CN113049691A - 一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法 - Google Patents
一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113049691A CN113049691A CN202011481694.7A CN202011481694A CN113049691A CN 113049691 A CN113049691 A CN 113049691A CN 202011481694 A CN202011481694 A CN 202011481694A CN 113049691 A CN113049691 A CN 113049691A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pretreatment
- column
- filtering
- diquat
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000005630 Diquat Substances 0.000 title claims abstract description 27
- SYJFEGQWDCRVNX-UHFFFAOYSA-N diquat Chemical compound C1=CC=[N+]2CC[N+]3=CC=CC=C3C2=C1 SYJFEGQWDCRVNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 26
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims abstract description 13
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 59
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000012799 strong cation exchange Methods 0.000 claims abstract description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 23
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 21
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims description 18
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims description 18
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims description 18
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 claims description 12
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 claims description 12
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 10
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 240000004160 Capsicum annuum Species 0.000 claims description 6
- 235000017784 Mespilus germanica Nutrition 0.000 claims description 6
- 244000182216 Mimusops elengi Species 0.000 claims description 6
- 235000000560 Mimusops elengi Nutrition 0.000 claims description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 235000007837 Vangueria infausta Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims description 6
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000002234 Allium sativum Species 0.000 claims description 5
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 5
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000004611 garlic Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 5
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 5
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 5
- 235000008534 Capsicum annuum var annuum Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 claims description 4
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 claims description 4
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 4
- 239000001511 capsicum annuum Substances 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 claims description 4
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 4
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 abstract description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 7
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 2
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 2
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 2
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 description 2
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- ODPOAESBSUKMHD-UHFFFAOYSA-L 6,7-dihydrodipyrido[1,2-b:1',2'-e]pyrazine-5,8-diium;dibromide Chemical compound [Br-].[Br-].C1=CC=[N+]2CC[N+]3=CC=CC=C3C2=C1 ODPOAESBSUKMHD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 241001464837 Viridiplantae Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- -1 cationic organic compound Chemical class 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 235000021022 fresh fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005360 mashing Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
Landscapes
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Library & Information Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明属于食品检测技术领域,具体涉及一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法,针对不同基质分别采用不同前处理方式,前处理方法更全面,适用性更强,操作更有针对性;采用硫酸回流法处理高糖高蛋白的复杂样品,采用强阳离子交换柱净化,有效去除高糖、高蛋白等基质中的干扰物,降低基质效应,提高上机响应,准确定性定量;采用酸提取净化法处理简单基质,简化前处理流程,极大的提高了简单基质的处理效率,采用直接提取法中不再使用固相萃取柱净化,大大降低了成本。本发明还采用了现有技术中未使用的反相色谱柱液相方法,利用AQ色谱柱,色谱峰稳定,响应较高,解决了敌草快在反相色谱柱上无保留的问题。
Description
技术领域
本发明属于食品检测技术领域,具体涉及一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法。
背景技术
敌草快是一种应用广泛的水生杂草除草剂,可迅速被绿色植物组织吸收,与土壤接触后很快失去活性。近年来,敌草快作为百草枯的替代品大量出现在市场上,对人体的伤害也非常大,敌草快为碱性阳离子有机化合物,在低pH范围下(pH≤3)已完全电离,成为高度溶剂化、纸质化的阳离子,几乎不能被憎水性的反相柱保留,由于和残留的硅羟基的二级相互作用色谱峰严重拖尾,所以这类化合物是反相液相色谱法的一个难题。因此,建立一种灵敏、快速、高效、可靠定性定量检测方法是十分重要的。
目前,在敌草快的测定方法中,主要采用两种标准方法,SN/T 0293-2014标准适用于大米、大豆、小麦、苹果、香蕉等基质,甲醇-盐酸溶液匀浆提取,经弱酸性阳离子交换固相萃取柱净化后,采用Hilic色谱柱,用甲酸水-乙腈体系作为流动相,用液相色谱串联质谱测试,外标法定量。GB/T 5009.221-2008仅适用于玉米和大麦基质,95%乙醇提取敌草快,与硼氢化钠反应后,用三氯甲烷萃取,除去三氯甲烷,以正己烷定容,采用HP-5MS柱,气相色谱-质谱检测器测定,外标法定量。但是这两个标准中针对的基质范围均太窄,并且在实验操作过程中存在问题。GB/T 5009.221-2008由于标准品和样品都需要衍生化,且步骤多而繁琐,实际操作中很难控制实验过程的稳定性,对于方法的定性以及定量都带来很大的难度。SN/T 0293-2014,在实际应用中,对于复杂基质,如脱水蒜粒、葡萄干、枸杞、辣椒粉等干物和含糖量较高的基质结果不理想,干扰强,无法准确定量。
上述现有标准的前处理方法,无法测试含糖量高、含蛋白高的复杂基质样品,例如枸杞、葡萄干、脱水蔬菜、辣椒、蛋白粉等干扰严重,质控差,无法定性定量。而针对简单基质,例如果汁、油、液态奶等,也同样需要衍生、反复萃取(GB/T 5009.221-2008:1次衍生,2次抽滤、2次旋蒸、多次萃取、2次反萃)以及匀浆、过柱净化(SN/T 0293-2014:匀浆提取2次,调pH后过柱净化)的复杂流程,操作繁琐。另外,现有技术还没有使用反相色谱柱的液相进行测定的方法。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术中存在的上述问题,提出了一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法,采用一种全新的前处理方法和仪器方法测定食品中敌草快的残留量。采用本发明方法,测试基质不受限制,针对粮谷类、含糖量较高基质等复杂基质以及新鲜水果、蔬菜等简单基质都有不同的前处理方式。解决了现有标准中方法抗干扰性差,质控差,无法准确定性和定量的问题,同时节省了人员操作时间。该方法也有效的解决了敌草快在反相液相色谱上无保留的问题,使测试方法可以准确定性定量,更加快捷、灵敏,提高了检测效率。
本发明的技术方案是:
一种食品中敌草快的前处理方法,适于食品类各种基质,基质适用范围不受限制,包括以下三种操作方法:
方法一,硫酸回流法,对高含糖量、高蛋白等复杂基质利用硫酸回流法可以显著降低干扰物,可准确定性定量;其具体步骤包括:
(1)向样品中加入25%硫酸溶液,混匀,加热100℃回流2.5~3.5h;待冷却后合并回流溶液并过滤;(2)取一定体积滤液,用1mol/L碳酸钠溶液调pH值至6~7,9000r/min离心2~4min;(3)过强阳离子交换柱净化,先进行柱活化,上样后采用水和甲醇依次淋洗,真空抽干,再加入1mol/L乙酸铵的25%乙腈溶液,真空抽干进行洗脱;(4)涡旋混匀后用10mmol/L乙酸铵溶液稀释1倍,过滤,待检测;
上述为全新的前处理方式,采用硫酸回流法,强阳离子交换柱净化,可以有效的去除高糖、高蛋白等复杂基质中的干扰物,降低基质效用,提高上机检测响应,可以准确定性定量,提高实验质量。
方法二,酸提取净化法,其具体步骤包括:
(a)向样品中加入含2%甲酸的50%甲醇溶液,振荡一段时间,4℃条件下9000r/min离心2~4min,取上清液过滤,待净化;
(b)过强阳离子交换柱净化,先进行柱活化,上样后采用水和甲醇依次淋洗,真空抽干,再加入1mol/L乙酸铵的25%乙腈溶液,真空抽干进行洗脱;
(c)涡旋混匀后用10mmol/L乙酸铵溶液稀释5倍,过滤,待检测;
方法三,直接提取法,针对简单基质,简化前处理流程,可提高检测效率;其具体步骤包括:向样品中加入含2%甲酸的50%甲醇溶液,振荡一段时间,4℃条件下9000r/min离心2~4min,取上清液过0.22μm滤膜,待检测。直接提取法通过简化前处理流程,极大的提高了简单基质的处理效率,并且不再使用固相萃取柱净化,大大降低了成本。
上述几种前处理方法中,仅需要10mL含2%甲酸的50%甲醇震荡提取,极大节省了人力,节省了耗材成本,提高产出率。
所述方法一步骤(1)中回流时间为3h;采用玻纤滤纸过滤;步骤(2)中离心时间为3min;步骤(3)中上样前的柱活化采用甲醇和水依次淋洗;步骤(4)中采用0.22μm尼龙滤膜过滤。
所述方法二步骤(a)中振荡时间为25~35min;离心时间为3min;采用0.45μm尼龙滤膜过滤;步骤(b)中上样前的柱活化采用甲醇和水依次淋洗;步骤(c)中采用0.22μm尼龙滤膜过滤。
所述方法三中振荡时间为25~35min;离心时间为3min;所述滤膜为0.22μm尼龙滤膜。
该前处理方法的基质适用范围更广,除了标准中涉及的基质,其他高糖高蛋白等复杂基质同样适用,适用于如下所列出的复杂基质及简单基质。
所述方法一适用于含糖量较高的样品或粉末样品,包括脱水蒜粒、葡萄干、枸杞、辣椒粉、坚果、紫薯粉、茶叶、蛋白粉、糖浆。
所述方法二适用于包括蔬菜、水果、浓缩果汁或奶粉类的样品前处理。
所述方法三适用于包括食用油、葡萄酒、澄清果汁类的样品前处理。
一种包括上述前处理方法的食品中敌草快残留量检测方法。
所述检测方法还包括将待测样品溶液进行高效液相色谱串联质谱法检测的步骤;
其中液相色谱的条件为:色谱柱:Agilent SB-Aq 1.8μm size 3.0×100mm或性能相当者;流动相A:0.1%甲酸-250mmoL/L乙酸铵水,流动相B:乙腈,柱温30℃,进样量10μL,流速为0.4mL/min,梯度洗脱程序见下表:
洗脱时间(min) | A(%):0.1%甲酸-250mmoL/L乙酸铵水 | B(%):乙腈 |
1.0 | 90% | 10% |
2.0 | 80% | 20% |
3.5 | 10% | 90% |
4.5 | 10% | 90% |
4.6 | 30% | 70% |
6.0 | 30% | 70% |
其中质谱的条件如下表所示:
本发明的有益效果:
(1)本发明提出三种不同的前处理方式,针对各类基质都有相应的处理方法,方法更全面,适用性更强,操作更有针对性,对于不同基质可以分别选择不同的前处理方法,一是避免因选择方法不当而返工,二是去除了衍生后反复萃取的繁琐操作,极大提高了产出效率。
(2)本发明采用硫酸回流的方法处理复杂基质,采用强阳离子交换柱净化,可以有效去除高糖、高蛋白等基质中的干扰物,降低基质效应,提高上机响应,可以准确定性定量;采用直接提取法,通过简化前处理流程,极大的提高了简单基质的处理效率,直提法中不再使用固相萃取柱净化,大大降低了成本。
(3)现有技术还没有使用反相色谱柱的液相方法,本发明在此方向上进行突破,利用AQ色谱柱,0.1%甲酸-250mmoL/L乙酸铵水-乙腈体系作为流动相,色谱峰稳定,响应较高,解决了敌草快在反相色谱柱上无保留的问题。
附图说明
图1为敌草快标准品溶液(浓度为10μg/L)谱图;
图2为辣椒粉基质样品谱图;
图3为辣椒粉基质添加样品(添加浓度为10μg/kg)谱图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
为了进一步理解本发明,将结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
采用硫酸回流法对高糖、高蛋白样品进行前处理,具体步骤如下:
(1)将脱水蒜粒、葡萄干、枸杞、辣椒粉、坚果、紫薯粉、茶叶、蛋白粉、糖浆等样品切碎或捣碎后,称取4g样品于250mL平底烧瓶中,加入40mL 25%硫酸溶液,混匀,加热100℃回流3h;
(2)待烧瓶冷却至室温,用100mL水冲洗回流管,合并溶液后用玻纤滤纸过滤;
(3)取5mL滤液,用1mol/L碳酸钠溶液调pH值至6~7,9000r/min离心3min;待净化;
(4)采用5mL甲醇和5mL水依次淋洗活化强阳离子交换柱,将上述待净化的溶液全部转移至已活化的强阳离子交换柱中,依次采用10mL水和5mL甲醇淋洗,真空抽干;再准确加入2mL含1mol/L乙酸铵的25%乙腈溶液,真空抽干进行洗脱;
(5)将上述得到的样品溶液经涡旋混匀后,用10mmol/L乙酸铵溶液稀释1倍,过0.22μm尼龙滤膜,待用LCMSMS分析。
实施例2
采用酸提取净化法对蔬菜、水果、浓缩果汁、奶粉类样品进行前处理,具体步骤如下:
(1)称取2g样品于50mL离心管中,加入10mL含2%甲酸的50%甲醇溶液,振荡30min;4℃下9000r/min离心3min,取上清液过0.45μm尼龙滤膜,待净化;
(2)采用5mL甲醇和5mL水依次淋洗活化强阳离子交换柱,将上述待净化的溶液全部转移至已活化的强阳离子交换柱中,依次采用10mL水和5mL甲醇淋洗,真空抽干;再准确加入2mL含1mol/L乙酸铵的25%乙腈溶液,真空抽干进行洗脱;
(3)将上述得到的样品溶液经涡旋混匀后,用10mmol/L乙酸铵溶液稀释5倍,过0.22μm尼龙滤膜,待用LCMSMS分析。
实施例3
采用直接提取法对食用油、葡萄酒、澄清果汁类样品进行前处理,具体步骤如下:
称取2g样品于50mL离心管中,加入10mL含2%甲酸的50%甲醇溶液,振荡30min;4℃下9000r/min离心3min,取上清液过0.45μm尼龙滤膜,待上机测试。
实施例4
将上述实施例1、2、3中经过前处理的待测试样品溶液进行检测,采用高效液相色谱串联质谱法检测,液相色谱条件设置如下:
色谱柱:Agilent SB-Aq 1.8μm size 3.0×100mm或性能相当者;
柱温:30℃;
进样量:10μL;
流速:0.4mL/min;
流动相A为:0.1%甲酸-250mmoL/L乙酸铵水;
流动相B为:乙腈;
梯度洗脱程序为:
质谱条件设置为:离子源:ES,正离子模式;毛细管电压:3.0kv;喷嘴电压:0v;干燥气温度:300℃;干燥气流速:8L/min;雾化气压力:40psi;鞘流气温度:350℃;鞘流气流速:11L/min;检测器增益电压:300v。
敌草快标准溶液的配制:
(1)敌草快标准储备液(1000μg/mL):准确称量敌草快的标准品10.0mg(精确到0.01mg),用50%甲醇水溶液分别定容至10mL,配成浓度分别为1000μg/mL的储备液。(该溶液于-18℃以下条件下储存,有效期12个月。)
(2)标准中间液(10μg/mL):准确移取敌草快标准储备液100μL,用50%甲醇水分别定容至10mL,配成浓度分别为10μg/mL的中间标准溶液。(该溶液于-18℃以下℃条件下储存,有效期3个月。)
(3)I级标准工作液(1μg/mL):准确量取敌草快标准中间液100μL,用2%甲酸的50%甲醇水溶液定容至1mL,配成浓度为1μg/mL的I级标准混合工作溶液。(该溶液于0-4℃条件下储存,有效期1个周。)
(4)II级标准工作液(0.1μg/mL):准确量取100μL敌草快I级标准混合工作液,用2%甲酸的50%甲醇水溶液定容至1mL,配成浓度为0.1μg/mL的II级标准工作溶液。(现用现配。)
(5)标准工作曲线:用10mmol/L乙酸铵溶液稀释II级标准工作液配制5点工作曲线(现用现配),具体见下表:
结果的计算和表达:
按如下公式计算样品中目标物残留量,计算结果需扣除空白值。
式中:
X----样品中待测组分残留量,μg/kg;
C----待测组分标准工作液的浓度,μg/L;
A----样液中待测组分的峰面积;
V----样液最终定容体积,mL;
As----标准品溶液中待测组分的峰面积;
W----称样量,g。
对部分基质进行加标回收试验验证,经试验结果表明,方法一硫酸回流法对脱水蒜粒、葡萄干、枸杞、辣椒粉、坚果、紫薯粉、茶叶、蛋白粉、糖浆等高糖高蛋白含量的样品在10ug/kg~100ug/kg添加范围内的添加回收率范围为60%~110%;方法二酸提取净化法对新鲜蔬菜、水果、浓缩果汁、奶粉类等样品在10ug/kg~100ug/kg添加范围内的添加回收率范围为60%~110%;方法三直接提取法对食用油、葡萄酒、澄清果汁类样品在10ug/kg~100ug/kg添加范围内的添加回收率范围为80%~120%。
上述说明仅为本发明的优选实施例,并非是对本发明的限制,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改型等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种食品中敌草快的前处理方法,其特征在于,包括以下三种操作方法:
方法一,硫酸回流法,其具体步骤包括:
(1)向样品中加入25%硫酸溶液,混匀,加热100℃回流2.5~3.5h;待冷却后合并回流溶液并过滤;(2)取一定体积滤液,用1mol/L碳酸钠溶液调pH值至6~7,9000r/min离心2~4min;(3)过强阳离子交换柱净化,先进行柱活化,上样后采用水和甲醇依次淋洗,真空抽干,再加入1mol/L乙酸铵的25%乙腈溶液,真空抽干进行洗脱;(4)涡旋混匀后用10mmol/L乙酸铵溶液稀释1倍,过滤,待检测;
方法二,酸提取净化法,其具体步骤包括:
(a)向样品中加入含2%甲酸的50%甲醇溶液,振荡一段时间,4℃条件下9000r/min离心2~4min,取上清液过滤,待净化;
(b)过强阳离子交换柱净化,先进行柱活化,上样后采用水和甲醇依次淋洗,真空抽干,再加入1mol/L乙酸铵的25%乙腈溶液,真空抽干进行洗脱;
(c)涡旋混匀后用10mmol/L乙酸铵溶液稀释5倍,过滤,待检测;
方法三,直接提取法:其具体步骤包括:
向样品中加入含2%甲酸的50%甲醇溶液,振荡一段时间,4℃条件下9000r/min离心2~4min,取上清液过0.22μm滤膜,待检测。
2.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述方法一步骤(1)中回流时间为3h;采用玻纤滤纸过滤;步骤(2)中离心时间为3min;步骤(3)中上样前的柱活化采用甲醇和水依次淋洗;步骤(4)中采用0.22μm尼龙滤膜过滤。
3.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述方法二步骤(a)中振荡时间为25~35min;离心时间为3min;采用0.45μm尼龙滤膜过滤;步骤(b)中上样前的柱活化采用甲醇和水依次淋洗;步骤(c)中采用0.22μm尼龙滤膜过滤。
4.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述方法三中振荡时间为25~35min;离心时间为3min;所述滤膜为0.22μm尼龙滤膜。
5.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述方法一适用于含糖量较高、高蛋白的样品或粉末样品,包括脱水蒜粒、葡萄干、枸杞、辣椒粉、坚果、紫薯粉、茶叶、蛋白粉、糖浆。
6.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述方法二适用于包括蔬菜、水果、浓缩果汁或奶粉类的样品前处理。
7.根据权利要求1所述的前处理方法,其特征在于,所述方法三适用于包括食用油、葡萄酒、澄清果汁类的样品前处理。
8.一种包括如权利要求1-7所述前处理方法的食品中敌草快残留量检测方法。
9.根据权利要求8所述的食品中敌草快残留量检测方法,其特征在于,所述检测方法还包括将待测样品溶液进行高效液相色谱串联质谱法检测的步骤;
其中设置液相色谱的条件为:色谱柱:Agilent SB-Aq 1.8μm size 3.0×100mm或性能相当者;流动相A:0.1%甲酸-250mmoL/L乙酸铵水,流动相B:乙腈,柱温30℃,进样量10μL,流速为0.4mL/min,梯度洗脱;
其中设置质谱的条件为:离子源:ES,正离子模式;毛细管电压:3.0kv;干燥气温度:300℃;干燥气流速:8L/min;雾化气压力:40psi;鞘流气温度:350℃;鞘流气流速:11L/min;检测器增益电压:300v。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011481694.7A CN113049691A (zh) | 2020-12-15 | 2020-12-15 | 一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011481694.7A CN113049691A (zh) | 2020-12-15 | 2020-12-15 | 一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113049691A true CN113049691A (zh) | 2021-06-29 |
Family
ID=76507937
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202011481694.7A Pending CN113049691A (zh) | 2020-12-15 | 2020-12-15 | 一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113049691A (zh) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109100450A (zh) * | 2018-11-22 | 2018-12-28 | 烟台杰科检测服务有限公司 | 一种食品中敌草快和百草枯残留量的快速检测方法 |
EP3466510A1 (en) * | 2017-10-05 | 2019-04-10 | NofaLab B.V. | Method for detecting pesticides in food products |
CN110779995A (zh) * | 2019-10-18 | 2020-02-11 | 石家庄君乐宝乳业有限公司 | 一种检测乳制品中残留农药含量的方法 |
CN111289658A (zh) * | 2020-04-03 | 2020-06-16 | 济南爱新卓尔医学检验有限公司 | 一种检测血液样品中百草枯和/或敌草快的方法和试剂盒 |
-
2020
- 2020-12-15 CN CN202011481694.7A patent/CN113049691A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3466510A1 (en) * | 2017-10-05 | 2019-04-10 | NofaLab B.V. | Method for detecting pesticides in food products |
CN109100450A (zh) * | 2018-11-22 | 2018-12-28 | 烟台杰科检测服务有限公司 | 一种食品中敌草快和百草枯残留量的快速检测方法 |
CN110779995A (zh) * | 2019-10-18 | 2020-02-11 | 石家庄君乐宝乳业有限公司 | 一种检测乳制品中残留农药含量的方法 |
CN111289658A (zh) * | 2020-04-03 | 2020-06-16 | 济南爱新卓尔医学检验有限公司 | 一种检测血液样品中百草枯和/或敌草快的方法和试剂盒 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
朱光艳等: "敌草快和百草枯在马铃薯中残留检测方法", 《农药科学与管理》 * |
李捷等: "超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定茶叶中敌草快和百草枯残留", 《分析试验室》 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN114137134B (zh) | 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱分离硒形态的方法 | |
Bedassa et al. | Salting-out assisted liquid-liquid extraction for the determination of multiresidue pesticides in alcoholic beverages by high performance liquid chromatography | |
Joe Jr et al. | Determination of urethane in wines by gas-liquid chromatography and its confirmation by mass spectrometry | |
CN105259266B (zh) | 检测啤酒和麦汁中的四种麦香类风味物质的方法 | |
CN114397260A (zh) | 六堡茶中茶褐素含量的测定方法 | |
CN106908539B (zh) | 一种土壤和植物中1-羟基苯并三唑的检测方法 | |
CN113049691A (zh) | 一种食品中敌草快的前处理方法及残留量检测方法 | |
CN109900825B (zh) | 玉米在散粮集装箱运输过程中产生的霉菌毒素的分离检测方法 | |
CN112649523A (zh) | 一种检测食品中稻曲菌素a或稻曲菌素b的方法 | |
CN116953142A (zh) | 茶叶中花青素的液相色谱质谱联用检测方法 | |
CN110749670B (zh) | 一种在线检测植物样品中褪黑素的方法 | |
CN112255327B (zh) | 乳制品中草铵膦含量的检测方法 | |
CN108680689A (zh) | 一种测定食品中爱德万甜的方法 | |
CN113533608A (zh) | 一种低成本的适合于大批量食用油样品中黄曲霉毒素快速检测的方法 | |
CN114460204B (zh) | 同时检测植物源性食品中环螨酯和烯虫炔酯农残的方法 | |
CN116359367B (zh) | 一种同位素内标高效液相色谱串联质谱法检测食品中γ-氨基丁酸的方法 | |
CN117214327B (zh) | 一种蜂蜜中正己醇、正庚醇和雪松醇的检测方法及其应用 | |
CN114076793B (zh) | 基于电感耦合等离子体质谱法测定食品中碘含量的方法 | |
CN116297956B (zh) | 一种评价酸性香原料在不同圆周卷烟释放转移行为的方法 | |
CN115754071B (zh) | 高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法 | |
CN118191202A (zh) | 一种蜂蜜中正己酸的检测方法及其应用 | |
CN114371229A (zh) | 干酪中氨基甲酸乙酯检测方法 | |
CN109298087B (zh) | 一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法 | |
CN117907480A (zh) | 一种水果中6种人工甜味剂的液相色谱-串联质谱检测方法 | |
CN106721926A (zh) | 辐照降解赭曲霉毒素的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210629 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |