CN113057988A - 一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法。属于中医药技术领域。按重量份包括原料：黄芩2～4份、乌梅2～4份、连翘1～2份、千里光2～4份和石榴皮1～3份。本发明可有效用于由创伤弧菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌、美人鱼发光杆菌和荧光假单胞菌等引起的细菌性疾病的预防和治疗；药物成分属天然中草药，符合食品安全要求，增强鱼类的适口性，且对鱼类无毒副作用，可减少和替代抗生素的使用，使用方法简便，用量小、成本低，可用于目前的鱼类养殖生产，提高养殖成活率和产品品质。

Description

一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法

技术领域

本发明涉及中医药技术领域，更具体的说是涉及一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法。

背景技术

半滑舌鳎以其肉味鲜美、生长速度快、个体大和经济价值高等优点，已经成为我国南北方沿海重要的养殖品种之一。

但是随着养殖产业的无序扩大和养殖环境的不断恶化，加之半滑舌鳎的水底集群习性而导致其病害频发。疾病发生后，养殖者盲目使用抗生素的现象普遍存在，以致药残、食品安全等问题接踵而来。药残事件报道不断对整个养殖业产生巨大的负面影响。

经对养殖半滑舌鳎进行系统的流行病学研究，发现有几种明显的疾病症状。其中体表溃疡病、肠炎病、腹水病和烂鳍烂尾病等细菌性疾病发病率高、传播速度快和致死率高，给养殖者及养殖企业造成重大的经济损失，其致病菌被证实为创伤弧菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌和美人鱼发光杆菌等。

目前主要的防治方法主要以抗生素和化学药物为主，主要通过药浴和拌饲投喂为主，一方面病原菌极易产生耐药性，治疗周期长和成本高等特点，另外也会导致药物残留产生，最终对消费者的身体健康产生负面影响。

中草药具有来源广泛，且具有抗病毒、抗细菌和提高机体免疫等功效，且具有天然性、毒副作用小和无抗药性等优点，且具有疗效显著、提高免疫和节约成本等特点。

现有资料显示尚未公开有半滑舌鳎抗多种细菌性疾病的复方中草药。因此，如何提供一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法，能够治疗半滑舌鳎如哈维氏弧菌、鳗弧菌、创伤弧菌、荧光假单胞菌和美人鱼发光杆菌引起的常见细菌性疾病，并对这些细菌性疾病具良好的预防效果。可显著提高养殖半滑舌鳎的存活率，保障养殖生产的稳定性和可持续性。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药，由以下重量份的原料构成：黄芩2～4份、乌梅2～4份、连翘1～2份、千里光2～4份和石榴皮1～3份。

优选的：由以下重量份的原料构成：黄芩2份、乌梅3份、连翘1份、千里光2份和石榴皮1份。

各组分的有益效果在于：

黄芩功效：别名山茶根、黄芩茶、小黄芩等。性寒，味苦。归肺经、胆经、脾经、大肠经、小肠经。含黄酮类化合物，是黄芩的有效成分，还含少量甾醇和氨基酸。黄酮类化合物主要有黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素粗毛豚草素等，另黏毛黄芩素、二氢木蝴蝶素A等。黄芩具有较广的抗菌谱，体外试验，对杆菌、球菌有抑制作用，对流感病毒、皮肤真菌亦有作用，临床用于治疗病毒性眼病及上呼吸道感染有较好疗效。动物试验表明，水煎剂具有抗炎、免疫促进和镇静解热作用；提取物有抑制HIV-1生长的作用。具有抗微生物、抗变态反应、降血压、利尿、降血脂、抗血小板聚集和抗凝、保肝、保护肾损伤的作用；低剂量促进免疫细胞增殖，高剂量则抑制；延缓白内障发生。清热燥湿、泻火解毒、止血，属清热药下属分类的清热燥湿药。

乌梅功效：别名梅实、熏梅、桔梅肉等。性平，味酸、涩。归肝经、脾经、肺经、大肠经。含有72种挥发油成分、有机酸、氨基酸及多糖。另含苹果酸、5-羟甲基-2-糠醛、延胡索酸、亚油酸等成分。药理实验证明，能使胆囊收缩，促进胆汁分泌，并有抗蛋白过敏作用；对多种致病菌有抗菌作用，对各种皮肤真菌亦有抑制作用；有驱蛔虫的作用；有抗疲劳、抗衰老、抗辐射、拮抗钙离子、增强免疫功能等作用敛肺、涩肠、生津、安蛔。属收涩药分类下的敛肺涩肠药。

