CN113171397A - 一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物及其制备方法 - Google Patents

一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，按照质量百分比计，原料由玫瑰花25％‑50％、黑豆25％‑50％和川芎25％‑50％的比例组成。本发明从人群摄入酒精难以快速代谢的技术问题出发，以激活乙醛脱氢酶活性为关键手段，针对中国人饮酒后脸红、上头是由乙醛积累所致，筛选药食同源的天然成分，从而获得具有激活乙醛脱氢酶活性的玫瑰花、黑豆、川芎中药组合物。

Description

一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及中药组合物技术领域，具体涉及一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物及其制备方法。
背景技术
饮酒是中国人几千年的传统，适量饮酒可以起到舒筋活络、安神助眠的作用，但是饮酒过量会给人体肝脏、神经系统等带来损伤。酒精在体内的代谢分为乙醇在乙醇脱氢酶催化分解为乙醛、乙醛在乙醛脱氢酶催化下进一步分解为二氧化碳和水排出体外，但中国人体内合成乙醛脱氢酶的基因缺乏，导致摄入酒精后乙醛代谢受阻，累积的乙醛比乙醇对人体的损伤更大。在市售的解酒保健品中，既有基于传统提取物的葛根护肝片：葛根提取物、枳椇子提取物、大豆油、明胶；海王金樽：牡蛎精粉、维生素C、L-半胱氨酸、牛磺酸、泛酸钙、淀粉、蔗糖；每德解酒护肝片：维生素C、B1、B2、B6、B12，艾蒿、穿心莲、肉桂、余甘子提取物、叶酸；莱特维健清肝1号：高纯度水飞蓟、蒲公英提取物、胆碱。也有基于单纯补充剂成分的Ru21：维生素C60毫克、维生素B2、维生素B6、谷氨酸；舒醒氨基酸解酒胶囊：氨基酸、维生素B、E、C、胡萝卜素。两类解酒产品实际使用效果不佳，对于解酒没有明确机理解释，未能解决中国人过量饮酒后解酒的根本性问题。
目前，未见有以玫瑰花、黑豆、川芎组合物，对乙醛脱氢酶有激活作用的直接报道。三种药材功效成分的主要利用领域也与解酒无关，比如玫瑰花主要以提取其精油成分，继而发挥其美容养颜，理气活血、疏肝解郁、主治月经不调等功能。即使有报道其提取物对缓解小鼠肝损伤有益，亦或是有解酒功能，但未能明确其发挥作用的方式。
发明内容
本发明提供了一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，其从人群摄入酒精难以快速代谢的技术问题出发，以激活乙醛脱氢酶活性为关键手段，针对中国人饮酒后脸红、上头是由乙醛积累所致，筛选药食同源的天然成分，从而获得具有激活乙醛脱氢酶活性的玫瑰花、黑豆、川芎中药组合物。
本发明的技术方案如下：
一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，按照质量百分比计，原料由玫瑰花25％-50％、黑豆25％-50％和川芎25％-50％的比例组成。
优选地，原料由玫瑰花25％、黑豆50％和川芎25％的比例组成。
优选地，原料由玫瑰花25％、黑豆25％、川芎50％的比例组成。
优选地，原料由玫瑰花40％、黑豆30％和川芎30％的比例组成。
优选地，所述中药组合物由以下方法制备而成：
(1)药材提取：按照质量百分比，取玫瑰花25％-50％、黑豆25％-50％、川芎25％-50％粉碎，添加8～12倍量35％～75％乙醇溶液，在400-500W超声提取2-3次，每次30～60min，提取结束后粗滤，合并滤液得提取液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度40～50℃；
(3)纯化制备：取干燥后的提取物进行树脂吸附、洗脱，收集洗脱液；
(4)浓缩干燥：将上述收集的洗脱液减压真空浓缩干燥，温度40～50℃，复溶于1倍量的55％乙醇之中，在4℃的温度下保存。
优选地，步骤(3)具体为：取干燥后的提取物加入2倍量超纯水超声溶解，上D101大孔树脂柱吸附4小时。利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，利用2.5倍量55％乙醇洗脱2小时，利用95％乙醇洗脱2小时，再利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，分别收集洗脱液。
本发明的有益效果如下：
(1)工艺便捷：相比其他的解酒产品，需要额外添加众多辅助性物质或者将某一物质分离纯化得到较少产品相比，本组合物只需将各组合物按照一定比例进行提取，借助大孔树脂柱分离纯化，选取所需要的纯化组分即可，按照不同类型的需求制备成不同类型产品，且有利于工业化大规模生产。
(2)效果显著：与其他类似产品对比，本中药组合物利用高通量体外筛选实验，发现其对乙醛脱氢酶有较好的激活作用，明显提高酶促反应的效率。将其用于细胞实验，结果显示其对正常人肝细胞有很好的保护作用。最后进行人体酒精测试时，证明饮酒前服用该中药组合物，可明显缩短醉酒后醒酒时间缓解不适症状。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做出详细说明，应当了解，实施例只用于说明本发明，而不是用于对本发明进行限定，任何在本发明基础上所做的修改、等同替换等均在本发明的保护范围内。
玫瑰花，为蔷薇科植物玫瑰Rosa rugosaThunb.的干燥花蕾。春末复初花将开放时分批采摘，及时低温干燥。姚可成《食物本草》：主利肺脾，益肝胆，辟邪恶之气，食之芳香甘美，令人神爽。具有行气解郁，和血散瘀。治肝胃气痛，新久风痹，吐血咯血，月经不调，赤白带下，痢疾，乳痈，肿毒之功效。中医认为，玫瑰花味甘微苦、性温，最明显的功效就是理气解郁、活血散淤和调经止痛。此外，玫瑰花的药性非常温和，能够温养人的心肝血脉，舒发体内郁气，起到镇静、安抚、抗抑郁的功效。玫瑰花茶能降火气、滋阴美容、调理血气、促进血液循环、养颜美容，且有消除疲劳，愈合伤口，保护肝脏胃肠功能，长期饮用亦有助于促进新陈代谢。民间有饮用玫瑰花茶达到解酒，增加酒量的习俗，也有研究者通过小鼠醉酒翻正实验，验证了香蜜玫瑰具有减少小鼠醉酒时间的功效。但是未能深入研究其发挥作用的具体机理，以及何种物质为其功效成分。
黑豆，为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的干燥成熟种子。秋季采收成熟果实，晒干，打下种子，除去杂质。《本草纲目》载“药黑豆有补肾养血、清热解毒、活血化瘀、乌发明目、延年益寿功效。”益精明目，养血祛风，利水，解毒。用于阴虚烦渴，头晕目昏，体虚多汗，肾虚腰痛，水肿尿少，痹痛拘挛，手足麻木，药食中毒。黑豆膳食可以降低餐后胰岛素水平和提高机体氧化应激能力，黑豆水提物(主要包括花青素、花色苷、异黄酮等)和花色苷可以平稳血糖、保护糖尿病导致的器官损伤；在降血脂方面，则包括发酵黑豆、黑豆多肽和花色苷；在护肝方面，黑豆和黑豆多糖被证实具有保护肝损伤作用；在氧化应激方面，则主要涉及黑豆多肽和黑豆皮提取物；除此之外，黑豆花青素还被证实具有一定保护心肌损伤的功效。
川芎，为伞形科植物川芎Ligusticumchuanriong Hort.的干燥根茎。夏季当茎上的节盘显著突出，并略带紫色时采挖，除去泥沙，晒后烘干，再去须根。《吴普本草》：黄帝、岐伯、雷公：辛，无毒，香。扁鹊：酸，无毒。李氏：生温，熟寒。功能主治：行气开郁，祛除风燥湿，活血止痛。治风冷头痛旋晕，胁痛腹疼，寒痹筋挛，经闭，难产，产后瘀阻块痛，痈疽疮疡。用于月经不调，经闭痛经，瘕腹痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，头痛，风湿痹痛。研究表明川芎水提物，降低醉酒小鼠血液中谷草转氨酶(ALT)和谷丙转氨酶(AST)，对酒精性肝损伤有保护作用。
实施例1
一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，按照以下步骤组成：
(1)药材提取：按照质量百分比，取玫瑰花25％、黑豆25％、川芎50％粉碎，添加8倍量35％乙醇溶液，在400W超声提取3次，每次30min，提取结束后粗滤，合并滤液得提取液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度50℃；
(3)纯化制备：取干燥后的提取物加入2倍量超纯水超声溶解，上D101大孔树脂柱吸附4小时。利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，利用2.5倍量55％乙醇洗脱2小时，利用95％乙醇洗脱2小时，再利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，分别收集洗脱液；
(4)浓缩干燥：将上述收集的洗脱液减压真空浓缩干燥，温度50℃，复溶于1倍量的55％乙醇之中，4℃保存待用。
对制备得到的中药组合物进行如下后续处理：
乙醛脱氢酶激活性能筛选：采用乙醛脱氢酶酶活测定的方法。ALDH、辅酶NAD+和底物在一定温度和pH值的条件下反应，通过测定每分钟波长340nm处吸光度值的变化，可计算出每分钟NAD+转化为NADH的量，从而得到该物质对酶活性的影响。
正常肝细胞酒精性肝损伤模型实验：以人正常肝细胞为研究对象。将细胞培养到指数期，以一定浓度将细胞接种到96T细胞板中，待细胞长满孔底加入造模用低浓度酒精以及样品，48h后用细胞形态观察法和MTT法检测活性变化判断不同样品对酒精性肝损伤的作用效果。
人群测试：将一定数量受试者分为实验组与对照组，实验组饮酒前1小时服用本组合物胶囊，对照组服用安慰剂。饮用统一量白酒产品，按照同一速度饮用，从头晕开始计时，到清醒则计时结束，通过对比醒酒时间看作用效果。
通过计算得到玫瑰花25％、黑豆25％、川芎50％组合效果为：
Figure BDA0003104448340000051
实施例2
一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，按照以下步骤组成：(1)药材提取：按照质量百分比，取玫瑰花25％、黑豆50％、川芎25％粉碎，添加10倍量55％乙醇溶液，在450W超声提取3次，每次60min，提取结束后粗滤，合并滤液得提取液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度45℃；
(3)纯化制备：取干燥后的提取物加入2倍量超纯水超声溶解，上D101大孔树脂柱吸附4小时。利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，利用2.5倍量55％乙醇洗脱2小时，利用95％乙醇洗脱2小时，再利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，分别收集洗脱液。
(4)浓缩干燥：将上述收集的洗脱液减压真空浓缩干燥，温度45℃，复溶于1倍量的55％乙醇之中，4℃保存待用。
检测方法同实施例1，通过计算得到玫瑰花25％、黑豆50％、川芎25％组合效果为：
Figure BDA0003104448340000052
实施例3
一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，按照以下步骤组成：(1)药材提取：按照质量百分比，取玫瑰花40％、黑豆30％、川芎30％粉碎，添加12倍量75％乙醇溶液，在500W超声提取2次，每次45min，提取结束后粗滤，合并滤液得提取液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度40℃；
(3)纯化制备：取干燥后的提取物加入2倍量超纯水超声溶解，上D101大孔树脂柱吸附4小时。利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，利用2.5倍量55％乙醇洗脱2小时，利用95％乙醇洗脱2小时，再利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，分别收集洗脱液。
(4)浓缩干燥：将上述收集的洗脱液减压真空浓缩干燥，温度40℃，复溶于1倍量的55％乙醇之中，4℃保存待用。
检测方法同实施例1，通过计算得到玫瑰花40％、黑豆30％、川芎30％组合效果为：
Figure BDA0003104448340000061

