CN113208961A - 一种金莲花提取物的制备方法和应用 - Google Patents

一种金莲花提取物的制备方法和应用 Download PDF

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CN113208961A CN202110501597.8A CN202110501597A CN113208961A CN 113208961 A CN113208961 A CN 113208961A CN 202110501597 A CN202110501597 A CN 202110501597A CN 113208961 A CN113208961 A CN 113208961A
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Abstract

本申请属于化妆品技术领域。本申请提供了一种金莲花提取物的制备方法和应用。将金莲花粉碎与溶剂混合得到混合物，所述混合物通过微射流提取器提取，得到所述金莲花提取物。通过微射流提取器提取能够有效将金莲花原料中的细胞破碎并使有效成分溶出，无需添加化学试剂或采用复杂的工艺流程，可以保留中药成分中的有效成分，同时还避免有害成分残留，制得的金莲花提取物中荭草苷和牧荆苷的含量高、刺激性小，可用于制备抗氧化或抗衰老化妆品。

Description

一种金莲花提取物的制备方法和应用
技术领域
本申请属于化妆品技术领域，尤其涉及一种金莲花提取物的制备方法和应用。
背景技术
金莲花作为中药材，以花入药，性苦、味凉，有清热解毒之功效。现代药理学研究表明，金莲花属植物中的黄酮类、生物碱类物质具有抗氧化、抑菌、抗病毒等多种生物活性。目前金莲花的应用以复配为主，佐以多种药材或活性成分以实现特殊功效。如中国专利CN202010114376.0将金莲花用水提醇沉后与黑芝麻萃取物混合，再配以蔗糖脂肪酸酯和L-岩藻糖制备成组合物，具有显著抗过敏、滋润保湿的效果；专利CN109771346A将金莲花、茉莉花和槐豆粉组成复合剂，经75％乙醇加热回流，减压浓缩、干燥后得到的金莲花复合物，有显著的美白、祛斑的功效。
然而，未见有将金莲花提取物作为单独的有效成分应用于化妆品中，这主要归因于金莲花存在提取繁琐、会引入有害成分残留或者有效成分无法充分利用，导致金莲花提取物的功效有限。
发明内容
有鉴于此，本申请提供了一种金莲花提取物的制备方法和应用，本申请的制备方法得到的金莲花提取物具有优异的抗氧化活性，且制备方法简单、绿色、高效。
本申请的具体技术方案如下：
本申请第一方面提供一种金莲花提取物的制备方法，包括如下步骤：
将金莲花粉碎与溶剂混合得到混合物，所述混合物通过微射流提取器提取，得到所述金莲花提取物。
本申请中，通过微射流提取器提取能够有效将金莲花原料中的细胞破碎并使有效成分溶出，无需添加化学试剂或采用复杂的工艺流程，可以保留中药成分中的有效成分，同时还避免有害成分残留，制得的金莲花提取物中荭草苷和牧荆苷的含量高、刺激性小，具有很高的应用价值。
优选的，所述溶剂为水和/或低级醇；
所述溶剂与所述金莲花的质量比为(10～50)：1。
优选的，所述微射流提取器包括外壳、转轴以及微射流提取单元；
所述转轴由中心贯穿所述外壳，所述转轴上设有导向叶片，在所述转轴的带动下使物料离心搅拌并向下料位挤压；
所述微射流提取单元位于所述下料位；
所述微射流提取单元嵌设于所述外壳的内壁，从加料位到下料位依次包括紧密连接的导向环、环形碰撞槽以及微孔过滤器；
所述环形碰撞槽的内壁设有齿形突刺；
所述微孔过滤器设有沿着下料方向径向分布的微孔通道，所述微孔过滤器与所述外壳的内壁围成微射流提取腔。
本申请中，金莲花原料在转轴的离心搅拌作用下通过导向叶片引流向微射流提取单元挤压，物料依次经过导向环以及环形碰撞槽内齿形突刺的挤压、碰撞，使金莲花中的中药成分在强大冲击力的引导下发生多次无规则碰撞，形成涡流混合的效果，同时在碰撞过程中产生加速度，向微孔通道挤压并甩出，促使金莲花中荭草苷和牧荆苷有效成分溶出、提高提取效率。
优选的，所述微孔的孔径为100～1000μm。
优选的，所述转轴的转速为500～800rmp，所述外壳内的温度为10～15℃，所述提取的时间为30～40min，所述提取的加料速度为10～20L/min。
优选的，所述提取之后收集得到的提取液还进行分离、纯化和浓缩；
所述分离为离心分离，所述离心分离的转速为2500～6000rpm；
所述纯化为陶瓷膜纯化，所述陶瓷膜的孔径为500～800nm；
所述浓缩为反渗透膜浓缩，原料与浓缩液的质量之比为1：(1～3)。
优选的，所述金莲花提取物中荭草苷的含量为2～5mg/ml，牧荆苷的含量为0.4～1mg/ml。
本申请第二方面提供所述制备方法制得的金莲花提取物在制备抗氧化或抗衰老的化妆品中的应用。
本申请第三方面提供一种化妆品，包括所述制备方法制得的金莲花提取物；
所述化妆品的剂型为乳液、面霜或面膜液。
优选的，所述金莲花提取物在所述化妆品中的质量百分比为0.5～50％。
更优选的，所述金莲花提取物在所述化妆品中的质量百分比为2～5％。
综上所述，本申请提供了一种金莲花提取物的制备方法和应用。将金莲花粉碎与溶剂混合得到混合物，所述混合物通过微射流提取器提取，得到所述金莲花提取物。通过微射流提取器提取能够有效将金莲花原料中的细胞破碎并使有效成分溶出，无需添加化学试剂或采用复杂的工艺流程，可以保留中药成分中的有效成分，同时还避免有害成分残留，制得的金莲花提取物中荭草苷和牧荆苷的含量高、刺激性小，可用于制备抗氧化或抗衰老化妆品。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本申请实施例所使用的微射流提取器的结构示意图；
图2为本申请实施例所使用的微射流提取器中微射流提取单元的结构示意图；
图示说明：1、外壳；11、进料口；12、出料口；2、转轴；21、导向叶片；3、微射流提取单元；31、导向环；32、环形碰撞槽；33、微孔过滤器；34、微孔通道；4、微射流提取腔。
具体实施方式
为使得本申请的目的、特征、优点能够更加的明显和易懂，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，下面所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而非全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本申请保护的范围。
本申请实施例中所使用的微射流提取器的结构示意图如图1所示，本申请实施例所使用的微射流提取器中微射流提取单元的结构示意图如图2所示。
微射流提取器包括外壳1、转轴2以及微射流提取单元3；转轴2由中心贯穿外壳1，转轴2上设有导向叶片21，在转轴2的带动下使物料离心搅拌并向下料位挤压；微射流提取单元3位于下料位；微射流提取单元3嵌设于外壳1的内壁，从加料位到下料位依次包括紧密连接的导向环31、环形碰撞槽32以及微孔过滤器33；环形碰撞槽32的内壁设有齿形突刺；微孔过滤器33设有沿着下料方向径向分布的微孔通道34，微孔过滤器33与外壳1的内壁围成微射流提取腔4。
物料由进料口11投入，转轴2可由电机牵引旋转，使导向叶片21带动物料发生离心搅拌并向微射流提取单元3挤压。导向环31的内径由上料位至下料位逐渐变小，将物料引流至环形碰撞槽32内。环形碰撞槽32内设有齿形突刺，使物料发生多次无规则碰撞，紧接着在微孔通道34的挤压过程中，促进物料中细胞破碎、有效成分溶出，最后通过出料口12收集提取液。
采用本申请的微射流提取器能够有效将金莲花原料中的细胞破碎并使有效成分溶出，可以保留中药成分中的有效成分，同时还避免有害成分残留，制得的金莲花提取物中荭草苷和牧荆苷的含量高、刺激性小，无需添加化学试剂或采用复杂的工艺流程。
实施例1
(1)将1kg金莲花粉碎成20目的药材粉后向其加入重量50kg的纯化水，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物置于微射流提取器中，设置温度为15℃、进料速度为15L/min、转速为500rmp，离心搅拌30min，其中，微射流提取器中的微孔孔径为100μm；(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为4000rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为800nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：1，即得产物。
实施例2
(1)将1kg金莲花粉碎成40目的药材粉后向其加入重量20kg的纯化水，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物置于微射流提取器中，设置温度为10℃、进料速度为20L/min、转速为800rmp，离心搅拌40min，其中，微射流提取器中的微孔孔径为500μm；(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为2500rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为500nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：2，即得产物。
实施例3
(1)将10kg金莲花粉碎成40目的药材粉后向其加入重量250kg的纯化水，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物置于微射流提取器中，设置温度为10℃、进料速度为20L/min、转速为800rmp，离心搅拌40min，其中，微射流提取器中的微孔孔径为800μm；(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为800nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：3，即得产物。
实施例4
(1)将10kg金莲花粉碎成40目的药材粉后向其加入重量为100kg，质量分数30％的1，3-丁二醇，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物置于微射流提取器中，设置温度为10℃、进料速度为20L/min、转速为800rmp，离心搅拌40min，其中，微射流提取器中的微孔孔径为1000μm；(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为500nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：3，即得产物。
对比例1
(1)将1kg金莲花粉碎成40目的药材粉后向其加入重量20kg的纯化水，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物置于超声提取器中，在温度为40℃、超声频率为40KHz的条件下超声提取30min，得到提取液；
(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为500nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：2，即得产物。
对比例2
(1)将1kg金莲花粉碎成40目的药材粉后向其加入重量20kg的纯化水，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物置于加热釜中，在温度为85℃的条件下煎煮提取2h，得到提取液，过滤后滤渣加入10kg纯化水再提取1h，过滤、合并两次提取液；
(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为500nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：2，即得产物。
对比例3
(1)将1kg金莲花粉碎成40目的药材粉后向其加入重量20kg质量分数70％的乙醇，搅拌均匀得到混合物；
(2)混合物在温度为70℃的条件下回流提取3h，得到提取液，过滤后滤渣加入10kg质量分数70％的乙醇再提取1.5h，过滤、合并两次提取液；
(3)将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集分离液，并将分离液用孔径为500nm陶瓷膜分离进行纯化，收集滤液，再用反渗透膜进行浓缩，使金莲花原料与浓缩液的质量比为1：2，即得产物。
测试例1(荭草苷和牧荆苷的含量测定)
本测试例用于测定实施例1～4和对比例1～3制得产物中荭草苷和牧荆苷的含量，具体测定方法如下：
(1)色谱条件
色谱柱：依利特Supersil ODS2(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-4ml/L磷酸溶液(14：86)；检测波长：340nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL；理论塔板数以荭草苷和牡荆苷计分别不低于4000和3000；分离度>1.5。
(2)标准曲线制备
精密称取适量荭草苷和牧荆苷标准品，加入甲醇制备成浓度分别为0.30mg/mL和0.35mg/mL的标准溶液。分别精密量取标准溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL，分别置于10ml容量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件进样，以标准品浓度(x)对其峰面积(y)进行线性回归，得到标准曲线。
(3)样品测定
分别取实施例1～4和对比例1～3制得产物作为供试品加入适量纯水进行稀释，使其浓度范围在标准曲线内。按照步骤(1)的色谱条件进样检测得到供试品溶液的峰面积，根据公式分别计算供试品中荭草苷和牧荆苷的含量；
Figure BDA0003056639920000071
其中，w为供试品中荭草苷(牧荆苷)的质量分数(％)，C为对照品溶液中荭草苷(牧荆苷)浓度(mg/mL)，A1为供试品溶液中荭草苷(牧荆苷)的峰面积，A0为对照品溶液中荭草苷(牧荆苷)的峰面积，V为供试品溶液的稀释体积(mL)，m为供试品的称样量(mg)。
实施例1～4和对比例1～3制得产物中荭草苷和牧荆苷的含量测定结果见下表1所示。
表1实施例1～4和对比例1～3制得产物中荭草苷和牧荆苷的含量
Figure BDA0003056639920000072
表1表明，实施例1～4的提取方法制得的金莲花提取物中荭草苷和牧荆苷的含量相比采用超声提取法的对比例1或煎煮提取法的对比例2或回流提取法的对比例3高出200％～300％。
测试例2(抗氧化能力-DPPH自由基清除实验)
(1)精密称取DPPH粉末(分子量约394)0.0100g置于250mL容量瓶，用适量95％乙醇溶解定容至250mL，期间若出现不溶物析出的情况，可适当降低乙醇酒精度，得到浓度为0.1mmol/L的DPPH溶液；
(2)取实施例1～4和对比例1～3制得产物加95％乙醇溶液配制成浓度为0.01g/mL的待测溶液，并以同样方法配制1mg/mL维生素E对照液；
(3)在10ml试管中依次加入4.0mlDPPH溶液和1.0ml 95％乙醇，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为A0；在10ml试管中依次加入4.0mlDPPH溶液和1.0ml待测溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为Ar；在10ml试管中依次加入4.0ml95％乙醇溶液和1.0ml待测溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为As。根据公式计算待测溶液对DPPH自由基的清除率η；
Figure BDA0003056639920000081
实施例1～4和对比例1～3制得产物DPPH自由基抑制效果见下表2所示。
表2实施例1～4和对比例1～3制得产物DPPH自由基抑制效果
样品 DPPH自由基清除率
维生素E(1mg/ml) 95.4％
实施例1产物(0.01g/ml) 91.7％
实施例2产物(0.01g/ml) 89.6％
实施例3产物(0.01g/ml) 87.1％
实施例4产物(0.01g/ml) 89.8％
对比例1产物(0.01g/ml) 57.1％
对比例2产物(0.01g/ml) 49.7％
对比例3产物(0.01g/ml) 52.9％
测试例3(抗氧化能力-ABTS自由基清除实验)
(1)用浓度为2.45mmol/L过硫酸钾溶解ABTS，配成7mmoL/L的ABTS溶液，溶液呈墨绿色，在室温、避光条件下静置12～16h，用磷酸盐缓冲液(pH＝7.2)稀释，使其吸光度在734nm波长处达到0.700±0.020，得到ABTS工作液；
(2)取实施例1～4和对比例1～3制得产物加磷酸盐缓冲液配制成浓度为0.01g/mL的待测溶液，并以同样方法配制1mg/mL维生素C对照液；
(3)分别取4ml的ABTS工作液与1mL待测溶液混合10s，在25℃避光静置6min，在734nm处测定吸光值，以4mLPBS和1mL待测样品的混合物作为参比，记A样品；取4ml的ABTS工作液与1mLPBS混合10s，在25℃避光静置6min，在734nm处测定吸光值，以PBS作为参比，记A0；待测样品对ABTS自由基的抑制率＝(A0-A样品)/A0×100％。
实施例1～4和对比例1～3制得产物对ABTS自由基抑制效果见下表3所示。
表3实施例1～4和对比例1～3制得产物对ABTS自由基抑制效果
样品 ABTS+自由基清除率
维生素C(5mg/ml) 97.6％
实施例1产物(0.01g/ml) 98.9％
实施例2产物(0.01g/ml) 98.5％
实施例3产物(0.01g/ml) 93.1％
实施例4产物(0.01g/ml) 97.4％
对比例1产物(0.01g/ml) 79.7％
对比例2产物(0.01g/ml) 50.6％
对比例3产物(0.01mg/ml) 77.5％
表2和表3表明，实施例1～4提取方法制得的金莲花提取物添加量为0.01g/ml时，对于DPPH自由基的清除率与1mg/ml维生素E相当，对于ABTS自由基的清除率与5mg/ml维生素C相当，呈现很强的抗氧化性，且与对比例1～3制得产物呈现出明显差异。
测试例4(组织修复活性)
(1)测试系统
本测试例所使用的斑马鱼为AB系斑马鱼，由广东药科大学引入，本实验室扩繁。测试主要设备和试剂如下：Z-A-D5五层单排独立养殖单元(上海海圣生物实验设备有限公司)，SZ780连续变倍体式显微镜(重庆奥特光学仪器有限公司)，ZXSD-A1090生化培养箱(上海智城分析仪器制造有限公司)，SQP万分之一电子秤(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)，三卡因(麦克林)。
(2)测试方法
a.取实施例1制得产物以斑马鱼系统养殖水为溶剂配置质量百分比分别为0.75％和1.0％的样品溶液；
b.挑选发育健康的斑马鱼幼鱼置于6孔细胞培养板中，切去斑马鱼尾鳍，置于体视显微镜下拍照记录，转移至96孔细胞培养板，分别加入200μL样品溶液，置于培养箱中继续孵育72h，置于体视显微镜下对斑马鱼拍照记录，并计算尾鳍的生长长度。实验设置空白对照组(斑马鱼系统养殖水)，每个浓度组20条；
c.采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用
Figure BDA0003056639920000103
数据表示，用单因素方差分析。各浓度组与空白对照组两两比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
实施例1制得产物对鱼胚尾鳍损伤修复的影响见下表4所示。表4表明，与空白对照组相比，斑马鱼幼鱼切除尾鳍后经浓度为0.75％和1.0％的受试样品处理后有促进尾鳍生长的作用，且当受试样品浓度为1.0％时，有显著性差异(**P<0.01)。另外，本申请实施例2～4制得产物具有相似的效果。
表4实施例1制得产物对鱼胚尾鳍损伤修复的影响
Figure BDA0003056639920000101
实施例5
本实施例提供一种护肤霜，以重量百分比计，其配方如表5所示，制备方法如下：
(1)将A相中的各原料分别加入容器A中，加热到80℃，搅拌至完全均匀；
(2)将B相中的各原料分别加入容器B中，加热到85℃，搅拌至完全均匀，其中，透明质酸钠和卡波940分别用甘油和丙二醇预分散；
(3)将A相加入B相均质3min，再将C相各原料加入，均质2min；
(4)搅拌降温冷却至45℃后，加入D相各原料，均质2min，继续搅拌冷却至室温即得。
表5护肤霜配方
Figure BDA0003056639920000102
Figure BDA0003056639920000111
实施例6
本实施例提供一种面膜液，以重量百分比计，其配方如表6所示，制备方法如下：
(1)将A相各原料加入主锅，搅拌，分散均匀至无不溶物，加热到80℃，保温20min，开始降温，降温至45℃以下，先加三乙醇胺，搅拌5min后，再加入B相其他原料，搅拌至均匀无不溶物；
(2)将C相原料预混合，搅拌至均匀，缓慢加入主锅，搅拌至均匀，降温至室温，使用400目以上绢布过滤即得。
表6面膜液配方
Figure BDA0003056639920000112
Figure BDA0003056639920000121
以上所述，以上实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本申请进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种金莲花提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将金莲花粉碎与溶剂混合得到混合物，所述混合物通过微射流提取器提取，得到所述金莲花提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂为水和/或低级醇；
所述溶剂与所述金莲花的质量比为(10～50)：1。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述微射流提取器包括外壳、转轴以及微射流提取单元；
所述转轴由中心贯穿所述外壳，所述转轴上设有导向叶片，在所述转轴的带动下使物料离心搅拌并向下料位挤压；
所述微射流提取单元位于所述下料位；
所述微射流提取单元嵌设于所述外壳的内壁，从加料位到下料位依次包括紧密连接的导向环、环形碰撞槽以及微孔过滤器；
所述环形碰撞槽的内壁设有齿形突刺；
所述微孔过滤器设有沿着下料方向径向分布的微孔通道，所述微孔过滤器与所述外壳的内壁围成微射流提取腔。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述微孔的孔径为100～1000μm。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述转轴的转速为500～800rmp，所述外壳内的温度为10～15℃，所述提取的时间为30～40min，所述提取的加料速度为10～20L/min。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述提取之后收集得到的提取液还进行分离、纯化和浓缩；
所述分离为离心分离，所述离心分离的转速为2500～6000rpm；
所述纯化为陶瓷膜纯化，所述陶瓷膜的孔径为500～800nm；
所述浓缩为反渗透膜浓缩，原料与浓缩液的质量之比为1：(1～3)。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述金莲花提取物中荭草苷的含量为2～5mg/ml，牧荆苷的含量为0.4～1mg/ml。
8.权利要求1～7任意一项所述制备方法制得的金莲花提取物在制备抗氧化或抗衰老的化妆品中的应用。
9.一种化妆品，其特征在于，包括权利要求1～7任意一项所述制备方法制得的金莲花提取物；
所述化妆品的剂型为乳液、面霜或面膜液。
10.根据权利要求9所述的化妆品，其特征在于，所述金莲花提取物在所述化妆品中的质量百分比为0.5～50％。
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