CN113181166B - 莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用 - Google Patents
莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113181166B CN113181166B CN202110584114.5A CN202110584114A CN113181166B CN 113181166 B CN113181166 B CN 113181166B CN 202110584114 A CN202110584114 A CN 202110584114A CN 113181166 B CN113181166 B CN 113181166B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lung cancer
- curcumenol
- cells
- tumor
- application
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 title claims abstract description 72
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 72
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 72
- ISFMXVMWEWLJGJ-NZBPQXDJSA-N curcumenol Chemical compound CC1=C[C@](O2)(O)C(=C(C)C)C[C@@]22[C@@H](C)CC[C@H]21 ISFMXVMWEWLJGJ-NZBPQXDJSA-N 0.000 title claims abstract description 71
- QRMPRVXWPCLVNI-UHFFFAOYSA-N Curcumenol Natural products C1C(=C)C2CCC(C)C22CC(C(C)C)C1(O)O2 QRMPRVXWPCLVNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 69
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims abstract description 13
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 24
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 13
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 claims description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 3
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 25
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 14
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 abstract description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 5
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 abstract description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 73
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 22
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 16
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 5
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 5
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 5
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 5
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 5
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 3
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 3
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 2
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940126673 western medicines Drugs 0.000 description 2
- MASUWVVNWALEEM-UHFFFAOYSA-M 1-methoxy-5-methylphenazin-5-ium;methyl sulfate Chemical compound COS([O-])(=O)=O.C1=CC=C2N=C3C(OC)=CC=CC3=[N+](C)C2=C1 MASUWVVNWALEEM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 108091006149 Electron carriers Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000000980 acid dye Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical class C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 239000003777 experimental drug Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000013115 immunohistochemical detection Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- YSRVJVDFHZYRPA-UHFFFAOYSA-N melem Chemical compound NC1=NC(N23)=NC(N)=NC2=NC(N)=NC3=N1 YSRVJVDFHZYRPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 102000036213 phospholipid binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091011000 phospholipid binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].COC1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本申请涉及医药技术领域，提供了一种莪术烯醇在制备治疗抗肺癌药物中的应用、抗肺癌药物。所述莪术烯醇在制备治疗抗肺癌药物中的应用。本申请提供的莪术烯醇的应用，经体内和体外实验证明，莪术烯醇通过抑制肺癌细胞的生长和增殖，增加肺癌细胞凋亡，实现对肺癌细胞普遍抑制作用，最终有效发挥抗肺癌的效果。因此，莪术烯醇有望成为治疗肺癌的药物，在治疗肺癌药物开发方面具有广阔的前景。
Description
技术领域
本申请属于医药技术领域，尤其涉及一种莪术烯醇在制备治疗抗肺癌药物中的应用，以及一种抗肺癌药物。
背景技术
肺癌是一种高发病率和高死亡率的恶性肿瘤，由于缺乏早期症状，大多数肺癌患者确诊时已是晚期，失去手术机会。虽然化疗、放疗、靶向治疗、免疫治疗等综合治疗可提高肺癌患者的生存期，但患者预后仍极差，有效率高、毒副反应小的抗癌药物十分有限，并且肺癌治疗使用的西药毒副作用大，有严重的不良反应，易产生耐药。中药毒副作用小，在抗肿瘤治疗方面具有无可比拟的优点，因此，寻找毒副作用小、新的抗癌中药具有重要意义。
发明内容
本申请的目的在于提供一种莪术烯醇在制备治疗抗肺癌药物中的应用，以及一种抗肺癌药物，旨在解决现有的肺癌治疗用的西药毒副作用大，有严重的不良反应的问题。
为实现上述申请目的，本申请采用的技术方案如下：
本申请第一方面提供一种莪术烯醇在制备治疗抗肺癌药物中的应用。
在一些实施方式中，所述抗肺癌药物为肿瘤细胞抑制剂。
在一些实施方式中，所述肿瘤细胞抑制剂为抑制肿瘤细胞增殖的药物制剂。
在一些实施方式中，所述肿瘤细胞抑制剂为抑制肿瘤细胞生长的药物制剂。
在一些实施方式中，所述肿瘤细胞抑制剂为肿瘤细胞消杀制剂。
本申请第二方面提供一种抗肺癌药物，包括莪术烯醇。
在一些实施方式中，所述抗肺癌药物以所述莪术烯醇作为抗肺癌的活性成分。
在一些实施方式中，所述抗肺癌药物以所述莪术烯醇作为抗肺癌的唯一活性成分。
在一些实施方式中，所述抗肺癌药物以所述莪术烯醇和其他抗肿瘤作用药物同时作为抗肺癌的活性成分。
在一些实施方式中，还包括医药可接受的辅料。
本申请提供的莪术烯醇的应用，经体内和体外实验证明，莪术烯醇通过抑制肺癌细胞的生长和增殖，增加肺癌细胞凋亡，实现对肺癌细胞普遍抑制作用，最终有效发挥抗肺癌的效果。因此，莪术烯醇有望成为治疗肺癌的药物，在治疗肺癌药物开发方面具有广阔的前景。
本申请提供的抗肺癌药物，由于含有莪术烯醇，同样具有上述效果。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本申请实施例1提供的不同浓度的莪术烯醇对肺癌细胞存活率的影响及IC50统计图；
图2A为本申请实施例2提供的不同浓度的莪术烯醇对肺癌细胞的增殖能力影响之克隆形成实验检测细胞增殖结果图；
图2B为本申请实施例3提供的不同浓度的莪术烯醇对肺癌细胞的增殖能力影响之不同浓度的莪术烯醇对细胞形态的影响结果图；
图2C为本申请实施例3提供的不同浓度的莪术烯醇对肺癌细胞的增殖能力影响之不同浓度莪术烯醇对肺癌细胞凋亡的影响结果图；
图3A为本申请实施例4提供的莪术烯醇对肺癌细胞体内成瘤能力的影响，构建裸鼠皮下荷瘤模型，莪术烯醇处理后收集的肺癌组织图；
图3B为本申请实施例4提供的莪术烯醇对肺癌细胞体内成瘤能力的影响，构建裸鼠皮下荷瘤模型，莪术烯醇处理前后荷瘤裸鼠的体重统计图；
图3C为本申请实施例4提供的莪术烯醇对肺癌细胞体内成瘤能力的影响，构建裸鼠皮下荷瘤模型，莪术烯醇处理前后荷瘤裸鼠的肿瘤体积统计图。
具体实施方式
为了使本申请要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。
在本申请实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本申请。在本申请实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。
本申请实施例说明书中所提到的相关成分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本申请实施例说明书相关组分的含量按比例放大或缩小均在本申请实施例说明书公开的范围之内。具体地，本申请实施例说明书中所述的质量可以是μg、mg、g、kg等化工领域公知的质量单位。
中药郁金味苦、辛，性温，无毒，归肺、肝、心经，具有“消癥散结，破血止痛”之功，《本草从新》指其“能开肺金之郁”。莪术烯醇(Curcumenol)是从温郁金中提取的有效成分，属于姜黄素化合物，其化学结构如下式1所示，分子式为：C15H22O2，分子量为：234.339。
体内外实验提示莪术烯醇可诱导胃癌细胞凋亡，抑制体内外肝癌细胞的增殖和转移。有鉴于此，
本申请实施例第一方面提供一种莪术烯醇在制备治疗抗肺癌药物中的应用。
本申请实施例提供的莪术烯醇的应用，经体内和体外实验证明，莪术烯醇通过抑制肺癌细胞的生长和增殖，增加肺癌细胞凋亡，实现对肺癌细胞普遍抑制作用，最终有效发挥抗肺癌的效果。因此，莪术烯醇有望成为治疗肺癌的药物，在治疗肺癌药物开发方面具有广阔的前景。
在一些实施例中，抗肺癌药物为肿瘤细胞抑制剂。即莪术烯醇作肿瘤细胞抑制剂在用于治疗抗肺癌中的应用。
在一些实施方式中，肿瘤细胞抑制剂为抑制肿瘤细胞增殖的药物制剂。在一些实施方式中，肿瘤细胞抑制剂为抑制肿瘤细胞生长的药物制剂。在一些实施方式中，肿瘤细胞抑制剂为肿瘤细胞消杀制剂。
应当理解的是，莪术烯醇可以作用于肿瘤细胞，同时发挥抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞生长和消杀肿瘤细胞的作用，达到治疗肿瘤的效果。
本申请实施例第二方面提供一种抗肺癌药物，包括莪术烯醇。本申请实施例提供的抗肺癌药物，由于含有莪术烯醇，能够抑制肺癌细胞的生长和增殖，增加肺癌细胞凋亡，实现对肺癌细胞普遍抑制作用，最终有效发挥抗肺癌的效果。
在一些实施例中，抗肺癌药物以莪术烯醇作为抗肺癌的活性成分，即抗肺癌药物中发挥抗肺癌作用的成分至少包括莪术烯醇。在一些实施方式中，抗肺癌药物以莪术烯醇作为抗肺癌的唯一活性成分。在一些实施方式中，抗肺癌药物以莪术烯醇和其他抗肿瘤作用药物同时作为抗肺癌的活性成分。
在一些实施例中，还包括医药可接受的辅料，以使得莪术烯醇或含有莪术烯醇的药物活性成分制备成各种剂型的药物。
下面结合皮下荷瘤裸鼠模型构建实施例，说明莪术烯醇对裸鼠体内肺癌细胞的抑制作用，证明莪术烯醇的抗肿瘤效果。
术语解释：
CCK-8：用于细胞增殖和毒性分析。该试剂中含有WST-8，它在电子载体(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒染料，生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，这一特性被用来直接进行细胞增殖和毒性分析。
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒：检测细胞凋亡。在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine，PS)位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合，可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现双阳性(AnnexinV+/PI+)。
实施例1
细胞培养：
H460、H1299、HCC827、H1975、PC9、H1650肺癌细胞株均购自American TypeCulture Collection(ATCC)，H460、H1299、HCC827、H1975、H1650细胞在RPMI-1640培养基中培养，PC9细胞在DMEM培养基中培养，培养基中包含青霉素，链霉素和10％(v/v)胎牛血清(FBS)(Corille，184590，澳大利亚)。将细胞放置在37℃的含有95％(v/v)空气和5％(v/v)CO2的培养箱中培养。待细胞长至约80％时，用含0.02％(v/v)EDTA的0.25％(v/v)胰蛋白酶消化2min，加入含10％(v/v)胎牛血清的培养液终止消化，离心后按照1:3的比例传代，取对数生长期细胞培养用于实验。
实验试剂与药物：
试剂：CCK-8(美仑)，甲醇(国药集团化学试剂有限公司)。
药物：莪术烯醇标准品购于成都曼斯特生物科技有限公司，货号：A1069，取20mg干粉溶于0.2ml甲醇配成100mg/ml莪术烯醇母液。
具体实验方法：
用含EDTA的0.25％(v/v)胰蛋白酶消化处于对数生长期的H460、H1299、HCC827、H1975、PC9、H1650细胞，弃去胰酶，加入完全培养液中止消化后离心，离心后将细胞悬浮在完全培养液中，计数，接种到96孔板中，每孔含有4000个细胞/100μl完全培养液，放在培养箱中培养过夜，加入100μl含不同浓度莪术烯醇的培养基，在培养箱中培养24h，孵育结束后，吸出96孔板的培养基，加入与CCK8混合的培养基(培养基：CCK8＝10:1)继续孵育1～4h，用酶标仪测定在450nm处的吸光度。实验重复三次，通过下式计算细胞存活率：细胞存活率＝[(实验孔-空白孔)/(对照孔-空白孔)]×100％。
实验结果：
CCK8结果如图1所示(纵坐标表示细胞存活率)，由图可见：随着莪术烯醇浓度增高，H460、H1299、HCC827、H1975、PC9肺癌细胞的存活率依次降低，且呈浓度依赖性，其半数致死率(IC50)如下表1，分别为293.089μg/ml、143.132μg/ml、201.080μg/ml、181.208μg/ml、132.535μg/ml。其中，H1650细胞对莪术烯醇的敏感性较低，在莪术烯醇最高浓度400μg/ml时，抑制率也不足50％。
表1
实施例2
实验试剂和药物：
试剂：结晶紫(索莱宝)，多聚甲醛(国药集团化学试剂有限公司)。
药物：莪术烯醇标准品购于成都曼斯特生物科技有限公司，货号：A1069，取20mg干粉溶于0.2ml甲醇配成100mg/ml莪术烯醇母液。
具体实验方法：
取对数生长期的H460和H1299细胞分别铺在三个6cm培养皿，每个培养皿含有1000个细胞，将培养皿放在培养箱中培养，显微镜下观察。当显微镜下观察到细胞克隆时，更换含不同浓度(0μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml)莪术烯醇的培养基培养，每三天更换一次新鲜的含不同浓度莪术烯醇的培养基，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4％(v/v)多聚甲醛固定细胞15min，然后弃去多聚甲醛；用PBS浸洗2次，加适量的结晶紫染20min，然后将培养皿用清水浸洗干净，晾干，显微镜下拍照。实验重复三次。
实验结果：
克隆形成实验结果如图2A所示。结果显示：H1299细胞形成的克隆体积略大于H460细胞，在低浓度(100μg/ml)的莪术烯醇处理后，H1299细胞和H460细胞的增殖能力受到抑制，但抑制作用不明显，高浓度(200μg/ml)的莪术烯处醇理后，H1299细胞和H460细胞的增殖能力受到明显的抑制，克隆形成数目大量减少，见图2A。
实施例3
实验试剂和药物：
试剂：Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(BD)
药物：莪术烯醇标准品购于成都曼斯特生物科技有限公司，货号：A1069，取20mg干粉溶于0.2ml甲醇配成100mg/ml莪术烯醇母液。
具体实验方法：
取对数生长期的H460和H1299细胞分别铺在四个6cm培养皿中，每个培养皿含5×106个细胞，将培养皿过夜培养后分别加0μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，300μg/ml的莪术烯醇处理24h。先在显微镜下观察细胞形态并拍照，然后收集全部细胞培养液，转移至15ml离心管中，用预冷的PBS洗涤，PBS也转入15ml离心管，然后用含EDTA的0.25％胰蛋白酶消化细胞，待完全消化后，弃去胰酶，加入培养基终止消化，轻轻吹下细胞，转移到15ml离心管中，800g离心5min，去除上清。加1ml预冷的PBS，分散细胞，转移到1.5ml EP管中，以800g离心5min，吸尽上清，加入1ml 1×binding buffer重悬细胞，计数，并将细胞浓度调至106个/ml。向流式上样管中加入100μl(105个细胞)细胞悬液，并向每个流式管中加入5μl FITC-Annexin V和5μl PI，轻弹流式管底部，混匀细胞与染色剂，室温避光放置15min，再向每个流式管中加入1×binding buffer缓冲液200μl，然后上机检测。Annexin V-FITC显示绿色荧光，PI显示红色荧光。实验重复三次。
实验结果：
显微镜下细胞形态如图2B所示，由图可见，随着莪术烯醇浓度增加，细胞体积缩小，连接消失，与周围细胞脱离，漂浮细胞增多。细胞凋亡实验结果如图2C所示，由图可见，随着莪术烯醇浓度增加，H1299和H460细胞的凋亡率逐渐增高，且有明显的统计学差异。其中，**表示p<0.01,***表示p<0.001,****表示p<0.0001，n＝3，代表实验重复三次。
