: 31C6 de doses escaladas de 2,1 mg, 7 mg, 21 mg, 70 mg, 210 mg e 700 mg a cada 3 semanas (Q3W) IV em combinação com pembrolizumabe (200 mg Q3W) IV.

[00211] A Parte A incluiu adultos com um tumor sólido metastático para o qual não há tratamento clinicamente eficaz que tinham doença mensurável por RECIST e ECOG PS 0-1; tratamento prévio com inibidor de CTLA-4, PD-1 ou PD- L1 foi permitido se o mesmo não foi interrompido para um AE. A escalada de dose seguiu um projeto de intervalo de probabilidade de toxicidade modificada com uma taxa de toxicidade limitante de dose alvo de aproximadamente 30%. O pembrolizumabe foi dosado a 200 mg Q3W. O anticorpo anti-TIGIT 31C6 foi dosado a 2,1 mg a 700 mg. O anticorpo anti-TIGIT e pembrolizumabe foram fornecidos durante 35 ciclos ou até progressão, toxicidade intolerável ou decisão do investigador ou paciente. Durante a escalada de dose, um mínimo de 3 pacientes foi exigido em cada dose. A escalada de dose e confirmação estavam completas após 14 pacientes serem tratados em qualquer nível de dose. Os pontos finais primários são a segurança uma tolerabilidade do anticorpo anti-TIGIT 31C6 como monoterapia e em combinação com pembrolizumabe para estabelecer as respectivas doses recomendadas de fase 2 (RP2Ds). Os pontos finais secundários são a PK do anticorpo anti-TIGIT 31C6 como monoterapia e em combinação com pembrolizumabe, a PK de pembrolizumabe fornecido com o anticorpo anti-TIGIT 31C6, e ORR (RECIST v1.1, análise do investigador) para o anticorpo anti-TIGIT 31C6 como monoterapia e com pembrolizumabe.

[00212] A Parte B é uma confirmação de dose de 31C6 em combinação com pembrolizumabe. Adicionalmente, coortes de expansão estimaram a eficácia antitumoral de 31C6 como monoterapia e em combinação com pembrolizumabe. O alistamento à porção de expansão do estudo foi disponibilizado para indivíduos com os seguintes cânceres: NSCLC refratário a tratamento com inibidor de PD-1 / PD-L1, NSCLC naive inibidor de PD-1 / PD-L1, câncer colorretal câncer de mama ovário epitelial, tubo falopiano ou carcinoma peritoneal primário.

[00213] As características de linha de base para Parte A do estudo são estabelecidas nas seguintes tabelas: Características de Linha de Base: Tabela 4 (data-limite de dados: 16 de agosto de 2018) Tabela 4. Características de linha de base (data-limite de dados: 16 de agosto de 2018) Característica, Monoterapia 31C6 31C6 + pembrolizumabe n (%) N = 34 N = 34 Idade, mediana (faixa) 67,5 (33 a 82) 62,5 (24 a 79) Sexo masculino 16 (47%) 22 (65%) ECOG PS 1 17 (50%) 22 (65%) Terapia anterior Neoadjuvante 1 (3%) 0 Adjuvante 2 (6%) 3 (9%) 1 3 (9%) 2 (6%) 2 9 (26%) 15 (44%) 3 5 (15%) 5 (15%) 4 8 (24%) 3 (9%) ≥5 5 (15%) 4 (12%) Ausente 1 (3%) 2 (6%) Tabela 5. Características de Linha de Base (data-limite de dados: 16 de agosto de 2018) Câncer primário, Monoterapia 31C6 31C6 + pembrolizumabe n (%) N = 34 N = 34 NSCLC 7 (21%) 7 (21%) Colorretal 6 (18%) 4 (12%) Ovário 4 (12%) 2 (6%) Gástrico / GEJ 3 (9%) 5 (15%) Cabeça e Pescoço 3 (9%) 0 Tímico 2 (6%) 1 (3%) Pancreático 1 (3%) 2 (6%) Urotelial 1 (3%) 2 (6%) Mama 0 2 (6%) Sarcoma 0 2 (6%) Outro 5 (15%)a 5 (15%)b Ausente / desconhecido 2 (6%) 2 (6%)

a: Inclui 1 paciente cada com câncer esofágico, vesícula biliar, intestinal, mesotelioma e SCLC b: Inclui 1 paciente cada com melanoma, célula Merkel, RCC, escamosa e uterino. Resultados:

[00214] Neste primeiro estudo em humano, o anticorpo 31C6 anti-TIGIT fornecido como monoterapia e em combinação com pembrolizumabe (200 mg) foi bem tolerado e teve segurança gerenciável em todas as doses testadas. A constatação de dose prosseguiu para conclusão sem DLTs e não houve mortes relacionadas ao tratamento. A Figura 1 estabelece os dados de PK de ambos os braços da monoterapia e da terapia de combinação. A disposição dos pacientes foi a seguinte para a monoterapia: 2 em tratamento e 32 com tratamento interrompido (27 com doença progressiva, 2 mediante decisão do médico e 3 desistências). Treze (13) pacientes realizaram a transição para terapia de combinação com pembrolizumabe.

