CN113209063B - 虎刺醛在制备治疗卵巢癌的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及虎刺醛在制备治疗卵巢癌的药物中的应用，本发明发现虎刺醛可有效杀死卵巢癌细胞系SKVO3细胞，通过增强细胞自噬和自噬流，促进SKVO3细胞的凋亡，抑制SKVO3细胞的迁移，具有明显的抗卵巢癌活性，可将其开发成为治疗卵巢癌的药物。本发明为虎刺醛用于治疗卵巢癌提供了重要理论依据，扩宽了该药物治疗范围，同时为提高现有卵巢癌的治疗水平，改善预后提供了新的药物解决方案。

Description

虎刺醛在制备治疗卵巢癌的药物中的应用

技术领域

本发明属于卵巢癌治疗技术领域，具体涉及虎刺醛在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。

背景技术

癌症的治疗是全世界所关注的公共卫生问题，其中卵巢癌是卵巢肿瘤的一种恶性肿瘤，是指生长在卵巢上的恶性肿瘤，其中90％～95％为卵巢原发性的癌，另外5％～10％为其它部位原发的癌转移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少症状，即使有症状也不特异，筛查的作用又有限，因此早期诊断比较困难，就诊时60％～70％已为晚期，而晚期病例又疗效不佳。因此，虽然卵巢癌的发病率低于宫颈癌和子宫内膜癌居妇科恶性肿瘤的第三位，但死亡率却超过宫颈癌及子宫内膜癌之和，高居妇科癌症首位，是严重威胁妇女健康的最大疾患。目前卵巢癌的治疗方式主要是手术和化疗，但治疗效果较差。这使卵巢癌治疗面临巨大挑战。因此，在提高手术治疗的同时，寻找安全、高效、非耐药的新型抗肿瘤新药成为人们关注的焦点。

我国幅员辽阔，具有珍稀可靠的中药材。如若能够从中药中提取出可用于抗卵巢癌的化合物，则对于卵巢癌的治疗具有重大意义。虎刺(学名：Damnacanthus indicusGaertn.)是茜草科虎刺属植物，分布于西藏、云南、贵州、四川、广西、广东、湖南、湖北、江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾等省区。生长于山地和丘陵的疏、密林下和石岩灌丛中。其根肉质，药用有祛风利湿、活血止痛之功效。

虎刺醛是从虎刺中提取出的化合物，已知有消炎、止咳、祛风祛湿、活血的作用。目前尚无虎刺醛用于治疗卵巢癌的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中的不足，提供虎刺醛的新用途，具体的：

本发明的第一方面，涉及虎刺醛在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。

本发明的第二方面，涉及虎刺醛在制备试剂中的应用，所述的试剂用于抑制卵巢癌细胞的增殖、凋亡或迁移。

本发明的第三方面，涉及一种体外抑制卵巢癌细胞生长的方法，所述方法包括对卵巢癌细胞施用有效量的虎刺醛。

虎刺醛(Damnacanthal，Dam)，分子式：C₁₆H₁₀O₅，分子量：282，化学结构式为：

虎刺醛是从中药材虎刺中提取的化合物，具有巨大的药理潜力。申请人通过体内体外实验研究了其对于卵巢癌的影响：1、体外实验部分，先培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，然后用不同浓度的虎刺醛处理，之后检测SKVO3细胞的细胞活力、细胞数量、凋亡水平、迁移水平、自噬水平LC3变化以及mTOR信号通路情况。结果发现，虎刺醛呈剂量和时间依赖性的杀死卵巢癌细胞系SKVO3，阻滞SKVO3细胞的生长周期，促进SKVO3细胞的凋亡，抑制SKVO3细胞的迁移，具体机制是抑制了与卵巢癌细胞生长密切相关的mTOR信号通路，激活细胞内自噬水平。2、体内实验部分，先将培养的卵巢癌细胞系SKVO3细胞注射进入裸鼠体内，然后给予虎刺醛进行治疗。结果发现，与对照组相比，给予虎刺醛的治疗组可有效降低肿瘤的生长速度，减小肿瘤的体积。上述实验结果证实了虎刺醛具有明显的抗卵巢癌活性，有望将其开发成为治疗卵巢癌的药物，具有良好的临床应用前景。

根据本发明具体实施方式的用途，本发明所述的治疗卵巢癌的药物可以虎刺醛作为活性成分，通过加入一种或多种药学上可接受的辅料，按照制剂学常规工艺，制备成药剂学上可接受的任何药物剂型。所述治疗卵巢癌的药物可经口服途径给药、也可以经局部给药、腹腔注射、静脉途径给药等其他临床治疗可接受的给药途径给药。

本发明的有益效果为：

本发明涉及的虎刺醛可有效杀死卵巢癌细胞系SKVO3细胞，通过增强细胞自噬和自噬流，促进SKVO3细胞的凋亡，抑制SKVO3细胞的迁移，具有明显的抗卵巢癌活性。本发明为已知药物虎刺醛发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域，同时为提高卵巢癌的治疗，改善预后提供了新的药物选择，具有重要临床意义。本发明涉及的虎刺醛为中药材虎刺中提取的化合物，相较于传统的抗卵巢癌药物毒副作用低，具有较好的临床应用前景。

附图说明

图1：虎刺醛呈浓度和时间依赖性降低SKVO3细胞的活力；

图2：虎刺醛呈浓度依赖性杀死SKVO3细胞；

图3：虎刺醛促进SKVO3细胞的凋亡；

图4：虎刺醛抑制SKVO3细胞的迁移；

图5：虎刺醛抑制mTOR信号通路，增强细胞内自噬水平；

图6：虎刺醛抑制卵巢癌肿瘤的生长。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。

实施例1：虎刺醛对卵巢癌细胞活力的影响实验

培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，在96孔板中接入10000个SKVO3细胞，加入(0、5、10、20μM)不同浓度的虎刺醛(Damnacanthal，Dam)，处理12小时，24小时和48小时，采用细胞增殖检测试剂盒CCK8检测细胞活力。结果表明虎刺醛可呈浓度和时间依赖性的降低SKVO3细胞的活力。见图1。

实施例2：虎刺醛对卵巢癌细胞增殖的影响实验

培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，在6孔板中接入500个SKVO3细胞，加入(0、5、10、20μM)不同浓度的虎刺醛(Damnacanthal，Dam)，每4天换一次培养液，培养12天，多聚甲醛固定细胞后，进行结晶紫染色，拍照观察细胞量。结果表明虎刺醛可显著杀死SKVO3细胞，抑制肿瘤细胞的生长。见图2。

实施例3：虎刺醛对卵巢癌细胞凋亡的影响实验

培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，在6孔板中接入10×10⁴个SKVO3细胞，加入(0、5、10、20μM)不同浓度的虎刺醛(Damnacanthal，Dam)，培养24小时，采用凋亡检测试剂盒Annexin V FITC/PI检测细胞的凋亡水平。结果表明虎刺醛促进了SKVO3细胞的凋亡。见图3。

实施例4：虎刺醛对卵巢癌细胞迁移的影响实验

培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，在6孔板中接入25×10⁴个SKVO3细胞，第二天待细胞长满，用枪尖在孔板中划十字痕，加入(0、5、10、20μM)不同浓度的虎刺醛(Damnacanthal，Dam)，处理24小时，观察细胞的迁移水平。结果表明虎刺醛抑制了SKVO3细胞的迁移。见图4。

实施例5：虎刺醛抑制卵巢癌细胞mTOR信号通路，增强细胞内自噬水平的实验

培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，在6孔板中接入10×10⁴个SKVO3细胞，加入(0、5、10、20μM)不同浓度的虎刺醛(Damnacanthal，Dam)，培养24小时，收集细胞蛋白，检测细胞自噬水平LC3变化和mTOR信号通路。结果表明虎刺醛抑制mTOR信号通路，增强细胞内自噬水平。见图5。

实施例6：虎刺醛对裸鼠体内卵巢癌细胞生长的影响实验

培养卵巢癌细胞系SKVO3细胞，在裸鼠右侧腋窝处皮下注射2×10⁶个SKVO3细胞，将裸鼠随机分为2组，对照组和虎刺醛治疗组(1mg/Kg)，注射药物14天，观察两组肿瘤的生长情况。结果表明虎刺醛可显著抑制肿瘤的生长水平。见图6。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (6)

1.虎刺醛在制备治疗卵巢癌的药物中的应用，所述治疗卵巢癌的药物为抑制卵巢癌细胞增殖和/或促进卵巢癌细胞凋亡的药物。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗卵巢癌的药物为通过抑制与卵巢癌细胞生长密切相关的mTOR信号通路，激活细胞内自噬水平来治疗卵巢癌的药物。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述卵巢癌细胞为SKVO3细胞。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述治疗卵巢癌的药物还包括一种或多种药学上可接受的辅料。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述治疗卵巢癌的药物的剂型为药剂学上可接受的任何药物剂型。

6.虎刺醛在制备药物中的应用，其特征在于，所述的药物用于抑制卵巢癌细胞的增殖或促进卵巢癌细胞凋亡。

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