CN113208989A - 皮蛋凝胶膏及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种皮蛋凝胶膏及其制备方法。该皮蛋凝胶膏由皮蛋酶解液和凝胶基底所组成,皮蛋酶解液和凝胶基底的质量比为1:(15‑19);所述皮蛋酶解液的固含量为12%‑20%;所述凝胶基底按质量份数计包括如下组成:卡波姆980 0.4‑0.6份、卡波姆U20 0.1‑0.5份、水50‑80份、尿囊素0.1‑0.5份、草甘酸二钾0.2‑0.5份、β‑葡聚糖0.5‑1份、EDTA二钠0.1‑0.5份、冰片0.02‑0.04份、丙二醇1‑3份、尼泊金丙酯0.06‑0.1份、苯氧乙醇0.04‑0.08份、1,3丁二醇6‑8份,甘油2‑3份、三乙醇胺0.3‑0.5份,氢化蓖麻油0.04‑0.08份混合而成。本发明以皮蛋酶解液为活性成分,富含小分子抗炎肽,复配甘油和丙二醇等制作成软膏后具有消炎、保湿、去瘙痒的功效。

Description

皮蛋凝胶膏及其制备方法
技术领域
本发明属于护肤品领域,具体涉及一种皮蛋凝胶膏及其制备方法。
背景技术
凝胶膏是近年来较为流行的护肤品,因为价格低廉、保湿性好,清爽无刺激备受年轻人 喜爱。市场现有的凝胶膏多为添加香精和色素以保湿为主的凝胶膏其消炎、止痒性较差,具 有消炎、止痒的多为添加激素的药膏,对皮肤刺激性较大,不适合日常使用。比较出名的芦 荟胶多为透明状凝胶,其保湿性较好,温和无刺激,具有一定的消炎性,但止痒性较差。
皮蛋是一种传统食品,具有清火、去热的功效,多半作为食品食用,附加值较低,用于 护肤品中更是少见。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术存在的不足而提供一种皮蛋凝胶膏及其 制备方法,所制皮蛋凝胶膏外观无色透明,具有消炎、保湿、去瘙痒的功效。
本发明为解决上述提出的问题所采用的技术方案为:
一种皮蛋凝胶膏,它由皮蛋酶解液和凝胶基底所组成,皮蛋酶解液和凝胶基底的质量比 为1:(15-19)。
按上述方案,所述皮蛋酶解液的制备方法如下:
(1)取15-20份鹌鹑皮蛋蛋白,打碎成小颗粒(颗粒大小一般为1-2mm)备用;配制质量分数0.025%柠檬酸溶液,备用;各步骤中的“份”均为质量份;
(2)将60-80份柠檬酸溶液加入15-20份鹌鹑皮蛋蛋白小颗粒中,搅拌浸泡,60目滤网过滤取滤渣,加入60-80份水,搅拌浸泡,60目滤网过滤取滤渣,得预处理后的皮蛋蛋 白;
(3)将100-120份水加入步骤(2)所得的预处理皮蛋蛋白中,磨浆,得皮蛋蛋白浆;
(4)将0.03-0.05份胰蛋白酶、0.3-0.5份风味蛋白酶加入步骤(3)所得皮蛋蛋白浆, 酶解过滤,煮沸得皮蛋酶解液。
进一步地,步骤(2)中,柠檬酸浸泡时间为15-30min,浸泡温度为50-55℃,水浸泡时间为15-30min,浸泡温度为50-55℃。低浓度柠檬酸有助于去除皮蛋碱味又避免溶解皮蛋,使皮蛋蛋白发生变性;水浸泡可以洗净柠檬酸,提高后续步骤pH,保持皮蛋蛋白不长时间接触酸性物质,使活性物质发生变性.
进一步地,步骤(4)中,酶解温度为50-55℃,酶解时间为60-90min,过滤网目数为300目。胰酶可以专一去除皮蛋蛋白腥味,风味酶可以将皮蛋蛋白切成更细小的分子,有利于其水溶性增加和稳定性增强。
按上述方案,所述凝胶基底的制备方法如下:
1)将0.4-0.6份卡波姆980和0.1-0.5份卡波姆U20置于40-60份水中静置,得基底1; 各步骤中的“份”均为质量份;
2)将0.1-0.5份尿囊素、0.2-0.5份草甘酸二钾、0.5-1份β葡聚糖、0.1-0.5份EDTA二 钠添加10-20份水中,搅拌5-10min,至粉末完全溶解,得基底2;
3)将0.02-0.04份冰片(又称龙脑香等)置于1-3份丙二醇中,搅拌至冰片完全融化, 得基底3;
4)将0.06-0.1份尼泊金丙酯、0.04-0.08份苯氧乙醇加入到6-8份1,3丁二醇中,至溶解 均匀,得基底4;
5)将0.04-0.08份氢化蓖麻油60加热溶化,加入2-3份甘油、0.3-0.5份三乙醇胺,得 基底5;
6)将基底1、基底2、基底3、基底4、基底5混合均匀,即得凝胶基底。
进一步地,步骤1)中,静置时间>12h。
进一步地,步骤5)中,水浴温度为40-50℃。基底液的配制需分步进行溶解,有助于保持其稳定性。
本发明还提供一种上述皮蛋凝胶膏的制备方法,主要步骤如下:
(1)按重量份数计,将10份皮蛋酶解液和150-190份凝胶基底混合均匀,搅拌20-30min得凝胶混合物;
(2)将步骤(1)所得混合物均质脱气后灌装即得皮蛋凝胶膏。其中,均质条件为2000r/min,均质时间5-10min,灌装后还需在5000r/min条件下离心20min,16KHz下超声 频率下超声30min,以去除膏体中的气泡。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
1、本发明提供了一种皮蛋凝胶膏,该皮蛋凝胶膏外观无色透明,具有消炎、保湿、去 瘙痒的功效。
2、本发明通过对优选原料黄金鹌鹑蛋蛋白,色泽较浅来控制凝胶膏的颜色不发黄,皮 蛋蛋白需经酸洗去除腥味和碱味,酸洗前经破碎处理有助于酸洗充分,减少后续步骤酸的浓 度和用量,去除蛋白的腥味和碱味效果更明显;酶解时,采用胰酶能充分去除皮蛋腥味,风 味酶能将大分子皮蛋蛋白分解成小分子水溶性肽,更有助于凝胶膏的吸收;皮蛋酶解液酶解 完成后经过煮沸处理在灭酶的同时还能挥发掉酶解液中的碱味;凝胶膏基底需采用分步溶 解,避免溶解不全,出现结团现象,影响稳定性。
附图说明
图1为实施例1所制备的皮蛋凝胶膏的实物照片。
具体实施方式
为了更好地理解本发明,下面结合实施例进一步阐明本发明的内容,但本发明不仅仅局 限于下面的实施例。
下述实施例中,各原料的“份”均指的是“重量份”,皮蛋酶解液和凝胶基底的质量比 为1:(15-19)。
下述实施例中,将产蛋7天内的新鲜鹌鹑蛋按质量比1:1加入腌制液中,21~26℃腌制 2.5-3天,然后在片碱石灰混合液中浸泡30-45s,常温晾干3-5天,即得黄金鹌鹑皮蛋;其 中,腌制液按质量份数由8份桂皮、14份片碱、5份食盐、100份水组成;片碱石灰混合液为片碱和石灰按质量比1:1制成的总质量分数为1%的水溶液;(2)将所得黄金鹌鹑皮蛋的皮蛋白和皮蛋黄分离,取皮蛋白部分作为制备皮蛋酶解液的鹌鹑皮蛋蛋白。
实施例1
一种皮蛋凝胶膏的制备方法,各原料按重量份数计,具体包括下列步骤:
(1)取15份黄金鹌鹑皮蛋蛋白,打碎成1-2mm大小颗粒备用,配制0.025%柠檬酸溶液备用;
(2)将60份柠檬酸溶液加入黄金鹌鹑蛋蛋白颗粒中,50℃搅拌浸泡15min,60目滤网 过滤取滤渣,加入60份水,50℃搅拌浸泡15min,60目滤网过滤取滤渣,得处理皮蛋蛋白;
(3)将100份水加入步骤(2)所得的处理皮蛋蛋白中,磨浆,得皮蛋蛋白浆;
(4)将0.03份胰蛋白酶、0.3份风味蛋白酶加入步骤(3)所得皮蛋蛋白浆,置于50℃条件下酶解60min,300目过滤,煮沸得皮蛋酶解液。
(5)将0.4份卡波姆980和0.1份卡波姆U20置于40份水中静置12h,得基底1;
(6)将0.1份尿囊素、0.2份草甘酸二钾、0.5份β葡聚糖、0.1份EDTA二钠添加到 10份水中,搅拌5min,至粉末完全溶解,得基底2;
(7)将0.02份冰片置于1份丙二醇中,搅拌至冰片完全融化,得基底3;
(8)将0.06份尼泊金丙酯、0.04份苯氧乙醇加入到6份1,3丁二醇中,至溶解均匀,得基底4;
(9)将0.04份氢化蓖麻油60于40℃水浴加热溶化,加入2份甘油、0.3份三乙醇胺,得基底5;
(10)将基底1、基底2、基底3、基底4、基底5混合均匀,即得凝胶基底。
(11)将10份皮蛋酶解液和150份凝胶基底混合均匀,搅拌20min,得凝胶混合物;
(12)将步骤(11)所得混合物2000r/min下均质5min,在5000r/min条件下离心20min,16KHz下超声频率下超声30min脱气后灌装即得皮蛋凝胶膏。
实施例2
一种皮蛋凝胶膏的制备方法,各原料按重量份数计,具体包括下列步骤:
(1)取18份黄金鹌鹑皮蛋蛋白,打碎成1mm大小颗粒备用,配制0.025%柠檬酸溶液备用;
(2)将70份柠檬酸溶液加入黄金鹌鹑蛋蛋白颗粒中,50℃搅拌浸泡15min,60目滤网 过滤取滤渣,加入70份水,50℃搅拌浸泡15min,60目滤网过滤取滤渣,得处理皮蛋蛋白;
(3)将105份水加入步骤(2)所得的处理皮蛋蛋白中,磨浆,得皮蛋蛋白浆;
(4)将0.04份胰蛋白酶、0.4份风味蛋白酶加入步骤(3)所得皮蛋蛋白浆,置于50℃条件下酶解60min,300目过滤,煮沸得皮蛋酶解液。
(5)将0.5份卡波姆980和0.3份卡波姆U20置于50份水中静置12h,得基底1;
(6)将0.3份尿囊素、0.3份草甘酸二钾、0.8份β葡聚糖、0.3份EDTA二钠添加15 份水中,搅拌5min,至粉末完全溶解,得基底2;
(7)将0.03份冰片置于2份丙二醇中,搅拌至冰片完全融化,得基底3;
(8)将0.08份尼泊金丙酯、0.06份苯氧乙醇加入到7份1,3丁二醇中,至溶解均匀,得基底4;
(9)将氢化0.06份蓖麻油60于50℃水浴加热溶化,加入2份甘油、0.4份三乙醇胺,得基底5;
(10)将基底1、基底2、基底3、基底4、基底5混合均匀,即得凝胶基底。
(11)将10份皮蛋酶解液和170份凝胶基底混合均匀,搅拌20min,得凝胶混合物;
(12)将步骤(11)所得混合物2000r/min下均质5min,在5000r/min条件下离心20min,16KHz下超声频率下超声30min脱气后灌装即得皮蛋凝胶膏。
实施例3
一种皮蛋山凝胶膏的制备方法,各原料按重量份数计,具体包括下列步骤:
(1)取20份黄金鹌鹑皮蛋蛋白,打碎成1-2mm大小颗粒备用,配制0.025%柠檬酸溶液备用;
(2)将80份柠檬酸溶液加入黄金鹌鹑蛋蛋白颗粒中,55℃搅拌浸泡30min,60目滤网 过滤取滤渣,加入80份水,55℃搅拌浸泡30min,60目滤网过滤取滤渣,得处理皮蛋蛋白;
(3)将110份水加入步骤(2)所得的处理皮蛋蛋白中,磨浆,得皮蛋蛋白浆;
(4)将0.05份胰蛋白酶、0.5份风味蛋白酶加入步骤(3)所得皮蛋蛋白浆,置于55℃条件下酶解90min,300目过滤,煮沸得皮蛋酶解液。
(5)将0.6份卡波姆980和0.5份卡波姆U20置于60份水中静置12h,得基底1;
(6)将0.5份尿囊素、0.5份草甘酸二钾、1份β葡聚糖、0.5份EDTA二钠添加20份 水中,搅拌10min,至粉末完全溶解,得基底2;
(7)将0.04份冰片置于3份丙二醇中,搅拌至冰片完全融化,得基底3;
(8)将0.1份尼泊金丙酯、0.08份苯氧乙醇加入到8份1,3丁二醇中,至溶解均匀,得基底4;
(9)将氢化0.08份蓖麻油60于40-50℃水浴加热溶化,加入3份甘油、0.5份三乙醇胺,得基底5;
(10)将基底1、基底2、基底3、基底4、基底5混合均匀,即得凝胶基底。
(11)将10份皮蛋酶解液和190份凝胶基底混合均匀,搅拌30min,得凝胶混合物;
(12)将步骤(11)所得混合物2000r/min下均质10min,在5000r/min条件下离心20min,16KHz下超声频率下超声30min脱气后灌装即得皮蛋凝胶膏。
对比例1
与实施例1的不同之处:省略步骤(2)。
对比例1由于不采用柠檬酸和水浸泡皮蛋,直接酶解,所制皮蛋凝胶膏碱味重,有不愉 悦的气味。
对比例2
与实施例1的不同之处:将步骤(5)、(6)、(7)、(8)、(9)、(10)合成一步。
对比例2由于凝胶基底未采用分步溶解方式,所制凝胶膏存在分层及稳定性较差问题。
应用测试1皮蛋凝胶膏的消炎试验
(1)试验对象:小鼠70只,均为雄性,体重20-25g/只,购自长沙市天勤生物技术有限公司。
(2)试验材料:实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2所制得的皮蛋凝 胶膏;醋酸地塞米松乳膏,购于三九医药,国药准字H44024170。
(3)试验方法:小鼠70只,随机分成7组:模型对照组,醋酸地塞米松组,实施例1组,实施例2组,实施例3组,对比例1组,对比例2组,每组10只。然后在各组小鼠左 耳正、反面均匀涂抹二甲苯0.5mL,右耳不涂抹,作为自身对照。30min后在致炎处涂抹给 药,醋酸地塞米松组给予醋酸地塞米松乳膏0.1g,实施例1组,实施例2组,实施例3组, 对比例1组,对比例2组分别给予相应的皮蛋凝胶膏0.1g,模型对照组不处理。给药1h后 颈椎脱臼处死小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,用直径6mm打孔器分别在每只小鼠两耳的同一 部位打下圆耳片,称重,以左右耳片质量之差表示肿胀程度,耳肿胀度=左侧耳片重-右侧 耳片重。
(4)试验结果:
表一 皮蛋凝胶膏的消炎试验结果
组别 耳肿胀度(mg)
模型对照组 11.37±2.45
醋酸地塞米松组 6.13±1.98<sup>a</sup>
实施例1组 7.54±2.05<sup>a</sup>
实施例2组 7.76±2.13<sup>a</sup>
实施例3组 7.91±2.19<sup>a</sup>
对比例1组 8.07±2.21<sup>a</sup>
对比例2组 8.16±2.32<sup>a</sup>
注:与模型组相比a P<0.05。
由表一可知,与模型组相比,醋酸地塞米松组、实施例1-3组,对比例1-2组可以显著 地降低小鼠的耳肿胀度,消炎效果较好。
应用测试2皮蛋凝胶膏的止痒试验
(1)试验对象:小鼠70只,均为雄性,体重20-25g/只,购自长沙市天勤生物技术有限公司。
(2)试验材料:实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2所制得的皮蛋凝 胶膏;醋酸氟轻松乳膏,批号100322,天津太平洋制药有限公司;低分子右旋糖酐-40,批 号060924,陕西西康乐制药厂。
(3)试验方法:小鼠70只,随机分成7组:模型对照组,醋酸氟轻松组,实施例1 组,实施例2组,实施例3组,对比例1组,对比例2组,每组10只。实验前3d用脱毛剂 将小鼠背部脱毛,脱毛面积约为9cm2,然后分别将药物均匀涂擦于脱毛区,模型对照组擦 等量生理盐水,每天涂3次,共6次。末次涂药30min后,向各组小鼠鼠尾静脉注射0.03% 右旋糖苷-40(1mg/mL)。以小鼠前爪搔抓头部,后爪搔抓躯干,啃咬全身各部位作为瘙痒特 征。观察记录首次搔抓的时间(耐痒时长)及30min内瘙痒次数。
(4)试验结果:
表二、皮蛋凝胶膏的止痒试验结果
组别 耐痒时长/s 瘙痒次数/次
模型对照组 93±16 72.33±6.91
醋酸氟轻松组 296±23 24.50±3.37<sup>a</sup>
实施例1组 207±28 36.57±3.04<sup>a</sup>
实施例2组 211±19 39.17±3.20<sup>a</sup>
实施例3组 197±16 41.98±4.39<sup>a</sup>
对比例1组 203±21 42.94±5.67<sup>a</sup>
对比例2组 210±25 40.37±5.29<sup>a</sup>
注:与模型组相比a P<0.05。
由表二可知,与模型组相比,醋酸氟轻松组、实施例1-3组、对比例1-2组可以显著地 延长小鼠的耐痒时长,减少其瘙痒次数,其中止痒效果较好,说明制作工艺对凝胶膏的止痒 性影响较小。
应用测试3皮蛋凝胶膏的保湿试验
将透气胶布剪成7份9cm2大小片段贴在光滑玻璃板上,准确称取水(空白对照)、1% 甘油、实施例1组,实施例2组,实施例3组,对比例1组,对比例2组皮蛋凝胶膏均匀涂 抹在胶布上,放入相对湿度分别为62%和85%的干燥器中,4h后称重,计算样品的保湿 率,保湿率=4小时的水分重量*100%/初始水分重量。其保湿率结果如表三所示:
表三 皮蛋凝胶膏的保湿试验
组别 w62%保湿率/% W85%保湿率/%
对照组 0.00±0.01 11.3±0.15
1%甘油 11.5±0.14 33.9±0.31<sup>a</sup>
实施例1 9.01±0.24 24.31±0.34<sup>a</sup>
实施例2 8.59±0.21 25.07±0.31<sup>a</sup>
实施例3组 8.93±0.26 26.19±0.28<sup>a</sup>
对比例1组 8.94±0.21 23.57±0.31<sup>a</sup>
对比例2组 8.78±0.19 24.37±0.25<sup>a</sup>
注:与模型组相比a P<0.05。
由表三可知,1%甘油、实施例1-3组、对比例1-2的保湿率与对照组相比有显著差异, 而对比例1组和对比例2组的保湿率差异不大。
对比评价
将实施例1-3所制备的皮蛋凝胶膏与对比例1-2所述凝胶膏分发给消费者进行试用,并 对比。测试方法为:受试人群年龄为15-50岁,人数为1000人,男女各半,通过发放测试 凝胶膏给每位评价人试用,然后填写统一制定的调查问卷来评价,评价结果采用平均分,评 价标准见表四。试用评价得分结果如表五示,总分100分。
表四 皮蛋凝胶膏评价标准
Figure BDA0003000324470000081
表五 皮蛋凝胶膏评价结果
实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2
色泽、气味 19 18 17 8 17
吸收性 23 22 23 22 15
滋润性 24 23 22 22 15
使用性 28 27 27 23 16
总分 94 90 89 75 63
由上表可知:实施例从色泽、气味、吸收性、滋润性、实用性上均优于对比例,其中实 施例1整体评分最好。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本领域的普通技术人员来说,在 不脱离本发明创造构思的前提下,还可以做出若干改进和变换,这些都属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种皮蛋凝胶膏,其特征在于它由皮蛋酶解液和凝胶基底所组成,皮蛋酶解液和凝胶基底的质量比为1:(15-19);所述皮蛋酶解液的固含量为12%-20%;所述凝胶基底按质量份数计包括如下组成:卡波姆980 0.4-0.6份、卡波姆U20 0.1-0.5份、水50-80份、尿囊素0.1-0.5份、草甘酸二钾0.2-0.5份、β-葡聚糖0.5-1份、EDTA二钠0.1-0.5份、冰片0.02-0.04份、丙二醇1-3份、尼泊金丙酯0.06-0.1份、苯氧乙醇0.04-0.08份、1,3丁二醇6-8份,甘油2-3份、三乙醇胺0.3-0.5份,氢化蓖麻油0.04-0.08份混合而成。
2.根据权利要求1所述的一种皮蛋凝胶膏,其特征在于所述凝胶基底的制备方法如下:
(1)将0.4-0.6份卡波姆980和0.1-0.5份卡波姆U20置于40-60份水中静置,得基底1;本步骤以及后续步骤中“份”均指质量份数;
(2)将0.1-0.5份尿囊素、0.2-0.5份草甘酸二钾、0.5-1份β-葡聚糖、0.1-0.5份EDTA二钠添加到10-20份水中,搅拌至完全溶解,得基底2;
(3)将0.02-0.04份冰片与1-3份丙二醇混合,搅拌至冰片完全融化,得基底3;
(4)将0.06-0.1份尼泊金丙酯、0.04-0.08份苯氧乙醇加入到6-8份1,3丁二醇中,溶解均匀,得基底4;
(5)将0.04-0.08份氢化蓖麻油水浴加热溶化,加入2-3份甘油和0.3-0.5份三乙醇胺,得基底5;
(6)将基底1、基底2、基底3、基底4、基底5混合均匀,即得凝胶基底。
3.根据权利要求2所述的一种皮蛋凝胶膏,其特征在于步骤(1)中,静置时间大于12h。
4.根据权利要求2所述的一种皮蛋凝胶膏,其特征在于步骤(5)中,水浴温度为40-50℃。
5.根据权利要求1所述的一种皮蛋凝胶膏,其特征在于所述皮蛋酶解液的制备方法如下:
(1)取15-20份鹌鹑皮蛋蛋白,打碎成小颗粒备用;配制质量分数0.02%-0.03%柠檬酸溶液,备用;各步骤中的“份”均为质量份;
(2)将60-80份柠檬酸溶液中加入15-20份鹌鹑皮蛋蛋白小颗粒,搅拌浸泡,过滤取滤渣,加入60-80份水,搅拌浸泡,再次过滤取滤渣,得预处理后的皮蛋蛋白;其中,浸泡时间均为15-30min,浸泡温度均为50-55℃;
(3)将100-120份水加入步骤(2)所得的预处理皮蛋蛋白中,磨浆,得皮蛋蛋白浆;
(4)将0.03-0.05份胰蛋白酶、0.3-0.5份风味蛋白酶加入步骤(3)所得皮蛋蛋白浆中,酶解过滤,煮沸得皮蛋酶解液;其中,酶解温度为50-55℃,酶解时间为60-90min。
6.根据权利要求5所述的一种皮蛋凝胶膏,其特征在于所述鹌鹑皮蛋蛋白的制备方法如下:
(1)将产蛋7天内的新鲜鹌鹑蛋按质量比1:1加入腌制液中,21-26℃腌制2.5-3天,然后在片碱石灰混合液中浸泡30-45s,常温晾干3-5天,即得黄金鹌鹑皮蛋;其中,腌制液按质量份数由8-10份桂皮、14-20份片碱、5-9份食盐、100-120份水组成;片碱石灰混合液为片碱和石灰按质量比1:1制成的总质量分数为1%-1.5%的水溶液;
(2)将所得黄金鹌鹑皮蛋的皮蛋白和皮蛋黄分离,取皮蛋白部分作为制备皮蛋酶解液的鹌鹑皮蛋蛋白。
7.权利要求1所述的皮蛋凝胶膏的制备方法,其特征在于主要步骤如下:
(1)按质量份数计,将10份皮蛋酶解液和150-190份凝胶基底混合均匀,搅拌均匀得凝胶混合物;
(2)将步骤(1)所得混合物均质脱气后灌装即得皮蛋凝胶膏。
8.根据权利要求7所述的一种皮蛋凝胶膏的制备方法,其特征在步骤(1)中,搅拌时间为20-30min。
9.根据权利要求7所述的一种皮蛋凝胶膏的制备方法,其特征在步骤(2)中,均质条件为1500-2500r/min,均质时间5-10min;脱气方法为:灌装后在4000-6000r/min条件下离心15-25min,15-20KHz下超声频率下超声20-40min。
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