CN113116867A - 一种预防和/或治疗流感的组合物 - Google Patents

一种预防和/或治疗流感的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN113116867A
CN113116867A CN201911405670.0A CN201911405670A CN113116867A CN 113116867 A CN113116867 A CN 113116867A CN 201911405670 A CN201911405670 A CN 201911405670A CN 113116867 A CN113116867 A CN 113116867A
Authority
CN
China
Prior art keywords
influenza
composition
cannabidiol
cannabidivarin
cbdv
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911405670.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113116867B (zh
Inventor
谭昕
王曙宾
张可
孙武兴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hanyi Bio Technology Beijing Co ltd
Original Assignee
Hanyi Bio Technology Beijing Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hanyi Bio Technology Beijing Co ltd filed Critical Hanyi Bio Technology Beijing Co ltd
Priority to CN201911405670.0A priority Critical patent/CN113116867B/zh
Publication of CN113116867A publication Critical patent/CN113116867A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113116867B publication Critical patent/CN113116867B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/60—Moraceae (Mulberry family), e.g. breadfruit or fig
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种预防和/或治疗流感的组合物，特别是大麻素类化合物的组合物，以及组合物在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用。大麻素类化合物的组合物具有差异显著的抑制流感的作用，特别是包含特定比例的大麻二酚、次大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的组合物差异性极显著的优于工业大麻全谱系油的作用，工业大麻全谱系油差异显著的优于各组分单独施用时的作用，其在抗流感的药物制备中均具有重要的应用价值。

Description

一种预防和/或治疗流感的组合物
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种预防和治疗流感的组合物，特别是大麻素类化合物的组合物，以及组合物在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用。
背景技术
流行性感冒简称流感(Influenza)，是由流感病毒(Influenza Virus)引起的急性呼吸道感染，是世界上分布最广的人、禽、畜共患传染病之一，所引起的并发症和死亡现象非常严重，它因传播速度快、发病率高和严重并发症而成为严重威胁人类健康的疾病。
流感病毒是正粘病毒科(Orthomyxoviridae)的代表种，可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。其中甲型流感病毒(Influenza AVirus，IAV)最为常见，是世界范围内主要的流行病，对人类威胁最大，可引起流感季节性和地区性爆发，除感染人外，还可引起禽、猪、马等多种动物感染。例如1918～1919年的大流行中，全世界至少有2000万～4000万人死于流感。目前，经世界各国批准上市的抗流感病毒药主要有：肌苷单磷酸脱氢酶(IMPDH)抑制药利巴韦林(ribavirin)、干扰素诱导剂盐酸阿比朵尔(arbidol hydrochloride)、M2离子通道蛋白抑制药盐酸金刚烷胺(amantadine hydrochloride)和盐酸金刚乙胺(rimantadinehydrochloride)、神经氨酸酶抑制药磷酸奥司他韦(osehamivir phosphate)和扎那米韦(zanamivir)4大类6个品种(Glezen,2006；Kolocourisetal.,1996)等。