连翘功效：别名落翘、黄花条、黄链条花等。性微寒，味苦。归肺经、心经、小肠经。含木脂素类、黄酮类、挥发性成分、苯乙烷类、乙基环己醇类、三萜类及香豆素类等化合物。还有桦木酸、连翘苷、牛蒡子苷、罗汉松脂苷、松脂素、连翘醇苷C、连翘醇苷D等。抗微生物；抑制磷酸二酯酶、脂氧酶作用；镇吐；抗肝损伤；抗炎；抑制弹性蛋白酶活性；降低自发性高血压等。清热解毒、消肿散结。属清热药下属分类的清热解毒药。

千里光功效：别名九里明、千里急、眼明草、九龙光、百花草等。性寒，味苦。归肝经、肺经。主要含千里光宁碱、千里光菲林碱、羽扇烯酮、齐墩果烷、β-谷固醇、胡萝卜苷、生物碱、对羟基苯乙酸、金丝桃苷、蒙花苷、齐墩果醇、槲皮素、消旋丁香脂素、大黄素、绿原酸、咖啡酸等成分。千里光煎剂具有抗菌、抑制钩端螺旋体生长、抗滴虫等作用，毒性小，煎剂灌服不能测出小鼠的半数致死量，对人阴道滴虫有一定的抑制作用，尤其对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、志贺痢疾杆菌、鲍氏痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌抗菌作用相当强。其所含酚酸对流感杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌、卡他球菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌等均有抑菌作用。清热解毒、凉血消肿、清肝明目、杀虫止痛。属清热药下分类的清热解毒药。

石榴皮功效：别名：石榴壳、安石榴酸实壳、酸石榴皮、酸榴皮、西榴皮。性味：味酸、涩、性温。具有涩肠止泻，止血，驱虫之功效。可以保创口免受刺激，石榴皮含有多种被称为鞣质的多元酚类化合物，这种化合物能够沉淀创口表面的蛋白质，从而防止创口的感染与刺激，对于创面的愈合有很好的促进作用。石榴的果皮水煎剂具有明显的抑菌作用，对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、霍乱弧菌、痢疾杆菌均有效果，对于痢疾杆菌、大肠杆菌有较好的抑制作用。石榴皮煎剂还能抑制流感病毒。另外有收敛功能，能使肠黏膜收敛。

优选的：复方中草药的剂型为汤剂。

本发明还提供了一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药的制备方法，包括以下步骤：

(1)按权利要求1或2称取原料，将原料和水混合浸泡；

(2)取浸泡后的原料，加水进行第1次熬制，收集药液；药渣加水进行第2次熬制，合并2次药液即得一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药。

进一步的：步骤(1)原料和水质量比为1:20～40。

有益效果为：熬制一次药液可以保证3个月不变质。

优选的：步骤(1)浸泡的时间为2～4h。

优选的：步骤(2)原料和水的质量比为1:20～40；药渣和水的质量比为1:10～20；两次熬制的时间均为1～2h。

本发明用药主要依据：中草药成分复杂，含有多种天然生物活性物质和营养物质，能够促进鱼类机体代谢、蛋白质和酶合成，促进生长，提高营养物质的利用率。凉血止血、抗菌消炎、抗病毒、抗寄生虫以及提高机体免疫和抗应激作用。其中，黄芩、乌梅、连翘、千里光、石榴皮具有较广的抗菌谱，体外试验证实对病原细菌均有抑制作用，对流感病毒、皮肤真菌亦有作用，动物试验表明，水煎剂具有抗菌、抗炎、免疫促进和清热解热作用，另外乌梅和石榴皮还具有收敛作用，能够使肠黏膜收敛。原料药中含有各种氨基酸、矿物质和维生素，能够进入鱼体消化道，完善饲料营养，提高饲料转化效率，促进鱼体生长。组方中药物来源于天然植物，在人医理论和实践中已经广泛应用，诸药相合，可以联合抗菌消炎、促进食欲、提高鱼体免疫力和抗病能力，加速生长等作用。

并且，本发明依据传统中医理论，结合鱼类生理学和免疫学的理论知识组合而成，并在实验室进行了半滑舌鳎病原细菌抑杀效果研究和大量的实际应用证明，有效控制由于细菌引起的半滑舌鳎死亡。

原料上，中草药来源广泛，价格低，同时本发明中草药生成工艺非常简单，适合药浴和拌饲投喂使用。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法，取得的技术效果：

1、本发明可做到“一剂多效”，同时治疗体表溃疡病、肠炎病、腹水病和烂鳍烂尾病等多种细菌性疾病；有效用于由创伤弧菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌、美人鱼发光杆菌和荧光假单胞菌等细菌性疾病的预防和治疗；

2、本发明属于纯中草药制剂，绿色环保、无残留，可减少和替代抗生素的使用，对提高水产品质量具有重要作用；药物成分属天然中草药，符合食品安全要求，增强鱼类的适口性，且对鱼类无毒副作用；

3、本发明对半滑舌鳎苗期和成鱼期均可使用，治愈率可达80％以上，预防和治疗效果显著；

4、本发明使用方便、用量小、成本低、对环境无污染、易于推广使用；可用于目前的鱼类养殖生产，提高养殖成活率和产品品质。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例公开了一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药及其制备方法。

实施例中原料来源均为市售渠道获得，未提及的步骤为常规生产试验步骤，在此不再赘述。

原料和配比筛选：

本发明针对半滑舌鳎的常见致病菌，如创伤弧菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌、荧光假单胞菌和美人鱼发光杆菌。

将黄蜀葵黄、金银花、佩兰、小茴香、青蒿、黄柏、穿心莲、紫花地丁、豆蔻、甘草、香叶、路边青、金荞麦、芦竹根、薄荷、裸花紫珠、紫苏叶、柴胡、竹叶柴胡、灯台叶、马边草、百蕊草、蒲公英、黄芩、千里光、买麻藤、地胆草、乌梅、连翘和石榴皮30种中草药与上述(市售)致病菌进行药物敏感性测定试验，初选抑菌效果良好的单方中草药。

通过单方筛选出对半滑舌鳎主要致病菌有较好抑菌效果且符合配伍要求的5种单方中草药：分别是黄芩、乌梅、连翘、千里光、石榴皮。

实施例1：

一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的中药组合物，由以下重量份数的原料配制而成：黄芪4份，乌梅2份，连翘2份，千里光4份，石榴皮2份。

为进一步优化技术方案：复方中草药的剂型为汤剂。

制备方法，包括以下步骤：

(1)称取原料，将原料和水混合浸泡；

(2)取浸泡后的原料，加水进行第1次熬制，收集药液；药渣加水进行第2次熬制，合并2次药液即得一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药。

为进一步优化技术方案：步骤(1)原料和水质量比为1:20。

为进一步优化技术方案：步骤(1)浸泡的时间为2h。

为进一步优化技术方案：步骤(2)原料和水的质量比为1:20；药渣和水的质量比为1:10；两次熬制的时间均为1h。

实施例2

一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的中药组合物，由以下重量份数的原料配制而成：黄芪2份，乌梅3份，连翘1份，千里光2份，石榴皮3份。

为进一步优化技术方案：复方中草药的剂型为汤剂。

制备方法，包括以下步骤：

(1)称取原料，将原料和水混合浸泡；

(2)取浸泡后的原料，加水进行第1次熬制，收集药液；药渣加水进行第2次熬制，合并2次药液即得一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药。

为进一步优化技术方案：步骤(1)原料和水质量比为1:30。

为进一步优化技术方案：步骤(1)浸泡的时间为3h。

为进一步优化技术方案：步骤(2)原料和水的质量比为1:30；药渣和水的质量比为1:15；两次熬制的时间均为1.5h。

实施例3

一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的中药组合物，由以下重量份数的原料配制而成：黄芪3份，乌梅4份，连翘1份，千里光3份，石榴皮1份。

为进一步优化技术方案：复方中草药的剂型为汤剂。

制备方法，包括以下步骤：

(1)称取原料，将原料和水混合浸泡；

(2)取浸泡后的原料，加水进行第1次熬制，收集药液；药渣加水进行第2次熬制，合并2次药液即得一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药。

为进一步优化技术方案：步骤(1)原料和水质量比为1:40。

为进一步优化技术方案：步骤(1)浸泡的时间为4h。

为进一步优化技术方案：步骤(2)原料和水的质量比为1:40；药渣和水的质量比为1:20；两次熬制的时间均为2h。

实验效果：

根据中药配伍原则进行中草药配比，得到体外抑菌配伍，实施例1～3对上述5种半滑舌鳎主要致病菌均有明显的抑制作用(其中，实施例2不同稀释浓度抑菌效果参见表1)。

表1体外抑菌试验

实施例2(复方中草药原药液)浓度调配为1g/mL，1/4、1/8……分别代表药液稀释4倍、8倍，“—”代表无菌生长；“+”表示有菌生长。

经重复实验，实施例1～3的抑菌效果无明显差异。

对比试验：采用牛津杯打孔法，将分离于患病半滑舌鳎的创伤弧菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌和美人鱼发光杆菌分别涂布在打孔平板上，在孔内加入1g/mL本发明中草药组方制成的液体，加满不溢出，在28℃培养24h测定抑菌圈直径，与传统的盐酸土霉素(5mg/mL)进行比较，具体判定标准为抑菌直径≥20mm为极度敏感；15～20mm为高度敏感；10～15mm为中度敏感；10mm不敏感。本发明中草药药物敏感性对比试验见表2。

表2药物敏感性对比试验结果(单位mm)

药物类别	创伤弧菌	鳗弧菌	哈维氏弧菌	美人鱼发光杆菌
					盐酸土霉素	17±0.5	17±0.3	16±0.5	18±0.3
本发明中草药复方	21±0.5	24±0.5	21±0.5	22±1.0

毒性试验：试验分为对照组和试验组(实施例1)，每组3个重复，每个重复5尾健康半滑舌鳎，正常饲养，试验组半滑舌鳎在200ppm的海水复方药液中饲养，经过96小时药浴毒性试验，肉眼观察生理状态良好，对照组和试验组均无死亡，也没有出现中毒现象，说明该中草药复方药液安全。

应用实施例1对河北地区3个不同养殖场患病大菱鲆进行了预防和治疗的临床试验，效果良好(参见表3)。

表3临床试验

结果表明：本发明制备步骤简单，用药易于操作(采用水煎方法进行)。经过临床试验证实：以2％(20g/kg)拌饲投喂能够达到良好的预防效果，可以有效减少半滑舌鳎细菌性疾病的发生。而治疗半滑舌鳎细菌病时，通过25ppm药浴并结合2％拌饲投喂的方法，治愈率能够达到80％以上(最高100％，无死亡)，通过几个养殖场的临床观察效果显著。对半滑舌鳎的体表溃疡病、肠炎病、腹水病和烂鳍烂尾病等细菌性疾病均具有良好的防治效果，能够实现“一剂多效”，对于减少抗生素和化学药物的使用，提高产品品质，保证养殖可持续绿色健康发展，使用方法简便、成本低、效果良好，易于推广使用。

实施例4

生产中具体使用方法：

预防用药方法：将实施例1～3制备得到的复方中草药按照20g/kg的剂量进行饲料混合添加，包括：准确计算饲料用量，然后称取相应剂量的中草药复方，用粘合剂包裹颗粒饲料表面后投喂，每日2次，连续7天；有条件的可以每月进行一个疗程。

治疗用药方法：将实施例1～3制备得到的复方中草药按照25ppm进行药浴，每天1次，每次6小时(药浴时间要求在6小时以上)，连用7～10天。同时按照20g/kg此复方中草药伴饲投药，连续10天。

本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (6)

1.一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药，其特征在于，由以下重量份包括原料构成：黄芩2～4份、乌梅2～4份、连翘1～2份、千里光2～4份和石榴皮1～3份。

2.根据权利要求1所述的一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药，其特征在于，由以下重量份原料构成：黄芩2份、乌梅3份、连翘1份、千里光2份和石榴皮1份。

3.如权利要求1或2所述的一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药，其特征在于，所述复方中草药的剂型为汤剂。

4.权利要求3所述的一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按权利要求1或2称取原料，将原料和水混合浸泡；

(2)取浸泡后的原料，加水进行第1次熬制，收集药液；药渣加水进行第2次熬制，合并2次药液即得一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药。

5.如权利要求4所述的一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述浸泡的时间为2～4h。

6.如权利要求4所述的一种防治半滑舌鳎细菌性疾病的复方中草药的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述原料和水的质量比为1:20～40；所述药渣和水的质量比为1:10～20；两次熬制的时间均为1～2h。