Claims (7)

1.一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，其特征在于，按照质量百分比计，原料由玫瑰花25％-50％、黑豆25％-50％和川芎25％-50％的比例组成。
2.根据权利要求1所述的一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，其特征在于，原料由玫瑰花25％、黑豆50％和川芎25％的比例组成。
3.根据权利要求1所述的一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，其特征在于，原料由玫瑰花25％、黑豆25％、川芎50％的比例组成。
4.根据权利要求1所述的一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，其特征在于，原料由玫瑰花40％、黑豆30％和川芎30％的比例组成。
5.根据权利要求1所述的一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物，其特征在于，所述中药组合物由以下方法制备而成：
(1)药材提取：按照质量百分比，取玫瑰花25％-50％、黑豆25％-50％、川芎25％-50％粉碎，添加8～12倍量35％～75％乙醇溶液，在400-500W超声提取2-3次，每次30～60min，提取结束后粗滤，合并滤液得提取液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度40～50℃；
(3)纯化制备：取干燥后的提取物进行树脂吸附、洗脱，收集洗脱液。
(4)浓缩干燥：将上述收集的洗脱液减压真空浓缩干燥，温度40～50℃，复溶于1倍量的55％乙醇之中，在4℃的温度下保存。
6.一种激活乙醛脱氢酶的解酒中药组合物的制备方法，其特征在于，由以下步骤制备而成：
(1)药材提取：按照质量百分比，取玫瑰花25％-50％、黑豆25％-50％、川芎25％-50％粉碎，添加8～12倍量35％～75％乙醇溶液，在400-500W超声提取2-3次，每次30～60min，提取结束后粗滤，合并滤液得提取液；
(2)浓缩干燥：将上述过滤后的提取液减压真空浓缩干燥，温度40～50℃；
(3)纯化制备：取干燥后的提取物进行树脂吸附、洗脱，收集洗脱液；
(4)浓缩干燥：将上述收集的洗脱液减压真空浓缩干燥，温度40～50℃，复溶于1倍量的55％乙醇之中，在4℃的温度下保存。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)具体为：取干燥后的提取物加入2倍量超纯水超声溶解，上D101大孔树脂柱吸附4小时。利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，利用2.5倍量55％乙醇洗脱2小时，利用95％乙醇洗脱2小时，再利用2.5倍量超纯水洗脱2小时，分别收集洗脱液。
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