CN104367633B - 一种有抗菌及增效抗菌作用的药物组合及制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药药物物质组合,及其抗菌和增效抗菌作用。本发明中药药物物质组合由紫苏方经过乙醇提取、大孔吸附树脂纯化得到,富集了紫苏方中的酚类、生物碱类和二萜醌类成分,同时经过体外和体内抗菌实验验证,具有明显体外抑菌作用,与头孢类抗生素联合使用可提高病原菌对抗生素的敏感性,具有增效抗菌作用。预防性给药后可降低全身感染模型小鼠的死亡率,延长存活时间,提高生活质量。体内体外均显示出较强抗菌活性。
Description
技术领域
本发明属于药物研究开发领域,涉及一种中药药物物质组合,特别涉及一种具有抗菌及增效抗菌作用的中药药物物质组合,与可同时制备该组合的方法。
背景技术
细菌感染给人类健康造成巨大威胁,随着抗生素的长期、大量、不合理使用,细菌耐药性问题日趋严重,不仅使患者出现不良反应、药源性疾病甚至死亡,以及二重感染的可能性大大增加,而且加重了患者家庭的经济负担,对国家医疗卫生资源也造成了严重的浪费。中药是我国独有的天然资源,许多单味中药已得到证实具有明确的体内和体外抗菌活性,配伍组方后抗菌效果明显提高,同时可通过增强患者免疫力,退热,镇痛,抗炎,止咳,达到综合全面的治疗效果。与抗生素相比,中药及中药复方在预防和治疗感染病方面有着毒副作用小,不易产生耐药性等突出优势,故阐明抗感染中药及中药复方的药效物质基础,开发创新药物具有重要意义和应用价值。
本发明以王永炎院士的临床经验方紫苏方为方原,探索发现了一种具有抗菌及增效抗菌作用的中药药物物质组合,并以药效关联的类型成分及指标性成分为综合考量,建立了稳定可靠、适合实际生产的同时制备工艺和科学全面的质量控制方法,有利于进一步创新药物的研发。目前,未见从紫苏方中纯化制备抗菌及增效抗菌药物物质组合的相关报道,也未见有关该组合物在治疗感染疾病方面的相关研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗菌及增效抗菌作用的药物物质组合,其药物体系主要由酚类、生物碱类及其萜类组成,
本发明的另一个目的在于提供该药物物质组合的中药方原组合,由紫苏梗、紫苏籽、丹参、黄芩、苦参等组成。
本发明的另一个目的在于提供其制备方法及工艺,本发明的第三个目的在于提供其质量检测及其控制方法。本发明的第四个目的在于提供其体外抗菌及增效抗菌活性,以及对金黄色葡菌感染小鼠的保护作用。本发明的第五个目的在于提供该中药药物物质组合物的制品及其在药品、食品领域的应用。
本发明的目的是通过如下途径实现的:
本发明中药药物物质组合主要由酚类、生物碱类及其萜类组成,可由化学合成、制备,天然药物提取制备组合制成;本发明的方原可由如下4组药用植物及其代用品种,包括其药用部位及非药用部位,药材及其饮片组合制成。
组1:紫苏,白苏,五彩苏,夏枯草,迷迭香,东陵草,连钱草,溪黄草,薄荷,泽兰,异叶青兰,石见穿,山地香茶菜,香薷,肾茶,留兰香等唇形科、紫草科及伞形科植物.
组2:苦参,苦豆子,山豆根,皂荚,沙冬青,等豆科植物。
组3:黄芩,半枝莲,灯盏花,木蝴蝶,小飞蓬,昆仑雪菊,及其同属植物。
组4:丹参,黑骨藤,子宫草,轮叶婆婆纳,及鼠尾草等唇形科鼠尾草属植物。
本发明中药药物物质组合,可经上述原料药组合后以乙醇、或其他醇类、稀醇、或其他有机溶剂或水提取再通过大孔吸附树脂或其他色谱方法,如聚酰胺色谱法等,或溶剂萃取法等纯化得到。
本发明中药药物物质组合可由上述原料药的提取物经进一步富集纯化后或上述原料药的大孔树脂制备物混合而成。
本发明中药药物物质组合可经化学合成或结构修饰,生物合成或生物转等途径获得。
本发明中药药物组合优选由如下原料药制成:
紫苏子100-300重量份 紫苏梗100-300重量份 苦参150-450重量份
黄芩150-450重量份 丹参250-750重量份。
本发明中药药物物质组合的制备方法包括如下步骤:
步骤1:选取上述原料药;
步骤2:乙醇提取;
步骤3:大孔吸附树脂纯化;
该中药药物物质组合由两部分构成,第一部分为黄棕色至黄褐色粉末,气略清香,味苦。其中总酚含量为10%-90%,总生物碱含量为2%-20%,黄芩苷含量为6%-50%,丹酚酸B含量为4%-50%,迷迭香酸含量为0.3%-3%,优选总酚含量为50%-80%,优选总生物碱含量为8%-16%,优选黄芩苷含量为20%-50%,优选丹酚酸B含量为14-50%,优选迷迭香酸含量为1%-3%。由于第一部分酚类占据主要组成故称其为酚类药物物质;第二部分为暗红色膏状固体,具特殊香气,味淡,称为二萜醌类药物物质。其中丹参酮IIA含量为0.1%-10%,优选丹参酮IIA含量为5%-10%。
上述步骤2中,将原料药用8-12倍量,0-70%乙醇回流提取1-3次,每次提取1-2小时。合并两次提取液减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.01-0.1g/mL。
上述步骤3中,上样液通过大孔吸附树脂,树脂径高比为1∶4-1∶10,上样液浓度为0.01-0.1g/mL,上样量以全方生药材计为0.2g/ml-0.5g/ml,吸附流速为1-4BV/h,水洗脱0-2倍树脂体积进行除杂,先以40-70%乙醇洗脱0-8倍树脂体积,洗脱流速为2-6BV/h,收集乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得酚类药物物质;再以70-95%乙醇洗脱0-13倍树脂体积,洗脱流速为2-6BV/h,收集乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得二萜醌类药物物质。
上述步骤3中所用大孔吸附树脂优选为AB-8,D101,HPD-100型等弱极性或非极性大孔树脂。
本发明中药药物物质组合,由2部分组成。酚类药物物质中主要包括酚酸类成分(如丹酚酸B,迷迭香酸等)、含有酚羟基的黄酮类成分(如黄芩苷,汉黄芩苷等)、不含酚羟基的各种黄酮类成分。此外,酚类药物物质中含有部分生物碱类成分如苦参碱、氧化苦参碱等,还含有少量其他类型成分。酚类物质百分含量的总和达到50%-80%,生物碱类百分含量总和为2-16%。二萜醌类药物物质中含有丹参酮II A,隐丹参酮,丹参酮I等脂溶性二萜醌类成分、小极性的黄酮类成分及其他类型成分,二萜醌类百分含量总和为5-10%。
将以上所得两部分中药药物物质进行配伍组合,加入常规辅料,按常规的制剂工艺制成药剂学可接受的任意常规剂型,包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液等。
本发明中药药物物质组合由紫苏方经过乙醇提取、大孔吸附树脂纯化得到,富集了紫苏方中的酚类成分(生物碱类)和二萜醌类成分,同时经过体外和体内抗菌实验验证,具有明显体外抑菌作用,与头孢类抗生素联合使用可提高病原菌对抗生素的敏感性,具有增效抗菌作用。预防性给药后可降低全身感染模型小鼠的死亡率(p<0.05),延长存活时间(p<0.05),提高生活质量。体内体外均显示出较强抗菌活性。
实验例1 本发明体外对金黄色葡萄球菌的抗菌作用及与广谱抗生素头孢克洛联用后的增效抗菌作用。
1实验材料
1.1器材
日本三洋高压蒸汽灭菌器型号:MLS-3780(北京得尔贝经贸有限公司),
HZQ-X100震荡培养箱(中国.哈尔滨市东联电子技术开发有限公司),
HD-1360洁净工作台(北京东联哈尔仪器制药有限公司)。
1.2实验菌种
金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)购自广东省微生物种质资源库(菌种保藏编号:26112-10;规格:冻干管)。
1.3培养基
LB培养基:称取胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠10g,加1000ml去离子水溶解,以1.0mol/L氢氧化钠溶液调PH约为7.2,封瓶膜封口,置于高压蒸汽灭菌器内灭菌2h。
1.4试剂与药品
头孢克洛胶囊(昆明贝克诺顿制药有限公司批号:国药准字H53021942)
中药药物物质组合物:由酚类药物物质与二萜醌类药物物质按出膏率比例组合而成。
2实验方法
2.1菌液的制备
将金黄色葡萄球菌以(菌液v∶培养基v=1∶10)的比例接种于LB液体培养基内,细菌置于37℃培养箱内震荡培养12h。
2.2受试药样品溶液及载药纸片的制备
受试药样品溶液:取中药药物物质组合物适量,以去离子水溶解配制成浓度相当于1g全方生药量/ml的受试药样品溶液,煮沸灭菌30min后备用,记作F1。将F1进行二倍稀释,煮沸30min灭菌后备用,记作F2。
抗生素样品溶液:准确称取头孢克洛胶囊内容物1.96mg,置于10ml容量瓶中,以去离子水定容至刻度混匀,过滤灭菌后备用,记作K1。精密移取K1溶液5ml于10ml容量瓶中,以去离子水定容至刻度,过滤灭菌后备用,记作K2。对K2溶液进行二倍稀释,过滤灭菌后备用,记为K3.
载药纸片制备:用打孔器将滤纸打成直径为6mm的圆形纸片若干,于高压蒸汽灭菌器内灭菌2h,超净工作台内,用移液枪按分组情况移取各药液加于无菌滤纸片上,每张纸片载药液量为5μl,晾干即得到载药纸片,纸片载药量如下表所示:
表1各组别纸片载药量(受试药载药量以全方生药量计)
备注:受试药组(F)-无菌滤纸片加F2溶液5μl;抗生素组(K)-无菌滤纸片加K2溶液5μl;受试药+抗生素组(KF1)-无菌滤纸片加入等体积的F1和K1混合溶液5μl;1/2抗生素对照组(1/2K)-加入K3溶液5μl;受试药+1/2抗生素组(KF2)-无菌滤纸片加入等体积的F1和K2混合溶液5μl
2.3体外抑菌实验
在超净工作台上将灭菌后的固体培养基倒入无菌培养皿中,每皿25ml左右。待冷却凝固后,加入制备好的金黄色葡萄球菌菌液,移入50μl用涂布棒将菌液涂布均匀。用无菌镊子夹取载药滤纸片贴在相应培养基表面,每个组别3次重复,封口膜封闭后,置于37℃培养箱内倒置培养24h取出,用游标卡尺测定其抑菌圈直径(mm)。纸片粘贴位置如说明书附图1所示:
3结果
3.1本专利体外抗菌作用及联用头孢克洛对金黄色葡萄球菌的增效抗菌作用
从表中数据可以直观地看出受试药组抑菌圈明显,与所设立的抗生素组抑菌圈直径相当,显示出中药药物物质组合物对病原菌的直接抑制或杀灭作用,体外抑菌活性 较好。与头孢克洛联用后抑菌效果提高(体现在抑菌圈直径增大约0.8mm)。通过设立1/2 抗生素对照组(1/2K)和受试药+1/2抗生素组(KF2),将抗生素用量继续减半,使得受试 药的体外增效抗菌作用较好体现(抑菌圈直径增加约2.2mm)。且受试药与抗生素联用组 所形成的抑菌圈边界明显,圈内无菌生长,抑菌效果在考察时间内(24h),良好保持。 可见该组合物与广谱抗生素头孢克洛合用后,可以增加细菌对抗生素的敏感性,具有增 效抗菌作用。
表2各组别抑菌圈直径结果(n=3)
备注:空白滤纸片直径6mm
抗菌结果图见说明书附图2。
实验例2 本专利对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用。
1实验材料
1.1实验动物
SPF级KM小鼠,体重为(18±21)g,雌雄各半,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2-12-0001。
1.2药品与试剂
双黄连口服液,由哈药集团三精制药股份有限公司生产,批号:国药准字Z10920053,
头孢克洛胶囊(昆明贝克诺顿制药有限公司批号:国药准字H53021942),
药物物质组合物:由酚类药物物质与二萜醌类药物物质按出膏率比例组合而成。
1.3器材
日本三洋高压蒸汽灭菌器型号:MLS-3780(北京得尔贝经贸有限公司),
HZQ-X100震荡培养箱(中国.哈尔滨市东联电子技术开发有限公司),
HD-1360洁净工作台(北京东联哈尔仪器制药有限公司)。
1.4实验菌种
金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)购自广东省微生物种质资源库(菌种保藏编号:26112-10;规格:冻干管)。
2试验方法
选取小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,即空白对照组、模型对照组、双黄连对照组、头孢克洛对照组、药物物质组合物组,药物物质组合物组及双黄连对照组按剂量连续灌胃给药7天,1次/天。空白对照组和模型对照组灌胃给予等量生理盐水,头孢克洛对照组在感染菌前1天开始给药1次。感染前小鼠禁食12h,第8天,选80%~100%小鼠死亡的金黄色葡萄球菌5%干酵母生理盐水稀释液0.4mL/只(浓度为7.0×106个/ml),腹腔注射攻击小鼠造成感染,空白对照组注射等量5%干酵母生理盐水溶液,0.4ml/只。感染后6h,阳性对照组再给药1次,继续给药1d。观察和记录各组动物感染后7d内的反应情况,死亡数及存活时间。
3统计学处理
死亡数据为分类资料,用SPSS17.0统计软件的Fishers’exact检验进行统计分析,P<0.05有统计学意义。存活时间的组件差异比较采用SPSS 17.0独立样本t检验分析。
4实验结果
4.1本专利对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用
结果表明,与空白对照组比较,模型对照组的动物死亡率为100%(P<0.01),表明浓度为7.0×106个/ml金黄色葡萄球菌的干酵母混悬液能明显引起小鼠死亡,造模成功。与模型对照组比较,两个阳性药组,即双黄连口服液组与头孢克洛组死亡率明显降低(P<0.05,P<0.01),且平均存活时间要明显延长;药物物质组合物组与模型组相比死亡率明显降低(P<0.05),与中药阳性药双黄连组的药效相当,且存活时间更长,药物剂量与用量小,显示出较强的体内抗菌药效。
表3对活菌攻击小鼠的保护作用(n=10)
备注:药物物质组合物组给药剂量为7.5g全方生药量/kg/d;○○与空白组相比具有显著性差异;△与模型组相比具有统计学意义;△△与模型组相比具有显著性差异;
含有本发明提出的制备物的制剂可根据本领域公知的方法制备。可将本发明提出的制备物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅料结合,制成可作为人药或兽药使用的适当的施用形式或剂量形式。
含有本发明提出的制备物物的制剂,可以单位剂量形式给药,给药途径可为肠道或非肠道,如口服、肌肉、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、透皮、皮下、皮内、腹膜、直肠等。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型,如液体剂型可以是真溶液剂型、胶体溶液剂型、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。液体剂型形式可以是糖浆剂、酒剂、注射溶液、非水溶液、悬浮液或乳液等;固体剂型例如片剂、锭剂、胶囊、滴丸剂、丸剂、颗粒剂、粉剂、霜剂、栓剂、散剂、膏剂等。
含有本发明提出的制备物的制剂,可以是普通制剂,也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统等。
为了将单位给药剂型制成片剂,可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子包括,赋形剂如碳酸钙、乳糖、磷酸钙、磷酸钠;稀释剂与吸收剂如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝、葡聚糖、胶态二氧化硅、阿拉伯胶、明胶、三硅酸镁、角蛋白等;湿润剂与粘合剂如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等;崩解剂如干燥淀粉、海藻酸钠、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等;崩解抑制剂如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可酯、氢化植物油等;吸收促进剂如季铵盐、十二烷基硫酸钠等;润滑剂如滑石粉、三乙胺硬脂酸镁、三乙胺硬脂酸、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片,如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片,或双层片和多层片等。
为了将单位给药剂型制成丸剂,可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是,例如稀释剂与吸收剂,如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可酯、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、高岭土、滑石粉等;粘合剂如阿拉伯胶、黄耆胶、明胶、乙醇、蜂蜜、米糊或面糊等;崩解剂如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸钠、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。
为了将单位给药剂型制成胶囊,可将本发明提出的制备物与上述各种载体混合,并将由此得到的混合物置于硬明胶胶囊或软胶囊中。也可将本发明提出的制备物制成微囊剂,混悬于水性介质中形成混悬剂,亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。
为了将单位给药剂型制成口服液体制剂,如乳液、溶液、悬浮液、糖浆等,可根据需要任选添加剂如着色剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、矫味剂(如薄荷、冬青油等)、甜味剂(如蔗糖、乳糖等)或其他材料。
为了将单位给药剂型制成注射用含水或非水制剂,如溶液剂、混悬型溶液剂、乳剂、冻干粉针剂,可含一种和/或多种药效学上可接受的载体,如稀释剂、润湿剂、乳化剂、润滑剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂,以及常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。稀释剂可选自水、乙醇、聚乙二醇、1,3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、植物油(如橄榄油、玉米油等)、明胶、可注射用有机酯(如油酸乙酯、脂肪酸酯等)、聚氧乙烯山梨醇等。为了制备等渗注射剂,还可以添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
附图说明:
图1是载药纸片粘贴位置图;图2是抗菌结果图。
具体实施方式
实施例1:抗菌中药药物物质组合制备工艺
紫苏子 133.3g 紫苏梗 133.3g 丹参 333.3g
苦参 200g 黄芩 200g
按上述比例取原料药饮片1kg,以10倍量50%乙醇回流提取2次,每次提取2小时,合并两次提取液(共20L)减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.05g/mL(以折生药材量计,其中总酚浓度为3.1493mg/ml,总生物碱浓度为0.4504mg/ml,黄芩苷浓度为1.3042mg/ml,丹酚酸B浓度为1.0660mg/ml,迷迭香酸浓度为0.0790mg/ml,丹参酮II A浓度为0.0296mg/ml),将上样液通过3L AB-8型大孔吸附树脂进行动态吸附,吸附流速2BV/h,树脂柱径高比为1∶8,水洗脱0.5倍树脂体积进行除杂,除杂流速为2BV/h,先以60%乙醇洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集60%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利酚类药物物质。再以95%乙醇洗脱11倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集95%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利二萜醌类药物物质。
总酚含量测定方法:
对照品溶液的制备:精密称定丹酚酸B对照品1.32mg,以50%甲醇定容至25ml,得到浓度为0.0528mg/ml的丹酚酸B对照品溶液;
试剂:0.6%三氯化铁溶液,0.9%铁氰化钾溶液,0.3%十二烷基硫酸钠溶液,50%甲醇 溶液,0.1mol/L盐酸溶液;
显色方法:精密移取样品溶液适量置于25ml茶色容量瓶中,加50%甲醇至5mL,再加入0.3%十二烷基硫酸钠溶液2mL,摇匀,加入1∶1的0.6%三氯化铁-0.9%铁氰化钾新制混合溶液1.6mL,暗处放置7min,用0.1mol/L盐酸加至25mL刻度线,摇匀后于暗处静置40min,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品于762±5nm波长范围内测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总酚以丹酚酸B计,不少于50.0%。
总生物碱含量测定方法:
对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品0.99mg,以50%乙醇定容至10ml,得到浓度为0.099mg/ml的苦参碱对照品溶液;
试剂:PH7.6的溴麝香草酚蓝溶液,0.1mol/L磷酸二氢钠溶液,0.1mol/L氢氧化钠溶液,氯仿(分析纯);
显色方法:精密移取样品适量置于50ml磨口圆底烧瓶中,60℃旋干,分别加入PH7.6溴麝香草酚蓝溶液4ml,再移入氯仿6ml,密塞,剧烈震摇2min,转移至分液漏斗中,静置2h,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品分取氯仿层于414nm±5nm波长处测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总生物碱以苦参碱计,不少于7.0%。
指标性成分黄芩苷、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮II A同时含量测定方法
对照品溶液的制备:精密称取迷迭香酸对照品1.17mg,置于10ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定丹参酮II A对照品0.85mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定黄芩苷对照品1.47mg,丹酚酸B对照品1.24mg,置于10ml干燥茶色容量瓶中,精密移入上述迷迭香酸对照品溶液2ml,再精密移入上述丹参酮II A对照品溶液2ml后,以50%甲醇定容至10ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得到黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸和丹参酮II A的混合标准品溶液。其中C黄芩苷=0.147mg/ml,C丹酚酸B=0.124mg/ml,C迷迭香酸=0.0234mg/ml,C丹参酮II A=0.0068mg/ml;
色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相(A),以0.2%甲酸水为流动相(B),按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长为270nm(黄芩苷、丹参酮II A),350nm(丹酚酸B),330nm(迷迭香酸);柱温40℃,流速为1.0ml/min;
标准曲线的制备:精密吸取黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮II A混合对照品溶液,0、2、5、10、20、30、40μL,注入液相色谱仪,测定色谱峰面积,以对照品量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。:
供试品溶液的制备:精密称取酚类药物物质18mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,备用。精密称取二萜醌类药物物质4mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇容至刻度,过0.45μm微孔滤膜,备用。
测定法:精密吸取酚类供试品溶液25ul,二萜醌类供试品溶液15ul,注入液相色谱仪,测定,将峰面积代入标准曲线,经计算即得到各指标性成分的量。
酚类药物物质按干燥品计算,含黄芩苷不得少于21.0%,含丹酚酸B不得少于16.0%,含迷迭香酸不得少于1.0%.二萜醌类药物物质按干燥品计算,含丹参酮II A不得少于6.0%。
实施例2:
紫苏子 133.3g 紫苏梗 133.3g 丹参 333.3g
苦参 200g 黄芩200g
按上述比例取原料药饮片1kg,以5倍量50%乙醇回流提取1次,每次提取1小时,合并两次提取液(共20L)减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.05g/mL(以折生药材量计,其中总酚浓度为3.1493mg/ml,总生物碱浓度为0.4504mg/ml,黄芩苷浓度为1.3042mg/ml,丹酚酸B浓度为1.0660mg/ml,迷迭香酸浓度为0.0790mg/ml,丹参酮II A浓度为0.0296mg/ml),将上样液通过3L AB-8型大孔吸附树脂进行动态吸附,吸附流速2BV/h,树脂柱径高比为1∶8,水洗脱0.5倍树脂体积进行除杂,除杂流速为2BV/h,先以60%乙醇洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集60%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利酚类药物物质。再以95%乙醇洗脱11倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集95%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利二萜醌类药物物质。
总酚含量测定方法:
对照品溶液的制备:精密称定丹酚酸B对照品1.32mg,以50%甲醇定容至25ml,得到浓度为0.0528mg/ml的丹酚酸B对照品溶液;
试剂:0.6%三氯化铁溶液,0.9%铁氰化钾溶液,0.3%十二烷基硫酸钠溶液,50%甲醇 溶液,0.1mol/L盐酸溶液;
显色方法:精密移取样品溶液适量置于25ml茶色容量瓶中,加50%甲醇至5mL,再加入0.3%十二烷基硫酸钠溶液2mL,摇匀,加入1∶1的0.6%三氯化铁-0.9%铁氰化钾新制混合溶液1.6mL,暗处放置7min,用0.1mol/L盐酸加至25mL刻度线,摇匀后于暗处静置40min,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品于762±5nm波长范围内测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总酚以丹酚酸B计,不少于50.0%。
总生物碱含量测定方法:
对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品0.99mg,以50%7醇定容至10ml,得到浓度为0.099mg/ml的苦参碱对照品溶液;
试剂:PH7.6的溴麝香草酚蓝溶液,0.1mol/L磷酸二氢钠溶液,0.1mol/L氢氧化钠溶液,氯仿(分析纯);
显色方法:精密移取样品适量置于50ml磨口圆底烧瓶中,60℃旋干,分别加入PH7.6溴麝香草酚蓝溶液4ml,再移入氯仿6ml,密塞,剧烈震摇2min,转移至分液漏斗中,静置2h,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品分取氯仿层于414nm±5nm波长处测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总生物碱以苦参碱计,不少于7.0%。
指标性成分黄芩苷、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮II A同时含量测定方法
对照品溶液的制备:精密称取迷迭香酸对照品1.17mg,置于10ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定丹参酮II A对照品0.85mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定黄芩苷对照品1.47mg,丹酚酸B对照品1.24mg,置于10ml干燥茶色容量瓶中,精密移入上述迷迭香酸对照品溶液2ml,再精密移入上述丹参酮II A对照品溶液2ml后,以50%甲醇定容至10ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得到黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸和丹参酮II A的混合标准品溶液。其中C黄芩苷=0.147mg/ml,C丹酚酸B=0.124mg/ml,C迷迭香酸=0.0234mg/ml,C丹参酮II A=0.0068mg/ml;
色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相(A),以0.2%甲酸水为流动相(B),按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长为270nm(黄芩苷、丹参酮II A),350nm(丹酚酸B),330nm(迷迭香酸);柱温40℃,流速为1.0ml/min;
标准曲线的制备:精密吸取黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮II A混合对照品溶液,0、2、5、10、20、30、40μL,注入液相色谱仪,测定色谱峰面积,以对照品量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。:
供试品溶液的制备:精密称取酚类药物物质适量,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,备用。精密称取二萜醌类药物物质4mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇容至刻度,过0.45μm微孔滤膜,备用。
测定法:精密吸取酚类供试品溶液25ul,二萜醌类供试品溶液15ul,注入液相色谱仪,测定,将峰面积代入标准曲线,经计算即得到各指标性成分的量。
酚类药物物质按干燥品计算,含黄芩苷不得少于21.0%,含丹酚酸B不得少于16.0%,含迷迭香酸不得少于1.0%.二萜醌类药物物质按干燥品计算,含丹参酮II A不得少于7.0%。
实施例3:
紫苏子 133.3g 紫苏梗 133.3g 丹参 333.3g
苦参 200g 黄芩 200g
按上述比例取原料药饮片1kg,以10倍量50%乙醇回流提取2次,每次提取2小时,合并两次提取液(共20L)减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.05g/mL(以折生药材量计,其中总酚浓度为3.1493mg/ml,总生物碱浓度为0.4504mg/ml,黄芩苷浓度为1.3042mg/ml,丹酚酸B浓度为1.0660mg/ml,迷迭香酸浓度为0.0790mg/ml,丹参酮II A浓度为0.0296mg/ml),将上样液通过3L AB-8型大孔吸附树脂进行动态吸附,吸附流速2BV/h,树脂柱径高比为1∶8,水洗脱0.5倍树脂体积进行除杂,除杂流速为2BV/h,先以50%乙醇洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集60%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利酚类药物物质。再以95%乙醇洗脱11倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集90%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利二萜醌类药物物质。
总酚含量测定方法:
对照品溶液的制备:精密称定丹酚酸B对照品1.32mg,以50%甲醇定容至25ml,得到浓度为0.0528mg/ml的丹酚酸B对照品溶液;
试剂:0.6%三氯化铁溶液,0.9%铁氰化钾溶液,0.3%十二烷基硫酸钠溶液,50%甲醇 溶液,0.1mol/L盐酸溶液;
显色方法:精密移取样品溶液适量置于25ml茶色容量瓶中,加50%甲醇至5mL,再加入0.3%十二烷基硫酸钠溶液2mL,摇匀,加入1∶1的0.6%三氯化铁-0.9%铁氰化钾新制混合溶液1.6mL,暗处放置7min,用0.1mol/L盐酸加至25mL刻度线,摇匀后于暗处静置40min,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品于762±5nm波长范围内测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总酚以丹酚酸B计,不少于50.0%。
总生物碱含量测定方法:
对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品0.99mg,以50%乙醇定容至10ml,得到浓度为0.099mg/ml的苦参碱对照品溶液;
试剂:PH7.6的溴麝香草酚蓝溶液,0.1mol/L磷酸二氢钠溶液,0.1mol/L氢氧化钠溶液,氯仿(分析纯);
显色方法:精密移取样品适量置于50ml磨口圆底烧瓶中,60℃旋干,分别加入PH7.6溴麝香草酚蓝溶液4ml,再移入氯仿6ml,密塞,剧烈震摇2min,转移至分液漏斗中,静置2h,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品分取氯仿层于414nm±5nm波长处测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总生物碱以苦参碱计,不少于7.0%。
指标性成分黄芩苷、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮II A同时含量测定方法
对照品溶液的制备:精密称取迷迭香酸对照品1.17mg,置于10ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定丹参酮II A对照品0.85mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定黄芩苷对照品1.47mg,丹酚酸B对照品1.24mg,置于10ml干燥茶色容量瓶中,精密移入上述迷迭香酸对照品溶液2ml,再精密移入上述丹参酮II A对照品溶液2ml后,以50%甲醇定容至10ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得到黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸和丹参酮II A的混合标准品溶液。其中C黄芩苷=0.147mg/ml,C丹酚酸B=0.124mg/ml,C迷迭香酸=0.0234mg/ml,C丹参酮II A=0.0068mg/ml;
色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相(A),以0.2%甲酸水为流动相(B),按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长为270nm(黄芩苷、丹参酮II A),350nm(丹酚酸B),330nm(迷迭香酸);柱温40℃,流速为1.0ml/min;
标准曲线的制备:精密吸取黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮II A混合对照品溶液,0、2、5、10、20、30、40μL,注入液相色谱仪,测定色谱峰面积,以对照品量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。:
供试品溶液的制备:精密称取酚类药物物质适量,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,备用。精密称取二萜醌类药物物质4mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇容至刻度,过0.45μm微孔滤膜,备用。
测定法:精密吸取酚类供试品溶液25ul,二萜醌类供试品溶液15ul,注入液相色谱仪,测定,将峰面积代入标准曲线,经计算即得到各指标性成分的量。
酚类药物物质按干燥品计算,含黄芩苷不得少于21.0%,含丹酚酸B不得少于16.0%,含迷迭香酸不得少于1.0%.二萜醌类药物物质按干燥品计算,含丹参酮II A不得少于7.0%。
实施例4:
紫苏子 133.3g 紫苏梗 133.3g 丹参 333.3g
苦参 200g 黄芩200g
按上述比例取原料药饮片1kg,以10倍量50%乙醇回流提取2次,每次提取2小时,合并两次提取液(共20L)减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.05g/mL(以折生药材量计,其中总酚浓度为3.1493mg/ml,总生物碱浓度为0.4504mg/ml,黄芩苷浓度为1.3042mg/ml,丹酚酸B浓度为1.0660mg/ml,迷迭香酸浓度为0.0790mg/ml,丹参酮II A浓度为0.0296mg/ml),将上样液通过3L AB-8型大孔吸附树脂进行动态吸附,吸附流速2BV/h,树脂柱径高比为1∶6,水洗脱0.5倍树脂体积进行除杂,除杂流速为2BV/h,先以50%乙醇洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集60%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利酚类药物物质。再以95%乙醇洗脱11倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集95%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利二萜醌类药物物质。
总酚含量测定方法:
对照品溶液的制备:精密称定丹酚酸B对照品1.32mg,以50%甲醇定容至25ml,得到浓度为0.0528mg/ml的丹酚酸B对照品溶液;
试剂:0.6%三氯化铁溶液,0.9%铁氰化钾溶液,0.3%十二烷基硫酸钠溶液,50%甲醇 溶液,0.1mol/L盐酸溶液;
显色方法:精密移取样品溶液适量置于25ml茶色容量瓶中,加50%甲醇至5mL,再加入0.3%十二烷基硫酸钠溶液2mL,摇匀,加入1∶1的0.6%三氯化铁-0.9%铁氰化钾新制混合溶液1.6mL,暗处放置7min,用0.1mol/L盐酸加至25mL刻度线,摇匀后于暗处静置40min,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品于762±5nm波长范围内测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总酚以丹酚酸B计,不少于50.0%。
总生物碱含量测定方法:
对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品0.99mg,以50%乙醇定容至10ml,得到浓度为0.099mg/ml的苦参碱对照品溶液;
试剂:PH7.6的溴麝香草酚蓝溶液,0.1mol/L磷酸二氢钠溶液,0.1mol/L氢氧化钠溶液,氯仿(分析纯);
显色方法:精密移取样品适量置于50ml磨口圆底烧瓶中,60℃旋干,分别加入PH7.6溴麝香草酚蓝溶液4ml,再移入氯仿6ml,密塞,剧烈震摇2min,转移至分液漏斗中,静置2h,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品分取氯仿层于414nm±5nm波长处测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总生物碱以苦参碱计,不少于7.0%。
指标性成分黄芩苷、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮II A同时含量测定方法
对照品溶液的制备:精密称取迷迭香酸对照品1.17mg,置于10ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定丹参酮II A对照品0.85mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定黄芩苷对照品1.47mg,丹酚酸B对照品1.24mg,置于10ml干燥茶色容量瓶中,精密移入上述迷迭香酸对照品溶液2ml,再精密移入上述丹参酮II A对照品溶液2ml后,以50%甲醇定容至10ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得到黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸和丹参酮II A的混合标准品溶液。其中C黄芩苷=0.147mg/ml,C丹酚酸B=0.124mg/ml,C迷迭香酸=0.0234mg/ml,C丹参酮II A=0.0068mg/ml;
色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相(A),以0.2%甲酸水为流动相(B),按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长为270nm(黄芩苷、丹参酮II A),350nm(丹酚酸B),330nm(迷迭香酸);柱温40℃,流速为1.0ml/min;
标准曲线的制备:精密吸取黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮II A混合对照品溶液,0、2、5、10、20、30、40μL,注入液相色谱仪,测定色谱峰面积,以对照品量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。:
供试品溶液的制备:精密称取酚类药物物质适量,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,备用。精密称取二萜醌类药物物质4mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇容至刻度,过0.45μm微孔滤膜,备用。
测定法:精密吸取酚类供试品溶液25ul,二萜醌类供试品溶液15ul,注入液相色谱仪,测定,将峰面积代入标准曲线,经计算即得到各指标性成分的量。
酚类药物物质按干燥品计算,含黄芩苷不得少于21.0%,含丹酚酸B不得少于16.0%,含迷迭香酸不得少于1.0%.二萜醌类药物物质按干燥品计算,含丹参酮II A不得少于7.0%。
实施例5:抗菌中药药物物质组合制备工艺
紫苏子 133.3g 紫苏梗 133.3g 丹参 333.3g
苦参 200g 黄芩 200g
按上述比例取原料药饮片1kg,以10倍量50%乙醇回流提取2次,每次提取2小时,合并两次提取液(共20L)减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.05g/mL(以折生药材量计,其中总酚浓度为3.1493mg/ml,总生物碱浓度为0.4504mg/ml,黄芩苷浓度为1.3042mg/ml,丹酚酸B浓度为1.0660mg/ml,迷迭香酸浓度为0.0790mg/ml,丹参酮II A浓度为0.0296mg/ml),将上样液通过3L D101型大孔吸附树脂进行动态吸附,吸附流速2BV/h,树脂柱径高比为1∶8,水洗脱0.5倍树脂体积进行除杂,除杂流速为2BV/h,先以60%乙醇洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集60%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利酚类药物物质。再以95%乙醇洗脱11倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集95%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为本专利二萜醌类药物物质。
总酚含量测定方法:
对照品溶液的制备:精密称定丹酚酸B对照品1.32mg,以50%甲醇定容至25ml,得到浓度为0.0528mg/ml的丹酚酸B对照品溶液;
试剂:0.6%三氯化铁溶液,0.9%铁氰化钾溶液,0.3%十二烷基硫酸钠溶液,50%甲醇 溶液,0.1mol/L盐酸溶液;
显色方法:精密移取样品溶液适量置于25ml茶色容量瓶中,加50%甲醇至5mL,再加入0.3%十二烷基硫酸钠溶液2mL,摇匀,加入1∶1的0.6%三氯化铁-0.9%铁氰化钾新制混合溶液1.6mL,暗处放置7min,用0.1mol/L盐酸加至25mL刻度线,摇匀后于暗处静置40min,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品于762±5nm波长范围内测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总酚以丹酚酸B计,不少于50.0%。
总生物碱含量测定方法:
对照品溶液的制备 精密称取苦参碱对照品0.99mg,以50%乙醇定容至10ml,得到浓度为0.099mg/ml的苦参碱对照品溶液;
试剂:PH7.6的溴麝香草酚蓝溶液,0.1mol/L磷酸二氢钠溶液,0.1mol/L氢氧化钠溶液,氯仿(分析纯);
显色方法:精密移取样品适量置于50ml磨口圆底烧瓶中,60℃旋干,分别加入PH7.6溴麝香草酚蓝溶液4ml,再移入氯仿6ml,密塞,剧烈震摇2min,转移至分液漏斗中,静置2h,并随行做空白对照,以备测定;
测定方法:将上述显色后样品分取氯仿层于414nm±5nm波长处测定吸光度值,酚类药物物质按干燥品计算,含总生物碱以苦参碱计,不少于7.0%。
指标性成分黄芩苷、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮II A同时含量测定方法
对照品溶液的制备:精密称取迷迭香酸对照品1.17mg,置于10ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定丹参酮II A对照品0.85mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀备用。精密称定黄芩苷对照品1.47mg,丹酚酸B对照品1.24mg,置于10ml干燥茶色容量瓶中,精密移入上述迷迭香酸对照品溶液2ml,再精密移入上述丹参酮II A对照品溶液2ml后,以50%甲醇定容至10ml,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,即得到黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸和丹参酮II A的混合标准品溶液。其中C黄芩苷=0.147mg/ml,C丹酚酸B=0.124mg/ml,C迷迭香酸=0.0234mg/ml,C丹参酮II A=0.0068mg/ml;
色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相(A),以0.2%甲酸水为流动相(B),按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长为270nm(黄芩苷、丹参酮II A),350nm(丹酚酸B),330nm(迷迭香酸);柱温40℃,流速为1.0ml/min;
标准曲线的制备:精密吸取黄芩苷,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮II A混合对照品溶液,0、2、5、10、20、30、40μL,注入液相色谱仪,测定色谱峰面积,以对照品量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。:
供试品溶液的制备:精密称取酚类药物物质适量,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,备用。精密称取二萜醌类药物物质4mg,置于25ml茶色容量瓶中,以50%甲醇容至刻度,过0.45μm微孔滤膜,备用。
测定法:精密吸取酚类供试品溶液25ul,二萜醌类供试品溶液15ul,注入液相色谱仪,测定,将峰面积代入标准曲线,经计算即得到各指标性成分的量。
酚类药物物质按干燥品计算,含黄芩苷不得少于21.0%,含丹酚酸B不得少于16.0%,含迷迭香酸不得少于1.0%.二萜醌类药物物质按干燥品计算,含丹参酮II A不得少于7.0%。
实施例6:胶囊剂的制备
取本发明中药药物物质组合200g,粉碎,过80目筛,与微晶纤维素100g混合均匀,以95%乙醇制粒,干燥,以20目筛整粒,灌装胶囊。
实施例7:片剂的制备
取本发明中药药物物质组合50g,粉碎,过80目筛,与微晶纤维素70g、羧甲基淀粉钠5g混合均匀,以5%PVP制粒,干燥,以20目筛整粒,加入硬脂酸镁2g,压片。
实施例8:滴丸剂的制备
取本发明中药药物物质组合60g,粉碎,过80目筛,混合均匀,投入180g加热熔融的聚乙二醇6000中,搅拌至溶解,转移至贮液瓶中,密闭并保温在80~90℃,调节滴丸机液滴定量阀门,由上往下滴入10~15℃的液体石蜡中,将形成的滴丸沥干并擦除液体石蜡,干燥。
实施例9:口服液的制备
取本发明中药药物物质组合70g,粉碎,过80目筛,混合均匀,与蜂蜜1000g、蔗糖200g、苯甲酸钠10g及蒸馏水2000ml混合,加热至85~90℃,搅拌使溶解,保温30min,滤过,滤液加水稀释至4000ml,搅拌均匀,灌封,灭菌。
实施例10:注射液的制备
取本发明中药药物物质组合100g,加注射用水适量使溶解,加配置量的0.02%的活性炭搅拌5~10min,滤过,滤液稀释至10L左右,加氯化钠调节渗透压至等渗,调节pH7.5~8.0,超 滤,灌封,100℃灭菌30min。
实施例11:粉针剂的制备
取本发明中药药物物质组合100g,加注射用水及稀氢氧化钠适量使溶解,加配置量的0.02%的活性炭搅拌5~10min,滤过,滤液稀释至1L,调节pH6.5~7.8,超滤,喷雾干燥,干粉无菌分装。每支100mg,临用前加注射用水适量使溶解,用氯化钠输液250~500ml稀释后缓慢静脉滴注。
Claims (13)
1.一种具有抗菌及增效抗菌作用的中药药物物质组合,其特征在于,该中药药物物质组合的制备方法包括如下步骤:
步骤1:选取如下原料药:
紫苏子 100-300重量份 紫苏梗 100-300重量份 苦参 150-450重量份
黄芩 150-450重量份 丹参 250-750重量份;
步骤2:乙醇回流提取;
步骤3:弱极性或非极性大孔吸附树脂纯化;
步骤2中,将原料药用8-12倍量,50-70%乙醇回流提取1-3次,每次提取1-2小时;
步骤3中,上样液通过弱极性或非极性大孔吸附树脂,树脂径高比为1∶4-1∶10,上样液浓度为0.01-0.1g/mL,上样量以全方生药材计为0.2g/ml-0.5g/ml,吸附流速为1-4BV/h,水洗脱0.5-2倍树脂体积进行除杂,先以40-70%乙醇洗脱6-8倍树脂体积,洗脱流速为2-6BV/h,收集乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得酚类药物物质;再以90-95%乙醇洗脱11-13倍树脂体积,洗脱流速为2-6BV/h,收集乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即得二萜醌类药物物质;
该中药药物物质组合由两部分构成,第一部分酚类药物物质为黄棕色至黄褐色粉末,气略清香,味苦,其中总酚含量以丹酚酸B计为18%-80%,总生物碱含量以苦参碱计为2%-16%,黄芩苷含量为6%-50%,丹酚酸B含量为4%-50%,迷迭香酸含量为0.3%-3%;第二部分二萜醌类药物物质为暗红色膏状固体,具特殊香气,味淡,其中丹参酮IIA含量为0.1%-10%。
2.如权利要求1所述的中药药物物质组合,其特征在于,步骤1中原料药的组成为:
紫苏子 133.3g 紫苏梗 133.3g 丹参 333.3g
苦参 200g 黄芩 200g。
3.如权利要求1所述的中药药物物质组合,其特征在于,中药药物物质组合的制备方法包括如下步骤:
按上述比例取原料药饮片1kg,以10倍量50%乙醇回流提取2次,每次提取2小时,合并两次提取液减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.05g/mL,将上样液通过3L AB-8型大孔吸附树脂进行动态吸附,吸附流速2BV/h,树脂柱径高比为1∶8,水洗脱0.5倍树脂体积进行除杂,除杂流速为2BV/h,先以60%乙醇洗脱6倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集60%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为酚类药物物质;再以95%乙醇洗脱11倍树脂体积,洗脱流速为2BV/h,收集95%乙醇洗脱液,回收溶剂,减压干燥,即为二萜醌类药物物质。
4.如权利要求1所述的中药药物物质组合,其特征在于步骤3中,将步骤2所得两次提取液合并后,减压浓缩,至相对密度为1.15-1.20g/ml的清膏,加水分散,使上样液浓度为0.01-0.1g/mL。
5.如权利要求1所述的中药药物物质组合,其特征在于,所述大孔吸附树脂为AB-8、D101或HPD-100型。
6.如权利要求1所述中药药物物质组合,其特征在于,所述酚类药物物质中,酚类物质百分含量的总和为50%-80%,生物碱类百分含量总和为2-16%。
7.如权利要求1所述中药药物物质组合,其特征在于,所述二萜醌类药物物质中,丹参酮IIA含量为5%-10%。
8.如权利要求1所述中药药物物质组合,其特征在于,由所述原料药的大孔树脂制备物混合而成。
9.如权利要求1所述中药药物物质组合,其特征在于,所述药物物质组合的剂型为液体剂型或固体剂型。
10.如权利要求1所述中药药物物质组合,其特征在于,所述药物物质组合的剂型为长效和缓释制剂、控释制剂、或靶向制剂。
11.如权利要求9所述中药药物物质组合,其特征在于,所述固体剂型为片剂、锭剂、胶囊、丸剂、颗粒剂、霜剂、栓剂、散剂或膏剂。
12.如权利要求9所述中药药物物质组合,其特征在于,所述固体剂型为滴丸剂。
13.如权利要求1-12任一所述的中药药物物质组合在制备抗菌及增效抗菌药物中的用途。
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