CN113248555B - 一种高纯度龙胆苦苷的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高纯度的龙胆苦苷的制备方法，其是将龙胆属植物在溶剂提取后，经大孔树脂层析富集，纯化后的料液经氧化铝或酸性氧化铝精制，精制液经浓缩回收酒精、浸膏干燥，甲醇结晶，离心分离结晶沉淀，干燥，得到纯度大于90％的龙胆苦苷，然后重结晶，结晶经干燥，获得纯度大于98％的龙胆苦苷单体。本发明涉及的溶剂与分离介质均可重复利用，且重现性好，操作简单，适合工业化批量生产。

Description

一种高纯度龙胆苦苷的制备方法

技术领域

本发明涉及裂环烯醚萜苷类提取及分离技术领域，尤其涉及一种高纯度龙胆苦苷的制备方法。

背景技术

龙胆苦苷属于裂环烯醚萜苷类化合物，含糖基，极性大，具有吸湿性和酸、碱、强光、高温条件下不稳定性。它是传统中药材龙胆、秦艽、獐牙菜等及其中成药的主要功效性成分，具有多种生理活性，如利胆、保肝、健胃、降压、抗炎、抗氧化，抗菌等功效。龙胆苦苷在化妆品中主要功效表现为抗敏，消红肿，止痒，对特异性皮炎和过敏有抑制刺，起到抗炎的作用；另外还具有清热燥湿的功效，可改善皮肤干、痒等敏感不适的状态，增强皮肤天然免疫力；龙胆苦甙对芳香化酶的活化，显示对皮肤局部的雌激素水平有作用，加之对弹性蛋白酶的抑制和抗氧性，使其具有抗衰老的作用；对表皮细胞胆甾醇的分泌有促进作用，可改善油性粗糙皮肤的状态；也用作生发剂、皮肤增白和保湿剂。

目前已有文献报道高纯度龙胆苦苷的制备工艺，例如利用不同树脂多次纯化使其纯度提高，该技术存在试剂使用量大，生产周期长、成本相对较高的问题。其中使用离子交换树脂纯化的工艺，其离子交换树脂再生时需要使用到大量的酸或碱溶液，存在安全与环保问题；另外，大孔树脂纯化的提取物(龙胆苦苷≥50％)的水溶液(提取物浓度2500mg/L时)pH值3～4，呈弱酸性，加入稀碱液调至pH8.0，HPLC检测水溶液中龙胆苦苷浓度，由初始值1250mg/L降至1106mg/L，表明龙胆苦苷碱不稳定，因此使用弱碱和碱性阴离子交换树脂纯化龙胆苦苷会使其发生降解，导致得率偏低，纯化后的提取物其龙胆苦苷的含量可能并不会显著提高。使用弱酸性或酸性的阳离子交换树脂进行纯化，则会因龙胆提取物水溶液呈酸性，呈酸性的物质难以与树脂发生离子交换，最终导致龙胆苦苷纯度提高不显著。而直接使用反相液相制备高纯度龙胆苦苷，其设备和填料昂贵，规模化生产不及本发明高效和价廉。再如料液在树脂纯化后使用价廉的硅胶进行柱层析纯化，其效率低，解吸附时使用的有机试剂量大，一般需要两种及以上的不同极性的试剂联合使用，且硅胶再生成本较高。至今在工业上还没有龙胆苦苷纯度在90％及98％以上的快速、高效、批量生产、得率高且价廉的制备工艺。

发明内容

本发明的目的是提供一种以含龙胆苦苷的植物为原料适用于工业生产的高纯度的龙胆苦苷的制备方法，该方法能实现降低耗能、降低溶剂损耗、提高产品收率，最终能制备出龙胆苦苷质量含量大于98.0％的产品。

本发明提供的技术方案如下：

一种高纯度的龙胆苦苷的制备方法，具体步骤如下：

1)以龙胆科植物的根或全草为原料，将药材进行前处理；

2)将1)中前处理好的药材中加入水或乙醇水溶液溶剂，进行热回流或搅拌提取；

3)将2)中水提后的料液在固液分离后进行大孔树脂柱纯化富集；

4)将3)中大孔树脂柱醇洗富集液进行中性或酸性氧化铝柱精制，收集上样流出液，并在上样结束后用1-5倍柱体积的树脂洗脱酒精度相同的醇溶液顶洗中性或者酸性氧化铝层析柱，然后浓缩上样流出液与顶洗液回收酒精，浓缩液真空干燥；

5)向4)中得到的干燥品中加入适量的甲醇，于60-70℃条件下使物料达到过饱和溶解；

6)将5)中的饱和溶液低温静置结晶，然后离心或过滤分离出晶体沉淀，再用甲醇将沉淀淋洗一遍，然后将沉淀热干燥或者冻干，可得到纯度大于90％的龙胆苦苷。

优选的，步骤(1)中的龙胆科植物包括坚龙胆、条叶龙胆、三花龙胆、秦艽、粗茎秦艽、麻花秦艽、小秦艽和獐芽菜。

优选的，步骤1)中的前处理包括切段、切片和粉碎。

优选的，当步骤2)中提取使用的溶剂为乙醇水溶液时，需要将料液在固液分离后进行减压浓缩至无醇味，再加入一定量的水稀释，至稀释液最终总体积为提取药材投入量的10-20倍，混匀，然后再进行大孔树脂柱纯化富集。

优选的，步骤5)中，甲醇用量相当于干燥品质量的0.05-1.0倍(v/g)。

优选的，将步骤6)中龙胆苦苷结晶沉淀用甲醇于60～70℃过饱和溶解，静置重结晶，收集晶体，热干燥或冷冻干燥，获得龙胆苦苷纯度大于98％的单体。

本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：

(1)本发明通过使用廉价、易得、且可循环使用的水或甲醇、乙醇-水溶液作为提取龙胆科植物的溶媒，成本低且环保，溶剂操作安全、易于从产品中除去且避免溶剂残留。

(2)本发明所使用的原料为龙胆科植物龙胆属和獐牙菜属家种或者野生的多种植物来源，原料范围更为广泛。

(3)本发明通过使用中性氧化铝或者酸性氧化铝精制工艺在工业上应用较少，但原料易得、成本低，且在高温煅烧后科重复使用，在本工艺中使用不仅可以脱色，而且除糖等杂质效果好，可将大孔树脂纯化后的龙胆苦苷纯度在40％～65％的龙胆提取物纯度提高20％～40％，浓度2500mg/L的提取物水溶液色度值由20～30EBC降至10EBC以下，利于溶液饱和结晶，更适合工业化生产。

(4)本发明使用的溶剂、分离介质用量相对较少，且可重复使用，价格低廉，生产成本低。本工艺中结晶和重结晶的母液均可反复利用，产品得率高。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明技术方案做进一步解释说明。

实施例1

将干燥的龙胆药材用破碎机破碎至长度小于1cm的小段，放入提取罐中，加15倍于干料的水，80℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液以小于1BV/h的流速上预处理好的D101树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的2倍，树脂柱径高比1:8。料液上样吸附结束后用4BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用5BV体积分数为10％乙乙醇水溶液溶液以1BV/h的流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液用中性氧化铝柱精制，中性氧化铝用量为提取用药材量的0.05倍，粒径100目，径高比1:5，收集流出液，并用1BV的10％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩、干燥。中性氧化铝使用后用5倍量水洗，然后再800℃条件下高温煅烧5小时后回收利用。再向中性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.3倍(v/g)，于65℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液过滤，收集沉淀，用不超过干燥品量0.05倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并于65℃热干燥，得到纯度大于90.13％的龙胆苦苷，结晶母液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于90.13％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.11％的龙胆苦苷单体。