实施例4
实验药物：
莪术烯醇标准品购于成都曼斯特生物科技有限公司，货号：A1069，取8mg莪术烯醇，加入100μl含1％吐温80的0.25％的羧甲基纤维素钠溶液,超声破碎1h，制成混悬液。
具体实验方法：
将含H460细胞的悬液(1×107个/0.1ml)接种至裸鼠后肢背部皮下，建立荷瘤裸鼠模型，大约十天成瘤；将上述荷瘤裸鼠模型随机分为两组：对照组、莪术烯醇组(400mg/kg/d)，根据试验方案进行腹腔给药，对照组给予100μl含1％吐温80的0.25％的羧甲基纤维素钠溶液处理，每组裸鼠给予正常的进食和饮水；每两天用游标卡尺测量肿瘤的长径和短径，计算肿瘤体积＝长径×(短径)2/2，待肿瘤长径约为1.5～2cm时或裸鼠生病时，采用颈部脱臼法处死荷瘤裸鼠，无菌条件下取出肿瘤，将肿瘤组织分为3份，一份用10％中性福尔马林固定、石蜡包埋、切片，进行免疫组化检测；一份组织匀浆、提取蛋白，用作Western blot实验；另一份提取RNA，用作qRT-PCR实验。
实验结果：
裸鼠荷瘤裸鼠模型结果如图3A(Curcumenol表示实验组，control表示对照组)所示，结果显示，莪术烯醇组肿瘤明显小于对照组。裸鼠体重在整个成瘤过程中稳定增长且组间无明显差异，说明药物无明显的蓄积毒性，对裸鼠的生长无明显影响，如图3B(Curcumenol表示实验组，control表示对照组，纵坐标表示裸鼠体重)。随着生存时间增加，对照组肿瘤体积逐渐增大，但莪术烯醇组肿瘤体积增长速度较缓，且明显小于对照组(*p<0.05)，如图3C(Curcumenol表示实验组，control表示对照组，纵坐标表示肿瘤体积)。
以上仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (5)
1.莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用；
其中，所述莪术烯醇的化学结构如下式1所示：
。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗肺癌药物为肿瘤细胞抑制剂。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞抑制剂为抑制肿瘤细胞增殖的药物制剂。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞抑制剂为抑制肿瘤细胞生长的药物制剂。
5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤细胞抑制剂为肿瘤细胞消杀制剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110584114.5A CN113181166B (zh) | 2021-05-27 | 2021-05-27 | 莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110584114.5A CN113181166B (zh) | 2021-05-27 | 2021-05-27 | 莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113181166A CN113181166A (zh) | 2021-07-30 |
| CN113181166B true CN113181166B (zh) | 2024-01-05 |
Family
ID=76985388
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110584114.5A Active CN113181166B (zh) | 2021-05-27 | 2021-05-27 | 莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113181166B (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106632383A (zh) * | 2016-11-21 | 2017-05-10 | 辽宁大学 | 莪术醇衍生物及其制备方法和在抗肿瘤药物中的应用 |
| CN106924236A (zh) * | 2015-12-31 | 2017-07-07 | 复旦大学 | 莪术醇在制备抗肿瘤药物增敏剂中的应用 |
| CN108586478A (zh) * | 2018-05-21 | 2018-09-28 | 王欢 | 一种颗粒酶b激活剂莪术烯醇的制备方法 |
| CN108939047A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-12-07 | 暨南大学 | 莪术醇与trail在制备抗肿瘤联合用药中的应用 |
| CN112336714A (zh) * | 2020-12-07 | 2021-02-09 | 淮安市厚沐医疗技术咨询中心 | 一种莪术醇衍生物用于制备抗肿瘤药物的用途 |
-
2021
- 2021-05-27 CN CN202110584114.5A patent/CN113181166B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106924236A (zh) * | 2015-12-31 | 2017-07-07 | 复旦大学 | 莪术醇在制备抗肿瘤药物增敏剂中的应用 |
| CN106632383A (zh) * | 2016-11-21 | 2017-05-10 | 辽宁大学 | 莪术醇衍生物及其制备方法和在抗肿瘤药物中的应用 |
| CN108586478A (zh) * | 2018-05-21 | 2018-09-28 | 王欢 | 一种颗粒酶b激活剂莪术烯醇的制备方法 |
| CN108939047A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-12-07 | 暨南大学 | 莪术醇与trail在制备抗肿瘤联合用药中的应用 |
| CN112336714A (zh) * | 2020-12-07 | 2021-02-09 | 淮安市厚沐医疗技术咨询中心 | 一种莪术醇衍生物用于制备抗肿瘤药物的用途 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 恶性肿瘤的病因病机与防治策略;胡凯文;《中华中医药杂志》;第26卷(第8期);1683-1685 * |
| 莪术醇抗肿瘤研究进展;秦铁城;《现代中西医结合杂志》;第22卷(第18期);2043-2045 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113181166A (zh) | 2021-07-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106974938B (zh) | 一种具有抗肝癌作用的骨髓间充质干细胞来源的外泌体及其药物制剂 | |
| CN106943432B (zh) | 一种脐带间充质干细胞来源的外泌体及其在制备治疗肝癌药物中的应用 | |
| CN114344325A (zh) | 脆弱拟杆菌及其两性离子荚膜多糖在制备用于防治生殖泌尿系统肿瘤的药物中的应用 | |
| CN108186643B (zh) | 一种具有协同抗骨肉瘤功效的药物组合物及其应用 | |
| CN111254182B (zh) | 石斛多糖抗癌活性分析方法与应用、及石斛多糖的应用 | |
| CN113181166B (zh) | 莪术烯醇在制备抗肺癌药物中的应用 | |
| CN111643513A (zh) | 阿瑞匹坦和阿糖胞苷的组合及其抗血癌作用 | |
| CN111166754A (zh) | 隐丹参酮在制备防治恶病质骨骼肌萎缩药物中的应用 | |
| CN114010630B (zh) | 槲皮素的氧甲基修饰物在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用 | |
| CN114010789B (zh) | 蟾蜍甾烯类化合物在制备治疗egfr和/或stat3驱动疾病的药物中的应用 | |
| CN113440519A (zh) | 霉酚酸及其衍生物在制备靶向治疗癌症药物中的应用 | |
| CN114558141A (zh) | 降低胰腺癌细胞恶性表型的促进剂、药物组合及其用途 | |
| CN111803484B (zh) | 奥替溴铵在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN108403941B (zh) | 一种治疗胰腺癌的中药组合物及其制备方法和应用 | |
| CN113995753A (zh) | 一种中药分子槐果碱在制备治疗胶质母细胞瘤药物上的应用 | |
| CN112402413A (zh) | 野马追倍半萜内酯b在制备抗肝癌药物中的应用及一种抗肝癌药物 | |
| CN111000850A (zh) | 隐丹参酮在制备克服nsclc治疗药物egfr-tki耐药的药物中的应用 | |
| CN109908129A (zh) | 千层纸素在制备抑制肺癌侵袭转移药物中的应用 | |
| CN105477068B (zh) | 一种桑枝叶活性部位的制备方法及其应用 | |
| CN116421590B (zh) | 二乙酸氯己定在制备预防或/和治疗肝癌的药物中的用途 | |
| CN110327465B (zh) | 一种复方抗前列腺癌药物 | |
| CN115990162B (zh) | 4-羟基-2-吡啶酮生物碱在制备治疗胃癌药物中的应用 | |
| CN111494397B (zh) | 麦冬皂苷类化合物在制备预防和治疗肿瘤的药物中的用途 | |
| CN104873513B (zh) | 一种抑制肺癌细胞转移的药物组合物以及检测方法 | |
| CN105999245A (zh) | 含乌司他丁的药物组合物在制备治疗胆囊癌药物中的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |