CN113229369A - sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公布了一种sn‑2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物及其制备方法与应用，所述组合物中的饱和脂肪酸包括月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸，所述组合物中sn‑2位月桂酸的含量为3‑10wt％，sn‑2位肉豆蔻酸的含量为10‑36wt％，sn‑2位棕榈酸的含量为40‑80wt％。本发明根据母乳中sn‑2位饱和脂肪酸的整体富集特点和营养学特征，针对sn‑2位脂肪酸的组成研究一种功能性结构脂组合物，综合考虑了sn‑2位月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的含量和分布设计，使得sn‑2位肉豆蔻酸含量与sn‑2位月桂酸含量之比为1‑12，sn‑2位棕榈酸的含量与sn‑2位肉豆蔻酸和sn‑2位月桂酸含量之和的比值为1‑8，优化组合后不但更加接近母乳，而且更加具有营养学优势，为食品应用领域提供了参考。

Description

sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于食品技术领域，具体涉及一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物及其制备方法与应用。

背景技术

母乳脂肪是婴儿营养和能量的重要来源，针对母乳脂肪的模拟成为近年来婴配脂肪原料的研究热点。母乳化结构油脂是一种模仿母乳中脂肪酸组成和位置分布，添加于婴儿配方奶粉中的甘油三酯混合物，是母乳脂肪类似物。在该领域中，对棕榈酸在sn-2位高度富集特征的模拟已经实现了在婴配产业中的应用落地，通过酶法合成的母乳化OPO结构脂sn-2位棕榈酸含量已经能够达到70％以上。已应用于婴配的母乳化结构脂OPO是采用现代酶技术对油脂进行改性，改变普通婴幼儿配方奶粉用油中棕榈酸的位置，使之大量被酯化到甘油主链sn-2位，并将其与富含不饱和脂肪酸的植物油混合，生产出棕榈酸结构与含量接近母乳的新型婴幼儿配方奶粉。研究结果表明，食用富含sn-2棕榈酸甘油三酯的婴幼儿均提高了对Ca²⁺和棕榈酸的吸收，并且钙皂的沉积较少。甘油一酯(Monoacylglycerols，MAGs)是一类同时含有亲水基团和疏水基团的化合物，是一种非离子型乳化剂，被广泛应用于食品、医药及相关行业中。含有功能性脂肪酸的MAGs多具有类似功能性脂肪酸的生理活性。脂类在动物体内的消化为胰脂肪酶特异水解甘油三酯1、3位酯键，生成2-单甘酯(2-MAG)及游离脂肪酸，单甘酯能被肠道上皮细胞完整吸收并进入淋巴细胞，部分进入血液发挥抗菌抗病毒的作用。脂肪在体内吸收过程中，单甘酯途径起主导作用，并且2-单甘酯是主要的吸收途径。

月桂酸和肉豆蔻酸都具有多种生理活性，如抑菌、抗炎、快速供能和免疫调节等生理功能。月桂酸单甘油酯和肉豆蔻酸单甘油酯都是食品乳化剂、稳定剂和抗菌剂，且都具有月桂酸和肉豆蔻酸的特定生理功能。

月桂酸及其单甘酯类衍生物同时兼具优良的抑菌和乳化性，是一种兼具抑菌功能的新型乳化剂，也是一种天然的抗菌剂，存在于母乳、椰子油和美洲蒲葵等植物中，是一种亲脂性的非离子表面活性剂，具有防腐和乳化功能，有广泛存在、抗细菌、不会导致细菌耐药性、抗病毒、抗炎和抗毒素等多种优良特性。由于天然存在于母乳中，对婴儿的免疫系统、健康起着重要作用。近年来的相关研究表明，月桂酸单甘酯在促进动物生长、预防和治疗动物疾病方面发挥着积极作用，如抑制消化道有害菌的生长，提高畜禽的营养吸收能力和生长速度。早在1977年，美国食品和药物管理局(FDA)已将月桂酸单甘酯定义为“一般公认安全类食品添加剂”(GRAS)，最新的中华人民共和国国家标准《GB 2760-2014食品添加剂使用标准》中也规定，单甘油脂肪酸酯(包括月桂酸单甘酯在内)和稀奶油中的最大使用量为“按生产需要适量使用”。