实施例2

将干燥的龙胆药材用破碎机破碎至长度小于3cm的小段，放入提取罐中，加10倍于干料的70％乙醇，80℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液浓缩至浓缩液酒精度低于10％，加入适量的水混匀，使料液最终体积约为提取投入药材量的15倍(v/g)，再将料液以小于1BV/h的流速上预处理好的AB-8树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的3倍，树脂柱径高比1:10。料液上样吸附结束后用5BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用5BV体积分数为20％乙乙醇水溶液溶液以2BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上氧化铝柱精制，中性氧化铝用量为提取用药材量的0.05倍，粒径100～200目，径高比1:5，收集流出液，并用1BV的20％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩回收酒精、浓缩液干燥。中性氧化铝使用后用5倍量水洗，然后再800℃条件下高温煅烧5小时后回收利用。再向中性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.2倍(v/g)，于65℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液过滤，收集沉淀，用不超过干燥品量0.05倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并于65℃热干燥，得到纯度大于90.07％的龙胆苦苷，结晶母液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于90.07％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.34％的龙胆苦苷单体。

实施例3

将干燥的龙胆药材用破碎机破碎至长度小于5cm的小段，放入提取罐中，加12倍于干料的30％甲乙醇水溶液溶液中，80℃水温下循环提取1.5h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，浓缩至无醇味，回收甲醇，再向浓缩液中加入适量的水，使料液的总体积约为提取投入药材量的20倍(v/g)，混匀，再将料液以小于1BV/h的流速上预处理好的D101树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的2.5倍，树脂柱径高比1:12。料液上样吸附结束后用5BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用5BV体积分数为30％乙乙醇水溶液溶液以3BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上酸性氧化铝柱精制，酸性氧化铝用量为提取用药材量的0.03倍，粒径200-300目，径高比1:5，收集流出液，并用1BV的30％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩、干燥。酸性氧化铝使用后用5倍量水洗，然后再700℃条件下高温煅烧5小时后回收利用。再向酸性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.3倍(v/g)，于65℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液过滤，收集沉淀，用不超过干燥品量0.05倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并于65℃热干燥，得到纯度大于91.23％的龙胆苦苷，结晶母液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于91.23％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.20％的龙胆苦苷单体。

实施例4

将干燥的龙胆药材粉碎，放入提取罐中，加20倍于干料的水，90℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液以小于1BV/h的流速上预处理好的AB-8树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的3倍，树脂柱径高比1:9。料液上样吸附结束后用7BV水以料液上样的流速对树脂柱进行洗脱除杂，然后用4BV体积分数为40％乙乙醇水溶液溶液以2BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上酸性氧化铝柱精制，酸性氧化铝用量为提取用药材量的0.1倍，粒径200-300目，径高比1:5，收集流出液，并用2BV的40％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩回收酒精，浓缩液真空热干燥。酸性氧化铝使用后用8倍量水洗，然后再800℃条件下高温煅烧6小时后回收利用。再向酸性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.4倍(v/g)，于65℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液过滤，收集沉淀，用不超过干燥品量0.05倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并冷冻干燥，得到纯度大于91.32％的龙胆苦苷，结晶母液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于91.32％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.37％的龙胆苦苷单体。

实施例5

将干燥的秦艽药材用破碎机破碎至粒度小于1cm的颗粒，放入提取罐中，加15倍于干料的水，90℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液以小于1BV/h的流速上预处理好的D101树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的3倍，树脂柱径高比1:10。料液上样吸附结束后用6BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用4BV体积分数为50％乙乙醇水溶液溶液以2BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上中性氧化铝柱精制，氧化铝用量为提取用药材量的0.08倍，粒径200-300目，径高比1:6，收集流出液，并用2BV的50％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩、干燥。中性氧化铝使用后用8倍量水洗，然后再800℃条件下高温煅烧6小时后回收利用。再向中性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.5倍(v/g)，于70℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液离心，收集沉淀，用不超过干燥品量0.05倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并冷冻干燥，得到纯度大于92.18％的龙胆苦苷，结晶母液甲醇淋洗液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于92.18％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.10％的龙胆苦苷单体。

实施例6

将干燥的秦艽药材粉碎，放入提取罐中，加12倍于干料的50％乙醇，80℃水温下循环提取1.5h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液并浓缩至浓缩液无醇味，再向浓缩液中加入适量的水，使料液最终总体积为提取药材投入量的10倍(v/g)，混匀，再将料液以小于1BV/h的流速上预处理好的AB-8树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的1.8倍，树脂柱径高比1:8。料液上样吸附结束后用5BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用4BV体积分数为60％乙乙醇水溶液溶液以3BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上酸性氧化铝柱精制，酸性氧化铝用量为提取用药材量的0.09倍，粒径200-300目，径高比1:5，收集流出液，并用2BV的60％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩回收酒精，浓缩浸膏真空热干燥。酸性氧化铝使用后用8倍量水洗，然后再800℃条件下高温煅烧8小时后回收利用。再向酸性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.4倍(v/g)，于70℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液过滤，收集沉淀，用不超过干燥品量0.03倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并冷冻干燥，得到纯度大于90.75％的龙胆苦苷，结晶母液甲醇淋洗液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于90.95％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.15％的龙胆苦苷单体。

实施例7

将干燥的小秦艽药材切片，放入提取罐中，加10倍于干料的体积分数60％甲乙醇水溶液溶液，70℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，浓缩回收甲醇至浓缩液无醇味，再向浓缩液中加入水稀释至料液总体积为提取投入药材量13倍(v/g)，混匀，再将料液以小于1BV/h的流速上预处理好的D101树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的2.5倍，树脂柱径高比1:15。料液上样吸附结束后用5BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用5BV体积分数为30％乙乙醇水溶液溶液以2BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上中性氧化铝柱精制，中性氧化铝用量为提取用药材量的0.05倍，粒径200-300目，径高比1:5，收集流出液，并用2BV的60％甲醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩、干燥。中性氧化铝使用后用8倍量水洗，然后再800℃条件下高温煅烧5小时后回收利用。再向中性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品1.0倍(v/g)，于65℃水浴溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液过滤，收集沉淀，用不超过干燥品量0.1倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并冷冻干燥，得到纯度大于91.07％的龙胆苦苷，结晶母液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于91.07％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后冷冻干燥，即得纯度大于98.03％的龙胆苦苷单体。

实施例8

将干燥的獐牙菜全草切段至长度小于3cm，放入提取罐中，加20倍于干料的水，90℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液以小于1BV/h的流速上预处理好的D101树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的2倍，树脂柱径高比1:10。料液上样吸附结束后用5BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用4BV体积分数为30％乙乙醇水溶液溶液以1.5BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。然后将洗脱液上酸性氧化铝柱精制，酸性氧化铝用量为提取用药材量的0.02倍，粒径100-200目，径高比1:3，收集流出液，并用2BV的30％乙醇顶洗，顶洗液与上样流出液合并浓缩回收乙醇，浓缩浸膏真空干燥。酸性氧化铝使用后用8倍量水洗，然后再600℃条件下高温煅烧5小时后回收利用。再向酸性氧化铝精制的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品0.3倍(v/g)，于70℃水浴搅拌溶解，然后冷却析晶。再将结晶溶液离心，收集沉淀，用不超过干燥品量0.1倍的少量甲醇洗淋洗沉淀一遍，收集沉淀并真空热干燥，得到纯度大于90.17％的龙胆苦苷，结晶母液在二次浓缩后进行再次结晶。最后用少量甲醇重结晶纯度大于90.17％龙胆苦苷沉淀，收集晶体，然后热干燥，即得纯度大于98.43％的龙胆苦苷单体。

对比例1

将干燥的龙胆切段至长度小于3cm，放入提取罐中，加15倍于干料的水，85℃水温下循环提取2.0h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液以小于1BV/h的流速上预处理好的D101树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的2倍，树脂柱径高比1:10。料液上样吸附结束后用5BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用5BV体积分数为40％乙乙醇水溶液溶液以1.5BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。将洗脱液浓缩至无醇味，然后向浓缩液中加入水稀释，至料液总体积为提取投入药材量的20倍(v/g)，混匀，以小于1BV/h的流速上D941弱碱性阴离子树脂柱吸附除杂，树脂用量为提取投入药材量的2倍，树脂柱径高比1:10。收集上样流出液，并用1BV水顶洗树脂柱，收集顶洗流出液，合并流出液，浓缩至固含量≥50％，热干燥，得到龙胆苦苷纯度≥56.6％的提取物。使用完的D941弱碱性阴离子交换树脂柱用3BV 4.0％NaOH以1～2BV/h的流速洗脱杂质，然后用水洗至pH8.0-9.0，再生完成。用相当于干品0.8倍量的甲醇(v/g)于70℃水浴搅拌溶解，然后静置冷却析晶，有沉淀析出，收集沉淀并热干燥，经HPLC检测龙胆苦苷含量25.2％，多糖含量72.3％。

对比例2

将干燥的龙胆切段至长度小于3cm，放入提取罐中，加20倍于干料的水，90℃水温下循环提取1.5h，然后过滤，重复上述工艺，再提取2次，合并滤液，将滤液以小于1BV/h的流速上预处理好的AB-8树脂柱进行吸附，树脂用量为提取投入药材量的2.5倍，树脂柱径高比1:8。料液上样吸附结束后用6BV水以料液上样的流速进行洗脱除杂，然后用5BV体积分数为30％乙乙醇水溶液溶液以2BV/h流速洗脱解析吸附，收集洗脱液。将洗脱液浓缩至无醇味，然后向浓缩液中加入水稀释，至料液总体积为提取投入药材量的20倍(v/g)，混匀，以小于1BV/h的流速上001×7阳离子树脂柱吸附除杂，树脂用量为提取投入药材量相同，树脂柱径高比1:8。收集上样流出液，并用1.0BV水顶洗树脂柱，收集顶洗流出液，合并流出液，浓缩至固含量≥50％，热干燥，得到龙胆苦苷纯度≥50％的提取物，提取物颜色与AB-8树脂纯化后的提取物颜色一致。使用完的001×7阳离子交换树脂柱先用5BV水洗，然后用4BV4.0％HCl洗脱杂质，最后用水洗至pH5.0-6.0，再生完成。用相当于干品0.5倍量的甲醇(v/g)于70℃水浴搅拌溶解，然后静置冷却析晶，有少量晶体析出，收集晶体并干燥，得率不足10％。

前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。

Claims (3)

1.一种高纯度的龙胆苦苷的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

1）以龙胆药材、秦艽药材、獐牙菜全草和小秦艽药材为原料，将药材进行前处理；

2）将1）中前处理好的药材中加入水或乙醇水溶液溶剂，进行热回流或搅拌提取；

3）将2）中水提后的料液在固液分离后进行大孔树脂柱纯化富集；

4）将3）中大孔树脂柱醇洗富集液进行中性或酸性氧化铝柱精制，收集上样流出液，并在上样结束后用1-5倍柱体积的树脂洗脱酒精度相同的醇溶液顶洗中性或者酸性氧化铝层析柱，然后浓缩上样流出液与顶洗液回收酒精，浓缩液真空干燥；

5）向4）中得到的干燥品中加入甲醇，甲醇用量为干燥品质量的0.05-1.0v/g于60-70℃条件下使物料达到过饱和溶解；

6）将5）中的饱和溶液低温静置结晶，然后离心或过滤分离出晶体沉淀，再用甲醇将沉淀淋洗一遍，然后将沉淀热干燥或者冻干，得到纯度大于90%的龙胆苦苷；

7）将步骤6）中龙胆苦苷结晶沉淀用甲醇于60~70°C过饱和溶解，静置重结晶，收集晶体，热干燥或冷冻干燥，获得龙胆苦苷纯度大于98%的单体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）中的前处理包括切段、切片和粉碎。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，当步骤2）中提取使用的溶剂为乙醇水溶液时，需要将料液在固液分离后进行减压浓缩至无醇味，再加入一定量的水稀释，至稀释液最终总体积为提取药材投入量的10-20倍，混匀，然后再进行大孔树脂柱纯化富集。