CN113260621A - 安全性得到提高的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及新型吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物或其药学上可接受的盐、其配体‑药物缀合化合物、包含其的组合物以及其作为抗癌剂的治疗用途，本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物在游离毒素(free toxin)形式的情况下，活性降低而呈现出显著减少毒性的效果，并且，当将配体‑药物缀合物作为药物应用并给药时，抗癌活性等同甚至优异于现有抗癌剂，治疗指数(therapeutic index)显著提高，因此，可以使对诸如癌症之类的增殖性疾病的靶向、特异性治疗、药效最大化并使副作用表达最小化，因此可在产业上非常有用。

Description

安全性得到提高的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物及其用途
技术领域
本发明涉及新型吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物或其药学上可接受的盐、其配体-药物缀合化合物、包含其的组合物以及其作为抗癌剂的治疗用途，本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物在游离毒素(free toxin)形式的情况下，活性降低而呈现出显著减少毒性的效果，并且，当将配体-药物缀合物作为药物应用并给药时，抗癌活性等同甚至优异于现有抗癌剂，治疗指数(therapeutic index)显著提高，因此，可以使对诸如癌症之类的增殖性疾病的靶向、特异性治疗、药效最大化并使副作用表达最小化，因此在产业上非常有用。
背景技术
已知吡咯并苯并二氮杂(pyrrolobenzodiazepine，PBD)为通过多种放线菌(actinomycetes)产生的具有抗生或抗肿瘤活性的天然物质。吡咯并苯并二氮杂为与细胞DNA供价结合的序列选择性DNA烷基化抗癌剂。吡咯并苯并二氮杂为DNA交联剂(DNA-crosslinking agents)，公知为比全身化疗剂具有显著更强的抗癌活性，在不破坏DNA螺旋结构(helix)的情况下，可阻止癌细胞的分裂。
吡咯并苯并二氮杂具有如下所示的一般结构：
Figure BDA0003147490830000011
上述吡咯并苯并二氮杂在芳香环A及吡咯并C环中的取代基的数量、类型及位置和C环的饱和度方面具有差异。在B环中用于担当DNA的烷基化的作为亲电子中心的N10-C11位置存在亚胺(N＝C)、甲醇胺(NH-CH(OH))或甲醇胺甲醚(NH-CH(OMe))。
已知艾伯维(AbbVie)、ADC therapeutics公司、英基生物(ImmunoGen)、武田(Takeda)、Medimmune公司等开发了使用吡咯并苯并二氮杂为细胞毒性药物的抗体药物偶联物。另外，Spirogen公司一直在开发基于吡咯并苯并二氮杂的急性髓系白血病治疗剂技术。
与此相关地，有关于吡咯并苯并二氮杂及其缀合物的公开专利(Medimune公司、专利文献1)、关于用于治疗增殖性疾病的的非对称吡咯并苯并二氮杂二聚物的公开专利(Medimune公司、专利文献2)、关于吡咯并苯并二氮杂的授权专利(Medimune公司、专利文献3)、关于用于治疗增殖性疾病的吡咯并苯并二氮杂的授权专利(Medimune公司、专利文献4)、关于吡咯并苯并二氮杂的公开专利(Medimune公司、专利文献5)、关于吡咯并苯并二氮杂的授权专利(Spirogen公司、专利文献6)等。这些公开了改变吡咯并苯并二氮杂化合物结构来提高抗肿瘤活性等，或者仅公开了可以将具有这种变形的结构的吡咯并苯并二氮杂化合物以抗体药物偶联物的形式给药来提高抗癌活性。
另一方面，具有公开有关对于吡咯并苯并二氮杂二聚物(dimer)的形态具有与氨基甲酸酯相连接的形态的抗体药物偶联物的技术、将单体形态的吡咯并苯并二氮杂化合物作为前体(prodrug)形态以示出细胞毒性少且稳定的论文、有关N10-(4-硝基苄基)氨基甲酸酯保护的吡咯并苯并二氮杂前体的制备方法及活性的研究论文(参照非专利文献7、非专利文献8及非专利文献9)。
但是，对于上述技术，在合成吡咯并苯并二氮杂时，在如下方面上受限制，即，由于收率低，因此存在不容易扩大的问题，并且存在给药后在血液中的稳定性下降的问题不足以解决。并且，作为ADC领域先驱者拥有多个渠道的西雅图遗传学公司(SeattleGenetics)，最近在将SGN-CD33A用于白血病患者的临床试验中，由于死亡率的增加停止临床试验后，停止了所有引入吡咯并苯并二氮杂二聚体的SGN-CD123A(靶：CD123)、SGN-CD19B(靶：CD19)、SGN-CD352A(靶：CD352)的临床试验，这被认为是由于吡咯并苯并二氮杂二聚体的强毒性所致。ADC therapeutics公司的ADCT-502也因吡咯并苯并二氮杂二聚体的毒性引起的安全问题而停止。然而，针对ADC therapeutics公司拥有的各种靶的吡咯并苯并二氮杂二聚体-抗体药物偶联物的临床试验正在进行中。
因此，需要开发一种可以提高吡咯并苯并二氮杂的收率的制备方法，并且开发一种给药后可以提高血液中的稳定性并降低毒性的同时，与现有抗癌剂相比，呈现出等同甚至优异的效果的新型吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物。
另一方面，抗体药物偶联物(ADCs，antibody-drug conjugates)为将毒素或药物结合在与抗原相结合的抗体后，在细胞内部释放毒性物质的同时，致使癌细胞凋亡的靶向性新技术。由于以最小限度地影响健康的细胞并将药物准确地传递到靶癌细胞，并且以使仅在特定条件下释放，因此该技术为功效优于抗体治疗剂本身，相对于现有抗癌剂，可大大降低副作用风险的技术。
这种抗体药物偶联物的基本结构由“抗体-连接体-低分子药物(毒素)”构成。其中，连接体不仅起到简单连接抗体与药物的功能作用，而且，在体内循环中稳定地到达靶细胞后，药物进入细胞内，以使药物通过抗体药物之间的解离现象(例如，基于酶的水解的结果)容易掉落并对靶癌细胞产生药效。
本发明的发明人开发了一种包含在血浆中更加稳定且在体内循环中也稳定，而且药物在癌细胞中容易释放并可产生药效的有效的自分解基(self-immolative group)的连接体，从而对此获得了专利(韩国授权专利第1628872号等)。
发明内容
技术问题
在本发明中，开发在游离毒素(free toxin)状态下不呈现出毒性，从而提高血液中的稳定性并降低全身副作用，而且与现有抗癌剂相比呈现等同甚至优异的效果的新型吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物。
解决问题的手段
本发明通过提供新型吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐，或其溶剂化物解决了上述问题。
更具体地，本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物具有下述化学式I的结构：
化学式I：
Figure BDA0003147490830000041
发明的效果
本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物在游离毒素(free toxin)形式的情况下，活性降低而呈现出显著减少毒性的效果，并且，当将配体-药物缀合物作为药物应用并给药时，抗癌活性等同甚至优异于现有抗癌剂，治疗指数(therapeutic index)显著提高，因此，具有可以使对诸如癌之类的增殖性疾病的靶向、特异性治疗、药效最大化并使副作用表达最小化的优点。
并且，在以现有方法制备的配体-药物缀合物的情况下，存在杂质的含量高、暴露的亚胺基受亲核试剂(nucleophile)攻击而生成不需要的结构的药物的隐患，相反，当以配体-药物缀合物的形式制备本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合时，纯度高使其容易分离，相对于现有吡咯并苯并二氮杂化合物，物性进一步得到提高。
附图说明
图1为以图示化的方式示出本发明的化合物28的合成过程。
图2为示出JIMT-1异种移植模型(xenograft model)的生物体内(in vivo)实验结果的图表。
图3为示出实验SD大鼠中的单次给药毒性的结果的曲线图。
图4为示出实验旁观者效应(Bystander effect)程度的结果的柱状图。
具体实施方式
以下进一步详细说明本发明。
本发明涉及具有下述化学式I的结构的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物：
化学式I：
Figure BDA0003147490830000051
在上述式中，
虚线表示C1与C2或C2与C3之间存在任意双键，
R1选自由氢、OH、＝O、＝CH2、CN、Rm、ORm、＝CH-Rm'＝C(Rm')2、O-SO2-Rm、CO2Rm、CORm、卤代以及二卤代(dihalo)组成的组中，
或者R1可以是以下R6的定义中描述的那些之一；
其中，Rm选自由取代或未取代的C1-12烷基、取代或未取代的C2-12烯基、取代或未取代的C2-12炔基、取代或未取代的C5-20芳基、取代或未取代的C5-20杂芳基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的3元至7元杂环基、取代或未取代的3元至7元杂环烷基以及取代或未取代的5元至7元杂芳基组成的组中，
其中，在C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、C5-20芳基、C5-20杂芳基、C3-6环烷基、3元至7元杂环基、3元至7元杂环烷基或5元至7元杂芳基被取代的情况下，C1-12烷基、C1-12烷氧基、C2-12烯基、C2-12炔基、C5-20芳基、C5-20杂芳基、C3-6环烷基、3元至7元杂环基、3元至7元杂环烷基或5元至7元杂芳基的各氢原子分别独立地被选自由C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、C5-20芳基、C5-20杂芳基、C3-6环烷基、3元至7元杂环基、3元至7元杂环烷基以及5元至7元杂芳基组成的组中的一种以上取代
其中，Rm'选自由Rm、CO2Rm、CORm、CHO、CO2H以及卤代组成的组中；
R2、R3以及R5分别独立地选自由H、Rm、OH、ORm、SH、SRm、NH2、NHRm、NRmRm'、NO2、Me3Sn以及卤代组成的组中，
其中，Rm以及Rm'如上所定义；
R4选自氢、Rm、OH、ORm、SH、SRm、NH2、NHRm、NRmRm'、NO2、Me3Sn、卤代、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的C2-6烯基、取代或未取代的C2-6炔基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的3元至7元杂环烷基、取代或未取代的C5-12芳基、取代或未取代的5元至7元杂芳基、-CN、-NCO、-ORn、-OC(O)Rn、-OC(O)NRnRn'、-OS(O)Rn、-OS(O)2Rn、-SRn、-S(O)Rn、-S(O)2Rn、-S(O)NRnRn'、-S(O)2NRnRn'、-OS(O)NRnRn'、-OS(O)2NRnRn'、-NRnRn'、-NRnC(O)RO、-NRnC(O)ORO、-NRnC(O)NRoRo'、-NRnS(O)RO、-NRnS(O)2RO、-NRnS(O)NRoRo'、-NRnS(O)2NRoRo'、-C(O)Rn、-C(O)ORn以及-C(O)NRnRn'组成的组中，
其中，在C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-12芳基、5元至7元杂芳基被取代的情况下，C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-12芳基、5元至7元杂芳基的各氢原子分别独立地被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-C6环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-10芳基、5元至7元杂芳基、-ORp、-OC(O)Rp、-OC(O)NRpRp'、-OS(O)Rp、-OS(O)2Rp、-SRp、-S(O)Rp、-S(O)2Rp、-S(O)NRpRp'、-S(O)2NRpRp'、-OS(O)NRpRp'、-OS(O)2NRpRp'、-NRpRp'、-NRpC(O)Rq、-NRpC(O)ORx、-NRpC(O)NRxRx'、-NRpS(O)Rx、-NRpS(O)2Rx、-NRpS(O)NRxRx'、-NRpS(O)2NRxRx'、-C(O)Rp、-C(O)ORp或-C(O)NRpRp取代，
其中，Rn、Ro、Rp、Rx、Rn'、Ro'、Rp'以及Rx'分别独立地选自由H、C1-7烷基、C2-7烯基、C2-7炔基、C3-13环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基以及5元至7元杂芳基组成的组中，或者
R4可以是以下R6的定义中描述的那些之一；
在X以及X'附着有分别独立地选自由-C(O)O*、-S(O)O*、-C(O)*、-C(O)NR*、-S(O)2NR*、-P(O)R'NR*、-S(O)NR*、以及-PO2NR*基组成的组中的一种，
其中，*为附着有连接体的部分，
其中，R以及R'分别独立地为H、OH、N3、CN、NO2、SH、NH2、ONH2、NHNH2、卤代、取代或未取代的C1-8烷基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的C1-8烷氧基、取代或未取代的C1-8烷基硫基、取代或未取代的C3-20杂芳基、取代或未取代的C5-20芳基或单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基，
其中，在C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、C3-20杂芳基、C5-20芳基被取代的情况下，被选自由H、OH、N3、CN、NO2、SH、NH2、ONH2、NNH2、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基以及C5-12芳基组成的组中的取代基取代；
Y以及Y'分别独立地选自由O、S以及N(H)组成的组中；
R6为具有下述化学式II的结构的极性官能团，
化学式II：
-A-B1-B2-C，
其中，
A为被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-20芳基、C3-8环烷基、3元至7元杂环烷基或5元至7元杂芳基，
B1为键、-O-、-NH-、-S-、-CO2、-CONRm-、-CONRmRm'、-CH＝CH-、-C≡C-、-N-、-P-，或者B1可以为支化单元(branching unit)，
其中，支化单元为C2-100烯基(其中，烯基的碳原子可以被一个或多个选自由N、O以及S组成的组中的杂原子取代，烯基还可以被一个或多个C1-20烷基取代)、亲水性(hydrophilic)氨基酸、-C(O)-、-C(O)NR””-、-C(O)O-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-C(O)-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-C(O)-、-S(O)2NR””-、-P(O)R””'NR””-、-S(O)NR””-或-PO2NR””-(其中，R””以及R””'分别独立地为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C5-20芳基，s、t、u以及v分别独立地为0至10的整数)，
B2具有键、-(CH2)r(V(CH2)p)q-、-((CH2)pV)q-、-V(Y(CH2)p)q-、-(CH2)r(V(CH2)p)qY-、-((CH2)pV)q(CH2)r-、-Y((CH2)pV)q-或-(CH2)r(V(CH2)p)qYCH2-结构，其中，r为0至10的整数，p为1至10的整数，q为1至20的整数，V以及Y分别独立地为单键、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR23C(O)R24-、-NR24SO2-或-SO2NR25-，R21至R25分别独立地为氢、(C1-6)亚烷基、(C1-6)烷基、(C1-6)烷基(C6-20)芳基或(C1-6)烷基(C3-20)杂芳基；
C选自由-RqORr、-ORr、-OC(O)ORr、-RqOC(O)ORr、-C(O)ORr、-RqC(O)ORr、-C(O)Rr、-RqC(O)Rr、-OC(O)Rr、-RqOC(O)Rr、-(RqO)n-ORr、-(ORq)n-ORr、-C(O)-O-C(O)Rr、-RqC(O)-O-C(O)Rr、-SRr、-RqSRr、-SSRr、-RqSSRr、-S(＝O)Rr、-RqS(＝O)Rr、-RqC(＝S)Rr-、-RqC(＝S)SRr、-RqSO3Rr、-SO3Rr、-CN、-RqCN、-NNC(＝S)Rr、-RqNNC(＝S)Rr、-NO2，RqNO2、
Figure BDA0003147490830000081
Figure BDA0003147490830000082
Figure BDA0003147490830000083
-SO2Rq、-RqSO2Rr、-OSO2Rr、-RqOSO2Rr、-OSO2ORr、-RqOSO2ORr、
Figure BDA0003147490830000084
Figure BDA0003147490830000091
Figure BDA0003147490830000092
以及
Figure BDA0003147490830000093
组成的组中，
其中，
Rq和Rq'相同或不同，且分别独立地为，
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的直链或支链亚烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链亚烯基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链亚炔基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C3-12的亚环烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C6-40的亚芳基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的亚烷氧基；或
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的亚羰基氧基，
Rr和Rs相同或不同，且分别独立地为，
氢；
卤素；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的直链或支链烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链烯基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链炔基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C3-12的环烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C6-40的芳基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的烷氧基；或
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的羰基氧基，
n分别独立地为1至10的整数，
R7为H、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C2-6烯基、取代或未取代的C2-6炔基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的3元至7元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5元至7元杂芳基、-ORt、-OC(O)Rt、-OC(O)NRtRt'、-OS(O)Rt、-OS(O)2Rt、-SRt、-S(O)Rt、-S(O)2Rt、-S(O)NRtRt'、-S(O)2NRrRr'、-OS(O)NRtRt'、-OS(O)2NRtRt'、-NRtRt'、-NRtC(O)Ru、-NRtC(O)ORu、-NRtC(O)NRuRu'、-NRtS(O)Ru、-NRtS(O)2Ru、-NRtS(O)NRuRu'、-NRtS(O)2NRuRu、-C(O)Rt、-C(O)ORu或-C(O)NRtRt'，
其中，在C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基、5元至7元杂芳基被取代的情况下，C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基、5元至7元杂芳基的各氢原子分别独立地被C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基、5元至7元杂芳基、-ORv、-OC(O)Rv、-OC(O)NRvRv'、-OS(O)Rv、-OS(O)2Rv、-SRv、-S(O)Rv、-S(O)2Rv、-S(O)NRvRv'、-S(O)2NRvRv'、-OS(O)NRvRv'、-OS(O)2NRvRv'、-NRvRv'、-NRvC(O)Rw、-NRvC(O)ORw、-NRv、C(O)NRwRw'、-NRvS(O)Rw、-NRvS(O)2Rw、-NRvS(O)NRwRw'、-NRvS(O)2NRwRw'、-C(O)Rv、-C(O)ORv或-C(O)NRvRv'取代，
其中，Rt、Rt'、Ru、Ru'、Rv、Rv'、Rw以及Rw'分别独立地选自由H、C1-7烷基、C2-7烯基、C2-7炔基、C3-13环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-10芳基以及5元至7元杂芳基组成的组中。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的R1可选自由H、OH、＝O、＝CH2、CN以及C1-6烷基组成的组中。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的R2、R3以及R5可分别独立地选自由H、OH以及ORm组成的组中，其中，Rm如上所定义。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的R4可选自由H、Rm、OH以及ORm组成的组中，其中，Rm可以为C1-6烷基。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的Y以及Y'可以为O。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的R6具有下述化学式II的结构，
化学式II：
-A-B1-B2-C，
其中，
A可以为C1-6烷基或C3-20芳基；
B1可选自由-O-、-NH-、-C≡C-以及-CONRmRm'组成的组中，其中，Rm以及Rm'可分别独立地为氢或C1-6烷基；
B2可以为-((CH2)pV)q-或-V(Y(CH2)p)q-，
其中，
V可以为O或-NR23C(O)R24-(其中，R23以及R24分别独立地为氢或C1-6亚烷基)，
p可以为2，
q可以为1至10的整数；
Figure BDA0003147490830000131
其中，
Rq以及Rq'可分别独立地为C1-6亚烷基、C2-6亚烯基或C2-6亚炔基，
Rr以及Rs可分别独立地选自由氢、羧基、被羧基取代的C1-6烷基以及C1-6烷基组成的组中。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的R7可以为氢、C1-6烷基或ORt(其中，Rt为H或C1-7烷基)。
在本发明的一实施方式中，上述化学式I的X以及X'可分别独立地选自由-C(O)O*、-C(O)*以及-C(O)NR*组成的组中，其中，R可分别独立地H、OH、N3、CN、NO2、SH、NH2、ONH2、NNH2、卤代、C1-3烷基或C1-3烷氧基。
在本发明的一实施方式中，上述吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物可以为选自由
Figure BDA0003147490830000132
Figure BDA0003147490830000141
Figure BDA0003147490830000151
以及
Figure BDA0003147490830000152
组成的组中的一种。
在本发明的另一实施方式中，提供具有下述化学式III的结构的缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物：
化学式III：
Ligand-(L-D)n，
在上述式中，
Ligand为配体，
L为连接体，
D为如上所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物，
其中，连接体通过D的N10位置、N10'位置或者N10以及N10'位置与D相结合，
n为1至20的整数。
在本发明的一实施方式中，上述化学式III的连接体可通过上述本发明的一实施方式所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物的X以及X'与化合物相结合。
在本发明的一实施方式中，上述化学式III中的n可以为1至10的整数。
在本发明的另一实施方式中，提供具有下述化学式IV的结构的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物：
化学式IV：
Figure BDA0003147490830000161
在上述式中，
虚线、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、R7'、X'以及Y'分别与上述化学式I的化合物的定义相同，
Xa以及Xa'分别独立地为键(bond)或者取代或未取代的C1-6亚烷基，其中，在C1-6亚烷基被取代的情况下，被氢、C1-8烷基或C3-8环烷基取代，
G及G'为葡萄糖醛酸苷(glucuronide)基、半乳糖苷基或其衍生物，
Z选自由H、C1-8烷基、卤代、NO2、CN、
Figure BDA0003147490830000162
以及-(CH2)m-OCH3组成的组中，
n为1至3的整数，在n为2以上的整数的情况下，每个Z可以相同或不同，
W为-C(O)-、-C(O)NR”-、-C(O)O-、-S(O)2NR”-、-P(O)R”'NR”-、-S(O)NR”-或-PO2NR”，上述R”以及R”'分别独立地为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C6-20芳基，
L为选自由支化单元(branching unit)、连接单元(connection unit)以及键合单元(binding unit)组成的组中的一种以上的单元或这些单元的组合，
其中，连接单元用于连接W与键合单元、W与支化单元、支化单元与支化单元或者支化单元与键合单元，其中，支化单元用于连接连接单元与W或者连接单元与另一连接单元，
支化单元为C2-100烯基(其中，烯基的碳原子可以被一个或多个选自由N、O以及S组成的组中的杂原子取代，烯基还可以被一个或多个C1-20烷基取代)、亲水性(hydrophilic)氨基酸、-C(O)-、-C(O)NR””-、-C(O)O-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-C(O)-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-C(O)-、-S(O)2NR””-、-P(O)R””'NR””-、-S(O)NR””-或-PO2NR””-(其中，R””以及R””'分别独立地为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C5-20芳基，s、t、u以及v分别独立地为0至10的整数)，
连接单元为-(CH2)r(V(CH2)p)q-，其中，r为0至10的整数，p为0至12的整数，q为1至20的整数，V为单键、-O-或S-，
键合单元为
Figure BDA0003147490830000171
其中，L1为单键或C2-30烯基，R11为H或C1-10烷基，L2为C2-30烯基；
Rv为-NH2、N3、取代或未取代的C1-12烷基、C1-12炔基、C1-3烷氧基、取代或未取代的C3-20杂芳基、C3-20杂环基或取代或未取代的C5-20芳基，
其中，在C1-12烷基、C3-20杂芳基、C3-20杂环基或C5-20芳基被取代的情况下，存在于C3-20杂芳基、C3-20杂环基或C5-20芳基的一种以上的氢原子分别独立地被OH、＝O、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯氧基、羧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基羰基、甲酰基、C3-8芳基、C5-12芳氧基、C5-12芳基羰基或C3-6杂芳基取代。
在本发明的一实施方式中，上述化学式IV的Xa以及Xa'可分别独立地为键或C1-3烷基。
在本发明的一实施方式中，上述化学式IV的Z可选自由H、
Figure BDA0003147490830000181
以及-(CH2)m-OCH3组成的组中，
R8、R9以及R10可分别独立地选自由H、C1-3烷基以及C1-3烷氧基组成的组中，m可以为1至6。
在本发明的一实施方式中，上述化学式IV的W可以为-C(O)-、-C(O)NR”'-或-C(O)O-，其中，R”'可为H或C1-8烷基。
在本发明的一实施方式中，上述化学式IV的L可以为选自由支化单元(branchingunit)、连接单元(connection unit)以及键合单元(binding unit)组成的组中的一种以上的单元或这些单元的组合，
其中，连接单元可用于连接W与键合单元、W与支化单元、支化单元与支化单元或者支化单元与键合单元，
其中，支化单元可用于连接连接单元与W或者连接单元与另一连接单元，支化单元可以为C2-8烯基(其中，烯基的碳原子可以被一个或多个选自由N、O以及S组成的组中的杂原子取代，烯基还可以被一个或多个C1-6烷基取代)、亲水性(hydrophilic)氨基酸、-C(O)-、-C(O)NR””-、-C(O)O-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-C(O)-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-C(O)-(其中，R””为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C5-20芳基，s、t、u以及v分别独立地为0至5的整数)，
连接单元可以为-(CH2)r(V(CH2)p)q-，其中，r可以为0至10的整数，p可以为0至12的整数，q可以为1至20的整数，V可以为单键或-O-，键合单元可以为
Figure BDA0003147490830000182
Figure BDA0003147490830000183
其中，L1可以为单键或C2-8烯基，R11可以为H或C1-6烷基，L2可以为C2-8烯基；其中，连接单元可以为-(CH2)r(V(CH2)p)q-，其中，r可以为0至8的整数，p可以为1至12的整数，q可以为1至10的整数，V可以为单键或-O-。
在本发明的一实施方式中，上述吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物可以为选自由
Figure BDA0003147490830000191
Figure BDA0003147490830000201
Figure BDA0003147490830000211
Figure BDA0003147490830000212
以及
Figure BDA0003147490830000221
组成的组中的一种。
在本发明的另一实施方式中，提供具有下述化学式V的结构的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物：
化学式V：
Figure BDA0003147490830000222
在上述式中，
虚线、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、R7'、X’、Y'分别与上述化学式I的化合物的定义相同，
Xa、G、Z、W、L、Xa'、G'、Z'分别与上述化学式IV的化合物的定义相同；
Ligand为抗原结合部分。
在本发明的一实施方式中，上述化学式V的Ligand可以为蛋白质。
在本发明的一实施方式中，上述蛋白质可以为寡肽、多肽、抗体、抗原性多肽的片段或人工抗体(repebody)。
在本发明的一实施方式中，上述化学式V的Ligand可以为抗体，其中，抗体可以为抗HER2抗体、抗DLK1抗体、抗ROR1抗体、抗MUC1抗体、CD19抗体或抗CD276抗体。
在本发明的一实施方式中，上述蛋白质可具有能够被类异戊二烯转移酶识别的一个以上的氨基酸基序，即，蛋白质的C-末端(片段、其类似物或衍生物)可以与能够被类异戊二烯转移酶识别的氨基酸基序相结合。并且，上述蛋白质与氨基酸基序之间还可以包含由氨基酸、寡肽或多肽构成的间隔单元。在本发明的一实施方式中，上述蛋白质通过氨基酸基序与连接体共价结合。在本发明的一实施方式中，上述氨基酸基序可以与蛋白质的C-末端共价结合，或者与至少一种共价结合在蛋白质的C-末端的间隔单元共价结合。蛋白质可以直接与氨基酸基序共价结合或者通过与间隔单元共价结合来与氨基酸基序相连接。上述氨基酸间隔单元由1个至20个氨基酸构成，其中，优选为甘氨酸(Glycin)单元。
在本发明的一实施方式中，上述蛋白质的C-末端为抗体的轻链或重链的C-末端。
在本发明的一实施方式中，上述蛋白质为单克隆抗体。
在本发明的一实施方式中，上述类异戊二烯转移酶可以为法尼基蛋白转移酶(farnesyl protein transferase，FTase)或香叶烯基转移酶(geranylgeranyltransferase，GGTase)。
在本发明的一实施方式中，上述类异戊二烯转移酶包括法尼基蛋白转移酶或香叶烯基转移酶，它们分别伴随向法呢基或叶草基-叶草基残基的靶蛋白质的(多个)C-末端半胱氨酸的转移。香叶烯基转移酶可分为香叶烯基转移酶I以及香叶烯基转移酶II。法尼基蛋白转移酶以及香叶烯基转移酶I可识别CAAX基序。
在本发明的一实施方式中，上述氨基酸基序可以为CYYX、XXCC、XCXC或CXX，其中，C可以为半胱氨酸，Y可以为脂肪族氨基酸，X可以为用于决定类异戊二烯转移酶的底物特异性的氨基酸。
在本发明的一实施方式中，具有上述氨基酸基序的蛋白质选自由A-HC-(G)ZCVIM、A-HC-(G)ZCVLL、A-LC-(G)ZCVIM以及A-LC-(G)ZCVLL组成的组中，上述A表示抗体，HC表示重链，LC表示轻链，G表示甘氨酸单元，z为0至20的整数。
在本发明的一实施方式中，类异戊二烯转移酶不仅可以识别异底物(isosubstrate)，还可以识别底物。异底物是指底物被变形的底物类似物。类异戊二烯转移酶在蛋白质的C-末端中使特定氨基酸基序(例如：CAAX基序)烷基化(参照：BenjaminP.DuckwoRth et al，ChemBioChem 2007，8，98；Uyen T.T.Nguyen et al，ChemBioChem2007，8，408；Guillermo R.Labadie et al，J.Org.Chem.2007，72(24)，9291；JamesW.Wollack et al，ChemBioChem 2009，10，2934)。官能化蛋白质在(多个)C-末端半胱氨酸中可通过烷基化使用类异戊二烯转移酶以及异底物来生成。
例如，C-末端CAAX基序的半胱氨酸残基可通过使用类异戊二烯转移酶与异底物进行反应。在特定情况下，AAX接着可被蛋白酶去除。所获得的半胱氨酸接着可由酶在羧基末端被甲基化(参照：Iran M.Bell，J.Med.Chem.2004，47(8)，1869)。
本发明的蛋白质可使用本技术领域中公知的任何分子生物或细胞生物法来制备。例如，可使用瞬时转染法。对可被类异戊二烯转移酶识别的特定氨基酸基序进行编码的基因序列可通过使用标准聚合酶链式反应(PCR)技术被插入至公知的质粒载体，以使在其C-末端表达具有特定氨基酸基序的蛋白质(片段或其类似物)。像这样，可表达具有可被类异戊二烯转移酶识别的一个以上的氨基酸基序的蛋白质。
在本发明的一实施方式中，在蛋白质为单克隆抗体的情况下，单克隆抗体的一个以上的轻链、单克隆抗体的一个以上的重链或两者可包含具有可被类异戊二烯转移酶识别的氨基酸基序的氨基酸位点，本技术领域的技术人员可立即选择使感兴趣的靶选择性结合的蛋白质(例如：受试者的靶细胞)。
在本发明的一实施方式中，可包含与感兴趣的靶特异性结合的抗体或抗原片段。
在本发明的一实施方式中，上述氨基酸基序为CYYX、XXCC、XCXC或CXX(其中，C为半胱氨酸，Y为脂肪族氨基酸，X为决定类异戊二烯转移酶的底物特异性的氨基酸)，优选地，上述氨基酸基序为CYYX。
在本发明的另一实施方式中，提供包含吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物的用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物。
在本发明的另一实施方式中，提供用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，包含：吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物；以及药学上可接受的赋形剂。
在本发明的另一实施方式中，提供用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，包含：吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物；一种以上的治疗共作用剂(therapeutic co-agent)；以及药学上可接受的赋形剂。
在本发明的一实施方式中，上述治疗共作用剂可以为对增殖性疾病具有预防、改善或治疗效果的作用剂、可减少给药增殖性疾病治疗剂时出现的副作用的表达的作用剂或者具有免疫力增强效果的作用剂等，但并不限定于此，是指只要是当与吡咯并苯并二氮杂一起以配合剂的形态适用时，具有治疗上有用的效果、和/或进一步提高吡咯并苯并二氮杂的稳定性、和/或降低给药吡咯并苯并二氮杂时出现的副作用、和/或通过增强免疫力来使治疗效果最大化的制剂，可配合任何一种来适用。
在本发明的另一实施方式中，提供吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物在治疗增殖性疾病中的用途。
在本发明的另一实施方式中，提供增殖性疾病的治疗方法，包括向个体给药吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物的步骤。即，在本发明中，提供具有增殖性疾病的个体中的增殖性疾病的治疗方法，包括向个体给药有效量的用于治疗增殖性疾病的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物的步骤。
在本发明的一实施方式中，提供包括向患者给药上述药学组合物的步骤的癌症的治疗方法。
在本发明的一实施方式中，上述增殖性疾病可选自由新生物、肿瘤、癌症、白血病、干癣、骨病、纤维增殖性障碍以及动脉粥样硬化组成的组中，但并不限定于此。在本发明的一实施方式中，上述增殖性疾病是指无论是在试管内或生物体内，不需要的过度或异常的细胞不会受到不希望的控制的细胞增殖相关疾病，如新生物或过形成性生长。作为新生物以及肿瘤的例，可列举组织细胞瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、骨瘤等。
在本发明的一实施方式中，上述癌症可选自由肺癌、小细胞肺癌、胃肠癌、大肠癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肝癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤以及黑色素瘤组成的组中，但并不限定于此，吡咯并苯并二氮杂只要能够产生治疗效果的癌瘤，均可适用。
定义
在本说明书中适用如下定义：
在本说明书中，“缀合物(conjugates)”是指与细胞毒性化合物的一个以上的分子供价结合的细胞结合剂。其中，“细胞结合剂”为对生物靶标具有亲和度的分子，例如，为配体、蛋白质、抗体，具体可以为单克隆抗体、蛋白质或抗体片段、肽、寡核苷酸、低聚糖，结合剂具有将生物学活性化合物诱导至生物靶标的功能。在本发明的一实施方式中，缀合物能够以通过细胞表面抗原来靶向肿瘤细胞的方式设计而成。抗原可以为从异常细胞类型中过表达或表达的细胞表面抗原。具体地，靶抗原可以是仅在增殖性细胞(例如，肿瘤细胞)上表达的。靶抗原通常可以基于增殖性组织与正常组织之间的不同表达来选择。在本发明中，配体与连接体相结合。
在本说明书中，“抗体”是可以通过位于免疫球蛋白分子的可变区域的至少一个抗原识别部位与碳水化物、多核苷酸、脂质、多肽等靶标特异性结合的免疫球蛋白分子。在本说明书中所使用的术语“抗体”不仅包括无损伤多克隆或单克隆抗体，而且还包括具有与规定的抗原特异性结合的能力的无损伤抗体的任意抗原结合部分(例如，“抗原结合片段”)或其单链、包含抗体的融合蛋白以及包含抗原识别部位的免疫球蛋白分子的任意其他变形的构型，例如，非限制性地，Fab；Fab'；F(ab')2Fd片段；Fv片段；单域抗体(dAb)片段；单离的互补性决定区(CDR)；单链(scFv)以及单域抗体(例如，鲨鱼及骆驼类抗体)、最大抗体、微抗体、内抗体、双抗体、三抗体、四抗体、v-NAR以及双-scFv(例如，参考文献[Hollinger andHudson，2005，Nature Biotechnology 23(9)：1126-1136])。
抗体包括任意类型的抗体，例如，免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)或免疫球蛋白M(IgM)(或其亚类)[0207]，抗体不必是任意特定类型。根据抗体的重链的恒定区的氨基酸序列，可将免疫球蛋白分配到不同类型。存在五种主要类型的免疫球蛋白：免疫球蛋白A、免疫球蛋白D(IgD)、免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G以及免疫球蛋白M，其中，几种可进一步被分为亚类(亚型)，例如，免疫球蛋白G1、免疫球蛋白G2、免疫球蛋白G3、免疫球蛋白G4、免疫球蛋白A1以及免疫球蛋白A2。相应于不同类型的免疫球蛋白的重链(HC)恒定域分别被称为α、δ，ε、γ以及μ。不同类型的免疫球蛋白的亚单元结构及三维配位是众所周知的。本发明的抗体可通过利用相关技术领域中公知的技术，例如，重组技术、噬菌体展示技术、合成技术或上述技术的组合或相关技术领域中熟知的其他技术来制备。
在本说明书中“单离的抗体”是指实际上并不包含具有不同的抗原特异性的其他抗体的抗体，实际上可能不包含其他细胞物质和/或化学物质。
在本说明书中“生物靶标”是指位于肿瘤、癌细胞、细胞外间质(extracellularmatrix)表面的抗原。
在本说明书中“连接体”是指使细胞毒性化合物与配体供价结合的化合物。在本发明的一实施方式中，连接体可使用在PCT/US2016/063564号及PCT/US2016/063595号中公开的连接体。
在本说明说中，“个体”是指人类和非人类动物，尤其包括哺乳动物。作为个体的例，可列举人类个体，例如，是包括在本说明书中所记载的具有障碍，更具体地为患有癌症的人类患者或者正常个体的概念。“非人类动物”包括所有脊椎动物，例如，非哺乳动物(例如，鸡、两栖类、爬虫类)，以及哺乳动物，例如，非人类灵长类、家畜和/或对农业有用的动物(例如，羊、狗、猫、牛、猪等)，以及啮齿类(例如，小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等)。在特定实例中，个体为人类患者。
在本说明书中“治疗”或“进行治疗”是指治疗性治疗以及预防学或预防措施。需要治疗的个体包括已患疾病的个体及易患疾病的个体或需预防疾病的个体。因此，使用于疾病或需要治疗的个体的情况下，相对于未处理个体，上述术语包括阻止或减缓疾病的进展、预防症状、降低疾病和/或症状的严重程度或缩短疾病持续时间，但并不限定于此。
在本说明书中“给药”或“进行给药”是指通过任意适当的途径提供和/或接触和/或传递化合物或多种化合物，以实现所期望的效果。给药途径可包括通过口服、舌下、胃肠外(例如，静脉内、皮下、皮内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、脊髓内、病变内或颅内注射)、经皮、局部、颊侧、直肠、阴道、鼻腔、眼科、吸入以及移植物的给药，但并不限定于此。
在本说明书中“未取代或取代的”是指可未取代或可取代的母体基团(parentgroup)，“取代的”是指具有一个以上的取代基的母体基团，“取代基”是指与母体基团供价结合或融合于母体基团的化学部分。
在本说明说中“卤代”是指氟、氯、溴、碘等。
在本说明书中“烷基”为从脂肪族或脂环族、饱和或不饱和(不饱和、完全不饱和)烃化合物的碳原子去除氢原子来获得的一价部分，作为饱和烷基的例，可列举甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基等，作为饱和直链型烷基的例，可列举甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基(戊基)、正己基、正庚基等，作为饱和支链型烷基的例，可列举异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基，新戊基等。
在本说明书中，“烷氧基”是指-OR[其中，R为烷基]，可列举甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等。
在本说明书中，“芳基”是指从具有环原子的芳香族化合物的芳香环原子去除氢原子来获得的一价部分。
在本说明书中，“烯基”为具有一个以上的碳碳双键的烷基，作为不饱和烯基的例，可列举乙烯基(乙烯基，-CH＝CH2)、1-丙烯(-CH＝CH-CH3)、2-丙烯、异丙烯、丁烯基、戊烯基、己烯基等。
在本说明书中，“炔基”为具有一个以上的碳碳三键的烷基，作为不饱和炔基的例，可列举乙炔基及2-丙炔基等。
在本说明书中，“羧基”是指-C(＝O)OH。
在本说明书中，“甲酰基”是指-C(＝O)H。
在本说明书中，“芳基”涉及从芳香族化合物的芳香环原子去除氢原子来获得的一价部分。例如，“C5-7芳基”作为具有5个至7个环原子的部分，指从芳香族化合物的芳香环原子去除氢原子来获得的一价部分，“C5-10芳基”作为具有5个至10个环原子的部分，指从芳香族化合物的芳香环原子去除氢原子来获得的一价部分。其中，前缀(C5-7、C5-10等)是指环原子的数或环原子数的范围，而与是否为碳原子还是杂原子无关。例如，“C5-6芳基”涉及具有5个或6个环原子的芳基。其中，环原子可均为碳原子，如“羧芳基”。作为羧芳基的例，包括衍生自苯、萘、薁、蒽、菲、萘并萘以及芘的那些，但并不限定于此。作为包含至少一个为芳香环的融合环的芳基的例，包括衍生自茚满、茚、异茚、四氢萘、苊、芴、非那烯、醋菲以及醋蒽的基团，但并不限定于此。或者，环原子可包含一个以上的杂原子，如“杂芳基”。
在本说明书中，“杂芳基”为包含一个以上的杂原子的芳基，例如，吡啶、嘧啶、苯并噻吩、呋喃基、二氧杂丙基、吡咯基、恶唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基等，更具体地，可列举苯并呋喃、异苯并呋喃、吲哚、异吲哚、吲嗪、吲哚啉、异吲哚啉、嘌呤(腺嘌呤或鸟嘌呤)、苯并咪唑、吲唑、苯并恶唑、苯并异恶唑、苯并二茂、苯并呋喃、苯并三唑、苯并噻呋喃、苯并噻唑、衍生自苯并噻二唑的具有两个融合环的C9、色烯、异色烯、色满、异色满、苯并二恶烷、喹啉、异喹啉、喹嗪、苯并恶嗪、苯二嗪、吡啶并吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、酞嗪、萘啶、衍生自蝶啶的具有两个融合环的C10、衍生自苯二氮卓的具有两个融合环的C11、咔唑、二苯并呋喃、二苯并噻吩、咔啉、嘧啶、衍生自吡啶并吲哚的具有三个融合环的C13、吖啶、呫吨、噻吨、氧蒽、吩恶噻、吩嗪、吩恶嗪、吩噻嗪、噻蒽、菲啶、邻菲咯啉、衍生自吩嗪的具有三个融合环的C14。
在本说明书中，“环烷基”是作为环基的烷基，涉及从环(cyclic)烃化合物的脂环族环原子去除氢原子来获得的一价部分。作为环烷基的例，包括衍生自以下的那些，但并不限定于此：
饱和单环烃化合物：环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、甲基环丙烷、二甲基环丙烷、甲基环丁烷、二甲基环丁烷、甲基环戊烷、二甲基环戊烷以及甲基环己烷；
不饱和单环烃化合物：环丙烯、环丁烯、环戊烯、环己烯、甲基环丙烯、二甲基环丙烯、甲基环丁烯、二甲基环丁烯、甲基环戊烯、二甲基环戊烯以及甲基环己烯；以及
饱和杂环烃化合物：降蒈烷、降蒎烷、降莰烷。
在本说明书中，“杂环基”涉及从杂环化合物的环原子去除氢原子来获得的一价部分。
在本说明书中，前缀(例如，C1-12、C3-8等)是指环原子的数或环原子的数的范围，而与是否为碳原子还是杂原子无关。例如，在本说明书中，所使用的术语“C3-6杂环基”涉及具有3个至6个环原子的杂环基。
作为单环杂环基的例，包括衍生自以下的那些，但并不限定于此：
N1：氮丙啶、吖丁啶、吡咯啶、吡咯啉、2H-或3H-吡咯、哌啶、二氢吡啶、四氢吡啶、吖庚因；
N2：咪唑啉啶、吡唑啶、咪唑啉、吡唑啉、哌嗪；
O1：环氧乙烷、氧杂环丁烷、氧戊环、呋喃、恶烷、二氢吡喃、吡喃、恶庚因；
O2：二氧戊环、二恶烷以及二氧杂环庚烷；
O3：三恶烷；
N1O1：四氢唑、二氢唑、四氢异唑、二氢异唑、吗啉、四氢恶嗪、二氢恶嗪、恶嗪；
S1：硫杂环丙烷、硫化环丙烷、硫杂环戊烷、硫化环戊烷、硫杂环庚烷；
N1S1：噻唑啉、噻唑烷、硫吗啉；
N2O1：噁二嗪；
O1S1：氧硫杂环戊烯、氧硫杂环己烷；以及
N1O1S1：恶噻嗪。
在本说明书中，作为“药学上可接受的盐”，可使用通过游离酸(free acid)形成的酸加成盐，作为上述游离酸，可使用有机酸或无机酸。
上述有机酸并不限定于此，包括柠檬酸、醋酸、乳酸、酒石酸、马来酸、富马酸、甲酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、苯甲酸、葡萄糖酸、甲磺酸、乙醇酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸、谷氨酸以及天冬氨酸。并且，上述无机酸并不限定于此，包括盐酸、溴酸、硫酸以及磷酸。
例如，在化合物具有阴离子或可能为阴离子的官能团的情况下(例如-COOH可以为-COO-)，可利用适当的阳离子来形成盐。作为适当的无机阳离子的例，包括：碱金属离子，如Na+及K+；碱土金属阳离子，如Ca2+及Mg2+；以及其他阳离子，如Al3+，但并不限定于此。作为适当的有机阳离子的例，包括铵离子(即，NH4+)及取代的铵离子(如NH3R+、NH2R2 +、NHR3 +、NR4 +)，但并不限定于此。
作为一些适当的取代的铵离子的例有衍生自以下的那些：乙胺、二乙胺、二环己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄胺、苯基苄胺、胆碱、葡甲胺以及三乙醇胺，不仅如此，还有氨基酸，如赖氨酸及精氨酸。作为通常的季铵离子的例有N(CH3)4 +。
在化合物具有阳离子或可能为阳离子的官能团的情况下(例如，-NH2可以为-NH3 +)，可利用适当的阴离子来形成盐。作为适当的无机阴离子的例，包括衍生自下述无机酸的那些，但并不限定于此：可列举盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、亚硫酸、硝酸、亚硝酸、磷酸以及亚磷酸等。
作为适当的有机阴离子的例，包括衍生自下述有机酸的那些，但并不限定于此：可列举2-乙酰氧基苯甲酸、乙酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑磺酸、肉桂酸、柠檬酸、依地酸、乙二磺酸、乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、谷氨酸、乙醇酸、羟基马来酸、羟基萘羧酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、甲磺酸、粘液酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、泛酸、苯基乙酸、苯磺酸、丙酸、丙酮酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、酒石酸、甲苯磺酸以及戊酸等。作为适当的聚合物有机阴离子的例，包括衍生自下述聚合物酸的那些，但并不限定于此：可列举单宁酸、羧甲基纤维素等。
在本说明书中，“溶剂化物(solvate)”是指本发明的化合物与溶剂分子(solventmolecules)之间的分子复合物(molecular complex)，作为溶剂化物的例，包括与水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲基亚砜(dimethylsulfoxide)、乙酸乙酯、乙酸、乙醇胺或其混合溶剂相结合的本发明的化合物，但并不限定于此。
方便或优选地，可以制备、纯化和/或处理相当于活性化合物的溶剂化物。术语“溶剂化物”在本说明书中以常规的含义使用，是指溶质(如，活性化合物、活性化合物的盐)及溶剂的络合物。在溶剂为水的情况下，可将溶剂化物方便地称为水合物，如一水化物、二水化物、三水化物等。
上述本发明的药学组合物可包含药学上可接受的载体。通常，药学上可接受的载体可包括缓慢代谢的巨大分子，例如，蛋白质、多糖类、聚乳酸、聚乙醇酸、聚合氨基酸、氨基酸共聚物、脂质凝聚物等，本技术领域的技术人员可适当选择使用这些药学上可接受的载体。
包含药学上可接受的载体的上述组合物可以为口服或胃肠外的各种剂型。在进行制剂化的情况下，通过使用通常使用的填充剂、增量剂、结合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂等的稀释剂或赋形剂来制备。
用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，这些固体制剂通过将一种以上的化合物与至少一种以上的赋形剂，例如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等混合来制备。并且，除了简单的赋形剂之外，还可使用润滑剂，如硬脂酸镁、滑石等。
作为用于口服给药的液相制剂有悬浮剂、内用液剂、乳剂、糖浆剂等，除了通常使用的作为简单稀释剂的水、液体石蜡之外，可包括多种赋形剂，如湿润剂、甜味剂、芳香剂、保鲜剂等。
用于胃肠外给药的制剂包括灭菌水溶液、非水溶剂、悬浮剂、乳剂、冷冻干燥剂、栓剂。作为非水溶剂、悬浮溶剂可使用丙二醇(propylene glycol)、聚乙二醇、橄榄油等植物油、油酸乙酯等可注射的酯等。作为栓剂的基质可使用witepsol、聚乙二醇、吐温(tween)61、可可油脂、月桂酸脂、甘油明胶等。
上述药学组合物可具有选自由注射剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮剂、内用液剂、乳剂、糖浆剂、灭菌水溶液、非水溶剂、悬浮剂、乳剂、冷冻干燥剂以及栓剂组成的组中的一种剂型。
为了静脉内、皮肤或皮下注射等，活性成分可以为无热原(pyrogen-free)的具有适当pH、等渗性以及稳定性的用于胃肠外给药的、可接受的水溶液的形态。本技术领域的技术人员可通过使用诸如氯化钠水溶液、林格氏液、乳酸林格氏液等的等渗赋形剂来制备适当的溶液，并且可根据需要包括保鲜剂、稳定化剂、缓冲剂、抗氧化剂或其他不同的添加剂。适合于注射的固体形态也可制备成乳液或通过脂质体进行胶囊化的多肽的形态。
在本说明书中所使用的语句“有效量”或“治疗有效量”是指用于实现所需治疗结果(对于给药量、给药时间及方式)的量。有效量是至少赋予个体治疗益处所需的活性剂的最小量，小于毒性量。例如，给药量范围为每位患者约100ng/kg至约100mg/kg，更典型地能够以约1μg/kg至约10mg/kg的范围给药。在活性化合物为盐、酯、酰胺、前药(prodrug)等的情况下，给药量以某化合物为基准计算，因此所使用的实际重量按比例增加。本发明的吡咯并苯并二氮杂化合物能够以每单位剂型(dosage form)包含0.1mg至3000mg、1mg至2000mg、10mg至1000mg的活性成分的方式被剂型化，但并不限定于此。可给药活性成分，以获得约0.05μM至100μM、1μM至50μM、5μM至30μM的活性化合物的峰等离子浓度。例如，任选地，在食盐水中通过静脉内注射0.1w/v％至5w/v％的活性成分的溶液来进行给药。
在药学组合物中，活性化合物的浓度可通过药物的吸收、非活性化、排出率以及本技术领域的普通技术人员已知的其他因素来确定。给药量可根据症状或疾病的严重程度而不同。并且，对于某一特定患者的给药量及给药方法可通过综合考虑患者的症状或疾病的程度、必要性、年龄、对药物的反应性等并根据给药监督人的职业判断来调整，在本发明中提出的浓度范围仅是作为一例，所请求保护的组合物的实施方式并不限定于此。并且，活性成分可以给药一次，或者可以分数次以较小给药量给药。
本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物或吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物-连接体化合物、吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物-连接体-配体缀合化合物可用于治疗增殖性疾病，尤其癌疾病。术语“增殖性疾病”是指无论是在试管内或生物体内，不希望的过度或异常的细胞的不需要的或不受控制的细胞增殖，如新生物或过形成性生长。例如，增殖性疾病包括新生物、肿瘤、癌症、白血病、干癣、骨病、纤维增殖性障碍、动脉粥样硬化等，可包括阳性、所有恶性或恶性细胞增殖，但并不限定于此。上述癌症可以为肺癌、小细胞肺癌、胃肠癌、大肠癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肝癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤或黑色素瘤，但并不限定于此
在本说明书中，除非另有定义，结合本发明所使用的科学术语及专业术语具有属于本技术领域的普通技术人员通常所理解的含义。
本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物以及吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物可以使用本说明书提供的技术以及本技术领域的普通技术人员的知识来制备。
例如，在本说明书中包含PCT/US2016/063564号及PCT/US2016/063595号中所描述的有关连接体的全部内容作为参照，其中，即使没有描述，还可根据在本说明书中所引用的或本技术领域的普通技术人员公知的参考文献来制备。
在本发明的一实施方式中，本发明的吡咯并苯并二氮杂衍生物和其前体、吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物以及吡咯并苯并二氮杂-连接体-配体缀合物可通过如下过程来合成。
吡咯并苯并二氮杂前体-连接体以及吡咯并苯并二氮杂前体-连接体-配体
缀合物的合成途径
Figure BDA0003147490830000341
Figure BDA0003147490830000351
吡咯并苯并二氮杂衍生物和其前体的合成途径
Figure BDA0003147490830000361
以下，通过实施例进一步详细说明本发明。但是，下述实施例仅用于理解本发明，本发明的保护范围并不限定于此。
实施例1：化合物4的制备
Figure BDA0003147490830000371
化合物1的制备
将三甘醇(7.0g，46.6mmol)溶解于二氯甲烷(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入氧化银(I)(16g，69.9mmol)和苄基溴(6.1mL，51.3mmol)。将反应溶液的温度升温至常温并搅拌20小时后，利用硅藻土过滤。将过滤的溶液浓缩后，经柱层析纯化得到化合物1(8.2g，73％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24-7.36(m，5H)，4.57(s，2H)，3.76-3.56(m，12H)，2.60(br s，1H)。
化合物2的制备
将化合物1(8.0g，33.3mmol)稀释于甲苯(40mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入叔丁醇钾(1M的四氢呋喃溶液，99mL，99mmol)和溴乙酸甲酯(15mL，166mmol)。将反应溶液的温度升温至常温并搅拌18小时。将盐水(200mL)加入反应溶液后，利用二氯甲烷(3×200mL)萃取。合并的有机层用盐水(200mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物2(5.9g，56％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.25-7.36(m，5H)，4.57(s，2H)，4.14(s，2H)，3.76-3.62(m，12H)。
化合物3的制备
将化合物2(9.0g，28.8mmol)溶解于甲醇(200mL)后，加入钯/炭(10％w/w，900mg)。在常温、氢大气条件下，将反应溶液搅拌2小时。反应溶液用硅藻土过滤后，经浓缩得到化合物3(5.18g，81％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.18(s，2H)，3.78-3.65(m，12H)，3.64-3.60(m，1H)。
化合物4的制备
将化合物3(5.0g，22.5mmol)溶解于四氢呋喃(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入四溴甲烷(11g，33.7mmol)和三苯基膦(7.3g，27.0mmol)。将反应溶液搅拌3小时后，用乙酸乙酯(100mL)稀释，用蒸馏水(50mL)洗涤。合并的有机层用无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物4(3.4g，53％)。
实施例2：化合物10的制备
Figure BDA0003147490830000381
化合物5的制备
将5-羟基间苯二甲酸二甲酯(10g，47.6mmol)溶解于四氢呋喃(250mL)后，在-30℃的温度、氮大气条件下，缓慢加入氢化铝锂(1M的四氢呋喃溶液，95.2mL，95.2mmol)。将反应溶液的温度缓慢升温至常温并搅拌5小时后，将温度降温至0℃，向反应溶液中缓慢加入蒸馏水(3.6mL)、氢氧化钠水溶液(15％w/w，3.6mL)以及蒸馏水(10.8mL)。过滤所生成的固体，将剩余的有机层浓缩后，经柱层析纯化得到化合物5(4.4g，60％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.18(s，1H)，6.65(s，1H)，6.57(s，2H)，5.05(br s，2H)，4.37(s，4H)。
化合物6的制备
将化合物5(6.8g，44.1mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(40mL)后，加入咪唑(18.0g，265mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(21.2g，141mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌16小时后，加入乙酸乙酯(200mL)。有机层依次用蒸馏水(200mL)和盐水(200mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物6(20.6g，94％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.84(s，1H)，6.69(s，2H)，4.66(s，4H)，0.97(s，9H)，0.93(s，18H)，0.17(s，6H)，0.08(s，12H)。
化合物7的制备
将化合物6(11.0g，22.1mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺/蒸馏水(150mL/10mL)后，加入乙酸钠(2.0g，24.3mmol)，在70℃的温度、氮大气条件下，搅拌反应溶液。3小时后，将反应温度降温至常温，加入乙酸乙酯(300mL)。有机层依次用蒸馏水(200mL)和盐水(200mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物7(7.6g，89％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.81(s，1H)，6.69(s，2H)，5.09(s，1H)，4.68(s，4H)，0.93(s，18H)，0.10(s，12H)。
化合物8的制备
将化合物7(2.7g，7.3mmol)和化合物4(2.5g，8.8mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)后，加入碳酸铯(3.4g，11.0mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌16小时。反应溶液用蒸馏水(100mL)稀释后，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。所萃取的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物8(2.3g，49％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.85(s，1H)，6.76(s，2H)，4.68(s，4H)，4.16(s，2H)，4.14-4.08(m，2H)，3.88-3.82(m，2H)，3.76-3.64(m，11H)，0.93(s，18H)，0.09(s，12H)。
化合物9的制备
将化合物8(2.25g，3.83mmol)溶解于四氢呋喃(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入四丁基氟化铵(1M的四氢呋喃溶液，8.0mL，8.0mmol)。搅拌1小时后，利用饱和氯化铵水溶液(100mL)稀释，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物9(1.4g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.98(s，1H)，6.83(s，2H)，4.62(s，4H)，4.16(s，2H)，4.12(t，J＝4.8Hz，2H)，3.83(t，J＝4.4Hz，2H)，3.74(s，3H)，3.74-3.64(m，13H)。
化合物10的制备
将化合物9(1.0g，2.79mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(1.2mL，8.37mmol)和甲磺酰氯(0.5mL，6.14mmol)。搅拌1小时后，利用蒸馏水(30mL)稀释，用二氯甲烷(2×50mL)萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得到化合物10(粗品(crude)1.54g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.01(s，1H)，6.97(s，2H)，5.18(s，4H)，4.16-4.12(m，4H)，3.83(t，J＝4.8Hz，2H)，3.74-3.64(m，11H)，2.97(s，6H)。
实施例3：化合物16的制备
Figure BDA0003147490830000401
化合物13的制备
将化合物11(48.7g，132mmol)和化合物12(25g，110mmol，化合物12利用韩国公开专利第10-2018-0110645号中描述的方法制备)溶解于二氯甲烷(450mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入1-羟基苯并三唑(19.3g，143mmol)、N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(29.5g，154mmol)以及三乙胺(27mL，194mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌12小时后，向反应溶液中加入饱和氯化铵水溶液(400mL)，利用二氯甲烷(2×300mL)萃取。合并的有机层用盐水(400mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物13(57.1g，89％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)(旋转异构体(rotamers))δ7.69(s，1H)，6.73(s，1H)，4.98(s，1H)，4.83(s，1H)，4.58(bs，1H)，3.89(s，4H)，3.75(bs，1H)，3.71(s，1H)，3.31-3.27(m，1H)，2.82-2.53(m，2H)，1.30-1.26(m，3H)，1.10(d，J＝7.6Hz，18H)，0.91(s，9H)，0.09(s，6H)。
化合物14的制备
将化合物13(29.5g，51.0mmol)溶解于乙醇(220mL)后，加入锌粉(Zinc dust，66.6g，1.01mol)和甲酸(5％的乙醇溶液(EtOH)，500mL)。在常温条件下，将反应溶液搅拌30分钟后，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(1L)。有机层依次用蒸馏水(500mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(500mL)以及盐水(500mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物14(27.9g，99％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)(旋转异构体)δ6.71(s，1H)，6.25(s，1H)，4.96(s，1H)，4.89(s，1H)，4.53(bs，1H)，4.21-4.09(m，4H)，3.71(s，3H)，3.62(bs，1H)2.73-2.63(m，2H)，1.29-1.21(m，3H)，1.10(d，J＝7.2Hz，18H)，0.87(s，9H)，0.02(s，6H)。
化合物15的制备
将化合物14(27.9g，50.9mmol)溶解于二氯甲烷(300mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(9.0mL，111.3mmol)和氯甲酸烯丙酯(5.9mL，55.5mmol)。将反应溶液搅拌1小时后，将反应温度升温至常温，浓缩后，经柱层析纯化得到化合物15(31.8g，98％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)(旋转异构体)δ8.67(bs，1H)，7.75(s，1H)，6.78(s，1H)，5.97-5.89(m，1H)，5.32(d，J＝17.2Hz，1H)，5.21(d，J＝10.4Hz，1H)，4.98(s，1H)，4.90(bs，1H)，4.66-4.61(m，3H)，4.19-4.15(m，1H)，4.01(bs，1H)，3.86(bs，1H)，3.76(s，3H)，3.65(bs，1H)2.68(s，2H)，1.33-1.24(m，3H)，1.10(d，J＝6.8Hz，18H)，0.87(s，9H)，0.03(s，6H)。
化合物16的制备
将化合物15(31.8g，50.3mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺/蒸馏水(300mL/6mL)后，加入乙酸钠(5.0g，60.0mmol)，在70℃的温度、氮大气条件下，搅拌反应溶液。3小时后，将反应温度降温至常温，加入乙酸乙酯(300mL)。有机层依次用蒸馏水(200mL)和盐水(200mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物16(18.6g，77％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)(旋转异构体)δ8.71(bs，1H)，7.75(s，1H)，6.78(s，1H)，6.14(s，1H)，5.94-5.90(m，1H)，5.32(d，J＝17.2Hz，1H)，5.21(d，J＝10.4Hz，1H)，4.97(s，1H)，4.90(bs，1H)，4.64-4.58(m，3H)，4.18-4.15(m，1H)，4.01(bs，1H)，3.83(s，4H)，3.65(bs，1H)2.68(s，2H)，0.87(s，9H)，0.02(s，6H)。
实施例4：化合物19的制备
Figure BDA0003147490830000421
化合物17的制备
将化合物16(3.2g，6.70mmol)和化合物10(1.4g，2.79mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(1.9g，13.6mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物17(2.72g，76％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.88(br s，2H)，7.24(s，2H)，7.13(s，1H)，6.99(s，2H)，6.81(s，2H)，5.97-5.87(m，2H)，5.32(dd，J＝17.2，1.2Hz，1H)，5.21(dd，J＝10.0，1.2Hz，1H)，5.12(s，4H)，4.96(br，2H)，4.89(br，2H)，4.64-4.54(m，5H)，4.21-4.12(m，7H)，3.84(t，J＝4.4Hz，4H)，3.81(s，6H)，3.73-3.63(m，13H)，2.67(br，4H)0.86(s，18H)，0.01(s，6H)。
化合物18的制备
将化合物17(2.7g，2.12mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)后，加入四氢吡咯(0.43mL，5.29mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(98mg，0.085mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌6小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用二氯甲烷(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物18(1.7g，72％)。EI-MS m/z：[M+H]+1108.2，1/2[M+H]+554.7。
化合物19的制备
将化合物18(1.6g，1.44mmol)溶解于二氯甲烷(100mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.3mL，3.03mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.13mL，1.30mmol)，将反应溶液搅拌1小时。向反应溶液中加入蒸馏水(100mL)后，利用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物19(985mg，57％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(br s，1H)，7.26(s，1H)，7.09(s，1H)，6.97(s，1H)，6.95(s，1H)，6.83(s，1H)，6.74(s，1H)，6.23(s，1H)，5.99-5.88(m，1H)，5.33(dd，J＝17.2，1.6Hz，1H)，5.23(dd，J＝10.4，1.2Hz，1H)，5.14(s，2H)，5.10(s，2H)，4.97(br，2H)，4.90(br，2H)，4.65-4.58(m，3H)，4.22-4.10(m，8H)，3.87-3.82(m，4H)，3.82(s，3H)，3.75(s，3H)，3.74-3.64(m，16H)，2.68(br，4H)0.87(s，18H)，0.02(s，6H)。
实施例5：化合物24的制备
Figure BDA0003147490830000441
化合物21的制备
将化合物19(980mg，0.82mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(40mL)后，在-10℃的温度下，加入三光气(98mg，0.33mmol)和三乙胺(0.18mL，1.32mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(490mg，0.90mmol，化合物20利用韩国公开专利第10-2018-0110645号中描述的方法制备)溶解于干燥的四氢呋喃(5mL)，加入三乙胺(0.18mL，1.32mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。1小时后，加热回流反应溶液并搅拌12小时。反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物21(580mg，40％)。EI-MS m/z：[M+H]+1760.7，1/2[M+H]+880.6。
化合物22的制备
将化合物21(580mg，0.33mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入四氢吡咯(0.035mL，0.43mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(9mg，0.0082mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌2小时。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物22(455mg，82％)。EI-MS m/z：[M+H]+1676.7，1/2[M+H]+838.6。
化合物24的制备
将化合物22(450mg，0.27mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(15mL)后，在-10℃的温度下，加入三光气(32mg，0.11mmol)和三乙胺(0.12mL，0.81mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(216mg，0.30mmol，化合物23利用韩国公开专利第10-2018-0110645号中描述的方法制备)溶解于干燥的四氢呋喃(3mL)，加入三乙胺(0.12mL，0.81mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。1小时后，加热回流反应溶液并搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物24(293mg，45％)。EI-MS m/z：[M+H]+2243.8，1/2[M+H]+1122.5。
实施例6：化合物28的制备
Figure BDA0003147490830000461
化合物25的制备
将化合物24(293mg，0.12mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(3mL/3mL)，加入乙酸(8mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物25(180mg，68％)。EI-MS m/z：[M+H]+2204.4，1/2[M+H]+1102.8。
化合物26的制备
将化合物25(180mg，0.082mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，76mg，0.18mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌24小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物26(120mg，66％)。EI-MS m/z：[M+H]+2199.7，[M+Na]+2222.5。
化合物27的制备
将化合物26(120mg，0.055mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(1mL/3mL)后，在-40℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(20mg，0.55mmol)溶解于蒸馏水(1mL)的溶液。将反应温度缓慢升温至0℃并搅拌2小时。反应溶液用乙酸中和后，减压浓缩反应溶液，经高效液相色谱(HPLC)纯化和冷冻干燥得到白色固体化合物27(32mg，31％)。EI-MS m/z：[M+H]+1905.4，1/2[M+H]+953.8。
化合物28的制备
将化合物27(32mg，0.017mmol)稀释于二氯甲烷(3mL)后，在0℃的温度下，加入三氟乙酸(1mL)并搅拌2小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到白色固体化合物28(5.6mg)。EI-MS m/z：[M+H]+1805.4，1/2[M+H]+903.5。
实施例7：化合物32的制备
Figure BDA0003147490830000481
化合物29的制备
将化合物17(350mg，0.27mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(3mL/3mL)，加入乙酸(6mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物29(197mg，70％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.40(br s，2H)，7.29(s，2H)，6.93(s，1H)，6.87(s，2H)，6.74(s，2H)，5.95-5.85(m，2H)，5.29(dd，J＝17.2，1.2Hz，2H)，5.23-5.16(m，6H)，4.98(br s，2H)，4.89(br s，2H)，4.64-4.52(m，5H)，4.16(s，4H)，4.08-4.00(m，3H)，3.88-3.83(m，4H)，3.80(s，6H)，3.74-3.64(m，13H)，2.76-2.66(m，2H)，2.48-2.40(m，2H)。
化合物30的制备
将化合物29(190mg，0.18mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，185mg，0.44mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌18小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化得到化合物30(168mg，89％)。
化合物31的制备
将化合物30(100mg，0.096mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(1mL/3mL)后，在-40℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(5mg，0.12mmol)溶解于蒸馏水(1mL)的溶液。将反应温度缓慢升温至0℃并搅拌2小时。反应溶液用乙酸中和后，减压浓缩反应溶液，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物31(95mg，96％)。EI-MS m/z：[M+H]+1029.9，[M+Na]+1051.8。
化合物32的制备
将化合物31(40mg，0.039mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)后，加入四氢吡咯(0.01mL，0.12mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(2mg，0.0017mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化得到化合物32(8.1mg，25％)。EI-MS m/z：[M+H]+825.7，1/2[M+H]+413.4。
实施例8：化合物33的制备
Figure BDA0003147490830000491
化合物33的制备
将化合物30(50mg，0.048mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)后，加入四氢吡咯(0.01mL，0.12mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(2mg，0.0017mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化得到化合物33(5.4mg，13％)。EI-MS m/z：[M+H]+839.7，1/2[M+H]+420.4。
实施例9：化合物38的制备
Figure BDA0003147490830000501
化合物34的制备
将化合物2(3.6g，11.5mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(5mL/10mL)后，在0℃的温度下，加入将氢氧化锂(725mg，17.3mmol)溶解于蒸馏水(5mL)的溶液。搅拌2小时后，用1N的盐酸水溶液将pH调节至～2左右后，利用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥后，经过滤及浓缩得到化合物34(2.8g，81％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-7.20(m，5H)，4.56(s，2H)，4.12(s，2H)，3.77-3.58(m，12H)。
化合物36的制备
将化合物34(2.8g，9.36mmol)和化合物35(1.8g，8.51mmol，化合物35利用韩国公开专利第10-2018-0078329号中描述的方法制备)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(6mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入1-羟基苯并三唑(1.7g，12.8mmol)、N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(2.4g，12.8mmol)以及三乙胺(9mL，34.0mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌24小时后，向反应溶液中加入饱和氯化铵水溶液(100mL)，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物36(3.35g，78％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝8.0Hz，1H)，7.38-7.21(m，5H)，4.71-4.60(m，1H)，4.54(d，J＝2.0Hz，1H)，3.95(d，J＝2.4Hz，1H)，3.72-3.58(m，18H)，2.74-2.58(m，4H)。
化合物37的制备
将化合物36(3.3g，7.25mmol)溶解于甲醇(50mL)后，加入钯/炭(10％w/w，330mg)。在常温、氢大气条件下，将反应溶液搅拌18小时。反应溶液用硅藻土过滤后，经浓缩得到化合物37(2.14g，79％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.55(d，J＝6.4Hz，1H)，4.65(d，J＝5.6Hz，1H)，3.99(s，2H)，3.78-3.58(m，18H)，3.00(bs，1H)，2.79-2.62(m，4H)。
化合物38的制备
将化合物37(0.50g，1.37mmol)溶解于四氢呋喃(5mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入四溴甲烷(0.545g，1.64mmol)和三苯基膦(368mg，1.37mmol)。将反应溶液搅拌6小时后，用乙酸乙酯(50mL)稀释，用蒸馏水(50mL)洗涤。合并的有机层用无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物38(350mg，64％)。EI-MS m/z：[M+H]+398.3。
实施例10：化合物41的制备
Figure BDA0003147490830000511
化合物39的制备
将化合物7(1.2g，3.01mmol)和化合物38(960mg，2.51mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(25mL)后，加入碳酸铯(1.22g，3.76mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌16小时。反应溶液用蒸馏水(100mL)稀释后，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。所萃取的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物39(1.65g，90％)。EI-MS m/z：[M+H]+731.1。
化合物40的制备
将化合物39(1.65g，2.26mmol)溶解于四氢呋喃(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入四丁基氟化铵(1M的四氢呋喃溶液，5.2mL，5.2mmol)。搅拌1小时后，利用饱和氯化铵水溶液(100mL)稀释，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物40(1.10g，97％)。EI-MS m/z：[M+H]+502.6。
化合物41的制备
将化合物40(1.1g，2.19mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(0.76mL，5.48mmol)和甲磺酰氯(0.37mL，4.82mmol)。搅拌1小时后，利用蒸馏水(30mL)稀释，用二氯甲烷(2×50mL)萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得到化合物41(粗品1.4g，100％)。EI-MS m/z：[M+H]+658.5。
实施例11：化合物44的制备
Figure BDA0003147490830000521
化合物42的制备
将化合物16(2.4g，5.11mmol)和化合物41(1.4g，2.13mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(1.45g，10.6mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物42(2.12g，70％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.81(brs，1H)，7.89(brs，1H)，7.43(d，J＝6.4Hz，1H)，7.24(s，1H)，7.14(s，1H)，6.99(s，2H)，6.81(s，2H)，6.02-5.84(m，2H)，5.34(d，J＝18.0Hz，2H)，5.22(d，J＝10.8Hz，1H)，5.18-5.06(m，4H)，5.00-4.82(m，4H)，4.52-4.40(m，7H)，4.22-4.16(m，4H)，3.88-3.84(m，4H)，3.81(s，6H)，3.77-3.72(m，2H)，3.70-3.62(m，16H)，2.78-2.60(m，8H)，0.86(s，18H)，0.02(s，12H)。
化合物43的制备
将化合物42(2.0g，1.41mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)后，加入四氢吡咯(0.29mL，3.52mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(65mg，0.056mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌3小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用二氯甲烷(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物43(1.42g，81％)。EI-MS m/z：[M+H]+1251.5，1/2[M+H]+626.4。
化合物44的制备
将化合物43(1.3g，1.04mmol)溶解于二氯甲烷(50mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.16mL，2.08mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.088mL，0.83mmol)，将反应溶液搅拌1小时。向反应溶液中加入蒸馏水(50mL)后，利用二氯甲烷(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物44(450mg，32％)。EI-MS m/z：[M+H]+1903.8，1/2[M+H]+952.4。
实施例12：化合物47的制备
Figure BDA0003147490830000541
化合物45的制备
将化合物44(440mg，0.33mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(20mL)后，在-10℃的温度下，加入三光气(40mg，0.14mmol)和三乙胺(0.074mL，0.53mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(196mg，0.36mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(5mL)，加入三乙胺(0.074mL，0.53mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。1小时后，加热回流反应溶液并搅拌12小时。反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物45(295mg，47％)。EI-MS m/z：[M+H]+1903.8，1/2[M+H]+952.4。
化合物46的制备
将化合物45(280mg，0.15mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入四氢吡咯(0.016mL，0.19mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(4mg，0.0029mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌2小时。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物46(250mg，93％)。EI-MS m/z：[M+H]+1819.4，1/2[M+H]+910.3。
化合物47的制备
将化合物46(250mg，0.14mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(10mL)后，在-10℃的温度下，加入三光气(16mg，0.055mmol)和三乙胺(0.020mL，0.41mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(100mg，0.14mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(3mL)，加入三乙胺(0.020mL，0.41mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。1小时后，加热回流反应溶液并搅拌12小时。反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物47(208mg，72％)。EI-MS m/z：[M+H]+2575.7，1/2[M+H]+1288.8。
实施例13：化合物48的制备
Figure BDA0003147490830000551
化合物48利用化合物47并通过类似于化合物28的合成的方法制备。EI-MS m/z：[M+H]+1934.8，1/2[M+H]+967.8。
实施例14：化合物52的制备
Figure BDA0003147490830000561
化合物49的制备
将化合物42(250mg，0.18mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(1.5mL/1.5mL)，加入乙酸(3mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物49(190mg，91％)。EI-MS m/z：[M+H]+1191.2，[M+Na]+1213.0。
化合物50的制备
将化合物49(190mg，0.16mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，162mg，0.39mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌15小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化得到化合物50(151mg，79％)。EI-MS m/z：[M+H]+1187.3，[M+Na]+1208.8。
化合物51的制备
将化合物50(70mg，0.059mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(1mL/2mL)后，在0℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(6.2mg，0.15mmol)溶解于蒸馏水(1mL)的溶液。搅拌16小时后，反应溶液用乙酸中和，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物51(61mg，89％)。EI-MS m/z：[M+H]+1159.0，[M+Na]+1181.0。
化合物52的制备
将化合物51(60mg，0.052mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)后，加入四氢吡咯(0.011mL，0.13mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(2.3mg，0.0021mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌3小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化得到化合物52(23mg，47％)。EI-MS m/z：[M+H]+954.6，1/2[M+H]+477.9。
实施例15：化合物53的制备
Figure BDA0003147490830000571
化合物53的制备
将化合物50(30mg，0.025mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)后，加入四氢吡咯(0.005mL，0.063mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(1mg，0.001mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化得到化合物53(11.2mg，45％)。EI-MS m/z：[M+H]+982.9，1/2[M+H]+491.9。
实施例16：化合物56的制备
Figure BDA0003147490830000572
化合物54的制备
将化合物7(3.5g，9.14mmol)和溴乙酸甲酯(1.68g，10.97mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(35mL)后，加入碳酸铯(4.5g，13.71mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(3×100mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。经过滤及减压浓缩得到化合物54(3.83g，92％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.89(s，1H)，6.77(s，2H)，4.70(s，4H)，4.64(s，2H)，3.80(s，3H)。
化合物55的制备
将化合物54(3.8g，8.35mmol)溶解于甲醇(30mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入樟脑磺酸(776mg，3.34mmol)。在常温条件下，搅拌5小时后，加入三乙胺(0.8mL)，将溶剂减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物55(1.83g，97％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.99(s，1H)，6.85(s，2H)，4.67(s，4H)，4.66(s，2H)，3.81(s，3H)。
化合物56的制备
将化合物55(700mg，3.09mmol)溶解于二氯甲烷(25mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(1.3mL，9.27mmol)和甲磺酰氯(0.53mL，6.81mmol)后，搅拌1小时。反应溶液用二氯甲烷(50mL)稀释后，用蒸馏水(50mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(50mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物56(0.95g，81％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.09(s，1H)，6.98(s，2H)，5.21(s，4H)，4.68(s，2H)，3.82(s，3H)，2.99(s，6H)。
实施例17：化合物60的制备
Figure BDA0003147490830000591
化合物57的制备
将化合物13(36g，62.1mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺/蒸馏水(300mL/6mL)后，加入乙酸钠(6.1g，74.6mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌反应溶液。3小时后，加入蒸馏水(500mL)，利用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。合并的有机层依次用蒸馏水(200mL)和盐水(200mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物57(26g，99％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)(旋转异构体)δ7.77-7.76(m，1H)，6.81-6.76(m，1H)，6.05-6.01(m，1H)，5.10-4.83(m，2H)，4.58-4.54(m，1H)，3.99(s，3H)，3.89-3.56(m，3H)，3.34-3.26(m，1H)，2.81-2.67(m，2H)，0.89(s，9H)，0.09(s，6H)。
化合物58的制备
将化合物57(2.31g，5.46mmol)和化合物56(0.95g，2.48mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(1.71g，12.40mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(3×100mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物58(2.45g，95％)。EI-MS m/z：[M+H]+1035.6。
化合物59的制备
将化合物58(2.45g，2.36mmol)溶解于乙酸乙酯(12mL)和乙醇(12mL)后，加入锌粉(Zinc dust，9.28g，141.98mmol)，加入在乙醇(12mL)中稀释的甲酸(3.56mL，94.4mmol)。在常温条件下，搅拌4小时后，用乙酸乙酯(30mL)稀释，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(100mL)。有机层依次用蒸馏水(150mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)以及盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物59(1.89g，82％)。EI-MS m/z：[M+H]+975.3，1/2[M+H]+488.4。
化合物60的制备
将化合物59(1.89g，1.94mmol)溶解于二氯甲烷(150mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.31mL，3.88mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.19mL，1.74mmol)，将反应溶液搅拌3小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物60(923mg，44％)。
实施例18：化合物63的制备
Figure BDA0003147490830000601
化合物61的制备
将化合物60(923mg，0.87mmol)和三光气(93mg，0.31mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(45mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.24mL，4.35mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(196mg，0.36mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(15mL)，加入N-甲基咪唑(0.06mL，1.04mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物61(1.01g，71％)。EI-MS m/z：[M+H]+1624.3，1/2[M+H]+814.0。
化合物62的制备
将化合物61(1.01g，0.62mmol)溶解于二氯甲烷(60mL)后，加入2-乙基己酸钠(155mg，0.93mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(36mg，0.03mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌2小时后，进一步加入2-乙基己酸钠(50mg，0.30mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(12mg，0.01mmol)。将反应物减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物62(900mg，94％)。EI-MS m/z：[M+H]+1543.5，1/2[M+H]+772.0。
化合物63的制备
将化合物62(900mg，0.58mmol)和三光气(62mg，0.21mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(30mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.16mL，2.90mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(508mg，0.69mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(10mL)，加入N-甲基咪唑(0.04mL，0.69mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物63(827mg，62％)。EI-MS m/z：[M+H]+2299.79，1/2[M+H]+1150.3。
实施例19：化合物64的制备
Figure BDA0003147490830000621
化合物64利用化合物63并通过类似于化合物28的合成的方法制备。EI-MS m/z：[M+H]+1673.1，1/2[M+H]+836.9。
实施例20：化合物68的制备
Figure BDA0003147490830000622
化合物65的制备
将5-溴-1-戊醇(5g，29.93mmol)溶解于四氢呋喃(70mL)后，在0℃的温度下，依次加入咪唑(5.09g，47.82mmol)、叔丁基二苯基氯硅烷(8.6mL，32.92mmol)，搅拌4小时。将溶剂减压浓缩，用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物65(11.2g，92％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.68-7.64(m，4H)，7.45-7.35(m，6H)，3.66(t，J＝6.0Hz，2H)，3.38(t，J＝6.8Hz，2H)，1.84(m，2H)，1.61-1.47(m，6H)，1.05(s，9H)。
化合物66的制备
将亚磷酸二叔丁酯(2mL，10mmol)稀释于N,N-二甲基甲酰胺(8mL)后，加入氢化钠(0.24g，10mmol)，在0℃的温度下，搅拌30分钟。加入在N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中稀释的化合物65(2g，5mmol)，在氮大气条件下，搅拌16小时。加入甲醇(0.5mL)，用乙酸乙酯(70mL)稀释，依次用饱和氯化铵溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物66(2.35g，90％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.67-7.65(m，4H)，7.44-7.35(m，6H)，3.66(t，J＝6.4Hz，2H)，1.65-1.40(m，24H)，1.20(s，9H)。
化合物67的制备
将化合物66(3.3g，6.36mmol)溶解于四氢呋喃(40mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入四丁基氟化铵(1M的四氢呋喃溶液，7.63mL，7.63mmol)。搅拌2小时后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物67(1.76g，99％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ3.65(t，J＝6.4Hz，2H)，1.72-1.33(m，26H)。
化合物68的制备
将化合物67(1.76g，6.28mmol)溶解于二氯甲烷(40mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(1.3mL，9.42mmol)和甲磺酰氯(0.58mL，7.53mmol)。搅拌2小时后，用二氯甲烷(30mL)稀释，用蒸馏水(40mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得到化合物68(粗品2.37g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.23(t，J＝6.0Hz，2H)，3.01(s，3H)，1.77(m，2H)，1.68-1.56(m，4H)，1.53-1.40(m，20H)。
实施例21：化合物71的制备
Figure BDA0003147490830000641
化合物69的制备
将化合物7(1.87g，4.90mmol)和化合物68(2.11g，5.88mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，加入碳酸铯(2.39g，7.35mmol)、碘化钠(147mg，0.98mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌4小时后，在60℃的温度下，搅拌15小时。反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(3×80mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(70mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。经过滤及减压浓缩得到化合物69(粗品3.56g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.84(s，1H)，6.75(s，2H)，4.69(s，4H)，3.95(t，J＝6.4Hz，2H)，1.84-1.72(m，2H)，1.72-1.42(m，28H)，0.94(s，18H)，0.09(s，12H)。
化合物70的制备
将化合物69(粗品3.56g，4.90mmol)溶解于四氢呋喃(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入四丁基氟化铵(1M的四氢呋喃溶液，16.6mL，16.6mmol)。搅拌2小时后，经减压浓缩得到化合物70(粗品2.04g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.92(s，1H)，6.85(s，2H)，4.67(s，2H)，4.65(s，2H)，3.99(t，J＝6.4Hz，2H)，2.05(t，J＝5.6Hz，2H)，1.78(m，2H)，1.71-1.48(m，26H)。
化合物71的制备
将化合物70(粗品2.04g，4.90mmol)溶解于二氯甲烷(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(2mL，14.40mmol)和甲磺酰氯(0.82mL，10.56mmol)。搅拌2小时后，用二氯甲烷(30mL)稀释，用蒸馏水(50mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得到化合物71(粗品2.91g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.02(s，1H)，6.95(s，2H)，5.20(s，4H)，3.98(t，J＝6.8Hz，2H)，2.99(s，6H)，1.83(m，2H)，1.71-1.51(m，6H)，1.50(s，18H)。
实施例22：化合物74的制备
Figure BDA0003147490830000651
化合物72的制备
将化合物57(1.2g，2.84mmol)和化合物71(766mg，1.29mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(0.89g，6.45mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(3×100mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物72(0.85g，53％)。
化合物73的制备
将化合物72(850mg，0.69mmol)溶解于乙酸乙酯(3mL)和乙醇(3mL)后，加入锌粉(Zinc dust，2.72g，41.6mmol)，加入在乙醇(4mL)中稀释的甲酸(1mL，27.6mmol)。在常温条件下，搅拌5小时后，用乙酸乙酯(30mL)稀释，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(70mL)。有机层依次用蒸馏水(50mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)以及盐水(50mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物73(565mg，70％)。
化合物74的制备
将化合物73(2.03g，1.74mmol)溶解于二氯甲烷(150mL)后，加入吡啶(0.28mL，3.48mmol)，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入在二氯甲烷(60mL)中稀释的氯甲酸烯丙酯(0.17mL，1.57mmol)，将反应溶液搅拌3小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物74(1.06g，49％)。
实施例23：化合物77的制备
Figure BDA0003147490830000661
化合物75的制备
将化合物74(1.06g，0.87mmol)和三光气(91mg，0.31mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(45mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.23mL，4.20mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(500mg，0.92mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(15mL)，加入N-甲基咪唑(0.06mL，1.00mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物75(1.27g，83％)。EI-MS m/z：[M+H]+1818.4，1/2[M+H]+909.6。
化合物76的制备
将化合物75(1.27mg，0.69mmol)溶解于二氯甲烷(60mL)后，加入四氢吡咯(0.34mL，4.19mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(40mg，0.035mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物76(1.1g，90％)。EI-MS m/z：[M+H]+1733.8，1/2[M+H]+867.3。
化合物77的制备
将化合物76(1.1g，0.63mmol)和三光气(68mg，0.22mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(30mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.17mL，3.15mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(506mg，0.69mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(10mL)，加入N-甲基咪唑(0.04mL，0.75mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物77(500mg，32％)。EI-MS m/z：[M+H]+2490.2，1/2[M+H]+1245.7。
实施例24：化合物81的制备
Figure BDA0003147490830000681
化合物78的制备
将化合物77(500mg，0.20mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(5mL/5mL)，加入乙酸(10mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(60mL)稀释，用蒸馏水(50mL)、饱和碳酸钠溶液(2×50mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物78(240mg，52％)。EI-MS m/z：[M+H]+2262.2，[M+Na]+2284.0。
化合物79的制备
将化合物78(240mg，0.106mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，104mg，0.24mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌90分钟。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物79(134mg，56％)。EI-MS m/z：[M+H]+2258.1，1/2[M+H]+1129.3。
化合物80的制备
将化合物79(134mg，0.059mmol)溶解于甲醇(4.2mL)后，在-50℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(22mg，0.534mmol)溶解于蒸馏水(4.2mL)的溶液，在常温条件下，搅拌3小时。反应溶液用甲酸中和，减压浓缩反应溶液后，经冷冻干燥得到化合物80(粗品147mg，100％)。
化合物81的制备
将化合物80(粗品147mg，0.059mmol)稀释于二氯甲烷(4mL)后，加入三氟乙酸(1mL)，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到白色固体化合物81(45mg，41％)。EI-MS m/z：[M+H]+1765.3，1/2[M+H]+883.1。
实施例25：化合物87的制备
Figure BDA0003147490830000691
化合物82的制备
将2-[2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基]乙醇(21.0g，119.8mmol)溶解于四氢呋喃(400mL)后，在0℃的温度下，加入甲基磺酸酐(31.3g，179.7mmol)和N-甲基吗啉(23.7mL，215.7mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌4小时。将反应溶液过滤并减压蒸馏后溶解于四氢呋喃(200mL)中，然后加入溴化锂(20.8g，239.7mmol)，在100℃的温度下，搅拌12小时。将反应溶液降温至常温后，用二氯甲烷(200mL)稀释，用蒸馏水(500mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物82(26.0g，91％)。
H-NMR(400MHz，CDCl3)δ3.84-.3.80(m，2H)，3.70(s，6H)，3.49-3.47(m，2H)，3.47-3.39(m，2H)。
化合物83的制备
将化合物82(2.12g，8.90mmol)和化合物7(2.84g，7.42mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)后，加入碳酸铯(3.62g，11.13mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌12小时。反应溶液用乙酸乙酯(50mL)稀释后，用蒸馏水(80mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(70mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物83(26.0g，91％)。
H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.84(s，1H)，6.76(s，2H)，4.67(s，4H)，4.11(t，J＝4.8Hz，2H)，3.85(t，J＝4.8Hz，2H)，3.74-3.71(m，2H)，3.68-3.65(m，6H)，3.38(t，J＝4.8Hz，2H)，0.87(s，18H)，0.07(s，12H)。
化合物84的制备
将化合物83(3.73g，6.90mmol)溶解于四氢呋喃(20mL)后，加入蒸馏水(1.2mL，69.0mmol)、三苯基膦(2.0g，7.59mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌12小时。反应溶液用无水硫酸钠干燥，过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物84(2.67g，75％)。
H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.86(s，1H)，6.77(s，2H)，4.69(s，4H)，4.13(t，J＝4.8Hz，2H)，3.6(t，J＝4.8Hz，2H)，3.74-3.72(m，2H)，3.66-3.64(m，2H)，3.54(t，J＝4.8Hz，2H)，2.89(t，J＝4.8Hz，2H)，2.21(br，2H)，0.94(s，18H)，0.09(s，12H).EI-MS m/z：[M+H]+514.4。
化合物85的制备
将化合物84(2.67g，5.19mmol)溶解于四氢呋喃(30mL)后，在0℃的温度下，加入三乙胺(0.72mL，5.19mmol)、二碳酸二叔丁酯(1.1g，5.19mmol)，在氮大气、常温的条件下，搅拌12小时。反应溶液用乙酸乙酯(50mL)稀释后，用蒸馏水(80mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物85(2.67g，84％)。
H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.86(s，1H)，6.77(s，2H)，5.00(br，1H)，4.69(s，4H)，4.13(t，J＝4.8Hz，2H)，3.85(t，J＝4.8Hz，2H)，3.73-3.70(m，2H)，3.65-3.63(m，2H)，3.55(t，J＝4.8Hz，2H)，3.32(q，2H)，1.46(s，9H)，0.93(s，18H)，0.09(s，12H)。
化合物86的制备
将化合物85(2.67g，4.35mmol)溶解于甲醇(50mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入樟脑磺酸(404mg，1.74mmol)。在常温条件下，搅拌2小时后，加入三乙胺(0.4mL)，将溶剂减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物86(1.2g，72％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.94(s，1H)，6.88(s，2H)，5.03(brs，1H)，4.67(s，2H)，4.66(s，2H)，4.17(t，J＝4.8Hz，2H)，3.85(t，J＝4.8Hz，2H)，3.72-3.70(m，2H)，3.70-3.60(m，2H)，3.60-3.50(m，2H)，3.34-3.28(m，2H)，1.92(brs，2H)，1.43(s，9H)。
化合物87的制备
将化合物86(1.2g，3.11mmol)溶解于二氯甲烷(30mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(1.3mL，9.33mmol)和甲磺酰氯(0.53mL，6.84mmol)后，搅拌1小时。将反应溶液用二氯甲烷(40mL)稀释后，用蒸馏水(50mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(50mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物87(1.57g，93％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.04(s，1H)，7.00(s，2H)，5.20(s，4H)，4.98(brs，1H)，4.17(t，J＝4.8Hz，2H)，3.87(t，J＝4.8Hz，2H)，3.73-3.71(m，2H)，3.66-3.64(m，2H)，3.55(t，J＝5.2Hz，2H)，3.36-3.25(m，2H)，2.99(s，6H)，1.43(s，9H)。
实施例26：化合物90的制备
Figure BDA0003147490830000721
化合物88的制备
将化合物87(1.57g，2.89mmol)和化合物57(2.69g，6.36mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(2g，14.45mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(3×80mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物88(2.73g，79％)。
化合物89的制备
将化合物88(2.1g，1.76mmol)溶解于乙酸乙酯(10mL)和乙醇(10mL)后，加入锌粉(Zinc dust，6.9g，105.60mmol)，加入在乙醇(10mL)中稀释的甲酸(2.66mL，70.4mmol)。在常温条件下，搅拌3小时后，用乙酸乙酯(30mL)稀释，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(100mL)。有机层依次用蒸馏水(150mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)以及盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物89(粗品1.99g，100％)。
化合物90的制备
将化合物89(2.8g，2.46mmol)溶解于二氯甲烷(200mL)，加入吡啶(0.39mL，4.93mmol)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入在二氯甲烷(50mL)中稀释的氯甲酸烯丙酯(0.23mL，2.22mmol)，将反应溶液搅拌3小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物90(1.5g，50％)。EI-MS m/z：[M+H]+1219.3。
实施例27：化合物93的制备
Figure BDA0003147490830000731
化合物91的制备
将化合物90(1.5g，1.23mmol)和三光气(131mg，0.44mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(60mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.49mL，6.15mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(799mg，1.47mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(20mL)，加入N-甲基咪唑(0.12mL，1.47mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物91(1.83g，82％)。EI-MS m/z：[M+H]+1786.3，1/2[M+H]+893.6。
化合物92的制备
将化合物91(1.83g，1.02mmol)溶解于二氯甲烷(80mL)后，加入四氢吡咯(0.17mL，2.05mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(23.6mg，0.020mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物92(1.26g，72％)。EI-MS m/z：[M+H]+1702.5，1/2[M+H]+851.6。
化合物93的制备
将化合物92(1.26g，0.74mmol)和三光气(79mg，0.27mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(30mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.29mL，3.70mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(649mg，0.88mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(10mL)，加入N-甲基咪唑(0.07mL，0.88mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物93(910mg，50％)。EI-MS m/z：[M+H]+2458.9，1/2[M+H]+1229.9。
实施例28：化合物97的制备
Figure BDA0003147490830000751
化合物94的制备
将化合物93(910mg，0.37mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(10mL/10mL)，加入乙酸(20mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(60mL)稀释，用蒸馏水(50mL)、饱和碳酸钠溶液(2×50mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物94(620mg，72％)。EI-MS m/z：[M+H]+2230.4，[M+Na]+2252.2。
化合物95的制备
将化合物94(620mg，0.27mmol)溶解于二氯甲烷(25mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，235mg，0.55mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌90分钟。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物95(380mg，62％)。EI-MS m/z：[M+H]+2225.8，[M+Na]+2248.0。
化合物96的制备
将化合物95(380mg，0.17mmol)溶解于甲醇(10mL)后，在-50℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(64mg，1.53mmol)溶解于蒸馏水(10mL)的溶液，在常温条件下，搅拌3小时。反应溶液用甲酸中和，减压浓缩后，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到化合物96(50mg，14％)。EI-MS m/z：[M+H]+1946.0，[M+Na]+1969.1。
化合物97的制备
将化合物96(50mg，0.025mmol)稀释于二氯甲烷(4mL)后，在0℃的温度下，加入三氟乙酸(1mL)，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到白色固体化合物97(27mg，52％)。EI-MS m/z：[M+H]+1745.4，1/2[M+H]+874.1。
实施例29：化合物100的制备
Figure BDA0003147490830000771
化合物98的制备
将化合物89(1.2g，1.06mmol)和三光气(226mg，0.76mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(50mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.58mL，10.60mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(1.26g，2.33mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(20mL)，加入N-甲基咪唑(0.17mL，2.33mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物98(1.41g，58％)。EI-MS m/z：[M+H]+2270.2，1/2[M+H]+1135.7。
化合物99的制备
将化合物98(1.41g，0.62mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(10mL/10mL)，加入乙酸(20mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物99(800mg，63％)。EI-MS m/z：[M+H]+2042.8，[M+Na]+2064.6。
化合物100的制备
将化合物99(740mg，0.36mmol)溶解于二氯甲烷(40mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，352mg，0.83mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌3小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物100(626mg，84％)。EI-MS m/z：[M+H]+2038.3 1/2[M+H]+1019.6。
实施例30：化合物102的制备
Figure BDA0003147490830000781
化合物101的制备
将化合物100(440mg，0.216mmol)稀释于二氯甲烷(4mL)后，在0℃的温度下，加入三氟乙酸(1mL)，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液，得到化合物101(粗品443mg，100％)。EI-MSm/z：[M+H]+1937.7，1/2[M+H]+969.7。
化合物103的制备
将化合物101(443mg，0.216mmol)和化合物102(290mg，0.324mmol，化合物102利用韩国公开专利第10-2018-0078329号中描述的方法制备)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)后，在0℃的温度下，加入N,N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.648mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌2小时。向反应溶液中进一步加入N-甲基咪唑(0.02mL，0.432mmol)和化合物102(398mg，0.44mmol)，搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(70mL)稀释，用蒸馏水(3×50mL)洗涤后，合并的有机层用盐水(70mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物103(340mg，56％)。EI-MS m/z：[M+H]+2694.3，1/2[M+H]+1347.9。
实施例31：化合物105的制备
Figure BDA0003147490830000791
化合物104的制备
将化合物103(340mg，0.126mmol)溶解于甲醇(9mL)后，在-50℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(53mg，1.26mmol)溶解于蒸馏水(9mL)的溶液，在常温条件下，搅拌4小时。反应溶液用乙酸中和，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物104(117mg，44％)。EI-MS m/z：[M+H]+2274.4，1/2[M+H]+1137.4。
化合物105的制备
将化合物104(117mg，0.05mmol)稀释于二氯甲烷(8mL)后，在0℃的温度下，加入三氟乙酸(2mL)，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到白色固体化合物105(49.7mg，43％)。EI-MS m/z：[M+H]+2173.9，1/2[M+H]+1087.4。
实施例32：化合物110的制备
Figure BDA0003147490830000801
化合物106的制备
将2-苄氧基乙醇(5g，32.85mmol)溶解于二氯甲烷(100mL)后，加入N-甲基吗啉(4mL，36.14mmol)和丙炔酸甲酯(3.2mL，36.14mmol)，在常温条件下，搅拌16小时。减压浓缩反应溶液，用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(70mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物106(6.90g，89％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.63(d，J＝12.4Hz，1H)，7.38-7.29(m，5H)，5.23(d，J＝12.8Hz，1H)，4.58(s，2H)，4.02(t，J＝4.4Hz，2H)，3.73(t，J＝3.2Hz，2H)，3.70(s，3H)。
化合物107的制备
将化合物106(6.9g，29.20mmol)溶解于甲醇(80mL)后，加入钯/炭(10％w/w，3g)。在常温、氢大气条件下，将反应溶液搅拌16小时。反应溶液用硅藻土过滤后，经浓缩得到化合物107(4.01g，92％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ3.78(t，J＝6.0Hz，2H)，3.75-3.70(m，5H)，3.59(t，J＝4.8Hz，2H)，2.61(t，J＝6.0Hz，2H)。
化合物108的制备
将化合物107(2g，13.5mmol)溶解于二氯甲烷(100mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(2.8mL，20.2mmol)和4-甲苯磺酰氯(3.09g，16.2mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌16小时，用二氯甲烷(30mL)稀释后，用蒸馏水(80mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物108(4.59g，56％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.80(d，J＝8.8Hz，2H)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，4.14(t，J＝4.4Hz，2H)，3.68(t，J＝6.8Hz，2H)，3.68(s，3H)，3.65(t，J＝4.4Hz，2H)，2.52(t，J＝6.0Hz，2H)，2.45(s，3H)。
化合物109的制备
将化合物108(2.09g，6.91mmol)和4-碘苯酚(1.82g，8.29mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(1.43g，10.36mmol)和碘化钠(207mg，1.38mmol)，在70℃的温度下，搅拌2小时。反应溶液用乙酸乙酯(70mL)稀释，用蒸馏水(3×50mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物109(1.73g，71％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.54(d，J＝8.8Hz，2H)，6.69(d，J＝8.4Hz，2H)，4.07(t，J＝4.8Hz，2H)，3.84-3.78(m，4H)，3.69(s，3H)，2.62(t，J＝6.8Hz，2H)。
化合物110的制备
将化合物109(930mg，4.94mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.01g，3.98mmol)、1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(0.43g，0.53mmol)以及乙酸钾(0.78g，7.95mmol)加入N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，在90℃的温度、氮大气条件下，搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(70mL)稀释，用蒸馏水(3×50mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物110(685mg，74％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.73(d，J＝8.4Hz，2H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，4.13(t，J＝4.8Hz，2H)，3.85-3.82(m，4H)，3.68(s，3H)，2.63(t，J＝6.4Hz，2H)，1.33(s，12H)。
实施例33：化合物117的制备
Figure BDA0003147490830000821
化合物111的制备
将化合物16(7.9g，16.5mmol)和二碘戊烷(12.3mL，82.8mmol)溶解于丙酮(100mL)后，加入碳酸钾(2.3g，16.5mmol)，在60℃的温度下，搅拌10小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物111(9.7g，87％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.88(brs 1H)，7.83(s，1H)，6.82(s，1H)，5.99-5.92(m，1H)，5.35(d，J＝17.2Hz，1H)，5.24(d，J＝10.4Hz，1H)，5.14-4.84(m，2H)，4.69-4.54(m，2H)，4.24-4.14(m，2H)，4.09(t，J＝6.8Hz，2H)，3.91-3.42(m，5H)，3.22(t，J＝7.3Hz，2H)，2.76-2.61(m，2H)，1.95-1.84(m，4H)，1.62-1.55(m，2H)，0.89(s，9H)，0.03(s，6H)
化合物113的制备
将化合物112(5.3g，9.09mmol，化合物112利用ACS.Med.Chem.2016，7，11，983-987中描述的方法制备)溶解于二氯甲烷(50mL)后，在-10℃的温度下，加入三氯异氰尿酸(1.48g，6.36mmol)、四甲基哌啶氧化物(TEMPO，142mg，0.91mmol)，搅拌1小时。用二氯甲烷(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠(2×70mL)、盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。经过滤浓缩得到化合物113(5.79g，100％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)(旋转异构体)δ7.71(s，1H)，6.73(s，1H)，5.01-4.99(m，1H)，4.32-4.29(m，1H)，3.91(s，3H)，3.73(dd，1H)，3.66(d，J＝17.2Hz，1H)，3.46(d，J＝16.8Hz，1H)，2.83-2.76(m，1H)，2.59-2.54(m，1H)，1.36-1.24(m，3H)，1.12(d，J＝10.4Hz，18H)，0.89(s，9H)，0.11(s，3H)，0.09(s，3H)。
化合物114的制备
将化合物113(3.79g，6.51mmol)溶解于二氯甲烷(60mL)后，在-55℃的温度、氮大气条件下，加入2,6-二甲基吡啶(3mL，26.0mmol)和三氟甲磺酸酐(3.3mL，19.5mmol)。将反应溶液搅拌30分钟后，用二氯甲烷(30mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物114(2.95g，63％)。
化合物115的制备
将化合物114(2.95g，4.13mmol)溶解于乙醇/甲苯/蒸馏水(7mL/14mL/7mL)后，在常温、氮大气条件下，加入化合物110(1.69g，4.82mmol)、碳酸钠(1.42g，13.44mmol)以及四(三苯基膦)钯(0)(0.52g，0.45mmol)。在85℃的温度下，将反应溶液搅拌3小时后，用乙酸乙酯(100mL)稀释反应溶液，用盐水(100mL)和蒸馏水(100mL)洗涤有机层。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩。将所得到的化合物溶解于N,N-二甲基甲酰胺/蒸馏水(10mL/0.2mL)，加入乙酸钠(67mg，0.81mmol)后，在常温、氮大气条件下，搅拌3小时。反应溶液用乙酸乙酯(50mL)稀释，用蒸馏水(3×40mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥有机层。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物115(1.10g，41％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.126(d，J＝8.8Hz，2H)，6.91(s，1H)，6.81(d，J＝8.8Hz，2H)，6.15(s，1H)，5.98(s，1H)，4.79(m，1H)，4.08(t，J＝4.8Hz，2H)，4.01(s，3H)，3.88-3.78(m，4H)，3.68(s，3H)，3.24-3.12(m 1H)，3.04-2.96(m，1H)，2.62(t，J＝6.4Hz，2H)，0.88(s，9H)，0.15(s，6H)。
化合物116的制备
将化合物115(1.10g，1.74mmol)和化合物111(1.28g，1.91mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(12mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(0.29g，2.08mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释后，用蒸馏水(3×100mL)洗涤。洗涤过的有机层用盐水(100mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物116(1.34g，65％)。EI-MS m/z：[M+H]+1176.1。
化合物117的制备
将化合物116(1.34g，1.14mmol)溶解于乙酸乙酯(6mL)和乙醇(6mL)后，加入锌粉(Zinc dust，1.49g，22.8mmol)，加入在乙醇(6mL)中稀释的甲酸(0.86mL，22.8mmol)。在常温条件下，搅拌3小时后，用乙酸乙酯(50mL)稀释，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(100mL)。有机层依次用蒸馏水(150mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)以及盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物117(1.21g，93％)。EI-MSm/z：[M+H]+1146.5，1/2[M+H]+573.4。
实施例34：化合物120的制备
Figure BDA0003147490830000851
化合物118的制备
将化合物117(700mg，0.61mmol)和三光气(65mg，0.22mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(30mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.17mL，3.05mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(376mg，0.73mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(10mL)，加入N-甲基咪唑(0.04mL，0.73mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物118(0.72g，69％)。EI-MS m/z：[M+H]+1713.1，1/2[M+H]+857.0。
化合物119的制备
将化合物118(720mg，0.42mmol)溶解于二氯甲烷(40mL)后，加入2-乙基己酸钠(105mg，0.63mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(24mg，0.02mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌2小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物119(586mg，85％)。EI-MS m/z：[M+H]+1629.1，1/2[M+H]+815.0。
化合物120的制备
将化合物119(586mg，0.36mmol)和三光气(38mg，0.13mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(15mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(0.1mL，1.80mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(315mg，0.43mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(5mL)，加入N-甲基咪唑(0.02mL，0.43mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。将反应溶液用二氯甲烷(15mL)稀释，用蒸馏水(20mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物120(516mg，60％)。EI-MS m/z：[M+H]+2385.5，1/2[M+H]+1193.2。
实施例35：化合物122的制备
Figure BDA0003147490830000861
化合物121的制备
将化合物120(516mg，0.216mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(3mL/3mL)，加入乙酸(7mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物121(383mg，82％)。EI-MS m/z：[M+H]+2157.9，[M+Na]+2179.1。
化合物122的制备
将化合物121(383mg，0.18mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，173mg，0.41mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌4小时。反应溶液用二氯甲烷(30mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物122(200mg，52％)。
实施例36：化合物124的制备
Figure BDA0003147490830000871
化合物123的制备
将化合物122(200mg，0.093mmol)溶解于甲醇(6mL)后，在-50℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(35mg，0.835mmol)溶解于蒸馏水(6mL)的溶液，在常温条件下，搅拌3小时。反应溶液用甲酸中和，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物123(95mg，55％)。EI-MS m/z：[M+H]+1858.9，[M+Na]+1880.3。
化合物124的制备
将化合物123(90mg，0.051mmol)稀释于二氯甲烷(4mL)后，在0℃的温度下，加入三氟乙酸(1mL)，搅拌2小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到白色固体化合物124(34mg，35.7％)。EI-MS m/z：[M+H]+1758.9，1/2[M+H]+879.9
实施例37：化合物130的制备
Figure BDA0003147490830000881
化合物125的制备
将三甘醇(10.0g，66.6mmol)溶解于二氯甲烷(60mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入氧化银(I)(23.1g，73.3mmol)和苄基溴(8.7mL，99.9mmol)。将反应溶液的温度升温至常温并搅拌20小时后，利用硅藻土过滤。将过滤的溶液浓缩后，经柱层析纯化得到化合物125(11.2g，70％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24-7.36(m，5H)，4.57(s，2H)，3.76-3.56(m，12H)，2.60(br s，1H)。
化合物126的制备
在0℃的温度下，向四氢呋喃(250mL)中加入氢化钠(1.3g，31.9mmol)后，向反应溶液中缓慢加入在四氢呋喃(50mL)中稀释的化合物125(5.9g，24.6mmol)后，在0℃的温度、氮大气条件下，搅拌1小时。然后，加入溴乙酸叔丁酯(4.7mL，24.6mmol)，在常温条件下，搅拌18小时。反应溶液用乙酸乙酯(200mL)稀释，用饱和氯化铵水溶液(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物126(5.9g，56％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.25-7.36(m，5H)，4.57(s，2H)，4.02(s，2H)，3.76-3.62(m，12H)，1.47(s，9H)。
化合物127的制备
将化合物126(9.2g，25.9mmol)溶解于乙醇(200mL)后，加入钯/炭(10％w/w，9.0g)。在常温、氢大气条件下，将反应溶液搅拌2小时。反应溶液用硅藻土过滤后，经浓缩得到化合物127(6.47g，94％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.03(s，2H)，3.76-3.67(m，12H)，2.59(m，1H)，1.47(s，9H)。
化合物128的制备
在-78℃的温度下，将草酰氯(3.5mL，41.2mmol)稀释于二氯甲烷(80mL)后，缓慢加入将二甲基亚砜(3.4mL，48.4mmol)稀释于二氯甲烷(10mL)的溶液。10分钟后，将化合物127(6.4g，24.2mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入到反应溶液中。将反应溶液搅拌30分钟后，加入三乙胺(16.8mL，121.0mmol)，在常温条件下，搅拌18小时。加入蒸馏水(20mL)后，用二氯甲烷(100mL)稀释，用0.5N的盐酸水溶液(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，经过滤浓缩得到化合物128(6.2g，97％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.74(s，1H)，4.17(s，2H)，4.03(s，2H)，3.76-3.67(m，8H)，1.47(s，9H)。
化合物129的制备
将化合物128(3.0g，11.4mmol)溶解于四氢呋喃(20mL)后，加入2M的2-甲基-2-丁烯四氢呋喃溶液(28mL，57.2mmol)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入将亚氯酸钠(3.2g，28.6mmol)和磷酸氢二钠(2.2g，16.0mmol)溶解于蒸馏水(40mL)的溶液以及过氧化氢(30wt.％水溶液，18.0g，160.1mmol)。在50℃的温度下，将反应溶液搅拌2小时，用1N的盐酸水溶液进行酸性化以使pH达到3后，用乙酸乙酯(200mL)稀释，用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后，用二异丙基乙胺碱化并浓缩。然后，溶解于四氢呋喃(40mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入碘甲烷(2.1mL，34.2mmol)和碳酸钾(1.6g，11.4mmol)，在常温条件下，搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(200mL)稀释，用蒸馏水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物129(1.1g，33％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.17(s，2H)，4.02(s，2H)，3.76-3.62(m，11H)，1.47(s，9H)。
化合物130的制备
将化合物129(1.1g，3.8mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入三氟乙酸(5mL，65.3mmol)和苯甲醚(4.1mL，37.6mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌4小时，经浓缩得到化合物130(867mg，97％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48(m，1H)，4.18(s，2H)，4.16(s，2H)，3.77-3.73(m，11H)。
实施例38：化合物137的制备
Figure BDA0003147490830000901
化合物131的制备
将5-硝基苯-1，3-二羧酸(5g，23.7mmol)溶解于四氢呋喃(30mL)后，在-20℃的温度、氮大气条件下，缓慢加入硼烷(1M的四氢呋喃溶液，94.8mL，94.8mmol)。将反应溶液的温度缓慢升温至常温并搅拌48小时后，将温度降温至0℃，向反应溶液中缓慢加入甲醇(30mL)。将反应溶液浓缩后，用乙酸乙酯(100mL)稀释，用蒸馏水(100mL)洗涤。合并的有机层用无水硫酸钠干燥后，经过滤及浓缩得到化合物131(4.6g)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(s，2H)，7.73(s，1H)，4.84(d，J＝4.0Hz，4H)，1.91(t，J＝5.6Hz，2H)。
化合物132的制备
将化合物131(4.6g)溶解于二氯甲烷(150mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入三乙胺(18.2mL，130.4mmol)和甲磺酰氯(7.7mL，99.5mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌16小时后，加入二氯甲烷(100mL)。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物132(3.06g，2steps 59％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.23(s，2H)，7.77(s，1H)，4.66(s，4H)。
化合物133的制备
将化合物132(500mg，2.27mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，在0℃的温度下，依次加入碘化钾(188.4mg，1.14mmol)、化合物16(2.8g，5.9mmol)、碳酸钾(940mg，6.8mmol)，在氮大气、40℃的温度条件下，搅拌16小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物133(1.72g，69％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.80(br s，1H)，8.34(s，2H)，7.93-7.90(m，3H)，6.85(s，2H)，5.94-5.93(m，2H)，5.34(d，J＝17.6Hz，2H)，5.27-5.22(m，6H)，4.99-4.91(m，4H)，4.61(s，4H)，4.21-4.17(m，2H)，4.03-3.85(m，8H)，3.64(m，2H)，2.70(s，4H)，0.88(s，18H)，0.03(s，12H)。
化合物134的制备
将化合物133(200mg，0.182mmol)溶解于乙醇(5mL)后，加入锌粉(Zinc dust，475mg，7.268mmol)和甲酸(0.27mL，7.268mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌1小时后，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(20mL)。有机层依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。经过滤浓缩得到化合物134(200mg，99％)。EI-MS m/z：[M+H]+1070.8，[M+Na]+1092.9。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.80(br s，1H)，7.89(s，2H)，6.93(s，1H)，6.82-6.78(m，4H)，5.95-5.93(m，2H)，5.36-5.09(m，8H)，4.98-4.90(m，4H)，4.62(m，4H)，4.20-4.03(m，5H)，3.83-3.64(m，11H)，2.69(s，4H)，0.87(s，18H)，0.23(s，9H)。
化合物135的制备
将化合物134(1.2g，1.1mmol)和化合物130(386mg，1.6mmol)溶解于二甲基甲酰胺(15mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入N，N，N'，N'-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(779mg，2.0mmol)和二异丙基乙胺(0.56mL，3.3mmol)，在常温条件下，搅拌3小时。将反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释，依次用饱和氯化铵水溶液(50mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)、蒸馏水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物135(1.1g，78％)。EI-MS m/z：[M+H]+1289.7，1/2[M+H]+645.1。
化合物136的制备
将化合物135(1.1g，0.85mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)后，加入四氢吡咯(0.27mL，3.34mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(49mg，0.043mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌30分钟。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用二氯甲烷(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物136(937mg，97％)。EI-MS m/z：[M+H]+1112.1，1/2[M+H]+561.1。
化合物137的制备
将化合物136(937mg，0.83mmol)溶解于二氯甲烷(40mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.14mL，1.67mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.080mL，0.75mmol)，将反应溶液搅拌1小时。向反应溶液中加入蒸馏水(50mL)后，利用二氯甲烷(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物137(465mg，46％)。EI-MS m/z：[M+H]+1205.3，1/2[M+H]+603.0。
实施例39：化合物140的制备
Figure BDA0003147490830000931
化合物138的制备
将化合物137(465mg，0.38mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(20mL)后，在0℃的温度下，加入三光气(40mg，0.14mmol)和N-甲基咪唑(0.12mL，1.54mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(251mg，0.46mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(5mL)，加入N-甲基咪唑(0.03mL，0.38mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。搅拌17小时后，反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物138(261mg，38％)。EI-MS m/z：[M+H]+1772.3，1/2[M+H]+886.7。
化合物139的制备
将化合物138(261mg，0.147mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)后，加入四氢吡咯(0.018mL，0.221mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(5mg，0.0044mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌30分钟。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物139(198mg，80％)。EI-MS m/z：[M+H]+1688.5，1/2[M+H]+844.6。
化合物140的制备
将化合物139(198mg，0.117mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(1.5mL)后，在0℃的温度下，加入三光气(12.5mg，0.042mmol)和N-甲基咪唑(0.037mL，0.469mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(102.9mg，0.141mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(1.5mL)，加入N-甲基咪唑(0.009mL，0.117mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。在常温条件下，将反应溶液搅拌6小时后，加入乙酸乙酯(20mL)。有机层用蒸馏水(20mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物140(227mg)。EI-MS m/z：[M+H]+2444.6，1/2[M+H]+1222.8。
实施例40：化合物144的制备
Figure BDA0003147490830000951
化合物141的制备
将化合物140(227mg)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(1.0mL/1.0mL)，加入乙酸(2mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物141(100mg)。EI-MS m/z：[M+H]+2216.2，1/2[M+H]+1108.7。
化合物142的制备
将化合物141(100mg)溶解于二氯甲烷(1.5mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，45.9mg，0.108mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。向反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)后，利用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物142(64mg)。EI-MS m/z：[M+H]+2212.5，1/2[M+H]+1106.7。
化合物143的制备
将化合物142(64mg，0.029mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(1.4mL/1.4mL)后，在-50℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(7.3mg，0.173mmol)溶解于蒸馏水(1.4mL)的溶液。将反应温度缓慢升温至0℃并搅拌4小时后，反应溶液用乙酸中和，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物143(20mg)。EI-MS m/z：[M+H]+1917.5，1/2[M+H]+959.6。
化合物144的制备
将化合物143(20mg，0.010mmol)溶解于二氯甲烷(0.45mL)后，在0℃的温度下，缓慢加入三氟乙酸(0.05mL)。搅拌1小时后，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物144(9.2mg，46％)。EI-MS m/z：[M+H]+1817.9，1/2[M+H]+909.5。
实施例41：化合物148的制备
Figure BDA0003147490830000971
化合物146的制备
将化合物22(677mg，0.398mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(4mL)后，在0℃的温度下，加入三光气(42.5mg，0.143mmol)和N-甲基咪唑(0.13mL，1.59mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物145(305.9mg，0.478mmol，化合物145利用韩国公开专利第10-2018-0110645号中描述的方法制备)溶解于干燥的四氢呋喃(4mL)，加入N-甲基咪唑(0.03mL，0.398mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。在常温条件下，将反应溶液搅拌16小时后，加入乙酸乙酯(30mL)。有机层用蒸馏水(20mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物146(780mg)。EI-MS m/z：[M+H]+2342.1，1/2[M+H]+1171.4
化合物147的制备
将化合物146(780mg)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(3.5mL/3.5mL)，加入乙酸(7mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌6小时。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物147(393mg，3steps 47％)。EI-MS m/z：[M+H]+2113.5，1/2[M+H]+1057.2。
化合物148的制备
将化合物147(393mg)溶解于二氯甲烷(6mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtinperiodinane，174mg，0.409mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌6小时。向反应溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)后，利用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物148(310mg)。EI-MSm/z：[M+H]+2109.7，1/2[M+H]+1055.3。
实施例42：化合物151的制备
Figure BDA0003147490830000981
化合物149的制备
将化合物148(310mg)溶解于二氯甲烷(4.75mL)后，在0℃的温度下，缓慢加入三氟乙酸(0.5mL)。搅拌3小时后，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物149(380mg)。EI-MS m/z：[M+H]+2009.3，1/2[M+H]+1005.1。
化合物150的制备
将化合物149(160mg)和DBCO-PEG4-酸(40.6mg，0.074mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，依次加入1-[双(二甲氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑[4,5-b]吡啶鎓六氟磷酸盐(36.4mg，0.096mmol)和二异丙基乙胺(0.033mL，0.191mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌16小时后，向反应溶液中加入饱和氯化铵水溶液(20mL)后，利用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物150(98mg，2steps 52％)。EI-MS m/z：[M+Na]+2565.0，1/2[M+H]+1272.4。
化合物151的制备
将化合物150(98mg，0.0385mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(0.7mL/2.9mL)后，在-50℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(16.15mg，0.385mmol)溶解于蒸馏水(1.8mL)的溶液。将反应温度缓慢升温至0℃并搅拌2小时后，反应溶液用乙酸中和，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物151(13.2mg，15％)。EI-MS m/z：[M+H]+2249.1，1/2[M+H]+1125.3。
实施例43：化合物156的制备
Figure BDA0003147490830001001
化合物153的制备
将化合物152(4.9g，8.46mmol，化合物152利用ACS.Med.Chem.2016，7，11，983-987中描述的方法制备)溶解于N,N-二甲基甲酰胺/蒸馏水(98mL/6mL)后，加入乙酸钠(694mg，8.46mmol)，在70℃的温度、氮大气条件下，搅拌反应溶液。3小时后，将反应温度降温至常温，加入乙酸乙酯(100mL)。有机层依次用蒸馏水(70mL)和盐水(70mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物153(3.52g，98％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74(s，1H)，6.79(s，1H)，6.16(br s，1H)，5.54(s，1H)，4.65(m，1H)，3.98(s，3H)，2.84-2.71(m，1H)，2.60-2.45(m，1H)，1.62(s，3H)，1.58(s，1H)，0.89(s，9H)，0.10(s，6H)。
化合物154的制备
将化合物153(3.5g，8.49mmol)和化合物10(1.9g，3.69mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，在0℃的温度下，加入碳酸钾(2.6g，18.4mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物154(3.33g，78％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.75(d，2H)，7.13(s，1H)，7.01(s，2H)，6.80(s，2H)，5.55(s，2H)，5.18(s，4H)，4.65(m，2H)，4.16(s，4H)，3.96(s，7H)，3.87(t，J＝4.8Hz，3H)，3.71-3.63(m，13H)，2.86-2.66(m，2H)，2.58-2.44(m，2H)，1.59(s，6H)0.89(s，18H)，0.10(s，12H)。
化合物155的制备
将化合物154(3.3g，2.82mmol)溶解于乙醇(47mL)后，加入锌粉(Zinc dust，7.2g，113.06mmol)和甲酸(5％的乙醇溶液，3mL)，在常温、氮大气条件下，搅拌3小时。向反应溶液中加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物155(2.15g，70％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.02(s，1H)，6.92(s，2H)，6.75(s，2H)，6.25-6.15(m，4H)，5.08(s，4H)，4.71-4.55(m，2H)，4.29(s，4H)，4.18-3.62(m，23H)，2.78-2.64(m，2H)，2.58-2.46(m，2H)，1.62(2，6H)0.87(s，18H)，0.11-0.01(m，12H)。
化合物156的制备
将化合物155(2.2g，1.99mmol)溶解于二氯甲烷(250mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.4mL，4.97mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.19mL，1.79mmol)，将反应溶液搅拌3小时。向反应溶液中加入蒸馏水(100mL)后，利用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物156(730mg，35％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.76(br s，1H)，7.91(br s，1H)，7.09(s，1H)，6.97(s，1H)，6.94(s，1H)，6.80(s，1H)，6.75(s，1H)，6.26-6.10(m，3H)，5.99-5.88(m，1H)，5.33(d，J＝17.2Hz，1H)，5.22(d，J＝10.8Hz，1H)，5.13(s，2H)，5.10(s，2H)，4.72-4.56(m，4H)，4.29(br s，2H)，4.21-4.09(m，5H)，4.01-3.91(m，3H)，3.90-3.75(m，11H)，3.71-3.63(m，12H)，2.78-2.66(m，2H)，2.61-2.48(m，2H)，1.60(s，6H)0.87(s，18H)，0.11-0.01(m，12H)。
实施例44：化合物163的制备
Figure BDA0003147490830001021
化合物157的制备
将2-(三甲硅基)乙醇(1g，8.45mmol)和二(对硝基苯)碳酸酯(3.1g，10.14mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)后，在0℃的温度下，加入N,N-二异丙基乙胺(2.9mL，16.9mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌20小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物157(2.27g，95％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.27(d，2H)，7.37(d，2H)，4.39(t，2H)，1.15(t，2H)，0.08(s，9H)。
化合物159的制备
将化合物158(5.0g，17.2mmol，化合物158利用韩国公开专利第10-2018-0078329号中描述的方法制备)溶解于二氯甲烷(20mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入盐酸(4M的1,4-二氧六环溶液，8.61mL，34.4mmol)。搅拌2小时后，经减压浓缩得到化合物159(3.0g，76％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ5.48(br s，2H)，3.82(s，2H)，3.64(s，8H)，3.36(s，2H)。
化合物160的制备
将化合物159(1.1g，4.85mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(15mL)后，加入N,N-二异丙基乙胺(2.2mL，12.1mmol)和化合物157(1.7g，5.82mmol)后，在常温条件下，将反应溶液搅拌6小时后，加入乙酸乙酯(30mL)。有机层依次用蒸馏水(15mL)和盐水(15mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物160(450mg，27％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.71(s，1H)，4.30-4.21(m，2H)，4.03(s，1H)，3.79-3.61(m，8H)，3.40(s，2H)，1.68(s，1H)，1.03-0.95(m，2H)，0.03(s，9H)。
化合物161的制备
将化合物160(450mg，1.34mmol)溶解于甲醇(20mL)后，加入钯/炭(10％w/w，100mg)。在常温、氢大气条件下，将反应溶液搅拌18小时。反应溶液用硅藻土过滤后，经浓缩得到化合物161(371mg，89％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ4.30-4.18(m，2H)，4.06-3.98(m，2H)，3.78-3.59(m，8H)，3.58-3.52(m，2H)，2.87(t，2H)，1.02(t，2H)，0.03(s，9H)。
化合物163的制备
将化合物162(642mg，1.32mmol，化合物162利用韩国公开专利第10-2018-0078329号中描述的方法制备)和化合物161(371mg，1.20mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入N，N，N'，N'-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)六氟磷酸脲(1.2g，3.02mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.8mL，4.8mmol)。在常温条件下，将反应溶液搅拌14小时后，向反应溶液中加入饱和氯化铵水溶液(50mL)，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物163(621mg，67％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.12(s，1H)，7.95(s，1H)，7.50(t，1H)，7.45(d，J＝8.0Hz，1H)，6.99(d，J＝8.8Hz，1H)，5.42-5.20(m，4H)，4.62(s，2H)，4.31-4.14(m，3H)，3.96(s，2H)，3.62-3.48(m，15H)，2.41(br s，1H)，2.03(s，9H)，0.98(t，2H)，0.01(s，9H)。
实施例45：化合物166的制备
Figure BDA0003147490830001041
化合物164的制备
将化合物156(720mg，0.61mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(15mL)后，在-10℃的温度下，加入三光气(65mg，0.22mmol)和N-甲基咪唑(0.19mL，2.42mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(360mg，0.67mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(15mL)，加入N-甲基咪唑(0.05mL，0.6mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。1小时后，将反应溶液加热回流并搅拌12小时。反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物164(508mg，48％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.87-8.62(m，2H)，8.02(m，1H)，7.96-7.84(m，1H)，7.49-7.41(m，2H)，7.14(s，1H)，7.06-6.94(m，3H)，6.78(d，J＝3.2Hz，2H)，6.19(br s，2H)，5.98-5.84(m，1H)，5.41-5.02(m，10H)，4.69-4.54(m，4H)，4.21-4.06(m，5H)，4.02-3.88(m，2H)，3.87-3.74(m，9H)，3.72-3.62(m，14H)，3.59-3.52(m，2H)，3.39(s，2H)，2.77-2.64(m，2H)，2.58-2.48(m，2H)，2.03(s，9H)，1.66(s，6H)，0.86(s，18H)，0.09-0.01(m，12H)。
化合物165的制备
将化合物164(495mg，0.28mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入四氢吡咯(0.070mL，0.84mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(8mg，0.007mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌2小时。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物165(372mg，79％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.91-8.79(m，1H)，7.93(br s，1H)，7.59-7.34(m，2H)，7.10(s，1H)，7.03(s，1H)，6.97(d，J＝11.6Hz，2H)，6.78(d，J＝12.8Hz，2H)，6.22(d，J＝14.0Hz，2H)，5.46-5.26(m，3H)，5.12(d，J＝12.8Hz，6H)，4.64(br s，2H)，4.32(br，2H)，4.24-4.20(m，1H)，4.16(s，5H)，4.04-3.89(m，3H)，3.87-3.64(m，26H)，3.57(s，3H)，3.31(s，2H)，3.23(s，1H)，2.78-2.64(m，2H)，2.62-2.48(m，2H)，2.05(s，9H)，1.68(s，6H)，0.88(s，18H)，0.04(s，12H)。
化合物166的制备
将化合物165(365mg，0.22mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(10mL)后，在-10℃的温度下，加入三光气(23mg，0.08mmol)和N-甲基咪唑(0.07mL，0.87mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物163(200mg，0.26mmol)溶解于干燥的四氢呋喃(10mL)，加入N-甲基咪唑(0.04mL，0.44mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。1小时后，将反应溶液加热回流并搅拌16小时。反应溶液用乙酸乙酯(30mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物166(513mg)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.84(br s，1H)，8.08-7.99(m，2H)，7.98-7.88(m，2H)，7.71-7.62(m，1H)，7.58-7.51(m，1H)，7.49-7.41(m，6H)，7.09-6.98(m，4H)，6.79(s，2H)，6.20(br s，2H)，5.42-5.24(m，8H)，5.19-5.04(m，6H)，4.66(s，4H)，4.24-4.16(m，4H)，4.04-3.92(m，4H)，3.88-3.76(m，1H)，3.76-3.64(m，3H)，3.55(s，3H)，3.41(s，2H)，3.31(s，1H)，2.78-2.64(m，2H)，2.59-2.49(m，2H)，2.04(s，18H)，1.67(s，6H)，1.00(t，J＝8.4Hz，2H)，0.87(s，18H)，0.02(s，21H)。
实施例46：化合物170的制备
Figure BDA0003147490830001061
化合物167的制备
将化合物166(513mg，0.21mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(4mL/4mL)，加入乙酸(8mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物167(172mg)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.44(br s，1H)，8.14-7.96(m，2H)，7.72-7.49(m，2H)，7.48-7.32(m，2H)，7.09(s，1H)，7.08-6.84(m，4H)，6.80(s，2H)，6.04(s，2H)，5.44-5.24(m，5H)，5.23-4.98(m，6H)，4.70(s，2H)，4.28-4.06(m，7H)，4.01(S，1H)，3.90-3.76(m，9H)，3.76-3.61(m，18H)，3.56(s，3H)，3.41(s，2H)，3.31(s，1H)，2.90-2.74(m，2H)，2.36-2.22(m，2H)，2.14-2.08(m，3H)，2.04(s，18H)，1.64(s，6H).EI-MS m/z：[M+H]+2247.3，1/2[M+H]+1124.2。
化合物168的制备
将化合物167(165mg，0.056mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，52mg，0.12mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌24小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物168(128mg，78％)。EI-MS m/z：[M+H]+2243.3，1/2[M+H]+1121.5。
化合物169的制备
将化合物168(120mg，0.053mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(1mL/3mL)后，在-78℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(22mg，0.54mmol)溶解于蒸馏水(1mL)的溶液。将反应温度缓慢升温至0℃并搅拌4小时。反应溶液用乙酸中和后，减压浓缩反应溶液，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到白色固体化合物169(20mg，20％)。EI-MS m/z：[M+H]+1950.7，1/2[M+H]+975.2。
化合物170的制备
将化合物169(19mg，0.01mmol)稀释于四氢呋喃(2mL)后，在室温条件下，加入四丁基氟化铵(0.28mL，0.29mmol)，搅拌2小时。将反应溶液减压浓缩后，进行树脂纯化，经高效液相色谱纯化、冷冻干燥得到白色固体化合物170(2.3mg)。EI-MS m/z：[M+H]+1804.9，1/2[M+H]+903.1。
实施例47：化合物174的制备
Figure BDA0003147490830001081
化合物171的制备
将化合物21(500mg，0.28mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(3mL/3mL)，加入乙酸(6mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌6小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物171(284mg，65％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.43(br s，2H)，8.05(s，1H)，7.52(s，1H)，7.40(s，2H)，7.06-6.98(m，1H)，6.95(s，1H)，6.89(s，2H)，6.94-6.74(m，2H)，5.48-5.25(m，5H)，5.24-5.05(m，7H)，5.01-4.75(m，4H)，4.78-4.46(m，4H)，4.17(s，7H)，3.90-3.86(m，3H)，3.84-3.76(m，6H)，3.73-3.65(m，16H)，3.62-3.54(m，3H)，3.41(s，3H)，2.90-2.74(m，2H)，2.36-2.22(m，2H)，2.04(s，3H)，2.04(s，18H)，1.64(s，6H).EI-MS m/z：[M+H]+2247.3，1/2[M+H]+1124.2。
化合物172的制备
将化合物171(280mg，0.056mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，52mg，0.12mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌24小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物172(266mg，78％)。EI-MS m/z：[M+H]+1527.53，1/2[M+H]+1549.36.
化合物173的制备
将化合物172(226mg，0.17mmol)溶解于甲醇/四氢呋喃(2mL/6mL)后，在-78℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(43mg，1.04mmol)溶解于蒸馏水(6mL)的溶液。将反应温度缓慢升温至0℃并搅拌4小时。反应溶液用乙酸中和后，减压浓缩反应溶液，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到白色固体化合物173(151mg，63％)。EI-MS m/z：[M+H]+1372.84，1/2[M+H]+686.83.
化合物174的制备
将化合物173(100mg，0.07mmol)溶解于二氯甲烷(4mL)后，加入四氢吡咯(0.010mL，0.09mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(2mg，0.004mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌2小时。向反应溶液中加入蒸馏水(20mL)后，利用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物174(46.9mg，53％)。EI-MS m/z：[M+H]+1270.5，1/2[M+H]+635.8。
实施例48：化合物176的制备
Figure BDA0003147490830001091
化合物175的制备
将化合物84(2.0g，3.9mmol)溶解于二氯甲烷(30mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒(1.3g，4.2mmol)和三乙胺(0.7mL，4.6mmol)。在0℃的温度下，将反应溶液搅拌3小时后，减压浓缩反应溶液，经柱层析纯化得到化合物175(2.5g，88％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(s，12H)，0.94(s，18H)，1.47(s，9H)，1.50(s，9H)，3.62(m，4H)，3.67(m，2H)，3.74(m，2H)，3.88(t，2H)，4.13(t，2H)，4.69(s，4H)，6.77(s，2H)，6.86(s，1H)，8.59(s，1H)，11.48(s，1H)。
化合物176的制备
将化合物175(2.2g，2.9mmol)溶解于四氢呋喃(30mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入四丁基氟化铵(1M的四氢呋喃溶液，7.4mL，7.4mmol)，在0℃的温度下，搅拌2小时。将反应溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释，依次用饱和氯化铵水溶液(50mL)、蒸馏水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后，减压浓缩，经柱层析纯化得到化合物176(1.5g，93％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.50(s，9H)，3.60(m，4H)，3.69(m，2H)，3.75(m，2H)，3.87(t，2H)，4.16(t，2H)，4.65(sd，4H)，6.87(s，2H)，6.92(s，1H)，8.59(s，1H)，11.41(s，1H)。
实施例49：化合物179的制备
Figure BDA0003147490830001111
化合物177的制备
将化合物176(800mg，1.51mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)、N,N-二甲基甲酰胺(7mL)后，在0℃的温度下，依次加入化合物57(1.4g，3.33mmol)、三苯基膦(994mg，3.79mmol)、偶氮二甲酸二异丙酯(0.74mL，3.79mmol)，在氮大气、常温条件下，搅拌3小时。向反应溶液中加入蒸馏水(30mL)后，利用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物177(1.7g，84％)。EI-MS m/z：[M+H]+1336.4。
化合物178的制备
将化合物177(1.7g，1.27mmol)溶解于乙酸乙酯(12mL)和乙醇(12mL)后，加入锌粉(Zinc dust，5.03g，76.9mmol)，加入在乙醇(12mL)中稀释的甲酸(2.9mL，76.9mmol)。在常温条件下，搅拌4小时后，用乙酸乙酯(30mL)稀释，利用硅藻土过滤并加入乙酸乙酯(100mL)。有机层依次用蒸馏水(150mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)以及盐水(100mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，经柱层析纯化得到化合物178(1.21g，74％)。EI-MSm/z：[M+H]+1276.4。
化合物179的制备
将化合物178(1.2g，0.94mmol)溶解于二氯甲烷(50mL)后，在-78℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.22mL，2.82mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.1mL，0.94mmol)，将反应溶液搅拌3小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物179(312mg，23％)。EI-MS m/z：[M+H]+1360.5。
实施例50：化合物182的制备
Figure BDA0003147490830001121
化合物180的制备
将化合物179(312mg，0.23mmol)和三光气(24mg，0.082mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(15mL)后，在-10℃的温度下，加入N-甲基咪唑(91μL，1.15mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物20(148mg，0.27mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(3mL)，加入N-甲基咪唑(18μL，0.23mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液，在常温条件下，搅拌17小时。反应溶液用二氯甲烷(20mL)稀释，用蒸馏水(30mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物180(315mg，69％)。EI-MS m/z：[M+H]+1927.8，1/2[M+H]+964.5
化合物181的制备
将化合物180(315mg，0.16mmol)溶解于二氯甲烷(3mL)后，加入四氢吡咯(40μL，0.49mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(9mg，0.008mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌30分钟。向反应溶液中加入蒸馏水(10mL)后，利用二氯甲烷(2×10mL)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物181(221mg，80％)。EI-MS m/z：[M+H]+1843.8，1/2[M+H]+922.4。
化合物182的制备
将化合物181(221mg，0.12mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(12mL)后，在0℃的温度下，加入三光气(12mg，0.043mmol)和N-甲基咪唑(38μL，0.48mmol)，在氮大气条件下，搅拌1小时。将化合物23(105mg，0.14mmol)溶解于干燥的二氯甲烷(5mL)，加入N-甲基咪唑(9.5μL，0.12mmol)后，向反应溶液中缓慢加入该溶液。搅拌17小时后，反应溶液用二氯甲烷(15mL)稀释后，用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物182(131mg，42％)。EI-MS m/z：1/2[M+H]+1301.1。
实施例51：化合物183的制备
Figure BDA0003147490830001141
化合物183利用化合物182并通过类似于化合物97的合成的方法制备。EI-MS m/z：[M+H]+1788.5，1/2[M+H]+895.3。
实施例52：化合物188的制备
Figure BDA0003147490830001142
化合物184的制备
将化合物117(250mg，0.218mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)后，在0℃的温度、氮大气条件下，加入吡啶(0.035mL，0.436mmol)和氯甲酸烯丙酯(0.026mL，0.24mmol)，将反应溶液搅拌1小时。反应溶液用二氯甲烷(30mL)稀释，用蒸馏水(40mL)洗涤后，用无水硫酸钠干燥有机层。经过滤及减压浓缩得到化合物184(粗品273mg，quant.)。
化合物185的制备
将化合物184(粗品273mg，0.218mmol)溶解于四氢呋喃/蒸馏水(3mL/3mL)，加入乙酸(7mL)后，在常温、氮大气条件下，搅拌16小时。减压浓缩反应溶液后，经柱层析纯化得到化合物185(210mg，96％)。
化合物186的制备
将化合物185(210mg，0.209mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入戴斯-马丁试剂(Dess-MaRtin periodinane，205mg，0.48mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌4小时。反应溶液用二氯甲烷(30mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤及减压浓缩后，经柱层析纯化得到化合物186(146mg，70％)。EI-MS m/z：[M+H]+997.6，1/2[M+H]+499.4。
化合物187的制备
将化合物186(146mg，0.146mmol)溶解于四氢呋喃(1.6mL)后，在0℃的温度下，缓慢加入将氢氧化锂(9.2mg，0.219mmol)溶解于蒸馏水(1.6mL)的溶液，在常温条件下，搅拌6小时。反应溶液用乙酸中和，减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物187(102mg，71％)。EI-MS m/z：[M+H]+983.7，1/2[M+H]+492.5。
化合物188的制备
将化合物187(102mg，0.103mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)后，加入四氢吡咯(0.04mL，0.515mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(2.4mg，0.002mmol)，在常温、氮大气条件下，搅拌1小时。减压浓缩反应溶液后，经高效液相色谱纯化和冷冻干燥得到化合物188(33mg，41％)。EI-MS m/z：[M+H]+779.5，1/2[M+H]+390.4。
实施例53：
抗体药物偶联物的制备
抗体药物偶联物通过如下两个步骤来制备，共同使用的LCB14-0512和LCB14-0606利用韩国公开专利第10-2014-0035393号中描述的方法制备。LCB14-0512和LCB14-0606的结构式如下：
Figure BDA0003147490830001161
步骤1：异戊烯基化抗体(prenylated antibody)的制备
制备抗体的异戊烯化(prenylation)反应混合物并在30℃的温度下使其反应16小时。抗体利用了韩国公开专利第10-2014-0035393号中使用的赫赛汀-G7-CVIM(LC)。反应混合物由24μM的抗体以及包含200nM的法尼基蛋白转移酶(Calbiochem#344145)和0.144mM的LCB14-0606(in house，韩国公开专利第10-2014-0035393号)的缓冲溶液(50mM的Tris-HCl(pH7.4)、5mM的MgCl2、10μM的ZnCl2、0.25mM的DTT)组成。反应结束后，异戊烯化抗体利用由PBS缓冲溶液均衡化的G25 Sepharose柱(AKTA purifier，GE healthcare)来制盐。
步骤2：药物偶联(Drug-conjugation)方法
异戊烯化抗体与连接体-药物之间的肟键生成反应混合物通过混合pH为5.2的100mM的Na-乙酸盐缓冲溶液、10％的DMSO、24μM的抗体以及240μM的连接体-药物(inhouse，表1的化合物)来制备，在30℃的温度下，轻轻搅拌。反应24小时后，通过快速蛋白液相色谱(FPLC)(AKTA purifier，GE healthcare)过程去除所使用过的过量的小分子(smallmolecule)，收集蛋白质分馏物并浓缩。
表1：
抗HER2抗体药物偶联物制备目录
Figure BDA0003147490830001162
Figure BDA0003147490830001171
实验例1：生物体外(In vitro)细胞毒性评价
测定对于在下述表2和表3中记载的药物以及抗体药物偶联物的癌细胞株的细胞增殖抑制活性。作为癌细胞株使用了市售的人类乳腺癌细胞株MCF-7(HER2阴性或正常)、SK-BR3(HER2阳性)以及JIMT-1(HER2阳性)。作为对照物质使用了SG2057以及使用SG2057作为毒素的表1的LCB14-0235。在96-孔板中，每个孔(well)接种(seeding)5000个SK-BR3、5000个MCF-7以及2500个JIMT-1，培养24小时后，以25fM～10nM(连续稀释5倍)的浓度处理抗体药物偶联物，以25fM～10nM(连续稀释5倍)或1fM～100nM(连续稀释10倍)的浓度处理药物。使用磺胺罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)染料定量经144小时之后存活的细胞数。
表2：
吡咯并苯并二氮杂衍生物的细胞毒性比较
Figure BDA0003147490830001172
Figure BDA0003147490830001181
对照物质SG2057的结构如下。
Figure BDA0003147490830001182
确认在SK-BR3、JIMT-1以及MCF7乳腺癌细胞株中，相对于对照物质吡咯并苯并二氮杂(SG2057)，新制备的吡咯并苯并二氮杂32、33、52、53以及188的细胞毒性非常弱。
表3：
抗HER2抗体药物偶联物的细胞毒性比较
Figure BDA0003147490830001183
用于作为对照物质抗体药物偶联物的LCB14-0235的连接体-药物LCB20-0174的结构如下。(LCB20-0174利用韩国公开专利第10-2018-0110645号中描述的方法制备。)
Figure BDA0003147490830001191
在SK-BR3和JIMT-1乳腺癌细胞株中，相对于新制备的吡咯并苯并二氮杂衍生物32、52本身，在抗体药物偶联物中引入连接体-药物28和48的抗体药物偶联物1、2的细胞毒性以抗原依赖性方式呈现出非常优异的功效。并且，包含抗体药物偶联物1、2的其他新型抗体药物偶联物1～9以抗原依赖性方式在SK-BR3细胞株中呈现出0.01～0.05nM的IC50，在JIMT-1细胞株中呈现出0.13nM～10nM以上的IC50。尤其，抗体药物偶联物1、5、6、8呈现出与对照物质LCB14-0235几乎相同的药效。
实验例2：生物体内异种移植实验
使用作为过表达HER2的人类乳腺癌细胞株的同时对赫赛汀(Herceptin)和T-DM1有抗性的JIMT-1细胞株(购自：Addexbio)评价抗体药物偶联物的功效。将JIMT-1细胞株与基质胶(matrigel)以1：1的比例混合，向每一只6周龄雌性小鼠(female mouse)的右侧胁腹皮下给药0.2mL的2×106细胞。当肿瘤大小达到平均1mm3时，将其分组，向尾静脉单次给药10mL/kg的受试物质，每周测量肿瘤大小和体重2次。
在单次给药2mg/kg的抗体药物偶联物1的组中，第42天后所有个体的肿瘤均消失，证实具有优异的肿瘤抑制能力(参照图2)。
实验例3：大鼠游离毒性实验
将21只8周龄雄性SD大鼠分为7组，每组3只，向尾静脉单次给药2mL/kg的受试物质后，观察体重/是否死亡/临床症状等。每周测量体重2次，每天观察是否死亡和临床症状。给药4周后，进行计划安乐死以检查器官的肉眼观察意见。其结果如图3所示。
当SG2057和化合物32以相同剂量给药时，证实SG2057在0.02mg/kg和0.04mg/kg组中显著抑制体重增加。第4周实验结束时，对照组(Vehicle)较给药时体重增加167％，SG2057给药组的体重分别确定为167％、148％、115％。然而，化合物32给药组呈现出与对照组相似的体重增加方式，对由毒性引起的体重增加的抑制水平很微小，分别确定为171％、164％、161％。由此，预测与SG2057相比，化合物32在SD大鼠中的毒性较低。
实验例4：旁观者效应(Bystander effect)实验
测定对于下述表4中记载的药物以及抗体药物偶联物的癌细胞株的细胞增殖抑制活性。作为HER2阳性细胞株使用了SK-BR3人类乳腺癌细胞株(购自：韩国细胞系银行(KCLB))，作为HER2阴性细胞株使用了MDA-MB-468人类三阴性乳腺癌细胞株(购自：ATCC)。作为对照物质使用了已知可呈现出旁观者效应的MMAE，作为游离毒素(free toxin)使用了已知未呈现出旁观者效应(Bystander effect)的MMAF。比较SG2057与SG2057的衍生物，并处理如上所述的包含游离毒素的每种抗体药物偶联物，以确认毒素(toxin)以及抗体药物偶联物是否有旁观者效应(Bystander effect)。实验中使用的抗体药物偶联物均为抗HER2抗体药物偶联物。在96-孔板中，每个孔(well)接种6000个SK-BR3、6000个MDA-MB-468，或者将3000个SK-BR3和3000个MDA-MB-468一起接种并培养24小时后，用1nM的单一浓度处理每种药物以及抗体药物偶联物。使用磺胺罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)染料定量经144小时之后存活的细胞数。
表4：
Figure BDA0003147490830001201
Figure BDA0003147490830001211
对于新合成的化合物32，与MMAE和SG2057不同，在SK-BR3细胞株和MDA-MB-468细胞株的共培养条件下均未呈现出细胞毒性。这种趋势与已知没有旁观者效应(Bystandereffect)的MMAF相似。并且，对于引入化合物32的抗体药物偶联物1，仅在SK-BR3中呈现出依赖于抗原表达水平的细胞毒性，在共培养条件下，仅呈现出微弱的细胞毒性，确认细胞的存活率为71％。然而，对于引入SG2057的LCB14-0235，在SK-BR3中呈现出优异的细胞毒性，由于旁观者效应(Bystander effect)，即使在共培养条件下，也呈现出32％的细胞存活率(参照图4)。上述结果表明化合物32和抗体药物偶联物1没有旁观者效应(Bystander effect)。
产业可利用性
本发明的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物在游离毒素(free toxin)形式的情况下，活性降低而呈现出显著减少毒性的效果，并且，当将配体-药物缀合物作为药物应用并给药时，抗癌活性等同甚至优异于现有抗癌剂。治疗指数(therapeutic index)显著提高，因此，可以使对诸如癌症之类的增殖性疾病的靶向、特异性治疗、药效最大化并使副作用表达最小化，从而能够用于增殖性疾病的治疗领域。

Claims (36)

1.一种吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物具有下述化学式I的结构：
化学式I：
Figure FDA0003147490820000011
在上述式中，
虚线表示C1与C2或C2与C3之间存在任意双键，
R1选自由氢、OH、＝O、＝CH2、CN、Rm、ORm、＝CH-Rm'＝C(Rm')2、O-SO2-Rm、CO2Rm、CORm、卤代以及二卤代组成的组中，或者R1能够是以下R6的定义中描述的那些之一；
Rm选自由取代或未取代的C1-12烷基、取代或未取代的C2-12烯基、取代或未取代的C2-12炔基、取代或未取代的C5-20芳基、取代或未取代的C5-20杂芳基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的3元至7元杂环基、取代或未取代的3元至7元杂环烷基以及取代或未取代的5元至7元杂芳基组成的组中，
在C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、C5-20芳基、C5-20杂芳基、C3-6环烷基、3元至7元杂环基、3元至7元杂环烷基或5元至7元杂芳基被取代的情况下，C1-12烷基、C1-12烷氧基、C2-12烯基、C2-12炔基、C5-20芳基、C5-20杂芳基、C3-6环烷基、3元至7元杂环基、3元至7元杂环烷基或5元至7元杂芳基的各氢原子分别独立地被选自由C1-12烷基、C2-12烯基、C2-12炔基、C5-20芳基、C5-20杂芳基、C3-6环烷基、3元至7元杂环基、3元至7元杂环烷基以及5元至7元杂芳基组成的组中的一种以上取代，
Rm'选自由Rm、CO2Rm、CORm、CHO、CO2H以及卤代组成的组中；
R2、R3以及R5分别独立地选自由H、Rm、OH、ORm、SH、SRm、NH2、NHRm、NRmRm'、NO2、Me3Sn以及卤代组成的组中，
Rm以及Rm'如上所定义；
R4选自氢、Rm、OH、ORm、SH、SRm、NH2、NHRm、NRmRm'、NO2、Me3Sn、卤代、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C1-6烷氧基、取代或未取代的C2-6烯基、取代或未取代的C2-6炔基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的3元至7元杂环烷基、取代或未取代的C5-12芳基、取代或未取代的5元至7元杂芳基、-CN、-NCO、-ORn、-OC(O)Rn、-OC(O)NRnRn'、-OS(O)Rn、-OS(O)2Rn、-SRn、-S(O)Rn、-S(O)2Rn、-S(O)NRnRn'、-S(O)2NRnRn'、-OS(O)NRnRn'、-OS(O)2NRnRn'、-NRnRn'、-NRnC(O)RO、-NRnC(O)ORO、-NRnC(O)NRoRo'、-NRnS(O)RO、-NRnS(O)2RO、-NRnS(O)NRoRo'、-NRnS(O)2NRoRo'、-C(O)Rn、-C(O)ORn以及-C(O)NRnRn'组成的组中，
在C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-12芳基、5元至7元杂芳基被取代的情况下，C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-12芳基、5元至7元杂芳基的各氢原子分别独立地被C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-C6环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-10芳基、5元至7元杂芳基、-ORp、-OC(O)Rp、-OC(O)NRpRp'、-OS(O)Rp、-OS(O)2Rp、-SRp、-S(O)Rp、-S(O)2Rp、-S(O)NRpRp'、-S(O)2NRpRp'、-OS(O)NRpRp'、-OS(O)2NRpRp'、-NRpRp'、-NRpC(O)Rq、-NRpC(O)ORx、-NRpC(O)NRxRx'、-NRpS(O)Rx、-NRpS(O)2Rx、-NRpS(O)NRxRx'、-NRpS(O)2NRxRx'、-C(O)Rp、-C(O)ORp或-C(O)NRpRp取代，
Rn、Ro、Rp、Rx、Rn'、Ro'、Rp'以及Rx'分别独立地选自由H、C1-7烷基、C2-7烯基、C2-7炔基、C3-13环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基以及5元至7元杂芳基组成的组中，或者
R4能够是以下R6的定义中描述的那些之一；
在X以及X'附着有分别独立地选自由-C(O)O*、-S(O)O*、-C(O)*、-C(O)NR*、-S(O)2NR*、-P(O)R'NR*、-S(O)NR*、以及-PO2NR*基组成的组中的一种，
*为附着有连接体的部分，
R以及R'分别独立地为H、OH、N3、CN、NO2、SH、NH2、ONH2、NHNH2、卤代、取代或未取代的C1-8烷基、取代或未取代的C3-8环烷基、取代或未取代的C1-8烷氧基、取代或未取代的C1-8烷基硫基、取代或未取代的C3-20杂芳基、取代或未取代的C5-20芳基或单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基，
在C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、C3-20杂芳基、C5-20芳基被取代的情况下，被选自由H、OH、N3、CN、NO2、SH、NH2、ONH2、NNH2、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基以及C5-12芳基组成的组中的取代基取代；
Y以及Y'分别独立地选自由O、S以及N(H)组成的组中；
R6为具有下述化学式II的结构的极性官能团，
化学式II：
-A-B1-B2-C，
A为被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-20芳基、C3-8环烷基、3元至7元杂环烷基或5元至7元杂芳基，
B1为键、-O-、-NH-、-S-、-CO2、-CONRm-、-CONRmRm'、-CH＝CH-、-C≡C-、-N-、-P-，或者B1能够为支化单元，
支化单元为C2-100烯基、亲水性氨基酸、-C(O)-、-C(O)NR””-、-C(O)O-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-C(O)-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-C(O)-、-S(O)2NR””-、-P(O)R””'NR””-、-S(O)NR””-或-PO2NR””-，其中，烯基的碳原子能够被一个或多个选自由N、O以及S组成的组中的杂原子取代，烯基还能够被一个或多个C1-20烷基取代，R””以及R””'分别独立地为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C5-20芳基，s、t、u以及v分别独立地为0至10的整数，
B2具有键、-(CH2)r(V(CH2)p)q-、-((CH2)pV)q-、-V(Y(CH2)p)q-、-(CH2)r(V(CH2)p)qY-、-((CH2)pV)q(CH2)r-、-Y((CH2)pV)q-或-(CH2)r(V(CH2)p)qYCH2-结构，r为0至10的整数，p为1至10的整数，q为1至20的整数，V以及Y分别独立地为单键、-O-、-S-、-NR21-、-C(O)NR22-、-NR23C(O)-、-NR23C(O)R24-、-NR24SO2-或-SO2NR25-，R21至R25分别独立地为氢、(C1-6)亚烷基、(C1-6)烷基、(C1-6)烷基(C6-20)芳基或(C1-6)烷基(C3-20)杂芳基；
C选自由-RqORr、-ORr、-OC(O)ORr、-RqOC(O)ORr、-C(O)ORr、-RqC(O)ORr、-C(O)Rr、-RqC(O)Rr、-OC(O)Rr、-RqOC(O)Rr、-(RqO)n-ORr、-(ORq)n-ORr、-C(O)-O-C(O)Rr、-RqC(O)-O-C(O)Rr、-SRr、-RqSRr、-SSRr、-RqSSRr、-S(＝O)Rr、-RqS(＝O)Rr、-RqC(＝S)Rr-、-RqC(＝S)SRr、-RqSO3Rr、-SO3Rr、-CN、-RqCN、
Figure FDA0003147490820000041
Figure FDA0003147490820000042
-SO2Rq、-RqSO2Rr、-OSO2Rr、-RqOSO2Rr、-OSO2ORr、-RqOSO2ORr、
Figure FDA0003147490820000043
Figure FDA0003147490820000044
Figure FDA0003147490820000051
Figure FDA0003147490820000052
以及
Figure FDA0003147490820000053
组成的组中，
Rq和Rq'相同或不同，且分别独立地为，
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的直链或支链亚烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链亚烯基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链亚炔基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C3-12的亚环烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C6-40的亚芳基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的亚烷氧基；或者
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的亚羰基氧基，
Rr和Rs相同或不同，且分别独立地为，
氢；
卤素；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的直链或支链烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链烯基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C2-20的直链或支链炔基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C3-12的环烷基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C6-40的芳基；
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的烷氧基；或者
被选自卤素、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、芳基、卤代芳基、芳烷基、卤代芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羧基、羰基氧基、卤代羰基氧基、芳氧基、卤代芳氧基、甲硅烷基以及甲硅烷氧基中的一种以上的取代基取代或未取代的C1-20的羰基氧基，
n分别独立地为1至10的整数，
R7为H、取代或未取代的C1-6烷基、取代或未取代的C2-6烯基、取代或未取代的C2-6炔基、取代或未取代的C3-6环烷基、取代或未取代的3元至7元杂环烷基、取代或未取代的C6-10芳基、取代或未取代的5元至7元杂芳基、-ORt、-OC(O)Rt、-OC(O)NRtRt'、-OS(O)Rt、-OS(O)2Rt、-SRt、-S(O)Rt、-S(O)2Rt、-S(O)NRtRt'、-S(O)2NRrRr'、-OS(O)NRtRt'、-OS(O)2NRtRt'、-NRtRt'、-NRtC(O)Ru、-NRtC(O)ORu、-NRtC(O)NRuRu'、-NRtS(O)Ru、-NRtS(O)2Ru、-NRtS(O)NRuRu'、-NRtS(O)2NRuRu、-C(O)Rt、-C(O)ORu或-C(O)NRtRt'，
在C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基、5元至7元杂芳基被取代的情况下，C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基、5元至7元杂芳基的各氢原子分别独立地被C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、3元至7元杂环烷基、C6-10芳基、5元至7元杂芳基、-ORv、-OC(O)Rv、-OC(O)NRvRv'、-OS(O)Rv、-OS(O)2Rv、-SRv、-S(O)Rv、-S(O)2Rv、-S(O)NRvRv'、-S(O)2NRvRv'、-OS(O)NRvRv'、-OS(O)2NRvRv'、-NRvRv'、-NRvC(O)Rw、-NRvC(O)ORw、-NRv、C(O)NRwRw'、-NRvS(O)Rw、-NRvS(O)2Rw、-NRvS(O)NRwRw'、-NRvS(O)2NRwRw'、-C(O)Rv、-C(O)ORv或-C(O)NRvRv'取代，
Rt、Rt'、Ru、Ru'、Rv、Rv'、Rw以及Rw'分别独立地选自由H、C1-7烷基、C2-7烯基、C2-7炔基、C3-13环烷基、3元至7元杂环烷基、C5-10芳基以及5元至7元杂芳基组成的组中。
2.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中，R1选自由H、OH、＝O、＝CH2、CN以及C1-6烷基组成的组中。
3.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，R2、R3以及R5分别独立地选自由H、OH以及ORm组成的组中，Rm如权利要求1中所定义。
4.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，R4选自由H、Rm、OH以及ORm组成的组中，Rm为C1-6烷基。
5.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Y以及Y'为O。
6.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，
R6具有下述化学式II的结构，
化学式II：
-A-B1-B2-C，
A为C1-6烷基或C3-20芳基；
B1选自由-O-、-NH-、-C≡C-以及-CONRmRm'组成的组中，Rm以及Rm'分别独立地为氢或C1-6烷基；
B2为-((CH2)pV)q-或-V(Y(CH2)p)q-，
V为O或-NR23C(O)R24-，R23以及R24分别独立地为氢或C1-6亚烷基，
p为2，
q为1至10的整数；
C为RqC(O)ORr或
Figure FDA0003147490820000091
Rq以及Rq'分别独立地为C1-6亚烷基、C2-6亚烯基或C2-6亚炔基，
Rr以及Rs分别独立地选自由氢、羧基、被羧基取代的C1-6烷基以及C1-6烷基组成的组中。
7.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，R7为氢、C1-6烷基或ORt，Rt为H或C1-7烷基。
8.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，X以及X'分别独立地选自由-C(O)O*、-C(O)*以及-C(O)NR*组成的组中，R分别独立地为H、OH、N3、CN、NO2、SH、NH2、ONH2、NNH2、卤代、C1-3烷基或C1-3烷氧基。
9.根据权利要求1所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，
上述吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物为选自由
Figure FDA0003147490820000101
Figure FDA0003147490820000111
Figure FDA0003147490820000112
以及
Figure FDA0003147490820000113
组成的组中的一种。
10.一种缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，缀合物具有下述化学式III的结构：
化学式III：
Ligand-(L-D)n，
在上述式中，
Ligand为配体，
L为连接体，
D为权利要求1至9中任一项所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体化合物，
连接体通过D的N10位置、N10'位置或者N10以及N10'位置与D相结合，
n为1至20的整数。
11.根据权利要求10所述的缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，连接体通过权利要求1至9中任一项所述的化合物的X以及X'与化合物相结合。
12.根据权利要求10所述的缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，n为1至10的整数。
13.一种吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物具有下述化学式IV的结构：
化学式IV：
Figure FDA0003147490820000121
在上述式中，
虚线、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、R7'、X'以及Y'分别与权利要求1所述的化学式I的化合物的定义相同，
Xa以及Xa'分别独立地为键或者取代或未取代的C1-6亚烷基，在C1-6亚烷基被取代的情况下，被氢、C1-8烷基或C3-8环烷基取代，
G及G'为葡萄糖醛酸苷基、半乳糖苷基或其衍生物，
Z选自由H、C1-8烷基、卤代、NO2、CN、
Figure FDA0003147490820000131
Figure FDA0003147490820000132
以及-(CH2)m-OCH3组成的组中，
n为1至3的整数，在n为2以上的整数的情况下，每个Z能够相同或不同，
W为-C(O)-、-C(O)NR”-、-C(O)O-、-S(O)2NR”-、-P(O)R”'NR”-、-S(O)NR”-或-PO2NR”，上述R”以及R”'分别独立地为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C6-20芳基，
L为选自由支化单元、连接单元以及键合单元组成的组中的一种以上的单元或这些单元的组合，
连接单元用于连接W与键合单元、W与支化单元、支化单元与支化单元或者支化单元与键合单元，支化单元用于连接连接单元与W或者连接单元与另一连接单元，
支化单元为C2-100烯基、亲水性氨基酸、-C(O)-、-C(O)NR””-、-C(O)O-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-C(O)-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-C(O)-、-S(O)2NR””-、-P(O)R””'NR””-、-S(O)NR””-或-PO2NR””-，其中，烯基的碳原子能够被一个或多个选自由N、O以及S组成的组中的杂原子取代，烯基还能够被一个或多个C1-20烷基取代，R””以及R””'分别独立地为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C5-20芳基，s、t、u以及v分别独立地为0至10的整数，
连接单元为-(CH2)r(V(CH2)p)q-，r为0至10的整数，p为0至12的整数，q为1至20的整数，V为单键、-O-或S-，
键合单元为
Figure FDA0003147490820000133
Figure FDA0003147490820000141
L1为单键或C2-30烯基，R11为H或C1-10烷基，L2为C2-30烯基；
Rv为-NH2、N3、取代或未取代的C1-12烷基、C1-12炔基、C1-3烷氧基、取代或未取代的C3-20杂芳基、C3-20杂环基或取代或未取代的C5-20芳基，
在C1-12烷基、C3-20杂芳基、C3-20杂环基或C5-20芳基被取代的情况下，存在于C3-20杂芳基、C3-20杂环基或C5-20芳基的一种以上的氢原子分别独立地被OH、＝O、卤代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯氧基、羧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基羰基、甲酰基、C3-8芳基、C5-12芳氧基、C5-12芳基羰基或C3-6杂芳基取代。
14.根据权利要求13所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Xa以及Xa'分别独立地为键或C1-3烷基。
15.根据权利要求13所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，
Z选自由H、
Figure FDA0003147490820000142
以及-(CH2)m-OCH3组成的组中，
R8、R9以及R10分别独立地选自由H、C1-3烷基以及C1-3烷氧基组成的组中，m为1至6。
16.根据权利要求13所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，W为-C(O)-、-C(O)NR”'-或-C(O)O-，R”'为H或C1-8烷基。
17.根据权利要求13所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，
L为选自由支化单元、连接单元以及键合单元组成的组中的一种以上的单元或这些单元的组合，
连接单元用于连接W与键合单元、W与支化单元、支化单元与支化单元或者支化单元与键合单元，支化单元用于连接连接单元与W或者连接单元与另一连接单元，
支化单元为C2-8烯基、亲水性氨基酸、-C(O)-、-C(O)NR””-、-C(O)O-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-、-(CH2)s-NHC(O)-(CH2)t-C(O)-、-(CH2)u-C(O)NH-(CH2)v-C(O)-，其中，烯基的碳原子能够被一个或多个选自由N、O以及S组成的组中的杂原子取代，烯基还能够被一个或多个C1-6烷基取代，R””为H、C1-8烷基、C3-8环烷基、C1-8烷氧基、C1-8烷基硫基、单-C1-8烷基氨基或二-C1-8烷基氨基、C3-20杂芳基或C5-20芳基，s、t、u以及v分别独立地为0至5的整数，
连接单元为-(CH2)r(V(CH2)p)q-，r为0至10的整数，p为0至12的整数，q为1至20的整数，V为单键或-O-，键合单元为
Figure FDA0003147490820000151
L1为单键或C2-8烯基，R11为H或C1-6烷基，L2为C2-8烯基；连接单元为-(CH2)r(V(CH2)p)q-，r为0至8的整数，p为1至12的整数，q为1至10的整数，V为单键或-O-。
18.根据权利要求13所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，
上述吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体化合物为选自由
Figure FDA0003147490820000161
Figure FDA0003147490820000171
Figure FDA0003147490820000181
Figure FDA0003147490820000182
以及
Figure FDA0003147490820000183
组成的组中的一种。
19.一种吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物具有下述化学式V的结构：
化学式V：
Figure FDA0003147490820000191
在上述式中，
虚线、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、X、Y、R1'、R2'、R3'、R4'、R5'、R7'、X’、Y'分别与权利要求1所述的化学式I的化合物的定义相同，
Xa、G、Z、W、L、Xa'、G'、Z'分别与权利要求13所述的化学式IV的化合物的定义相同；
Ligand为抗原结合部分。
20.根据权利要求19所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ligand为蛋白质。
21.根据权利要求19所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，Ligand为抗体。
22.根据权利要求21所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，抗体选自由抗HER2抗体、抗DLK1抗体、抗ROR1抗体、抗MUC1抗体、抗体CD19抗体以及抗CD276抗体组成的组中。
23.根据权利要求20所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，上述蛋白质具有能够被类异戊二烯转移酶识别的一个以上的氨基酸基序。
24.根据权利要求23所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，上述类异戊二烯转移酶为法尼基蛋白转移酶或香叶烯基转移酶。
25.根据权利要求23所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于，
上述氨基酸基序为CYYX、XXCC、XCXC或CXX，
C为半胱氨酸，Y为脂肪族氨基酸，X为用于决定类异戊二烯转移酶的底物特异性的氨基酸。
26.一种用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，其特征在于，包含权利要求19至25中任一项所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物。
27.根据权利要求26所述的用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，其特征在于，上述增殖性疾病选自由新生物、肿瘤、癌症、白血病、干癣、骨病、纤维增殖性障碍以及动脉粥样硬化组成的组中。
28.根据权利要求27所述的用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，其特征在于，上述癌症选自由肺癌、小细胞肺癌、胃肠癌、大肠癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肝癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤以及黑色素瘤组成的组中。
29.一种用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，其特征在于，包含：
权利要求19至25中任一项所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物；以及
药学上可接受的赋形剂。
30.一种用于预防或治疗增殖性疾病的药学组合物，其特征在于，包含：
权利要求19至25中任一项所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物；
一种以上的治疗共作用剂；以及
药学上可接受的赋形剂。
31.权利要求19至25中任一项所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物在治疗增殖性疾病中的用途。
32.根据权利要求31所述的用途，其特征在于，上述增殖性疾病选自由新生物、肿瘤、癌症、白血病、干癣、骨病、纤维增殖性障碍以及动脉粥样硬化组成的组中。
33.根据权利要求32所述的用途，其特征在于，上述癌症选自由肺癌、小细胞肺癌、胃肠癌、大肠癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肝癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤以及黑色素瘤组成的组中。
34.一种增殖性疾病的治疗方法，其特征在于，包括向个体给药权利要求19至25中任一项所述的吡咯并苯并二氮杂二聚体-连接体-配体缀合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物的步骤。
35.根据权利要求34所述的增殖性疾病的治疗方法，其特征在于，上述增殖性疾病选自由新生物、肿瘤、癌症、白血病、干癣、骨病、纤维增殖性障碍以及动脉粥样硬化组成的组中。
36.根据权利要求35所述的增殖性疾病的治疗方法，其特征在于，上述癌症选自由肺癌、小细胞肺癌、胃肠癌、大肠癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肝癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤以及黑色素瘤组成的组中。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023051814A1 (zh) * 2021-09-30 2023-04-06 江苏恒瑞医药股份有限公司 吡咯并苯并二氮杂卓类衍生物及其偶联物、其制备方法及其应用

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180078329A (ko) 2015-11-25 2018-07-09 주식회사 레고켐 바이오사이언스 분지된 링커를 포함하는 항체-약물 접합체 및 이의 제조방법
CN112601555A (zh) 2018-05-09 2021-04-02 乐高化学生物科学股份有限公司 与抗cd19抗体药物结合物相关的组合物和方法
EP3936150A4 (en) * 2019-03-06 2023-03-29 LegoChem Biosciences, Inc. ANTIBODY-DRUG CONJUGATES COMPRISING ANTIBODY AGAINST HUMAN DLK1 AND USE THEREOF
KR20210086557A (ko) 2019-12-31 2021-07-08 주식회사 레고켐 바이오사이언스 피롤로벤조디아제핀 유도체 및 이의 리간드-링커 접합체
CN115010715B (zh) * 2022-06-24 2023-07-21 河南师范大学 3-(吲哚-2-基)琥珀酰亚胺和吲哚并苯并二氮卓类化合物的合成方法及抗癌活性

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013055990A1 (en) * 2011-10-14 2013-04-18 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
WO2014031566A1 (en) * 2012-08-22 2014-02-27 Immunogen, Inc. Cytotoxic benzodiazepine derivatives
WO2014057114A1 (en) * 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
US20140294868A1 (en) * 2013-03-13 2014-10-02 Genentech, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CN105102003A (zh) * 2012-10-12 2015-11-25 Adc疗法责任有限公司 吡咯并苯并二氮杂卓-抗psma抗体结合物
WO2017089890A1 (en) * 2015-11-25 2017-06-01 Legochem Biosciences, Inc. Conjugates comprising self-immolative groups and methods related thereto
CN107847605A (zh) * 2015-11-25 2018-03-27 乐高化学生物科学股份有限公司 包含分支接头的抗体‑药物缀合物及其相关方法
WO2018182341A1 (ko) * 2017-03-29 2018-10-04 주식회사 레고켐 바이오사이언스 피롤로벤조디아제핀 이량체 전구체 및 이의 리간드-링커 접합체 화합물

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0226593D0 (en) 2002-11-14 2002-12-24 Consultants Ltd Compounds
GB0819097D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
KR20110075542A (ko) 2009-12-28 2011-07-06 주식회사 효성 연료전지 시스템의 워터트랩 장치
NZ602933A (en) 2010-04-15 2014-09-26 Seattle Genetics Inc Pyrrolobenzodiazepines used to treat proliferative diseases
EA024730B1 (ru) 2010-04-15 2016-10-31 Медимьюн Лимитед Пирролбензодиазепиновые соединения, их конъюгаты, фармацевтические композиции, содержащие указанные конъюгаты, и применение указанных конъюгатов
JP6196613B2 (ja) 2011-05-08 2017-09-13 レゴケム バイオサイエンシズ， インク．Ｌｅｇｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｉｎｃ． タンパク質−活性剤コンジュゲートおよびこれを調製するための方法
EP2855482B1 (en) 2012-04-30 2017-03-01 MedImmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
KR20180110207A (ko) 2014-10-24 2018-10-08 주식회사 소니 인터랙티브 엔터테인먼트 제어 장치, 제어 방법, 및 정보 기억 매체
WO2016063595A1 (ja) 2014-10-24 2016-04-28 ソニー株式会社 画像処理装置、画像処理方法及びプログラム
MX2018011136A (es) 2016-03-14 2019-01-14 Afferent Pharmaceuticals Inc Pirimidinas y variantes de estas, y usos de estas.
AU2018246806B2 (en) 2017-03-29 2022-05-12 Ligachem Biosciences Inc. Pyrrolobenzodiazepine dimer precursor and ligand-linker conjugate compound thereof

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013055990A1 (en) * 2011-10-14 2013-04-18 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
WO2014031566A1 (en) * 2012-08-22 2014-02-27 Immunogen, Inc. Cytotoxic benzodiazepine derivatives
WO2014057114A1 (en) * 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
CN105102003A (zh) * 2012-10-12 2015-11-25 Adc疗法责任有限公司 吡咯并苯并二氮杂卓-抗psma抗体结合物
US20140294868A1 (en) * 2013-03-13 2014-10-02 Genentech, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CN105307685A (zh) * 2013-03-13 2016-02-03 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂卓和其结合物
WO2017089890A1 (en) * 2015-11-25 2017-06-01 Legochem Biosciences, Inc. Conjugates comprising self-immolative groups and methods related thereto
CN107847605A (zh) * 2015-11-25 2018-03-27 乐高化学生物科学股份有限公司 包含分支接头的抗体‑药物缀合物及其相关方法
WO2018182341A1 (ko) * 2017-03-29 2018-10-04 주식회사 레고켐 바이오사이언스 피롤로벤조디아제핀 이량체 전구체 및 이의 리간드-링커 접합체 화합물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARNAUD C. TIBERGHIEN ET AL.: "An optimised synthesis of SG3376, a non-cleavable antibody-drug conjugate pyrrolobenzodiazepine drug-linker", vol. 58, pages 4363 - 4366, XP085273196, DOI: 10.1016/j.tetlet.2017.10.010 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023051814A1 (zh) * 2021-09-30 2023-04-06 江苏恒瑞医药股份有限公司 吡咯并苯并二氮杂卓类衍生物及其偶联物、其制备方法及其应用

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SE01 Entry into force of request for substantive examination
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