同时，肉豆蔻酸已被证实具有极强的抗肿瘤活性和良好的抗菌活性，是一种前景广阔的新型、高效、安全的食品添加剂。肉豆蔻酸单甘酯也是一种良好的食品乳化剂，同时具有肉豆蔻酸抑菌、增强免疫力和抗肿瘤的生理活性。

月桂酸和肉豆蔻酸都是中链脂肪酸(MCFAs)。相对于长链脂肪酸(LCFAs)来说，中链脂肪酸不仅是动物快速的供能物质，还在动物生长、繁殖、免疫、脂肪沉积、肠道发育及肠道菌群等方面有着特殊的影响，特别是在免疫及肠道菌群方面的影响尤为突出。但目前的动物实验表明，中链脂肪酸对动物生长性能的影响结果各异，有的试验表明，添加中链甘油三酯(MCTs)或MCFAs对动物增重等方面有积极的影响，但有的试验结果表明无影响，甚至会产生消极影响。

虽然椰子油富含中碳链脂肪酸月桂酸，能被人体快速消化和吸收，且不会储存于身体组织中；然而，中链甘油三酯(MCT)最主要的缺点是缺乏必需脂肪酸，大量摄入会引起体内酮体蓄积及消化系统的不良反应。为改善MCT缺陷，本发明在月桂酸基础上引入肉豆蔻酸和棕榈酸，不仅在吸收MCT过程中避免了不良反应，而且还能提高月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的吸收利用，同时兼具这三种饱和脂肪酸的生理活性：低能量、易于消化吸收、快速供能，可降低血脂和体脂积累等特点。

有别于已有婴配奶粉用油只针对甘油三酯sn-2位棕榈酸开展的母乳脂肪模拟应用，本发明综合考虑月桂酸、肉豆蔻酸及其相应2-单甘酯的理化、构效和生物活性优势；结合母乳脂肪sn-2位脂肪酸分布的特点——月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸都在母乳sn-2位有所富集，其中以肉豆蔻酸和棕榈酸这两种常量脂肪酸的富集最为显著，本发明在母乳数据的基础上优化并改良了sn-2位月桂酸、肉豆蔻酸与棕榈酸的配比，使sn-2位这三种脂肪酸的协同优势在促生长方面更为突出。

肉豆蔻酸和棕榈酸是母乳中两种在sn-2位被明显富集的常量脂肪酸，中国母乳中sn-2肉豆蔻酸的相对含量达65.34％，棕榈酸的相对含量达90％以上。研究报道了适量摄入分布在sn-2位的肉豆蔻酸能降低血液中甘油三酯的含量，同时能增加高密度胆固醇的含量。US8114461公开了一种能增加高密度胆固醇，并降低低密度胆固醇的油脂组合物，采用肉豆蔻酸甘油三酯和高油酸葵花籽按照一定比例混合后进行随机酯交换得到，并将该酯交换油脂和其他含有多不饱和脂肪酸的植物油进行复配得到。基于sn-2肉豆蔻酸在调节血脂组成的重要性，目前的母乳脂肪替代物制备方法，多采用添加棕榈仁油或椰子油等方法来补充所需要的肉豆蔻酸，但是天然油脂中，sn-2位肉豆蔻酸占总肉豆蔻酸的含量低，远不能达到母乳脂肪组成的要求。

目前部分市售婴幼儿配方奶粉品牌添加了OPO从而提高了sn-2位棕榈酸含量，但是与母乳仍有较大差距，完全没有综合考虑sn-2位月桂酸和肉豆蔻酸的含量和分布设计，鉴于母乳是婴儿营养的黄金准则，有必要开发一种脂肪酸组成及其位置分布全面接近母乳脂肪的油脂组合物，不仅涉及sn-2位肉豆蔻酸的含量，还包括月桂酸和棕榈酸等。

现有的母乳脂肪替代物通常通过植物油进行制备，植物油的脂肪酸组成相对简单，较易获得单一脂肪酸相对含量高的油脂，通常将几种植物油按人乳脂的脂肪酸分布范围进行调和。但是植物油与人乳脂在sn-2位脂肪酸分布相差很大，如植物油中16：0的80％以上分布在sn-1，3位，而人乳脂70％以上的16：0却分布在sn-2位上，这一点上很难直接通过几种植物油的调和方式来解决，仅通过几种植物油的调和，在sn-2位脂肪酸分布上不可能得到与人乳脂高度相似的人乳替代脂产品。

中国发明专利CN106916631A公开了一种油脂组合物、母乳脂肪替代物及其制备方法，制备方法，包括(1)将含有棕榈酸的油脂与含有月桂酸和/或肉豆蔻酸的油脂进行随机酯交换，获得酯交换油脂，(2)将上述步骤(1)所获得的酯交换油脂与含有不饱和脂肪酸的脂肪酸或其酯的混合物在脂肪酶的存在下进行反应。通过本发明的油脂组合物或母乳脂肪替代物的制备方法，可以获得在脂肪酸组成及其位置分布上更加全面接近母乳脂肪的油脂组合物或母乳脂肪替代物。对比文件中所制备的油脂中sn-2肉豆蔻酸占总肉豆蔻酸含量的40％以上，虽然更加接近母乳脂肪sn-2位肉豆蔻酸的含量，却未对sn-2位棕榈酸和月桂酸的含量提出富集要求。

发明内容

为了克服现有技术中的问题，本发明提供一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物及其制备方法与应用，根据母乳中sn-2位脂肪酸的整体富集特点和营养学特征，针对sn-2位脂肪酸的组成研究一种功能性结构脂组合物，组合物中具体包括sn-2位月桂酸、sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位棕榈酸，综合考虑了sn-2位月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的含量和分布设计，缩短了与母乳sn-2饱和脂肪酸分布特点的差距。

为了实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：

本发明第一方面提供所述组合物包括甘油三酯，所述甘油三酯中的饱和脂肪酸包括月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸；

所述组合物中sn-2位月桂酸的含量为3-10wt％，sn-2位肉豆蔻酸的含量为10-36wt％，sn-2位棕榈酸的含量为40-80wt％。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中sn-2位月桂酸的含量为3-5wt％，sn-2位肉豆蔻酸的含量为20-30wt％，sn-2位棕榈酸的含量为40-70wt％。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中sn-2位月桂酸与sn-2位肉豆蔻酸的含量之和为10-40wt％。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中sn-2位月桂酸与sn-2位肉豆蔻酸的含量之和为20-40wt％。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中sn-2位月桂酸、sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位棕榈酸的含量之和为50-90wt％。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中：

sn-2位肉豆蔻酸含量与sn-2位月桂酸的含量之比为1-12；且sn-2位棕榈酸的含量与sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位月桂酸含量之和的比值为1-8。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中：

sn-2位肉豆蔻酸与sn-2位月桂酸含量之比为4-10且sn-2位棕榈酸的含量与sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位月桂酸含量之和的比值为1-3.5。

在一个优选的实施方案中，所述组合物中sn-1,3位均为长链不饱和脂肪酸。

在一个优选的实施方案中，所述长链不饱和脂肪酸为油酸或亚油酸。

本发明第二方面提供一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、将基础油于40-65℃下混熔后得到液态混合油，所述基础油包括棕榈硬脂、椰子油、鲈鱼油、羊乳脂、牛乳脂、马乳脂、棕榈仁油、巴沙鲶鱼油或鲤鱼油中的至少两种；

S2、将步骤S1得到的混合油与油酸在40-65℃条件下混合，搅拌均匀后添加6-12％(w/w)Lipozyme RM IM，搅拌水解8-12h后，4000-8000rpm条件下离心去除酶，得到混合油脂；

S3、将步骤S2得到的混合油脂与乙醇等体积混合，萃取除去游离脂肪酸，重复进行两次萃取后，即得所述结构脂组合物。

在一个优选的实施方案中，步骤S1中棕榈硬脂、椰子油与鲈鱼油、羊乳脂、牛乳脂、马乳脂、棕榈仁油、巴沙鲶鱼油或鲤鱼油中的一种的比例为(25-40)：(5-20)：(69-83)。

在一个优选的实施方案中，步骤S2中混合油与油酸的体积比为1：(8-10)。

本发明第三方面提供一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物的用途，作为人乳替代脂组合物或食品级营养油。

本申请中sn-2位某脂肪酸的含量表示为sn-2位某脂肪酸占sn-2位脂肪酸的含量。

本发明有益效果如下：

(1)本发明参考母乳脂肪中的含量范围，满足新GB10765/10766中对脂肪酸部分的含量要求，同时结合了脂肪营养学的研究结果以及甘油三酯sn-2位脂肪营养学研究结果，优化了基于母乳脂肪sn-2位月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸的含量和比例数据，sn-2位肉豆蔻酸与sn-2位月桂酸的含量比值在1.5以上，有别于母乳组成的同时更加具有营养学优势，为婴幼儿配方食品乃至食品添加剂领域提供了一种功能性结构脂组合物。

(2)本发明中制备的结构脂组合物，sn-2位富集中链饱和脂肪酸，主要为月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸，sn-1位和sn-3位上富集长链不饱和脂肪酸，主要为油酸和亚油酸，缩短了本发明中的功能性结构脂组合物与母乳sn-2饱和脂肪酸分布特点的差距，得到的组合物更加接近母乳的组成，月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸酯化在sn-2位上，婴幼儿使用后，能最大程度的在消化过程中保留，婴儿吸收后能够提高对Ca²⁺、月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的吸收，并且钙皂的沉积较少，改善、治疗和预防婴儿的二苄醚情况，油酸和亚油酸富集在sn-1位和sn-3位上，更加有利于摄入和吸收。

(3)本发明充分考虑母乳sn-2脂肪酸组成和分布、sn-2位肉豆蔻酸的分布以及多不饱和脂肪中油酸和亚油酸的摄入，从三个维度上优化了结构脂组合物的组成，为人乳替代脂组合物提供了新的可能。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示意性实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本公开的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

一、功能性结构脂组合物的制备

实施例1

(1)首先将棕榈硬脂、椰子油和鲈鱼油于40℃混熔，三者的重量比例为30：10：82，得到混合油；

(2)将步骤(1)中得到的混合油再与油酸以1：8的体积比混合，于40℃充分搅拌后添加12％(w/w)Lipozyme RM IM，搅拌水解12h后，4000-8000rpm条件下离心去除消化酶，得到混合油脂；

(3)将步骤(2)得到的混合油脂与乙醇以1：1体积混合，萃取除去游离脂肪酸，重复进行两次萃取后，即得结构脂组合物1。

实施例2

(1)首先将棕榈硬脂、椰子油和羊乳脂于55℃混熔，三者的重量比例为4：2：7，得到混合油；

(2)将步骤(1)中得到的混合油再与油酸以1：10的体积比混合，于55℃充分搅拌后添加10％(w/w)Lipozyme RM IM，搅拌水解10h后，4000-8000rpm条件下离心去除消化酶，得到混合油脂；

(3)将步骤(2)得到的混合油脂与乙醇以1：1体积混合，萃取除去游离脂肪酸，重复进行两次萃取后，即得结构脂组合物2。

实施例3

(1)将棕榈硬脂、椰子油和牛乳脂于65℃混熔，三者的重量比例为25：5：83，得到混合油；

(2)将步骤(1)中得到的混合油再与油酸以1：10的体积比混合，于65℃充分搅拌后添加10％(w/w)Lipozyme RM IM，搅拌水解8h后，4000-8000rpm离心去除消化酶，得到混合油脂；

(3)将步骤(2)得到的混合油脂与乙醇以1：1体积混合，萃取除去游离脂肪酸，重复进行两次萃取后，即得结构脂组合物3。

实施例4

(1)将棕榈硬脂、椰子油和牛乳脂于65℃混熔，三者的重量比例为33：20：69，得到混合油；

(2)将步骤(1)中得到的混合油再与油酸以1：10的体积比混合，于65℃充分搅拌后添加6％(w/w)Lipozyme RM IM，搅拌水解12h后，4000-8000rpm离心去除消化酶，得到混合油脂；

(3)将步骤(2)得到的混合油脂与乙醇以1：1体积混合，萃取除去游离脂肪酸，重复进行两次萃取后，即得结构脂组合物4。

对比例1

1，3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)

对比例2

中部地区母乳脂肪提取物

收集中部地区母乳，向中部地区母乳中加入氯仿/甲醇(2:1，v/v)混合物，充分混匀振荡，再加入饱和氯化钠，振荡，离心(2000r，20min)，收集有机相，过无水Na₂SO₄柱子，滤液N₂吹干，所得脂质提取物即为中部地区母乳脂肪提取物。

对比例3：市售配方奶粉脂肪提取物(含OPO)

取10g市售婴幼儿配方奶粉1加入100ml温水充分溶解后，加入2ml氨水混合加热至60℃，孵育15-20min，加热过程中振荡3-5次。加热完成后冷却至室温后，加入100ml乙醇，充分混合。加入250ml乙醚和石油醚混合溶液进行萃取，分层后取保留有机相。重复萃取2-3次后旋蒸去除有机溶剂，所得市售配方奶粉脂肪提取物1。

对比例4：市售配方奶粉脂肪提取物(不含OPO)

取10g市售婴幼儿配方奶粉2加入100ml温水充分溶解后，加入2ml氨水混合加热至60℃，孵育15-20min，加热过程中振荡3-5次。加热完成后冷却至室温后，加入100ml乙醇，充分混合。加入250ml乙醚和石油醚混合溶液进行萃取，分层后取保留有机相。重复萃取2-3次后旋蒸去除有机溶剂，所得市售配方奶粉脂肪提取物2。

二、脂肪酸组成含量检测

采用下述方法检测实施例1-4制备的组合物和对比例1-4组合物sn-2位脂肪酸的含量：

取30mg提取得到的脂肪于15mL离心管中，依次加入7mL Tris-HCl(pH7.6)，1.75mL胆酸盐溶液(0.05％)，0.7mL CaCl₂溶液(2.2％)；然后加入30mg胰脂酶，振荡1min；放入37℃水浴锅中反应3min，取出后振荡30s，并再重复两次，最后一次水浴时间减为2min。用流动的冷水冲洗离心管壁以冷却，再加入2mL乙醚，振荡提取。离心(4000rpm，3min)，取上清液于1.5mL离心管中，氮吹浓缩至溶液体积约为500μL。采用TLC法分离sn-2FAs，展开剂为正己烷/乙醚/乙酸＝50:50:1。经2，7-二氯荧光素在紫外灯下显色后获得单甘酯条带，进行甲酯化并过膜后进GC分析，结果如表1所示。

在本申请中，sn-2位某脂肪酸含量为：sn-2位某脂肪酸的含量表示为sn-2位某脂肪酸占sn-2位脂肪酸的含量。

表1

由表1可知，实施例1-4中sn-2位月桂酸含量在3.6-12.8wt％范围内，符合3-10wt％的要求，对比文件3和4中分别为15.1wt％和11.8wt％，与实施例1-4相差不大；实施例1-4中sn-2位肉豆蔻酸含量在15wt％左右，符合10-36wt％的要求，但对比文件3和4分别为4.8wt％和5.4wt％，远远小于实施例1-4的含量；实施例1-4中sn-2位棕榈酸相对含量均在50wt％以上，对比文件1-2中sn-2位棕榈酸相对含量虽然符合要求，但对比文件1中不含有月桂酸和肉豆蔻酸，对比文件2中肉豆蔻酸含量较低，对比文件3-4中sn-2位棕榈酸含量分别为21.8wt％和12.6wt％，含量较低。

三、动物试验

(一)肠道中油脂消化后的粒径大小检测

体外模拟胃液消化和肠液消化过程中乳糜微粒粒径的测定和比较分析

①模拟胃液的配置

称取0.2gNaCl，加1.3mL 1mol/L HCl，溶解于80mL去离子水中，用0.1mol/LHCl将溶液pH调至5.5，去离子水定容至100mL。上述溶液加入胃脂肪酶(1.3mg/mL)和胃蛋白酶(1.5mg/mL)，室温下磁力搅拌20min。

②模拟小肠液的配置

配制164mmol/L NaCl，10mmol/L KCl，119mmol/L CaCl2的溶液，用0.2mol/LNaOH将溶液pH调至6.5。加入胆盐(0.5mg/mL)，胰酶(1mg/mL)溶于上述溶液，37℃下磁力搅拌20min。

③体外模拟胃液、肠液消化

取10mL制备的实施例1-4和对比例1-4的液态油脂于37℃水浴中恒温10min；加入模拟胃液5mL，37℃搅拌，用0.1mol/L NaOH溶液滴定使体系pH保持在5.5不变，消化0.5h，取样。用0.2mol/L NaOH将经过模拟胃液消化后的消化液pH调至6.5，加入10mL模拟肠液，进行模拟小肠阶段的消化2h，在此期间，不断滴加0.1mol/L NaOH溶液，使体系pH保持在6.5不变，记录不同时间所消耗的NaOH的量。整个过程恒定温度37℃，定期取样。每个样品进行至少3次模拟消化实验，消化后的乳糜微粒采用Nano-ZS 90激光纳米粒度仪测定不同组合物乳液的平均粒径和电位，测定结果如表2所示。

④统计分析

实验数据分析使用SPSS 17.0统计学软件对数据进行方差分析(ANOVA)。方差分析采用Tukey检验，p<0.05时为显著性差异。所有数据取3次测定的平均值。结果均以平均值±标准偏差的方式表示。

表2

上述试验结果表明，实施例1-4制备的结构脂组合物粒径显著低于对比例1、对比例3和对比例4(p<0.01)，显著优于对比例2(母乳脂肪)(p<0.05)。根据甘油三酯在胃和肠道中已有的消化吸收理论，结合此数据分析推测，本发明所制备的结构脂组合物在经胃肠道消化后形成的乳糜微粒中，月桂酸-2-单甘酯、肉豆蔻酸-2-单甘酯和棕榈酸-2-单甘酯的协同乳化效果不但显著优于所选用的市售配方奶粉用油，而且优于母乳脂肪。

(二)幼鼠膳食摄入和生长情况

采用实施例1-4和对比例1、3、4制备的油脂组合物饲喂21日龄刚断乳SD雌性幼鼠，每组12只，各组幼鼠生长状态良好，幼鼠的摄食量没有显著性差异。两周内脂肪的总摄入量为20g/只。幼鼠摄食两周后膳食摄入和生长情况详如表3所示。

实验数据分析使用SPSS 17.0统计学软件对数据进行方差分析(ANOVA)。方差分析采用Tukey检验，p＜0.05时为显著性差异。所有数据取3次测定的平均值。结果均以平均值±标准偏差的方式表示。

表3

	膳食摄入量(g)	体重增加量(g)
			组合物1	195.4±3.5	78.3±1.7
组合物2	196.2±4.2	75.9±2.6
			组合物3	194.8±5.1	71.7±1.9
组合物4	195.1±4.6	69.5±2.1
			对照组1	195.7±4.9	62.1±1.3
对照组3	195.8±4.5	65.4±1.8
			对照组4	196.4±3.8	67.7±1.5

注：因为母乳样本数量有限，所以母乳脂肪无法作为对照组2完成此实验。

由表3可知，与对比例1、3、4相比，实施例1-4所制备的结构脂组合物对幼鼠生长性能的提高发挥着极其显著的积极作用(p＜0.05)，实施例1、2所制备结构脂组合物对幼鼠生长性能的提高显著优于对比例(p＜0.01)。根据MCT(中链甘油三酯)的高效供能优势和缺少必需脂肪酸的劣势，结合本发明研究数据分析，本发明所制备的结构脂组合物不但弥补了MCT的缺陷，而且充分发挥了MCT的优势，基于消化后所释放的月桂酸-2-单甘酯、肉豆蔻酸-2-单甘酯和棕榈酸-2-单甘酯复配后显著的协同乳化和缓解炎症的效果，使得经胃肠道消化后形成的乳糜微粒粒径细小，有利于吸收利用，并且显著缓解了幼鼠肠道多发的不适应性症状(如炎症)，从而从整体上提高了幼鼠的生长性能；而市售配方奶粉用油乳糜微粒粒径与本发明专利相比都较为粗大，不利于幼鼠稚嫩未发育完善的肠道对乳糜微粒的吸收利用，因此在对幼鼠生长性能的改良上不及本发明专利的整体效果突出，且此结论具有统计学意义。

(三)抗炎功效

选取实验用21日龄刚断乳雌性SD幼鼠120只，所有幼鼠精神状态良好，行为活泼，进食正常，随机分为10组，每组12只，分为实施例1-4组、对比例1-4组、LPS炎症模型组和地塞米松治疗组，将各组幼鼠注射LPS，制造炎症模型，注射后均出现了精神不振、行动迟缓、畏寒、对外界的刺激(如声音、振动等)反应迟钝的现象。大约3小时后，经过注射LPS后幼鼠陆续恢复正常的状态，开始活动，但活动度均不如注射前。LPS注射8h后，各组均无大鼠死亡，各组的生存率均为100％，将实施例1-4组和对比例1、3、4组分别按照1.5ml/kg的剂量灌胃，地塞米松按常规使用剂量灌胃、LPS炎症模型组不进行灌胃，取各组幼鼠血清，利用幼鼠TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β、IL-4、IL-10ELISA试剂盒检测各组物质对幼鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β、IL-4、IL-10分泌的影响(pg/ml，mean±SD，n＝12)，结果如表4所示。

采用SPSS17.0软件对实验结果进行统计分析，采用多个实验组和地塞米松组、LPS炎症模型组组间均数的两两比较方法(Dunnett检验法)进行比较；同时对数据进行方差分析(ANOVA)，方差分析采用Tukey检验；以p＜0.05为具有统计意义的差异。结果均以平均值±标准偏差的方式表示。

表4

注：因为母乳样本数量有限，所以母乳脂肪无法作为对照组2完成此实验。

由表4可知，LPS炎症模型组各类炎症因子分泌量最高，地塞米松组经过治疗后，炎症因子分泌量最低，与实施例1-4组制备的组合物1-4与对比例1、3、4组相比，具有良好的抗炎效果；实施例1-4制备的结构脂组合物与LPS炎症模型组相比，具有显著的缓解炎症的生理功效(p<0.01)；实施例1-4与对比例1、3、4相比，具有显著的缓解炎症的生理功效(p<0.05)。基于月桂酸-2-单甘酯、肉豆蔻酸-2-单甘酯和棕榈酸-2-单甘酯复配后显著的抗炎症效果，本发明所制备结构脂组合物显著缓解了幼鼠肠道多发的炎症症状和不适应性。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只限于这些说明。对于本发明所属领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物包括甘油三酯，所述甘油三酯中的饱和脂肪酸包括月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸；

所述组合物中sn-2位月桂酸的含量为3-10wt％，sn-2位肉豆蔻酸的含量为10-36wt％，sn-2位棕榈酸的含量为40-80wt％。

2.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中sn-2位月桂酸的含量为3-5wt％，sn-2位肉豆蔻酸的含量为20-30wt％，sn-2位棕榈酸的含量为40-70wt％。

3.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中sn-2位月桂酸与sn-2位肉豆蔻酸的含量之和为10-40wt％。

4.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中sn-2位月桂酸与sn-2位肉豆蔻酸的含量之和为20-40wt％。

5.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中sn-2位月桂酸、sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位棕榈酸的含量之和为50-90wt％。

6.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中：

sn-2位肉豆蔻酸含量与sn-2位月桂酸的含量之比为1-12；且sn-2位棕榈酸的含量与sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位月桂酸含量之和的比值为1-8。

7.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中：

sn-2位肉豆蔻酸与sn-2位月桂酸含量之比为4-10且sn-2位棕榈酸的含量与sn-2位肉豆蔻酸和sn-2位月桂酸含量之和的比值为1-3.5。

8.根据权利要求1所述的一种sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物，其特征在于，所述组合物中sn-1,3位均为长链不饱和脂肪酸，所述长链不饱和脂肪酸为油酸或亚油酸。

9.如权利要求1-8任一所述的sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将基础油于40-65℃下混熔后得到液态混合油，所述基础油包括棕榈硬脂、椰子油、鲈鱼油、羊乳脂、牛乳脂、马乳脂、棕榈仁油、巴沙鲶鱼油或鲤鱼油中的至少两种；

S2、将步骤S1得到的混合油与油酸在40-65℃条件下混合，搅拌均匀后添加6-12％(w/w)Lipozyme RM IM，搅拌水解8-12h后，4000-8000rpm条件下离心去除酶，得到混合油脂；

S3、将步骤S2得到的混合油脂与乙醇等体积混合，萃取除去游离脂肪酸，重复进行两次萃取后，即得所述结构脂组合物。

10.如权利要求1-8任一所述的sn-2饱和脂肪酸活性型结构脂组合物的用途，其特征在于，作为人乳替代脂组合物或食品营养油。