[00215] Para a combinação de anti-TIGIT 31C6 e Pembrolizumabe, a escalada de dose foi concluída para cada nível de dose pré-especificado. Nenhuma DLTs foi observada. A disposição dos pacientes em terapia de combinação foi a seguinte: 7 em tratamento, 27 com tratamento interrompido (25 com doenças progressivas, 1 decisão do médico e 1 desistência). Um resumo dos eventos adversos é listado abaixo: Tabela 6: Resumo de Evento Adverso Evento Adverso, Monoterapia 31C6 31C6 + pembrolizumabe n (%) N = 34 N = 47a Qualquer atribuição Qualquer Grau 33 (97%) 45 (96%) Grau 3 a 5 13 (38%) 20 (43%) Grau 5 1 (3%) 3 (6%)

Levou à Interrupção 0 1 (2%) Relacionado ao Tratamento Qualquer Grau 19 (56%) 28 (60%) Grau 3 a 5 2 (6%) 5 (11%) Grau 5 0 0 Levou à Interrupção 0 0 a: Inclui os 34 pacientes originalmente alocados para a combinação e os 13 que realizaram transição a partir da monoterapia 31C6. Tabela 7: Eventos Adversos Relacionados ao Tratamento: Monoterapia 31C6 31C6 + pembrolizumabe N=34 N=47a Ocorreu em ≥2 pacientes, n (%) Ocorreu em ≥2 pacientes, n (%) Fadiga 5 (15%) Prurido 10 (21%) Prurido 4 (12%) Fadiga 4 (9%) Anemia 3 (9%) Náusea 4 (9%) Reação relacionada à 3 (9%) Exantema 4 (9%) infusão Artralgia 2 (6%) Apetite reduzido 3 (6%)

Apetite reduzido 2 (6%) Diarreia 3 (6%)

Dermatite 2 (6%) ALT aumentada 2 (4%) acneiforme Diarreia 2 (6%) Dispneia 2 (4%)

Dor de cabeça 2 (6%) Hipofosfatemia 2 (4%)

Náusea 2 (6%) Neuropatia 2 (4%) periférica Exantema 2 (6%) Pirexia 2 (4%)

Exantema 2 (6%) Exantema 2 (4%) maculopapular maculopapular

2 grau 3: anemia e diarreia (n = 1 5 grau 3: ALT aumentada, colite, cada) 0 grau 4 γGT aumentada, hipersensibilidade e exantema maculopapular (n=1 cada) 0 grau 4 a: Inclui os 34 pacientes originalmente alocados para a combinação e os 13 que realizaram a transição a partir da monoterapia 31C6. Data-limite de dados: 16 de agosto de 2018

[00216] Além disso, atividade antitumoral promissora foi observada em uma população fortemente pré-tratada com múltiplos tipos de tumor, particular para terapia de combinação. Especificamente, 3% ORR e 35% DCR foram observadas para monoterapia 31C6 sozinha e 19% ORR e 47% DCR foram observadas para a terapia de combinação de 31C6 e pembrolizumabe. As respostas foram observadas em pacientes que realizaram a transição de monoterapia para terapia de combinação. A Fig 2A e a Fig 2B estabelecem o melhor percentual de mudança a partir da linha de base em lesões-alvo (RECIST v1.1, Análise do Investigador). A Fig 3A e Fig 3B estabelecem um diagrama da duração de tratamento e resposta (RECIST v1.1, Análise do Investigador). Um resumo da atividade antitumoral (RECIST v1.1, Análise do Investigador) é estabelecido abaixo: Tabela 8: Atividade Antitumoral Atividade Antitumorala Resposta Monoterapia 31C6 31C6 + N=34 pembrolizumabe N=43b ORR, % (95% CI) 3% (<1 a 15) 19% (8 a 33) DCR, % (95% CI) 35% (20 a 54) 47% (31 a 62) Melhor resposta, n (%) Resposta completa 0 0

Resposta Parcial 1 (3%) 8 (19%) Doença estável 11 (32%) 12 (28%) Doença progressiva 13 (38%) 20 (47%) Não estimadoc 9 (26%) 3 (7%) a: Avaliada em pacientes com doença mensurável na linha de base. Inclui respostas confirmadas e não confirmadas. b: inclui os 34 pacientes originalmente alocados para a combinação e os 13 que realizaram a transição a partir da monoterapia 31C6. c: nenhuma estimação pós-linha de base desde a data-limite. Data-limite de dados: 16 de agosto de 2018

[00217] Uma resposta parcial foi observada em um paciente do sexo feminino de 75 anos de idade com câncer de ovário do tipo selvagem BRCA. O paciente recebeu 4 linhas anteriores de quimioterapia e não teve terapia anterior de anti-PD-1 ou anti-PD-L1. O paciente recebeu monoterapia com anticorpo 31C6 anti-TIGIT 2,1 mg com documento PD por RECIST, então, realizou transição para a terapia de combinação de 2,1 mg de anticorpo 31C6 anti-TIGIT mais 200 mg de pembrolizumabe. Uma resposta parcial foi observada 9 semanas após realizar a transição. Especificamente, houve uma redução de 85% no volume de tumor, redução no tamanho de todas as lesões (depósitos mesentéricos, linfonodos (para-aórtica, ilíaco, cervical)). Resposta estava em andamento em 13 meses. O tratamento foi interrompido devido a exantema. Exemplo 2: Parte B do estudo de Fase I

[00218] O projeto de Parte B do estudo Fase I descrito acima no exemplo 1 é o seguinte: Tabela 9: Projeto de Parte B do estudo de Fase 1 Tipo de Tumor Dose 31C6 Terapia Anterior Braço de Tratamento

Monoterapia 31C6 31C6 + PD-1 naive pembrolizumabe (200 mg) NSCLC 200 mg 31C6 + PD-1 refratário pembrolizumabe (200 mg) Mama (pelo menos 31C6 + 10 TNBC) 200 mg PD-1 naive pembrolizumabe (200 mg) Ovário (resistente à 200 mg PD-1 naive 31C6 +pembrolizumabe platina) (200 mg) CRC 200 MG PD-1 naive 31C6 + Pembrolizumabe (200 mg) Cervical 200 MG PD-1 naive 31C6 + Pembrolizumabe (200 mg) Cervical 700 MG PD-1 naive 31C6 + Pembrolizumabe (200 mg)

[00219] Além disso, as seguintes combinações estão sendo almejadas: 31C6 + Pembrolizumabe + Carboplatina e Paclitaxel (Taxol) em NSCLC Naive PD1 escamosa 31C6 + Pembrolizumabe + Carboplatina em NSCLC Naive PD1 não escamosa 31C6 + Pembrolizumabe + Carboplatina e Taxol em NSCLC Naive PD1 escamosa Resultados: Visão geral de segurança

[00220] Em setembro de 2019, observou-se que o perfil de efeito colateral de 31C6 e pembrolizumabe foi comparável ao pembrolizumabe sozinho. As taxas de efeito adverso foram similares entre os tratamentos com monoterapia 31C6 e terapia de combinação com 31C6 e pembrolizumabe. Reações à infusão e insuficiência adrenal ocorreram a uma taxa mais alta do que distrofia simpático-reflexa (RSD) por pembrolizumabe. Vide visão geral Tabela 10. Tabela 10. Visão geral de insuficiência adrenal e reações à infusão 31C6 (n=68) 31C6+ pembro Pembrolizumabe (n= 236) RSD (n=2799) Insuficiência 1, 1,5% 6, 2,5% 22, 0,8% Adrenal (0,0,7,9%) (0,9,5,5%) (0,5,1,2%) Reação à infusão 3, 4,4% 14, 5,9% 70, 2,5% (0,9,12,4%) (3,3,9,8%) (2,0,3,1%)

[00221] Observou-se que pacientes que tiveram doses, tais como 200 mg administradas tiveram um valor de depuração linear consistente com as observações anteriores nos dados de Parte A (200 mg: CL = 0,49 L/Dia e t1/2 = 9,9 dias; 700 mg: CL = 0,48 L/Dia e t1/2 = 9,4 dias). A variabilidade de PK também foi analisada e mostrou resultados consistentes (CV em CL = 46%). Eficácia

[00222] A atividade antitumoral foi analisada nos diferentes grupos de pacientes testados na Parte B. NSCLC naive PD-1.

[00223] Respostas foram observadas em pacientes NSCLC naive e são mostradas na FIG. 4 e na Tabela 11 (RECIST v1.1, Análise do Investigador). Os dados de ORR mostram que a combinação de 31C6 e pembrolizumabe é maior do que controle, apesar do alistamento de pacientes com todos os níveis de PD-L1 e linha de tratamento mais avançada. Em indivíduos com NSCLC alistados em KN-010 que receberam uma ou mais linhas anteriores de terapia e foram TPS≥1%, e ORR foi 18%. Tabela 11. Melhor Resposta Geral por RECIST1.1 por Investigador em NSCLC naive PD-1 Sem Com confirmação confirmação Indivíduos 41 41 na população CR 1 (2%) 1 (2%) PR 10 (24%) 8 (20%) ORR 11 (27%) 9 (22%) SD 12 (29%) 13 (32%) DCR 23 (56%) 22 (54%) PD 14 (34%) 14 (34%) NE ou NA 4 (10%) 5 (12%) KN-010: 100% pts TPS≥1, 29% pts são 3L+ Pembro+31C6: 52% pts TPS ≥1, 60% indivíduos são 3L+

[00224] Além disso, dados foram obtidos que mostram a melhor resposta por RECIST1.1 por Investigador em indivíduos com NSCLC refratário PD-1 tratados com monoterapia com anticorpo 31C6 (200 mg) ou uma terapia de combinação de 31C6 (200 mg) e pembrolizumabe (200 m). Vide a Tabela 12. A atividade de monoterapia foi observada em NSCLC refratário PD1 não selecionado, também observado foi um resultado de ORR considerável. As respostas de monoterapia foram observadas incluindo uma CR. Os resultados de monoterapia de ORR para anticorpo 31C6 (200 mg) foram similares aos resultados para a terapia de combinação. Tabela 12. Melhor Resposta Geral por RECIST1.1 por Investigador em indivíduos com NSCLC refratário PD-1 tratados com 31C6 sozinho ou em combinação com pembrolizumabe Braço de Nº de Sem Com Resposta Tratamento Indivíduos confirmação confirmação 31C6 41 CR* 1 (2%) 1 (2%) PR 2 (5%) 1 (2%) ORR 3 (7%) 2 (5%) SD 13 (32%) 13 (32%) DCR 16 (37%) 15 (37%)

PD 19 (46%) 19 (46%) NE ou 6 (15%) 7 (15%)

NA 31C6 + 37 Pembro CR 0 (0%) 0 (0%) PR 1 (3%)* 1 (3%) ORR 1 (3%) 1 (3%) SD 17 (46%) 17 (46%) DCR 18 (49%) 18 (49%) PD 16 (43%) 16 (43%) NE ou 3 (8%) 3 (8%)

NA 83% de indivíduos NSCLC refratário PD-1 em 31C6 são 3L+

[00225] Os dados de duração de resposta em indivíduos com NSCLC refratário PD-1 tratados com 31C6 (200 mg) sozinho ou em uma terapia de combinação com pembrolizumabe (200 mg) são mostrados na Tabela 13 e nas Figuras 5A e 5B. Tabela 13. Duração de Resposta em indivíduos com NSCLC refratário PD- 1 tratados com 31C6 (200 mg) + pembrolizumabe Duração de Resposta 31C6 31C6 + (N=41) pembrolizumabe (N=37) Número de indivíduos com resposta† 2 1 Tempo para Resposta (meses) Média (SD) 6,1(5,8) 1,8() Mediana (faixa) 6,1(2,1 a 10,2) 1,8(1,8 a 1,8) Duração de Resposta‡ (meses) Mediana (faixa) NR(2,1+-4,2+) 12,7(12,7 a 12,7) Número (%‡ ) de Indivíduos com Duração de Resposta Estendida: ≥3 meses 1(100,0) 1(100,0) ≥6 meses 1(100,0)

Inclui indivíduos com resposta completa ou resposta parcial confirmada. De método de produto-limite (Kaplan-Meier) para dados censurados. “+” indica que não há doença progressiva no momento da última estimação da doença. NR = Não Alcançado. Data-limite de banco de dados: 07Maio2019 Câncer de ovário

[00226] Uma visão geral dos dados de eficácia para o grupo de pacientes com câncer de ovário (Parte A e Parte B) é mostrada na Figura 6 e na Tabela 14. No grupo de indivíduos com câncer de ovário naive PD1 (resistente à terapia à base de platina), observou-se que a ORR foi de 19% (n=27). O enriquecimento adicional foi observado em tumores PD-L1 positivo (CPS1, ORR 40%). O tempo médio para resposta foi de 3,5 +/- 2,3 meses e a DOR mediana foi de 4,1 a 11,2+ meses. Tabela 14. Melhor Resposta Geral por RECIST1.1. por Investigador para pacientes com câncer de ovário Sem Com confirmação confirmação Indivíduos na 27 27 população CR 0 (0%) 0 (0%) PR 5 (19%) 3 (11%) ORR 5 (19%) 3 (11%) SD 6 (22%) 8 (30%) DCR 11 (41%) 11(41%) PD 13 (48%) 13 (48%) NE ou NA 3 (10%) 3 (10%)

[00227] Pembro+31C6: (74% de indivíduos são 3L+); os três responsivos confirmados são 3L+ todos responsivos BRCA negativo.

[00228] A eficácia preliminar foi testada em um coorte de pacientes com câncer de ovário resistentes à platina na Parte B (n=20) após a observação de 2 respostas objetivas em indivíduos com câncer de ovário (de 7 no total) em escalada de dose. Em indivíduos com câncer de ovário tratado com uma terapia de combinação de anticorpo 31C6 e pembrolizumabe (Partes A e B), a ORR foi de 19% (5/27) com uma DOR de 4,2 a 11,4+ meses. Dos 27 pacientes com câncer de ovário, os dados de PD-L1 estavam disponíveis para 14 indivíduos. Nos tumores PD-L1 positivo (CPS1) de pacientes com câncer de ovário tratados com anticorpo 31C6, a ORR foi observada ser 40% (2/5) em comparação a 14% em PD-L1+ indivíduos com câncer de ovário tratados com monoterapia de pembrolizumabe. De maneira notável, todos os responsivos de câncer de ovário neste estudo foram BRCA negativo. Desse modo, com base em eficácia e tolerabilidade, mas sem se limitar a qualquer terapia ou mecanismo específico, é possível que a monoterapia com anticorpo 31C6 e terapia de combinação com anticorpo 31C6 e pembrolizumabe possam representar uma opção muito atraente de tratamento livre de quimio nessa população de alta necessidade não atendida. Câncer de mama

[00229] Para esse estudo, não houve pacientes de primeira linha, de modo que todos pacientes que experimentaram 2L+, PD-1/L-1 tiveram permissão para se alistar. Dentre esses pacientes, as seguintes características foram identificadas: 1 DLT (neutropenia febril) e 7 de 10 pacientes permanecem no estudo. Os pacientes com tratamento interrompido tinham as seguintes características: 1 paciente PD clínica, 2 pacientes tinham AE [PNA (não relacionado) e elevação G3 LFT (relacionada a io (isto é, anticorpo 31C6 e pembrolizumabe) + pemetrexede)]. Neste estudo, 10 pacientes no estudo passaram por exames de imagem, todos realizaram 1 exame de imagem apenas (7 SD, 2 PR, 1 PD). Os dados para este estudo de câncer de mama são mostrados na Figura 7 e na Tabela 15. Tabela 15. Dados para pacientes com câncer de mama naive PD-1 tratados com 31C6 (200 mg) e pembrolizumabe Duração de Resposta 31C6 200 mg + pembrolizumabe (N=42) Número de indivíduos com resposta† 2 Tempo para Resposta (meses) Média (SD) 3,1(1,4) Mediana (faixa) 3,1(2,1 a 4,1) Duração de Resposta‡ (meses) Mediana (faixa) NR (8,4+-10,4+) Número (%‡ ) de Indivíduos com Duração de Resposta Estendida: ≥3 meses 2(100,0) ≥6 meses 2(100,0) Data-limite de banco de dados: 07Maio2019

[00230] Os dados anexos para pacientes com câncer de mama CRC na Figura 8 e na Tabela 16. Tabela 16. Dados para pacientes com câncer de mama CRC naive PD-1 tratados com 31C6 (200 mg) e pembrolizumabe Duração de Resposta 31C6 200mg + pembrolizumabe (N=42) Número de indivíduos com resposta† 2 Tempo para Resposta (meses) Média (SD) 3,1(1,4)

Mediana (faixa) 3,1(2,1 a 4,1) Duração de Resposta‡ (meses) Mediana (faixa) NR(8,4+-10,4+) Número (%‡ ) de Indivíduos com Duração de Resposta Estendida: ≥3 meses 2(100,0) ≥6 meses 2(100,0) Data-limite de banco de dados: 07Maio2019 Câncer Cervical

[00231] No momento do limite de dados, 7 e 8 pacientes permaneciam no estudo com doses de 200 mg e 700 mg, respectivamente. Os dados são mostrados nas Figuras 9A e 9B e na Tabela 17. Nesse ponto no tempo precoce, nenhuma diferença significativa na eficácia ou segurança entre os braços de tratamento de combinação de 31C6 a 200 mg e 700 mg com pembrolizumabe. Tabela 17. Dados para pacientes com câncer cervical randomizados com doses de 200 mg ou 700 mg de anticorpo 31C6 e pembrolizumabe 31C6 200mg + 31C6 700mg + Pembro Pembro Indivíduos na 18 19 população CR 0 (0%) 0 (0%) PR 4 (22%) 3 (16%) ORR 4 (22%) 3 (16%) SD 6 (33%) 4 (21%) DCR 10 (56%) 7 (37%) PD 7 (39%) 9 (47%) NE ou NA 1 (6%) 3 (16%)

[00232] Em conclusão, observou-se que a monoterapia com anticorpo 31C6 foi bem tolerada. Quaisquer efeitos colaterais foram toleráveis e o perfil de efeito colateral observado para o anticorpo 31C6 na combinação com pembrolizumabe foi similar aos resultados observados para monoterapia com pembrolizumabe. Em termos de dose e dados de PK, observou-se que a meia- vida de anticorpo 31C6 foi de aproximadamente 10 dias. A variabilidade de PK normal foi observada, e a incidência de ADA observada foi de 10 a 20%. Embora muitas das doses tenham mostrado resultados favoráveis, a RP2D preliminar de 200 mg permanece favorável. Os dados mostram que a exposição do tratamento com anticorpo se manteve ao longo do intervalo de dosagem. Os dados iniciais mostram segurança/eficácia comparáveis para 200 mg e 700 mg de anticorpo 31C6 em comparação de dose randomizada.

[00233] Entre os dados de eficácia favoráveis, foi observado que havia sinais significativos de eficácia clínica para tratar pacientes com NSCLC (PD-1 Naive e PD-1 refratário) e pacientes com câncer de ovário com anticorpo 31C6 como uma monoterapia e também com uma terapia de combinação com anticorpo 31C6 e pembrolizumabe. Mais importante, havia evidência de que o tratamento com anticorpo 31C6 (tanto como parte de uma monoterapia terapia quanto de uma terapia de combinação) tinha atividade antitumoral em cada um dos cânceres testados. Por exemplo, atividade antitumoral com monoterapia foi observada em pacientes NSCLC refratário PD-1. Os dados incluíam uma CR em um paciente tratado com monoterapia 31C6 cadeia e 113 na cadeia pesada.

REFERÊNCIAS

1. Sharpe, A.H, Wherry, E.J., Ahmed R., and Freeman G.J. The function of programmed cell death 1 and its ligands in regulating autoimmunity and infection. Nature Immunology (2007);8:239 a 245.

2. Dong H et al. Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion. Nat Med. 2002 Aug;8(8):793 a 800.

3. Yang et al. PD-1 interaction contributes to the functional suppression of T-cell responses to human melanoma cells in vitro. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008 Jun;49(6 (2008): 49: 2.518 a 2.525.

4. Ghebeh et al. The B7-H1 (PD-L1) T lymphocyte-inhibitory molecule is expressed in breast cancer patients with infiltrating ductal carcinoma: correlation with important high-risk prognostic factors. Neoplasia (2006) 8: 190 a 198.

5. Hamanishi J et al. Programmed cell death 1 ligand 1 and tumor- infiltrating CD8+ T lymphocytes are prognostic factors of human ovarian cancer. Proceeding of the National Academy of Sciences (2007): 104: 3.360 a

3.365.

6. Thompson RH et al. Significance of B7-H1 overexpression in kidney cancer. Clinical genitourin Cancer (2006): 5: 206 a 211.

7. Nomi, T. Sho, M., Akahori, T., et al. Clinical significance and therapeutic potential of the programmed death- 1 ligand/programmed death-1 pathway in human pancreatic cancer. Clinical Cancer Research (2007);13:2.151 a 2.157.

8. Ohigashi Y et al. Clinical significance of programmed death-1 ligand-1 and programmed death-1 ligand 2 expression in human esophageal cancer. Clin. Cancer Research (2005): 11: 2.947 a 2.953.

9. Inman et al. PD-L1 (B7-H1) expression by urothelial carcinoma of the bladder and BCG- induced granulomata: associations with localized stage progression. Cancer (2007): 109: 1.499 a 1.505.

10. Shimauchi T et al. Augmented expression of programmed death-1 in both neoplasmatic and nonneoplastic CD4+ T-cells in adult T-cell Leukemia/ Lymphoma. Int. J. Cancer (2007): 121:2.585 a 2.590.

11. Gao et al. Overexpression of PD-L1 significantly associates with tumor aggressiveness and postoperative recurrence in human hepatocellular carcinoma. Clinical Cancer Research (2009) 15: 971 a 979.

12. Nakanishi J. Overexpression of B7-H1 (PD-L1) significantly associates with tumor grade and postoperative prognosis in human urothelial cancers. Cancer Immunol Immunother. (2007) 56:1.173 a 1.182.

13. Hino et al. Tumor cell expression of programmed cell death-1 is a prognostic factor for malignant melanoma. Cancer (2010): 00: 1 a 9.

14. Ghebeh H. Foxp3+ tregs and B7-H1+/PD-1+ T lymphocytes co-infiltrate the tumor tissues of high-risk breast cancer patients: implication for immunotherapy. BMC Cancer. 2008 Feb 23;8:57.

15. Ahmadzadeh M et al. Tumor antigen-specific CD8 T cells infiltrating the tumor express high levels of PD-1 and are functionally impaired. Blood (2009) 114: 1.537 a 1.544.

16. Thompson RH et al. PD-1 is expressed by tumor infiltrating cells and is associated with poor outcome for patients with renal carcinoma. Clinical Cancer Research (2007) 15: 1.757 a 1.761.

[00234] Todas as referências citadas na presente invenção são incorporadas a título de referência da mesma maneira como se cada publicação, entrada em banco de dados (por exemplo, sequências em Genbank ou entradas em GeneID), pedido de patente ou patente individual fosse indicada de maneira específica e individual para ser incorporada a título de referência. Essa afirmação de incorporação a título de referência se destina a Requerentes, nos termos do 37C.F.R. §1.57(b)(1), para se referir a toda e cada publicação, entrada em banco de dados (por exemplo, sequências em Genbank ou entradas em GeneID), pedido de patente ou patente individual, em que cada um é claramente identificado em conformidade com 37 C.F.R. §1.57(b)(2),

até mesmo se tal citação não for imediatamente adjacente a uma afirmação dedicada de incorporação a título de referência.

A inclusão de afirmações dedicadas de incorporação a título de referência, se houver, no relatório descritivo não enfraquece, de modo algum, essa afirmação geral de incorporação a título de referência.

A citação das referências na presente invenção não é destinada como uma admissão de que a referência é pertinente à anterioridade, nem constitui qualquer admissão quanto ao conteúdo ou data dessas publicações ou documentos.

Na medida em que as referências fornecem uma definição para um termo reivindicado que está em desacordo com as definições fornecidas no presente relatório descritivo, as definições fornecidas no presente relatório descritivo devem ser utilizadas para interpretar a invenção reivindicada.

Claims (53)

REIVINDICAÇÕES

1. Um método para tratar câncer em um paciente compreendendo administrar ao paciente 2,1 mg a 700 mg de um anticorpo anti-TIGIT compreendendo uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia leve compreende CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e a cadeia pesada compreende CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31.

2. O método da reivindicação 1, em que o anticorpo anti-TIGIT é administrado por infusão intravenosa.

3. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 2,1 mg do anticorpo anti-TIGIT.

4. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 7 mg do anticorpo anti-TIGIT.

5. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 21 mg do anticorpo anti-TIGIT.

6. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 70 mg do anticorpo anti-TIGIT.

7. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 200 mg do anticorpo anti-TIGIT.

8. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 210 mg do anticorpo anti-TIGIT.

9. O método da reivindicação 1, em que são administrados ao paciente 700 mg do anticorpo anti-TIGIT.

10. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 9, em que é administrado ao paciente o anticorpo anti-TIGIT no Dia 1 e, então, uma vez a cada três semanas.

11. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 10, em que o anticorpo anti-TIGIT compreende cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

12. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO:22.

13. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 10, em que o anticorpo anti-TIGIT é uma variante de 31C6.

14. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 13, em que o anticorpo anti-TIGIT é coadministrado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

15. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 13, em que o anticorpo anti-TIGIT é coformulado com um anticorpo anti-PD-1 ou anticorpo anti-PD-L1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

16. O método da reivindicação 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, se liga especificamente a PD-1 humano e bloqueia a ligação de PD-L1 humano a PD-1 humano.

17. O método da reivindicação 16, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo, também bloqueia a ligação de PD- L2 humano a PD-1 humano.

18. O método da reivindicação 17, em que o anticorpo anti-PD-1, ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende: (a) CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1, 2 e 3 e (b) CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e

8.

19. O método da reivindicação 18, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4.

20. O método da reivindicação 18, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4.

21. O método da reivindicação 17, em que o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumabe.

22. O método da reivindicação 17, em que o anticorpo anti-PD-1 é uma variante de pembrolizumabe.

23. O método da reivindicação 14, em que o anticorpo anti-PD-1 é nivolumabe.

24. O método da reivindicação 14, em que o anticorpo anti-PD-L1 é atezolizumabe, durvalumabe ou avelumabe.

25. O método de qualquer uma das reivindicações 18 a 24, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada três semanas.

26. O método de qualquer uma das reivindicações 18 a 24, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada seis semanas.

27. O método da reivindicação 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 6, 7 e 8 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo

CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 1,2 e 3; e o anticorpo anti-TIGIT é um anticorpo anti-TIGIT humanizado que compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28.

28. O método da reivindicação 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:9 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 4; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

29. O método da reivindicação 14 ou 15, em que o anticorpo anti-PD-1 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:10 e a cadeia leve compreende SEQ ID NO: 5; e o anticorpo anti-TIGIT compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 22.

30. O método de qualquer uma das reivindicações 27 a 29, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada três semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada três semanas.

31. O método de qualquer uma das reivindicações 27 a 29, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada seis semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a

200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 uma vez a cada três semanas.

32. O método de qualquer uma das reivindicações 27 a 29, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 200 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada três semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a 700 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada três semanas.

33. O método de qualquer uma das reivindicações 27 a 29, em que o anticorpo anti-PD-1 é administrado a 400 mg por infusão intravenosa no Dia 1 e, então, uma vez a cada seis semanas, e o anticorpo anti-TIGIT é administrado a 700 mg por infusão intravenosa no Dia 1 uma vez a cada três semanas.

34. O método de qualquer uma das reivindicações 27 a 29, em que 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 200 mg de anticorpo anti-TIGIT.

35. O método de qualquer uma das reivindicações 27 a 29, em que 200 mg de anticorpo anti-PD-1 são coformulados com 700 mg de anticorpo anti-TIGIT.

36. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 35, em que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em: NSCLC, câncer cervical, câncer colorretal, câncer gástrico, câncer de mama, câncer de ovário, câncer epitelial, câncer no tubo falopiano ou carcinoma peritoneal primário.

37. O método da reivindicação 36, em que o câncer é NSCLC.

38. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 37, o método compreendendo, ainda, administrar uma combinação de carboplatina e pemetrexede ou (ii) carboplatina e paclitaxel.

39. O método de qualquer uma das reivindicações 1 a 38, em que o indivíduo não foi previamente tratado com terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 ou é confirmado progressivo enquanto recebia terapia anti-PD-1 ou anti-PD-L1 anterior.

40. Uma composição farmacêutica compreendendo 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 200 mg de anticorpo

31C6 ou de uma variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

41. Uma composição farmacêutica compreendendo 200 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 2,1 a 700 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de 31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

42. Uma composição farmacêutica compreendendo 400 mg de pembrolizumabe ou de uma variante de pembrolizumabe, 2,1 a 700 mg de anticorpo 31C6 ou de uma variante de a31C6, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

43. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 2,1 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

44. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 7 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

45. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 21 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

46. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 70 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

47. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 200 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

48. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 210 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

49. A composição farmacêutica da reivindicação 41 ou 42, compreendendo 700 mg do anticorpo 31C6 ou de variante de 31C6.

50. A composição farmacêutica de qualquer uma das reivindicações 40 a 49, em que o anticorpo 31C6 ou variante de 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia leve compreende CDRs de cadeia leve das SEQ ID NOs: 26, 27 e 28 e a cadeia pesada compreende CDRs de cadeia pesada das SEQ ID NOs: 29, 30 e 31.

51. A composição farmacêutica de qualquer uma das reivindicações 40 a 49, em que o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, em que a cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo SEQ ID NO:25 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 24.

52. A composição farmacêutica de qualquer uma das reivindicações 40 a 49, em que o anticorpo 31C6 compreende uma cadeia pesada e uma cadeia leve, e em que a cadeia pesada compreende SEQ ID NO:23 e a cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo SEQ ID NO: 22.

53. Um kit para tratar câncer compreendendo qualquer das composições farmacêuticas das reivindicações 40 a 52, e instruções para uso.