CN113080064A - 一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，本发明以杜仲株系的带有一叶一芽的微茎段为外植体，经预处理、不定根诱导处理、外植体的定植和不定根诱导培养、外植体的腋芽萌发诱导和成苗培养等步骤。本发明采用的生根诱导剂处理茎段30s，7‑10d即伴有不定根原基形成，22d就可以获得完整的杜仲再生植株，比利用传统繁殖方法和利用组织培养技术对杜仲进行快繁的速度快，大大缩短了繁殖的周期；且本发明通过将微茎段扦插于装有营养基质的育苗盘中于温室内直接生根成苗，一方面避免了季节、地域等自然因素的影响和限制，另一方面也避免了杜仲组织培养繁育过程的繁琐及后续组培再生苗驯化移栽成活率低的缺陷。

Description

一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法

技术领域

本发明涉及植物无性繁殖技术领域，更具体地说，关于一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法。

背景技术

杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)又名思仲、丝绵木，为杜仲科，杜仲属多年生木本植物，是我国特有的经济植物和药用植物，属上新世遗留下来的单科单属单种的活化石植物。杜仲适应性极强，能抗寒、抗旱、耐盐碱、抗病虫，是理想的城乡绿化树种，在流域治理、水土保持、荒山绿化、通道和城市街道绿化中发挥着重要作用。

杜仲作为我国特有药材，在“三降”(降血压、降血糖、降血脂)、“四护”(护心血管、护肝、护肾、护视力)“六抗”(抗肿瘤、抗梗塞、抗骨质疏松和衰老、抗病毒细菌、抗过敏、抗氧化)等方面具有显著功效，且无毒副作用，已公布的27个保健功能食品功能中，杜仲具有其一半以上功能。

此外，由于杜仲植株不同器官含有大量的杜仲胶，其中成熟叶片含胶量为3-5％，成熟果实含胶量为10-18％，干皮含胶量为6-10％，根皮含胶量为1-2％。杜仲胶国外又称古塔波胶，为一种硬橡胶，具有耐腐蚀性强，绝缘性能极佳，可塑性好，耐压强度高等优势，且其独有的“橡塑二重性”的发现，开拓了广泛的应用领域，使得杜仲成为世界上适应范围最广的重要胶源植物。杜仲胶的开发不仅可改变我国天然橡胶长期进口的局面，还可为我国提供新的来源充足的后备胶种，并且还将改变国际天然橡胶资源分布的格局。因此，发展杜仲产业对于维护生态安全、保障国家食用油安全(杜仲油)、特别是改善国民身体素质具有重要意义，在大健康产业非常有应用前景。但是由于缺乏科技支撑，杜仲产业发展关键瓶颈问题未突破，出现了繁殖困难，“种苗荒”等问题，大大限制了杜仲产业的长远发展。

目前，在生产上，杜仲主要采用播种方式进行繁殖，但由于杜仲种子寿命较短，通常只有半年到一年时间；此外，由于种子含有杜仲胶，在利用种子进行繁育过程中需要在特定时间采种且需经特定处理来打破种子休眠。因此，利用种子进行育苗时存在繁育过程繁琐，繁育周期长且发芽率低等问题。同时，由于杜仲为雌雄异株，通常种植10年以上才能开花结果，且雌株比例约占5％，因此开展杜仲无性繁殖技术研究对杜仲优良株系的工厂化繁育及定向搭配雌雄比例具有重要意义。

目前，扦插、嫁接和压根等传统无性繁殖方式在杜仲繁殖方面虽有报道，但存在繁殖过程繁琐，繁殖受时间和季节限制，繁殖效率低等问题，例如，专利CN103583372A公开了一种杜仲离体快速繁殖的方法，利用植物离体培养技术，以杜仲离体培养的子叶、愈伤组织等多种外植体所形成的不定根为材料，经过诱导高效获得不定芽，生根后形成试管苗移栽大田获得无性繁殖系；专利CN102550304A公开了一种杜仲良种嫁接苗的快速繁育方法；专利CN109496576A公开了一种杜仲的繁殖方法，通过春季切接法或秋季带木质嵌芽接法嫁接；专利CN106105985A公开了一种杜仲扦插快速扩繁方法。利用植物组织培养技术对杜仲进行繁殖的研究虽有报道，但主要集中以种子实生苗为外植体来源，且存在污染严重、不定芽增殖效率低和成本高等问题，严重限制了杜仲良种的种质保存和规模化繁殖。因此，针对目前杜仲繁殖所存在的上述诸多问题，急需开发一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，以满足对杜仲优良株系的快速繁殖需求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于解决现有的杜仲繁殖方法存在繁殖周期长，且繁殖受季节和时间限制的问题。

本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题的：

一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，包括以下步骤：

(1)取材

以多年生具有优良农艺性状的杜仲当年生的带有一叶一芽的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中进行预处理一定时间后，捞出后备用；

(3)不定根的诱导处理

将步骤(2)中消毒后的茎段基部置于不定根诱导液中处理30s，其中，不定根诱导液为含有终浓度为300-500mg/L的硝普钠和800-1000μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；

(4)外植体的定植与不定根诱导培养

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，喷施不含有机元素的1/4WPM培养液后盖上育苗盘盖，于温室中进行不定根的诱导培养；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

光照培养7-10d后，给步骤(4)中定植的茎段喷施一定浓度的腋芽萌发诱导剂，喷施后盖上育苗盘盖，然后继续于温室中进行成苗培养；其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为2-10mg/L的TDZ、10-60mg/L 的KT和20-50μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液。

本发明采用的生根诱导剂处理茎段30s，7-10d即伴有不定根原基形成， 22d就可以获得完整的杜仲再生植株，比利用传统繁殖方法和利用组织培养技术对杜仲进行快繁的速度快，大大缩短了繁殖的周期；且本发明通过将微茎段扦插于装有营养基质的育苗盘中于温室内直接生根成苗，一方面避免了季节、地域等自然因素的影响和限制，另一方面也避免了杜仲组织培养繁育过程的繁琐及后续组培再生苗驯化移栽成活率低的缺陷。

优选地，所述步骤(1)中优良农艺性状包括高产、叶大、生长速度快、抗逆性强中一种或几种性状。

优选地，所述高产是指树皮或叶子含胶量高、种子产量高或种子含油量高。

优选地，所述步骤(1)中微茎段长度为2.0-3.0cm。

优选地，所述步骤(2)中低温等离子体活化水由大气压低温等离子体处理装置处理双蒸水2min得到。

优选地，所述大气压低温等离子体处理装置以空气作为进料气体，放电电压4kV。

优选地，所述步骤(2)中低温等离子体活化水预处理时间为2-6min。

优选地，所述步骤(4)中营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物。

优选地，所述步骤(4)中不定根的诱导培养条件为：温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为光照/黑暗＝14/10h、育苗盘的湿度控制在85-90％。

优选地，所述步骤(5)中成苗培养条件为：温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为光照/黑暗＝14/10h、育苗盘的湿度控制在85-90％。

本发明具有如下的有益效果：

1、本发明采用的生根诱导剂处理茎段30s，7-10d即伴有不定根原基形成，22d就可以获得完整的杜仲再生植株，比利用传统繁殖方法和利用组织培养技术对杜仲进行快繁的速度快，大大缩短了繁殖的周期；且本发明通过将微茎段扦插于装有营养基质的育苗盘中于温室内直接生根成苗，一方面避免了季节、地域等自然因素的影响和限制，另一方面也避免了杜仲组织培养繁育过程的繁琐及后续组培再生苗驯化移栽成活率低的缺陷。

2、本发明所用的外植体为具有优良农艺性状的杜仲当年生的带有一叶一芽的长2.0-3.0cm的杜仲微茎段，与传统的长8-16cm的扦插枝条相比，极大节约了种质材料，取材方便，材料丰富，且该枝条为具有旺盛的生长状态，易生根且不易腐烂。

3、本发明对微茎段进行简单的预处理，无需严格的无菌操作环境就可以达到表面消毒和促成苗的作用，在室外即可进行，不仅生产再生小苗成本低，而且操作方法简单，易于掌握；可使植株数量在较短时期内实现几何级倍增，适于杜仲的工厂化育苗。

附图说明

图1为本发明实施例2的定植于营养基质中的杜仲优良株系微茎段图；

图2为本发明实施例2的定植7d的杜仲茎段基部形态图；

图3为本发明实施例2的未经腋芽诱导剂处理的定植22d后的杜仲茎段图；

图4为本发明实施例2的经腋芽诱导剂处理的定植22d后的完整杜仲再生植株图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例和说明书附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例中未注明具体技术或条件者，均可以按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。

实施例1

一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，包括以下步骤：

(1)取材

分别于4月初到5月初，选取田间多年生具有优良农艺性状(具有高产、叶大、速生、抗逆性强中一种或几种性状)的杜仲当年生的带有一叶一芽的长2.0-3.0cm的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中处理 2min，捞出后备用；

(3)外植体不定根的诱导处理

将步骤(2)中预处理后的茎段基部置于不定根诱导液中处理30s，其中，不定根诱导液为含有终浓度为300mg/L的硝普钠和800μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；

(4)外植体的定植与不定根诱导培养

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，喷施不含有机元素的1/4WPM培养液后，盖上育苗盘，于温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为14/10h(光照/黑暗)的温室中进行不定根的诱导培养；营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物，育苗盘中的湿度为85-90％；光照培养10d后，外植体基部膨大，茎段不定根原基形成；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

给步骤(4)中定植的茎段喷施腋芽萌发诱导剂，其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为2mg/L的TDZ、10mg/L的KT和20μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；喷施后，盖上育苗盘盖子，继续于温室中进行成苗培养。

培养结果为：培养7d后，微茎段腋芽萌发；继续培养14d后，茎段基部产生3cm左右乳白色的不定根，平均每个外植体产生2.4条不定根；经测定，本实施例的茎段不定根诱导率仅为73.6％，主要是因为4月初到5 月初取材，由于茎段材料较嫩，易出现坏死的现象，这也就导致了较低的不定根诱导率和成苗率。

实施例2

一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，包括以下步骤：

(1)取材

分别于5月上旬到6月上旬，选取田间多年生具有优良农艺性状(具有高产、叶大、速生、抗逆性强中一种或几种性状)的杜仲当年生的带有一叶一芽的长2.0-3.0cm的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中处理 4min，捞出后备用；

(3)外植体不定根的诱导处理

将步骤(2)中消毒后的茎段基部置于不定根诱导液中处理30s，其中，不定根诱导液为含有终浓度为400mg/L的硝普钠和900μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；

(4)外植体的定植与不定根诱导管理

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，如图1所示，然后喷施不含有机元素的1/4WPM培养液后，盖上育苗盘，于温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为14/10h(光照/黑暗)的温室中进行不定根的诱导培养；营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物，育苗盘中的湿度为85-90％；光照培养 7d后，外植体基部膨大并形成不定根原基凸起，如图2所示；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

给步骤(4)中定植的茎段进行喷施或不喷施腋芽萌发诱导剂，其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为7.5mg/L的TDZ、40mg/L的 KT和30μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；喷施后，盖上育苗盘盖子，继续于温室中进行成苗培养。

研究发现，对于未喷施腋芽诱导剂的茎段而言，腋芽出现萌发缓慢甚至不萌发的现象，如图3所示，继续培养30d后腋芽萌发率也仅为8.4％；对于喷施腋芽诱导剂的茎段而已，继续于光下培养5d后，茎段腋芽就出现萌发的现象；继续培养10d后，茎段基部产生乳白色不定根，平均每个外植体产生4.3条不定根，不定根的长度为5.2cm，茎段不定根诱导率高达 98.7％，如图4所示。

此外，研究发现，5月上旬到6月上旬取材有利于杜仲茎段的成苗培养，不定根的诱导率和成苗率均较高。

实施例3

一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，包括以下步骤：

(1)取材

分别于6月下旬到7月下旬，选取田间多年生具有优良农艺性状(具有高产、叶大、速生、抗逆性强中一种或几种性状)的杜仲当年生的带有一叶一芽的长2.0-3.0cm的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中处理 6min，捞出后备用；

(3)外植体不定根的诱导处理

将步骤(2)中消毒后的茎段基部置于不定根诱导液中处理30s，其中，不定根诱导液为含有终浓度为500mg/L的硝普钠和1000μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；

(4)外植体的定植与不定根诱导管理

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，喷施不含有机元素的1/4WPM培养液后，盖上育苗盘，于温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为14/10h(光照/黑暗)的温室中进行不定根的诱导培养；营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物，育苗盘中的湿度为85-90％；光照培养7d后，茎段基部形成不定根原基凸起；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

给步骤(4)中定植的茎段喷施腋芽萌发诱导剂，其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为10mg/L的TDZ、60mg/L的KT和50μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；喷施后，盖上育苗盘盖子，继续于温室中进行成苗培养。

研究发现，喷施芽诱导液3d后腋芽萌发，且继续培养10d后，茎段基部产生乳白色不定根，平均每个外植体产生3.6条不定根，不定根长度为 4.0cm左右；茎段不定根诱导率高达81.4％。

此外，研究发现，6月下旬到7月下旬取材由于木质化程度的提高，不利于不定根的形成。

实施例4

本实施例测试了不同类型培养液对杜仲微茎段再生的影响，包括如下步骤：

(1)取材

于5月上旬，选取田间多年生具有优良农艺性状(具有高产、叶大、速生、抗逆性强中一种或几种性状)的杜仲当年生的带有一叶一芽的长 2.0-3.0cm的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中处理 4min，捞出后备用；

(3)外植体不定根的诱导处理

将步骤(2)中消毒后的茎段基部置于不定根诱导液中处理30s，其中，不定根诱导液的主要成分为含有终浓度为400mg/L的硝普钠和900μM的褪黑素；

(4)外植体的定植与不定根诱导管理

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物，然后喷施不含有机元素的不同类型培养液(其中，采用自来水做对照)后，盖上育苗盘，于温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为 14/10h(光照/黑暗)的温室中进行不定根的诱导培养；育苗盘中的湿度为 85-90％；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

光照培养7d后，给步骤(4)中定植的茎段进行喷施腋芽萌发诱导剂，其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为7.5mg/L的TDZ、40mg/L 的KT和30μM的褪黑素；喷施后，盖上育苗盘盖子，继续于温室中进行成苗培养。

研究结果如表1所示，研究结果表明，不同培养液类型对杜仲微茎段离体再生具有重要影响，其中，以不含有机元素的1/4WPM培养液处理的茎段获得的植株长势和不定根的诱导率最佳，1/4DKW培养液次之，而水溶液处理的效果最差。因此，不含有机元素的1/4WPM培养液为杜仲微茎段离体再生的最佳营养液。

表1为培养液类型对杜仲微茎段离体再生的影响

注：数据为平均值，每个处理包含120个外植体，每个处理重复三次。

实施例5

本实施例测试了不同不定根诱导剂成分对杜仲微茎段再生的影响，包括如下步骤：

(1)取材

于5月上旬，选取田间多年生具有优良农艺性状(具有高产、叶大、速生、抗逆性强中一种或几种性状)的杜仲当年生的带有一叶一芽的长 2.0-3.0cm的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中处理 4min，捞出后备用；

(3)外植体不定根的诱导处理

将步骤(2)中消毒后的茎段基部置于含有不同成分的不定根诱导液中处理30s；

(4)外植体的定植与不定根诱导管理

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，如图1所示，然后喷施不含有机元素的1/4WPM培养液后，盖上育苗盘，于温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为14/10h(光照/黑暗)的温室中进行不定根的诱导培养；营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物，育苗盘中的湿度为85-90％；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

光照培养7d后，给步骤(4)中定植的茎段进行喷施腋芽萌发诱导剂，其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为7.5mg/L的TDZ、40mg/L 的KT和30μM的褪黑素；喷施后，盖上育苗盘盖子，继续于温室中进行成苗培养。

研究结果如表2所示，研究结果表明，生根诱导液成分对杜仲微茎段不定根的形成具有重要影响，其中，以400mg/L的硝普钠与900μM褪黑素结合使用，不定根诱导率最高。

表2生根诱导液成分对杜仲茎段不定根诱导率的影响。

注：数据为平均值，每个处理包含120个外植体，每个处理重复三次。

综上，本发明采用的生根诱导剂处理茎段30s，7-10d即伴有不定根原基形成，22d就可以获得完整的杜仲再生植株，比利用传统繁殖方法和利用组织培养技术对杜仲进行快繁的速度快，大大缩短了繁殖的周期；且本发明通过将微茎段扦插于装有营养基质的育苗盘中于温室内直接生根成苗，一方面避免了季节、地域等自然因素的影响和限制，另一方面也避免了杜仲组织培养繁育过程的繁琐及后续组培再生苗驯化移栽成活率低的缺陷。

本发明严格优化并控制不定根诱导液的种类和浓度，使其成为杜仲不定根诱导的最佳浓度；严格优化取材时间，使植株生长状态最佳；且本发明的预处理液、不定根诱导液、腋芽萌发诱导液以及营养基质等的种类和浓度选择也严格与杜仲生长过程中所需的必要元素相配合，同时避免有害元素的引入。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取材

以多年生具有优良农艺性状的杜仲当年生的带有一叶一芽的健壮微茎段为外植体；

(2)外植体的预处理

将步骤(1)中的茎段经流水冲洗后，浸于低温等离子体活化水中进行预处理一定时间后，捞出后备用；

(3)不定根的诱导处理

将步骤(2)中消毒后的茎段基部置于不定根诱导液中处理30s，其中，不定根诱导液为含有终浓度为300-500mg/L的硝普钠和800-1000μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液；

(4)外植体的定植与不定根诱导培养

将步骤(3)中经过不定根诱导液处理后的茎段定植于装有营养基质的育苗盘中，喷施不含有机元素的1/4WPM培养液后盖上育苗盘盖，于温室中进行不定根的诱导培养；

(5)外植体腋芽的萌发诱导和成苗培养

光照培养7-10d后，给步骤(4)中定植的茎段喷施一定浓度的腋芽萌发诱导剂，喷施后盖上育苗盘盖，然后继续于温室中进行成苗培养；其中，腋芽萌发诱导剂的主要成分为含有终浓度为2-10mg/L的TDZ、10-60mg/L的KT和20-50μM的褪黑素且不含有机元素的1/4WPM溶液。

2.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(1)中优良农艺性状包括具有高产、叶大、生长速度快、抗逆性强中一种或几种性状。

3.根据权利要求2所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述高产是指树皮或叶子含胶量高、种子产量高或种子含油量高。

4.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(1)中微茎段长度为2.0-3.0cm。

5.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(2)中低温等离子体活化水由大气压低温等离子体处理装置处理双蒸水2min得到。

6.根据权利要求5所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述大气压低温等离子体处理装置以空气作为进料气体，放电电压4kV。

7.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(2)中低温等离子体活化水预处理时间为2-6min。

8.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(4)中营养基质为质量比为品冠营养土：蛭石：珍珠岩＝5:2:2的混合物。

9.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(4)中不定根的诱导培养条件为：温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为光照/黑暗＝14/10h、育苗盘的湿度控制在85-90％。

10.根据权利要求1所述的一种杜仲优良种苗低成本快速微繁的方法，其特征在于：所述步骤(5)中成苗培养条件为：温度为22±2℃、光照强度为2200-2500lx、光周期为光照/黑暗＝14/10h、育苗盘的湿度控制在85-90％。

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