大麻(学名：Cannabis sativa L.)隶属于大麻科、大麻属植物，又名山丝苗、线麻、胡麻、野麻、火麻，具有重要的农用及药用价值。药理研究表明，大麻中的主要活性成分为大麻素类化合物(cannabinoids)。大麻植株中主要的大麻素类化合物有四氢大麻酚(THC)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、次大麻二酚(CBDV)、四氢次大麻酚(THCV)、大麻萜酚(CBG)等，其中前三者占大麻素类化合物的90％以上。CBDV是大麻中的非成瘾性成分，能阻碍THC对人体神经系统的影响，并具有治疗癫痫、神经性疼痛、关节炎、流感等药理活性。有文献报道了THC处理的小鼠对流感病毒的侵袭能够广泛降低流感先天性免疫应答诱导的mRNA表达水平，并减少肺部呼吸道内的单核细胞和淋巴细胞(Δ9-tetrahydrocannabinol impairsthe inflammatory response to influenza infection:role of antigen-presentingcells and the cannabinoid receptors 1 and 2.Toxicol Sci.2013)。专利申请CN109419786A公开了CBD在制备抗流感的药物中的用途。但是，现有药物对许多患者仍然没有治疗效果或治疗效果不佳，亟需研制出更有效的抗流感病毒药物。
发明内容
本发明的第一方面提供了一种组合物，所述的组合物包含次大麻二酚和至少一种其它大麻素类化合物，所述的其它大麻素类化合物选自大麻二酚、大麻萜酚、四氢次大麻酚。
在本发明的一个具体实施方式中，所述的组合物包含次大麻二酚和大麻二酚，所述的次大麻二酚和大麻二酚的质量比为1：1-8(如1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8)；优选的，所述的次大麻二酚和大麻二酚的质量比为1:5-8。
在本发明的一个具体实施方式中，所述的组合物包含次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚，所述的次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚的质量比为1:1-8:0.05-0.7(如1:1-8:0.05、1:1-8:0.07、1:1-8:0.09、1:1-8:0.1、1:1-8:0.2、1:1-8:0.3、1:1-8:0.4、1:1-8:0.5、1:1-8:0.6、1:1-8:0.7)；优选的，所述的次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚的质量比为1:1-8:0.07-0.6。
在本发明的一个具体实施方式中，所述的组合物包含次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚，所述的次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.5(具体如1:1-8:0.05、1:1-8:0.07、1:1-8:0.09、1:1-8:0.1、1:1-8:0.2、1:1-8:0.3、1:1-8:0.4、1:1-8:0.5)；优选的，所述的次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.4。
在本发明的一个具体实施方式中，所述的组合物包含次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚，所述的次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.7:0.05-0.5；优选的，所述的次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.07-0.6:0.05-0.4。
优选的，所述的次大麻二酚和至少一种其它大麻素类化合物可以是化学合成产物、生物合成产物、植物提取物或采用其它方式制备得到。
优选的，所述的次大麻二酚和至少一种其他大麻素类化合物可以分别为各组分的纯净物产品，将其混合即可得到所述的组合物；所述的次大麻二酚和至少一种其他大麻素类化合物也可以同时存在于同一种产品中，例如同时包含所述的次大麻二酚和至少一种其它大麻素类化合物的植物提取物。
优选的，所述的植物提取物的植物提取部位可以为工业大麻的秆芯、花、叶、籽和籽的外壳中的一种或多种，特别是花和/或叶。
在本发明的一个具体实施方式中，所述的组合物为工业大麻全谱系油，所述的工业大麻全谱系油通过以下方法制得：
(1)取工业大麻药材粉末，用提取溶剂提取，得提取液；
(2)将步骤(1)所得提取液过滤，减压浓缩；
(3)将步骤(2)所得浓缩物加入溶剂溶解，通过柱层析纯化，收集洗脱液，减压浓缩，得全谱系油粗品；
任选地，(4)将步骤(3)所得全谱系油粗品加入溶剂溶解，通过柱层析纯化，收集洗脱液，减压浓缩。
具体地，步骤(1)中的工业大麻药材可以为工业大麻的秆芯、花、叶、籽和籽的外壳中的一种或多种；在本发明的一个实施例中，上述工业大麻药材为工业大麻的花和/或叶。
具体地，步骤(1)中的提取溶剂为60-80％(具体如60％、65％、68％、70％、72％、75％、80％)乙醇；在本发明的一个实施例中，该提取溶剂为70％乙醇。
具体地，步骤(1)中工业大麻药材粉末与提取溶剂的料液比为1:5-10(w/v，具体如1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10)；在本发明的一个实施例中，该料液比为1:8。
在本发明的一个实施例中，步骤(1)中的提取为室温浸提。
具体地，步骤(1)中提取次数为1-3次，每次0.5-2小时；在本发明的一个实施例中，步骤(1)中提取次数为2次，每次1小时。
具体地，步骤(2)中减压浓缩的压力条件为-0.08～-0.09Mpa。
具体地，步骤(2)中减压浓缩的温度为60-70℃(具体如60、62、64、65、66、68、70℃)；在本发明的一个实施例中，该温度为65℃。
具体地，步骤(2)中的浓缩物密度为1.050-1.100。
在本发明的一个实施例中，步骤(3)中所述溶剂为水。
在本发明的一个实施例中，步骤(3)所用层析柱为大孔树脂柱。
在本发明的一个实施例中，步骤(3)所用层析柱的径高比为1：5。
具体地，步骤(3)中柱层析依次采用洗脱剂1、洗脱剂2和洗脱剂3洗脱，其中，洗脱剂1为水，洗脱剂2为40-60％(具体如40％、45％、50％、55％、60％)乙醇，洗脱剂3为70-90％(具体如70％、75％、80％、85％、90％)乙醇；在本发明的一个实施例中，洗脱剂2为50％乙醇，洗脱剂3为80％乙醇。
具体地，步骤(3)中柱层析中洗脱剂流速为5-10BV/h(具体如5、6、7、8、9、10BV/h)；在本发明的一个实施例中，该洗脱剂流速为9BV/h。
具体地，步骤(3)中柱层析中收集的洗脱液为洗脱剂3洗脱所得。
具体地，步骤(3)中减压浓缩的压力条件为-0.08～-0.09Mpa。
具体地，步骤(3)中减压浓缩的温度为60-70℃(具体如60、62、64、65、66、68、70℃)；在本发明的一个实施例中，该温度为65℃。
具体地，步骤(4)中的溶剂为60-80％(具体如60％、65％、68％、70％、72％、75％、80％)乙醇；在本发明的一个实施例中，该溶剂为70％乙醇。
在本发明的一个实施例中，步骤(4)所用层析柱为聚合色谱填料柱。
在本发明的一个实施例中，步骤(4)所用层析柱的径高比为1:6。
具体地，步骤(4)中柱层析的洗脱剂为60-80％(具体如60％、65％、68％、70％、72％、75％、80％)乙醇；在本发明的一个实施例中，该洗脱剂为70％乙醇。
具体地，步骤(4)中柱层析中洗脱剂流速为1-4BV/h(具体如1、2、3、4BV/h)；在本发明的一个实施例中，该洗脱剂流速为2BV/h。
具体地，步骤(5)中减压浓缩的压力条件为-0.08～-0.09Mpa。
具体地，步骤(4)中减压浓缩的温度为60-70℃(具体如60、62、64、65、66、68、70℃)；在本发明的一个实施例中，该温度为65℃。
本发明所述组合物可制成具体的剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。
本发明所述组合物剂型可通过任何适当的途径给药，优选口服剂型，如：胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。所述的口服剂型可包括常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣；适宜的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂；适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠；适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁；适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。
通过将一种或多种本发明的活性成分与药物可接受的载体混合而形成的组合物，然后可以以适合公开给药途径的各种剂型方便地给予。所述的载体包括惰性固体稀释剂或填充剂、无菌水溶液和各种有机溶剂。药物制剂可根据药物配方的标准程序方便地制成单位剂型。每单位剂量的活性化合物的量可能会根据活性化合物的性质和预期的剂量方案而改变。一般来说，在每单位剂量0.1mg～5000mg的范围内。
需要指出的是，活性成分的使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括待治疗患者的一般情况和年龄、待治疗疾病的性质和具体活性成分或所选择的活性成分以及诊治医师的主观判断。
本发明的第二方面提供了大麻素类化合物在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用，所述的大麻素类化合物选自次大麻二酚、大麻萜酚、四氢次大麻酚的一种。
优选的，所述的预防和/或治疗流感包括预防和/或治疗选自如下的流感症状：发热、咳嗽、头痛、肌肉酸痛以及腹泻或前述症状的任何组合。
优选的，所述的流感病毒选自甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒中的一种或两种以上。特别优选的，所述的甲型流感病毒包括H1 N1亚型、H2N2亚型、H3N2亚型、H5NI亚型、H7N9亚型或H9N2亚型的甲型流感病毒。
本发明的第三方面提供了大麻素类化合物的组合物在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用，所述的大麻素类化合物包含次大麻二酚和至少一种其它大麻素类化合物，所述的其它大麻素类化合物选自大麻二酚、大麻萜酚、四氢次大麻酚。
优选的，所述应用中，所述的其它大麻素类化合物为大麻二酚，次大麻二酚和大麻二酚的质量比为1：1-8(如1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8)；优选的，所述的次大麻二酚和大麻二酚的质量比为1:5-8。
优选的，所述应用中，所述的其它大麻素类化合物为大麻二酚和大麻萜酚，次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚的质量比为1:1-8:0.05-0.7(如1:1-8:0.05、1:1-8:0.07、1:1-8:0.09、1:1-8:0.1、1:1-8:0.2、1:1-8:0.3、1:1-8:0.4、1:1-8:0.5、1:1-8:0.6、1:1-8:0.7)；优选的，所述的次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚的质量比为1:1-8:0.07-0.6。
优选的，所述应用中，所述的其它大麻素类化合物为大麻二酚和四氢次大麻酚，次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.5(具体如1:1-8:0.05、1:1-8:0.07、1:1-8:0.09、1:1-8:0.1、1:1-8:0.2、1:1-8:0.3、1:1-8:0.4、1:1-8:0.5)；优选的，所述的次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.4。
优选的，所述应用中，所述的其它大麻素类化合物为大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚，所述的次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.7:0.05-0.5；优选的，所述的次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.07-0.6:0.05-0.4。
优选的，所述的预防和/或治疗流感包括预防和/或治疗选自如下的流感症状：发热、咳嗽、头痛、肌肉酸痛以及腹泻或前述症状的任何组合。
优选的，所述的流感病毒选自甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒中的一种或两种以上。特别优选的，所述的甲型流感病毒包括H1N1亚型、H2N2亚型、H3N2亚型、H5NI亚型、H7N9亚型或H9N2亚型的甲型流感病毒。
本发明的第四方面提供了大麻素类化合物组合物的制备方法，所述的制备方法包括将化合物组分按照比例混合均匀的步骤。
本发明的第五方面提供了一种工业大麻全谱系油在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用，所述的工业大麻全谱系油包含CBD60-90％(具体如60％、65％、70％、75％、80％、90％)，CBDV2-12％(具体如2％、5％、8％、10％、12％)，CBG1-5％(具体如1％、2％、3％、4％、5％)，THCV0.5-2％(具体如0.5％、1％、1.5％、2％)，所述的工业大麻全谱系油不含THC或其中THC含量低至无法检出的水平。
本发明的第六方面提供了一种预防和/或治疗流感的方法，所述的方法包括给予有需要的个体治疗有效量的本发明所述的组合物的步骤。
优选的，所述的预防和/或治疗流感病毒包括预防和/或治疗选自如下的流感病毒症状：发热、咳嗽、头痛、肌肉酸痛以及腹泻或前述症状的任何组合。
优选的，所述的流感病毒选自甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒中的一种或两种以上。特别优选的，所述的甲型流感病毒包括H1N1亚型、H2N2亚型、H3N2亚型、H5NI亚型、H7N9亚型或H9N2亚型的甲型流感病毒。
优选的，所述的个体为哺乳动物，例如人、猿、猴、猪、牛、羊，或者禽类，如鸡、鸭、鹅等家禽类或者野生禽类；特别优选的，所述的个体为人。
优选的，所述的治疗有效量取决于诸多因素，包括个体的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、服用时间、代谢速率、病症的严重程度以及诊治医师的主观判断等。
本发明提供的组合物具有差异显著的抑制流感的作用，特别是包含特定比例的大麻二酚、次大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的组合物差异性极显著的优于工业大麻全谱系油的作用，工业大麻全谱系油差异显著的优于各组分单独施用时的作用，其在抗流感药物制备中均具有重要的应用价值。
附图说明
图1是H1N1 WSN感染小鼠并只给予一种药物的体重变化。
图2是H1N1 WSN感染小鼠并只给予一种药物的体温变化。
图3是H1N1 WSN感染小鼠并只给予一种药物的小鼠存活率。
图4是H1N1 WSN感染小鼠并联合给予药物的体重变化图。
图5是H1N1 WSN感染小鼠并联合给予药物的体温变化图。
图6是H1N1 WSN感染小鼠并联合给予药物的小鼠存活率。
具体实施方式
除非另行定义，文中所用的专业与科学用语与本领域技术人员熟悉的意义相同。例如：
本发明所述的CBDV是指次大麻二酚。
本发明所述的CBD是指大麻二酚。
本发明所述的CBG是指大麻萜酚。
本发明所述的THCV是指四氢次大麻酚。
本发明所述的SPF级鸡胚是指由生长在屏障系统或隔离器中、无国际国内流行的主要鸡传染病病原的鸡群所产蛋，即为SPF级鸡胚。
本发明所述的MDCK细胞是指犬肾细胞。
本发明所述的汇合度是指细胞在增殖时，出现在细胞间的粘连和排列状态，达到某种状态用汇合度％表示。
本发明所述的差异性不显著是指P>0.05，差异性显著是指0.01<P<0.05，差异性极显著是指P<0.01。
本发明所述的全谱系油是指工业大麻全谱系油。
下面结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整的阐述。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限定本发明的范围。下例实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域常规条件或按照制造厂商建议的条件。如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1全谱系油制备工艺
(1)取工业大麻花叶药材进行粉碎，过1号筛，100℃烘烤200min，取一定量烘烤后的大麻花叶药材，按料液比1:8(w/v)加入70％乙醇，室温搅拌提取两次，每次1小时，过滤，合并提取液，离心过滤，离心过滤液减压浓缩(65℃，-0.08～-0.09Mpa)至无醇味且密度为1.070(60℃)，补加纯化水至溶液重量为药材重量的8倍，搅拌均匀，即得上样液。
(2)量取上样液，以4BV/h的流速经已处理好的大孔树脂柱(径高比为1：5)纯化，上样毕静置60min，再以9BV/h的流速依次用纯化水、50％乙醇、80％乙醇洗脱，用molish反应确定水洗脱终点，50％乙醇洗脱3BV，80％乙醇洗脱5BV，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩(65℃，-0.08～-0.09Mpa)至水分至5％以下，即得全谱系油粗品。
(3)取全谱系油粗品，加入70％乙醇搅拌溶解，过滤，所得滤液以2BV/h的流速经已处理好的聚合色谱填料柱(径高比为1：6)纯化，上样毕，再以2BV/h的流速用70％乙醇洗脱5BV，70％乙醇洗脱液减压浓缩(65℃，-0.08～-0.09Mpa)至水分至5％以下，即得全谱系油。
全谱系油中总大麻素含量达78.41％，其中CBDV 10.52％、CBG 1.57％、CBD64.80％、THCV 1.52％，THC未检出。
实施例2CBDV在抗流感病毒中的应用
1.H1N1 WSN流感病毒的扩增
(1)选取9日龄的SPF级鸡胚，划出气室位置，找到血管较少位置并划线；
(2)用碘伏和90％乙醇消毒鸡胚外壳，在步骤(1)划线位置上方2mm处打孔，取经PBS稀释的H1N1 WSN流感病毒150μl注入到鸡胚的尿囊腔，并用蜡将所打小孔封口；
(3)将步骤(2)的鸡胚放于37℃培养48h～72h，每24h观察一次鸡胚存活情况，若观察到鸡胚死亡，将鸡胚置于4℃过夜后收集尿囊液，到72h时，将剩余鸡胚均置于4℃过夜后收集尿囊液；
(4)将步骤(3)收获的尿囊液离心，3000rpm，10min，吸取上清，即为扩增的H1N1WSN病毒，保存于-80℃冰箱备用。
(5)MDCK细胞在培养基中进行培养，细胞汇合度达到95％时，使用步骤(4)鸡胚扩增的病毒H1N1 WSN毒株感染MDCK细胞，离心，收集上清，纯化后得到病毒原液，通过扩增法进行病毒滴度测定。
2.动物感染H1N1 WSN流感病毒并给药
取健康6周龄的昆明白雄鼠，体重20-25g。饲养条件：10只/笼，温度20±2℃，湿度55±5％，光照周期为12小时光照和12小时黑暗，自由摄食，自由饮水。所有动物适应新环境3天后开始实验。
(1)感染方法：将第一部分“H1N1 WSN流感病毒的扩增”中步骤(4)保存于-80℃病毒原液按照1∶100稀释于PBS；以乙醚轻度麻醉小鼠后，用稀释后的H1N1 WSN流感病毒液滴鼻感染小鼠；
(2)将上述小鼠随机分为5组，每组10只，具体分组如下：
对照组：滴鼻给予生理盐水50μl/只，不感染病毒，第4天开始腹腔注射等体积生理盐水；
CBD组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射CBD，剂量20mg/kg/d；
CBDV组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射CBDV，剂量分别为2.5mg/kg/d、3mg/kg/d、3.5mg/kg/d；
从感染第4天起，每天腹腔注射给药1次，连续给药5天。
3.实验观察记录
感染的当天开始记录不同时间小鼠的体重、温度、死亡时间和死亡数，至感染后第12天。
(1)体重的测量：每24小时称一次，每组随机8只；每只小鼠当天体重变化率：(当天体重-感染当天体重)/感染当天体重*100％。
(2)体温的测量：每24小时肛温测量一次，每组随机8只；每只小鼠当天体温变化率：(当天肛温-感染当天肛温)/感染当天肛温*100％。
(3)每天记录小鼠的死亡时间和死亡数，计算出每组小鼠的存活率：当天存活个数/每组总个数*100％。
4.实验结果
采用SPSS软件单因素方差统计分析记录的各组实验数据。
图1是小鼠的体重波动图，小鼠在感染流感病毒的第4天体重开始明显下降，第8天到达最低点，然后开始回升；与对照组相比，CBD、CBDV能差异显著的抑制H1N1 WSN感染鼠体重的降低。图2是小鼠的体温变化图，小鼠在感染流感病毒的第3天体温开始明显下降，第7-8天到达最低点，然后开始回升；与对照组相比，CBD、CBDV能差异显著的抑制H1N1 WSN感染鼠体温的降低。图3是小鼠的存活率变化图，小鼠在感染流感病毒的第6天开始出现死亡，到感染病毒的第12天，CBD组死亡6只，CBDV组死亡5只，CBD组与CBDV组死亡率没有显著差异，但是与对照组相比，CBD、CBDV能差异显著的提高H1N1 WSN感染鼠的存活率。
综合上述实验结果表明，CBDV能显著的提高H1N1 WSN感染小鼠的抗流感病毒能力，提高其生存率。
实施例3大麻素类化合物的组合物在抗流感病毒中的应用
1.动物感染H1N1 WSN病毒并给药
按照实施例1的方式扩增H1N1 WSN病毒和滴度测定，并按照实施例1的方式选取云南白雄鼠，随机分为11组，每组10只，具体分组如下：
CBDV+CBD联合用药组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射，分别为CBDV 2.5mg/kg+CBD 20mg/kg、CBDV 3mg/kg+CBD20mg/kg、CBDV 3.5mg/kg+CBD20mg/kg；
CBDV+CBD+CBG联合用药组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射，分别为CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+CBG 0.05mg/kg、CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+CBG0.25mg/kg、CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+CBG0.5mg/kg；
CBDV+CBD+THCV联合用药组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射，分别为CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+THCV 0.05mg/kg、CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+THCV 0.25mg/kg、CBDV 3mg/kg+CBD20mg/kg+THCV 0.5mg/kg；
CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射，给予CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+CBG0.25mg/kg+THCV 0.25mg/kg。
全谱系油用药组：滴鼻给予H1N1 WSN流感病毒50μl/只，第4天开始腹腔注射，给予全谱系油33mg/kg。
从感染第4天起，每天腹腔注射给药1次，连续给药5天。
按照实施例2的方式观察并记录感染后小鼠的体重、体温、死亡时间和死亡数。
2.实验结果
采用SPSS软件对记录的数据进行分析，挑选每个联合用药组中的一组数据进行作图比较；其中，CBDV+CBD联合用药组选取CBDV 3mg/kg+CBD20mg/kg组，CBDV+CBD+CBG联合用药组选取CBDV 3mg/kg+CBD 20mg/kg+CBG0.25mg/kg组，CBDV+CBD+THCV联合用药组选取CBDV 3mg/kg+CBD20mg/kg+THCV 0.25mg/kg组。
图4是小鼠的体重波动图，小鼠在感染流感病毒的第4天体重开始明显下降，第7-8天到达最低点，然后开始回升，与单独给予CBD、CBDV组相比，全谱系油组、CBDV+CBD联合用药组、CBDV+CBD+CBG联合用药组、CBDV+CBD+THCV联合用药组、CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组能够差异性极显著的抑制H1N1 WSN感染鼠体重的降低；而与给予全谱系油组相比，CBDV+CBD联合用药组、CBDV+CBD+CBG联合用药组、CBDV+CBD+THCV联合用药组、CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组能够差异性显著的抑制H1N1 WSN感染鼠体重的降低。
图5是小鼠的体温变化图，小鼠在感染流感病毒的第3天体温开始明显下降，第7-8天到达最低点，然后开始回升；与单独给予CBD、CBDV组相比，全谱系油组、CBDV+CBD联合用药组、CBDV+CBD+CBG联合用药组、CBDV+CBD+THCV联合用药组、CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组能够差异性极显著的抑制H1N1 WSN感染鼠体温的降低。而与给予全谱系油组相比，CBDV+CBD联合用药组、CBDV+CBD+CBG联合用药组、CBDV+CBD+THCV联合用药组、CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组能够差异性显著的抑制H1N1 WSN感染鼠体温的降低。
图6是小鼠的存活率变化图，小鼠在感染流感病毒的第6天开始出现死亡，全谱系油组死亡4只，CBDV+CBD联合用药组死亡3只，CBDV+CBD+CBG联合用药组死亡2只，CBDV+CBD+THCV联合用药组死亡2只，CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组死亡2只；与CBD组、CBDV组相比，全谱系油组、CBDV+CBD联合用药组、CBDV+CBD+CBG联合用药组、CBDV+CBD+THCV联合用药组、CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组能够差异性极显著的提高H1N1 WSN感染鼠的存活率；而与给予全谱系油组相比，CBDV+CBD联合用药组、CBDV+CBD+CBG联合用药组、CBDV+CBD+THCV联合用药组、CBDV+CBD+CBG+THCV联合用药组能够差异性显著的提高H1N1 WSN感染鼠的存活率。
综合上述实验结果表明，两种以上大麻素类的化合物组合、全谱系油能显著的提高H1N1 WSN感染小鼠的抗流感病毒能力，提高其生存率。
上述实施例的说明只是用于理解本发明的方法，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节。对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行改进和修饰，这些改进和修饰也将落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (14)

1.一种组合物，其特征在于，所述的组合物包含次大麻二酚和至少一种其它大麻素类化合物，其中，所述的其它大麻素类化合物选自大麻二酚、大麻萜酚、四氢次大麻酚。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物包含次大麻二酚和大麻二酚，其中，所述的次大麻二酚和大麻二酚的质量比为1：1-8，特别是1:5-8。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物包含次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚，其中，所述的次大麻二酚、大麻二酚和大麻萜酚的质量比为1:1-8:0.05-0.7，特别是1:1-8:0.07-0.6。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物包含次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚，其中，所述的次大麻二酚、大麻二酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.5，特别是1:1-8:0.05-0.4。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物包含次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚，其中，所述的次大麻二酚、大麻二酚、大麻萜酚和四氢次大麻酚的质量比为1:1-8:0.05-0.7:0.05-0.5；优选的，特别是1:1-8:0.07-0.6:0.05-0.4。
6.根据权利要求1-5任一项所述的组合物，其特征在于，所述的次大麻二酚和其它大麻素类化合物是化学合成产物、生物合成产物、植物提取物。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述的植物提取物的植物提取部位选自：工业大麻的秆芯、花、叶、籽和籽的外壳中的一种或两种以上。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物为工业大麻全谱系油。
9.大麻素类化合物在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用，其特征在于，所述的大麻素类化合物选自次大麻二酚、大麻萜酚、四氢次大麻酚的一种。
10.大麻素类化合物的组合物在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用，其特征在于，所述的组合物包含次大麻二酚和至少一种其它大麻素类化合物，所述的其它大麻素类化合物选自大麻二酚、大麻萜酚、四氢次大麻酚。
11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述的预防和/或治疗流感包括预防和/或治疗选自如下的流感症状：发热、咳嗽、头痛、肌肉酸痛以及腹泻或前述症状的任何组合。
12.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述的流感病毒选自甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒中的一种或两种以上。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述的甲型流感病毒包括H1 N1亚型、H2N2亚型、H3N2亚型、H5N I亚型、H7N9亚型或H9N2亚型的甲型流感病毒。
14.一种工业大麻全谱系油在制备预防和/或治疗流感的药物中的应用。
CN201911405670.0A 2019-12-31 2019-12-31 一种预防和/或治疗流感的组合物 Active CN113116867B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911405670.0A CN113116867B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种预防和/或治疗流感的组合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911405670.0A CN113116867B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种预防和/或治疗流感的组合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113116867A true CN113116867A (zh) 2021-07-16
CN113116867B CN113116867B (zh) 2022-08-23

Family

ID=76768743

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911405670.0A Active CN113116867B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种预防和/或治疗流感的组合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113116867B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113683490A (zh) * 2021-08-02 2021-11-23 云南翰谷生物科技有限公司 一种次大麻二酚晶体的制备方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103826621A (zh) * 2011-09-29 2014-05-28 Gw药品有限公司 包含植物大麻素次大麻二酚(cbdv)和大麻二酚(cbd)的药物组合物
CN109200046A (zh) * 2017-07-04 2019-01-15 汉义生物科技（北京）有限公司 大麻素类化合物在治疗神经性皮炎中的应用
CN109419786A (zh) * 2017-08-31 2019-03-05 汉义生物科技（北京）有限公司 大麻二酚在制备抗流感的药物中的用途
WO2019041239A1 (zh) * 2017-08-31 2019-03-07 汉义生物科技（北京）有限公司 大麻二酚在制备抗流感的药物中的用途
CN109498606A (zh) * 2017-09-15 2019-03-22 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含有大麻二酚和/或次大麻二酚的组合物及其在治疗痛经中的应用
CN109498605A (zh) * 2017-09-15 2019-03-22 汉义生物科技（北京）有限公司 一种治疗妇科炎症的组合物及其在外用组合物中的应用
CN110279678A (zh) * 2019-06-15 2019-09-27 汉义生物科技（北京）有限公司 含大麻素的固体组合物及其制备方法和应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103826621A (zh) * 2011-09-29 2014-05-28 Gw药品有限公司 包含植物大麻素次大麻二酚(cbdv)和大麻二酚(cbd)的药物组合物
CN109200046A (zh) * 2017-07-04 2019-01-15 汉义生物科技（北京）有限公司 大麻素类化合物在治疗神经性皮炎中的应用
CN109419786A (zh) * 2017-08-31 2019-03-05 汉义生物科技（北京）有限公司 大麻二酚在制备抗流感的药物中的用途
WO2019041239A1 (zh) * 2017-08-31 2019-03-07 汉义生物科技（北京）有限公司 大麻二酚在制备抗流感的药物中的用途
CN109498606A (zh) * 2017-09-15 2019-03-22 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含有大麻二酚和/或次大麻二酚的组合物及其在治疗痛经中的应用
CN109498605A (zh) * 2017-09-15 2019-03-22 汉义生物科技（北京）有限公司 一种治疗妇科炎症的组合物及其在外用组合物中的应用
CN110279678A (zh) * 2019-06-15 2019-09-27 汉义生物科技（北京）有限公司 含大麻素的固体组合物及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KARMAUS, P. W. F. ET AL.: ""Δ9-Tetrahydrocannabinol Impairs the Inflammatory Response to Influenza Infection: Role of Antigen-Presenting Cells and the Cannabinoid Receptors 1 and 2"", 《TOXICOLOGICAL SCIENCES》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113683490A (zh) * 2021-08-02 2021-11-23 云南翰谷生物科技有限公司 一种次大麻二酚晶体的制备方法
CN113683490B (zh) * 2021-08-02 2022-03-25 云南翰谷生物科技有限公司 一种次大麻二酚晶体的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113116867B (zh) 2022-08-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2044935B1 (en) A composition containing non-psychotropic cannabinoids for the treatment of inflammatory diseases
Ansori et al. Medicinal properties of Muntingia calabura L.: A Review
Tao et al. Shufeng Jiedu Capsule protect against acute lung injury by suppressing the MAPK/NF-κB pathway
CN101485647B (zh) 百秋李醇在制备药物中的用途
WO2018210224A1 (zh) 雷公藤甲素及其衍生物在制备治疗和/或预防肺损伤疾病的药物中的应用
CN104922176B (zh) 一种野菊花提取物的应用
CN102961469B (zh) 一种治疗上呼吸道感染的中药分散片及其制备和检测方法
CN113813277A (zh) 一种包含落新妇苷和/或其异构体的组合物在制备治疗银屑病的药物中的用途
WO2021232836A1 (zh) 大麻素类化合物及其在治疗帕金森症中的应用
CN113116867B (zh) 一种预防和/或治疗流感的组合物
CN108605931B (zh) 四种化合物在制备杀线虫药物中的应用
CN1857418A (zh) 一种中药干粉吸入剂和制备方法及其应用
CN101024663A (zh) 一种新化合物、含有该化合物的提取物及制备方法和应用
KR20150129344A (ko) 핑거루트 다당류를 유효성분으로 포함하는 항비만 및 항당뇨 조성물
CN104367633B (zh) 一种有抗菌及增效抗菌作用的药物组合及制备方法与应用
TW201442719A (zh) 魚針草萃取物及其純化物抗流感病毒之用途
US20220031654A1 (en) Standardized Bioflavonoid Composition for Regulation of Homeostasis of Host Defense Mechanism
CN114699436A (zh) 一种防治流感的中药提取物组合物及其制备方法和应用
CN101085037A (zh) 一种兽用中药制剂及其制备方法
CN104208089B (zh) 一种用于治疗家禽腺胃炎的胃漂浮制剂及其制备方法
CN108261435A (zh) 一种诸葛菜生物碱类提取物及其在制备保肝制品中的应用
CN109172663B (zh) 一种治疗焦虑抑郁的药物组合物及其应用
CN101375844A (zh) 以丹酚酸b为原料的抗抑郁药物及其制法
CN101816706B (zh) 一种用于治疗病毒性呼吸道感染疾病的中药有效部位组合物
CN1857358A (zh) 苍术酮、含苍术酮的植物及苍术酮提取物在制备抗流感病毒药物中的用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant