CN113166236A - 限制穿过黏液的合成粘合剂 - Google Patents

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Abstract

用于减少可穿过黏液和/或自由分裂的靶标比例的合成粘合剂，以及使用这些合成粘合剂减少靶标的黏膜渗透和/或自由分裂的方法。

Description

限制穿过黏液的合成粘合剂
相关申请的交叉引用
本专利申请要求于2018年9月21日提交的美国临时专利申请第62/734,771号(名称为“SYNTHETIC BINDING AGENTS FOR MUCOSAL TRAPPING(用于黏膜捕获的合成粘合剂)”)的优先权，通过引用以其整体并入本文。
通过引用并入
本说明书中提到的所有出版物和专利申请都通过引用以其整体并入本文，其程度如同每个单独的出版物或专利申请被具体地且单独地指出通过引用并入。
关于联邦资助研究的声明
本发明是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的批准号R56HD095629和U54HD096957的政府支持下完成的。政府对本发明享有一定的权利。
对序列表的引用
本申请包括序列表。电子格式的序列表随该实用申请一起提交。
领域
本公开总体上涉及用于增强靶标的凝集、促进对靶标的锁链式捕获(enchaining)和/或靶标的黏液捕获(muco-trapping)以防止受孕(例如，用于避孕)和/或预防或治疗感染(包括病毒、细菌和/或真菌感染)的方法和组合物。
背景
黏膜屏障作为防止外源物质进入机体的屏障具有重要的潜在保护作用。黏膜屏障可通过局部免疫被进一步增强，这种局部免疫允许在肠、泌尿生殖道和呼吸系统的黏膜(即，与外部环境接触的表面)发生稳健的免疫系统应答。黏膜免疫系统可提供针对病原体的保护，但保持对非有害共生微生物和良性环境物质的耐受。由于黏膜是宿主与其环境之间的主要接触点，因此此处存在大量次级淋巴组织。黏膜相关淋巴组织或MALT提供了黏膜免疫应答的关键要素。黏膜免疫系统提供了三个主要功能：作为机体防御抗原和感染的第一道防线，防止对共生细菌和食物抗原(主要是肠相关淋巴组织中的食物蛋白，所谓的口服耐受性)的全身免疫应答，以及调控对每天遇到的病原体的合适免疫应答。
遗憾的是，黏膜免疫应答可能不足，并且通常难以持续足够时间引发的所需的免疫应答。这通过缺乏针对大多数性传播感染(包括HIV、疱疹、衣原体和淋病)的有效疫苗来例证。因此，已经提出通过直接递送抗体来增强黏液屏障和黏膜免疫系统作为治疗或预防感染的一种方法。参见，例如，US 20150284451，其描述了组合物通过施加可能与黏液相互作用的抗体来预防病原体感染的用途。
尽管一些抗体已经显示出与黏蛋白相互作用以将被抗体包被的不同病原体与黏蛋白粘附交联并由此将它们固定在黏液中(通常称为黏液捕获的一种方法)，但提供具有进一步提高的能力的抗体或抗体构建体将是有益的，该抗体或抗体构建体更有效地防止外源物质(包括病毒和细菌)穿过黏液而到达靶细胞。此外，通过阻断或限制精子进入雌性生殖道内的卵子，这种改进的构建体可以有益地用作避孕药物。除了将外源实体交联至黏蛋白之外，还可以通过限制外源实体有效穿过过黏液的方式共同提高对外源实体的凝集和/或锁链式捕获，从而进一步增强抗体的效力。
在美国，几乎一半的妊娠是意外的，这凸显了对其他避孕选择的迫切需求。非激素类避孕药物将是特别有用的。
本文描述了用于增强靶标的凝集、锁链式捕获和/或黏液捕获，即减少靶标实体(包括病原体和精子)可能穿过黏液的比例的方法和组合物(包括工程化/合成粘合剂的组合物)。
发明内容
总体上，本文描述了用于增强靶标的凝集和/或黏液捕获的合成粘合剂，以及使用这些合成粘合剂中的任一种来增强靶标凝集和/或黏液捕获的方法。靶标通常具有一个或多个表位，并且可以是病毒、细菌、真菌、精子或寄生虫。本文所述的合成粘合剂是多聚化的，具有多个表位结合区。所有这些表位结合区都可以是免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)区或片段，并且可以包括具有Fab和Fc结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)的核心。所有Fab片段/结构域(包括核心人源化IgG的那些)可针对相同表位以识别异物(foreignbody)。因此，本文所述的用于增强凝集和/或黏液捕获的合成粘合剂可包括与一个或多个额外的Fab结构域连接的人或人源化IgG，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和亲本IgGFab结构域均以高亲和力特异性结合靶标的表位，并且可以将靶标在黏液中的运动性降低至低于相对于靶标在黏液中的天然运动性的约50％。合成粘合剂可以是重组的(例如，工程化的)抗体。本文所述的任何合成粘合剂可被进一步改造(或选择)以在黏蛋白结合至靶标后增强黏蛋白交联，否则靶标可相对自由地扩散通过黏液(例如，对黏蛋白具有低亲和力)。如本文所用，术语“天然运动性(native mobility)”是指在不存在合成粘合剂或抗体的情况下，靶标(例如精子、病毒、细菌等)在相同环境(例如黏液、盐水等)中的运动性。
本文还描述了这样的方法和组合物(包括工程化/合成粘合剂的组合物)，其能够通过将经历细胞分裂的病原体更有效地丛聚在一起而提供杀菌和/或杀微生物作用，这促成了细菌和/或其他病原体的链状物，并且可能抑制复制、触发细胞死亡，例如，形成聚集体(在一些变化形式中包括多病原体聚集体)和/或通过凝集或锁链式生长(enchainedgrowth)而防止感染传播。
特别地，本文描述了被构造为可用作避孕药物的重组抗体的合成粘合剂。避孕用合成粘合剂在本文中可称为人避孕药物(HCA)，但是这些方法也可用于非人类(例如，动物)的避孕。例如，本文描述了避孕方法和HCA组合物，包括可以阻断精子穿过黏液的重组工程化抗体(Ab)。黏液中Ab的主要效应功能是阻止外源实体如病毒和高能动细菌(highlymotile bacteria)的前进运动(forward motion)，并阻止它们到达靶细胞。该功能可以以两种方式实现。第一，当外源实体的浓度高到使异物频繁碰撞时，Ab可以将两个或更多个异物交联在一起，这不仅导致流体动力学直径的增加，而且导致对游动物体的净前进运动(net forward motion)的有效中和。该过程通常称为凝集(agglutination)。第二，当外源实体的浓度适度使得异物之间的碰撞相对不频繁时，Ab可以经由多个Fc-黏蛋白键将异物直接交联至黏液中存在的黏蛋白基质而固定。该过程在本文中称为黏蛋白交联(mucin-crosslinking)或黏液捕获(muco-trapping)，至今仍未得到广泛认可，因为各Ab分子与黏蛋白之间的亲和力长久以来被认为太弱而无法有效地将个体异物结合至黏蛋白。然而，被调整为对黏蛋白具有弱亲和力的经阴道给药的抗原特异性IgG可通过在病毒与黏蛋白网之间形成多个弱粘合键(adhesive bond)(类似于具有单个弱钩的
Figure BDA0003076814020000041
贴剂)而捕获黏液中的病毒。最后，对于能够独立分裂的异物(例如细菌、真菌等)，细菌的聚集体可以通过将分裂细菌的子细胞与母细胞连锁在一起，即链锁式生长(enchained growth)而形成。最终得到异物的团块(类似于凝集形成的物质)，而不需要独立和独特的异物相互碰撞。
在雌性生殖道中，精子的浓度变化很大，紧随射精的精液中精子浓度最高，而在越远的部位(例如子宫颈管)精子浓度越低。
本文所述的各种HCA构建体被配置为通过阻止精子穿过黏液并防止精子到达卵子来起作用，并且因此可以利用凝集和黏液捕获机制。诸如sIgA和IgM的多价Ig是比IgG更有效的凝集剂(IgM的凝集效力比IgG强约1000倍)。遗憾的是，IgM或sIgA的大规模生产仍面临巨大挑战，而且IgM和sIgA都受限于稳定性问题。IgG代表正在临床开发的Ab的主要同种型，并且在人类中具有出色的安全性跟踪记录。因此，从转化性研发的角度来看，IgG代表了开发更有效的HCA的最合逻辑的平台。更大的效力不仅转化为更低的HCA的所需剂量，而且使基于HCA避孕的潜在有效性最大化。
到目前为止，还没有开发出多聚Ab构建体来创建更有效的HCA。本文描述了工程化的多聚体Ab，其可以通过更有效地使精子凝集而从根本上改善了当前基于单体IgG1的HCA，从而在阻断穿过黏液方面实现更大的效力。
例如，用于增强具有表位的靶标的凝集和/或黏液捕获的合成粘合剂可以包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合靶标的表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合靶标，并将靶标在黏液中的运动性降低至低于相对于其在黏液(或在一些变化形式中，是在水中)中的天然运动性的约50％。黏液运动性的降低可能是由于合成粘合剂(构建体)的凝集增强，和/或由于可分裂的靶标的锁链式捕获增强。在本文所述的任何变化形式中，所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域可以结合相同靶标(例如，病原体)上的不同表位。
可以包括任何数量(优选偶数)的额外的Fab结构域。例如，一个或多个额外的Fab结构域可以包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
在一些变化形式中，合成粘合剂是避孕用合成粘合剂(例如，避孕用抗体)，并且靶标是精子，并且所述一个或多个Fab结构域和IgG Fab结构域都特异性地结合精子上的重复聚-N-乙酰基乳糖胺基结构，即SEQ ID:1的N-连接的糖基化形式(例如，包括GQNDTSQTSSPS的氨基酸序列)，其中聚糖是聚-N-乙酰基乳糖胺。该靶标在本文中称为CD52g。
所述额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)(例如，如SEQID NO:4的HC CDR序列)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)(例如，如SEQ ID NO:7的LC CDR序列)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列。在一些变化形式中，合成粘合剂的至少一个额外的Fab结构域与IgG的一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接；可替代地或另外地，该至少一个额外的Fab结构域可与IgG的Fc区连接。IgG可包含至少一个Fc区，该Fc区是天然存在的序列。如下所述，在一些变化形式中，Fc序列也可被修饰(例如，被修饰为延长全身循环并减少与其他免疫细胞的相互作用)。
虽然所述额外的Fab结构域的氨基酸序列不必彼此相同或与IgG Fab结构域相同，但是它们都可以以大致相同的亲和力结合相同的抗原。本领域技术人员可以应用已知的方法改变序列，同时基本上保留全部结合亲和力。例如，可以进行保守氨基酸取代(例如，因较小的物理化学差距而不同的两个氨基酸之间的交换)。例如，在本文所述的任何变化形式中，所述额外的Fab结构域可包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与IgG Fab结构域的氨基酸序列100％-75％(例如，100％-80％、100％-85％、100％-90％、100％-95％等)相同的氨基酸序列(例如，对于CD52g合成结合肽，其具有与SEQID NO:4的氨基酸序列例如，如SEQ ID NO:4的HC CDR序列100％-75％(例如，100％-80％、100％-85％、100％-90％、100％-95％等)相同的氨基酸序列，)；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，该可变区具有与IgG Fab结构域轻链VL的氨基酸序列100％-75％(例如，100％-80％、100％-85％、100％-90％、100％-95％等)相同的氨基酸序列(例如，对于CD52g合成结合肽，其具有与SEQ ID NO:7的氨基酸序列例如，如SEQ ID NO:7的LC CDR序列100％-75％(例如，100％-80％、100％-85％、100％-90％、100％-95％等)相同的氨基酸序列)。
在一些变化形式中，一个或多个额外的Fab结构域可经由柔性接头(flexiblelinker)连接至IgG，该柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为2-15(例如，2-14、2-13、2-12、2-11、2-10、2-9、2-8、3-15、3-14、3-13、3-12、3-11、3-10、3-9、3-8等)。可以使用不限于氨基酸/肽接头的其他接头，例如非氨基酸聚合物如多核苷酸接头和其他合成接头。通常，接头不需要是相同的。接头可以是一组甘氨酸丝氨酸接头(用于连接一个Fab)，但另一组接头使用例如(EAAAK)3，和/或又另一组接头使用(Ala-Pro)n(10–34aa)接头。
本文还描述了编码本文所述的任何合成粘合剂的分离的核酸分子。本文还描述了包含这些核酸分子中的任一个的载体和/或用该核酸分子转化或转染的分离的宿主细胞或非人生物体。本文还描述了包含任一种合成粘合剂和药学上可接受的载体的组合物。
虽然本文描述的许多变化具体涉及用于避孕的组合物(例如，合成粘合剂)和方法，但是应当理解，这些组合物和方法中的任一种可以针对治疗或预防由病原体(例如，病毒、细菌、真菌等)引起的感染。
例如，本文描述了增强对具有表位的靶标(例如，精子、病毒、细菌、真菌等)的凝集和/或黏液捕获的方法，该方法包括：向患者施用合成粘合剂，该合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合靶标的表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合靶标，并增强靶标在患者黏液中的凝集和/或黏液捕获，以将靶标的运动性降低至低于其天然运动性(例如相对于其在黏液(或在一些变化形式中，是在水中)的天然运动性)的约50％(例如，低于其天然运动性的约40％、30％、20％、10％等)。在一些变化形式中，与对照中进行性运动精子的比例相比，本文所述的合成粘合剂将进行性运动精子的百分比降低了例如>95％(90％或以上、85％或以上、80％或以上、75％或以上、70％或以上、65％或以上、60％或以上等)。例如，进行性运动精子群体减少了>50％。
如上所述，可以包括任何数量(优选偶数)的额外Fab结构域。例如，所述一个或多个额外的Fab结构域可以包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
特别地，靶标可以是精子，并且所述一个或多个Fab结构域和所述IgG Fab结构域都可特异性结合CD52g的表位。精子的运动性(例如，相对于其在黏液中的天然运动性)减慢了至少50％，例如，小于天然运动性的约40％、30％、20％或10％。
通常，施用包括经阴道向患者施用。在一些变化形式中(例如针对呼吸系统或其他感染或传染途径)中，施用可包括局部施用，例如但不限于经由吸入(例如气雾剂)、口服、滴眼剂、灌洗剂等施用。在这些变化形式中的任何一种中，施用可包括对患者进行全身施用，包括用于黏膜(例如阴道的、呼吸系统的、胃肠道的黏膜)应用的全身递送。
在一些变化形式中，施用包括通过阴道内环(IVR)或阴道膜递送。在一些变化形式中，施用包括使用雾化器递送至肺黏膜。
可以施用任何合适量的合成粘合剂。例如，施用可以包括递送0.01mg/天至100mg/天的合成粘合剂。例如，当使用避孕用合成粘合剂时，施用可包括施用足以使靶标凝集以增强限制精子穿过黏液的整体能力的量。
在一些变化形式中，本文描述的合成粘合剂是用于抑制精子通过黏液的运动性的合成粘合剂。例如，用于抑制精子通过黏液的运动性的合成粘合剂可以包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合CD52g的表位，使得合成粘合剂将精子在黏液中的运动性降低至低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％和/或将进行性运动精子的比例降低50％。在一些变化形式中，所述一个或多个额外的Fab结构域可以包含例如2、4、6或8个额外的Fab结构域。CD52g的表位可包含SEQ ID NO:1的N-连接的糖基化形式。
在本文所述的任一种变化形式中，所述额外的Fab结构域可各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列。
所述一个或多个额外的Fab结构域可以与IgG的一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接。例如，至少一个额外的Fab结构域可以与IgG的Fc区连接。IgG可包含为天然存在的序列的至少一个Fc区。
一个或多个额外的Fab结构域可经由柔性接头与IgG连接，该柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为3-8。
本文还描述了编码合成粘合剂的分离的核酸分子，和/或包含相应核酸分子的载体，和/或用所述核酸分子转化或转染的分离的宿主细胞或非人生物体。本文所述的任何合成粘合剂可以是包含所述合成粘合剂和药学上可接受的载体的组合物的一部分。
任何合适的递送装置可与本文所述的组合物和/或合成粘合剂一起使用。例如，可以使用阴道内环(IVR)或阴道膜。
本文描述了在雌性受试者中提供避孕的方法。这些方法可以包括以有效提供避孕的量向受试者的生殖道黏膜施用任何一种合成粘合剂(且特别是结合精子选择性标志物的那些，包括本文所述的CD52g)。例如，本文描述了抑制精子在雌性受试者的生殖道黏液中运动性的方法，其包括使(例如，在雌性生殖道中的)黏液与有效抑制黏液中存在的至少80％精子的运动性的量的这些合成粘合剂(包括经由递送装置)中的任何一种接触。在一些变化形式中，精子的运动性相对于其在黏液中的正常或天然运动性被减慢至少50％和/或将进行性运动精子的比例降低了50％。合成粘合剂或组合物可以经由阴道施用(例如，使用阴道内环(IVR)递送；可替代地或另外地，合成粘合剂或组合物可以通过全身施用来递送。IVR可被配置为释放有效量达至少15天。在一些变化形式中，组合物可以在膜中递送，该膜在阴道内溶解，从而释放合成粘合剂。
通常，Fab片段可位于核心IgG的N末端或C末端。例如，额外的Fab结构域可以插入N末端(即延伸另一个Fab臂)或C末端(即位于Fc结构域之后)。在一些变化形式中，合成粘合剂可在人或人源化IgG之前和/或之后包含至少两个额外的Fab结构域(在本文中也称为Fab片段)。特别地，用于增强对具有表位(包括精子特有的表位并因此有效捕获精子)的靶标的凝集、锁链式捕获和/或黏液捕获的合成粘合剂可以包括具有一对Fab结构域(和一对Fc结构域)的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与四个额外的Fab结构域连接，并且所述IgG Fab结构域和所述额外的Fab结构域均特异性结合靶标的表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合靶标并将靶标在黏液中的运动性降低至低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％。在本实例中，合成粘合剂在核心IgG的两侧都包括额外的Fab(例如，2个位于N末端，2个位于C末端，分子上总共6个Fab)。
在被构造为避孕药物的变化形式中，粘合剂的效力可部分地由能够有效地使精子凝集并防止其自由游动(即，保持为进行性运动的精子)的合成粘合剂的最小浓度来确定。总体上，已经发现具有6个或更多个总Fab片段的合成粘合剂具有比单独的IgG(包括被糖基化以增强黏膜结合的IgG)更好数量级的效力(例如凝集效力)。具体而言，许多构造为本文所述的避孕药物的合成粘合剂已经显示出在比天然IgG低10倍的粘合剂浓度下将进行性运动精子减少到与天然IgG相似的程度(例如与未处理的对照相比减少95％)。粘合剂的效力也可部分地通过增强的“黏液捕获”来测定，所述增强的“黏液捕获”是指与天然IgG相比，合成粘合剂使更大比例的精子与黏蛋白交联，或在更低的粘合剂浓度下使与IgG相似比例的精子与粘蛋白交联。
形成本文所述的合成粘合剂的核心的人或人源化IgG可包括非天然Fc区(例如，经修饰以增加体内稳定性/半衰期的Fc区、经修饰以降低免疫反应性的Fc区等)。例如，合成粘合剂的IgG部分的Fc区可以被修饰以包括一个或多个特定突变，籍此改变特定免疫功能。例如，Fc区可具有增强的FcRn亲和力以延长循环动力学。例如，人IgG(例如，IgG1)中的T250Q/M428L突变可提高与FcRn的结合并提高半衰期，和/或M252Y/S254T/T256E+H433K/N434F突变可提高与FcRn的结合并提高半衰期。在一些变化形式中，合成粘合剂包括具有降低的FcR亲和力的修饰的Fc区，其可以帮助确保Ab不激发免疫系统产生针对精子的抗体。例如，可在人IgG(例如，IgG1)中包括降低与FcR(例如，FcγR)结合的一个或多个突变，例如E233P/L234V/L235A/G236+A327G/A330S/P331S、L234A/L235A/P329G和/或K322A。
例如，如上所述，增强对具有表位的靶标的凝集和/或黏液捕获的方法可以包括：向受试者施用合成粘合剂，该合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合靶标的表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合靶标并增强受试者的黏液限制靶标穿过黏液的穿透力的能力，如通过将靶标的运动性降低至低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％，或将活动靶标的比例降低至低于相对于未处理的对照的50％所反映的。所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
在一些变化形式中，并且特别是避孕方法中，靶标可以是精子。在一些变化形式中，抗原是CD52g。与精子在黏液中的天然运动性相比，精子在黏液中的运动性可被减慢至少50％。
在一些变化形式中，靶标可以是病原体，例如，一个或多个Fab结构域和IgG Fab结构域都可特异性结合病原体。例如，病原体可以是以下中的一种(或多种)：鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)；脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)；洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)；艰难梭菌(Clostridium difficile)；索氏梭菌(Clostridiumsordellii)；耐碳青霉烯肠杆菌科(Enterobacteriaceae)；粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)；大肠杆菌(Escherichia coli)；甲型肝炎；乙型肝炎；丙型肝炎；人类免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2(HIV，AIDS)；流感；肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia)；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；摩氏摩根菌(Morganella morganii)；脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus)；诺如病毒；铜绿假单胞菌(Psuedomonasaeruginosa)；金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)；结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)；耐万古霉素金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；耐万古霉素肠球菌(Enterococci；)；淋病奈瑟球菌(Neisseria gonorrhoeae)(淋病)；沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)(衣原体，性病淋巴肉芽肿)；梅毒螺旋体(Treponema pallidum)(梅毒)；杜克雷嗜血杆菌(Haemophilus ducreyi)(软性下疳)；肉芽肿克雷伯氏菌(Klebsiella granulomatis)或肉芽肿荚膜杆菌(Calymmatobacterium granulomatis)(杜诺凡病)、生殖支原体(Mycoplasmagenitalium)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum)(支原体)；HTLV-1(1型嗜T-淋巴细胞病毒)；1型和2型单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)；EB(Epstein-Barr)病毒；巨细胞病毒；人疱疹病毒6；水痘-带状疱疹病毒；人乳头瘤病毒(生殖器疣)；甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(病毒性肝炎)；传染性软疣病毒(MCV)；阴道毛滴虫(Trichomona vaginalis)(滴虫病)；以及酵母菌，例如白色念珠菌(Candida albicans)(外阴阴道念珠菌病)。在一些变化形式中，病原体包括真菌，例如曲霉属(Aspergillus)。
施用可以包括通过任何合适的途径或多于一种途径施用。例如，施用可以包括经阴道向受试者施用(例如，通过阴道内环IVR施用)。施用可以包括向受试者全身施用。施用可以包括作为阴道膜向受试者施用。施用可以包括从雾化器施用。施用可以包括通过吸入施用。施用可以包括滴眼剂。施用可以包括口服胶囊或丸剂。施用可以包括漱口剂。在一些变化形式中，施用包括递送0.01mg/天至100mg/天的合成粘合剂。施用可以包括以足以使靶标凝集或形成靶标的锁链式捕获同时维持或增强黏液捕获的量施用，其总体净效果是降低靶标通过黏液的穿透力和/或降低靶标的生长或存在。
如上所述，IgG Fab结构域可具有与一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列。例如，IgG结构域可具有100％至75％、80％、85％、90％、95％等(同一性)相同的氨基酸序列。通常，不管其序列如何，IgG Fab和额外的Fab结构域以大致相同的亲和力识别相同的抗原。
例如，本文描述了通过精子凝集和/或黏液捕获来抑制受精和/或受孕的方法，该方法可包括：向受试者施用合成粘合剂，该合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合精子的表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合精子并且增强精子在黏液中的凝集和/或黏液捕获。净效应是进行性运动精子比例的降低，和/或活动精子(motile sperm)的运动性降低。如上所述，所述一个或多个额外的Fab结构域可以包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
与精子在黏液中的天然运动性相比，精子在黏液中的运动性可被减慢至少50％。在一些变化形式中，靶标(例如，精子、病原体等)的运动性与靶标的天然运动性相比可被减慢至少40％、与天然运动性相比减慢至少30％、与天然运动性相比减慢至少20％、与天然运动性相比减慢至少15％等。
在一些变化形式中，本文所述的合成粘合剂减少所有精子中进行性运动精子的比例，例如与对照相比，进行性运动精子的比例减少>95％或(90％或以上、85％或以上、80％或以上、75％或以上、70％或以上、65％或以上、60％或以上等)。例如，进行性运动精子群体减少>50％。
如上所述，可以使用任何合适的施用途径。例如，施用可以包括经由以下的一种或多种途径向受试者施用：经阴道地(例如，通过阴道内环)、局部地、全身地、作为阴道膜、通过雾化器。施用可包括以足以使靶标凝集和/或被黏液捕获的量施用，其总体效果是减少了靶标穿过黏液。
本文还描述了治疗或预防病原体感染的方法，该方法包括向受试者施用合成粘合剂，该合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合病原体的单一表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合病原体并增强靶标的凝集，诱导靶标的锁链式生长和/或靶标在受试者的黏液中被黏液捕获。所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。病原体在黏液中的运动性与病原体在黏液中的天然运动性相比减慢了至少10％(至少50％、至少40％、至少30％、至少20％、至少15％等)。
病原体可以是以下一种或多种：流感(包括A型流感、B型流感和C型流感)；严重急性呼吸综合征(SARS)；呼吸道合胞病毒(RSV)；副流感病毒；腺病毒；人鼻病毒；冠状病毒；和诺如病毒。病原体可以是沙门氏菌属(Salmonella)和大肠杆菌(Escherichia coli)中的一种或多种。所述病原体可以是以下的一种或多种：淋病奈瑟氏菌(淋病)；沙眼衣原体(衣原体，性病淋巴肉芽肿)；梅毒螺旋体(梅毒)；杜克雷嗜血杆菌(软性下疳)；肉芽肿克雷伯氏菌(Klebsiella granulomatis)或肉芽肿荚膜杆菌(杜诺凡病)、生殖支原体、解脲支原体(支原体)；人类免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2(HIV，AIDS)；HTLV-1(1型嗜T-淋巴细胞病毒)；1型和2型单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)；EB病毒；巨细胞病毒；人疱疹病毒6；水痘-带状疱疹病毒；人乳头瘤病毒(生殖器疣)；甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(病毒性肝炎)；传染性软疣病毒(MCV)；阴道毛滴虫(滴虫病)；以及酵母菌，例如白色念珠菌(外阴阴道念珠菌病)。
施用可以是本文所述的的递送类型的任一种，包括但不限于：全身施用、口服、肌肉内注射、血管内注射、皮下注射、肠胃外施用、吸入(例如，通过雾化器)、局部施用等。施用包括递送0.01mg/天至100mg/天的合成粘合剂。施用可包括以足以使病原体凝集和/或保持或进一步增强病原体的黏液捕获的量施用。在一些变化形式中，施用可包括以足以引起锁链式生长(即，将来自相同母细菌的分裂细菌连接在一起形成长链)的量施用，其具有的效果是产生太大而不能穿过黏液的大团块。在一些变化形式中，施用可包括以足以引起锁链式生长(即，将来自相同母亲细菌的分裂细菌连接在一起形成长链)的量施用，其具有的效果是产生限制其在身体中的散播和/或限制其生长速率的大团块。
如上所述，IgG Fab结构域可具有与一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列。
用于增强具有表位的靶标的凝集、锁链式生长和/或黏液捕获的本文所述的任何合成粘合剂可以包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG通过接头(例如，氨基酸/肽接头)与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均可特异性结合靶标的表位，使得合成粘合剂以高亲和力结合靶标并降低靶标在黏液中的运动性(例如，减少到低于相对于其在黏液中的天然运动性的约x％，例如约15％、20％、30％、40％、50％等)。所述一个或多个额外的Fab结构域可包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
靶标可以是精子，并且一个或多个Fab结构域和IgG Fab结构域都可特异性结合CD52g的表位(例如，精子上的重复的聚-N-乙酰基乳糖胺基结构，即SEQ ID:1的N-连接的糖基化形式)。如上所述，靶向CD52g的合成粘合剂的额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，，其具有与SEQ ID NO:4的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:7的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
例如，用于抑制精子通过黏液的运动性的合成粘合剂可以包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgGFab结构域均特异性结合CD52g的表位，使得合成粘合剂将精子在黏液中的运动性降低至低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％。所述一个或多个额外的Fab结构域可包括2、4、6或8个额外的Fab结构域。CD52g的表位可以是重复的聚-N-乙酰基乳糖胺基结构，即SEQID NO:1的N-连接糖基化形式。额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:4的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQID NO:7的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
本文还描述了靶向细菌病原体，例如，在一个非限制性实例中是克雷伯氏杆菌(Klebsiella bacillus)的合成粘合剂的特定实例。例如，IgG可以针对克雷伯氏菌属(Klebsiella)的抗原，例如，其实例在SEQ ID NO:39至SEQ ID NO:45中提供，并且额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，，该可变区具有的氨基酸序列与IgG的HC VH区相同或相似(例如，关于SEQ ID NO:39至SEQ IDNO:45、SEQ ID NO:41的实例)；和(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，，其具有的氨基酸序列与IgG的相应氨基酸序列相同或相似(例如，关于SEQ ID NO:39至SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:44的实例)。例如，针对克雷伯氏菌属的抗原的合成粘合剂可以具有额外的Fab结构域，每个额外的Fab结构域包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，，其与SEQ ID NO:41的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:44的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
例如，用于治疗或预防克雷伯氏杆菌病原体感染的合成粘合剂可包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合克雷伯氏杆菌的特有的表位，使得合成粘合剂降低了克雷伯氏杆菌在黏液中的运动性。所述一个或多个额外的Fab结构域可包括2、4、6或8个额外的Fab结构域。额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，，其具有与SEQ ID NO:41的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:44的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
靶向细菌病原体的合成粘合剂的另一个非限制性实例是靶向沙门氏杆菌(Salmonella bacillus)的合成粘合剂。该合成粘合剂的IgG部分可针对沙门氏菌属的抗原(如SEQ ID NO:67-73描述的)，并且额外的Fab结构域(针对相同的靶抗原)可以具有与IgG的Fab结构域相似或相同的氨基酸序列。例如，额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有所述IgG的氨基酸序列(例如，SEQ IDNO:69)；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有所述IgG的氨基酸序列(例如，SEQ ID NO:72)。在一些变化形式中，针对沙门氏菌属(Salmonella)的抗原的合成粘合剂包含额外的Fab结构域，其各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)得可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:69的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:72的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
例如，用于治疗或预防沙门氏杆菌病原体感染的合成粘合剂可以包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合沙门氏杆菌特有的表位，使得合成粘合剂降低了沙门氏菌在黏液中的运动性。所述一个或多个额外的Fab结构域可包括2、4、6或8个额外的Fab结构域。额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:69的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:72的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
靶向细菌病原体的合成粘合剂的另一个非限制性实例是靶向淋病奈瑟球菌(Neisseria gonorrhoeae)的合成粘合剂。该合成粘合剂的IgG部分可以针对淋病奈瑟球菌的抗原(例如SEQ ID NO:102-108描述的)，并且额外的Fab结构域(其针对相同的靶抗原)可以具有与IgG的Fab结构域相似或相同的氨基酸序列。例如，额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，该可变区(VH)具有的氨基酸序列与IgG的HC VH(例如，SEQ ID NO:104)相似或相同；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，该可变区(VL)具有的氨基酸序列与IgG的LC VL的氨基酸序列(例如，SEQ ID NO:107)相似或相同。例如，针对淋病奈瑟球菌的合成粘合剂可以包括针对淋病奈瑟球菌的抗原的IgG和额外的Fab结构域，每个额外的Fab结构域包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与IgG的氨基酸序列(SEQ ID NO:104)100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与IgG的氨基酸序列(SEQ ID NO:107)100％至80％相同的氨基酸序列。
例如，用于治疗或预防淋病奈瑟球菌感染的合成粘合剂可包括：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgGFab结构域均特异性结合淋病奈瑟球菌特有的表位，使得合成粘合剂降低了淋病奈瑟氏菌在黏液中的运动性。所述一个或多个额外的Fab结构域可包括2、4、6或8个额外的Fab结构域。额外的Fab结构域可以各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:104的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:107的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
本文所述的任何合成粘合剂可包含至少一个额外的Fab结构域，其与IgG的一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接；可替代地或另外地，本文所述的任何合成粘合剂可包括连接至IgG的Fc区的至少一个额外Fab结构域。IgG可包含为天然存在的序列的至少一个Fc区。IgG可包含至少一个Fc区，所述Fc区包含增强或降低与Fc受体的结合的一个或多个突变。
如此处所述，一个或多个额外的Fab结构域可以经由接头与IgG连接，该接头例如为包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列的柔性肽接头，其中n为3-8。
通常，IgG Fab结构域可具有与一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列，同时仍以相同(或几乎相等的)亲和力识别相同的抗原。
本文还描述了编码这些合成粘合剂中的任一种的分离的核酸分子，和/或包含此类分离的核酸分子的载体。在一些变化形式中，编码额外的IgG的核苷酸序列(例如，HV和/或LC)可以不同于编码具有相应结合亲和力的IgG区的核苷酸序列；得到的氨基酸序列可以是相同的或几乎相同的(例如，具有75％或更高的同源性、80％或更高的同源性、85％或更高的同源性、90％或更高的同源性、95％或更高的同源性等，包括相应的置换)。本文还描述了用这些核酸分子转化或转染的分离的宿主细胞或非人生物体。
本文还描述了具有这些合成粘合剂中的任一种和药学上可接受的载体的组合物。
附图说明
本发明的新颖特征在所附权利要求书中具体阐述。通过参考阐述说明性实施方案(说明性实施方案中利用了本发明的原理)的以下详述和附图，将获得对本发明的特征和优点的更好理解，在附图中：
图1A是针对一个表位的mAb的示意性实例，该mAb可以形成具有增强的凝集和/或黏液捕获的合成粘合剂(例如，重组mAb)的核心。在一些变化形式中，核心抗体针对与精子，且特别是人精子相关的抗原。可替代地，可以使用其他表位，包括病毒或细菌表位。
图1B-1F示出了使用图1A所示的核心的合成的、工程化的构建体的实例，这些构建体针对靶标的表位，具有增强的凝集和/或黏液捕获。图1B是Fab-IgG变化形式的实例(例如，双重Fab结构域与核心IgG的氨基末端连接)。图1C是IgG-Fab变化形式的实例(例如，双重Fab结构域与核心IgG的羧基末端连接)。图1D是Fab-IgG-Fab变化形式的实例(例如，双重Fab结构域与核心IgG的羧基末端和氨基末端都连接)。图1E是Fab-IgG-Fab-Fab变化形式的实例(例如，双重Fab结构域与核心IgG的羧基末端和氨基末端都连接)。图1F是如本文所述的合成粘合剂的Fab-Fab-IgG-Fab-Fab变化形式的实例(例如，10聚体，其具有4对额外的Fab结构域，两对连接到核心IgG的羧基末端并且两对连接到核心IgG的氨基末端)。
图1G是进一步示出图1A-1E中所示的核心IgG和合成构建体的结构特性的图表。
图2A-2B示意性地示出了黏液捕获。在本实例中，靶标是病毒；其他靶标可包括细菌和精子。在图2A中，该示意图显示了靶标(例如病毒)如何容易地在天然黏液中扩散(在没有任何病毒特异性Ab的情况下)。图2B显示了抗病毒Ab，且特别是仅微弱(处于未结合状态)与黏蛋白相互作用并因此通过黏液自由扩散的抗体如何可通过粘附性相互作用捕获黏液中的靶标。箭头指示将在任何给定时间与黏蛋白相互作用的一小部分游离(未结合病毒的)Ab。
图3A显示了人精子的凝集。
图3B示出了黏液(例如子宫颈阴道黏液(CVM)和子宫颈内黏液(CM))中精子的捕获。
图4A示出了对具有与未修饰的IgG相比增强的凝集和/或黏液捕获效力的一个示例性合成粘合剂(称为MM-006)的SDS-PAGE分析。在本实例中，合成粘合剂被构造为Fab-IgG-Fab构建体，并与HCA(例如IgG)进行比较。
图4B显示了对来自图4A的MM-006的颜色匹配的SEC/MALS分析。SEC曲线(实线曲线，右y轴)显示了均一的表达谱，且MALS数据(较粗的线，左y轴)确认了期望的分子量(MW)。
图5A和图5B示出了图4A-4B的构建体(MM-006)降低精子的移动性/运动性中的应用。图5A是精子暴露于MM-006后30秒的明场图像。图5B显示了MM-006和HCA相对于PBS的精子凝集效力。*表示p<0.05；**p<0.01；***p<0.001。
图6A-6B示出了用于递送构建体(例如，具有多个Fab重复的避孕用合成粘合剂)的装置的实例。图6A示出了环的透明视图，其中四个胶囊插入到环腔中。图6B示出了缓释胶囊的分解图和组装图：包被的抗体小球(中心区域，上图)，封闭端胶囊片(胶囊的右端)，和具有释放窗口的胶囊帽(胶囊的左端)。
图6C显示了在使用不同的缓释胶囊制剂的至少28天内人IgG的每日(上图)和累积(下图)释放。
图7显示了银染凝胶，其显示从胶囊回收的人IgG即使在暴露于人CVM(每5天更换一次以维持降解性环境)多达4周之后仍保持完整。纯IgG条带和PBS被示为对照；所有孵育均在37℃。每个条带代表从单个胶囊中回收的IgG。
图8A-8B显示了在存在本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂(构造为HCA)之一的情况下的精子凝集。图8A显示了具有圆形细胞(由箭头指示)的凝集的精子的光学显微图像。图8B是同一视场的荧光图像；将本实例中的构建体(HCA)与Dylight633(红色)缀合并标记所有精子的全长。如通过共同标记所示的，CMFDA(Live CellTracker green)标记的精液白细胞也对HCA呈阳性(白色箭头)。
图9是示出具有多个Fab重复的(例如，Fab-IgG下图)和scFv-IgG(上图)构建体的示例性合成粘合剂的差示扫描量热法的图。由于缺乏CH1/CL结构域，scFv构建体在比具有多个Fab重复(Fab-IgG)的合成粘合剂低得多的温度下显示解折叠(unfolding)。
图10显示了单独的核心(IgG，下图)、scFv-IgG构建体(中图)和具有多个Fab重复的示例性合成粘合剂(Fab-IgG，上图)在单步蛋白A纯化后的分析尺寸排阻层析图。IgG和Fab-IgG构建体均在其预期分子量处显示单个尖峰。scFv-IgG构建体显示了高分子量聚集体的形成。
图11A显示了具有多个Fab重复的多聚体合成粘合剂的SDS-PAGE分析。在本实例中，多聚体构建体是具有多个Fab重复的HCA(例如，避孕药物)合成粘合剂，其中所有Fab都针对CD52g的相同表位(例如，全部共享相同的靶向序列)。
图11B是对来自图11A的不同多聚体HCA构建体的颜色匹配的SEC/MALS分析。各构建体的SEC曲线(实线曲线，右y轴)显示均一的表达谱，而MALS数据(虚线，左y轴)确认了各构建体的期望分子量(也与核心IgG进行了比较)。
图12A显示了全精子ELISA，验证了具有多个Fab重复(构建为HCA构建体)的不同多聚体合成粘合剂具有结合精子的功能性Fab。
图12B和12C显示了用PBS处理1分钟后的精子的明场图像(图12B)，或用具有多个Fab重复的多聚体合成粘合剂(例如，构造为Fab-IgG-Fab HCA构建体)处理30秒后的精子的明场图像)(图12C)。
图13显示了Fab-IgG与未处理的CVM中未包被的纳米颗粒(PS-COOH)相比的黏液捕获效力，通过无Ab的人CVM、具有对照IgG(Ctrl IgG)的人CVM或具有多个Fab重复的多聚体合成粘合剂(例如，抗PEG Fab-IgG构建体)的人CVM中PEG化纳米颗粒(PS-PEG)的有效扩散率(Deff)的总体几何平均值来反映。绘制不同样品的数据(用不同色圈表示)，平均值用实线表示。*表示统计学上显著的差异(p<0.05)。
图14A和14B显示了针对人精子表位CD52g的核心IgG的重链(图14A；将SEQ ID NO:3的VH部分与种系序列的VH部分进行比较)和轻链(图14B；将SEQ ID NO:7的VL部分与种系序列的VL部分进行比较)序列的部分之间的氨基酸序列与种系序列(例如天然IgG)的比较。
图15A-15D示出了多聚体抗精子IgG抗体的产生和表征的一个实例。图15A示意性地示出了抗精子IgG、Fab、Fc、Fab-IgG和IgG-Fab的实例。图15B是显示IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的非还原性凝胶。图15C显示了在Expi 293细胞中表达并通过蛋白A/G层析纯化后比较IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的还原SDS-PAGE分析。图15D是通过分析型SEC-MALS分析示出纯化的多聚体抗体(IgG与Fab-IgG和IgG-Fab相比)的纯度和同质性的图。
图16A-16C示出了对多聚体抗精子IgG抗体的表征。图16A显示了通过SEC-MALS分别测定的IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的摩尔质量与时间的关系。图16B显示了通过nanoDSF通过分别测量蛋白质的固有荧光和背向反射(back-reflection)的变化而确定的解链温度(Tm)和聚集温度(Tagg)的值。图16C是显示评估所示抗体的结合效力的全精子ELISA分析的图。用莫维珠单抗(Motavizumab)(抗RSV IgGl)作为同种型对照。一式三份进行ELISA，并使用3个独特的样本重复三次。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图17A-17B使用纯化的活动精子(10×106个进行性运动精子/mL)示出了亲本IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的精子凝集效力。图17A图示了亲本和多聚体抗精子IgG的精子凝集效力，其通过相对于处理前(pre-treatment)条件定量不同浓度的Ab处理后仍保持进行性运动的精子的百分比来测量。图17B显示了处理后逃脱凝集的进行性运动精子的百分比，将其相对于阴性对照归一化以便进一步比较。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图18A-18B使用纯化的活动精子(10×106个前向运动精子/mL)显示了亲本IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的精子凝集动力学。图18A是显示与未处理的对照相比，达到90％的进行性运动精子凝集所需时间的定量图。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图18B显示了所示抗精子抗体的精子凝集率，其通过定量相对于处理前在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比来指示。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图19使用pH中和的雌性CVM和纯化的活动精子(1×106进行性运动精子/mL)示出了亲本IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的黏液捕获效力。通过对悬浮在Ab处理的(25ug/ml)CVM中的荧光标记的精子进行实时视频显微术，评估所示抗体的黏液捕获效力。在记录的所有视频中使用用标准化精子运动性参数定制的神经网络跟踪器来量化黏液样本中存在的进行性运动精子的百分比。
图20A-20D示出了多聚体抗精子IgG抗体的产生和表征。图20A示意性地示出了抗精子Fab、Fc、IgG、Fab-IgG-Fab(FIF)、Fab-IgG-Fab-Fab(FIFF)和Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(FFIFF)。在本实例中，FIF、FIFF和FFIFF的N-末端和C-末端Fab包含具有VH、VL、CH1和CL的完全完整的抗精子Fab。图20B是显示了未还原的FIF、FIFF和FFIFF的凝胶(与IgG相比)。图20C是所示抗体(IgG、FIF、FIFF和FFIFF)在Expi293细胞中表达并通过蛋白A/G层析纯化后的还原性SDS-Page分析。图20D是通过分析型SEC-MALS分析表明纯化的多聚体抗体的纯度和同质性的图。
图21A-21C示出了对多聚体抗精子IgG抗体的附加表征。图21A分别示出了通过SEC-MALS测定的IgG、FIF、FIFF和FFIFF的摩尔质量与时间的关系。图21B图示了由nanoDSF通过分别测量蛋白质的固有荧光和背向反射(back-reflection)的变化而确定的所示抗体的解链温度(Tm)和聚集温度(Tagg)的值。图21C是显示评估所示抗体的结合效力的全精子ELISA分析的图。用莫维珠单抗(抗RSV IgGl)作为同种型对照。一式三份进行ELISA，并使用3个独特的样本重复三次。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图22A-22D使用纯化的活动精子(10x106前向运动精子/mL)和全精液示出了亲本IgG和多聚体构建体的精子凝集效力。图22A是使用纯化的活动精子(10x106个前向运动精子/mL)显示亲本IgG、FIF、FIFF和FFIFF的精子凝集效力的图，相对于处理前条件定量了进行Ab处理后仍保持进行性运动的精子百分比来确定。图22B显示了使用纯化的活动精子进行Ab处理后逃脱凝集的进行性运动精子的百分比，该百分比被相对于阴性对照归一化以便进一步比较。图22C是使用全精液显示亲本IgG和FFIFF的测量的精子凝集效力的图，其通过相对于处理前条件定量进行Ab处理后保持进行性运动的精子百分比来测量。图22D显示了用全精液进行Ab处理后逃脱凝集的进行性运动精子的百分比，其被相对于阴性对照归一化以便进一步比较。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图23A-23D使用纯化的活动精子(10x106进行性运动精子/mL)和全精液示出了亲本IgG和多聚体构建体的精子凝集动力学。图23A使用纯化的活动精子(10x106个活动精子/mL)示出了亲本IgG、FIF、FIFF和FFIFF的凝集动力学，其通过定量相对于未处理对照，实现90％的进行性运动精子凝集所需的时间来确定。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图23B使用纯化的活动精子(10x106个进行性运动精子/mL)示出了亲本IgG、FIF、FIFF和FFIFF的精子凝集率，其通过相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处的凝集的精子的百分比来确定。图23C使用全精液显示了亲本IgG和FFIFF的凝集动力学，其通过定量相对于未处理的对照实现90％的进行性运动精子凝集所需的时间来确定。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图23D是使用全精液显示亲本IgG和FFIFF的精子凝集率的图，其通过相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处的凝集的精子的百分比来确定。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图24A-24D使用低浓度和高浓度的纯化的活动精子(2x106和50x106进行性精子/mL)显示了亲本IgG和FFIFF的精子凝集动力学。图24A显示了IgG和FFIFF的凝集动力学，其通过定量相对于未处理的对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来确定。用纯化的活动精子(2x106个精子/mL)在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图24B使用纯化的活动精子(2x106个进行性精子/mL)显示了IgG和FFIFF的精子凝集率，其通过相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处的凝集的精子的百分比来确定。图24C使用纯化的活动精子(50x106个进行性精子/mL)显示了IgG和FFIFF的凝集动力学，其通过定量相对于未处理的对照，实现90％的进行性精子凝集所需的时间来确定。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图24D使用纯化的活动精子(50x106个进行性精子/mL)显示了IgG和FFIFF的精子凝集率，其通过相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处的凝集的精子的百分比来确定。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图25是在绵羊研究中使用全精液显示亲本IgG、FIF和FFIFF的精子凝集效力的图。通过将Ab滴入绵羊阴道，然后滴入人精液并模拟性交，体内测量IgG、FIF和FFIFF的凝集效力。立即在绵羊阴道液中评估精子活力。数据代表3项对FIF和FFIFF的独特绵羊研究以及1项对33μg/ml和333μg/ml的IgG的绵羊研究。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图26和27A使用纯化的活动精子(10x106个进行性精子/mL)和全精液示出了亲本IgG和FIF的示例性膜(例如，烟草(Nicotiana)产生的膜)的凝集效力。图26使用纯化的活动精子(10x106进行性运动精子/mL)显示了亲本IgG膜和FIF膜的精子凝集效力，其通过相对于处理前条件定量Ab处理后保持进行性运动的精子的百分比来确定。图27A示出了使用纯化的活动精子进行Ab处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比；数据相对于阴性对照归一化。
图27B使用全精液通过相对于处理前条件定量Ab处理后保持进行性运动的精子的百分比示出了亲本IgG膜和FIF膜的精子凝集效力。
图27C使用全精液显示了Ab处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比，该百分比被相对于阴性对照归一化。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图28A-28D使用纯化的活动精子(10x106进行性运动精子/mL)和全精液显示了亲本IgG和FIF的示例性膜(例如，烟草产生的膜)的凝集动力学。图28A使用纯化的活动精子(10x106个进行性运动精子/mL)通过定量相对于未处理的对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间示出了所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图28B使用纯化的活动精子(10x106个进行性运动精子/mL)通过相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处的凝集的精子的百分比示出了所示抗精子抗体的精子凝集率。图28C是使用全精液，通过定量相对于未处理对照，实现90％的进行性精子凝集所需的时间显示所示抗体的凝集动力学的图。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图28D显示了测量的所示抗精子抗体的精子凝集率(使用全精液相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比)。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图29A-29D使用低浓度和高浓度的纯化活动精子(2x106和50x106前向运动精子/mL)示出了亲本IgG和FIF的示例性膜(例如，烟草产生的膜)的凝集动力学。图29A显示了所示抗体的凝集动力学，其基于使用纯化的活动精子(2x106个进行性运动精子/mL)定量相对于未处理的对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图29B显示了所示抗精子抗体的精子凝集率，其通过使用纯化的活动精子(2x106个进行性运动精子/mL)相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比来确定。图29C通过使用纯化的活动精子(50x106个进行性运动精子/mL)定量相对于未处理的对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间显示了所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。图29D通过使用纯化的活动精子(50x106个进行性运动精子/mL)相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比显示了所示抗精子抗体的精子凝集率。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图30使用纯化的活动精子(20x106进行性运动精子/mL)并用乳酸处理24小时示出了亲本IgG和FIF的示例性膜(例如，烟草产生的膜)在酸性环境中的凝集动力学。通过定量相对于未处理的对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来评估乳酸处理的抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。数据代表2份独特的精子样本。注意：乳酸(LA)处理的抗体用精浆(SP)中和，然后用SP或盐水培养基即MHM稀释。
图31A-31D示出了烟草产生的FIF膜(Fab-IgG-Fab合成粘合剂的膜)和Expi293产生的FFIFF(例如，Fab-Fab-IgG-Fab-Fab)合成粘合剂在雾化后的表征。图31A显示了使用筛网雾化器雾化之前和之后所示抗体的非还原性SDS-Page分析，而图31B显示了使用筛网雾化器雾化之前和之后所示抗体的还原性SDS-Page分析。在图31C和图31D中，使用全精子ELISA分析评估FIF膜(图31A中所示)与FFIFF(图31D)雾化后的结合效力。一式三份进行ELISA，并使用相同的供体样本重复两次。线条表示算术平均值浓度和平均值标准误差。
图32A-32B示出了多聚体抗RSV IgG抗体的产生和表征。图32A显示了在Expi293细胞中表达并通过蛋白A/G层析纯化后针对RSV的多聚IgG(莫维珠单抗作为亲本IgG)的非还原性凝胶和还原性SDS-Page分析。图32B是评估所示抗体的结合效力的RSV ELISA分析。将帕利珠单抗(Synagis/Palivizumab)(抗RSV IgGl)用作阳性对照。一式三份进行ELISA。
具体实施方式
本文所述的方法和组合物(包括用于增强凝集、促进锁链式生长和/或改善黏液捕获的具有多个Fab重复的多聚体合成粘合剂)部分基于以下发现：异物(包括病原体如病毒和细菌)以及精子在与基于多聚体抗体的构建体结合后可以被黏液更强地捕获。这些构建体可以被工程化以通过提高凝集效力、促进病原体的锁链式生长和/或促成黏液捕获来阻止靶标(例如病原体、精子等)穿过黏液，并且可以预防和/或治疗感染和/或提供避孕作用。
下面将更详细地解释本发明。本说明书并不旨在成为可以实施本发明的所有不同方式的详细目录，也不旨在成为可添加到本发明中的所有特征的详细目录。例如，关于一个实施方案说明的特征可并入到其他实施方案中，且关于一个具体实施方案说明的特征可从那个实施方案中删除。此外，根据本公开，本文提出的各种实施方案的不偏离本发明的多种变化和添加对于本领域技术人员将是明显。因此，以下说明旨在例示本发明的一些具体实施方案，而不是穷尽地指定其所有置换、组合和变化。
除非上下文另外指示，否则明确意图本文描述的本发明的各种特征可以任何组合地使用。此外，本发明还设想了，在本发明的一些实施方案中，可以排除或省略本文阐述的任何特征或特征的组合。为了说明，如果本说明书指出复合体包含组分A、B和C，则特别意指A、B或C中的任一个或其组合可以单独地或以任何组合被省略和放弃。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。本文在本发明的说明书中使用的术语仅用于描述具体实施方案的目的，而不旨在限制本发明。
除非另外指明，否则本领域技术人员已知的标准方法可用于生产重组和合成多肽、抗体或其抗原结合片段、操纵核酸序列以及产生转化的细胞。这些技术是本领域技术人员已知的。参见，例如，SAMBROOK等人的“分子克隆：实验室手册”(MOLECULAR CLONING:ALABORATORY MANUAL)第2版(冷泉港，纽约，1989)；F.M.AUSUBEL等人的“分子生物学现行方案”(CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY)(绿色出版商协会公司和约翰威利父子公司(Green Publishing Associates,Inc.and John Wiley&Sons,Inc.)，纽约)。
本文提及的所有出版物、专利申请、专利、核酸序列、氨基酸序列和其他参考文献均通过引用以其整体全文引入。
如在本发明的说明书和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一(a、an)”和“该(the)”旨在也包括复数形式，除非上下文另外清楚地指示。
如本文所用，“和/或”是指并涵盖一个或多个相关所列项目的任一个和所有可能的组合，以及当以备选方式(“或”)解释时缺少组合。
此外，本发明还设想了，在本发明的一些实施方案中，可以排除或省略本文阐述的任何特征或特征的组合。
当涉及可测量值，例如本发明的化合物或剂的量、剂量、时间、温度等时，本文所用的术语“约”意指包括指定量的±10％、±5％、±1％、±0.5％或甚至±0.1％的变化。
除非另外指明，否则本说明书和权利要求书中使用的表示成分的量，性质(例如反应条件)等的所有数字应理解为在所有情况下均由术语“约”修饰。因此，除非有相反指示，否则本说明书和权利要求书中阐述的数值参数是近似值，其可根据本公开的主题寻求获得的期望性质而变化。
如本文所用，范围可表示为从“约”一个特定值和/或至“约”另一特定值。还应当理解，本文公开了许多值，并且每个值除了该值本身之外在本文中也被公开为“约”该特定值。例如，如果公开了值“10”，则也公开了“约10”。还应当理解，还公开了两个特定单元之间的每个单元。例如，如果公开了10和15，则也公开了11、12、13和14。
过渡性措辞“主要由……组成(consisting essentially of)”是指权利要求的范围应解释为涵盖该权利要求中所述的指定材料或步骤，以及不会实质性影响所要求保护的发明的基本特征和新颖特征的那些材料或步骤。
除非另外指明，否则如本文所用的术语“多肽(polypeptide)”涵盖肽和蛋白质两者。
“核酸(nucleic acid)”或“核苷酸序列(nucleotide sequence)”是核苷酸碱基的序列，并且可以是RNA、DNA或DNA-RNA杂交序列(包括天然存在的和非天然存在的核苷酸)，但优选单链或双链DNA序列。
如本文所用，“分离的(isolated)”抗体意指与天然存在的生物体或病毒的至少一些其他组分(例如通常发现与抗体缔合的细胞结构组分或其他多肽或核酸)分开的或基本上不含天然存在的生物体或病毒的至少一些其他组分的抗体(例如通常发现与抗体缔合的细胞结构组分或其他多肽或核酸)。该术语还涵盖合成制备的抗体。
术语“治疗(treat、treating或treatment of)”(或语法上等同的术语)意指受试者病症的严重程度降低或至少部分改善或改进和/或至少一种临床症状的部分缓解、减轻或减少和/或存在病症进展的延缓。
如本文所用，术语“预防(prevent、prevents或prevention)”和“抑制(inhibit、inhibits或inhibition)”(及其语法等同物)并不意味着完全消除疾病，而是涵盖任何类型的可以降低病症的发生率、延缓疾病的发作和/或减少发作后与该病症相关的症状的预防性治疗。
如本文所用，“有效的(effective)”、“预防有效的(prophylacticallyeffective)”或“治疗有效的(therapeutically effective)”量是足以为受试者提供一些改善或益处的量。可替代地，“有效的”、“预防有效的”或“治疗有效的”量是将部分延缓、缓解、减轻或减少受试者的至少一种临床症状的量。本领域技术人员将理解，效果不必是完全的或治愈的，只要向受试者提供某种益处即可。
如本文所用，术语“捕获效力(trapping potency)”是指特异性结合靶标病原体或精子的抗体抑制该病原体或精子通过黏液移动的能力。捕获效力可以通过本领域已知的和如本文公开的方法进行测量。捕获效力可以定量为例如，将黏液中至少50％(例如，至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％等)的病原体或精子的运动性降低至其在溶液(例如，盐水)和/或黏液中的天然运动性的至少一半(例如，四分之一、十分之一等)所需的抗体量(例如，黏液中抗体浓度)。对于精子，捕获效力也可以量化为例如通过计算机辅助精子分析(CASA)确定的将进行性运动精子的比例降低至少50％(例如，至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％等)所需的抗体的量(例如，黏液中抗体浓度)。黏液中的运动性可以使用本领域熟知的和本文描述的技术来测量。可替代地，可将捕获效力定量为穿过黏液的病原体或精子的百分比降低。
术语“增强捕获效力(enhances trapping potency)”是指相对于核心抗体(例如，核心IgG)的增强。进一步地，可以选择或进一步配置本文所述的具有多个Fab重复的任一种多聚体合成粘合剂，以通过包含糖基化模式来增强粘蛋白交联，该糖基化模式包括双触角核心聚糖结构Manα1-6(Manα1-3)Manβ1-4GlcNAcβl-4G1cNAcβ1，其中每条支链上均带有末端N-乙酰氨基葡萄糖。该糖基化模式可以位于核心Ab(例如，核心IgG)的Fc区上。可替代地或另外地，可以选择或配置本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物，使得至少x％的具有多个Fab重复的合成粘合剂具有糖基化模式，该糖基化模式包括双触角核心聚糖结构Manα1-6(Manα1-3)Manβ1-4GlcNAcβl-4G1cNAcβ1，其中每条支链上均带有末端N-乙酰氨基葡萄糖，其中x％为20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或基本上全部。相对于在任何修饰和/或选择之前的天然存在的核心IgG，这样的组合物一旦与靶标结合后将对靶标的黏液捕获特别有益，在该组合物中例如超过40％的合成粘合剂具有本文所述的多个Fab重复(以增强凝集效力)同时还拥有提供增加的黏蛋白交联的寡糖。
如本文所用，关于本公开主题的抗体的术语“特异性结合(bind specifically或specifically binds)”意指本发明的抗体将与靶标病原体或精子的表位(包括一个或多个表位)结合，但基本上不与其他不相关的表位或分子结合。在某些实施方案中，该术语是指相对于其他无关表位或分子的结合，抗体表现出至少约60％，例如至少约70％、80％、90％或95％与靶标表位结合。
本文所述的抗体、组合物和方法可包括用于抑制和/或治疗病原体感染、从黏膜表面消除病原体和提供避孕的方法。具体地，本公开的主题涉及具有多个Fab重复的合成粘合剂和这些合成粘合剂的组合物，其能够促进病原体和精子的聚集和/或锁链式生长、在黏液中捕获病原体和精子，从而抑制病原体或精子穿过或通过黏液分泌物的运输，这可能破坏和/或自然消除这些病原体和/或精子。
本文所述的具有多个Fab重复的任何合成粘合剂针对病原体的非中和表位；在一些变化形式中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂针对病原体的中和表位。
抗体天然存在于黏液中。本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂通常可快速扩散通过黏液，通过与黏液内的黏蛋白的弱的、瞬时粘附相互作用仅稍微减慢。这种快速扩散允许具有多个Fab重复的合成粘合剂在病原体或精子表面上快速积累。当多个合成粘合剂已经累积在病原体或精子的表面上时，多个抗体与黏液之间的粘附相互作用变得足以捕获黏液中的结合的病原体或精子，从而防止感染/提供避孕措施。此外，并且有点出人意料的是，使用具有多个Fab重复的相同合成粘合剂结合多个病原体可以更有效地捕获由多个病原体/精子和合成粘合剂形成的复合物，该复合物通过将不同的病原体/精子聚集在一起或促进病原体的锁链式生长而形成。在CVM中捕获的病原体或精子不能到达它们在黏膜表面的靶细胞，而是在性交后排出和/或通过自发热降解以及被黏液中的其他保护因子如防御素灭活(Cole,Curr.Top.Microbiol.Immunol.306:199(2006))；Doss等人，J.Leukoc.Biol.87:79(2010))。如本文所公开的，这种病原体凝集和/或捕获活性提供保护但不中和，并且可以以亚中和剂量(sub-neutralization dose)和/或使用针对病原体的非中和表位的抗体来有效地抑制感染。本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可能与黏蛋白形成的低亲和力相互作用不仅是Fc依赖性的，而且还可能受抗体糖基化的影响。
因此，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可在糖基化位点包含寡糖，该寡糖包含与(提供)增强的对于黏液中抗体的捕获效力相关的模式、主要由该模式组成或由该模式组成，并且其中所述抗体特异性结合靶标(例如，病原体或精子)的表位。一旦合成粘合剂与一个或多个靶标(例如，病原体或精子)形成复合物，抗体的独特糖基化模式/独特寡糖组分可使合成粘合剂的捕获效力最大化，而不会过度地阻碍未结合的合成粘合剂容易地通过黏液扩散以快速结合靶标的能力。在某些实施方案中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂是这样一种粘合剂，它在黏液中的运动性相对于其在溶液(例如，黏液、盐水或水)中的天然运动性降低不超过约50％，例如，不超过40％、30％、20％、10％或5％，并且一旦与一个或多个靶标复合，就有效地捕获黏液中的靶标病原体或精子(例如，至少50％的靶标减慢至少一半)。在一些实施方案中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂将至少50％的靶标(例如，至少50％、60％、70％、80％或90％或更多靶标)的运动性降低至少50％(例如，60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％等)或更多。在其他实施方案中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂将能够穿过黏液的靶标(例如，病原体或精子)的百分比降低至少10％，例如至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多。例如，具有本文所述多个Fab重复的合成粘合剂可与靶标的表位具有足够的结合率，以在黏液中的合成粘合剂浓度小于10mg/ml(例如，小于5mg/ml、小于1mg/ml、小于0.1mg/ml、小于50μg/ml、小于30μg/ml、小于20μg/ml、小于10μg/ml、小于5μg/ml、小于2.5μg/ml、小于1μg/ml、小于0.5μg/ml、小于0.1μg/ml等)时在一小时内(例如，在30分钟内或15分钟内)捕获黏液中的靶标病原体或精子。
在一些实施方案中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可包括寡糖组分，其与合成粘合剂的Fc区(例如，合成粘合剂的核心IgG部分)中的N-连接糖基化位点结合。N-连接糖基化位点可以是核心的Fc区上的天冬酰胺残基，例如Asn 297天冬酰胺残基。氨基酸编号是相对于人IgG分子的标准氨基酸结构而言的。
N-聚糖结构可以是G0/G0F形式，或者是纯的GnGn形式(例如，每个分支上具有末端N-乙酰葡糖胺，但不含末端半乳糖或唾液酸)。在一些实施方案中，附着于抗体的寡糖组分(即，聚糖)包含不含任何岩藻糖残基的核心结构、主要由该核心结构组成或由该核心结构组成。在其他实施方案中，聚糖不包含任何半乳糖残基。在一些实施方案中，聚糖不包括半乳糖。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可以包括具有不同寡糖组分的合成粘合剂的混合物。在一些实施方案中，混合物包含至少约30％例如，至少约40％、50％、60％、70％、80％、90％或更高的本文所述的具有多个Fab重复片段的合成粘合剂，该多个Fab重复片段具有(例如，含有或不含有岩藻糖残基的)G0/G0F核心聚糖结构。
在一些实施方案中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂产生于人细胞系(例如，293细胞系，例如，293T细胞系)、其他哺乳动物细胞系(例如，CHO)、植物(例如，烟草)或其他微生物(例如，木霉属)。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可用于结合靶标以捕获黏液中的靶标以抑制靶标的感染或浸渍。在靶标是病原体的变化形式中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可针对可通过黏膜感染受试者的任何病原体。病原体可以属于以下种类：藻类、细菌、真菌、寄生虫(蠕虫、原生动物)、病毒和亚病毒物质。靶标病原体还包括合成系统，该系统包含具有表位的抗原，例如包含附着的蛋白质，例如，可以用于生物恐怖主义(bioterrorism)的天然蛋白质的颗粒或微粒(例如，聚苯乙烯珠)。病原体包括引起性传播疾病的那些(与此类病原体引起的疾病一起列出)，包括但不限于淋病奈瑟氏菌(淋病)；沙眼衣原体(衣原体，性病淋巴肉芽肿)；梅毒螺旋体(梅毒)；杜克雷嗜血杆菌(软性下疳)；肉芽肿克雷伯氏菌(Klebsiella granulomatis)或肉芽肿荚膜杆菌(杜诺凡病)、生殖支原体、解脲支原体(支原体)；人类免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2(HIV，AIDS)；HTLV-1(1型嗜T-淋巴细胞病毒)；1型和2型单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)；EB病毒；巨细胞病毒；人疱疹病毒6；水痘-带状疱疹病毒；人乳头瘤病毒(生殖器疣)；甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(病毒性肝炎)；传染性软疣病毒(MCV)；阴道毛滴虫(滴虫病)；以及酵母菌，例如白色念珠菌(外阴阴道念珠菌病)。抗体和组合物也可能对其他疾病有活性，这些疾病通过与体液接触传播，也可以通过性接触传播，并且能够通过施用根据本发明的组合物而被预防。因此，措辞“性传播疾病(STD)”在本文中被解释为包括能够在性接触过程中传播的任何疾病，无论生殖器官是否为导致病理的部位。病原体还包括引起呼吸系统疾病的那些，包括但不限于流感(包括甲、乙和丙型流感)；严重急性呼吸综合征(SARS)；呼吸道合胞病毒(RSV)；副流感病毒；腺病毒；人鼻病毒；冠状病毒；和诺如病毒。其他病原体包括但不限于沙门氏菌属(Salmonella)和大肠杆菌(Escherichia coli)。其他病原体包括克雷伯氏杆菌(Klebsiella bacillus)。
病原体可以包括影响非人动物的那些，例如家畜，诸如猪(例如，猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒、猪瘟病毒(CSFV)、2型猪圆环病毒(PCV2)、脑心肌炎病毒(EMCV)、猪生殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)、日本脑炎病毒(JEV)、布鲁氏菌属(Brucella)、钩端螺旋体属(Leptospira)、沙门氏菌属，和胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)、多杀巴斯德氏菌(Pasteurellamultocida)、猪痢疾短螺旋体(Brachyspira hyodysenteriae)、猪肺炎支原体(Mycoplasmahyopneumoniae))；反刍动物(例如，牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)、牛丘疹性口炎病毒(BPSV)、伪牛痘病毒(PCPV)、溶血性巴斯德氏菌(Pasteurella haemolytica)、多杀巴斯德氏菌、睡眠嗜血杆菌(Haemophilus somnus)、羔羊嗜血杆菌(Haemophilus agni)、牛莫拉氏菌(Moraxella bovis)、丝状支原体(Mycoplasma mycoides)、环形泰勒虫(Theileria annulata)、禽副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium paratuberculosis))；有蹄类动物(例如，流产布鲁氏杆菌(Brucella abortus)、牛结核分枝杆菌(Mycobacteriumbovis)、小泰勒虫(Theileria parva)、裂谷热病毒、口蹄疫病毒、结节性皮肤病病毒)；马(例如，马红球菌(Rhodococcus equi)、猪霍乱沙门菌(Salmonella choleraesuis)、多杀巴斯德氏菌(Pasteurella multocida)、马疱疹病毒-1、马疱疹病毒-4、马流感病毒、马链球菌(Streptococcus equi))；家禽(例如，禽痘病毒、新城疫病毒、马立克氏病病毒(Marek'sdisease virus)、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV))等。
术语病毒和病毒病原体在本文中可互换使用，并且还指各种病毒株，例如，流感包含新的流感病毒株，这对于本领域普通技术人员来说是容易鉴别的。术语细菌(bacterium、bacteria)和细菌病原体在本文中可互换使用，并且还指细菌病原体的抗生素耐药菌株或多药耐药菌株。如本文所用，当涉及细菌病原体时，术语“抗生素耐药菌株(antibiotic-resistant strain)”或“多药耐药菌株(multidrug resistant strain)”是指能够耐受本领域中用于治疗细菌病原体(即，细菌病原体的非耐药菌株)的抗生素或药物的作用的细菌病原体。
在一些实施方案中，预期本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂能够广泛地结合含有脂质包膜的病毒，该脂质包膜不一定是一种病毒特有的。
在变化形式中，当本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂特异性结合靶标病原体的中和表位时，可以使用亚中和剂量。亚中和剂量是低于实现有效中和所需剂量的剂量。例如，如下文所述，在靶向HSV的多克隆抗HSV IgG抗体的情况下，有效中和剂量为约5μg/ml。然而，使用本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂以低于5μg/ml的剂量和甚至低于1μg/ml的剂量可以实现有效凝集和/或捕获。
如本领域技术人员将认识到的，在一些实施方案中适于凝集和/或捕获细菌病原体的剂量可以高于适于捕获病毒病原体的剂量。还将认识到，病原体之间、黏膜表面之间以及个体之间的适当剂量可以不同。还将认识到，不同受试者和不同黏膜表面可能具有不同的最佳聚糖模式和最佳抗体-黏蛋白亲和力，从而导致不同的最佳剂量。
本文进一步提出，具有选择性结合靶标病原体的非中和性表位的本文所述的多个Fab重复的合成粘合剂可用于有效地捕获黏液中的靶标病原体。因此，在一些实施方案中，具有多个Fab重复的合成粘合剂特异性结合非中和表位，例如一个或多个非中和表位。
本公开的主题还包括合成粘合剂，其具有选择性结合靶标的保守表位的多个Fab重复。靶向保守的表位的益处是，保留具有多个Fab重复的合成粘合剂针对病原体的新菌株的功效。在过去，有时会避免靶向这些表位，因为它们被视为无效靶标；然而，考虑到本文的公开内容，这些表位可用作有效靶标。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可特别用于结合精子以捕获黏液中的精子以抑制精子使卵子受精。可用作抗体靶标的精子特异性抗原是本领域熟知的。参见，例如，美国专利第8,211,666、8,137,918、8,110,668、8,012,932、7,339,029、7,230,073和7,125,550号，每个专利均通过引用整体并入本文。如本文所述，人精子的一个特定表位区可包含精子CD52糖型的N-连接聚糖。还参见美国专利第5,227,160和6,355,235号，其在此通过引用整体并入本文。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂与黏蛋白形成的低亲和力结合相互作用可能受糖基化影响，并且也可能是Fc依赖性的。因此，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可在核心IgG区中具有保留的和/或工程化的Fc区。这样的合成粘合剂可以是IgG的一个或多个亚类，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其任何组合。
在一些实施方案中，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂对靶标的表位具有足够的结合率和/或结合亲和力，在以小于约10mg/mL(例如，小于约5mg/mL、小于2mg/mL、小于约1mg/mL、小于约0.1mg/mL、小于约50μg/ml、小于约40μg/ml、小于约30μg/ml、小于约20μg/ml、小于约10μg/ml、小于约5μg/ml、小于约1μg/ml、小于约0.5μg/ml、小于约0.1μg/ml等)的浓度施用本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂后一小时内以足以捕获靶标的水平积聚在靶标表面上。在这种情况下，术语“捕获”是指减少进一步通过黏液的移动。在一些实施方案中，在施用本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂后约30分钟，例如约25分钟、20分钟、15分钟、10分钟、5分钟或1分钟内，可以捕获靶标(例如，病原体或精子)。在一些实施方案中，合成粘合剂以小于约5mg/ml、2.5mg/ml、1mg/ml、100μg/ml、50μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、4μg/ml、3μg/ml、2μg/ml或1μg/ml的合成粘合剂浓度捕获靶标。
以下讨论作为可用于生产具有多个Fab重复的合成粘合剂的技术的一般概述；然而，本领域技术人员将认识到对以下方法的许多变化形式是已知的。
本文所用的术语“抗体(antibody或antibodies)”是指所有类型的免疫球蛋白，包括IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。抗体可以是单克隆的或多克隆的，并且可以是任何来源的物种，包括(例如)小鼠、大鼠、兔、马、山羊、绵羊、骆驼或人，或者可以是嵌合的或人源化的抗体。参见，例如Walker等人，Molec.Immunol.26:403(1989)。抗体可以是根据美国专利死4,474,893号或美国专利第4,816,567号中公开的方法产生的重组单克隆抗体，抗体也可以根据美国专利第4,676,980号中公开的方法来化学构建。
包括在本发明范围内的抗体片段包括例如Fab、Fab’、F(ab)2和Fv片段；域抗体、双体抗体(diabody)；纳米抗体；疫苗体(vaccibody)、线性抗体；单链抗体分子、scFv；以及由抗体片段形成的多特异性抗体。这些片段可以通过已知技术产生。例如，可以通过胃蛋白酶消化抗体分子产生F(ab’)2片段，以及可以通过还原F(ab’)2片段的二硫键产生Fab片段。可替代地，可构建Fab表达文库以允许快速且容易地鉴定具有所需特异性的单克隆Fab片段(Huse等人，Science 254:1275(1989))。在一些实施方案中，如本文所用的术语“抗体片段”还可以包括能够结合靶标的任何蛋白质构建体。
包括本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的核心Ab形成部分的抗体可以是人源化的或骆驼源化的。非人(例如，鼠)抗体的人源化形式是嵌合免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其片段(例如Fv、Fab、Fab′、F(ab′)2或抗体的其他抗原结合子序列)，其含有源自非人免疫球蛋白的最小序列。人源化抗体包括人免疫球蛋白(受体抗体)，其中来自受体的互补决定区(CDR)的残基被来自具有期望特异性、亲和力和能力的非人物种(供体抗体)如小鼠、大鼠或兔的CDR的残基替代。在一些情况下，人免疫球蛋白的Fv框架残基被相应的非人残基替代。人源化抗体还可以包含既不存在于受体抗体中也不存在于输入的CDR或框架序列中的残基。通常，人源化抗体将包含基本上所有可变区或至少一个，通常是两个可变区)，其中所有或基本上所有的CDR区对应于非人免疫球蛋白中的CDR区，并且所有或基本上所有的框架(FR)区(即，CDR区之间的序列)是人免疫球蛋白共有序列的框架(FR)区。人源化抗体最佳地还将包含免疫球蛋白恒定区(Fe)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区的一部分(Jones等人，Nature 321:522(1986)；Riechmann等人，Nature,332:323(1988)；和Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593(1992))。
人源化非人抗体的方法是本领域熟知的。通常，人源化抗体具有从非人来源引入的一个或多个氨基酸残基。这些非人氨基酸残基通常称为“输入(import)”残基，其通常取自“输入”可变结构域。人源化基本上可以按照Winter和同事的方法进行(Jones等人，Nature 321:522(1986)；Riechmann等人，Nature,332:323(1988)；Verhoeyen等人，Science239:1534(1988))，用啮齿类动物的CDR或CDR序列取代人源抗体的相应序列。因此，这样的“人源化”抗体是嵌合抗体(美国专利第4,816,567号)，其中基本上比完整的人可变结构域小的部分被来自非人物种的相应序列替代。实际上，人源化抗体(humanized antibody)通常是其中一些CDR残基(例如，全部CDR或其部分)以及可能的一些FR残基被来自啮齿动物抗体中类似位点的残基取代的人源抗体。
基于本文所述的人或人源化IgG的具有多个Fab重复的人源抗体和合成粘合剂也可以使用本领域已知的各种技术，包括噬菌体展示文库(Hoogenboom和Winter，J.Mol.Biol.227:381(1991))；Marks等人，J.Mol.Biol.222:581(1991))产生。Cole等人和Boerner等人的技术也可用于制备人单克隆抗体(Cole等人,Monoclonal Antibodies andCancer Therapy,Alan R.Liss,p.77(1985)和Boerner等人,J.Immunol.147:86(1991))。类似地，可以通过将人免疫球蛋白基因座引入内源免疫球蛋白基因已经部分或完全失活的转基因动物(例如小鼠)中来制备人源抗体。在攻击后，观察到人源抗体产生，其在所有方面都与在人体中观察到的非常相似，包括基因重排、组装和抗体库。该方法描述于例如美国专利第5,545,807号；第5,545,806号；第5,569,825号；第5,625,126号；第5,633,425号；第5,661,016号以及以下科学出版物中：Marks等人，Bio/Technology 10:779(1992)；Lonberg等人，Nature 368:856(1994)；Morrison，Nature 368:812(1994)；Fishwild等人，NatureBiotechnol.14:845(1996))；Neuberger,Nature Biotechnol.14:826(1996))；Lonberg和Huszar,Intern.Rev.Immunol.13:65(1995)。
使用免疫原(抗原)产生与靶多肽特异性反应的抗体。例如长度至少为5(例如，至少7或10)个氨基酸或更长的重组或合成多肽和肽是产生单克隆或多克隆抗体的优选免疫原。在一个实施方案中，还包括免疫原性多肽缀合物作为免疫原。这些肽以纯的、部分纯的或不纯的形式使用。用于靶标病原体和精子的合适的多肽和表位是本领域熟知的。多核苷酸和多肽序列可在公共序列数据库如
Figure BDA0003076814020000391
/
Figure BDA0003076814020000392
中获得。本领域已经描述了大量特异性结合靶标病原体和精子的中和和非中和抗体，并可用作制备本发明抗体的起始材料。可替代地，可使用本文所述和本领域熟知的技术产生针对靶标病原体和精子的新抗体。
重组多肽在真核或原核细胞中表达并使用标准技术纯化。然后将所述多肽或其合成形式注射到能够产生抗体的动物中。可以产生单克隆或多克隆抗体用于随后的免疫分析以测定多肽的存在和数量。
产生多克隆抗体的方法是本领域技术人员已知的。简而言之，将免疫原(例如，纯化的或合成的肽)、与适当载体(例如，谷胱甘肽-S-转移酶、钥孔戚血蓝蛋白等)偶联的肽或掺入免疫载体如重组痘苗病毒的肽任选地与佐剂混合，并用该混合物免疫动物。通过取供试血并测定对目的肽的反应性的效价来监测动物对免疫原制剂的免疫应答。当获得针对免疫原的适当高效价的抗体时，从动物采集血液并制备抗血清。在需要时进行抗血清的进一步分级分离以富集与肽反应的抗体。抗多肽的抗体，包括其结合片段和单链重组形式，通过使用包含如上所述的共价连接(缀合)至载体蛋白的多肽的免疫原性缀合物免疫动物而产生。通常，目的免疫原是长度至少约10个氨基酸的多肽，在另一个实施方案中，多肽的长度为至少约20个氨基酸，而在另一个实施方案中，片段的长度为至少约30个氨基酸。例如，多肽可包含自乳头瘤病毒L2蛋白的N末端起的1至200个氨基酸残基。免疫原性缀合物通常通过将多肽与载体蛋白(例如，作为融合蛋白)偶联来制备，或者可替代地，它们在免疫载体中重组表达。
从分泌所需抗体的细胞制备单克隆抗体。筛选这些抗体与正常或修饰肽的结合，或筛选其激动或拮抗活性。特异性单克隆和多克隆抗体将通常以至少约50mM，例如至少约1mM，例如至少约0.1mM或更好的KD结合。在一些情况下，需要从各种哺乳动物宿主例如小鼠、啮齿动物、灵长类动物、人等制备单克隆抗体。对制备这些单克隆抗体的技术的说明可见于Kohler和Milstein 1975Nature 256:495-497。简要概括地讲，该方法通过给动物注射单独的免疫原或任选地与载体蛋白连接的免疫原(例如免疫原性肽)来进行。然后将动物处死并从其脾脏取出细胞，将细胞与骨髓瘤细胞融合。结果得到能够在体外繁殖的杂交细胞或“杂交瘤(hybridoma)”。随后筛选杂交瘤群体以分离单独的克隆，每个克隆分泌针对该免疫原的单一抗体种类。以这种方式，所获得的个体抗体种类是免疫动物被永生化和克隆的单一B细胞响应于所识别的免疫原性物质上的特定位点而产生的的产物。
永生化的可选方法包括用EB病毒、癌基因或逆转录病毒转化或本领域已知的其他方法。筛选来自单一永生化细胞的克隆以产生对抗原具有期望特异性和亲和力的抗体，并且通过各种技术(包括注射到脊椎动物(优选哺乳动物)宿主的腹膜腔中)增强由此类细胞产生的单克隆抗体的产量。本发明的多肽和抗体在有或没有修饰的情况下使用，并且包括嵌合抗体如人源化鼠抗体。其他合适的技术包括在噬菌体或类似载体中选择重组抗体文库。参见，Huse等人，1989Science 246:1275-1281；和Ward等人，1989Nature 341:544-546.
还可以通过本领域已知的噬菌体展示技术获得对靶多肽特异的抗体。
可以通过共价或非共价连接提供可检测信号的物质来标记如本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂。各种标记和缀合技术是已知的，并且在科学和专利文献中都有广泛报道。合适的标记包括放射性核素、酶、底物、辅因子、抑制剂、荧光部分、化学发光部分、磁性颗粒等。如本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可用于检测或诊断在其上发现抗原的靶标的存在。
可以通过本领域技术人员已知的任何方法实现制备具有多个如本文所述的具有目的糖基化模式的Fab重复的合成粘合剂的方法。例如，在一些实施方案中，可以使用哺乳动物细胞，如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞以及NS0-和SP2/0-小鼠骨髓瘤细胞，以产生具有所需糖基化模式的抗体。在某些实施方案中，可以使用人细胞系，例如人293细胞。在一些实施方案中，可以使用非哺乳动物细胞。细胞系可被遗传工程化以产生具有期望寡糖的抗体。这样的细胞系可以具有例如影响糖基化模式的一种或多种酶(例如糖基转移酶)的表达改变。糖基转移酶包括但不限于半乳糖基转移酶、岩藻糖基转移酶、葡糖基转移酶、N-乙酰半乳糖胺基转移酶、N-乙酰葡糖胺基转移酶、葡糖醛酸基转移酶、唾液酸基转移酶、甘露糖基转移酶、葡糖醛酸转移酶、半乳糖醛酸转移酶、寡糖基转移酶或其任何组合。具体实例包括但不限于寡糖基转移酶、UDP-N-乙酰-D-半乳糖胺:多肽N-乙酰半乳糖胺基转移酶、GDP-岩藻糖蛋白:O-岩藻糖基转移酶1、GDP-岩藻糖蛋白:O-岩藻糖基转移酶2，蛋白:O-葡糖基转移酶、UDP-N-乙酰葡糖胺:肽N-乙酰葡糖胺基转移酶、蛋白:O-甘露糖基转移酶、β1,4半乳糖基转移酶及其任何组合。参与蛋白质糖基化的酶是本领域熟知的，并且可以使用常规技术进行操作。参见,例如美国专利第8,383,106、8,367,374、8,080,415、8,025,879、8,021,856、7,906,329和7,846,434号，每个专利均通过引用整体并入本文。在其他实施方案中，可以合成特定模式的聚糖并将其连接至本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂。在另外的实施方案中，可以分离具有混合糖基化模式的本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂，以分离具有所需的糖基化模式的抗体。
如本领域技术人员将认识到的，也可将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂形成合适的组合物，例如用于施用于受试者以用作避孕药物和/或治疗或预防由靶标病原体引起的感染或由靶标病原体感染引起的疾病或病症的药物组合物。组合物可以包含预防或治疗有效量的本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂和药学上可接受的载体、主要由所述合成粘合剂和药学上可接受的载体组成或由所述合成粘合剂和药学上可接受的载体组成。
包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的药物组合物可以与本领域通常使用的任何合适的药学媒介物、赋形剂或载体(包括用于此目的的此类常规材料，例如生理盐水、右旋糖、水、甘油、乙醇及其组合)组合配制。如本领域技术人员将认识到的，使用的具体媒介物、赋形剂或载体将根据受试者和受试者的状况而变化，并且多种施用模式将适用于本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物。本申请中公开的任何药物组合物的合适的施用方法包括但不限于局部、口服、鼻内、含服、吸入、肛门和阴道施用，其中这样的施用实现了抗体向目的黏膜的递送。
组合物可以是适于将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂递送至黏膜表面的任何类型的组合物，并且可以是本领域已知的各种形式，包括固体、半固体或液体形式、或者呈洗剂、或者水包油或油包水的乳液、水凝胶组合物形式。组合物包括但不限于凝胶、糊剂、栓剂、冲洗剂(douche)、卵状剂(ovule)、泡沫、薄膜、喷雾剂、软膏剂、阴道栓、胶囊、片剂、胶冻剂、霜剂、乳状物(milk)、分散剂、脂质体、粉末/滑石或其他固体、悬浮液、溶液、乳剂、微乳剂、纳米乳剂、液体、气雾剂、微胶囊、定时释放胶囊、控释制剂、缓释制剂或生物粘附凝胶(例如，黏膜粘附热胶凝组合物)或包埋在基质中用于将抗体缓慢或受控释放到其被施用或接触的表面上的其他形式。
如果需要局部施用，组合物可根据需要配制成合适的形式，例如软膏剂、霜剂、凝胶剂、洗剂、滴剂(例如滴眼剂和滴耳剂)或溶液(例如漱口剂)。组合物可含有常规添加剂，例如防腐剂、促进渗透的溶剂和软化剂。局部制剂还可以含有常规载体，例如霜基或软膏基(cream or ointment bases)、乙醇或油醇。用于施用(包括鼻内施用等)的其他制剂预期与本公开的主题结合使用。本领域技术人员已知的适于将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂或含有本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物递送至受试者的一个或多个黏液膜的所有制剂、装置和方法可与本公开的主题结合使用。
本文所述的任何组合物可包括本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的混合物，包括具有不同数目的Fab重复(例如，一些具有4个Fab重复、一些具有6个Fab重复等)的混合物。
在本文所述的方法中使用的组合物可包括不会不利地影响或以其他方式影响组合物的组分的抑制有效性和/或避孕有效性的其他药剂，包括抗体、抗微生物剂和/或精子功能抑制剂。例如，固体、液体或固体与液体的药学上可接受的载体、稀释剂、媒介物或赋形剂的混合物可用于药物组合物中。合适的生理学上可接受的基本上惰性的载体包括水、聚乙二醇、矿物油或矿脂、丙二醇、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、纤维素衍生物、聚羧酸、连接的聚丙烯酸，例如卡波普(carbopol)；以及其他聚合物，例如聚赖氨酸、聚谷氨酸、聚马来酸、聚乳酸、热聚天冬氨酸(thermal polyaspartate)和脂族-芳族树脂；甘油、淀粉、乳糖、二水合硫酸钙、石膏粉(terra alba)、蔗糖、滑石、明胶、果胶、阿拉伯树胶、硬脂酸镁、硬脂酸、糖浆、花生油、橄榄油、盐水溶液等。
可用于本发明方法的本文所述的药物组合物还可包括稀释剂、填充剂、粘合剂、着色剂、稳定剂、香料、胶凝剂、抗氧化剂、保湿剂、防腐剂、酸类和本领域技术人员已知的其他元素。例如，合适的防腐剂是本领域熟知的，并且包括例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸和苯甲醇。
对于注射，载体通常可为液体，例如无菌无热原的水、无热原的磷酸盐缓冲盐水溶液、抑菌水或Cremophor
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(BASF,Parsippany,N.J.)。对于其他施用方法，载体可以是固体或液体。
对于口服施用，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可以以固体剂型施用，例如胶囊、片剂和粉末；或以液体剂型施用，例如酏剂、糖浆剂和悬浮液。组合物可以与非活性成分和粉末状载体如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、淀粉、纤维素或纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸、糖精钠、滑石、碳酸镁等一起封装到明胶胶囊中。可被添加以提供期望颜色、味道、稳定性、缓冲能力、分散性或其他已知所需特征的其他非活性成分的实例为氧化铁红、硅胶、十二烷基硫酸钠、二氧化钛、可食用白墨等。类似的稀释剂可用于制备压制片剂(compressed tablet)。片剂和胶囊均可制成缓释产品，以提供药物在数小时内的连续释放。压制片剂可以是糖包衣的或薄膜包衣的以掩盖任何令人不悦的味道并保护片剂免受大气影响，或者是肠溶包衣的以在胃肠道中选择性崩解。用于口服施用的液体剂型可包含有着色剂和调味剂以增加患者的接受度。
适用于含服(舌下)施用的组合物包括在调味基质(通常是蔗糖和阿拉伯树胶或黄芪胶)中包含抗体的片剂或菱形含片(lozenge)；以及在惰性基质(如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶)中包含抗体的锭剂(pastille)。组合物可包括口服可溶解或可降解的组合物。可替代地，组合物可包括含有抗体的粉末状或气溶胶化(aerosolized)或气雾化(atomized)溶液或悬浮液。这种粉末状、气溶胶化或气雾化的组合物在分散时优选具有约0.1至约200纳米的平均颗粒或液滴尺寸。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的适用于肠胃外施用的组合物包括本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的无菌水性和非水性注射溶液，该制剂优选与预期接受者的血液等渗。这些制剂可以含有使得组合物与预期接受者的血液等渗的抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质。水性和非水性无菌悬浮液可包括悬浮剂和增稠剂。组合物可以存在于单位/剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿和小瓶中，并且可以储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在使用前立即添加无菌液体载体，例如盐水或注射用水。
临时注射溶液和悬浮液可以由前述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备。例如，在一个方面，将包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的单位剂型的可注射的、稳定的、无菌的组合物提供在密封的容器中。本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可以冻干物的形式提供，该冻干物能够与合适的药学上可接受的载体重构以形成适合于将其注射到受试者体内的液体组合物。
适于直肠施用的组合物可以作为单位剂量栓剂存在。这些可以通过将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂与一种或多种常规固体载体例如可可脂混合，然后使所得混合物成形来制备。
可替代地，可将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂配制为用于经鼻施用或通过任何合适的方式施用于受试者的肺，例如通过使受试者吸入包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的可吸入颗粒的气雾混悬剂(aerosol suspension)施用。该可吸入颗粒可以是液体或固体。术语“气雾剂(aerosol)”包括能够被吸入细支气管或鼻腔通道的任何气载悬浮相。具体地，气雾剂包括液滴的气载悬浮液，可以在定量雾化吸入器或雾化器(nebulizer)中或在弥雾器(mist sprayer)中产生。气雾剂还包括悬浮在空气或其他载气中的干粉组合物，其可通过例如吸入器装置的吹气来递送。参见Ganderton&Jones,DrugDelivery to the Respiratory Tract,Ellis Harwood(1987)；Gonda(1990)CriticalReviews in Therapeutic Drug Carrier Systems6:273-313；和Raeburn等人，J.Pharmacol.Toxicol.Meth.27:143(1992)。包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的液体颗粒的气雾剂可以通过任何合适的方式产生，例如使用本领域技术人员已知的压力驱动气雾剂雾化器或超声雾化器。参见，例如，美国专利第4,501,729号。包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的固体颗粒的气雾剂同样可以通过制药领域已知的技术用任何固体颗粒药物气雾剂发生器产生。
可替代地，人们可以以局部而非全身的方式，例如以贮库或缓释制剂的方式，施用本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂。
可将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂包被或浸渍在装置上(或包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物可被包被或浸渍)。该装置可用于将本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂和合成粘合剂的组合物递送至黏膜，例如递送至阴道或子宫。在一个实施方案中，装置包括适于插入阴道的固体支持物。支持物可以用本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物浸渍或包被。合成粘合剂从装置中的释放可以通过构成这些装置的材料例如硅氧烷弹性体、乙烯乙酸乙烯酯和聚氨酯聚合物来控制。装置诸如宫颈阴道和直肠用装置包括但不限于环、棒、涂药器、海绵、宫颈帽、棉塞、隔膜(diaphragm)或子宫内装置。涂药器可以是目前商业上用于递送杀精凝胶或抗酵母化合物的那些，并且包括但不限于柱塞型涂药器、阴道栓、喷雾剂、可挤压管、阴道环、宫颈环、海绵等。所有这些用于递送的装置都旨在被本发明涵盖。
如本文所述，当未结合时，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂能够通过黏液扩散，以允许具有多个Fab重复的合成粘合剂以期望的速率结合靶标(例如，病原体或精子)。还期望的是，当本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂结合至靶标时，抗体-黏蛋白相互作用的累积效应有效地捕获黏液中的病原体或精子和/或使靶标凝集。为了促成该目标，在一些实施方案中，可能需要提供一种组合物，其包含一种以上的本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂，其中每种合成粘合剂特异性结合病原体或精子的不同表位。这样的组合物可以提供增加数量的具有多个Fab重复的合成粘合剂与病原体或精子结合的能力，从而增强用于将捕获黏液中的病原体或精子的抗体-黏蛋白相互作用。
在一些实施方案中，组合物包含本文所述的具有多个Fab重复的第一合成粘合剂和本文所述的具有多个Fab重复的第二合成粘合剂，其中第一合成粘合剂特异性结合靶标的第一表位，并且第二粘合剂特异性结合靶标的第二表位，其中第一表位不同于第二表位。在某些实施方案中，组合物包括三种或更多种不同的本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂，例如，3、4、5、6、7、8、9、10或更多种不同的本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂，其中每种合成粘合剂特异性结合靶标的不同表位。
还期望提供一种组合物，该组合物能够提供对由于一种以上靶标病原体引起的感染的治疗或预防。在本公开主题的一些实施方案中，组合物包含具有多个Fab重复的第一合成粘合剂和具有多个Fab重复的第二合成粘合剂，其中第一合成粘合剂特异性结合第一靶标病原体的表位，并且第二合成粘合剂特异性结合第二靶标病原体的表位。在某些实施方案中，组合物包括三种或更多种不同的具有多个Fab重复的合成粘合剂，例如3、4、5、6、7、8、9、10或更多种不同的合成粘合剂，其中每种合成粘合剂特异性结合不同靶标的表位。如上所述，在一些变化形式中，靶标可以是相同的，但是具有多个Fab重复的合成粘合剂可以具有不同数目的Fab重复。
在其他实施方案中，组合物提供避孕和治疗或预防由一种或多种靶标病原体引起的感染二者。在一些实施方案中，组合物包含具有多个Fab重复的第一合成粘合剂和具有多个Fab重复的第二合成粘合剂，其中第一合成粘合剂特异性结合精子的表位，并且第二合成粘合剂特异性结合靶标病原体的表位。在某些实施方案中，组合物包括三种或更多种不同的本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂，例如3、4、5、6、7、8、9、10或更多种不同的具有多个Fab重复的合成粘合剂，其中一种或多种具有多个Fab重复的合成粘合剂结合精子的不同表位，并且一种或多种具有多个Fab重复的合成粘合剂特异性结合靶标病原体或多个靶标病原体的表位。
在一些实施方案中，药物组合物还可以包括其他活性剂，例如，预防性药物或治疗性药物。例如，其他活性剂可以是本领域技术人员已知的抗微生物剂。抗微生物剂可对藻类、细菌、真菌、寄生虫(蠕虫、原生动物)、病毒和亚病毒物质具有活性。因此，抗微生物剂可以是抗细菌剂、抗真菌剂、抗病毒剂、抗寄生虫剂或抗原生动物剂。抗微生物剂优选对传染病具有活性。合适的抗病毒剂包括，例如，病毒灭活剂如非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂，和C31G(氧化胺和烷基甜菜碱)、聚双胍、二十二烷醇、酰基肉毒碱类似物、辛基甘油和抗微生物肽如爪蟾抗菌肽、短杆菌肽、protegrin和retrocyclin。在本文描述的组合物中，可以有利地使用温和的表面活性剂，例如失水山梨醇单月桂酸酯(sorbitan monolaurate)作为抗病毒剂。可有利地用于本文所述组合物的其他抗病毒剂包括核苷酸或核苷类似物，例如替诺福韦、阿昔洛韦、金刚烷胺、地达诺新、膦甲酸、更昔洛韦、利巴韦林、阿糖腺苷、扎西他宾和齐多夫定。可以使用的其他抗病毒剂包括非核苷逆转录酶抑制剂，例如UC-781(硫代甲酰苯胺(thiocarboxanilide))、吡啶酮类化合物(pyridinones)、TIBO、奈韦拉平、地拉夫定、胡桐内酯A(calanolide A)、卡普韦林(capravirine)和依法韦仑。在这些逆转录酶抑制剂中，已显示出不良口服生物利用度的药剂及其类似物特别适合与本发明的抗体和组合物联合施用于黏膜组织，以预防HIV的性传播。可以使用的其他抗病毒剂是HIV进入阻滞剂类别中的那些，如蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N)、环糊精、角叉菜胶、硫酸化或磺化聚合物、扁桃酸缩合聚合物、单克隆抗体、趋化因子受体拮抗剂如TAK-779、SCH-C/D和AMD-3100，以及融合抑制剂如T-20和1249。
合适的抗细菌剂包括抗生素，例如氨基糖苷类、头孢菌素，包括第一代、第二代和第三代头孢菌素；大环内酯类，包括红霉素类、青霉素类，包括天然青霉素类、耐青霉素酶的青霉素类、氨基青霉素类、广谱青霉素类；磺胺类、四环素类、氟喹诺酮类、甲硝唑和泌尿道抗菌剂。
合适的抗真菌剂包括两性霉素B、制霉菌素、灰黄霉素、氟胞嘧啶、氟康唑、碘化钾、伊曲康唑、克霉唑、咪康唑、酮康唑和托萘酯。合适的抗原生动物剂包括抗疟疾剂，例如氯喹、伯氨喹、乙胺嘧啶、奎宁、治疟宁(fansidar)和甲氟喹；抗阿米巴药，例如二醇草酰胺(dioloxamide)、吐根碱、双碘喹啉、甲硝唑、巴龙霉素和奎纳克林；羟乙磺酸喷他脒、阿托伐醌和依氟鸟氨酸。
在某些实施方案中，其他活性剂可以是精子功能抑制剂，例如能够例如通过杀死精子和/或使精子功能失活或通过对精子活性的其他作用来抑制精子功能、以其他方式抑制精子卵子受精和/或以其他方式防止怀孕的剂。在一些实施方案中，活性剂可以具有至少双重功能，例如作为精子功能抑制剂和抗微生物剂。
精子功能抑制剂包括但不限于表面活性剂，包括非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂和阴离子表面活性剂；杀精子剂，例如壬苯醇醚-9(α-(4-壬基苯基)-ω-羟基壬基(氧乙烯)；其他精子失活剂，例如硫酸化或磺化聚合物，例如聚磺苯乙烯、扁桃酸缩合聚合物、环糊精；抗微生物肽，例如短杆菌肽、爪蟾抗菌肽、吲哚青霉素(indolicidin)和蜂毒肽；以及酸缓冲组合物，例如BufferGel和AcidForm。非离子表面活性剂包括例如失水山梨醇单月桂酸酯、壬基苯氧基聚乙氧基乙醇、对二异丁基苯氧基聚乙氧基乙醇、聚氧乙烯(10)油基醚和onyx醇(onyx-ol)。合适的阴离子表面活性剂包括但不限于烷基磺酸钠和烷基苯磺酸钠(sodium alkylbenzene sulfonate)。阳离子表面活性剂包括例如季铵表面活性剂，例如氯化十六烷嘧啶(cetyl pyrimidinium chloride)和苯扎氯铵。两性离子表面活性剂如酰基肉毒碱类似物和C31G由于它们温和的皮肤和黏膜刺激特性是特别合适的。
本公开的主题还包括：包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂或包含本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物的试剂盒以及任选地用于施用合成粘合剂或组合物的装置。在一些实施方案中，试剂盒可以包括多种具有多个Fab重复的合成粘合剂和/或含有此类合成粘合剂的组合物。在一些实施方案中，在这样的试剂盒中提供的多种合成粘合剂中的每一种可以特异性结合靶标(例如病原体或精子)的不同表位。在其他实施方案中，在这样的试剂盒中提供的多种本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂中的每一种可特异性结合不同靶标病原体的表位或精子的表位。在一些实施方案中，试剂盒还可以包括其他活性剂，例如抗微生物剂，例如抗生素、抗病毒剂或其他抗微生物剂，或本领域技术人员已知的精子功能抑制剂。
具有多个Fab重复的合成粘合剂
通常，本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可包括针对靶标表位的核心IgG。具有多个Fab重复的合成粘合剂可以通过偶联该IgG核心的相同Fab结构域(或该相同Fab结构域的一部分)的多个额外拷贝来构建。在一些实施方案中，这些额外的Fab可能与IgG核心的Fab结构域不相同，但仍结合相同的表位。这些额外的拷贝可以添加到IgG核心的氨基和/或羧基末端。这在图1A-1G中示意性地示出。另外，核心IgG包含Fc区，该区可以以增强黏液捕获的模式被糖基化(或可以选择包含具有多个Fab重复的合成粘合剂的组合物以富集糖基化)，例如G0糖基化形式。
例如，图1A-1E示出了可被产生和表征的不同的多聚体构建体(“具有多个Fab重复的合成粘合剂”)，以及测量的凝集和黏液捕获效力。可以组合并使用例如具有最大效力的一种或多种构建体。
图1A显示了包括一对Fab和Fc区的核心IgG的实例。如图1B-1E所示，然后可以将相同的Fab区成对(例如，2个额外的、4个额外的、6个额外的、8个额外的、10个额外的等)结合到核心IgG以形成具有多个Fab重复的合成粘合剂。
具有多个Fab重复的避孕用合成粘合剂
对于非激素避孕药物存在强烈未满足的需求：根据CDC的数据，在美国约3,000万年龄在20-35岁之间的女性中，大约有一半寻求某种形式的可逆避孕方法(例如药丸、IUD、避孕套、环等)。社交-社会问题无疑造成了对普通避孕方法的摄取和坚持有限；然而，许多研究也已经证明需要替代的避孕方法，特别是非激素方案。绝大多数女性开始使用激素避孕药物，这种避孕药物容易获得并且非常有效。然而，尽管有咨询，许多女性天然地厌恶外源激素。超过一半以上的女性由于包括与激素避孕药物相关的真实和可感知的副作用(例如体重增加、情绪波动和抑郁、头痛和恶心)在内的原因而停药(多数在3至6个月内)，这强烈地强调了对非激素避孕药物的需要。此外，口服和基于IUD的激素避孕都经常导致月经间期的“点滴出血(spotting)”(在月经之前几周内轻微出血。虽然这在西方社会中可能被看作仅仅是不方便，但是许多女性/夫妇认为这很令人反感。因为出于宗教原因(例如，穆斯林和正统的犹太人)男性接触女性的经血可能是一种严重的禁忌，因此在特定人群中发现点滴出血会极大地限制激素避孕的使用。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可以是能够阻断精子穿过黏液的非激素避孕药物。黏液中Ab的主要效应功能是阻止外源实体如病毒和高能动细菌(highlymotile bacteria)的前进运动(forward motion)，并阻止它们到达靶细胞。该功能可以以两种方式实现。第一，当外源实体的浓度高到使得异物经常碰撞时，Ab可以将两个或更多个异物交联在一起，这不仅导致流体动力直径的增加，而且更重要地是有效中和游动异物的净向前运动。该过程通常称为凝集(参见，例如，图3A)。其次，当异物的浓度适度使得异物之间的碰撞相对不频繁时，Ab可以通过经由多个Fc-黏蛋白键将外源物体直接交联至黏液中存在的黏蛋白基质来固定(参见，例如，图3B)。该过程在本文中称为黏液捕获(muco-trapping)，至今仍未被广泛认知，因为长久以来各Ab分子与黏蛋白之间的亲和力被认为太弱而无法有效地将个体异物结合至黏蛋白。经阴道给药的抗原特异性IgG可通过在病毒与黏蛋白网之间形成多个弱粘合键(类似于具有单个弱钩的
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贴剂)而捕获黏液中的病毒。IgG介导的捕获有效地减少了病毒到达靶细胞的通量并直接阻断了小鼠中的阴道疱疹传播。
精子在雌性生殖道中的浓度变化很大，射精后精液中的精子浓度最高，而在越远的部位(例如子宫颈管)精子浓度越低。因此，理想的人避孕Ab(HCA，即能够阻断精子穿过黏液并阻止精子到达卵子的Ab分子)应当利用黏液中的凝集和捕获中的一种或两种。诸如sIgA和IgM等多价Ig的凝集效力明显强于IgG(IgM的凝集效力比IgG强约1000倍)。遗憾的是，大规模生产IgM或sIgA仍格外具挑战性，并且IgG代表了正在临床开发的Ab的主要同种型。然而，使用IgG可能是有益的。
与目前的基于单体IgG1的HCA(参见，例如，JPS638400A)相比，本文通过工程化可以更有效地凝集精子的多聚体HCA描述了具有更高凝集效力的具有多个Fab重复的合成粘合剂。
因此，本文描述了具有增强的凝集效力的多聚体HCA构建体(例如，具有多个Fab重复的合成粘合剂)。这些合成粘合剂可以包括来自人IgM的Fab，其结合仅限于男性生殖道中的精子和细胞的独特抗原CD52g，并且似乎对所有男性都是普遍的(参见，例如，Norton等人，Tissue Antigens 2002,60:354-364,August 14,2002)。这种Fab可用作HCA分子(例如，合成粘合剂)的基础。如上所述，可以形成具有多个Fab重复构建体的不同合成粘合剂，其包括相对于传统IgG增加Fab结构域的化合价，同时保持其天然黏液捕获效力。上述不同的合成粘合剂可包括：Fab-IgG、IgG-Fab、Fab-IgG-Fab和Fab-IgG-Fab-Fab；核心IgG可作为对照。参见上述图1A-1G。测试所有这些合成粘合剂构建体的表达和活性，包括(i)ELISA和生物膜层干涉技术(biolayer interferometry)测定抗原亲和力，(ii)凝胶电泳和SEC评估额外Fab结构域的掺入，以及(iii)验证使用常规蛋白A/G柱纯化不同HCA构建体的能力。
本文描述了具有多个Fab重复的合成粘合剂，其可以如以上关于图1A-1G所讨论的那样形成。例如，在图1A中，核心抗体可以是如下面更详细描述的靶向CD52g聚糖的HCA-UNC抗体的IgG形式。在一些变化形式中，具有多个Fab重复的合成粘合剂包括核心IgG和附着于氨基末端(如图1B所示)或羧基末端(如图1C所示)的一对额外Fab拷贝(从所述IgG核心拷贝)。在一些变化形式中，额外的Fab拷贝附着于氨基和/或羧基末端的任一个或两个，如图1D(额外Fab拷贝位于氨基和羧基末端)和图1E(两个额外Fab拷贝位于氨基末端且四个额外Fab拷贝位于羧基末端)所示。图1G示出了这些结构的实例。所附序列表提供了这五种结构中的每一种的序列的实例。例如，SEQ ID NO:9是全长Fab-IgG重链部分的示例性列表，而SEQ ID No:13是相应的全长Fab-IgG轻链氨基酸序列。类似地，SEQ ID No:15和SEQ ID No:19分别示出了具有多个Fab重复的IgG-Fab合成粘合剂的重链和轻链的氨基酸序列的实例。SEQ ID No:21和SEQ ID No:25分别示出了具有多个Fab重复的Fab-IgG-Fab合成粘合剂的重链和轻链的氨基酸序列的实例。此外，SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:31分别示出了具有多个Fab重复的Fab-IgG-Fab-Fab合成粘合剂的重链和轻链的氨基酸序列的实例。
相对于彼此以及相对于核心IgG(例如，由SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:7的氨基酸序列编码的IgG)检测这些具有多个Fab重复的各种合成粘合剂。还相对于单链可变片段(scFv)部分或骆驼源纳米抗体检测了这些合成粘合剂。基于scFv的多聚Ab构建体通常受限于低稳定性、异源表达以及由于去除全长Fab中存在的CH1/CL接触面(interface)而导致的亲和力和特异性降低(图9)。相反，具有多个Fab重复的合成粘合剂表现出相对于靶向相同抗原的HCA-UNC增强的凝集效力。这些具有多个Fab重复的合成粘合剂具有增加的Fab化合价、跨度和方向分离性(完全相反的方向)。因为所有Fab都结合相同的靶标表位并具有基本上相同的氨基酸，所以合成粘合剂不受重链和轻链的不正确的配对的限制，该配对需要使用通常用于工程化靶向两个不同表位的多聚体双特异性抗体的基于scFv的设计。相反，这些多聚Ab构建体(具有多个Fab重复的合成粘合剂)将完整Fab结构域连接至IgG。这些基于Fab的HCA构建体将可能导致与基于scFv的构建体相比提高的稳定性和可制造性，保留对特定表位的结合亲和力并保留Fc-黏蛋白亲和力。
例如，使用Fab-IgG(具有多个Fab重复的合成粘合剂的一种形式)的初始研究显示这些分子可以使用工业标准技术表达和纯化，同时避免形成基于scFv的多聚体构建体通常观察到的聚集体，如图10所示，其显示了单步蛋白A纯化后IgG(下图)、scFv-IgG(中间图)和Fab-IgG(上图)的分析尺寸排阻层析结果。IgG和Fab-IgG形式都在它们的预期分子量处显示了单个尖锐的峰，而scFv-IgG显示了高分子量聚集体的形成。
因此，具有多个Fab重复的合成粘合剂可用于避孕用的基于IgG的HCA。CVM中存在的IgG比IgA多至少10倍，这表明IgG是保护人阴道的最佳mAb。
未稀释的生理性人类生殖器分泌物被用于具有多个靶向CD52g表位的Fab重复的合成粘合剂的精子和STI捕获的离体研究。观察到在新鲜的、受干扰最小的CVM和CM离体样本中的精子捕获，确保我们的观察结果尽可能密切地反映出生理状况。
使用标准克隆方法产生被构建为多聚体HCA构建体(例如，Fab-IgG、IgG-Fab、Fab-IgG-Fab)的具有多个Fab重复的合成粘合剂。简单地说，合成编码HCA VH/VL结构域和柔性接头(GSSSSx3(SEQIDNO：32))的基因，并克隆到自身的(in-house)HCA IgG1哺乳动物表达载体中。
通过在30mL的Expi293细胞培养物中瞬时表达来使构建体表达，并且使用蛋白-A亲和层析来纯化相应的HCA构建体。通过SDS-PAGE验证纯度(图11A；注意：我们比较了自身IgG HCA和通过Mapp Biopharmaceutical独立制备的IgG HCA)。我们还对每个多聚体HCA构建体进行了尺寸排阻层析/多角度光散射(SEC/MALS)，以确保所需抗体构建体的均一表达(图11B)。在所有情况下，构建体都以高产率表达，且聚集最小(<10％)。
被构建为多聚体HCA的具有多个Fab重复的合成粘合剂结合精子并使精子凝集。显示多聚体HCA结合精子。我们首先使用等摩尔量的每种构建体(1.5nM)进行全精子ELISA测定，然后使用抗Fc HRP二次检测。我们的初步测定显示，所测试的每种多聚体构建体(Fab-IgG、IgG-Fab、Fab-IgG-Fab)具有与天然IgG相当的(如不优于天然IgG的话)结合精子的能力(图12A)，表明新的HCA构建体(具有针对CD52g的多个Fab重复的合成粘合剂)的确可以结合精子。为了进一步验证HCA构建体可介导凝集，我们将IgG-Fab HCA和PBS混合到精液中，并在1分钟后对精液中细胞的分布进行成像，并发现IgG-Fab HCA有效使细胞凝集(图12B-12C)。图12B显示了PBS对照，而图12C显示了1分钟后由具有针对CD52g(IgG-Fab)的多个Fab重复的合成粘合剂引起的凝集，如通过进行性运动精子比例所定量的。
黏液捕获用IgG-Fab构建体展示。如使用抗HER2 x抗PEG IgG-Fab的显微镜研究所确认的，具有多个Fab结构域的合成粘合剂保留了其黏液捕获效力，表明该构建体在人类CVM中可以固定～100nm PEG包被的纳米颗粒(PS-PEG)。抗PEG Fab部分是功能性的并且结合目的抗原(PEG)，并且IgG-Fab结构保留了足够的黏液亲和力以在黏液中捕获病毒尺寸的颗粒。这在图13中示出。天然CVM(无Ab)以及用对照IgG-Fab(抗HER2x抗VSVG)处理的CVM中的PS-PEG均表现出仅比它们在纯水中的理论速率慢几倍的快速扩散。相比而言，将结合PEG的IgG-Fab添加至CVM导致PS-PEG的大量捕获，可移动颗粒的比例从71％降低至仅3％，与黏膜粘附的未包被纳米颗粒(PS-COOH)相当。捕获程度与我们以前用天然抗PEG IgG证明的水平相似。这些结果强调了IgG-Fab和具有多个Fab的其他合成粘合剂促进在黏液中捕获异物(包括病毒、细菌和精子)的效力。
新鲜的、受干扰最小的CVM和CM的离体样本中观察到的精子捕获和凝集提供了生理学上重要的证据。
如本文所讨论的，具有针对CD52g的表位的多个Fab重复的各种合成粘合剂已经显示出天然IgGl HCA(例如，IgG-UNC)的凝集效力。构建并检测了如图1B-1F所示的不同多价(即每个分子中Fab结构域的数目)的HCA构建体。初步结果表明通过沿IgG骨架增加CD52g结合Fab结构域的数目将实现更大的凝集效力，并且我们用我们的Fab-IgG-Fab-Fab和Fab-Fab-IgG-Fab-Fab构建体可以实现与天然IgM分子相当的凝集效力。对Fab-IgG和IgG-Fab形式(仅在附加Fab片段的位置上不同)的评估提供了有关精子凝集和捕获效力中几何方向和空间位置(尤其是Fab的间隔，或“跨越性(spanning)”容量)的重要性的其他信息。通过使用完整的Fab结构域而不是scFv，我们预期多聚体HCA构建体保持稳定，并且每个Fab结构域对CD52g抗原具有相当高的亲和力。我们预期具有与天然IgG分子相同的Fc-N-聚糖谱的HCA构建体将具有同等的黏液捕获效力。
使用基线IgG1 HCA构建体在重链的不同位置掺入针对CD52g的额外的相同Fab结构域。可对IgG对照抗体和各基于Fab的多聚体抗体的重链和轻链基因序列进行密码子优化、合成，然后克隆到哺乳动物表达载体中(Integrated DNA Technologies)。对于每种形式，Fab组分可通过柔性肽接头(例如，包括包含n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列的柔性接头，其中n为3-8个氨基酸，例如6个重复的GSSSS单元(SEQ ID NO:33)、GGGGS单元(SEQ ID NO:34)等)隔开。
在验证克隆后，小批量(30-60mL)的每种HCA构建体将通过瞬时转染在Expi293哺乳动物细胞中表达。细胞生长3天后，通过蛋白A亲和层析从培养上清液中纯化各种HCA构建体。使用280nm处的吸光度和以人IgG作为标准的BCA法来定量表达产量，并使用在还原和非还原条件下的SDS-PAGE电泳评估纯化产物的纯度。可以验证每种多聚体HCA形式的正确组装、热稳定性和结合动力学；例如，正确的组装可以通过尺寸排阻层析/多角度光散射(Wyatt DAWN HELEOS II；参见，例如图10)通过分子量评估来确定。热稳定性(Tm)可以使用差示扫描量热法(MicroCal VP-DSC；参见图9)来测量。在没有优化的情况下，表达和纯化出少于95％正确组装产物的抗体，或在超过10℃的条件下不稳定的来自亲本序列的抗体在没有优化的情况下将不被进一步测试。
全精子ELISA可用于定量不同的HCA mAb。首先，将高亲和力96孔半区板(ThermoScientific,Rockford,IL)用每孔50μL的106/ml的精子(使用细胞计数器测量)在4℃包被过夜。将板用含0.05％Tween的PBS(PBS-T)洗涤3次，用5％牛奶封闭至少1小时，并用每种HCA mAb的连续稀释液孵育至少2小时。在3次PBS-T洗涤后，将板与F(ab')2抗人IgG Fc(山羊)-HRP缀合物(709-1317；Rockland,Gilbertsville,PA)孵育1小时。用1-Step Ultra TMB底物(Thermo Scientific,Rockford,IL)使HRP缀合的IgG显色15分钟，然后用2N硫酸猝灭。使用BioTek Synergy 2酶标仪在450nm处测量吸光度。也可以使用浸入TritonX-100处理过的精子裂解物中的抗hIgG Fc捕获生物传感器通过生物膜层干涉仪(Octet Red384)评估与精子的结合动力学。我们预计HCA将结构完整、稳定并结合精子。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂源自免疫不孕但其他方面健康的女性(Isojim等人)的完全人源抗体。表位可包括糖基化结构；并且可以特异性地识别聚-N-乙酰基乳糖胺区域(例如，重复的聚-N-乙酰基乳糖胺结构)诸如H6-3C4的抗体可以结合内部的一段N-乙酰基乳糖胺，并且与针对血型i的抗体不同，它不受末端唾液酸化的影响。这种糖型(称为CD52g)被认为对雄性来源的细胞(例如，精子)特有的。因此，Fab可以结合这种CD52g(参见，SEQ ID NO:1)糖蛋白，该糖蛋白是男性生殖道特有的并且存在于精液中的所有精子和其他细胞的表面上。尽管CD52g与白细胞CD52共享短肽骨架，但用作核心IgG的HCA-UNC不结合CD52，而仅结合仅由衬在附睾、输精管和精囊腔内的上皮细胞产生和分泌的独特形式的CD52g。CD52g含有糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol，GPI)锚，并且当它们在附睾中成熟时被转移至精子的质膜。如图8A-8B所示，HCA还共同凝集精液中的白细胞；这些细胞是潜在的HIV感染的“特洛伊木马白细胞(Trojan Horse leukocyte)”，其可以作为HIV传播的活动载体，意味着HCA还可以提供一些针对细胞介导的传播的保护。WHO发起的抗精子疫苗研讨会已将CD52g鉴定为有前景的避孕疫苗候选物，这是由于其在男性生殖道中的独特表达、有效的抗原性以及其在原本健康的个体中诱导不育的能力。重要的是，这种HCA靶标似乎在男性中普遍存在：我们测试了来自100名男性的新鲜精液样品(73％白种人、26％非裔美国人和1％亚洲非洲人)，并且所有样品中>90％的精子都在数秒内被原型HCA凝集。
本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂可以在CHO细胞、烟草属植物和木霉属中产生(对于后两者，它们可以在含有人糖基化途径的修饰的植物或酵母中产生，并且能够产生全人源mAb，例如烟草中的ZMapp)。
用于避孕的具有多个Fab重复的合成粘合剂(例如，HCA)的总剂量可以是例如，约20-80mg以在CVM中维持约400μg/mL HCA，持续28天。本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂中将凝集效力比例如HCA-UNC提高仅10倍，可以允许递送明显更低的浓度。
然后测试这些具有多个Fab重复的合成粘合剂，以在体外测量精子凝集和捕获效力。测试了不同的具有多个Fab重复的合成粘合剂(在本实例中称为HCA构建体)的精子凝集和捕获效力。用新鲜的人宫颈阴道黏液(CVM)和中期宫颈黏液(CM)测量用不同HCA构建体处理的黏液中数千个单精细胞的实时运动性，以确定黏液中精子的运动性和移动精子的比例因被凝集和黏液捕获而随时间降低的准确程度。
可进一步用绵羊阴道模型评估HCA通过凝集和/或捕获阴道黏液中的人精子来降低游离活动精子的效力。绵羊阴道的解剖结构与人类阴道相似，并且是临床上评估阴道产品的最佳可用动物模型。为了检查潜在的体内功效，可以在精液给药后的不同时间，例如沉积后2分钟，评估对绵羊阴道中新鲜人精液的凝集和捕获。
精子必须游过黏液到达卵子。在没有其他已知的不孕原因的一些不孕女性中，已经分离出结合活精子的表面并阻断精子穿过黏液的Ab，其中在天然存在的Ab中IgM提供凝集和捕获的最有效联合(参见，例如，Isojima等人，“Establishment andcharacterization of a human hybridoma secreting monoclonal antibody with hightiters of sperm immobilizing and agglutinating activities against humanseminal plasma)”J Reprod Immunol,1987.10(1):67-78；和Tsuji等人，“Human spermcarbohydrate antigens defined by an antisperm human monoclonal antibodyderived from an infertile woman bearing antisperm antibodies in her serum”JExp Med,1988.168(1):p.343-56.PMCID:2188971)。与人体研究相吻合的是，动物研究还表明，结合阴道精子的IgG、sIgA和IgM可以提供避孕措施。这种不孕症的天然机制可用于设计具有多个Fab重复的合成粘合剂，以使非激素避孕成为可能。使用称为HCA-UNC(或“原始HCA(HCA original)”)的全人源mAb来形成用作避孕药物的具有多个Fab重复的合成粘合剂的核心IgG，该全人源mAb结合高度认可且充分表征的仅普遍存在于男性生殖道中的精子和细胞表面上的抗原靶标。
构建了具有多个Fab结构域与亲本IgG分子连接的多聚体HCA构建体(例如，具有多个Fab重复的合成粘合剂)，其总体目标是工程化一种这样的HCA，其具有IgM样凝集效力同时仍然适合于使用例如蛋白质A/G的商业IgG纯化方法，以通过HCA实现有效的局部非激素的避孕药物，这是有成本效益的并且是全球范围内的女性迫切需要的。
在免疫不孕的情况下，抗体可以结合精子表面上的抗原。免疫不育症泛指可导致不孕的免疫机制并且可由多种抗体介导，包括抗磷脂抗体、抗甲状腺抗体和抗精子抗体(ASA)。ASA指可以结合任何精子相关抗原的广谱抗体。绝大多数天然存在的ASA结合仅在精子死亡后可触及的细胞质抗原，且因此与避孕无关。然而，从免疫不孕女性中分离出的某些Ab即使不直接阻断精子-卵子相互作用也可引起不孕，包括Isojima从不孕女性中分离出的IgM分子作为我们目前HCA的基础。可用作本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂的基础的HCA-UNC结合雄性生殖道中的精子和细胞所特有的可触及的表面抗原，并且可通过凝集和/或固定黏液中的精子来防止精子到达卵子。事实上，部分原因正是由于黏液中结合精子的抗体所赋予的屏障功能增强，因此经常在不孕症的临床评估中测量CM中的精子活力。使用本文所述的原理，其他的ASA可以形成其他HCA的基础(例如，核心IgG)。
阴道递送的HCA可能提供高度有效和安全的避孕措施。精子必须游过黏液才能到达卵子并使其受精。令人惊讶的是，宫颈黏液中精子活力差通常与不育症良好相关，并且黏液中的精子运动性仍然是诊断不育症的金标准试验。引申开来，通过能够凝集和固定黏液中的个体精子的抗体来阻止黏液中的精子运动性因直接减少了到达卵子的精子的数量而应当提供一种有效的避孕措施。实际上，这种结合精子的Ab是从不孕女性的宫颈阴道分泌物中分离的。研究已经表明，这些结合精子的Ab(IgG、IgA或IgM)可以捕获宫颈黏液中的剧烈活动精子而不干扰精子活力装置(Ab包被的精子将在缓冲液中自由游动)，并且被捕获的精子在黏液中在适当位置颤动数小时直到它们死亡。这种“颤动现象(shakingphenomenon)”曾经是并且仍然是人类不孕不育症的原因的标准临床诊断。结合精子的Ab的局部递送在体内非常有效，在高繁殖力的兔子模型中，将卵子的受精率至少降低了95％。
包被雌性生殖道的黏液的体积(约1-2mL)远小于循环中的血液体积(约5,000mL)。因此，通过局部递送HCA，可以用比全身递送低得多的HCA量达到避孕浓度。经阴道递送的mAb在体循环中吸收差，从而进一步降低了维持雌性生殖道内避孕水平所需的HCA量。
递送到阴道中的HCA极可能不产生全身毒性，因为：HCA是全人源IgG；HCA不可能被吸收到体循环中，阴道对免疫的反应差，并且HCA的靶抗原只存在来源于雄性生殖道的细胞中，而在雌性中不存在。异常有限的全身吸收可为HCA带来足够的安全性。阴道分泌物具有非常低的补体活性，并且由于来自共生乳杆菌(Lactobacilli)的乳酸将阴道持续酸化至pH～4而具有极少(如果有的话)的活白细胞(白细胞在pH<6时被有效固定或杀死)。因此，HCA，特别是如果以低于CVM中存在的总IgG的剂量给药，不可能在局部阴道组织中引发毒性或炎症，但在阴道pH下仍然有效。
黏蛋白与具有多个Fab重复的合成粘合剂的弱的和瞬时的键合可允许合成粘合剂大部分时间在黏液中自由扩散并在病原体上快速累积。Ab/病原体复合物上所结合的Ab的阵列继而可以与黏蛋白网形成足够数量的弱交联来以永恒的亲合力捕获病原体。IgG和黏蛋白之间的相互作用似乎通过IgG-Fc上的N-聚糖发生。IgG可用于捕获甚至是高度活动的细菌病原体，并能够捕获在不同的黏液分泌物(包括来自气道以及GI和雌性生殖道的黏液分泌物)中的病原体，强调了通过IgG-黏蛋白亲和性捕获病原体是普遍的黏膜保护机制。我们的多聚体HCA构建体相对于IgG保留了黏液捕获能力，并有效地将固定黏液中的单个精子。
释放装置实例：阴道内环
图6A-6C描述了可以与本文所述的具有多个Fab重复的合成粘合剂一起使用的胶囊-IVR(阴道内环)系统。该递送装置利用常规的制丸工艺来制造胶囊，该胶囊可被包埋在IVR中并且促进合成粘合剂的缓释。在图6A中，装置是可以放置在阴道(例如，子宫内)中的环，并且多个延时释放胶囊(图6B)可以装载在其上。当浸入37℃的人CVM(CVM每3-4天替换一次)时，所述胶囊显示维持具有多个Fab重复的合成粘合剂的结构稳定性至少4周。这在图6C中示出，其显示了一个月内的每日和累积释放。释放速率可以在很宽的释放速率范围，包括在低至0.1-0.3mg/天的范围(图4C；制剂D)内轻松调节，持续28天或更长时间。还可以配制胶囊以在第2-6天窗口期间提供更大的释放速率(制剂A&B)；还可以将胶囊配制为在第2-6天的窗口期间提供更高的释放速率(制剂A和B)；可能希望紧临受精窗口之前递送更大剂量的HCA。被构建为如本文所述的HCA的具有多个Fab重复的合成粘合剂当装载到合适的IVR系统中时，将实现可靠和安全的避孕产品，该产品不仅是非激素的，而且是经济上可行的，并且不需要每日或性交相伴的施用。
实施例：序列
如上所述，本文所述的合成粘合剂通常包括多个额外拷贝的Fab区。如以上在图1A-1G中描述的，这些合成粘合剂可以以核心IgG(包括Fc和Fab结构域)的各种不同构造排列，其中Fab结构域的重复拷贝(与核心IgG上的Fab结构域针对相同的靶标表位)连接在NH2和/或COOH的任一端或两端。任何Fab结构域可被使用，并且可以通过包含氨基酸序列的柔性接头与氨基或羧基末端连接，该氨基酸序列包含n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复，其中n为3-8。
作为一个实例，合成粘合剂可针对精子特异性表位的N-连接聚糖，称为CD52糖型(“CD52g”)。SEQ ID NO:1显示了对应于CD52g的氨基酸序列的一个实例(参见，例如，Diekman等人，FASEB Journal,vol.13:1303-1313,August 1999)。可以使用针对包括该序列的蛋白质的任何抗体的可变结构域(重链和/或轻链)，并将其构建为如本文所述的合成粘合剂。由SEQ ID NO:2-31描述的示例性合成粘合剂示出了这种针对精子特异性表位的抗体的实例。例如，针对精子特异性表位例如CD52g(例如，CD52的N-糖基化形式)的合成粘合剂包括重链和轻链。SEQ ID NO:2是针对CD52g表位的核心IgG的重链结构域的示例性DNA序列，且SEQ ID NO:3是IgG重链部分的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:4是重链Fab片段的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:5是重链的Fc片段的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:6是针对CD52g表位的核心IgG的轻链结构域的示例性DNA序列的实例。SEQ ID NO:7是针对CD52g表位的核心IgG的轻链结构域的氨基酸序列的实例。
SEQ ID NO:8至SEQ ID NO:13显示了合成粘合剂(例如，重组mAb)的重链和轻链部分的示例性DNA和氨基酸序列，该合成粘合剂可以降低黏液中精子的运动性，具有与图1B(例如，Fab-IgG)中所示相似的结构。SEQ ID NO:8是针对CD52g表位的Fab-IgG合成粘合剂的重链结构域的示例性DNA序列，且SEQ ID NO:9是Fab-IgG重链部分的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:10是合成粘合剂的重链的Fab片段的氨基酸序列的实例，该合成粘合剂包括从核心IgG的N-末端延伸的Fab。SEQ ID NO:11是重链的Fc片段的氨基酸序列的实例。SEQ IDNO:12是针对CD52g表位的核心IgG的轻链结构域的示例性DNA序列的实例。SEQ ID NO:13是合成粘合剂的轻链结构域的氨基酸序列的实例，该合成粘合剂包括从针对CD52g表位的核心IgG的N-末端延伸的Fab。
SEQ ID NO:14至SEQ ID NO:19显示了合成粘合剂(例如，重组mAb)的重链和轻链部分的示例性DNA和氨基酸序列，该合成粘合剂可以降低黏液中精子的运动性，具有与图1C(例如，IgG-Fab)中所示相似的结构。SEQ ID NO:14是针对CD52g表位的IgG-Fab合成粘合剂的重链结构域的示例性DNA序列，且SEQ ID NO:15是此类IgG-Fab重链部分的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:16是合成粘合剂的重链的Fab片段的氨基酸序列的实例，该合成粘合剂包括从核心IgG的N-末端延伸的Fab。SEQ ID NO:17是重链的Fc片段的氨基酸序列的实例。SEQID NO:18是针对CD52g表位的轻链结构域的示例性DNA序列的实例。SEQ ID NO:19是针对CD52g表位的合成粘合剂的轻链结构域的氨基酸序列的实例。
SEQ ID NO:20至SEQ ID NO:25显示了合成粘合剂(例如，重组mAb)的重链和轻链部分的示例性DNA和氨基酸序列，该合成粘合剂可以降低黏液中精子的运动性，具有与图1D(例如，Fab-IgG-Fab)中所示相似的结构。SEQ ID NO:20是针对CD52g表位的Fab-IgG-Fab合成粘合剂的重链结构域的示例性DNA序列，且SEQ ID NO:21是该Fab-IgG-Fab重链部分的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:22是针对CD52g表位的合成粘合剂的重链的Fab片段的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:23是针对CD52g表位的合成粘合剂的重链Fc片段的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:24是针对CD52g表位的轻链结构域的示例性DNA序列的实例。SEQ ID NO:25是针对CD52g表位的合成粘合剂的轻链结构域的氨基酸序列的实例。
SEQ ID NO:26至SEQ ID NO:31显示了合成粘合剂(例如，重组mAb)的重链和轻链部分的示例性DNA和氨基酸序列，该合成粘合剂可以降低黏液中精子的运动性，具有与图1E(例如，Fab-IgG-Fab-Fab)中所示相似的结构。SEQ ID NO:26是针对CD52g表位的Fab-IgG-Fab-Fab合成粘合剂的重链结构域的示例性DNA序列，且SEQ ID NO:27是此类Fab-IgG-Fab-Fab的重链部分的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:28是针对CD52g表位的合成粘合剂的重链的Fab片段的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:29是针对CD52g表位的合成粘合剂的重链Fc片段的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:30是针对CD52g表位的轻链结构域的示例性DNA序列的实例。SEQ ID NO:31是针对CD52g表位的合成粘合剂的轻链结构域的氨基酸序列的实例。
图14A和14B示出了序列表中所述的重链(图14A)和轻链(图14B)序列的氨基酸序列与种系序列(例如，天然IgG)的比较。列出了不同构建体从NH2到COOH末端的注释，其中IgG表示Fab-Fc。
SEQ ID NO:32至SEQ ID NO:38显示了具有Fab-Fab-IgG-Fab-Fab的结构的合成粘合剂(例如，重组mAb)的重链和轻链部分的示例性DNA和氨基酸序列，该合成粘合剂可以降低黏液中精子的运动性。SEQ ID NO:32是针对CD52g表位的Fab-Fab-IgG-Fab-Fab合成粘合剂的重链结构域的示例性DNA序列，且SEQ ID NO:33是该Fab-Fab-IgG-Fab-Fab重链部分的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:34是抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab合成蛋白的轻链的DNA序列的实例。SEQ ID NO:35是抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab合成粘合剂的氨基酸序列的实例。SEQ ID NO:36是Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)部分的Fab片段的氨基酸序列，而SEQID NO:37是Fab-Fab-IgG-Fab-Fab的抗CD52g Fab片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:38是针对CD52g表位的合成粘合剂的重链的Fc片段的氨基酸序列的实例，包括被构建为Fab-Fab-IgG-Fab-Fab。
在另一个实例中，合成粘合剂可以针对克雷伯氏菌属(例如具有抗克雷伯氏菌属活性)，该合成粘合剂尤其可以减少如本文所述的可以穿过黏液和/或自由分裂的病原体的比例。例如，可以使用特异性识别肺炎克雷伯氏菌Ol的表位的人或人源化IgG(mAb)。例如，SEQ ID NO:39至SEQ ID NO:45所示的抗克雷伯氏菌属mAb针对肺炎克雷伯氏菌的D-半乳聚糖-II抗原；可替代使用其他表位或其他抗克雷伯氏菌属的mAb。例如，SEQ ID NO:39是抗克雷伯氏菌属IgG的重链的多核苷酸(DNA)序列。SEQ ID NO:40是抗克雷伯氏菌属重链的氨基酸序列。SEQ ID NO:43是抗克雷伯氏菌属IgG轻链的多核苷酸(DNA)序列；SEQ ID NO:44是抗克雷伯氏菌属轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:45是该抗克雷伯氏菌属IgG轻链的Fab片段的氨基酸序列，而SEQ ID NO:41是抗克雷伯氏菌属重链的Fab片段的氨基酸序列，且SEQ IDNO:42是该抗克雷伯氏菌属抗体重链的Fc片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:46至SEQ ID NO:52描述了如本文所述构建为Fab-IgG构建体(与图1B相似)的对克雷伯氏菌属特异的合成粘合剂的实例。SEQ ID NO:46是抗克雷伯氏菌属Fab-IgG重链的DNA序列，而SEQ ID NO:47是Fab-IgG重链的氨基酸序列。SEQ ID NO:48是Fab-IgG重链的该抗克雷伯氏菌属Fab片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:49是IgG-Fab的Fc片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:50是Fab-IgG轻链的DNA序列，且SEQ ID NO:51是Fab-IgG轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:52显示了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:53至SEQ ID NO:59描述了构建为IgG-Fab构建体(与图1C相似)的对克雷伯氏菌属特异的合成粘合剂的另一实例。SEQ ID NO:53是抗克雷伯氏菌属IgG-Fab重链的DNA序列，而SEQ ID NO:54是IgG-Fab重链的氨基酸序列。SEQ ID NO:55是IgG-Fab重链的抗克雷伯氏菌属Fab片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:56是IgG-Fab的Fc片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:57是该IgG-Fab合成粘合剂轻链的DNA序列，而SEQ ID NO:58是IgG-Fab轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:59显示了IgG-Fab轻链的Fab片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:60至SEQ ID NO:66描述了如本文所述构建为Fab-IgG-Fab构建体(与图1D相似)的对克雷伯氏菌属特异的合成粘合剂的实例。SEQ ID NO:60是抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab重链的DNA序列，且SEQ ID NO:61是Fab-IgG-Fab重链的氨基酸序列。SEQ IDNO:62是Fab-IgG-Fab重链的该抗克雷伯氏菌属Fab片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:63是Fab-IgG-Fab的Fc片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:64是Fab-IgG-Fab轻链的DNA序列，且SEQID NO:65是Fab-IgG-Fab轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:66显示了Fab-IgG-Fab轻链的Fab片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:160至SEQ ID NO:166描述了如本文所述构建为Fab-Fab-IgG-Fab-Fab构建体(与图1F相似)的对克雷伯氏菌属特异的合成粘合剂的实例。SEQ ID NO:160是抗克雷伯氏菌属Fab-Fab-IgG-Fab-Fab重链的DNA序列，且SEQ ID NO:161是Fab-Fab-IgG-Fab-Fab重链的氨基酸序列。SEQ ID NO:162是Fab-Fab-IgG-Fab-Fab重链的该抗克雷伯氏菌属Fab片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:163是Fab-Fab-IgG-Fab-Fab的Fc片段的氨基酸序列。SEQ ID NO:164为Fab-Fab-IgG-Fab-Fab轻链的DNA序列，且SEQ ID NO:165为Fab-Fab-IgG-Fab-Fab轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:166显示了Fab-Fab-IgG-Fab-Fab轻链的Fab片段的氨基酸序列。
在另一个实例中，合成粘合剂可以针对沙门氏菌属(例如具有抗沙门氏菌属活性)，该合成粘合剂尤其可以如本文所述的减少可以穿过黏液和/或自由分裂的病原体的比例。例如，可以使用特异性识别沙门氏菌属的表位的人或人源化IgG(mAb)。例如，SEQ IDNO:67至SEQ ID NO:73所示的抗沙门氏菌属mAb针对沙门氏菌属的抗原。可以使用任何合适的表位或其他抗沙门氏菌属mAb。例如，SEQ ID NO:67是抗沙门氏菌属IgG重链的多核苷酸(DNA)序列。SEQ ID NO:68是抗沙门氏菌属重链的氨基酸序列。SEQ ID NO:71是抗沙门氏菌属IgG轻链的多核苷酸(DNA)序列；SEQ IDNO：72是抗沙门氏菌属轻链的氨基酸序列。SEQ IDNO:69是该抗沙门氏菌属IgG重链的Fab片段的氨基酸序列，而SEQ ID NO:73是抗沙门氏菌属轻链的Fab片段的氨基酸序列，且SEQ ID NO:70是该抗沙门氏菌属抗体重链的Fc片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:74至SEQ ID NO:80描述了Fab-IgG合成抗沙门氏菌属LP粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:74中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ IDNO:75中)。SEQ ID NO:76提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:77提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:78是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:79中。SEQ ID NO:80列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:81至SEQ ID NO:87描述了IgG-Fab合成抗沙门氏菌属LPS粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:81中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ IDNO:82中)。SEQ ID NO:83提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:84提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:85是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:86中。SEQ ID NO:87列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:88至SEQ ID NO:94描述了Fab-IgG-Fab合成抗沙门氏菌属LPS粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:88中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQID NO:89中)。SEQ ID NO:90提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:91提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:92是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:93中。SEQ ID NO:94列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:95至SEQ ID NO:101描述了Fab-Fab-IgG-Fab-Fab合成抗沙门氏菌属LPS粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:95中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ ID NO:96中)。SEQ ID NO:97提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:98提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:99是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:100中。SEQ ID NO:101列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
在另一个实例中，合成粘合剂可以针对淋病奈瑟球菌(例如具有抗淋病活性)，该合成粘合剂尤其可以如本文所述的减少可以穿过黏液和/或自由分裂的病原体的比例。例如，可以使用特异性识别淋病奈瑟球菌表位的人或人源化IgG(mAb)。例如，SEQ ID NO:102至SEQ ID NO:108所示的抗淋病mAb(2C7)针对淋病奈瑟球菌的抗原。可以使用任何合适的表位或其他抗淋球菌mAb。例如，SEQ ID NO:102是抗淋球菌IgG重链的多核苷酸(DNA)序列。SEQ ID NO:103是抗淋球菌重链的氨基酸序列。SEQ ID NO:106是抗淋球菌IgG轻链的多核苷酸(DNA)序列；SEQ IDNO：107是抗淋球菌轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:104是该抗淋球菌IgG重链的Fab片段的氨基酸序列，而SEQ ID NO:108是抗淋球菌轻链的Fab片段的氨基酸序列，且SEQ ID NO:105是该抗淋球菌抗体重链的Fc片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:109至SEQ ID NO:115描述了Fab-IgG合成抗淋球菌(2C7)粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:109中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ IDNO:110中)。SEQ ID NO:111提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:112提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:113是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:114中。SEQ ID NO:115列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:116至SEQ ID NO:122描述了IgG-Fab合成抗淋球菌粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:116中的合成IgG-Fab重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ ID NO:117中)。SEQ ID NO:118提供了IgG-Fab重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:119提供了IgG-Fab的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:120是IgG-Fab(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:121中。SEQ ID NO:122列出了IgG-Fab轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:123至SEQ ID NO:129描述了Fab-IgG-Fab合成抗淋球菌粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:123中的合成Fab-IgG-Fab重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ ID NO:124中)。SEQ ID NO:125提供了Fab-IgG-Fab重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:126提供了Fab-IgG-Fab的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:127是Fab-IgG-Fab(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:128中。SEQ ID NO:129列出了Fab-IgG-Fab轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:153至SEQ ID NO:159描述了Fab-Fab-IgG-Fab-Fab合成抗淋球菌粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:153中的合成Fab-Fab-IgG-Fab-Fab重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ ID NO:154中)。SEQ ID NO:155提供了Fab-Fab-IgG-Fab-Fab重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:156提供了Fab-Fab-IgG-Fab-Fab的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:157是Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ IDNO:158中。SEQ ID NO:159列出了Fab-Fab-IgG-Fab-Fab轻链的Fab片段的氨基酸残基。
在另一个实例中，合成粘合剂可以针对呼吸道合胞病毒(RSV)，该合成粘合剂尤其可以如本文所述的减少可以穿过黏液的病原体的比例。例如，可使用特异性识别RSV表位的人或人源化IgG(mAb)。例如，SEQ ID NO:132至SEQ ID NO:138示出了抗RSV mAb(以公开的莫维珠单抗为模型)并针对RSV抗原。可以使用任何合适的表位或其他抗RSV mAb。SEQ IDNO:132是抗RSV IgG的重链的多核苷酸(DNA)序列。SEQ ID NO:133是抗RSV重链的氨基酸序列。SEQ IDNO：136是抗RSV IgG的轻链的多核苷酸(DNA)序列；SEQ ID NO:137是抗RSV轻链的氨基酸序列。SEQ ID NO:134是该抗RSV IgG重链的Fab片段的氨基酸序列，而SEQ ID NO:138是抗RSV轻链的Fab片段的氨基酸序列，且SEQ ID NO:135是该抗RSV抗体重链的Fc片段的氨基酸序列。
SEQ ID NO:139至SEQ ID NO:145描述了Fab-IgG合成抗RSV粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:139中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ ID NO:140中)。SEQ ID NO:141提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:142提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:143是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:144中。SEQ ID NO:145列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
SEQ ID NO:146至SEQ ID NO:152描述了IgG-Fab合成抗RSV粘合剂的实例，包括SEQ ID NO:146中的合成Fab-IgG重链的DNA序列(该重链的氨基酸序列示于SEQ ID NO:147中)。SEQ ID NO:148提供了Fab-IgG重链的Fab片段的氨基酸残基，且SEQ ID NO:149提供了Fab-IgG的Fc片段的氨基酸残基。SEQ ID NO:150是Fab-IgG(轻链)部分的DNA序列，且氨基酸序列在SEQ ID NO:151中。SEQ ID NO:152列出了Fab-IgG轻链的Fab片段的氨基酸残基。
其他的合成粘合剂(例如多聚体构建体)可以针对铜绿假单胞菌、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌和艰难梭菌。公开了抗这些(和其他病原体)的表面抗原的IgGmAb的序列，并且可以形成如本文所述的合成粘合剂。因此，尽管以上描述了可以减少可穿过黏液和/或自由分裂的病原体的比例的示例性合成粘合剂的特定序列，但是本领域技术人员可以理解，本说明书总体上教导了从IgG，特别是针对表面抗原的IgG制备合成粘合剂的方法和使用合成粘合剂的方法。
实施例
本文所述的合成粘合剂是具有一对Fab结构域的合成的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其具有一对Fab结构域，额外的针对相同抗原的Fab结构域通过柔性接头串联连接在该IgG的Fab结构域的一端或两端和/或该IgG的Fc区。已经发现所得到的合成粘合剂显著降低了靶标(例如病原体，诸如细菌、病毒、酵母等和/或精子等)在黏液中的运动性。发现合成粘合剂在包括雾化形式在内的多种递送形式中是稳定的，并且可以使用本文所述的方法和技术容易地生产。
例如，进行的研究表明，几乎对于与靶标(例如精子或病原体(病毒、细菌、酵母、霉菌等))的抗原(或抗原区域)特异性结合的任何起始IgG(例如，IgGl mAb)，可以产生如本文所述的合成粘合剂。在一些变化形式中，使用优化工具，例如GeneArt(ThermoFisherScientific)提供的工具，针对智人对起始IgG1 mAb的可变重链和轻链，在一些情况下还对重链和轻链恒定区序列进行密码子优化。VH、CH1、VL和CL的密码子优化的序列可用来设计组装本文所述的合成粘合剂所需的基因片段(例如，使用诸如Benchling软件的软件)。
例如，为了组装Fab-IgG合成粘合剂，设计包含VH-CH1-6xG4S-接头-VH的基因片段以克隆到包含CH1-CH2-CH3 DNA序列的哺乳动物表达载体中。类似地，为了组装Fab-Fab-IgG-Fab-Fab，设计包含VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH和6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1的基因片段以进一步克隆到IgGl表达载体中。在一些实例中，为了最小化可能由于重复序列而发生的合成问题，可以例如对重复片段的DNA序列进行人工密码子优化，从而使DNA序列的可变性增加并随后降低基因合成的复杂性。密码子优化后，基因序列可以通过所提供的复杂度分析工具(例如，诸如IDT(Integrated DNA Technologies)提供的工具)进一步处理以获得复杂度得分(complexity score)。已知经由GeneArt基因合成(GeneArt Gene synthesis)容易且成功地合成复杂度得分<25的基因片段。
可以生成编码合成粘合剂的表达载体。例如，编码轻链(由VL和CL(Cλ)DNA序列组成的基因片段)的表达质粒可以使用定制的基因合成服务(例如，Integrated DNATechnologies)合成，并使用例如KpnI(5')和EcoRI(3')限制性位点克隆到空的哺乳动物表达载体中。为了构建编码合成粘合剂的重链(HC)的表达质粒，在一些实例中，使用
Figure BDA0003076814020000691
基因合成服务(ThermoFisher Scientific)合成由VH-CH1-6xG4S接头-VH、VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH、6xG4S接头-VH-CH1和6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1 DNA序列组成的四个克隆载体。在一些实例中，为了构建编码IgG的HC的表达质粒，使用正向引物5'-TAAGCAGGTACCGCCACCATGAAGTG-3'(SEQ ID NO:130)和反向引物5'-TGCTTAGCTAGCTGGAGAAACTGTC-3'(SEQ ID NO:131)从包含VH-CH1-6xG4S接头-VH载体的克隆载体中扩增VH片段，然后使用KpnI(5')和NheI(3')限制性位点克隆到包含CH1-CH2-CH3DNA序列的哺乳动物表达载体中。在一些实例中，为了构建编码Fab-IgG的HC的表达质粒，使用KpnI(5')和NheI(3')限制性位点将VH-CH1-6xG4S接头-VH片段克隆到相同的哺乳动物表达载体中。例如，构建编码IgG-Fab的HC的表达质粒可包括使用6xG4S接头-VH-CH1片段,其被使用BamHI(5')和MluI(3')限制性位点克隆到IgG哺乳动物表达载体中。为了构建编码Fab-IgG-Fab的HC的表达质粒，可先使用KpnI(5')和NheI(3')限制性位点将VH-CH1-6xG4S接头-VH片段克隆到哺乳动物表达载体中，然后使用BamHI(5')和MluI(3')限制性位点克隆6xG4S接头-VH-CH1片段。为了构建编码Fab-IgG-Fab-Fab的HC的表达质粒，可先使用KpnI(5')和NheI(3')限制性位点将VH-CH1-6xG4S接头-VH片段克隆到哺乳动物表达载体中，然后使用BamHI(5')和MluI(3')限制性位点克隆6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1片段。为了构建编码Fab-Fab-IgG-Fab-Fab的HC的表达质粒，可先使用KpnI(5')和NheI(3')限制性位点将VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH片段克隆到哺乳动物表达载体中，然后使用BamHI(5')和MluI(3')限制性位点克隆6xG4S接头-VH-CH1-6xG4S接头-VH-CH1片段。为了将所有重链和轻链连接到表达载体中，可以使用快速连接试剂盒(New EnglandBiolabs,Ipswich,MA)。所有连接的DNA构建体可转化到化学感受态TOP10大肠杆菌细胞(Life Technologies)中并涂布在氨苄青霉素平板上进行选择。可挑取细菌菌落，进行培养，并提取质粒(例如，Qiagen MiniPrep Kit)。可以通过Sanger测序(例如，EurofinsGenomics)确认构建体正确组装到表达载体中。
在本文所述的一些实验中，通过以下步骤来按比例放大编码IgG、Fab-IgG、IgG-Fab、FIF、FIFF和FFIFF抗体的重链(HC)和轻链(LC)的表达质粒：将测序确认的表达质粒转化到化学感受态TOP10大肠杆菌中，将转化混合物接种到250mL振荡培养瓶(baffledflask)中的100mL Luria肉汤中，并在37℃以220r.p.m.振摇过夜。根据制造商的实验步骤，使用Nucleo
Figure BDA0003076814020000711
Xtra Midi EF试剂盒(Macherey-Nagel)进行Midi-prep质粒纯化。使用ExpiFectamineTM293转染试剂和制造商(ThermoFisher Scientific)提供的实验步骤在Expi293细胞中表达蛋白质。对于IgG，以每1mL培养物中1μg总DNA使用1:1的比例共转染一种HC和一种LC质粒。对于Fab-IgG和IgG-Fab，以每1mL培养物中1μg总DNA使用1:2的比例共转染一种HC和一种LC质粒。对于Fab-IgG-Fab，以每1mL培养物中1μg总DNA使用1:3的比例共转染一种HC和一种LC质粒。对于Fab-IgG-Fab-Fab，以每1mL培养物中1μg总DNA使用1:4的比例共转染一种HC和一种LC质粒。对于Fab-Fab-IgG-Fab-Fab，以每1mL培养物中1μg总DNA使用1:5的比例共转染一种HC和一种LC质粒。使转染细胞在5％CO2培养箱中于37℃下生长，同时以125r.p.m.振摇5天。通过在5000g离心10分钟收获上清液，并使其通过0.22-μm滤器以便使用标准蛋白A亲和层析进行纯化。简单地说，对30mL转染的上清液接种400μL PBS洗涤的PierceTM蛋白A+琼脂糖树脂(ThermoFisher Scientific)，在4℃孵育过夜。接下来，使树脂-上清液溶液流过重力柱，然后洗涤树脂。通过将900μL PierceTMIgG洗脱缓冲液(ThermoFisher Scientific)加入经PBS洗涤的树脂中来洗脱蛋白质，并通过加入100μL的UltraPureTM 1M Tris-HCl缓冲液(pH 7.5)(ThermoFisher Scientific)来立即中和。将洗脱的蛋白质使用
Figure BDA0003076814020000712
超离心过滤器(Millipore Sigma)进一步透析到PBS中。
在一些变化形式中，如本文所述，合成粘合剂可递送至黏膜。递送可以经由局部递送，包括气雾剂、液体或凝胶(包括可溶解的凝胶)。例如，在一些变化形式中，可使用膜递送合成粘合剂。在一些情况下，可以使用阴道膜。
为了在合成抗精子粘合剂的背景下检验这一点，将含有IgG和Fab-IgG-Fab的完整重链和轻链序列的基因克隆到植物表达载体(TMV和PVX；Icon Genetics)中，然后转化到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株ICF320中(Icon Genetics)。接下来，将转化混合物浸入4周龄的本氏烟草(N.benthamiana)植株中，该植株经基因修饰以产生GnGn糖型的高度同源的哺乳动物N-聚糖。7天后，从叶片组织中提取抗精子抗体并使用蛋白A层析法纯化。为了除去内毒素，使纯化的mAb通过配备有Mustang Q膜的Acrodisc组件(Pall LifeSciences)中。用Endosafe PTS(Charles River)测定内毒素水平，发现内毒素水平低于150EU/mg。然后可以制作膜，例如烟草产生的HCA膜。在一些实验中，将HCA膜配制为2英寸×2英寸的聚乙烯醇(PVA)铸膜(film cast)，并且从水性湿混合物中干燥。该水性湿混合物包含约38.5mL配制的抗体浓缩物(200mg/mL麦芽糖醇，10.0mM组氨酸，0.05mg/mL聚山梨酯20)与水性聚合物浓缩物(17.88g PVA 8-88溶于53.6g WFI)的混合物。IgG膜和FIF膜(例如，Fab-IgG-Fab)的每张膜分别包含20mg和10mg mAb。将膜溶解于超纯水中以进行表征研究，随后进行精子效力和凝集动力学测定。
本文所述的合成粘合剂也可被雾化递送而不显著降低其功效。例如，检测了FIF(Fab-IgG-Fab)构建体和FFIFF(Fab-Fab-IgG-Fab-Fab)构建体的雾化。使用PARI eRapid振动网孔雾化器系统(vibrating mesh nebulizer system)将FIF和FFIFF抗体雾化。将雾化的溶液收集到50mL锥形管中，并使用SDS-PAGE评估雾化的抗体的稳定性，并使用全精子ELISA测定法评估抗体对其抗原的亲和力。
在本文所述的一些实例中，使用SDS-PAGE、SEC-MALS和nano-DSF进行合成粘合剂(例如，Fab-IgG、IgG-Fab、Fab-IgG-Fab、Fab-Fab-IgG、IgG-Fab-Fab、Fab-Fab-IgG-Fab、Fab-IgG-Fab-Fab、Fab-Fab-IgG-Fab-Fab)的生物物理表征。使用4-12％NuPage Bis-Tris凝胶(ThermoFisher Scientific)在1X NuPage MOPS缓冲液中在还原和非还原条件下进行SDS-PAGE实验，以确认所有HCA蛋白构建体的正确组装。对于每个蛋白质样品，将1μg蛋白质稀释到3.75μL LDS样品缓冲液中，然后加入11.25μL无核酸酶的水。然后使蛋白质在热循环仪中于70℃变性10分钟。接下来，将0.3μL的0.5MTCEP作为还原剂加入变性蛋白质中以获得还原的样品，并在室温下孵育5分钟。用Bio-Rad精密蛋白+未染色标准品和NovexTM Sharp预染色蛋白标准品作为分子量标准。在装载样品后，将凝胶在200V的恒定电压下运行50分钟并用Milli-Q水洗涤3次。然后，通过用Imperial蛋白染色剂(ThermoFisher Scientific)染色1小时，然后用Milli-Q水过夜脱色，使蛋白质条带可视化。
使用连接至Agilent FPLC系统的GE Superdex 200 10/300柱、Wyatt DAWNHELEOS II多角度光散射仪和Wyatt T-rEX折射计在室温下进行SEC-MALS实验。流速维持在0.5mL/min。在样品装载前将柱用含有200mg/L的NaN3的1X PBS(pH 7.4)平衡。将50-100μg的每种样品注入柱中，收集数据50分钟。收集MALS数据并使用Wyatt ASTRA软件(版本6)分析。
使用Nanotemper Prometheus NT.48系统进行NanoDSF实验。将样品在1X PBS(pH7.4)中稀释至0.5mg/mL并装入Prometheus NT.48毛细管中。从25℃至95℃以1℃/min的速率进行热变性实验，测量330nm和350nm处的固有色氨酸荧光。每个实验的解链温度(Tm)由Nanotemper PR.Thermcontrol软件。通过绘制荧光信号随温度升高的比例式测量自动计算。每个实验的聚集温度(Tagg)也由Nanotemper PR.Thermcontrol软件通过检测穿过样品的光束的背向反射强度自动计算。
检测本文所述的抗精子合成粘合剂以确定精子凝集效力以及黏液捕获效力。检测了新鲜精液。例如，男性受试者被要求在收集精液之前24小时内不要进行性行为。通过自慰将精液收集到无菌的50mL样品杯中，并在射精后室温孵育最少15分钟以使其液化。测量精液体积，并使用密度梯度精子分离程序从液化的精液中提取活动精子。简单地说，在室温下，将1.5mL液化精液小心地铺在1.5mLIsolate(90％密度梯度介质，Irvine Scientific)上，并在300g下离心20分钟。离心后，小心除去含有死细胞和精浆的上层，而不干扰下层中的活动精子沉淀物。然后将精子沉淀物用精子洗涤介质(Irvine Scientific)通过300g离心10分钟洗涤两次。最后，将纯化的活动精子沉淀物重悬于精子洗涤介质中，并取等分试样以便使用计算机辅助的精子分析(CASA)测定精子计数和活力。功能测定中使用的所有精液样品均超过了WHO参考指南所指示的精子计数(15×106精子/mL)和总运动性(40％)的参考下限。除非另外说明，否则在所有实验中使用12.3版Hamilton-Thorne计算机辅助精子分析仪进行精子计数和活力分析。该装置由相差显微镜(Olympus CX41)、摄像机、图像数字化仪和用于保存和分析获得的数据的带有Hamilton-Thorne Ceros 12.3软件的计算机组成。对于每次分析，将4.4μL精液样品插入到MicroTool计数室载玻片(Cytonix)中。然后，对载玻片中心附近的6个随机选择的显微镜视野成像并分析进行性和非进行性运动动精子计数。通过CASA评估活力分析的参数如下：平均路径速度(VAP：精子通过平滑细胞路径的平均速度，μm/sec)；直线速度(VSL：从轨迹的起点到终点以直线测量的平均速度，μm/sec)；曲线运动速度(VCL：在细胞的实际点对点轨迹上测量的平均速度，μm/sec)；头部侧摆幅度(ALH：头部侧向位移的幅度，μm)；鞭打频率(BCF：精子头部穿过精子平均路径的频率，Hz)；直线度(STR：比率VSL/VAP的平均值，％)以及线性度(LIN：比率VSL/VCL的平均值，％)。将进行性运动精子定义为具有最小25μm/secVAP和80％STR。
还进行了全精子ELISA。简而言之，聚苯乙烯半区板(CLS3690,Corning)的每个孔用含有2.0x105个精子的50μL NaHCO3缓冲液(pH 9.6)包被。在4℃孵育过夜后，将板以300g的速度离心20分钟。弃去上清液，并将板在45℃风干1小时。将板用1XPBS洗涤一次。加入100μL的5％牛奶，在室温下孵育1小时以防止抗体与微孔的非特异性结合。将单克隆抗体在1％牛奶中的连续稀释液加入到微孔中并在4℃孵育过夜。通过访问已公开的序列在实验室中构建和表达莫维珠单抗(一种针对呼吸道合胞病毒的mAb)，并用作该测定的阴性对照。初次孵育后，用PBS洗涤板3次。然后，向孔中加入第二抗体，即HRP标记的山羊抗人IgG F(ab')2抗体(209-1304，Rockland Inc.，1:50,000稀释在1％牛奶中，)并在室温孵育1小时。重复洗涤步骤并加入50μL含有底物(一步Ultra TMB ELISA底物，ThermoFisher Scientific)的缓冲液以使比色反应显色15分钟。用50μL的2N H2SO4猝灭反应，并使用SpectraMax M2酶标仪(Molecular Devices)测量450nm(信号)和570nm(背景)处的吸光度。由于测量分析的可变性，每个实验用一式三份的样品进行，并重复至少两次。
还用纯化的活动精子和全精液进行了精子逃逸测定。将纯化的活动精子在精子洗涤介质中稀释至最终浓度为10x106个进行性运动精子/mL。然后，将40μL等分试样的稀释精子或全精液转移到单独的0.2mL PCR管中，并使用CASA对每个40μL等分试样再次进行精子计数和活力测定。该计数用作评估各个HCA构建体的凝集效力的精子的原始(未处理)浓度。在CASA后，将30μL精子加入30μL HCA构建体中，并通过移液器吸打(pipetting)轻轻混合。然后将管以45°角固定在定制的3D打印管架中，在室温下保持5分钟。在此孵育时间段之后，以最小的管扰动从混合物的顶层吸取4.4μL，并将其转移至CASA仪器中以对进行性运动精子的数量定量。通过用HCA构建体处理后获得的精子计数除以每个相应试管中的原始精子数来计算逃脱凝集的进行性运动精子的百分比，对2倍稀释的抗体进行校正。对每个精液标本一式两份地评估每种实验条件，并在分析种使用来自两次实验的平均值。每个测定进行至少5次独立的实验，每次实验使用单一精液供体。
还使用纯化的活动精子和全精液进行了凝集动力学测定，以表征精子(“抗精子”)合成粘合剂。将纯化的活动精子在精子洗涤介质中稀释至最终浓度为10x106个进行性运动精子/mL或50x106个进行性运动精子/mL或2x106个进行性运动精子/mL。接下来，将4.4μL稀释的精子或全精液加入0.2mL PCR管中的4.4μL HCA构建体中，并通过在3s内轻轻上下吸打三次进行混合。第二个人立即启动计时器，同时将4.4μL的混合物转移到深度为20μm的载玻片(Cytonix,Beltsville,MD)上，并使用聚焦于载玻片中心的10倍物镜的视频显微镜(Olympus CKX41)以60帧/秒的速度捕获了长达90s的图像。每30秒用CASA法测量精子计数，直至90秒。通过将用HCA构建体处理后获得的进行性精子的计数相对于用精子洗涤介质处理后获得的进行性精子计数归一化来计算每个时间点的凝集精子的百分比。对每个精液样本上一式两份地评估每种实验条件，并在分析中使用两次实验的平均值。每个测定至少进行6次独立的实验，每次实验使用单一精液供体。
使用在0.5％乳酸(LA)或精子洗涤介质(MHM；对照)中于37℃孵育24小时的IgG膜和FIF膜构建体通过凝集动力学测定进行IgG膜和FIF膜的酸性pH稳定性的测定。使用等体积的精浆(SP)中和在LA中孵育的HCA构建体。接下来，使用SP或MHM介质进一步稀释中和的HCA。将纯化的活动精子在精子洗涤介质中稀释至最终浓度为20x106个进行性运动精子/mL。然后，将4.4μL稀释的精子加入0.2mL PCR管中的4.4μL HCA构建体(HCA-LA/SP或HCA-LA/MHM或HCA-MHM/MHM)中，并通过在3s内轻轻上下吸打三次进行混合。第二个人立即启动计时器，同时将4.4μL的混合物转移到深度为20μm的载玻片(Cytonix,Beltsville,MD)上，并使用聚焦于载玻片中心的10倍物镜的视频显微镜(Olympus CKX41)以60帧/秒的速度捕获了长达90s的图像。每30秒用CASA法测量精子计数，直至90s。通过将用HCA构建体处理后获得的进行性运动精子计数相对于用精子洗涤介质处理后获得的进行性运动精子计数归一化来计算每个时间点的凝集精子的百分比。
在一些情况下，精子被荧光标记。使用活/死精子活力试剂盒(InvitrogenMolecular Probes)对纯化的活动精子进行荧光标记，该试剂盒用SYBR 14染料(可透过膜的核酸染料)染色活的精子，并用碘化丙锭(不透过膜的核酸染料)染色死的精子。对于标记1mL洗涤的精液，SYBR 14和碘化丙啶染料的最终浓度分别为200nM和12μM。标记后，通过使用精子洗涤介质(Irvine Scientific)以300g离心10分钟将精子溶液洗涤两次以除去未结合的荧光团。接下来，将标记的活动精子沉淀物重悬于精子洗涤介质中，并取等分试样以便使用CASA确定精子计数和运动性。
在一些情况下，使用宫颈阴道黏液(CVM)。简单地说，通过使用自取样月经收集装置(Instead Softcup)从20至32岁(27.4±0.9岁，平均值±SD)的育龄女性获得未稀释的CVM分泌物，平均每个样品0.5g。参与者将装置插入阴道至少30秒，将其取出，随后将其放入50mL离心管中。将样品在230g离心5分钟以收集分泌物。立即制备用于乳酸和Ab测定的CVM等分试样(用1×PBS以1:5稀释并储存在-80℃)以及用于革兰氏染色的载玻片，并且通常在几个小时内将剩余的样品保存在4℃下直至显微镜检查。
使用对CVM中荧光标记精子的多粒子追踪来模拟碱性精液对CVM的稀释和中和。先使用精子洗涤介质将CVM稀释3倍，并使用少量(约3％v/v)的3N NaOH滴定至pH 6.8-7.1。使用针对pH 4、7和10缓冲液校准的微型pH电极(Microelectrodes,Inc.,Bedford,NH)确认pH。接下来，将4μL的HCA构建体或对照(抗RSV IgGl)加入到60μL稀释并调节过pH的CVM中，并在CultureWellTM室载玻片(Invitrogen#C37000，ThermoFisher Scientific)中充分混合，然后加入4μL的7.5x105/mL荧光标记的精子。混合后，将精子、抗体和CVM在室温孵育15分钟。然后，使用安装在配备有Alpha Plan-Apo 20/0.4物镜、环境(温度和CO2)控制室和发光二极管(LED)光源(Lumencor Light Engine DAPI/GFP/543/623/690)的倒置落射荧光显微镜(AxioObserver D1；Zeiss,Thornwood,NY)上的电子倍增电荷耦合器件照相机(Evolve512；Photometrics,Tucson,AZ)记录精子的平移运动。使用MetaMorph成像软件(MolecularDevices,Sunnyvale,CA)在66.7ms的时间分辨率和50nm的空间分辨率(标称像素分辨率，0.78μm/像素)对于每种抗体条件捕获6个视频(512×512像素，16位图像深度)，持续20秒。用不同浓度的HCA构建体孵育后，将该捕获获得的显微镜视频通过神经网络跟踪器运行以确定进行性运动精子的百分比。
在一些实验中，将HCA构建体滴注到绵羊的阴道中，然后注入人精液，并用阴道扩张器进行模拟性交(约30s)。2分钟后，回收来自绵羊阴道的液体并立即评估进行性运动精子的运动性。在同一只绵羊中，将对于多聚体HCA构建体的条件重复两次以上，两次实验之间间隔至少7天。对于每次实验，收集来自3-4个供体的精液样品。
在本文所述的一个实例中，产生并表征了天然IgG序列和基于抗RSV IgG的合成抗RSV粘合剂。利用VH、CH1、VL和CL的密码子优化序列设计抗RSV IgG、Fab-IgG和IgG-Fab抗体的序列。用GeneArt基因合成订购了IgG、IgG-Fab和Fab-IgG的完整序列。为了最小化可能由于IgG-Fab和Fab-IgG中的重复序列发生的合成问题，可以对重复片段的DNA序列进行人工密码子优化，从而使DNA序列的可变性增加并随后降低基因合成的复杂性。经过人工密码子优化后，利用IDT提供的复杂度分析工具对基因序列进进行性一步处理，以获得复杂度得分。经由GeneArt基因合成，很容易并成功地合成了复杂度得分<25的基因片段。
如上所述的生成编码天然抗RSV mAb和抗RSV合成粘合剂的质粒。抗RSV抗体的可变重链(VH)和可变轻链(VL)DNA序列获自公开的莫维珠单抗。为了构建编码轻链的表达质粒，使用
Figure BDA0003076814020000783
基因合成服务合成由VL和CL(Ck)DNA序列组成的基因片段，并使用KpnI(5')和EcoRI(3')限制性位点克隆到空的哺乳动物表达载体(pAH)中。为了构建编码IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的重链(HC)的表达质粒，使用
Figure BDA0003076814020000784
基因合成服务(ThermoFisherScientific)合成所有Ab的完整基因序列，并使用KpnI(5')和MluI(3')限制性位点克隆到空的哺乳动物表达载体(pAH)中。为了将所有重链和轻链连接到表达载体中，使用了快速连接试剂盒(New England Biolabs,Ipswich,MA)。所有连接的DNA构建体被转化到化学感受态TOP10大肠杆菌细胞(Life Technologies)中并涂布在氨苄青霉素平板上进行选择。挑取细菌菌落，进行培养，并制备质粒(Qiagen MiniPrep Kit)。通过Sanger测序(EurofinsGenomics)确认构建体正确组装到表达载体中。
通过以下步骤来按比例放大编码IgG、Fab-IgG和IgG-Fab抗体的重链(HC)和轻链(LC)的表达质粒：将测序确认的表达质粒转化到化学感受态TOP10大肠杆菌中，将转化混合物接种到250 mL振荡培养瓶中的100mL Luria肉汤中，并在37℃以220 r.p.m.振摇过夜。根据制造商的实验步骤，使用
Figure BDA0003076814020000785
Xtra Midi EF试剂盒(Macherey-Nagel)进行Midi-prep质粒纯化。使用ExpiFectamineTM 293转染试剂和制造商(ThermoFisherScientific)提供的实验步骤在Expi293细胞中表达蛋白质。对于IgG，以每1 mL培养物中1μg总DNA使用1:1的比例共转染一种HC和一种LC质粒。对于Fab-IgG和IgG-Fab，以每1 mL培养物中1μg总DNA使用1:2的比例共转染一种HC和一种LC质粒。使转染的细胞在5％CO2培养箱中于37℃下生长，同时以125 r.p.m.振摇5天。通过在5000g离心10分钟收获上清液，并使其通过0.22μm滤器以便使用标准蛋白A亲和层析进行纯化。简单地说，将30 mL转染的上清液与400μL PBS洗涤的PierceTM蛋白A+琼脂糖树脂(PierceTM Protein A Plus AgaroseResin)(ThermoFisher Scientific)在4℃孵育过夜。接下来，使树脂-上清液流过重力柱，然后洗涤树脂。通过将900μL PierceTM IgG洗脱缓冲液(ThermoFisher Scientific)加入经PBS洗涤的树脂中来洗脱蛋白质，并通过加入100μL UltraPureTM 1M Tris-HCl缓冲液(pH7.5)(ThermoFisher Scientific)立即中和。将洗脱的蛋白质使用
Figure BDA0003076814020000792
超离心过滤器(Millipore Sigma)进一步透析到PBS中。
使用4-12％NuPage Bis-Tris凝胶(ThermoFisher Scientific)在1X NuPageMOPS缓冲液中在还原和非还原条件下进行SDS-PAGE实验，以确认所有抗RSV抗体构建体的正确组装。对于每个蛋白质样品，将1μg蛋白质稀释在3.75μL LDS样品缓冲液中，然后加入11.25μL无核酸酶的水。然后将蛋白质在热循环仪中于70℃变性10分钟。接下来，将0.3μL的0.5MTCEP作为还原剂加入变性蛋白质中以获得还原的样品，并在室温下孵育5分钟。用Biorad精密蛋白+未染色标准品作为蛋白分子量标准。在装载样品后，将凝胶在200V的恒定电压下运行50分钟并用Milli-Q水洗涤3次。然后，通过用Imperial蛋白染色剂(ThermoFisher Scientific)染色1小时，接着用Milli-Q水过夜脱色，使蛋白质条带可视化。
使用ELISA检测抗RSV合成粘合剂。简而言之，聚苯乙烯半区板(CLS3690,Corning)的每个孔用50μL 10μg/mL人RSV(
Figure BDA0003076814020000791
VR-1540P)使用NaHCO3缓冲液(pH 9.6)包被。在4℃孵育过夜后，将板在UV下孵育1小时以灭活病毒。将板用1XPBS洗涤两次。加入100μL的5％牛奶，在室温下孵育1小时以防止抗体与微孔的非特异性结合。将单克隆抗体在1％牛奶中的连续稀释液加入到微孔中并在4℃下孵育过夜。FDA批准的针对RSV的mAb，帕利珠单抗(Synagis)用作本测定的阳性对照。初次孵育后，用1XPBS洗涤板3次。然后，向孔中加入第二抗体，即HRP缀合的山羊抗人IgG F(ab')2抗体(209-1304，Rockland Inc.，1:50,000稀释在1％牛奶中)并在室温孵育1小时。重复洗涤步骤并加入50μL含有底物的缓冲液(一步UltraTMB ELISA底物，ThermoFisher Scientific)以使比色反应显色15分钟。用50μL的2N H2SO4猝灭反应，并使用SpectraMax M2酶标仪(Molecular Devices)测量450nm(信号)和570nm(背景)处的吸光度。由于测量分析的可变性，每个实验用一式三份的样品进行并至少重复两次。
通常，如本文所述合成抗RSV合成粘合剂以形成Fab-IgG、IgG-Fab、Fab-IgG-Fab、Fab-Fab-IgG、Fab-Fab-IgG-Fab、IgG-Fab-Fab、Fab-IgG-Fab-Fab和Fab-Fab-IgG-Fab-Fab。这些抗RSV合成粘合剂的合成和表征都与对于所述其他合成粘合剂描述的相似，带来了改进的黏液捕获。特别地，相对于IgG，本文所述的合成粘合剂对靶标具有更佳的黏液捕获和凝集作用。特别地，相对于天然抗体，诸如精子、细菌和其他病原体的活动靶标可显示出黏膜追踪的增加。初步证据还表明本文所述的合成粘合剂可以特异性地抑制细菌的生长。在本文描述的所有实例中使用了靶标(例如，病毒)上的表面抗原。
例如，图15A示出了天然(包括组分Fab和Fc区的IgG，上图)以及FI(Fab-IgG)和IF(IgG-Fab)合成粘合剂(下图)。例如，图15A所示的图可以是抗精子IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的图；如上所述，Fab-IgG的N-末端Fab和IgG-Fab的C-末端Fab可包含具有VH、VL、CH1和CL的完全完整的抗精子Fab。在图15B中，非还原性凝胶显示如预期地产生了合成的Fab-IgG和IgG-Fab，并高效表达。图15C显示了在Expi293细胞中表达并通过蛋白A/G层析纯化后所示抗体的还原性SDS-PAGE分析。图15D是通过分析型SEC-MALS分析证明了纯化的多聚体抗体的纯度和同质性。
图16A-16C进一步表征了本文所述的合成粘合剂。在本实例中，将抗精子合成粘合剂与抗精子IgG抗体进行比较。如图16A所示，通过SEC-MALS分别测定的IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的摩尔质量与时间的关系表明，本文所述的合成粘合剂类似于它们所来源的天然mAb。这在图16B中也是明显的。由nanoDSF通过分别测量蛋白质的固有荧光和背向反射的变化而确定的解链温度(Tm)和聚集温度(Tagg)的值几乎相同。在图16C中，使用全精子ELISA分析评价所示抗体的结合效力。用莫维珠单抗(例如，抗RSV IgGl)作为同种型对照。一式三份进行ELISA，并使用3份独特的标本重复三次。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图17A-17B显示了如本文所述的抗精子合成粘合剂(例如，具有额外的FAB区通过柔性接头连接至天然可变区(Fab)或恒定区末端之一或两者)的作用。在图17A中，使用纯化的活动精子(10×106个进行性运动精子/mL)检测亲本IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的精子凝集效力。通过相对于前处理条件定量在不同浓度Ab处理后保持进行性运动的精子的百分比来测量亲本和多聚体抗精子IgG(例如，合成粘合剂)的精子凝集效力。在图17B中，将处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比相对于阴性对照归一化以便进一步比较。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。Fab-IgG和IgG-Fab合成粘合剂之间几乎没有可觉察的差异，但是在凝集的相对程度(即凝集的比例)以及凝集相当比例的精子所需的Fab-IgG或IgG-Fab的最低浓度方面，观察到二者都比天然IgG有了明显改进。
图18A-18B使用纯化的活动精子(1×106个进行性运动精子/mL)显示了亲本IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的精子凝集动力学的作用。在图18A中，通过相对于未处理对照定量使90％的进行性运动精子凝集所需的时间来测定所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获得CASA分析，直到90s。在图18B中，通过相对于处理前定量在Ab处理后的三个不同时间点处的凝集的精子的百分比来测量所示抗精子抗体的精子凝集率。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。再次地，合成粘合剂相对于单独的IgG具有远远更佳的精子凝集效力，特别是在较低浓度下(例如，低于约2μg/ml)。
图19使用pH中和的雌性CVM和纯化的活动精子(1.5x106进行性运动精子/mL)显示了亲本IgG、Fab-IgG和IgG-Fab的黏液捕获效力。通过对悬浮在Ab处理的(25ug/ml)CVM中的荧光标记的精子进行实时视频显微术(real-time video microscopy)，评估了所示抗体的黏液捕获效力。我们在所有记录的视频中采用了用标准化精子活力参数定制的神经网络跟踪器，以对进行性运动型精子的百分比定量。
通常，使用额外的数组Fab(最多10组Fab)会有进一步的改进。10聚体(例如，Fab-Fab-IgG-Fab-Fab，具有总共10个Fab)的表现略好于6聚体(Fab-IgG-Fab，Fab-Fab-IgG，IgG-Fab-Fab)或8聚体(Fab-Fab-IgG-Fab，Fab-IgG-Fab-Fab)和4聚体(Fab-IgG，IgG-Fab)。图20A-20D显示了多聚体抗精子IgG抗体的表征。图20A是抗精子IgG、Fab-IgG-Fab(FIF)、Fab-IgG-Fab-Fab(FIFF)和Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(FFIFF)的示意图。FIF、FIFF和FFIFF的N-末端和C-末端Fab包含具有VH、VL、CH1和CL的完全完整的抗精子Fab。图20B和20C分别显示了在Expi293细胞中表达和通过蛋白A/G层析纯化后，所示抗体的非还原性和还原性SDS-Page分析。图20D显示了通过分析型SEC-MALS分析证明的纯化的多聚抗体的纯度和同质性。
图21A-21C也示出了本文所述的合成粘合剂(例如，多聚体抗精子IgG抗体)相对于彼此和天然IgG具有相当的性质。在图21A中，通过SEC-MALS分别确定了IgG、FIF、FIFF和FFIFF的摩尔质量与时间的关系。图21B显示了由nanoDSF通过分别测量蛋白质的固有荧光和背向反射的变化而确定的所示抗体的解链温度(Tm)和聚集温度(Tagg)的值。在图21C中，使用全精子ELISA分析评价所示抗体的结合效力。用莫维珠单抗(抗RSV IgGl)作为同种型对照。一式三份进行ELISA，并使用3份独特的标本重复三次。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
如上所述，包括高Fab数目(例如，8聚体、10聚体)的合成粘合剂对于增强精子凝集是高度有效的。图22A-22B使用纯化的活动精子(10x106进行性运动精子/mL)和全精液显示了亲本IgG和多聚体构建体的精子凝集效力。在图22A中，亲本IgG、FIF、FIFF和FFIFF的精子凝集效力是通过使用纯化的活动精子(10x106个进行性运动精子/mL)相对于处理前条件定量Ab处理后仍保持进行性运动的精子百分比来测量的。在图22B中，使用纯化的活动精子将Ab处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比相对于阴性对照归一化以便进一步比较。如上所述，10聚体(Fab-Fab-IgG-Fab-Fab)略好于较低的Fab构建体，特别是浓度更低和凝集时间更快。在图22C中，使用全精液通过相对于处理前条件对Ab处理后保持进行性运动的精子的百分比定量来测量亲本IgG和FFIFF的精子凝集效力。在图22D中，将使用全精液进行Ab处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比相对于阴性对照归一化以便进一步比较。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图23A-23B中还使用纯化的活动精子(10×106个进行性运动精子/mL)和全精液示出了亲本IgG和多聚体构建体的精子凝集动力学。在图23A中，使用纯化的活动精子(10x106个进行性运动精子/mL)通过定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来检测亲本IgG、FIF、FIFF和FFIFF的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。在图23B中，使用纯化的活动精子(10x106个前向运动精子/mL)通过相对于处理前对在Ab处理后3个不同时间点处凝集的精子的百分比定量来测量亲本IgG、FIF、FIFF和FFIFF的精子凝集率。通过使用全精液定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来评估亲本IgG和FFIFF的凝集动力学(在图23C中)。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。在图23D中，通过使用全精液相对于处理前对在Ab处理三个不同时间点处的凝集的精子的百分比定量来测量亲本IgG和FFIFF的精子凝集率。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
如图24A-24B所示，使用低浓度和高浓度的纯化的活动精子(2x106和50x106进行性精子/mL)检测亲本IgG和FFIFF的精子凝集动力学。在图24A中，通过定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来检测IgG和FFIFF的凝集动力学。使用纯化的活动精子(2x106个进行性精子/mL)，在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。如图24B所示，使用纯化的活动精子(2×106个进行性精子/mL)通过相对于处理前对在Ab处理后三个不同时间点处的凝集的精子的百分比来测量IgG和FFIFF的精子凝集率。在图24C中，通过使用纯化的活动精子(50×106个进行性精子/mL)定量相对于未处理的对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来检测IgG和FFIFF的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。在图24D中，通过使用纯化的活动精子(50×106精子/mL)相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比来测量IgG和FFIFF的精子凝集率。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图25使用全精液在绵羊研究中显示了亲本IgG、FIF和FFIFF的精子凝集效力。通过将Ab滴入绵羊阴道，然后滴入人精液并模拟性交，在体内测量了IgG、FIF和FFIFF的凝集效力。在来自绵羊阴道的液体中立即检测精子活力。数据代表对于FIF和FFIFF的3项独特绵羊研究，以及对于33μg/ml和333μg/ml的IgG的1项绵羊研究。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
如上所述，膜也可用于递送本文所述的合成粘合剂。例如，图26和27A-27C使用纯化的活动精子(10×106个进行性精子/mL)和全精液示出了烟草产生的亲本IgG和FIF膜的凝集效力。图26使用纯化的活动精子(10x106进行性运动精子/mL)显示了亲本IgG膜和FIF膜的精子凝集效力，其通过相对于处理前条件定量Ab处理后保持进行性运动的精子的百分比来测量。图27A显示了使用纯化的活动精子进行Ab处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比被相对于阴性对照归一化以便进一步比较。亲本IgG膜和FIF膜的精子凝集效力通过使用全精液定量相对于处理前条件进行Ab处理后保持进行性运动的精子的百分比来测量(在图27B中)。在图27C中，将使用全精液进行Ab处理后逃脱凝集的进行性精子的百分比相对于阴性对照归一化，以便进一步比较。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图28A-28B使用纯化的活动精子(10×106个进行性运动精子/mL)和全精液示出了烟草产生的亲本IgG和FIF膜的凝集动力学。图28A通过使用纯化的活动精子(10×106个进行性运动精子/mL)定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间显示了所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。使用纯化的活动精子(10x106个进行性运动精子/mL)通过相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集精子的百分比来评估所示抗精子抗体的精子凝集率(在图28B中)。
如图28C和图28D所示，使用纯化的活动精子(10×106个进行性运动精子/mL)和全精液来评估烟草产生的亲本IgG和FIF膜的凝集动力学。通过使用全精液定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来评估所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。通过使用全精液相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集精子的百分比来测量所示抗精子抗体的精子凝集率。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图29A-28B使用低浓度和高浓度的纯化活动精子(2x106和50x106个进行性运动精子/mL)示出了烟草产生的亲本IgG和FIF膜的凝集动力学。通过使用纯化的活动精子(2x106个进行性运动精子/mL)定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来评估所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。我们还通过使用纯化的活动精子(2x106进行性运动精子/mL)相对于处理前定量在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比来测量所示抗精子抗体的精子凝集率(图29B)。如图29C所示，通过使用纯化的活动精子(50×106个进行性运动精子/mL)定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来评估所示抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。我们还通过使用纯化的活动精子(50x106个进行性运动精子/mL)定量与处理前相比在Ab处理后三个不同时间点处凝集的精子的百分比来测量所示抗精子抗体的精子凝集率(图29D)。数据代表6份独特的精子样本。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。
图30使用纯化的活动精子(20x106个进行性运动精子/mL)和用乳酸处理24小时示出了烟草产生的亲本IgG和FIF膜在酸性环境中的凝集动力学。通过定量相对于未处理对照实现90％的进行性精子凝集所需的时间来评估乳酸处理的抗体的凝集动力学。在处理后每30s获取CASA分析，直到90s。数据代表2份独特的精子样本。注意：乳酸(LA)处理的抗体用精浆(SP)中和，然后用SP或盐水培养基即MHM稀释。
图31A-31D显示了烟草产生的FIF膜和Expi293产生的FFIFF抗体雾化后的表征。在使用筛网雾化器雾化之前和之后所示抗体的非还原性(图31A)和还原性(图31B)SDS-Page分析。全精子ELISA分析评价雾化后FIF膜(图31C)和FFIFF(图31D)的结合效力。一式三份进行ELISA，并使用相同的供体样本重复两次。线条表示算术平均浓度和平均值标准误差。因此，雾化本文所述的合成粘合剂不会损害或破坏它们，并且它们可通过雾化(例如，通过气溶胶化)有效递送。
图32A-32B示出了多聚体抗RSV IgG抗体的产生和表征。图32A分别显示了在Expi293细胞中表达并通过蛋白A/G层析纯化后抗RSV合成粘合剂(例如，由莫维珠单抗亲本IgG形成)的非还原性和还原性SDS-Page分析。图32B显示了评估所示抗体的结合效力的RSVELISA分析。将帕利珠单抗(Synagis/Palivizumab)(抗RSV IgG1)用作阳性对照。一式三份进行ELISA。
与对照相比，抗RSV合成粘合剂(在该实例中为Fab-IgG和IgG-Fab，然而Fab-Fab-IgG-Fab-Fab和Fab-IgG-Fab可能具有如上所述的类似结果)在结合相同靶标方面优于天然IgG，这将导致实质上更大的黏液捕获效力并因此产生治疗功效，特别浓度更低且时间更快。
如上所述，在一些变化形式中，可将合成粘合剂制备为具有多个scFv或纳米抗体，以对于Fab描述的相同方式。此外，在一些变化形式中，与本文描述的抗体相似的多聚体抗体可被制备为没有Fc区。
序列表
SEQ ID NO:1
CD52g的氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000861
SEQ ID NO:2
HCA-UNC(抗CD52g)(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020000871
SEQ ID NO:3
HCA-UNC(抗CD52g)(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000872
SEQ ID NO:4
HCA-UNC(抗CD52g)(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000873
SEQ ID NO:5
HCA-UNC(抗CD52g)(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000874
SEQ ID NO:6
HCA-UNC(抗CD52g)(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020000881
SEQ ID NO:7
HCA-UNC(抗CD52g)(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000882
SEQ ID NO:8
合成抗CD52g Fab-IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020000883
Figure BDA0003076814020000891
SEQ ID NO:9
合成抗CD52g Fab-IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000892
SEQ ID NO:10
合成抗CD52g Fab-IgG(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000901
SEQ ID NO:11
合成抗CD52g Fab-IgG(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000902
SEQ ID NO:12
合成抗CD52g Fab-IgG(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020000903
SEQ ID NO:13
合成抗CD52g Fab-IgG(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000904
SEQ ID NO:14
合成抗CD52g IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020000911
SEQ ID NO:15
合成抗CD52g IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000912
SEQ ID NO:16
合成抗CD52g IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000921
SEQ ID NO:17
合成抗CD52g IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000922
SEQ ID NO:18
合成抗CD52g IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020000923
SEQ ID NO:19
合成抗CD52g IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000924
SEQ ID NO:20
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020000931
SEQ ID NO:21
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000941
SEQ ID NO:22
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000942
SEQ ID NO:23
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000943
SEQ ID NO:24
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020000944
SEQ ID NO:25
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000951
SEQ ID NO:26
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020000952
Figure BDA0003076814020000961
SEQ ID NO:27
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000962
Figure BDA0003076814020000971
SEQ ID NO:28
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000972
SEQ ID NO:29
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000973
SEQ ID NO:30
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020000974
SEQ ID NO:31
合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000975
SEQ ID NO:32
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020000981
Figure BDA0003076814020000991
SEQ ID NO:33
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020000992
Figure BDA0003076814020001001
SEQ ID NO:34
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001002
SEQ ID NO:35
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001003
SEQ ID NO:36
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001004
SEQ ID NO:37
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001011
SEQ ID NO:38
合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001012
SEQ ID NO:39
抗克雷伯氏菌属IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001013
SEQ ID NO:40
抗克雷伯氏菌属IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001021
SEQ ID NO:41
抗克雷伯氏菌属(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001025
SEQ ID NO:42
抗克雷伯氏菌属(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001022
SEQ ID NO:43
抗克雷伯氏菌属(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001023
SEQ ID NO:44
抗克雷伯氏菌属(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001024
SEQ ID NO:45
抗克雷伯氏菌属IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001031
SEQ ID NO:46
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001032
SEQ ID NO:47
合成抗克雷伯氏菌属IgG Fab-IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001041
SEQ ID NO:48
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001042
SEQ ID NO:49
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001043
SEQ ID NO:50
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001044
SEQ ID NO:51
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001051
SEQ ID NO:52
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001052
SEQ ID NO:53
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001053
Figure BDA0003076814020001061
SEQ ID NO:54
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001062
SEQ ID NO:55
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001063
SEQ ID NO:56
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001064
SEQ ID NO:57
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001071
SEQ ID NO:58
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001072
SEQ ID NO:59
合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001073
SEQ ID NO:60
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001074
Figure BDA0003076814020001081
SEQ ID NO:61
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001082
Figure BDA0003076814020001091
SEQ ID NO:62
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001092
SEQ ID NO:63
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001093
SEQ ID NO:64
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001094
SEQ ID NO:65
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001101
SEQ ID NO:66
合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001102
SEQ ID NO:67
抗沙门氏菌属LPS IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001103
SEQ ID NO:68
抗沙门氏菌属LPS IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001111
SEQ ID NO:69
抗沙门氏菌属LPS IgG(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001112
SEQ ID NO:70
抗沙门氏菌属LPS(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001113
SEQ ID NO:71
抗沙门氏菌属LPS(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001114
SEQ ID NO:72
抗沙门氏菌属LPS(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001115
SEQ ID NO:73
合成抗沙门氏菌属LPS IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001121
SEQ ID NO:74
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001122
SEQ ID NO:75
合成抗沙门氏菌属LPS IgG Fab-IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001131
SEQ ID NO:76
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001132
SEQ ID NO:77
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001133
SEQ ID NO:78
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001134
SEQ ID NO:79
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001141
SEQ ID NO:80
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001142
SEQ ID NO:81
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001143
Figure BDA0003076814020001151
SEQ ID NO:82
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001152
SEQ ID NO:83
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001153
SEQ ID NO:84
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001161
SEQ ID NO:85
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001162
SEQ ID NO:86
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001163
SEQ ID NO:87
合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001164
SEQ ID NO:88
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001171
SEQ ID NO:89
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001181
SEQ ID NO:90
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001182
SEQ ID NO:91
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001183
SEQ ID NO:92
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001191
SEQ ID NO:93
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001192
SEQ ID NO:94
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001193
SEQ ID NO:95
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001194
Figure BDA0003076814020001201
Figure BDA0003076814020001211
SEQ ID NO:96
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001212
SEQ ID NO:97
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001213
SEQ ID NO:98
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001221
SEQ ID NO:99
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001222
SEQ ID NO:100
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001223
SEQ ID NO:101
合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001224
SEQ ID NO:102
抗淋病(2C7)IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001225
Figure BDA0003076814020001231
SEQ ID NO:103
抗淋病(2C7)IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001232
SEQ ID NO:104
抗淋病(2C7)(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001233
SEQ ID NO:105
抗淋病(2C7)(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001234
SEQ ID NO:106
抗淋病(2C7)(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001241
SEQ ID NO:107
抗淋病(2C7)(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001242
SEQ ID NO:108
抗淋病(2C7)IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001243
SEQ ID NO:109
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001244
Figure BDA0003076814020001251
SEQ ID NO:110
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001252
SEQ ID NO:111
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001261
SEQ ID NO:112
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001262
SEQ ID NO:113
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001263
SEQ ID NO:114
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001264
SEQ ID NO:115
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001265
SEQ ID NO:116
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001271
SEQ ID NO:117
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001272
SEQ ID NO:118
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001281
SEQ ID NO:119
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001282
SEQ ID NO:120
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001283
SEQ ID NO:121
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001284
SEQ ID NO:122
合成抗淋病(2C7)IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001285
SEQ ID NO:123
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001291
SEQ ID NO:124
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001301
SEQ ID NO:125
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001302
SEQ ID NO:126
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001303
SEQ ID NO:127
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001304
SEQ ID NO:128
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001311
SEQ ID NO:129
合成抗淋病(2C7)Fab-IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001312
SEQ ID NO:130
正向引物
Figure BDA0003076814020001313
SEQ ID NO:131
反向引物
Figure BDA0003076814020001314
SEQ ID NO:132
抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001321
SEQ ID NO:133
抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001322
SEQ ID NO:134
抗RSV(呼吸道合胞病毒)(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001324
SEQ ID NO:135
抗RSV(呼吸道合胞病毒)(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001323
SEQ ID NO:136
抗RSV(呼吸道合胞病毒)(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001331
SEQ ID NO:137
抗RSV(呼吸道合胞病毒)(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001333
SEQ ID NO:138
抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001332
SEQ ID NO:139
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)Fab-IgG(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001341
SEQ ID NO:140
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG Fab-IgG(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001342
SEQ ID NO:141
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)Fab-IgG(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001351
SEQ ID NO:142
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)Fab-IgG(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001352
SEQ ID NO:143
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)Fab-IgG(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001353
SEQ ID NO:144
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)Fab-IgG(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001354
SEQ ID NO:145
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)Fab-IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001361
SEQ ID NO:146
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001362
SEQ ID NO:147
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001371
SEQ ID NO:148
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001372
SEQ ID NO:149
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001373
SEQ ID NO:150
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001374
SEQ ID NO:151
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001381
SEQ ID NO:152
合成抗RSV(呼吸道合胞病毒)IgG-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001382
SEQ ID NO:153
抗淋病(2C7)Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001383
Figure BDA0003076814020001391
Figure BDA0003076814020001401
SEQ ID NO:154
抗淋病(2C7)Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001402
SEQ ID NO:155
抗淋病(2C7)(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001403
SEQ ID NO:156
抗淋病(2C7)(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001411
SEQ ID NO:157
抗淋病(2C7)(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001412
SEQ ID NO:158
抗淋病(2C7)(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001413
SEQ ID NO:159
抗淋病(2C7)IgG(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001414
SEQ ID NO:160
抗克雷伯氏菌属Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释DNA序列
Figure BDA0003076814020001421
Figure BDA0003076814020001431
SEQ ID NO:161
抗克雷伯氏菌属Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(重链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001432
Figure BDA0003076814020001441
SEQ ID NO:162
抗克雷伯氏菌属(重链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001442
SEQ ID NO:163
抗克雷伯氏菌属(重链)Fc片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001443
SEQ ID NO:164
抗克雷伯氏菌属(轻链)的DNA序列
Figure BDA0003076814020001444
SEQ ID NO:165
抗克雷伯氏菌属(轻链)的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001445
SEQ ID NO:166
抗克雷伯氏菌属Fab-Fab-IgG-Fab-Fab(轻链)Fab片段的注释氨基酸序列
Figure BDA0003076814020001451
序列表
<110> 北卡罗来纳大学查佩尔希尔分校
穆科曼恩有限责任公司
S·莱
B·什雷斯塔
A·谢弗
T·雅各布斯
T·芒什
<120> 用于黏膜捕获的合成粘合剂
<130> 5470-848WO
<150> US 62/734771
<151> 2018-09-21
<160> 155
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 12
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
Gly Gln Asn Asp Thr Ser Gln Thr Ser Ser Pro Ser
1 5 10
<210> 2
<211> 1362
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> HCA-UNC（抗CD52g）（重链）的注释DNA序列
<400> 2
caggttcagc tgcagcaatg gggagccgga ctgctgaagc ctagcgagac actgtctctg 60
acctgtgccg tgtacggcgg cagcttcagc ggctactact ggtcctggat cagacagcct 120
cctggcaaag gcctggaatg gatcggcgag atcaatcaca gcggcagcac caactacaac 180
cccagcctga gaagcagagt gaccatcagc gtggacacca gcaagaacca gttcagcctg 240
aagctgagaa gcgtgacagc cgccgatacc gccgtgtact attgcgccag aggctttatg 300
gtccgaggca tcatgtggaa ctactactac atggacgtgt ggggcaaggg caccaccgtg 360
acagtttctc cagctagcac caagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 420
agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 480
gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 540
ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 600
ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 660
aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa 720
ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc 780
tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc 840
aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag 900
gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 960
ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag 1020
aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca 1080
tcccgggacg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat 1140
cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc 1200
acgcctcccg tgctggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac 1260
aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac 1320
aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aa 1362
<210> 3
<211> 454
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> HCA-UNC（抗CD52g）（重链）的注释氨基酸序列
<400> 3
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
245 250 255
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
275 280 285
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
305 310 315 320
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn
355 360 365
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
370 375 380
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
385 390 395 400
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
420 425 430
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
435 440 445
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 4
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> HCA-UNC（抗CD52g）（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 4
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 5
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> HCA-UNC（抗CD52g）（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 5
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 6
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> HCA-UNC（抗CD52g）（轻链）的DNA序列
<400> 6
agcagcgagc tgacacagga tccagtggtg tctgtggccc tgggccagac agtgcggatt 60
acttgtcagg gcgacagcct gagaacctac cacgcctctt ggtatcagca gaagcccaga 120
caggcccctg tgctggtcat ctacgacgag aacaacagac ccagcggcat ccccgataga 180
ttcagcggca gcacatctgg caataccgcc agcctgacaa tcactggcgc ccaggctgaa 240
gatgaggccg actactactg caacagcaga gacagcagcg gcaaccggct ggtttttggc 300
ggaggcacaa agctgacagt gctgggccaa cctaaggccg ctcctagcgt gacactgttc 360
cctccaagca gcgaagaact gcaggccaac aaggccacac tcgtgtgcct gatcagcgac 420
ttttatcctg gcgccgtgac cgtggcctgg aaggctgata gttctcctgt gaaggccggc 480
gtggaaacca ccacacctag caagcagagc aacaacaaat acgccgccag cagctacctg 540
agcctgacac ctgagcagtg gaagtcccac agatcctaca gctgccaagt gacccacgag 600
ggcagcaccg tggaaaaaac agtggcccct accgagtgca gc 642
<210> 7
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> HCA-UNC（抗CD52g）（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 7
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Arg
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 8
<211> 2148
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG （重链）的注释DNA序列
<400> 8
caggttcagc tgcagcaatg gggagccgga ctgctgaagc ctagcgagac actgtctctg 60
acctgtgccg tgtacggcgg cagcttcagc ggctactact ggtcctggat cagacagcct 120
cctggcaaag gcctggaatg gatcggcgag atcaatcaca gcggcagcac caactacaac 180
cccagcctga gaagcagagt gaccatcagc gtggacacca gcaagaacca gttcagcctg 240
aagctgagaa gcgtgacagc cgccgatacc gccgtgtact attgcgccag aggctttatg 300
gtccgaggca tcatgtggaa ctactactac atggacgtgt ggggcaaggg caccaccgtg 360
acagtttctc cagcctctac caagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 420
agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 480
gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 540
ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 600
ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 660
aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacaggtg gcggaggatc tggcggaggg 720
gggagcggag ggggtgggtc cggcgggggg ggttccgggg gtggtggatc aggcggcgga 780
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cagcctcctg gcaaaggcct ggaatggatc ggcgagatca atcacagcgg cagcaccaac 960
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agcctgaagc tgagaagcgt gacagccgcc gataccgccg tgtactattg cgccagaggc 1080
tttatggtcc gaggcatcat gtggaactac tactacatgg acgtgtgggg caagggcacc 1140
accgtgacag tttctccagc tagcaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 1200
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ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaa 2148
<210> 9
<211> 716
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 9
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
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130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
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180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
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Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly
260 265 270
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275 280 285
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Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr
340 345 350
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp
355 360 365
Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val
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<210> 10
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 10
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
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Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
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<210> 11
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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180 185 190
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<210> 12
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<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG（轻链）的DNA序列
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 13
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
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Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
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Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 14
<211> 2154
<212> DNA
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<220>
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<400> 14
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<210> 15
<211> 718
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<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
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Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
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Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
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Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
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Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
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260 265 270
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Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
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Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<223> 合成抗CD52g IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
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<210> 17
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
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Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 18
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 18
agcagcgagc tgacacagga tccagtggtg tctgtggccc tgggccagac agtgcggatt 60
acttgtcagg gcgacagcct gagaacctac cacgcctctt ggtatcagca gaagcccaga 120
caggcccctg tgctggtcat ctacgacgag aacaacagac ccagcggcat ccccgataga 180
ttcagcggca gcacatctgg caataccgcc agcctgacaa tcactggcgc ccaggctgaa 240
gatgaggccg actactactg caacagcaga gacagcagcg gcaaccggct ggtttttggc 300
ggaggcacaa agctgacagt gctgggccaa cctaaggccg ctcctagcgt gacactgttc 360
cctccaagca gcgaagaact gcaggccaac aaggccacac tcgtgtgcct gatcagcgac 420
ttttatcctg gcgccgtgac cgtggcctgg aaggctgata gttctcctgt gaaggccggc 480
gtggaaacca ccacacctag caagcagagc aacaacaaat acgccgccag cagctacctg 540
agcctgacac ctgagcagtg gaagtcccac agatcctaca gctgccaagt gacccacgag 600
ggcagcaccg tggaaaaaac agtggcccct accgagtgca gc 642
<210> 19
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 19
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Arg
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 20
<211> 2940
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 20
caggttcagc tgcagcaatg gggagccgga ctgctgaagc ctagcgagac actgtctctg 60
acctgtgccg tgtacggcgg cagcttcagc ggctactact ggtcctggat cagacagcct 120
cctggcaaag gcctggaatg gatcggcgag atcaatcaca gcggcagcac caactacaac 180
cccagcctga gaagcagagt gaccatcagc gtggacacca gcaagaacca gttcagcctg 240
aagctgagaa gcgtgacagc cgccgatacc gccgtgtact attgcgccag aggctttatg 300
gtccgaggca tcatgtggaa ctactactac atggacgtgt ggggcaaggg caccaccgtg 360
acagtttctc cagcctctac caagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 420
agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 480
gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 540
ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 600
ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 660
aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacaggtg gcggaggatc tggcggaggg 720
gggagcggag ggggtgggtc cggcgggggg ggttccgggg gtggtggatc aggcggcgga 780
ggaagtcagg ttcagctgca gcaatgggga gccggactgc tgaagcctag cgagacactg 840
tctctgacct gtgccgtgta cggcggcagc ttcagcggct actactggtc ctggatcaga 900
cagcctcctg gcaaaggcct ggaatggatc ggcgagatca atcacagcgg cagcaccaac 960
tacaacccca gcctgagaag cagagtgacc atcagcgtgg acaccagcaa gaaccagttc 1020
agcctgaagc tgagaagcgt gacagccgcc gataccgccg tgtactattg cgccagaggc 1080
tttatggtcc gaggcatcat gtggaactac tactacatgg acgtgtgggg caagggcacc 1140
accgtgacag tttctccagc tagcaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 1200
tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 1260
gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 1320
gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 1380
agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 1440
gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 1500
cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 1560
atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 1620
gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 1680
cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 1740
gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1800
atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1860
cccccatccc gggacgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1920
ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1980
aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc 2040
gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 2100
ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaagg atccggtggc 2160
ggaggatctg gcggaggggg gagcggaggg ggtgggtccg gcgggggggg ttccgggggt 2220
ggtggatcag gcggcggagg aagtcaggtt cagctgcagc aatggggagc cggactgctg 2280
aagcctagcg agacactgtc tctgacctgt gccgtgtacg gcggcagctt cagcggctac 2340
tactggtcct ggatcagaca gcctcctggc aaaggcctgg aatggatcgg cgagatcaat 2400
cacagcggca gcaccaacta caaccccagc ctgagaagca gagtgaccat cagcgtggac 2460
accagcaaga accagttcag cctgaagctg agaagcgtga cagccgccga taccgccgtg 2520
tactattgcg ccagaggctt tatggtccga ggcatcatgt ggaactacta ctacatggac 2580
gtgtggggca agggcaccac cgtgacagtt tctccagcct ctaccaaggg cccatcggtc 2640
ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 2700
gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 2760
ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 2820
gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 2880
cccagcaaca ccaaggtgga caagaaagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca 2940
<210> 21
<211> 980
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 21
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
225 230 235 240
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
245 250 255
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly
260 265 270
Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly
275 280 285
Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly
290 295 300
Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser
325 330 335
Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr
340 345 350
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp
355 360 365
Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val
370 375 380
Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
385 390 395 400
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
405 410 415
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
420 425 430
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
435 440 445
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
450 455 460
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
465 470 475 480
Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
485 490 495
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
500 505 510
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
515 520 525
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
530 535 540
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
545 550 555 560
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
565 570 575
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
580 585 590
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
595 600 605
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
610 615 620
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
625 630 635 640
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
645 650 655
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
660 665 670
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
675 680 685
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
690 695 700
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Ser Gly Gly
705 710 715 720
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
725 730 735
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu
740 745 750
Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu
755 760 765
Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp
770 775 780
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn
785 790 795 800
His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr
805 810 815
Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser
820 825 830
Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met
835 840 845
Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys
850 855 860
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
865 870 875 880
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
885 890 895
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
900 905 910
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
915 920 925
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
930 935 940
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
945 950 955 960
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
965 970 975
Lys Thr His Thr
980
<210> 22
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 22
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 23
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 23
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 24
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 24
agcagcgagc tgacacagga tccagtggtg tctgtggccc tgggccagac agtgcggatt 60
acttgtcagg gcgacagcct gagaacctac cacgcctctt ggtatcagca gaagcccaga 120
caggcccctg tgctggtcat ctacgacgag aacaacagac ccagcggcat ccccgataga 180
ttcagcggca gcacatctgg caataccgcc agcctgacaa tcactggcgc ccaggctgaa 240
gatgaggccg actactactg caacagcaga gacagcagcg gcaaccggct ggtttttggc 300
ggaggcacaa agctgacagt gctgggccaa cctaaggccg ctcctagcgt gacactgttc 360
cctccaagca gcgaagaact gcaggccaac aaggccacac tcgtgtgcct gatcagcgac 420
ttttatcctg gcgccgtgac cgtggcctgg aaggctgata gttctcctgt gaaggccggc 480
gtggaaacca ccacacctag caagcagagc aacaacaaat acgccgccag cagctacctg 540
agcctgacac ctgagcagtg gaagtcccac agatcctaca gctgccaagt gacccacgag 600
ggcagcaccg tggaaaaaac agtggcccct accgagtgca gc 642
<210> 25
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 25
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Arg
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 26
<211> 3726
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 26
caggttcagc tgcagcaatg gggagccgga ctgctgaagc ctagcgagac actgtctctg 60
acctgtgccg tgtacggcgg cagcttcagc ggctactact ggtcctggat cagacagcct 120
cctggcaaag gcctggaatg gatcggcgag atcaatcaca gcggcagcac caactacaac 180
cccagcctga gaagcagagt gaccatcagc gtggacacca gcaagaacca gttcagcctg 240
aagctgagaa gcgtgacagc cgccgatacc gccgtgtact attgcgccag aggctttatg 300
gtccgaggca tcatgtggaa ctactactac atggacgtgt ggggcaaggg caccaccgtg 360
acagtttctc cagcctctac caagggccca tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag 420
agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg 480
gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc 540
ctacagtcct caggactcta ctccctcagc agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg 600
ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag 660
aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact cacacaggtg gcggaggatc tggcggaggg 720
gggagcggag ggggtgggtc cggcgggggg ggttccgggg gtggtggatc aggcggcgga 780
ggaagtcagg ttcagctgca gcaatgggga gccggactgc tgaagcctag cgagacactg 840
tctctgacct gtgccgtgta cggcggcagc ttcagcggct actactggtc ctggatcaga 900
cagcctcctg gcaaaggcct ggaatggatc ggcgagatca atcacagcgg cagcaccaac 960
tacaacccca gcctgagaag cagagtgacc atcagcgtgg acaccagcaa gaaccagttc 1020
agcctgaagc tgagaagcgt gacagccgcc gataccgccg tgtactattg cgccagaggc 1080
tttatggtcc gaggcatcat gtggaactac tactacatgg acgtgtgggg caagggcacc 1140
accgtgacag tttctccagc tagcaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 1200
tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 1260
gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 1320
gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 1380
agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 1440
gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 1500
cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 1560
atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 1620
gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 1680
cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 1740
gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1800
atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1860
cccccatccc gggacgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1920
ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1980
aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctacag caagctcacc 2040
gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 2100
ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaagg atccggtggc 2160
ggaggctctg gtggaggagg cagtggcgga ggcggttctg gtggtggtgg ctctggtggc 2220
ggcggttcag gcggtggcgg atctcaagtt cagctgcagc aatggggagc cggcctgctg 2280
aagccttctg agacactgtc tctgacctgc gccgtgtacg gcggcagctt tagcggctac 2340
tactggtcct ggatcagaca gcctcctggc aaaggcctgg aatggatcgg cgagatcaat 2400
cacagcggca gcaccaacta caaccccagc ctgagaagca gagtgaccat cagcgtggac 2460
accagcaaga accagttcag cctgaagctg cggagcgtga cagccgctga tacagccgtg 2520
tactactgcg ccagaggctt tatggtccga ggcatcatgt ggaactacta ctacatggac 2580
gtgtggggca agggcaccac cgtgacagtt tctccagcca gcacaaaggg ccccagcgtt 2640
ttcccactgg ctcctagcag caagagcaca tctggtggaa cagccgctct gggctgcctg 2700
gtcaaggatt actttcccga gcctgtgacc gtgtcctgga attctggcgc tctgacaagc 2760
ggcgtgcaca cctttccagc tgtgctgcaa agcagcggcc tgtactctct gagcagcgtg 2820
gtcacagtgc caagctctag cctgggcacc cagacctaca tctgcaatgt gaaccacaag 2880
cctagcaaca ccaaggtgga caagaaggtg gaacccaaga gctgcgacaa gacccataca 2940
gggggcggtg gaagcggagg cgggggtagc ggtggtggcg gcagcggcgg aggcggatca 3000
gggggcggcg gaagtggtgg cggtggttct caggttcaac tccaacagtg gggcgctgga 3060
ctgctgaaac ctagcgaaac cctgagcctg acatgtgctg tgtatggcgg ctccttctcc 3120
ggctactatt ggagctggat tcggcagcca ccaggcaagg gactcgagtg gattggagag 3180
atcaaccact ccggctccac caattacaat ccatctctgc ggtcccgcgt gaccatctcc 3240
gtggatacct ctaagaatca gttctcactg aagctgagat ccgtgaccgc tgccgacact 3300
gccgtgtatt attgtgcccg gggattcatg gttcgaggga ttatgtggaa ttactattat 3360
atggatgtct ggggaaaagg gacgaccgtg actgtgtccc ctgcctctac aaagggaccc 3420
tccgtgtttc ctctggctcc cagctctaag tctaccagcg gaggaacagc tgccctggga 3480
tgtctcgtga aagactactt ccccgaacca gtgacagtca gctggaacag cggagccctg 3540
acttctgggg tgcacacatt ccctgccgtc ctgcaatctt ctggcctgta cagcctgtcc 3600
agcgtcgtga ccgttccttc tagctctctg ggaacacaga catatatctg taatgtcaat 3660
cacaaaccct ccaatacgaa ggtcgacaaa aaggtcgagc ctaagtcctg tgataagacc 3720
cacacc 3726
<210> 27
<211> 1242
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 27
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
225 230 235 240
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
245 250 255
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly
260 265 270
Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly
275 280 285
Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly
290 295 300
Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser
325 330 335
Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr
340 345 350
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp
355 360 365
Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val
370 375 380
Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
385 390 395 400
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
405 410 415
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
420 425 430
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
435 440 445
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
450 455 460
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
465 470 475 480
Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro
485 490 495
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
500 505 510
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
515 520 525
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
530 535 540
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
545 550 555 560
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
565 570 575
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
580 585 590
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
595 600 605
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
610 615 620
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
625 630 635 640
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
645 650 655
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
660 665 670
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
675 680 685
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
690 695 700
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Ser Gly Gly
705 710 715 720
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
725 730 735
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu
740 745 750
Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu
755 760 765
Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp
770 775 780
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn
785 790 795 800
His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr
805 810 815
Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser
820 825 830
Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met
835 840 845
Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys
850 855 860
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
865 870 875 880
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
885 890 895
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
900 905 910
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
915 920 925
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
930 935 940
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
945 950 955 960
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
965 970 975
Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
980 985 990
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
995 1000 1005
Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys
1010 1015 1020
Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser
1025 1030 1035
Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
1040 1045 1050
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn
1055 1060 1065
Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr
1070 1075 1080
Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala
1085 1090 1095
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met Val Arg Gly
1100 1105 1110
Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr
1115 1120 1125
Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
1130 1135 1140
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
1145 1150 1155
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
1160 1165 1170
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
1175 1180 1185
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
1190 1195 1200
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
1205 1210 1215
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
1220 1225 1230
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
1235 1240
<210> 28
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 28
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 29
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 29
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 30
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）的 DNA序列
<400> 30
agcagcgagc tgacacagga tccagtggtg tctgtggccc tgggccagac agtgcggatt 60
acttgtcagg gcgacagcct gagaacctac cacgcctctt ggtatcagca gaagcccaga 120
caggcccctg tgctggtcat ctacgacgag aacaacagac ccagcggcat ccccgataga 180
ttcagcggca gcacatctgg caataccgcc agcctgacaa tcactggcgc ccaggctgaa 240
gatgaggccg actactactg caacagcaga gacagcagcg gcaaccggct ggtttttggc 300
ggaggcacaa agctgacagt gctgggccaa cctaaggccg ctcctagcgt gacactgttc 360
cctccaagca gcgaagaact gcaggccaac aaggccacac tcgtgtgcct gatcagcgac 420
ttttatcctg gcgccgtgac cgtggcctgg aaggctgata gttctcctgt gaaggccggc 480
gtggaaacca ccacacctag caagcagagc aacaacaaat acgccgccag cagctacctg 540
agcctgacac ctgagcagtg gaagtcccac agatcctaca gctgccaagt gacccacgag 600
ggcagcaccg tggaaaaaac agtggcccct accgagtgca gc 642
<210> 31
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 31
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Arg
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 32
<211> 4512
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 32
caagttcagc tgcagcaatg gggagccggc ctgctgaagc cttctgagac actgtctctg 60
acctgcgccg tgtacggcgg cagctttagc ggctactact ggtcctggat cagacagcct 120
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cccagcctga gaagcagagt gaccatcagc gtggacacca gcaagaacca gttcagcctg 240
aagctgcgga gcgtgacagc cgctgataca gccgtgtact actgcgccag aggctttatg 300
gtccgaggca tcatgtggaa ctactactac atggacgtgt ggggcaaggg caccaccgtg 360
acagtttctc cagccagcac aaagggcccc agcgttttcc cactggctcc tagcagcaag 420
agcacatctg gtggaacagc cgctctgggc tgcctggtca aggattactt tcccgagcct 480
gtgaccgtgt cctggaattc tggcgctctg acaagcggcg tgcacacctt tccagctgtg 540
ctgcaaagca gcggcctgta ctctctgagc agcgtggtca cagtgccaag ctctagcctg 600
ggcacccaga cctacatctg caatgtgaac cacaagccta gcaacaccaa ggtggacaag 660
aaggtggaac ccaagagctg cgacaagacc catacagggg gcggtggaag cggaggcggg 720
ggtagcggtg gtggcggcag cggcggaggc ggatcagggg gcggcggaag tggtggcggt 780
ggttctcagg ttcaactcca acagtggggc gctggactgc tgaaacctag cgaaaccctg 840
agcctgacat gtgctgtgta tggcggctcc ttctccggct actattggag ctggattcgg 900
cagccaccag gcaagggact cgagtggatt ggagagatca accactccgg ctccaccaat 960
tacaatccat ctctgcggtc ccgcgtgacc atctccgtgg atacctctaa gaatcagttc 1020
tcactgaagc tgagatccgt gaccgctgcc gacactgccg tgtattattg tgcccgggga 1080
ttcatggttc gagggattat gtggaattac tattatatgg atgtctgggg aaaagggacg 1140
accgtgactg tgtcccctgc ctctacaaag ggaccctccg tgtttcctct ggctcccagc 1200
tctaagtcta ccagcggagg aacagctgcc ctgggatgtc tcgtgaaaga ctacttcccc 1260
gaaccagtga cagtcagctg gaacagcgga gccctgactt ctggggtgca cacattccct 1320
gccgtcctgc aatcttctgg cctgtacagc ctgtccagcg tcgtgaccgt tccttctagc 1380
tctctgggaa cacagacata tatctgtaat gtcaatcaca aaccctccaa tacgaaggtc 1440
gacaaaaagg tcgagcctaa gtcctgtgat aagacccaca ccggtggcgg aggctctggg 1500
ggaggaggca gtggcggagg cggttctggt ggtggtggct ctggtggcgg cggttcaggc 1560
ggtggcggat ctcaggttca gctgcagcaa tggggagccg gactgctgaa gcctagcgag 1620
acactgtctc tgacctgtgc cgtgtacggc ggcagcttca gcggctacta ctggtcctgg 1680
atcagacagc ctcctggcaa aggcctggaa tggatcggcg agatcaatca cagcggcagc 1740
accaactaca accccagcct gagaagcaga gtgaccatca gcgtggacac cagcaagaac 1800
cagttcagcc tgaagctgag aagcgtgaca gccgccgata ccgccgtgta ctattgcgcc 1860
agaggcttta tggtccgagg catcatgtgg aactactact acatggacgt gtggggcaag 1920
ggcaccaccg ttacagtctc acctgctagc accaagggcc catcggtctt ccccctggca 1980
ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca gcggccctgg gctgcctggt caaggactac 2040
ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc 2100
ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc 2160
tccagcagct tgggcaccca gacctacatc tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc 2220
aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 2280
ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 2340
accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 2400
gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 2460
aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 2520
caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 2580
gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 2640
accctgcccc catcccggga cgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 2700
aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 2760
aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 2820
ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 2880
gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaaggatcc 2940
ggtggcggag gctctggtgg aggaggcagt ggcggaggcg gttctggtgg tggtggctct 3000
ggtggcggcg gttcaggcgg tggcggatct caagttcagc tgcagcaatg gggagccggc 3060
ctgctgaagc cttctgagac actgtctctg acctgcgccg tgtacggcgg cagctttagc 3120
ggctactact ggtcctggat cagacagcct cctggcaaag gcctggaatg gatcggcgag 3180
atcaatcaca gcggcagcac caactacaac cccagcctga gaagcagagt gaccatcagc 3240
gtggacacca gcaagaacca gttcagcctg aagctgcgga gcgtgacagc cgctgataca 3300
gccgtgtact actgcgccag aggctttatg gtccgaggca tcatgtggaa ctactactac 3360
atggacgtgt ggggcaaggg caccaccgtg acagtttctc cagccagcac aaagggcccc 3420
agcgttttcc cactggctcc tagcagcaag agcacatctg gtggaacagc cgctctgggc 3480
tgcctggtca aggattactt tcccgagcct gtgaccgtgt cctggaattc tggcgctctg 3540
acaagcggcg tgcacacctt tccagctgtg ctgcaaagca gcggcctgta ctctctgagc 3600
agcgtggtca cagtgccaag ctctagcctg ggcacccaga cctacatctg caatgtgaac 3660
cacaagccta gcaacaccaa ggtggacaag aaggtggaac ccaagagctg cgacaagacc 3720
catacagggg gcggtggaag cggaggcggg ggtagcggtg gtggcggcag cggcggaggc 3780
ggatcagggg gcggcggaag tggtggcggt ggttctcagg ttcaactcca acagtggggc 3840
gctggactgc tgaaacctag cgaaaccctg agcctgacat gtgctgtgta tggcggctcc 3900
ttctccggct actattggag ctggattcgg cagccaccag gcaagggact cgagtggatt 3960
ggagagatca accactccgg ctccaccaat tacaatccat ctctgcggtc ccgcgtgacc 4020
atctccgtgg atacctctaa gaatcagttc tcactgaagc tgagatccgt gaccgctgcc 4080
gacactgccg tgtattattg tgcccgggga ttcatggttc gagggattat gtggaattac 4140
tattatatgg atgtctgggg aaaagggacg accgtgactg tgtcccctgc ctctacaaag 4200
ggaccctccg tgtttcctct ggctcccagc tctaagtcta ccagcggagg aacagctgcc 4260
ctgggatgtc tcgtgaaaga ctacttcccc gaaccagtga cagtcagctg gaacagcgga 4320
gccctgactt ctggggtgca cacattccct gccgtcctgc aatcttctgg cctgtacagc 4380
ctgtccagcg tcgtgaccgt tccttctagc tctctgggaa cacagacata tatctgtaat 4440
gtcaatcaca aaccctccaa tacgaaggtc gacaaaaagg tcgagcctaa gtcctgtgat 4500
aagacccaca cc 4512
<210> 33
<211> 1504
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 33
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
225 230 235 240
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
245 250 255
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly
260 265 270
Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly
275 280 285
Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly
290 295 300
Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn
305 310 315 320
Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser
325 330 335
Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr
340 345 350
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp
355 360 365
Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val
370 375 380
Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
385 390 395 400
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
405 410 415
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
420 425 430
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
435 440 445
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
450 455 460
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
465 470 475 480
Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly
485 490 495
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
500 505 510
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu
515 520 525
Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu
530 535 540
Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp
545 550 555 560
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn
565 570 575
His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr
580 585 590
Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser
595 600 605
Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met
610 615 620
Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys
625 630 635 640
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
645 650 655
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
660 665 670
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
675 680 685
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
690 695 700
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
705 710 715 720
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
725 730 735
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
740 745 750
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
755 760 765
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
770 775 780
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
785 790 795 800
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
805 810 815
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
820 825 830
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
835 840 845
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
850 855 860
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
865 870 875 880
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
885 890 895
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900 905 910
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
915 920 925
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
930 935 940
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
945 950 955 960
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
965 970 975
Gly Lys Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
980 985 990
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
995 1000 1005
Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys
1010 1015 1020
Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser
1025 1030 1035
Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
1040 1045 1050
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn
1055 1060 1065
Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr
1070 1075 1080
Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala
1085 1090 1095
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Phe Met Val Arg Gly
1100 1105 1110
Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr
1115 1120 1125
Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
1130 1135 1140
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
1145 1150 1155
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
1160 1165 1170
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
1175 1180 1185
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
1190 1195 1200
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
1205 1210 1215
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
1220 1225 1230
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1235 1240 1245
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1250 1255 1260
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln
1265 1270 1275
Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr
1280 1285 1290
Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp
1295 1300 1305
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile
1310 1315 1320
Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg
1325 1330 1335
Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys
1340 1345 1350
Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
1355 1360 1365
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met
1370 1375 1380
Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser
1385 1390 1395
Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser
1400 1405 1410
Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
1415 1420 1425
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
1430 1435 1440
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
1445 1450 1455
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly
1460 1465 1470
Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
1475 1480 1485
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
1490 1495 1500
Thr
<210> 34
<211> 642
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）的注释DNA序列
<400> 34
agcagcgagc tgacacagga tccagtggtg tctgtggccc tgggccagac agtgcggatt 60
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caggcccctg tgctggtcat ctacgacgag aacaacagac ccagcggcat ccccgataga 180
ttcagcggca gcacatctgg caataccgcc agcctgacaa tcactggcgc ccaggctgaa 240
gatgaggccg actactactg caacagcaga gacagcagcg gcaaccggct ggtttttggc 300
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cctccaagca gcgaagaact gcaggccaac aaggccacac tcgtgtgcct gatcagcgac 420
ttttatcctg gcgccgtgac cgtggcctgg aaggctgata gttctcctgt gaaggccggc 480
gtggaaacca ccacacctag caagcagagc aacaacaaat acgccgccag cagctacctg 540
agcctgacac ctgagcagtg gaagtcccac agatcctaca gctgccaagt gacccacgag 600
ggcagcaccg tggaaaaaac agtggcccct accgagtgca gc 642
<210> 35
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 35
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Arg
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 36
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 36
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Arg
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Met Trp Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 37
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 37
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Val Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Asp Glu Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Thr Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Arg
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210
<210> 38
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗CD52g Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 38
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
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Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
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<210> 39
<211> 1365
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 39
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gcccctggca aaggccttga atgggttgcc agagtgatct gggctggcgg catcacccac 180
tacaatagcg ccctgatgag cagatacgcc gacagcgtga agggcagatt caccatcagc 240
gccgacacca gcaagaacac cgcctacctg cagatgaaca gcctgagagc cgaggacacc 300
gccgtgtact attgcgccag aggcaactgg gccttcgact attggggaca gggcaccctg 360
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aagtctacat ctggcggaac agccgctctg ggctgcctgg tcaaggatta ctttcccgag 480
cctgtgaccg tgtcctggaa ttctggcgct ctgacaagcg gcgtgcacac ctttccagct 540
gtgctgcaaa gcagcggcct gtactctctg agcagcgtgg tcacagtgcc tagctctagc 600
ctgggcaccc agacctacat ctgcaatgtg aaccacaagc ctagcaacac caaggtggac 660
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gaactgctcg gcggaccttc cgtgttcctg tttcctccaa agcctaagga caccctgatg 780
atcagcagaa cccctgaagt gacctgcgtg gtggtggatg tgtcccacga ggatcccgaa 840
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tacccttccg atatcgccgt ggaatgggag agcaatggcc agcctgagaa caactacaag 1200
acaacccctc ctgtgctgga cagcgacggc tcattcttcc tgtacagcaa gctgacagtg 1260
gacaagtcca gatggcagca gggcaacgtg ttcagctgca gcgtgatgca cgaggccctg 1320
cacaaccact acacccagaa gtccctgagc ctgtctcctg gcaaa 1365
<210> 40
<211> 455
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 40
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
225 230 235 240
Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
245 250 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
260 265 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
275 280 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
290 295 300
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305 310 315 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
325 330 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
340 345 350
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
355 360 365
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
370 375 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
385 390 395 400
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
405 410 415
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
420 425 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
435 440 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450 455
<210> 41
<211> 233
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 41
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 42
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 42
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 43
<211> 666
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属（轻链）的DNA序列
<400> 43
gacatccaga tgacacagag ccctagcagc ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcag cgccagatcc agcgtgtcct atattcacgt ggcctggtat 120
cagcagaagc ccggcaaagc ccctaagctg ctgatctacg acaccagcaa actggccagc 180
ttcctgtaca gcggcgtgcc ctctagattc agcggcagca gatctggcac cgacttcacc 240
ctgaccataa gcagcctgca gcctgaggac ttcgccacct actactgctt tcaaggcagc 300
ggctacccct acacctttgg ccagggaaca aaggtggaaa tcaagagaac agtggccgct 360
cctagcgtgt tcatcttccc accttccgac gagcagctga agtctggcac agcctctgtc 420
gtgtgcctgc tgaacaactt ctaccccaga gaagccaagg tgcagtggaa ggtggacaac 480
gccctgcaga gcggcaatag ccaagagagc gtgaccgagc aggacagcaa ggactctacc 540
tacagcctga gcagcaccct gacactgagc aaggccgact acgagaagca caaagtgtac 600
gcctgcgaag tgacccacca gggcctttct agccctgtga ccaagagctt caaccggggc 660
gaatgt 666
<210> 44
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 44
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100 105 110
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 45
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗克雷伯氏菌属IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 45
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100 105 110
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 46
<211> 2154
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 46
gaggtgcagt tggttgaatc cggtggcggg ttggtccagc ctggcgggag ccttcggctt 60
agttgtgccg catcatttag cctgacatct tacgctgtcc atatccattg ggtgcggcaa 120
gcgcctggta agggcctgga atgggtggca agggtgatat gggcaggggg tattacgcat 180
tacaactctg cattgatgag tcggtacgcc gacagcgtca aaggtcggtt caccatttct 240
gccgatacct ctaagaacac agcctacctc cagatgaact cactgcgagc ggaggacact 300
gctgtgtact attgcgcccg cggcaattgg gcatttgact actgggggca aggtacactc 360
gtaacggtct catctgcctc tacaaagggc cctagtgtgt tccctctggc tcccagcagc 420
aagtctacat ctggcggaac agccgctctg ggctgcctgg tcaaggatta ctttcccgag 480
cctgtgaccg tgtcctggaa ttctggcgct ctgacaagcg gcgtgcacac ctttccagct 540
gtgctgcaaa gcagcggcct gtactctctg agcagcgtgg tcacagtgcc tagctctagc 600
ctgggcaccc agacctacat ctgcaatgtg aaccacaagc ctagcaacac caaggtggac 660
aagaaggtgg aacccaagag ctgcgacaag acccacaccg gtggcggagg atctggtgga 720
ggagggagcg gagggggtgg gtccggaggg ggtggttccg gaggtggtgg atcaggtggc 780
ggaggaagtg aggtgcagct ggttgaatct ggcggaggac tggttcagcc tggcggatct 840
ctgagactgt cttgcgccgc cagctttagc ctgacaagct acgccgtgca catccactgg 900
gttcgacagg cccctggcaa aggccttgaa tgggttgcca gagtgatctg ggctggcggc 960
atcacccact acaatagcgc cctgatgagc agatacgccg acagcgtgaa gggcagattc 1020
accatcagcg ccgacaccag caagaacacc gcctacctgc agatgaacag cctgagagcc 1080
gaggacaccg ccgtgtacta ttgcgccaga ggcaactggg ccttcgacta ttggggacag 1140
ggcaccctgg tcaccgttag ctctgcctct acaaagggcc ctagtgtgtt ccctctggct 1200
cccagcagca agtctacatc tggcggaaca gccgctctgg gctgcctggt caaggattac 1260
tttcccgagc ctgtgaccgt gtcctggaat tctggcgctc tgacaagcgg cgtgcacacc 1320
tttccagctg tgctgcaaag cagcggcctg tactctctga gcagcgtggt cacagtgcct 1380
agctctagcc tgggcaccca gacctacatc tgcaatgtga accacaagcc tagcaacacc 1440
aaggtggaca agaaggtgga acccaagagc tgcgacaaga cccacacctg tcctccatgt 1500
cctgctccag aactgctcgg cggaccttcc gtgttcctgt ttcctccaaa gcctaaggac 1560
accctgatga tcagcagaac ccctgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccacgag 1620
gatcccgaag tgaagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1680
aagcctagag aggaacagta caacagcacc tacagagtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1740
caccaggatt ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa ggccctgcct 1800
gctcctatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc ctagggaacc ccaggtttac 1860
acactgcctc caagccggga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgac ctgcctcgtg 1920
aagggcttct acccttccga tatcgccgtg gaatgggaga gcaatggcca gcctgagaac 1980
aactacaaga caacccctcc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct gtacagcaag 2040
ctgacagtgg acaagtccag atggcagcag ggcaacgtgt tcagctgcag cgtgatgcac 2100
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgagcc tgtctcctgg caaa 2154
<210> 47
<211> 718
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG Fab-IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 47
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly
260 265 270
Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
275 280 285
Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala
290 295 300
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly
305 310 315 320
Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val
325 330 335
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
340 345 350
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
355 360 365
Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
370 375 380
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
385 390 395 400
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
405 410 415
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
420 425 430
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
435 440 445
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
450 455 460
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
465 470 475 480
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
485 490 495
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
500 505 510
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
515 520 525
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val
530 535 540
Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
545 550 555 560
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
565 570 575
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
580 585 590
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser
595 600 605
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
610 615 620
Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
625 630 635 640
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
645 650 655
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
660 665 670
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
675 680 685
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
690 695 700
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
705 710 715
<210> 48
<211> 233
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 48
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 49
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 49
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
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Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 50
<211> 666
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG（轻链）的DNA序列
<400> 50
gacatccaga tgacacagag ccctagcagc ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcag cgccagatcc agcgtgtcct atattcacgt ggcctggtat 120
cagcagaagc ccggcaaagc ccctaagctg ctgatctacg acaccagcaa actggccagc 180
ttcctgtaca gcggcgtgcc ctctagattc agcggcagca gatctggcac cgacttcacc 240
ctgaccataa gcagcctgca gcctgaggac ttcgccacct actactgctt tcaaggcagc 300
ggctacccct acacctttgg ccagggaaca aaggtggaaa tcaagagaac agtggccgct 360
cctagcgtgt tcatcttccc accttccgac gagcagctga agtctggcac agcctctgtc 420
gtgtgcctgc tgaacaactt ctaccccaga gaagccaagg tgcagtggaa ggtggacaac 480
gccctgcaga gcggcaatag ccaagagagc gtgaccgagc aggacagcaa ggactctacc 540
tacagcctga gcagcaccct gacactgagc aaggccgact acgagaagca caaagtgtac 600
gcctgcgaag tgacccacca gggcctttct agccctgtga ccaagagctt caaccggggc 660
gaatgt 666
<210> 51
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 51
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
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Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
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100 105 110
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145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
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195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 52
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 52
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 53
<211> 2160
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 53
gaggtgcagc tggttgaatc tggcggagga ctggttcagc ctggcggatc tctgagactg 60
tcttgcgccg ccagctttag cctgacaagc tacgccgtgc acatccactg ggttcgacag 120
gcccctggca aaggccttga atgggttgcc agagtgatct gggctggcgg catcacccac 180
tacaatagcg ccctgatgag cagatacgcc gacagcgtga agggcagatt caccatcagc 240
gccgacacca gcaagaacac cgcctacctg cagatgaaca gcctgagagc cgaggacacc 300
gccgtgtact attgcgccag aggcaactgg gccttcgact attggggaca gggcaccctg 360
gtcaccgtta gctctgcctc tacaaagggc cctagtgtgt tccctctggc tcccagcagc 420
aagtctacat ctggcggaac agccgctctg ggctgcctgg tcaaggatta ctttcccgag 480
cctgtgaccg tgtcctggaa ttctggcgct ctgacaagcg gcgtgcacac ctttccagct 540
gtgctgcaaa gcagcggcct gtactctctg agcagcgtgg tcacagtgcc tagctctagc 600
ctgggcaccc agacctacat ctgcaatgtg aaccacaagc ctagcaacac caaggtggac 660
aagaaggtgg aacccaagag ctgcgacaag acccacacct gtcctccatg tcctgctcca 720
gaactgctcg gcggaccttc cgtgttcctg tttcctccaa agcctaagga caccctgatg 780
atcagcagaa cccctgaagt gacctgcgtg gtggtggatg tgtcccacga ggatcccgaa 840
gtgaagttca attggtacgt ggacggcgtg gaagtgcaca acgccaagac caagcctaga 900
gaggaacagt acaacagcac ctacagagtg gtgtccgtgc tgaccgtgct gcaccaggat 960
tggctgaacg gcaaagagta caagtgcaag gtgtccaaca aggccctgcc tgctcctatc 1020
gagaaaacca tcagcaaggc caagggccag cctagggaac cccaggttta cacactgcct 1080
ccaagccggg aagagatgac caagaaccag gtgtccctga cctgcctcgt gaagggcttc 1140
tacccttccg atatcgccgt ggaatgggag agcaatggcc agcctgagaa caactacaag 1200
acaacccctc ctgtgctgga cagcgacggc tcattcttcc tgtacagcaa gctgacagtg 1260
gacaagtcca gatggcagca gggcaacgtg ttcagctgca gcgtgatgca cgaggccctg 1320
cacaaccact acacccagaa gtccctgagc ctgtctcctg gcaaaggatc cggtggcgga 1380
ggatctggtg gaggagggag cggagggggt gggtccggag ggggtggttc cggaggtggt 1440
ggatcaggtg gcggaggaag tgaggtgcag ttggttgaat ccggtggcgg gttggtccag 1500
cctggcggga gccttcggct tagttgtgcc gcatcattta gcctgacatc ttacgctgtc 1560
catatccatt gggtgcggca agcgcctggt aagggcctgg aatgggtggc aagggtgata 1620
tgggcagggg gtattacgca ttacaactct gcattgatga gtcggtacgc cgacagcgtc 1680
aaaggtcggt tcaccatttc tgccgatacc tctaagaaca cagcctacct ccagatgaac 1740
tcactgcgag cggaggacac tgctgtgtac tattgcgccc gcggcaattg ggcatttgac 1800
tactgggggc aaggtacact cgtaacggtc tcatctgcct ctacaaaggg ccctagtgtg 1860
ttccctctgg ctcccagcag caagtctaca tctggcggaa cagccgctct gggctgcctg 1920
gtcaaggatt actttcccga gcctgtgacc gtgtcctgga attctggcgc tctgacaagc 1980
ggcgtgcaca cctttccagc tgtgctgcaa agcagcggcc tgtactctct gagcagcgtg 2040
gtcacagtgc ctagctctag cctgggcacc cagacctaca tctgcaatgt gaaccacaag 2100
cctagcaaca ccaaggtgga caagaaggtg gaacccaaga gctgcgacaa gacccacacc 2160
<210> 54
<211> 720
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 54
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
225 230 235 240
Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
245 250 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
260 265 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
275 280 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
290 295 300
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305 310 315 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
325 330 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
340 345 350
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
355 360 365
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
370 375 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
385 390 395 400
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
405 410 415
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
420 425 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
435 440 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
450 455 460
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
465 470 475 480
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly
485 490 495
Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
500 505 510
Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala
515 520 525
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly
530 535 540
Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val
545 550 555 560
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
565 570 575
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
580 585 590
Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
595 600 605
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
610 615 620
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
625 630 635 640
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
645 650 655
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
660 665 670
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
675 680 685
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
690 695 700
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
705 710 715 720
<210> 55
<211> 233
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 55
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 56
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 56
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 57
<211> 666
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 57
gacatccaga tgacacagag ccctagcagc ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcag cgccagatcc agcgtgtcct atattcacgt ggcctggtat 120
cagcagaagc ccggcaaagc ccctaagctg ctgatctacg acaccagcaa actggccagc 180
ttcctgtaca gcggcgtgcc ctctagattc agcggcagca gatctggcac cgacttcacc 240
ctgaccataa gcagcctgca gcctgaggac ttcgccacct actactgctt tcaaggcagc 300
ggctacccct acacctttgg ccagggaaca aaggtggaaa tcaagagaac agtggccgct 360
cctagcgtgt tcatcttccc accttccgac gagcagctga agtctggcac agcctctgtc 420
gtgtgcctgc tgaacaactt ctaccccaga gaagccaagg tgcagtggaa ggtggacaac 480
gccctgcaga gcggcaatag ccaagagagc gtgaccgagc aggacagcaa ggactctacc 540
tacagcctga gcagcaccct gacactgagc aaggccgact acgagaagca caaagtgtac 600
gcctgcgaag tgacccacca gggcctttct agccctgtga ccaagagctt caaccggggc 660
gaatgt 666
<210> 58
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 58
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100 105 110
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 59
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 59
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100 105 110
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 60
<211> 2949
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 60
gaggtgcagt tggttgaatc cggtggcggg ttggtccagc ctggcgggag ccttcggctt 60
agttgtgccg catcatttag cctgacatct tacgctgtcc atatccattg ggtgcggcaa 120
gcgcctggta agggcctgga atgggtggca agggtgatat gggcaggggg tattacgcat 180
tacaactctg cattgatgag tcggtacgcc gacagcgtca aaggtcggtt caccatttct 240
gccgatacct ctaagaacac agcctacctc cagatgaact cactgcgagc ggaggacact 300
gctgtgtact attgcgcccg cggcaattgg gcatttgact actgggggca aggtacactc 360
gtaacggtct catctgcctc tacaaagggc cctagtgtgt tccctctggc tcccagcagc 420
aagtctacat ctggcggaac agccgctctg ggctgcctgg tcaaggatta ctttcccgag 480
cctgtgaccg tgtcctggaa ttctggcgct ctgacaagcg gcgtgcacac ctttccagct 540
gtgctgcaaa gcagcggcct gtactctctg agcagcgtgg tcacagtgcc tagctctagc 600
ctgggcaccc agacctacat ctgcaatgtg aaccacaagc ctagcaacac caaggtggac 660
aagaaggtgg aacccaagag ctgcgacaag acccacaccg gtggcggagg atctggtgga 720
ggagggagcg gagggggtgg gtccggaggg ggtggttccg gaggtggtgg atcaggtggc 780
ggaggaagtg aggtgcagct ggttgaatct ggcggaggac tggttcagcc tggcggatct 840
ctgagactgt cttgcgccgc cagctttagc ctgacaagct acgccgtgca catccactgg 900
gttcgacagg cccctggcaa aggccttgaa tgggttgcca gagtgatctg ggctggcggc 960
atcacccact acaatagcgc cctgatgagc agatacgccg acagcgtgaa gggcagattc 1020
accatcagcg ccgacaccag caagaacacc gcctacctgc agatgaacag cctgagagcc 1080
gaggacaccg ccgtgtacta ttgcgccaga ggcaactggg ccttcgacta ttggggacag 1140
ggcaccctgg tcaccgttag ctctgcctct acaaagggcc ctagtgtgtt ccctctggct 1200
cccagcagca agtctacatc tggcggaaca gccgctctgg gctgcctggt caaggattac 1260
tttcccgagc ctgtgaccgt gtcctggaat tctggcgctc tgacaagcgg cgtgcacacc 1320
tttccagctg tgctgcaaag cagcggcctg tactctctga gcagcgtggt cacagtgcct 1380
agctctagcc tgggcaccca gacctacatc tgcaatgtga accacaagcc tagcaacacc 1440
aaggtggaca agaaggtgga acccaagagc tgcgacaaga cccacacctg tcctccatgt 1500
cctgctccag aactgctcgg cggaccttcc gtgttcctgt ttcctccaaa gcctaaggac 1560
accctgatga tcagcagaac ccctgaagtg acctgcgtgg tggtggatgt gtcccacgag 1620
gatcccgaag tgaagttcaa ttggtacgtg gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc 1680
aagcctagag aggaacagta caacagcacc tacagagtgg tgtccgtgct gaccgtgctg 1740
caccaggatt ggctgaacgg caaagagtac aagtgcaagg tgtccaacaa ggccctgcct 1800
gctcctatcg agaaaaccat cagcaaggcc aagggccagc ctagggaacc ccaggtttac 1860
acactgcctc caagccggga agagatgacc aagaaccagg tgtccctgac ctgcctcgtg 1920
aagggcttct acccttccga tatcgccgtg gaatgggaga gcaatggcca gcctgagaac 1980
aactacaaga caacccctcc tgtgctggac agcgacggct cattcttcct gtacagcaag 2040
ctgacagtgg acaagtccag atggcagcag ggcaacgtgt tcagctgcag cgtgatgcac 2100
gaggccctgc acaaccacta cacccagaag tccctgagcc tgtctcctgg caaaggatcc 2160
ggtggcggag gatctggtgg aggagggagc ggagggggtg ggtccggagg gggtggttcc 2220
ggaggtggtg gatcaggtgg cggaggaagt gaggtgcagt tggttgaatc cggtggcggg 2280
ttggtccagc ctggcgggag ccttcggctt agttgtgccg catcatttag cctgacatct 2340
tacgctgtcc atatccattg ggtgcggcaa gcgcctggta agggcctgga atgggtggca 2400
agggtgatat gggcaggggg tattacgcat tacaactctg cattgatgag tcggtacgcc 2460
gacagcgtca aaggtcggtt caccatttct gccgatacct ctaagaacac agcctacctc 2520
cagatgaact cactgcgagc ggaggacact gctgtgtact attgcgcccg cggcaattgg 2580
gcatttgact actgggggca aggtacactc gtaacggtct catctgcctc tacaaagggc 2640
cctagtgtgt tccctctggc tcccagcagc aagtctacat ctggcggaac agccgctctg 2700
ggctgcctgg tcaaggatta ctttcccgag cctgtgaccg tgtcctggaa ttctggcgct 2760
ctgacaagcg gcgtgcacac ctttccagct gtgctgcaaa gcagcggcct gtactctctg 2820
agcagcgtgg tcacagtgcc tagctctagc ctgggcaccc agacctacat ctgcaatgtg 2880
aaccacaagc ctagcaacac caaggtggac aagaaggtgg aacccaagag ctgcgacaag 2940
acccacacc 2949
<210> 61
<211> 983
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 61
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly
260 265 270
Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
275 280 285
Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala
290 295 300
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly
305 310 315 320
Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val
325 330 335
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
340 345 350
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
355 360 365
Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
370 375 380
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
385 390 395 400
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
405 410 415
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
420 425 430
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
435 440 445
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
450 455 460
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
465 470 475 480
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
485 490 495
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
500 505 510
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
515 520 525
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val
530 535 540
Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
545 550 555 560
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
565 570 575
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
580 585 590
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser
595 600 605
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
610 615 620
Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
625 630 635 640
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
645 650 655
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
660 665 670
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
675 680 685
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
690 695 700
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Ser
705 710 715 720
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
725 730 735
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val
740 745 750
Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu
755 760 765
Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala Val His
770 775 780
Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
785 790 795 800
Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala Leu Met
805 810 815
Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp
820 825 830
Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu
835 840 845
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe Asp Tyr
850 855 860
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
865 870 875 880
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
885 890 895
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
900 905 910
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
915 920 925
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
930 935 940
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
945 950 955 960
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
965 970 975
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
980
<210> 62
<211> 233
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 62
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Ala
20 25 30
Val His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Val Ala Arg Val Ile Trp Ala Gly Gly Ile Thr His Tyr Asn Ser Ala
50 55 60
Leu Met Ser Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg
85 90 95
Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Trp Ala Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
115 120 125
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His
165 170 175
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
180 185 190
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
195 200 205
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu
210 215 220
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
225 230
<210> 63
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 63
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 64
<211> 666
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 64
gacatccaga tgacacagag ccctagcagc ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacctgta gagccagcag cgccagatcc agcgtgtcct atattcacgt ggcctggtat 120
cagcagaagc ccggcaaagc ccctaagctg ctgatctacg acaccagcaa actggccagc 180
ttcctgtaca gcggcgtgcc ctctagattc agcggcagca gatctggcac cgacttcacc 240
ctgaccataa gcagcctgca gcctgaggac ttcgccacct actactgctt tcaaggcagc 300
ggctacccct acacctttgg ccagggaaca aaggtggaaa tcaagagaac agtggccgct 360
cctagcgtgt tcatcttccc accttccgac gagcagctga agtctggcac agcctctgtc 420
gtgtgcctgc tgaacaactt ctaccccaga gaagccaagg tgcagtggaa ggtggacaac 480
gccctgcaga gcggcaatag ccaagagagc gtgaccgagc aggacagcaa ggactctacc 540
tacagcctga gcagcaccct gacactgagc aaggccgact acgagaagca caaagtgtac 600
gcctgcgaag tgacccacca gggcctttct agccctgtga ccaagagctt caaccggggc 660
gaatgt 666
<210> 65
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 65
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100 105 110
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 66
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗克雷伯氏菌属Fab-IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 66
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ala Arg Ser Ser Val
20 25 30
Ser Tyr Ile His Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Phe Leu Tyr Ser
50 55 60
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr
65 70 75 80
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val
100 105 110
Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu
130 135 140
Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn
145 150 155 160
Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser
165 170 175
Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala
180 185 190
Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly
195 200 205
Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215 220
<210> 67
<211> 1350
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗沙门氏菌属LPS IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 67
gaagtgaagc tggtggaatc tggcggcgga ctggttcaac ctggcggatc tctgtctctg 60
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc gactactaca tgacctgggt ccgacaggcc 120
cctggaaaag ctcctgaatg gctggccctg atccggaaca agagaaacgg cgataccgcc 180
gagtacagcg cctctgtgaa gggcagattc accatcagcc gggactacag ccggtccatc 240
ctgcaccttc agatgaacgc cctgagaacc gaggactccg ccacctacta ttgcgtgcga 300
caaggcagag gctacaccct ggattattgg ggccagggca caagcgtgac agtgtctagc 360
gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 660
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 900
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggacgag 1080
ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200
ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320
cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 1350
<210> 68
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗沙门氏菌属LPS IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 68
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 69
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗沙门氏菌属LPS IgG（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 69
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 70
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗沙门氏菌属LPS（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 70
Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
1 5 10 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
20 25 30
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
35 40 45
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
50 55 60
Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
65 70 75 80
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
85 90 95
Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
100 105 110
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp
115 120 125
Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
130 135 140
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
145 150 155 160
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
165 170 175
Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
180 185 190
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
195 200 205
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215
<210> 71
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗沙门氏菌属LPS（轻链）的DNA序列
<400> 71
gacatccaga tgaatcagag ccccagcagc ctgtctgcca gcctgggaga taccatcagc 60
atcacctgtc gggccagcca gaacatcaac atctggctga gctggtatca gcagaaaccc 120
ggcaacgtgc ccaagctgct gatctacaag gccagcaatc tgcacaccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gctctggcag cggcaccgac ttcaccctga tcatatctag cctgcagcct 240
gaggatatcg ccacctacta ctgcctgcaa ggccagagct accccagaac atttggcgga 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gacggtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360
gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420
agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480
agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540
agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600
agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgt 639
<210> 72
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗沙门氏菌属LPS（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 72
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 73
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 73
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 74
<211> 2124
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 74
gaagtgaagc tggtggaatc tggcggcgga ctggttcaac ctggcggatc tctgtctctg 60
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc gactactaca tgacctgggt ccgacaggcc 120
cctggaaaag ctcctgaatg gctggccctg atccggaaca agagaaacgg cgataccgcc 180
gagtacagcg cctctgtgaa gggcagattc accatcagcc gggactacag ccggtccatc 240
ctgcaccttc agatgaacgc cctgagaacc gaggactccg ccacctacta ttgcgtgcga 300
caaggcagag gctacaccct ggattattgg ggccagggca caagcgtgac agtgtctagc 360
gccagcacaa agggcccctc tgtttttcca ctggctccca gcagcaagag cacaagcgga 420
ggaacagctg ccctgggatg cctcgtgaag gactacttcc ctgaaccagt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac ttctggggtc cacactttcc cagctgtcct gcagtctagc 540
ggactgtact ctctgagcag cgtggtcaca gtgcctagct ctagcctggg cacccagacc 600
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacacgaagg tcgacaaaaa ggtggaaccc 660
aagagctgcg acaagaccca tacaggcggc ggaggatctg gcggaggtgg aagcggaggc 720
ggaggaagcg gtggcggcgg tagtggcggt ggtggttcag gcggtggcgg atctgaagtg 780
aaactggttg aaagcggcgg aggcctggtt cagccaggtg gaagtctctc tctgtcttgt 840
gccgcctctg gctttacctt ctctgattac tatatgacgt gggttcgcca agctcctggc 900
aaggcaccag aatggctcgc tctgattaga aacaagcgga atggcgacac agccgagtat 960
tccgccagcg tgaaaggccg gttcaccatc tccagagact actcccgcag catcctgcat 1020
ctgcaaatga atgctctgcg gaccgaggac agcgctacct attactgcgt taggcaaggc 1080
cggggataca cactggacta ctggggacaa ggcacctccg tgactgtgtc ctccgctagc 1140
accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 1200
gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 1260
tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 1320
tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 1380
tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct 1440
tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 1500
gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 1560
acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 1620
gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 1680
taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 1740
aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1800
aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga cgagctgacc 1860
aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1920
gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1980
tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 2040
gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2100
agcctctccc tgtctccggg taaa 2124
<210> 75
<211> 708
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG Fab-IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 75
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
260 265 270
Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser
275 280 285
Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu
290 295 300
Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr
305 310 315 320
Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg
325 330 335
Ser Ile Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala
340 345 350
Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp
355 360 365
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
370 375 380
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
385 390 395 400
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
405 410 415
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
420 425 430
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
435 440 445
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn
450 455 460
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser
465 470 475 480
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu
485 490 495
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
500 505 510
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
515 520 525
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
530 535 540
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
545 550 555 560
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
565 570 575
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
580 585 590
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
595 600 605
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val
610 615 620
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
625 630 635 640
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
645 650 655
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
660 665 670
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
675 680 685
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
690 695 700
Ser Pro Gly Lys
705
<210> 76
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 76
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 77
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 77
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 78
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG（轻链）的DNA序列
<400> 78
gacatccaga tgaatcagag ccccagcagc ctgtctgcca gcctgggaga taccatcagc 60
atcacctgtc gggccagcca gaacatcaac atctggctga gctggtatca gcagaaaccc 120
ggcaacgtgc ccaagctgct gatctacaag gccagcaatc tgcacaccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gctctggcag cggcaccgac ttcaccctga tcatatctag cctgcagcct 240
gaggatatcg ccacctacta ctgcctgcaa ggccagagct accccagaac atttggcgga 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gacggtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360
gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420
agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480
agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540
agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600
agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgt 639
<210> 79
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 79
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 80
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 80
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 81
<211> 2130
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 81
gaagtgaagc tggtggaatc tggcggcgga ctggttcaac ctggcggatc tctgtctctg 60
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc gactactaca tgacctgggt ccgacaggcc 120
cctggaaaag ctcctgaatg gctggccctg atccggaaca agagaaacgg cgataccgcc 180
gagtacagcg cctctgtgaa gggcagattc accatcagcc gggactacag ccggtccatc 240
ctgcaccttc agatgaacgc cctgagaacc gaggactccg ccacctacta ttgcgtgcga 300
caaggcagag gctacaccct ggattattgg ggccagggca caagcgtgac agtgtctagc 360
gctagcacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420
ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600
tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagaa agttgagccc 660
aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720
ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780
gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840
tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 900
agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960
gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020
aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggacgag 1080
ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140
gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200
ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260
cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320
cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa ggatccggcg gaggcggatc tggtggcgga 1380
ggtagtggcg gcggaggttc aggtggtggt ggtagcggag gtggcggttc tggcggtggt 1440
ggatctgaag tgaagctggt ggaatctggc ggaggcctgg ttcaacctgg cggatctctg 1500
tctctgagct gtgccgccag cggcttcacc ttcagcgact actacatgac ctgggtccga 1560
caggcccctg gaaaagctcc tgaatggctg gccctgatcc ggaacaagag aaacggcgat 1620
accgccgagt acagcgcctc tgtgaagggc agattcacca tcagccggga ctacagccgg 1680
tccatcctgc accttcagat gaacgccctg agaaccgagg atagcgccac ctactactgc 1740
gtgcgacaag gcagaggcta caccctggat tattggggcc agggcacaag cgtgacagtg 1800
tctagcgcct ctacaaaggg ccccagcgtt ttcccactgg ctcctagcag caagagcaca 1860
agcggaggaa cagccgctct gggctgtctg gtcaaggact actttcccga gcctgtgacc 1920
gtgtcctgga attctggcgc tctgacaagc ggcgtgcaca cctttccagc tgtgctgcaa 1980
agcagcggcc tgtactctct gagcagcgtg gtcacagtgc caagctctag cctgggcacc 2040
cagacctaca tctgcaatgt gaaccacaag cctagcaaca ccaaggtgga caagaaggtg 2100
gaacccaaga gctgcgacaa gacccacacc 2130
<210> 82
<211> 710
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 82
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
450 455 460
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
465 470 475 480
Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
485 490 495
Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser
500 505 510
Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu
515 520 525
Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr
530 535 540
Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg
545 550 555 560
Ser Ile Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala
565 570 575
Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp
580 585 590
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
595 600 605
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
610 615 620
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
625 630 635 640
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
645 650 655
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
660 665 670
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn
675 680 685
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser
690 695 700
Cys Asp Lys Thr His Thr
705 710
<210> 83
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 83
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 84
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 84
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 85
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 85
gacatccaga tgaatcagag ccccagcagc ctgtctgcca gcctgggaga taccatcagc 60
atcacctgtc gggccagcca gaacatcaac atctggctga gctggtatca gcagaaaccc 120
ggcaacgtgc ccaagctgct gatctacaag gccagcaatc tgcacaccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gctctggcag cggcaccgac ttcaccctga tcatatctag cctgcagcct 240
gaggatatcg ccacctacta ctgcctgcaa ggccagagct accccagaac atttggcgga 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gacggtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360
gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420
agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480
agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540
agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600
agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgt 639
<210> 86
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 86
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 87
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 87
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 88
<211> 2904
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 88
gaagtgaagc tggtggaatc tggcggcgga ctggttcaac ctggcggatc tctgtctctg 60
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc gactactaca tgacctgggt ccgacaggcc 120
cctggaaaag ctcctgaatg gctggccctg atccggaaca agagaaacgg cgataccgcc 180
gagtacagcg cctctgtgaa gggcagattc accatcagcc gggactacag ccggtccatc 240
ctgcaccttc agatgaacgc cctgagaacc gaggactccg ccacctacta ttgcgtgcga 300
caaggcagag gctacaccct ggattattgg ggccagggca caagcgtgac agtgtctagc 360
gccagcacaa agggcccctc tgtttttcca ctggctccca gcagcaagag cacaagcgga 420
ggaacagctg ccctgggatg cctcgtgaag gactacttcc ctgaaccagt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac ttctggggtc cacactttcc cagctgtcct gcagtctagc 540
ggactgtact ctctgagcag cgtggtcaca gtgcctagct ctagcctggg cacccagacc 600
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacacgaagg tcgacaaaaa ggtggaaccc 660
aagagctgcg acaagaccca tacaggcggc ggaggatctg gcggaggtgg aagcggaggc 720
ggaggaagcg gtggcggcgg tagtggcggt ggtggttcag gcggtggcgg atctgaagtg 780
aaactggttg aaagcggcgg aggcctggtt cagccaggtg gaagtctctc tctgtcttgt 840
gccgcctctg gctttacctt ctctgattac tatatgacgt gggttcgcca agctcctggc 900
aaggcaccag aatggctcgc tctgattaga aacaagcgga atggcgacac agccgagtat 960
tccgccagcg tgaaaggccg gttcaccatc tccagagact actcccgcag catcctgcat 1020
ctgcaaatga atgctctgcg gaccgaggac agcgctacct attactgcgt taggcaaggc 1080
cggggataca cactggacta ctggggacaa ggcacctccg tgactgtgtc ctccgctagc 1140
accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 1200
gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 1260
tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 1320
tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 1380
tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct 1440
tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 1500
gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 1560
acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 1620
gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 1680
taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 1740
aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1800
aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga cgagctgacc 1860
aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1920
gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1980
tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 2040
gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2100
agcctctccc tgtctccggg taaaggatcc ggcggaggcg gatctggtgg cggaggtagt 2160
ggcggcggag gttcaggtgg tggtggtagc ggaggtggcg gttctggcgg tggtggatct 2220
gaagtgaagc tggtggaatc tggcggaggc ctggttcaac ctggcggatc tctgtctctg 2280
agctgtgccg ccagcggctt caccttcagc gactactaca tgacctgggt ccgacaggcc 2340
cctggaaaag ctcctgaatg gctggccctg atccggaaca agagaaacgg cgataccgcc 2400
gagtacagcg cctctgtgaa gggcagattc accatcagcc gggactacag ccggtccatc 2460
ctgcaccttc agatgaacgc cctgagaacc gaggatagcg ccacctacta ctgcgtgcga 2520
caaggcagag gctacaccct ggattattgg ggccagggca caagcgtgac agtgtctagc 2580
gcctctacaa agggccccag cgttttccca ctggctccta gcagcaagag cacaagcgga 2640
ggaacagccg ctctgggctg tctggtcaag gactactttc ccgagcctgt gaccgtgtcc 2700
tggaattctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagctgtgct gcaaagcagc 2760
ggcctgtact ctctgagcag cgtggtcaca gtgccaagct ctagcctggg cacccagacc 2820
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacaccaagg tggacaagaa ggtggaaccc 2880
aagagctgcg acaagaccca cacc 2904
<210> 89
<211> 968
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 89
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
260 265 270
Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser
275 280 285
Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu
290 295 300
Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr
305 310 315 320
Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg
325 330 335
Ser Ile Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala
340 345 350
Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp
355 360 365
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
370 375 380
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
385 390 395 400
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
405 410 415
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
420 425 430
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
435 440 445
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn
450 455 460
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser
465 470 475 480
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu
485 490 495
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
500 505 510
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
515 520 525
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
530 535 540
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
545 550 555 560
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
565 570 575
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
580 585 590
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
595 600 605
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val
610 615 620
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
625 630 635 640
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
645 650 655
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
660 665 670
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
675 680 685
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
690 695 700
Ser Pro Gly Lys Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
705 710 715 720
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
725 730 735
Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
740 745 750
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr
755 760 765
Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala
770 775 780
Pro Glu Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala
785 790 795 800
Glu Tyr Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr
805 810 815
Ser Arg Ser Ile Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp
820 825 830
Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp
835 840 845
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
850 855 860
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
865 870 875 880
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
885 890 895
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
900 905 910
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
915 920 925
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
930 935 940
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
945 950 955 960
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
965
<210> 90
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（重链） Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 90
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
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Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
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165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
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195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 91
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 91
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 92
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 92
gacatccaga tgaatcagag ccccagcagc ctgtctgcca gcctgggaga taccatcagc 60
atcacctgtc gggccagcca gaacatcaac atctggctga gctggtatca gcagaaaccc 120
ggcaacgtgc ccaagctgct gatctacaag gccagcaatc tgcacaccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gctctggcag cggcaccgac ttcaccctga tcatatctag cctgcagcct 240
gaggatatcg ccacctacta ctgcctgcaa ggccagagct accccagaac atttggcgga 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gacggtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360
gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420
agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480
agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540
agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600
agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgt 639
<210> 93
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 93
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
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130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
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195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 94
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 94
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 95
<211> 4452
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 95
gaagtgaagc tggtggaaag cggcggagga ctggttcaac ctggcggatc tctgagcctg 60
tcttgtgccg ccagcggctt caccttcagc gactactaca tgacctgggt ccgacaggcc 120
cctggaaaag ctcctgaatg gctggccctg atccggaaca agagaaacgg cgataccgcc 180
gagtacagcg cctctgtgaa gggcagattc accatcagcc gggactacag ccggtccatc 240
ctgcaccttc agatgaacgc cctgagaacc gaggactccg ccacctacta ttgcgtgcga 300
caaggcagag gctacaccct ggattattgg ggccagggca caagcgtgac agtgtctagc 360
gccagcacaa agggcccctc tgtttttcca ctggctccca gcagcaagag cacaagcgga 420
ggaacagctg ccctgggatg cctcgtgaag gactacttcc ctgaaccagt gaccgtgtcc 480
tggaactctg gcgctctgac atctggggtg cacacattcc ctgctgtgct gcagagcagc 540
ggcctgtatt ctctgagcag cgtggtcaca gtgcccagct ctagtctggg cacccagacc 600
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacacgaagg tcgacaaaaa ggtggaaccc 660
aagagctgcg acaagaccca tacaggcgga ggcggatctg gtggtggtgg atctggcggt 720
ggcggttcag gtggcggcgg tagcggaggt ggtggtagtg gtggtggcgg ctctgaagtg 780
aaactcgtcg aatctggtgg cggactggtg cagccaggtg gaagtctgtc tctgagctgt 840
gccgcctctg gctttacctt ctctgattac tatatgacgt gggttcgcca agctcctggc 900
aaggcaccag aatggctcgc tctgattaga aacaagcgga atggcgacac agccgagtat 960
tccgccagcg tgaaaggccg gttcaccatc tccagagact actcccgcag catcctgcat 1020
ctgcaaatga atgctctgcg gaccgaggac agcgctacct attactgcgt taggcaaggc 1080
cggggataca cactggacta ctggggacaa ggcacctccg tgactgtgtc ctctgcctct 1140
accaagggac ccagcgtgtt cccacttgca cctagcagca agtctaccag cggcggaact 1200
gccgctctcg gatgcctggt caaagattat ttccccgaac ctgtcaccgt cagctggaat 1260
agcggagccc ttaccagcgg agtgcatact ttccctgccg tcctccagtc atccgggctg 1320
tatagtctgt cctccgtggt taccgtgcca agcagctctc tgggaacaca gacatatatc 1380
tgtaatgtca atcacaaacc ctccaacaca aaagtggaca aaaaagtcga gccgaagtcc 1440
tgtgataaga cacacactgg cggcggaggt tctggcggag gtggaagcgg aggcggtggc 1500
tcaggcggcg gtggcagtgg cggaggcggt agcggcggag gcggttctga agttaagctg 1560
gttgagtccg gcggtggcct tgtgcagcct ggtggttctc tctctctgtc ctgtgctgcc 1620
tccggattca ccttttccga ttattacatg acatgggttc gacaagcacc agggaaagcc 1680
ccagagtggc tggcactcat cagaaacaaa cgcaacgggg acaccgccga atactctgcc 1740
agtgtcaaag gcaggtttac aatcagcagg gattactctc ggagcattct ccacctccaa 1800
atgaacgcac tccgcacaga ggatagcgcc acttactact gtgtccggca aggacggggc 1860
tataccctcg attactgggg tcaagggaca tctgtgaccg tcagttctgc tagcaccaag 1920
ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 1980
ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 2040
gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 2100
ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 2160
gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 2220
aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc 2280
ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc 2340
gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc 2400
gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt 2460
gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga atggcaagga gtacaagtgc 2520
aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 2580
cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggacgagct gaccaagaac 2640
caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg 2700
gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 2760
ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 2820
gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 2880
tccctgtctc cgggtaaagg atccggcgga ggcggatctg gcggcggagg tagtggcggc 2940
ggaggttcag gtggtggtgg tagcggaggt ggcggttctg gcggtggtgg aagcgaagtg 3000
aagctggtgg aatctggcgg aggcctggtt caacctggcg gatctctgtc tctgagctgt 3060
gccgccagcg gcttcacctt cagcgactac tacatgacct gggtccgaca ggcccctgga 3120
aaagctcctg aatggctggc cctgatccgg aacaagagaa acggcgatac cgccgagtac 3180
agcgcctctg tgaagggcag attcaccatc agccgggact acagccggtc catcctgcac 3240
cttcagatga acgccctgag aaccgaggat agcgccacct actactgcgt gcgacaaggc 3300
agaggctaca ccctggatta ttggggccag ggcacaagcg tgacagtgtc tagcgcctct 3360
acaaagggcc ccagcgtttt cccactggct cctagcagca agagcacaag cggaggaaca 3420
gccgctctgg gctgtctggt caaggactac tttcccgagc ctgtgaccgt gtcctggaat 3480
tctggcgctc tgacaagcgg cgtgcacacc tttccagctg tgctgcaaag cagcggcctg 3540
tactctctga gcagcgtggt cacagtgcca agctctagcc tgggcaccca gacctacatc 3600
tgcaatgtga accacaagcc tagcaacacc aaggtggaca agaaggtgga acccaagagc 3660
tgcgacaaga cccatacagg cggtggcgga agcggaggcg gtggctcagg tggcggaggt 3720
tctggcggag gcggcagtgg tggtggtggc agtggtggcg gaggatctga agtcaaactg 3780
gtcgaaagcg gaggtggact ggttcagcca ggtggaagcc tgtctctgtc ttgtgccgct 3840
tccggcttta ccttctctga ttactatatg acgtgggttc gccaagctcc tggcaaggca 3900
ccagaatggc tcgctctgat tagaaacaag cggaatggcg acacagccga gtattccgcc 3960
agcgtgaaag gccggttcac catctccaga gactactccc gcagcatcct gcatctgcaa 4020
atgaatgctc tgcggaccga ggactccgcc acatattact gtgtcagaca aggccgggga 4080
tacacactcg actactgggg acagggaacc tccgtgactg tgtcctctgc cagcacaaag 4140
gggccctccg tgtttcctct ggctccaagc tccaagtcta ccagcggtgg aactgctgcc 4200
ctgggatgcc tcgtgaagga ttacttccca gaaccagtga cagtcagctg gaacagcgga 4260
gccctgactt ctggggtgca cacattccct gccgtcctgc aatcttctgg cctgtacagc 4320
ctgtcctccg tcgtgaccgt tccttctagc tctctgggaa cacagacata tatctgtaat 4380
gtcaatcaca aaccctccaa tacgaaggtc gacaaaaagg tcgagcctaa gtcctgtgat 4440
aagacccaca cc 4452
<210> 96
<211> 1484
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 96
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
260 265 270
Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser
275 280 285
Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu
290 295 300
Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr
305 310 315 320
Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg
325 330 335
Ser Ile Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala
340 345 350
Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp
355 360 365
Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
370 375 380
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
385 390 395 400
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
405 410 415
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
420 425 430
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
435 440 445
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn
450 455 460
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser
465 470 475 480
Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
485 490 495
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
500 505 510
Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
515 520 525
Gln Pro Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr
530 535 540
Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala
545 550 555 560
Pro Glu Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala
565 570 575
Glu Tyr Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr
580 585 590
Ser Arg Ser Ile Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp
595 600 605
Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp
610 615 620
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
625 630 635 640
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
645 650 655
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
660 665 670
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
675 680 685
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
690 695 700
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
705 710 715 720
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
725 730 735
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
740 745 750
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
755 760 765
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
770 775 780
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
785 790 795 800
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
805 810 815
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
820 825 830
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
835 840 845
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
850 855 860
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn
865 870 875 880
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
885 890 895
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
900 905 910
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
915 920 925
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
930 935 940
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
945 950 955 960
Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
965 970 975
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
980 985 990
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly
995 1000 1005
Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser
1010 1015 1020
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala
1025 1030 1035
Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg
1040 1045 1050
Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe
1055 1060 1065
Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile Leu His Leu Gln Met
1070 1075 1080
Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Val Arg
1085 1090 1095
Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
1100 1105 1110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
1115 1120 1125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
1130 1135 1140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
1145 1150 1155
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
1160 1165 1170
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
1175 1180 1185
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
1190 1195 1200
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro
1205 1210 1215
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
1220 1225 1230
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
1235 1240 1245
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Val Glu Ser
1250 1255 1260
Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Ser Leu Ser Cys
1265 1270 1275
Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Thr Trp Val
1280 1285 1290
Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu Ala Leu Ile Arg
1295 1300 1305
Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala Ser Val Lys
1310 1315 1320
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile Leu His
1325 1330 1335
Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr
1340 1345 1350
Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
1355 1360 1365
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
1370 1375 1380
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
1385 1390 1395
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
1400 1405 1410
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
1415 1420 1425
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser
1430 1435 1440
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile
1445 1450 1455
Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys
1460 1465 1470
Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
1475 1480
<210> 97
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链） Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 97
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Pro Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Leu Ile Arg Asn Lys Arg Asn Gly Asp Thr Ala Glu Tyr Ser Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Tyr Ser Arg Ser Ile
65 70 75 80
Leu His Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Val Arg Gln Gly Arg Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 98
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（重链） Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 98
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 99
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 99
gacatccaga tgaatcagag ccccagcagc ctgtctgcca gcctgggaga taccatcagc 60
atcacctgtc gggccagcca gaacatcaac atctggctga gctggtatca gcagaaaccc 120
ggcaacgtgc ccaagctgct gatctacaag gccagcaatc tgcacaccgg cgtgcccagc 180
agattttctg gctctggcag cggcaccgac ttcaccctga tcatatctag cctgcagcct 240
gaggatatcg ccacctacta ctgcctgcaa ggccagagct accccagaac atttggcgga 300
ggcaccaagc tggaaatcaa gacggtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360
gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420
agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480
agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540
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agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgt 639
<210> 100
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 100
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 101
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗沙门氏菌属LPS Fab-Fab-IgG-Fab-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 101
Asp Ile Gln Met Asn Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ile Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Ile Trp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ile Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly Gln Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 102
<211> 1341
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 102
gaggttcagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtcaagc ctggcagcag cgtgaagatc 60
agctgtaaag gcagcggcta caccttcacc gactacaaca tggaatgggt caagcagagc 120
cacggcaaga gcctggaatg gatcggcgtg atcaacccca acaaccggtt caccagctac 180
aaccagaact tcagaggcaa ggccacactg accgtggaca agagcagcag caccgcctac 240
atggatctga gaagcctgac cagcgaggac agcgccgtgt atttttgtgc cggcagccgg 300
tggtatcagt acgactattg gggccagggc acaaccctga ccgttagctc tgctagcacc 360
aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420
gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480
ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540
tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600
aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660
gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc 720
ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggacga gctgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 1260
aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320
ctctccctgt ctccgggtaa a 1341
<210> 103
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 103
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 104
<211> 225
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 104
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr
225
<210> 105
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 105
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 106
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）（轻链）的DNA序列
<400> 106
caggtggtgg tcacacaaga gagcgccctg acaacaagcc ctggcgagac agtgaccctg 60
acctgcagat cttctacagg cgccgtgacc acctccaact acgccaattg ggtgcaagag 120
aagcccgacc acctgttcac aggcctgatc ggcggcatca acaatagagc acctggcgtg 180
ccagccagat tcagcggatc tctgatcgga gacaaggccg cactgacaat cacaggcgcc 240
cagacagagg acgaggccat ctacttttgc gccctgtggt acagcaacca ctgggttttc 300
ggcggaggca ccaagctgac agttctgggc caacctaagg ccgctcctag cgtgacactg 360
ttccctccaa gcagcgaaga actgcaggcc aacaaggcca cactcgtgtg cctgatcagc 420
gacttttatc ctggcgccgt gaccgtggcc tggaaggctg atagttctcc tgtgaaggcc 480
ggcgtggaaa ccaccacacc tagcaagcag agcaacaaca aatacgccgc cagcagctac 540
ctgagcctga cacctgagca gtggaagtcc cacagatcct acagctgcca agtgacccac 600
gagggcagca ccgtggaaaa aacagtggcc cctaccgagt gcagc 645
<210> 107
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 107
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 108
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗淋病（2C7）IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 108
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 109
<211> 2106
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 109
gaggtacaac tgcaacagag tggccccgag cttgtgaagc cagggtccag cgtgaagatt 60
tcttgcaagg gaagtgggta cacgttcacg gactacaaca tggagtgggt gaaacaaagt 120
cacggtaaat ccttggagtg gatcggagtt atcaacccaa acaaccgatt tactagctac 180
aaccagaatt tcagggggaa ggcaacactc accgtcgaca aatcctcttc tacggcatat 240
atggatctcc gctcacttac tagcgaggac tctgcagtct atttttgcgc ggggagccga 300
tggtatcaat acgactattg gggtcaaggt acaacgctta ctgttagctc agctagcacc 360
aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420
gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480
ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540
tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600
aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660
gacaaaactc acacaggtgg cggaggatct ggtggaggag ggagcggagg gggtgggtcc 720
ggagggggtg gttccggagg tggtggatca ggtggcggag gaagtgaggt tcagctgcag 780
cagtctggac ctgagctggt caagcctggc agcagcgtga agatcagctg taaaggcagc 840
ggctacacct tcaccgacta caacatggaa tgggtcaagc agagccacgg caagagcctg 900
gaatggatcg gcgtgatcaa ccccaacaac cggttcacca gctacaacca gaacttcaga 960
ggcaaggcca cactgaccgt ggacaagagc agcagcaccg cctacatgga tctgagaagc 1020
ctgaccagcg aggacagcgc cgtgtatttt tgtgccggca gccggtggta tcagtacgac 1080
tattggggcc agggcacaac cctgaccgtt agctctgcta gcaccaaggg cccatcggtc 1140
ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 1200
gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 1260
ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 1320
gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 1380
cccagcaaca ccaaggtgga caagaaagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca 1440
tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca 1500
aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac 1560
gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat 1620
aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 1680
ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 1740
aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa 1800
ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg gacgagctga ccaagaacca ggtcagcctg 1860
acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1920
cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1980
ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc 2040
tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg 2100
ggtaaa 2106
<210> 110
<211> 702
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG Fab-IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 110
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
225 230 235 240
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
245 250 255
Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser Ser
260 265 270
Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Asn
275 280 285
Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly
290 295 300
Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe Arg
305 310 315 320
Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met
325 330 335
Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala
340 345 350
Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu
355 360 365
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
370 375 380
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
385 390 395 400
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
405 410 415
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
420 425 430
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
435 440 445
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
450 455 460
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
465 470 475 480
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
485 490 495
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
500 505 510
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val
515 520 525
Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
530 535 540
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
545 550 555 560
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
565 570 575
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser
580 585 590
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
595 600 605
Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
610 615 620
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
625 630 635 640
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
645 650 655
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
660 665 670
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
675 680 685
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
690 695 700
<210> 111
<211> 225
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 111
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr
225
<210> 112
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 112
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 113
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG（轻链）的DNA序列
<400> 113
caggtggtgg tcacacaaga gagcgccctg acaacaagcc ctggcgagac agtgaccctg 60
acctgcagat cttctacagg cgccgtgacc acctccaact acgccaattg ggtgcaagag 120
aagcccgacc acctgttcac aggcctgatc ggcggcatca acaatagagc acctggcgtg 180
ccagccagat tcagcggatc tctgatcgga gacaaggccg cactgacaat cacaggcgcc 240
cagacagagg acgaggccat ctacttttgc gccctgtggt acagcaacca ctgggttttc 300
ggcggaggca ccaagctgac agttctgggc caacctaagg ccgctcctag cgtgacactg 360
ttccctccaa gcagcgaaga actgcaggcc aacaaggcca cactcgtgtg cctgatcagc 420
gacttttatc ctggcgccgt gaccgtggcc tggaaggctg atagttctcc tgtgaaggcc 480
ggcgtggaaa ccaccacacc tagcaagcag agcaacaaca aatacgccgc cagcagctac 540
ctgagcctga cacctgagca gtggaagtcc cacagatcct acagctgcca agtgacccac 600
gagggcagca ccgtggaaaa aacagtggcc cctaccgagt gcagc 645
<210> 114
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 114
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 115
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 115
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 116
<211> 2112
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 116
gaggttcagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtcaagc ctggcagcag cgtgaagatc 60
agctgtaaag gcagcggcta caccttcacc gactacaaca tggaatgggt caagcagagc 120
cacggcaaga gcctggaatg gatcggcgtg atcaacccca acaaccggtt caccagctac 180
aaccagaact tcagaggcaa ggccacactg accgtggaca agagcagcag caccgcctac 240
atggatctga gaagcctgac cagcgaggac agcgccgtgt atttttgtgc cggcagccgg 300
tggtatcagt acgactattg gggccagggc acaaccctga ccgttagctc tgctagcacc 360
aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420
gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480
ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540
tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600
aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660
gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc 720
ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggacga gctgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 1260
aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320
ctctccctgt ctccgggtaa aggatccggt ggcggaggat ctggtggagg agggagcgga 1380
gggggtgggt ccggaggggg tggttccgga ggtggtggat caggtggcgg aggaagtgag 1440
gtacaactgc aacagagtgg ccccgagctt gtgaagccag ggtccagcgt gaagatttct 1500
tgcaagggaa gtgggtacac gttcacggac tacaacatgg agtgggtgaa acaaagtcac 1560
ggtaaatcct tggagtggat cggagttatc aacccaaaca accgatttac tagctacaac 1620
cagaatttca gggggaaggc aacactcacc gtcgacaaat cctcttctac ggcatatatg 1680
gatctccgct cacttactag cgaggactct gcagtctatt tttgcgcggg gagccgatgg 1740
tatcaatacg actattgggg tcaaggtaca acgcttactg ttagctcagc tagcaccaag 1800
ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc tccaagagca cctctggggg cacagcggcc 1860
ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 1920
gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 1980
ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cccagaccta catctgcaac 2040
gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac 2100
aaaactcaca ca 2112
<210> 117
<211> 704
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 117
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly
435 440 445
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
450 455 460
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
465 470 475 480
Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser Ser
485 490 495
Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Asn
500 505 510
Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly
515 520 525
Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe Arg
530 535 540
Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met
545 550 555 560
Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala
565 570 575
Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu
580 585 590
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
595 600 605
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
610 615 620
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
625 630 635 640
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
645 650 655
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
660 665 670
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
675 680 685
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
690 695 700
<210> 118
<211> 225
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 118
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr
225
<210> 119
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 119
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 120
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 120
caggtggtgg tcacacaaga gagcgccctg acaacaagcc ctggcgagac agtgaccctg 60
acctgcagat cttctacagg cgccgtgacc acctccaact acgccaattg ggtgcaagag 120
aagcccgacc acctgttcac aggcctgatc ggcggcatca acaatagagc acctggcgtg 180
ccagccagat tcagcggatc tctgatcgga gacaaggccg cactgacaat cacaggcgcc 240
cagacagagg acgaggccat ctacttttgc gccctgtggt acagcaacca ctgggttttc 300
ggcggaggca ccaagctgac agttctgggc caacctaagg ccgctcctag cgtgacactg 360
ttccctccaa gcagcgaaga actgcaggcc aacaaggcca cactcgtgtg cctgatcagc 420
gacttttatc ctggcgccgt gaccgtggcc tggaaggctg atagttctcc tgtgaaggcc 480
ggcgtggaaa ccaccacacc tagcaagcag agcaacaaca aatacgccgc cagcagctac 540
ctgagcctga cacctgagca gtggaagtcc cacagatcct acagctgcca agtgacccac 600
gagggcagca ccgtggaaaa aacagtggcc cctaccgagt gcagc 645
<210> 121
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 121
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 122
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 122
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 123
<211> 2877
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 123
gaggtacaac tgcaacagag tggccccgag cttgtgaagc cagggtccag cgtgaagatt 60
tcttgcaagg gaagtgggta cacgttcacg gactacaaca tggagtgggt gaaacaaagt 120
cacggtaaat ccttggagtg gatcggagtt atcaacccaa acaaccgatt tactagctac 180
aaccagaatt tcagggggaa ggcaacactc accgtcgaca aatcctcttc tacggcatat 240
atggatctcc gctcacttac tagcgaggac tctgcagtct atttttgcgc ggggagccga 300
tggtatcaat acgactattg gggtcaaggt acaacgctta ctgttagctc agctagcacc 360
aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420
gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480
ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540
tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600
aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660
gacaaaactc acacaggtgg cggaggatct ggtggaggag ggagcggagg gggtgggtcc 720
ggagggggtg gttccggagg tggtggatca ggtggcggag gaagtgaggt tcagctgcag 780
cagtctggac ctgagctggt caagcctggc agcagcgtga agatcagctg taaaggcagc 840
ggctacacct tcaccgacta caacatggaa tgggtcaagc agagccacgg caagagcctg 900
gaatggatcg gcgtgatcaa ccccaacaac cggttcacca gctacaacca gaacttcaga 960
ggcaaggcca cactgaccgt ggacaagagc agcagcaccg cctacatgga tctgagaagc 1020
ctgaccagcg aggacagcgc cgtgtatttt tgtgccggca gccggtggta tcagtacgac 1080
tattggggcc agggcacaac cctgaccgtt agctctgcta gcaccaaggg cccatcggtc 1140
ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 1200
gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 1260
ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 1320
gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 1380
cccagcaaca ccaaggtgga caagaaagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca 1440
tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca 1500
aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac 1560
gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat 1620
aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 1680
ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 1740
aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa 1800
ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg gacgagctga ccaagaacca ggtcagcctg 1860
acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1920
cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1980
ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc 2040
tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg 2100
ggtaaaggat ccggtggcgg aggatctggt ggaggaggga gcggaggggg tgggtccgga 2160
gggggtggtt ccggaggtgg tggatcaggt ggcggaggaa gtgaggtaca actgcaacag 2220
agtggccccg agcttgtgaa gccagggtcc agcgtgaaga tttcttgcaa gggaagtggg 2280
tacacgttca cggactacaa catggagtgg gtgaaacaaa gtcacggtaa atccttggag 2340
tggatcggag ttatcaaccc aaacaaccga tttactagct acaaccagaa tttcaggggg 2400
aaggcaacac tcaccgtcga caaatcctct tctacggcat atatggatct ccgctcactt 2460
actagcgagg actctgcagt ctatttttgc gcggggagcc gatggtatca atacgactat 2520
tggggtcaag gtacaacgct tactgttagc tcagctagca ccaagggccc atcggtcttc 2580
cccctggcac cctcctccaa gagcacctct gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc 2640
aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc 2700
gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc tcaggactct actccctcag cagcgtggtg 2760
accgtgccct ccagcagctt gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc 2820
agcaacacca aggtggacaa gaaagttgag cccaaatctt gtgacaaaac tcacaca 2877
<210> 124
<211> 959
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 124
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
225 230 235 240
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu
245 250 255
Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser Ser
260 265 270
Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Asn
275 280 285
Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly
290 295 300
Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe Arg
305 310 315 320
Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met
325 330 335
Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala
340 345 350
Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu
355 360 365
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
370 375 380
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
385 390 395 400
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
405 410 415
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
420 425 430
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
435 440 445
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
450 455 460
Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
465 470 475 480
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
485 490 495
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
500 505 510
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val
515 520 525
Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
530 535 540
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
545 550 555 560
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
565 570 575
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser
580 585 590
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
595 600 605
Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
610 615 620
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
625 630 635 640
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
645 650 655
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
660 665 670
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
675 680 685
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Ser
690 695 700
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
705 710 715 720
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val
725 730 735
Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser Ser Val
740 745 750
Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Asn Met
755 760 765
Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile Gly Val
770 775 780
Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe Arg Gly
785 790 795 800
Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Asp
805 810 815
Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Gly
820 825 830
Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr
835 840 845
Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro
850 855 860
Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val
865 870 875 880
Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala
885 890 895
Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly
900 905 910
Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly
915 920 925
Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys
930 935 940
Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
945 950 955
<210> 125
<211> 225
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 125
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Glu Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Asn Arg Phe Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe
50 55 60
Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Ser Arg Trp Tyr Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr
225
<210> 126
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 126
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 127
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 127
caggtggtgg tcacacaaga gagcgccctg acaacaagcc ctggcgagac agtgaccctg 60
acctgcagat cttctacagg cgccgtgacc acctccaact acgccaattg ggtgcaagag 120
aagcccgacc acctgttcac aggcctgatc ggcggcatca acaatagagc acctggcgtg 180
ccagccagat tcagcggatc tctgatcgga gacaaggccg cactgacaat cacaggcgcc 240
cagacagagg acgaggccat ctacttttgc gccctgtggt acagcaacca ctgggttttc 300
ggcggaggca ccaagctgac agttctgggc caacctaagg ccgctcctag cgtgacactg 360
ttccctccaa gcagcgaaga actgcaggcc aacaaggcca cactcgtgtg cctgatcagc 420
gacttttatc ctggcgccgt gaccgtggcc tggaaggctg atagttctcc tgtgaaggcc 480
ggcgtggaaa ccaccacacc tagcaagcag agcaacaaca aatacgccgc cagcagctac 540
ctgagcctga cacctgagca gtggaagtcc cacagatcct acagctgcca agtgacccac 600
gagggcagca ccgtggaaaa aacagtggcc cctaccgagt gcagc 645
<210> 128
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 128
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 129
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗淋病（2C7）Fab-IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 129
Gln Val Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser
20 25 30
Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly
35 40 45
Leu Ile Gly Gly Ile Asn Asn Arg Ala Pro Gly Val Pro Ala Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala
65 70 75 80
Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn
85 90 95
His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro
100 105 110
Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu
115 120 125
Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro
130 135 140
Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala
145 150 155 160
Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala
165 170 175
Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg
180 185 190
Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr
195 200 205
Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
210 215
<210> 130
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 130
taagcaggta ccgccaccat gaagtg 26
<210> 131
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 131
tgcttagcta gctggagaaa ctgtc 25
<210> 132
<211> 1350
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 132
caagtgaccc tgagagagtc tggccccgct ctggttaagc ccacacagac cctgacactg 60
acctgcacct tcagcggctt tagcctgtct acagccggca tgagcgtcgg ctggattaga 120
cagcctcctg gcaaagccct ggaatggctg gccgacattt ggtgggacga caagaagcac 180
tacaacccca gcctgaagga ccggctgacc atcagcaagg acaccagcaa gaaccaggtg 240
gtgctgaaag tgaccaacat ggaccctgcc gacaccgcca cctactactg cgccagagac 300
atgatcttca acttctactt cgacgtgtgg ggccagggca ccaccgtgac agttagctct 360
gcctctacaa agggccccag cgtgttccct ctggctccta gcagcaagtc tacaagcgga 420
ggaacagccg ctctgggctg cctggtcaag gattactttc ccgagcctgt gaccgtgtcc 480
tggaattctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagctgtgct gcaaagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtggtcaca gtgccaagct ctagcctggg cacccagacc 600
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacaccaagg tggacaagaa ggtggaaccc 660
aagagctgcg acaagaccca cacctgtcct ccatgtcctg ctccagaact gctcggcgga 720
ccttccgtgt ttctgttccc tccaaagcct aaggacaccc tgatgatcag cagaacccct 780
gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtcc cacgaggatc ccgaagtgaa gttcaattgg 840
tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc aagaccaagc ctagagagga acagtacaac 900
agcacctaca gagtggtgtc tgtgctgacc gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa 960
gagtacaagt gcaaggtgtc caacaaggcc ctgcctgctc ctatcgagaa aaccatctcc 1020
aaggccaagg gccagcctag ggaaccccag gtttacacac tgcctccaag cagggacgag 1080
ctgaccaaga atcaggtgtc cctgacctgc ctcgtgaagg gcttctaccc ttccgatatc 1140
gccgtggaat gggagagcaa tggccagcct gagaacaact acaagacaac ccctcctgtg 1200
ctggacagcg acggctcatt cttcctgtac agcaagctga cagtggacaa gtccagatgg 1260
cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320
cagaagtccc tgagcctgtc tccaggcaag 1350
<210> 133
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 133
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
20 25 30
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 134
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 134
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
20 25 30
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 135
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 135
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 136
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）（轻链）的DNA序列
<400> 136
gacatccaga tgacacagag ccccagcaca ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacatgta gcgccagcag cagagtgggc tacatgcact ggtatcagca gaagcctggc 120
aaggccccta agctgctgat ctacgacaca agcaagctgg cctctggcgt gcccagcaga 180
ttttctggct ctggcagcgg caccgagttc accctgacca tctctagcct gcagcctgac 240
gacttcgcca cctactactg ctttcaaggc agcggctacc ccttcacctt tggcggcgga 300
acaaaggtgg aaatcaagcg gacagtggcc gctcctagcg tgttcatctt tccacctagc 360
gacgagcagc tgaagtctgg cacagcctct gtcgtgtgcc tgctcaacaa cttctacccc 420
agagaagcca aggtgcagtg gaaggtggac aacgccctgc agagcggcaa tagccaagag 480
agcgtgaccg agcaggacag caaggactct acctacagcc tgtcctccac actgaccctg 540
agcaaggccg actacgagaa gcacaaagtg tacgcctgcg aagtgaccca ccagggcctt 600
tctagccctg tgaccaagag cttcaaccgg ggcgagtgc 639
<210> 137
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 137
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Arg Val Gly Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 138
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 138
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Arg Val Gly Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 139
<211> 2124
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）Fab-IgG（重链）的注释DNA序列
<400> 139
caagtgaccc tgagagagtc tggccccgct ctggttaagc ccacacagac cctgacactg 60
acctgcacct tcagcggctt tagcctgtct acagccggca tgagcgtcgg ctggattaga 120
cagcctcctg gcaaagccct ggaatggctg gccgacattt ggtgggacga caagaagcac 180
tacaacccca gcctgaagga ccggctgacc atcagcaagg acaccagcaa gaaccaggtg 240
gtgctgaaag tgaccaacat ggaccctgcc gacaccgcca cctactactg cgccagagac 300
atgatcttca acttctactt cgacgtgtgg ggccagggca ccaccgtgac agttagctct 360
gcctctacaa agggccccag cgtgttccct ctggctccta gcagcaagtc tacaagcgga 420
ggaacagccg ctctgggctg cctggtcaag gattactttc ccgagcctgt gaccgtgtcc 480
tggaattctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagctgtgct gcaaagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtggtcaca gtgccaagct ctagcctggg cacccagacc 600
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacaccaagg tggacaagaa ggtggaaccc 660
aagagctgcg acaagaccca tacaggcggc ggaggatctg gcggaggtgg aagcggaggc 720
ggaggaagcg gtggcggcgg tagtggcggt ggtggttcag gtggtggtgg ctctcaagtc 780
acactgagag aaagcggccc tgctctcgtg aagcctactc agacactcac cctgacctgt 840
acattctctg gcttcagcct gagcaccgcc ggcatgtctg ttggatggat cagacaacca 900
ccaggcaagg ctctcgagtg gctcgctgat atttggtggg atgataagaa acattataac 960
ccatctctca aggaccgcct cacaatctcc aaggatacct ccaagaatca ggtcgtcctc 1020
aaagtcacga atatggatcc cgccgatacg gccacatatt actgtgcccg ggatatgatc 1080
tttaatttct attttgatgt ctggggccaa gggacaaccg tcaccgtgtc tagcgccagc 1140
acaaagggac cctccgtgtt tccactggca cccagctcta agagcacctc tggtggaaca 1200
gctgccctgg gatgtctcgt gaaagactac ttccccgaac cagtgacagt cagctggaac 1260
agcggagccc tgacttctgg ggtgcacaca ttccctgccg tcctgcaatc ttctggcctg 1320
tacagcctgt ccagcgtcgt gaccgttcct tctagctctc tgggaacaca gacatatatc 1380
tgtaatgtca atcacaaacc ctccaatacg aaggtcgaca aaaaggtcga gcctaagtcc 1440
tgtgataaga cccacacctg tcctccatgt cctgctccag aactgctcgg cggaccttct 1500
gtgtttctgt tccctccaaa gcctaaggac accctgatga tcagcagaac ccctgaagtg 1560
acctgcgtgg tggtcgatgt gtcccacgag gatcccgaag tgaagttcaa ttggtacgtg 1620
gacggcgtgg aagtgcacaa cgccaagacc aagcctagag aggaacagta caacagcacc 1680
tacagagtgg tgtctgtgct gaccgtgctg caccaggatt ggctgaacgg caaagagtac 1740
aagtgcaagg tgtccaacaa ggccctgcct gctcctatcg agaaaaccat ctctaaggcc 1800
aagggccagc ctcgcgaacc ccaggtttac acacttccac caagccggga cgagctgaca 1860
aaaaaccagg tgtccctgac atgcctcgtg aagggcttct acccctccga tatcgccgtg 1920
gaatgggaga gcaatggcca gcctgagaac aactacaaga ccacacctcc tgtgctggac 1980
agcgacggct cattcttcct gtactccaag ctgacagtgg acaagtccag atggcagcag 2040
ggcaacgtgt tcagctgcag cgtgatgcac gaggccctgc acaaccacta cacccagaaa 2100
agcctgtctc tgagccccgg caag 2124
<210> 140
<211> 708
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG Fab-IgG（重链）的注释氨基酸序列
<400> 140
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
20 25 30
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
225 230 235 240
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
245 250 255
Gly Ser Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro
260 265 270
Thr Gln Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser
275 280 285
Thr Ala Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala
290 295 300
Leu Glu Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn
305 310 315 320
Pro Ser Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn
325 330 335
Gln Val Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr
340 345 350
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp
355 360 365
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro
370 375 380
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr
385 390 395 400
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr
405 410 415
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro
420 425 430
Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr
435 440 445
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn
450 455 460
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser
465 470 475 480
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu
485 490 495
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
500 505 510
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
515 520 525
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
530 535 540
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr
545 550 555 560
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn
565 570 575
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro
580 585 590
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
595 600 605
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val
610 615 620
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
625 630 635 640
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
645 650 655
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
660 665 670
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
675 680 685
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
690 695 700
Ser Pro Gly Lys
705
<210> 141
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）Fab-IgG（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 141
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
20 25 30
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 142
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）Fab-IgG（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 142
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
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Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 143
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）Fab-IgG（轻链）的DNA序列
<400> 143
gacatccaga tgacacagag ccccagcaca ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacatgta gcgccagcag cagagtgggc tacatgcact ggtatcagca gaagcctggc 120
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ttttctggct ctggcagcgg caccgagttc accctgacca tctctagcct gcagcctgac 240
gacttcgcca cctactactg ctttcaaggc agcggctacc ccttcacctt tggcggcgga 300
acaaaggtgg aaatcaagcg gacagtggcc gctcctagcg tgttcatctt tccacctagc 360
gacgagcagc tgaagtctgg cacagcctct gtcgtgtgcc tgctcaacaa cttctacccc 420
agagaagcca aggtgcagtg gaaggtggac aacgccctgc agagcggcaa tagccaagag 480
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<210> 144
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）Fab-IgG（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 144
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Arg Val Gly Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
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Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
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65 70 75 80
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Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
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Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
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Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 145
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）Fab-IgG（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 145
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Arg Val Gly Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 146
<211> 2124
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（重链）的注释DNA序列
<400> 146
caagtgaccc tgagagagtc tggccccgct ctggttaagc ccacacagac cctgacactg 60
acctgcacct tcagcggctt tagcctgtct acagccggca tgagcgtcgg ctggattaga 120
cagcctcctg gcaaagccct ggaatggctg gccgacattt ggtgggacga caagaagcac 180
tacaacccca gcctgaagga ccggctgacc atcagcaagg acaccagcaa gaaccaggtg 240
gtgctgaaag tgaccaacat ggaccctgcc gacaccgcca cctactactg cgccagagac 300
atgatcttca acttctactt cgacgtgtgg ggccagggca ccaccgtgac agttagctct 360
gcctctacaa agggccccag cgtgttccct ctggctccta gcagcaagtc tacaagcgga 420
ggaacagccg ctctgggctg cctggtcaag gattactttc ccgagcctgt gaccgtgtcc 480
tggaattctg gcgctctgac aagcggcgtg cacacctttc cagctgtgct gcaaagcagc 540
ggcctgtact ctctgagcag cgtggtcaca gtgccaagct ctagcctggg cacccagacc 600
tacatctgca atgtgaacca caagcctagc aacaccaagg tggacaagaa ggtggaaccc 660
aagagctgcg acaagaccca cacctgtcct ccatgtcctg ctccagaact gctcggcgga 720
ccttccgtgt ttctgttccc tccaaagcct aaggacaccc tgatgatcag cagaacccct 780
gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtcc cacgaggatc ccgaagtgaa gttcaattgg 840
tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc aagaccaagc ctagagagga acagtacaac 900
agcacctaca gagtggtgtc tgtgctgacc gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa 960
gagtacaagt gcaaggtgtc caacaaggcc ctgcctgctc ctatcgagaa aaccatctcc 1020
aaggccaagg gccagcctag ggaaccccag gtttacacac tgcctccaag cagggacgag 1080
ctgaccaaga atcaggtgtc cctgacctgc ctcgtgaagg gcttctaccc ttccgatatc 1140
gccgtggaat gggagagcaa tggccagcct gagaacaact acaagacaac ccctcctgtg 1200
ctggacagcg acggctcatt cttcctgtac agcaagctga cagtggacaa gtccagatgg 1260
cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320
cagaagtccc tgagcctgtc tccaggcaaa ggtggcggag gatctggcgg aggtggaagc 1380
ggcggaggcg gttctggtgg tggcggctct ggcggcggtg gttcaggtgg cggcggttct 1440
caagttacac tgagagaaag cggcccagct ctcgtgaagc ctactcagac actcaccctg 1500
acatgtacct tctctggctt cagcctgagc accgccggca tgtctgttgg atggatcaga 1560
caaccaccag gcaaggctct cgagtggctc gctgatattt ggtgggatga taagaaacat 1620
tataacccat ctctcaagga ccgcctcacc atttccaagg atacctccaa aaatcaggtc 1680
gtgctcaaag tcacgaatat ggatcccgcc gatacggcca catattactg tgcccgggat 1740
atgatcttta atttctattt tgatgtctgg ggccaaggga caaccgtcac cgtgtctagc 1800
gccagcacaa agggaccctc tgtgtttcca ctggctccca gctctaagag cacctccggt 1860
ggaacagctg ccctgggatg tctcgtgaaa gactacttcc ccgaaccagt gacagtcagc 1920
tggaacagcg gagccctgac tagtggggtg cacacattcc ctgccgtcct gcaatctagc 1980
ggactgtaca gcctgtccag cgtcgtgacc gtgccttcta gctctctggg aacacagaca 2040
tatatctgta atgtcaatca caaaccctcc aatacgaagg tcgacaaaaa ggtcgagcct 2100
aagtcctgtg ataagacgca caca 2124
<210> 147
<211> 708
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（重链）的注释氨基酸序列
<400> 147
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
20 25 30
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
450 455 460
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
465 470 475 480
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
485 490 495
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
500 505 510
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
515 520 525
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
530 535 540
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
545 550 555 560
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
565 570 575
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
580 585 590
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
595 600 605
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
610 615 620
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
625 630 635 640
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
645 650 655
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
660 665 670
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
675 680 685
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
690 695 700
Lys Thr His Thr
705
<210> 148
<211> 228
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（重链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 148
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ala
20 25 30
Gly Met Ser Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Asp Ile Trp Trp Asp Asp Lys Lys His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Asp Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Lys Val Thr Asn Met Asp Pro Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Met Ile Phe Asn Phe Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr
225
<210> 149
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（重链）Fc片段的注释氨基酸序列
<400> 149
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
1 5 10 15
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
50 55 60
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
65 70 75 80
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
85 90 95
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
100 105 110
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
115 120 125
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
130 135 140
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
145 150 155 160
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
165 170 175
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
180 185 190
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
195 200 205
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
210 215 220
<210> 150
<211> 639
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（轻链）的DNA序列
<400> 150
gacatccaga tgacacagag ccccagcaca ctgtctgcca gcgtgggaga cagagtgacc 60
atcacatgta gcgccagcag cagagtgggc tacatgcact ggtatcagca gaagcctggc 120
aaggccccta agctgctgat ctacgacaca agcaagctgg cctctggcgt gcccagcaga 180
ttttctggct ctggcagcgg caccgagttc accctgacca tctctagcct gcagcctgac 240
gacttcgcca cctactactg ctttcaaggc agcggctacc ccttcacctt tggcggcgga 300
acaaaggtgg aaatcaagcg gacagtggcc gctcctagcg tgttcatctt tccacctagc 360
gacgagcagc tgaagtctgg cacagcctct gtcgtgtgcc tgctcaacaa cttctacccc 420
agagaagcca aggtgcagtg gaaggtggac aacgccctgc agagcggcaa tagccaagag 480
agcgtgaccg agcaggacag caaggactct acctacagcc tgtcctccac actgaccctg 540
agcaaggccg actacgagaa gcacaaagtg tacgcctgcg aagtgaccca ccagggcctt 600
tctagccctg tgaccaagag cttcaaccgg ggcgagtgc 639
<210> 151
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（轻链）的注释氨基酸序列
<400> 151
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Arg Val Gly Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 152
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成抗RSV（呼吸道合胞病毒）IgG-Fab（轻链）Fab片段的注释氨基酸序列
<400> 152
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Arg Val Gly Tyr Met
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp
65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 153
<211> 124
<212> PRT
<213> 智人
<400> 153
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Phe Met Val Arg Gly Ile Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Pro
115 120
<210> 154
<211> 48
<212> PRT
<213> 智人
<400> 154
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
<210> 155
<211> 57
<212> PRT
<213> 智人
<400> 155
Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly
1 5 10 15
Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala
20 25 30
Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Trp Val Phe
35 40 45
Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
50 55

Claims (126)

1.一种减少具有表位的靶标的黏膜渗透的方法，所述方法包括：向受试者施用合成粘合剂，所述合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合所述靶标的所述表位，从而使所述合成粘合剂以高亲和力与所述靶标结合并增强所述靶标在所述受试者的黏液中的凝集，以将所述靶标的运动性减少到低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
3.根据权利要求1中任一项所述的方法，其中所述靶标是精子。
4.根据权利要求3所述的方法，其中与所述精子在黏液中的天然运动性相比，所述黏液中的进行性运动的精子部分减慢了至少50％。
5.根据权利要求3所述的方法，其中所述一个或多个Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合CD52g。
6.根据权利要求3所述的方法，其中所述一个或多个Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合病原体。
7.根据权利要求5所述的方法，其中所述病原体是以下之一：鲍氏不动杆菌(Acinetobacter baumannii)；脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)；洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)；艰难梭菌(Clostridium difficile)；索氏梭菌(Clostridiumsordellii)；耐碳青霉烯肠杆菌科(Enterobacteriaceae)；粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)；大肠杆菌(Escherichia coli)；甲型肝炎；乙型肝炎；丙型肝炎；人类免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2(HIV，AIDS)；流感；肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia)；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；摩氏摩根菌(Morganella morganii)；脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus)；诺如病毒；铜绿假单胞菌(Psuedomonasaeruginosa)；金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)；结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)；耐万古霉素金黄色葡萄球菌；耐万古霉素肠球菌(Enterococci；)；淋病奈瑟球菌(Neisseriagonorrhoeae)(淋病)；沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)(衣原体，性病淋巴肉芽肿)；梅毒螺旋体(Treponema pallidum)(梅毒)；杜克雷嗜血杆菌(Haemophilus ducreyi)(软性下疳)；肉芽肿克雷伯氏菌(Klebsiella granulomatis)；肺炎克雷伯氏菌；肉芽肿荚膜杆菌(Calymmatobacterium granulomatis)(杜诺凡病)、生殖支原体(Mycoplasmagenitalium)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum)(支原体)；人类免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2(HIV，AIDS)；HTLV-1(1型嗜T-淋巴细胞病毒)；1型和2型单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)；EB病毒；巨细胞病毒；人疱疹病毒6；水痘-带状疱疹病毒；人乳头瘤病毒(生殖器疣)；甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(病毒性肝炎)；传染性软疣病毒(MCV)；阴道毛滴虫(Trichomona vaginalis(trichomoniasis))(滴虫病)；以及酵母菌例如白色念珠菌(Candida albicans)(外阴阴道念珠菌病)。
8.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括经阴道向所述受试者施用。
9.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括通过阴道内环(IVR)递送。
10.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括对所述受试者全身施用。
11.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括对所述受试者口服施用。
12.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括作为阴道膜对所述受试者施用。
13.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括通过雾化器施用。
14.根据权利要求1所述的方法，其中施用包括通过吸入施用。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中施用包括递送0.01mg/天-1.5g/天的所述合成粘合剂。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中施用包括以足以使所述靶标凝集的量施用。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述IgG Fab结构域具有与所述一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列。
18.一种通过减少精子穿过黏液来抑制受精和受孕的方法，所述方法包括：向受试者施用合成粘合剂，所述合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合精子的表位，使得所述合成粘合剂以高亲和力结合所述精子并降低所述精子在黏液中的平均运动性。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
20.根据权利要求18所述的方法，其中与所述精子在黏液中的天然运动性相比，所述精子在所述黏液中的运动性减慢了至少50％。
21.根据权利要求18所述的方法，其中所述一个或多个Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合CD52g。
22.根据权利要求18所述的方法，其中施用包括经阴道向所述受试者施用。
23.根据权利要求18所述的方法，其中施用包括通过阴道内环(IVR)递送。
24.根据权利要求18所述的方法，其中施用包括对所述受试者全身施用。
25.根据权利要求18所述的方法，其中施用包括作为阴道膜对所述受试者施用。
26.根据权利要求18所述的方法，其中施用包括通过雾化器施用。
27.根据权利要求18-26中任一项所述的方法，其中施用包括递送0.01mg/天-100mg/天的所述合成粘合剂。
28.根据权利要求18-26中任一项所述的方法，其中施用包括以足以使所述靶标凝集同时保持和/或增强黏液捕获的量施用。
29.根据权利要求18-26中任一项所述的方法，其中所述IgG Fab结构域具有与所述一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列。
30.一种治疗或预防病原体感染的方法，所述方法包括向受试者施用合成粘合剂，所述合成粘合剂包含具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白片段抗原结合(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合病原体的表位，使得所述合成粘合剂以高亲和力结合所述靶标并增强所述靶标的凝集，促进所述靶标的锁链式生长和/或实现所述靶标的黏液捕获。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
32.根据权利要求30所述的方法，其中与所述病原体在黏液中的天然运动性相比，所述病原体在所述黏液中的运动性减慢了至少50％。
33.根据权利要求30所述的方法，其中所述病原体是以下的一种或多种：沙门氏菌属(Salmonella)和大肠杆菌、淋病奈瑟球菌(淋病)；沙眼衣原体(衣原体，性病淋巴肉芽肿)；梅毒螺旋体(梅毒)；杜克雷嗜血杆菌(软性下疳)；肉芽肿克雷伯氏菌；肺炎克雷伯氏菌；肉芽肿荚膜杆菌(杜诺凡病)、生殖支原体、解脲支原体(支原体)；阴道毛滴虫(滴虫病)；以及酵母菌例如白色念珠菌(外阴阴道念珠菌病)。
34.根据权利要求30所述的方法，其中所述病原体是以下一种或多种：人类免疫缺陷病毒HIV-1和HIV-2(HIV，AIDS)；HTLV-1(1型嗜T-淋巴细胞病毒)；1型和2型单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)；EB病毒；巨细胞病毒；人疱疹病毒6；水痘-带状疱疹病毒；人乳头瘤病毒(生殖器疣)；甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(病毒性肝炎)；传染性软疣病毒(MCV)。
35.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括对所述受试者全身施用。
36.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括通过雾化器施用。
37.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括通过吸入施用。
38.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括口服施用。
39.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括肠胃外施用。
40.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括局部施用。
41.根据权利要求30中任一项所述的方法，其中施用包括递送0.01mg/天-100mg/天的所述合成粘合剂。
42.根据权利要求30所述的方法，其中施用包括以足以使所述病原体凝集同时保持和/或增强黏液捕获的量施用。
43.根据权利要求30所述的方法，其中所述IgG Fab结构域具有与所述一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列。
44.一种用于增强具有表位的靶标的凝集的合成粘合剂，所述合成粘合剂包含：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG通过氨基酸接头与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合所述靶标的表位，使得所述合成粘合剂以高亲和力结合所述靶标，并将所述靶标在黏液中的平均运动性降低至低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％。
45.根据权利要求44所述的合成粘合剂，其种所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
46.根据权利要求44所述的合成粘合剂，其中所述靶标是精子，并且所述一个或多个Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合CD52g的表位。
47.根据权利要求46所述的合成粘合剂，其中CD52g的所述表位是精子上的重复聚-N-乙酰基乳糖胺基结构，即SEQ ID:1的N-连接的糖基化形式。
48.根据权利要求46所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列。
49.根据权利要求46所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:4的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:7的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
50.根据权利要求44所述的合成粘合剂，其中所述靶标是克雷伯氏杆菌(Klebsiellabacillus)。
51.根据权利要求50所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:41的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ ID NO:44的氨基酸序列。
52.根据权利要求50所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，所其具有与SEQ ID NO:41的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:44的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
53.根据权利要求44所述的合成粘合剂，其中所述靶标是沙门氏杆菌(Salmonellabacillus)。
54.根据权利要求53所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:69的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ ID NO:72的氨基酸序列。
55.根据权利要求53所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:69的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，，其具有与SEQ ID NO:72的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
56.根据权利要求44所述的合成粘合剂，其中所述靶标是淋病奈瑟氏菌。
57.根据权利要求56所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:104的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ ID NO:107的氨基酸序列。
58.根据权利要求56所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:104的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:107的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
59.根据权利要求44-58中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的所述一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接。
60.根据权利要求44-58中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的Fc区连接。
61.根据权利要求44-60中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区为天然存在的序列。
62.根据权利要求44-60中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区包含增强或减少与Fc受体的结合的一个或多个突变。
63.根据权利要求44-62中任一项所述的合成粘合剂，其中所述一个或多个额外的Fab结构域经由柔性接头与所述IgG连接，所述柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为3-8。
64.根据权利要求44-63中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG Fab结构域具有与所述一个或多个额外的Fab结构域不相同的氨基酸序列。
65.一种编码权利要求44-64中任一项所述的合成粘合剂的分离的核酸分子。
66.一种包含权利要求65所述的核酸分子的载体。
67.一种用权利要求65所述的核酸分子或权利要求66所述的载体转化或转染的分离的宿主细胞或非人生物体。
68.一种组合物，所述组合物包含权利要求44-65中任一项所述的合成粘合剂和药学上可接受的载体。
69.一种用于抑制精子通过黏液的运动性的合成粘合剂，所述合成粘合剂包含：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合CD52g的表位，使得所述合成粘合剂将精子在黏液中的运动性降低至低于相对于其在黏液中的天然运动性的约50％。
70.根据权利要求69所述的合成粘合剂，其种所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
71.根据权利要求69-70中任一项所述的合成粘合剂，其中CD52g的所述表位包含重复的聚-n-乙酰基乳糖胺基结构，即SEQ ID NO:1的N-连接的糖基化形式。
72.根据权利要求69-71中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ IDNO:7的氨基酸序列。
73.根据权利要求69-71所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:4的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:7的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
74.根据权利要求69-73中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的所述一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接。
75.根据权利要求69-74中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的Fc区连接。
76.根据权利要求69-75中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区为天然存在的序列。
77.根据权利要求69-75中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区包含增强或减少与Fc受体的结合的一个或多个突变。
78.根据权利要求69-77中任一项所述的合成粘合剂，其中所述一个或多个额外的Fab结构域经由柔性接头与所述IgG连接，所述柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为3-8。
79.一种编码权利要求69-78中任一项所述的合成粘合剂的分离的核酸分子。
80.一种包含权利要求79所述的核酸分子的载体。
81.一种用权利要求79所述的核酸分子或权利要求80所述的载体转化或转染的分离的宿主细胞或非人生物体。
82.一种组合物，所述组合物包含权利要求69-78中任一项所述的合成粘合剂和药学上可接受的载体。
83.一种递送装置，所述递送装置包含权利要求69-78中任一项所述的合成粘合剂或权利要求82所述的组合物。
84.根据权利要求83所述的递送装置，所述装置被配置为阴道内环(IVR)或阴道膜。
85.一种用于治疗或预防克雷伯氏杆菌病原体感染的合成粘合剂，所述粘合剂包含：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合克雷伯氏杆菌特有的表位，使得所述合成粘合剂降低克雷伯氏杆菌在黏液中的运动性。
86.根据权利要求85所述的合成粘合剂，其种所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
87.根据权利要求85-86中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:41的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQ IDNO:44的氨基酸序列。
88.根据权利要求85-86中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:41的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:44的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
89.根据权利要求85-88中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的所述一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接。
90.根据权利要求85-89中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的Fc区连接。
91.根据权利要求85-90中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区为天然存在的序列。
92.根据权利要求85-90中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区包含增强或减少与Fc受体的结合的一个或多个突变。
93.根据权利要求85-92中任一项所述的合成粘合剂，其中所述一个或多个额外的Fab结构域经由柔性接头与所述IgG连接，所述柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为3-8。
94.一种编码权利要求85-92中任一项所述的合成粘合剂的分离的核酸分子。
95.一种包含权利要求94所述的核酸分子的载体。
96.一种用权利要求94所述的核酸分子或权利要求95所述的载体转化或转染的分离的宿主细胞或非人生物体。
97.一种组合物，所述组合物包含权利要求85-93中任一项所述的合成粘合剂和药学上可接受的载体。
98.一种递送装置，所述递送装置包含权利要求85-93中任一项所述的合成粘合剂或权利要求97所述的组合物。
99.一种用于治疗或预防沙门氏杆菌病原体感染的合成粘合剂，所述粘合剂包含：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和IgG Fab结构域均特异性结合沙门氏菌特有的表位，使得所述合成粘合剂降低沙门氏杆菌在黏液中的运动性。
100.根据权利要求99所述的合成粘合剂，其种所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
101.根据权利要求99-100中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:69的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQID NO:72的氨基酸序列。
102.根据权利要求99-100中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:69的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:72的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
103.根据权利要求99-102中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的所述一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接。
104.根据权利要求99-103中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的Fc区连接。
105.根据权利要求99-104中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区为天然存在的序列。
106.根据权利要求99-105中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区包含增强或减少与Fc受体的结合的一个或多个突变。
107.根据权利要求99-106中任一项所述的合成粘合剂，其中所述一个或多个额外的Fab结构域经由柔性接头与所述IgG连接，所述柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为3-8。
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113.一种用于治疗或预防淋病奈瑟球菌感染的合成粘合剂，所述粘合剂包含：具有一对Fab结构域的人或人源化免疫球蛋白G(IgG)，其中所述人或人源化IgG与一个或多个额外的免疫球蛋白抗原结合片段(Fab)结构域连接，其中所述一个或多个额外的Fab结构域和所述IgG Fab结构域均特异性结合淋病奈瑟球菌特有的表位，使得所述合成粘合剂降低淋病奈瑟球菌在黏液中的运动性。
114.根据权利要求113所述的合成粘合剂，其种所述一个或多个额外的Fab结构域包含2、4、6或8个额外的Fab结构域。
115.根据权利要求113-114中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有SEQ ID NO:104的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有SEQID NO:107的氨基酸序列。
116.根据权利要求113-114中任一项所述的合成粘合剂，其中所述额外的Fab结构域各自包含：(i)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VH)的重链(HC)，其具有与SEQ ID NO:104的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列；和/或(ii)具有包含互补决定区(CDR)的可变区(VL)的轻链(LC)，其具有与SEQ ID NO:107的氨基酸序列100％至80％相同的氨基酸序列。
117.根据权利要求113-116中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的所述一对Fab结构域中的一个Fab结构域连接。
118.根据权利要求113-117中任一项所述的合成粘合剂，其中所述至少一个额外的Fab结构域与所述IgG的Fc区连接。
119.根据权利要求113-118中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区为天然存在的序列。
120.根据权利要求113-119中任一项所述的合成粘合剂，其中所述IgG包含至少一个Fc区，所述Fc区包含增强或减少与Fc受体的结合的一个或多个突变。
121.根据权利要求113-120中任一项所述的合成粘合剂，其中所述一个或多个额外的Fab结构域经由柔性接头与所述IgG连接，所述柔性接头包含含有n个由甘氨酸(G)和丝氨酸(S)组成的五肽重复的氨基酸序列，其中n为3-8。
122.一种编码权利要求113-121中任一项所述的合成粘合剂的分离的核酸分子。
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