CN113045794A - 一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法，分散剂、阻聚剂和水混合并加热，搅拌至完全溶解制备成水相；单体、致孔剂和引发剂混合均匀作为油相；将油相加入水相中静置，待油相和水相完全分层后调整搅拌转速控制粒径大小，然后进行升温保温反应；反应结束后提取出树脂内部的致孔剂，然后水洗烘干，制得干白球；将制备的干白球加入二氯乙烷中溶胀，然后加入催化剂进行反应，反应结束后在体系中加入自来水，通过水和二氯乙烷共沸回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，得到黄色不透明大孔吸附树脂成品。本发明具有生产成本低、易于放大、绿色环保、低能耗的特点，在绿原酸提取中具有吸附量大、解吸率高的优势。

Description

一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法

技术领域

本发明属于化工、医药技术领域，具体涉及一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法。

背景技术

绿原酸又名咖啡单宁酸，是由咖啡酸和奎尼酸组成的缩酚酸，分子式为C₁₆H₁₈O₉，分子量354.30，是一种重要的生物活性物质，具有保肝利胆、抗病毒、抗菌、降血压、降血脂、抗肿瘤以及兴奋中枢神经系统等诸多药理作用，在医疗、保健品领域、日用化工以及食品行业具有广泛应用。绿原酸在大多数植物中普遍存在，但具有高含量绿原酸的植物并不多见。研究表明杜仲叶中绿原酸含量最为丰富，其含量大约在1％～5％，而在我国杜仲林广泛种植，每年杜仲叶的产量高达上百万吨，这为绿原酸的提取提供了充足的原料基础。

从杜仲叶中提取绿原酸的相关研究报道已久，相对成熟的方法有溶剂提取法、酶解法、超临界流体萃取法、微波辅助法等，但此类方法均存在提取率不高、产品纯度低、有机溶剂用量大、能源消耗大等问题，严重制约了杜仲叶产业的发展。随着提取工艺的不断完善和改进，又出现诸如高速逆流色谱法、大孔树脂提取法以及膜技术分离法等对绿原酸进行提取，提取效果有了一定的提升。其中，高速逆流色谱法得到的绿原酸纯度较高，但是直接用提取物分离，上样量少，得到的绿原酸成品太少，这在一定程度上限制了其在工业上的应用；膜分离法在使用过程中膜污染严重，降低了膜的使用年限，使用成本大幅增加。对比而言，大孔吸附树脂法由于吸附分离效果好、操作简单、树脂可再生、重复利用性好等诸多优点在绿原酸提取方面被广泛应用。

现有一种方法是采用大孔吸附树脂从杜仲叶中分离绿原酸粗品，将绿原酸提取液经预处理后直接上大孔吸附树脂柱进行吸附和解吸，解决绿原酸因浓缩在水中长时间受热不稳定导致分解的问题，同时可通过控制洗脱液的浓度生产20％～60％各种规格的粗品，但是并没有提到所用大孔吸附树脂的合成过程。还有一种是将超滤膜、纳滤膜技术和大孔吸附树脂纯化技术相结合，提供了一种提取、分离、纯化杜仲叶中绿原酸的新方法，该方法工艺简便，所用树脂能再生利用，不产生污染，但是并没有给出大孔吸附树脂的具体合成方法，仅仅提供了一种提取绿原酸的方法。还有一种是采用大孔吸附树脂对绿原酸吸附，乙醇解吸，离子交换树脂对解吸液进行脱色精制，从而制备出具有高纯度的绿原酸产品。但是对提取所用的大孔吸附树脂的合成方法并未论述。综上，大孔吸附树脂在绿原酸提取方面已较为成熟，但是提取绿原酸所用的大孔吸附树脂合成方法报道较少。

虽然大孔吸附树脂在绿原酸提取过程中已广泛应用，但是大孔吸附树脂在在使用过程中由于强度低所产生的碎球引起的运行周期缩短，提取效果差以及大孔吸附树脂生产成本高等问题一直存在。因此，发明一种具有强度高、生产成本低并且对绿原酸具有高吸附量和高解吸率的大孔吸附树脂合成方法势在必行。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法，解决现有大孔吸附树脂生产成本高、生产过程中有机溶剂排放量大以及在绿原酸提取中吸附量小和解吸率低的问题。

本发明采用以下技术方案：

一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂的合成方法，包括以下步骤：

S1、分散剂、阻聚剂和水混合并加热，搅拌至完全溶解制备成水相；单体、致孔剂和引发剂混合均匀作为油相；将油相加入水相中静置，待油相和水相完全分层后调整搅拌转速控制粒径大小，然后进行升温保温反应；反应结束后提取出树脂内部的致孔剂，然后水洗烘干，制得干白球；

S2、将步骤S1制备的干白球加入二氯乙烷中溶胀，然后加入催化剂进行反应，反应结束后在体系中加入自来水，通过水和二氯乙烷共沸回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，得到黄色不透明大孔吸附树脂成品。

具体的，步骤S1中，自来水、分散剂和阻聚剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(1～5)。

进一步的，分散剂为明胶，阻聚剂为浓度0.1％的次甲基蓝溶液。

具体的，步骤S1中，单体、引发剂和致孔剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(100～250)。

进一步的，单体包括二乙烯苯和苯乙烯、乙基苯乙烯、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯腈等其中一种或几种；引发剂包括氧化苯甲酰、偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈、过氧化环己酮中的一种或多种；致孔剂包括饱和烃、甲苯、二甲苯、四甲苯中的任意一种或几种组成的致孔剂。

具体的，步骤S1中，油相加入水相中静置5～10分钟，待油相和水相完全分层后控制油相粒径0.285～1.0mm，然后升温至80～95℃，反应8～12小时。

具体的，步骤S2中，干白球在二氯乙烷中溶胀的时间为2～4h，然后分两次加入催化剂，反应8～12h。

进一步的，干白球和二氯乙烷的质量体积比为1：(5～8)。

进一步的，干白球和催化剂的质量比为1：(0.1～0.3)，催化剂为无水三氯化铝或无水三氯化铁。

本发明的另一技术方案是，一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂。

与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：

本发明一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂的合成方法，通过悬浮聚合的方法一方面在合成过程中能够对混合致孔剂分别进行回收，回收的致孔剂可直接用于下一批次树脂的合成；另一方面在致孔剂的提取过程中，采用水蒸气提取代替有机溶剂提取这一工艺环节，减少有机溶剂污染。通过该方法制备的大孔吸附树脂不仅成本低，制备过程绿色环保，同时对绿原酸具有选择性好、吸附量大以及解吸率高等优势。

进一步的，自来水、分散剂和阻聚剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(1～5)，在该范围内，一方面分散剂能够降低水的表面张力，使单体更容易分散成小液珠，另一方面，分散剂吸附在液珠的表面，保护液珠在彼此碰撞时不致于粘结。而阻聚剂主要是防止单体在水中发乳液聚合。

进一步的，分散剂为明胶，阻聚剂为浓度0.1％的次甲基蓝溶液。明胶对单体能起到很好的分散作用，使单体更容易分散成球，同时从成本方面来说价格相比其他分散剂更便宜一点；而次甲基蓝作为一种水溶性阻聚剂，少量的次甲基蓝一方面能够防止单体在水中发生乳液聚合，另一方面也能通过氧化还原反应消除水中溶解的氧，缩短聚合的诱导期。

进一步的，步骤S1中，单体、引发剂和致孔剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(100～250)。引发剂量太大，会引起单体发生爆聚，量太少单体发生自由基聚合反应速度太慢；致孔剂的量太少，无法起到致孔的效果，量太多树脂孔径太大，达不到吸附绿原酸的效果。因此，在以上比例范围内，经过调控各组分的比例就能够制备出对绿原酸具有高吸附性能的大孔吸附树脂。

进一步的，单体包括二乙烯苯和苯乙烯、乙基苯乙烯、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯腈等其中一种或几种；引发剂包括氧化苯甲酰、偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈、过氧化环己酮中的一种或多种；致孔剂包括饱和烃、甲苯、二甲苯、四甲苯中的任意一种或几种组成的致孔剂。采用以上单体、引发剂和致孔剂，通过调整三者之间的比例均能制备出具有特定孔道结构、极性基团以及比表面积的大孔吸附树脂。

进一步的，步骤S1中，油相加入水相中静置5～10分钟，待油相和水相完全分层后控制油相粒径为0.285～1.0mm，然后升温至80～95℃，反应8～12小时。静置5～10分钟是为了保证油相和水相完全分层，有利于后期控制树脂的粒径。目前市售的大孔吸附树脂，其粒度大多控制在0.315～1.25mm之间，而在后期还要经过二次交联，树脂还会发生一定的膨胀，因此，油相粒径控制在0.285～1.0mm之间。反应温度80～95℃，反应时间8～12小时，当温度在80℃左右时，引发剂能够引发单体发生自由基聚合反应，而随着自由基聚合反应的发生，会产生较大的聚合热，体系温度过高会使单体发生爆聚，温度较低单体自由基聚合反应速度太慢。最后升温至95℃，在此温度下确保树脂完全定型。

进一步的，干白球在二氯乙烷中溶胀的时间为2～4h，然后再分两次加入催化剂，反应8～12h。白球在二氯乙烷中的溶胀时间不能少于2小时，时间太少白球在二氯乙烷中不能完全溶胀，影响二次交联反应程度，进而影响树脂性能；溶胀时间太长，会使树脂强度降低，不利于树脂的实际应用。催化剂分两次加入一方面能够使反应稳定进行。另一方面能够使白球上面的悬挂双键更加彻底的参与反应，增加交联程度。

进一步的，干白球和二氯乙烷的质量体积比为1：(5～8)。干白球和二氯乙烷的质量体积比主要以能保证二氯乙烷对白球能够完全溶胀，加入二氯乙烷的量太少，无法使干白球充分溶胀，加入量太多造成二氯乙烷的浪费。

进一步的，干白球和催化剂的质量比为1：(0.1～0.3)，催化剂为无水三氯化铝或无水三氯化铁。溶胀结束后，室温条件下先加入一半量的催化剂，以5℃/10min升温至80±1℃反应3～5h，然后降温至75℃以下，加入剩余一半量的催化剂，升温在80±1℃继续反应6～8h。催化剂的量加入太低，无法引起白球内部发生二次交联反应，加入量太多反应太剧烈，对树脂的性能产生一定的影响，另一方面催化剂的量太大也导致合成成本增加；而催化剂分两次加入一方面能够使反应稳定进行。另一方面能够使白球上面的官能团更加彻底的发生反应，增加交联程度。

综上所述，本发明具有生产成本低、易于放大、绿色环保、低能耗的特点，在绿原酸提取中具有吸附量大、解吸率高的优势。

下面通过实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

应当理解，当在本说明书和所附权利要求书中使用时，术语“包括”和“包含”指示所描述特征、整体、步骤、操作、元素和/或组件的存在，但并不排除一个或多个其它特征、整体、步骤、操作、元素、组件和/或其集合的存在或添加。

还应当理解，在本发明说明书中所使用的术语仅仅是出于描述特定实施例的目的而并不意在限制本发明。如在本发明说明书和所附权利要求书中所使用的那样，除非上下文清楚地指明其它情况，否则单数形式的“一”、“一个”及“该”意在包括复数形式。

还应当进一步理解，在本发明说明书和所附权利要求书中使用的术语“和/或”是指相关联列出的项中的一个或多个的任何组合以及所有可能组合，并且包括这些组合。

本发明提供了一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法，通过悬浮聚合的方法发明一种合成成本低、绿色环保、易于放大生产以及对绿原酸具有高吸附量和高解吸率的大孔吸附树脂的合成方法，不仅能够实现大孔吸附树脂的绿色、环保生产，同时也能实现对绿原酸的高效提取。

本发明一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法，包括以下步骤：

S1、白球合成

S101、在反应釜中加入明胶、0.1％次甲基蓝溶液和水并加热，搅拌至明胶完全溶解制备成水相；单体、致孔剂和引发剂混合均匀作为油相；

自来水、明胶和0.1％的次甲基蓝溶液的质量比为100：(0.5～1.5)：(1～5)。

单体、引发剂和致孔剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(100～250)。

单体包括二乙烯苯和苯乙烯、乙基苯乙烯、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯腈等其中一种或几种。

引发剂包括氧化苯甲酰、偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈、过氧化环己酮中的一种或多种。

致孔剂包括饱和烃、甲苯、二甲苯、四甲苯中的任意一种或几种组成的致孔剂。

S102、将油相加入到配好的水相反应釜中，静置5～10分钟，待油相和水相完全分层后调整搅拌转速控制粒径大小，油相粒径控制在0.285～1.0mm，粒径合适后匀速搅拌，然后升温至80～95℃，反应8～12小时；

S103、反应结束后提取出树脂内部的致孔剂，然后水洗烘干。

S2、傅-克烷基化反应

S201、将步骤S1中所制备的干白球加入到反应釜中，并加入二氯乙烷溶胀，干白球和二氯乙烷的质量体积比为1：(5～8)，溶胀2～4h后，分两次加入催化剂在80℃反应8～12h，干白球和催化剂的质量比为1：(0.1～0.3)，催化剂为无水三氯化铝或无水三氯化铁；

S202、反应结束后在体系中加入自来水，通过水和二氯乙烷共沸回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性出料，即得到成品大孔吸附树脂。

采用本发明方法能够合成一种生产成本低、绿色环保、易于放大生产、机械强度高以及对绿原酸具有良好提取效果的大孔吸附树脂。

本发明所合成的大孔吸附树脂比表面积在1000m²/g以上，孔容为1.95～2.23ml/g，平均孔径为

磨后圆球率90％以上，相比市售的用于绿原酸提取大孔吸附树脂，具有较大的比表面积和较高的强度。

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处所示的本发明实施例的组件可以通过各种不同的配置来布置和设计。因此，以下对提供的本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法

将含有90g二乙烯苯(含量80％)、10g丙烯酸甲酯，25g异构十二烷，175g甲苯以及1.5g过氧化苯甲酰的油相混合物加入到由500ml自来水、7.5g明胶以及5g0.1％的次甲基蓝溶液组成的水相溶液中，静置10分钟，待油相和水相完全分层后，调整搅拌速度控制油相粒径在0.285～1.0mm之间，然后保持匀速搅拌并缓慢升温至80℃反应3小时，90℃反应3小时，此时有甲苯流出要单独收集，95℃反应6小时。反应结束后用热水将白球冲洗除去残留的明胶，然后加入到水蒸气提取器中，在100℃下进行蒸汽提取回收剩余致孔剂甲苯和异构十二烷，提取至出口冷凝液中几乎不含油状物，停止提取，最后降温出料。蒸汽提取回收的致孔剂经气相色谱法可检测出反应过程中剩余的甲苯，其含量为21.5％，经计算甲苯和异构十二烷的回收率分别为为95.4％和93.8％。将提取完的白球在105℃下干燥4小时，烘干至水分含量≤2％。

称取50g干白球，加入250ml二氯乙烷，室温下搅拌溶胀4小时，然后加入2.5g无水三氯化铝，以5℃/10min升温至80℃反应4小时，然后将温度降至75℃以下，再加入2.5g无水三氯化铝，升温至80℃继续反应7小时。反应结束后在体系中加入自来水，加热至水和二氯乙烷共沸，回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，最后得黄色不透明大孔吸附树脂。

实施例2

一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法

将含有95g二乙烯苯(含量80％)、5g丙烯腈、100g四甲苯以及0.5g过氧化苯甲酰的油相混合物加入到由500m自来水、2.5g明胶以及25g0.1％的次甲基蓝溶液组成的水相溶液中，静置5分钟，待油相和水相完全分层后，调整搅拌速度控制油相粒径在0.285～1.0mm之间，然后保持匀速搅拌并缓慢升温至80℃反应2小时，90℃反应2小时，95℃反应6小时。反应结束后用热水将白球进行冲洗，然后加入到水蒸气提取器中，在95℃下进行蒸汽提取回收致孔剂四甲苯，提取至出口冷凝液中几乎不含油状物，停止提取，最后降温出料。四甲苯的回收率为95.3％。将提取完的白球在105℃下干燥4小时，烘干至水分含量≤2％。

称取50g干白球，加入350ml回收的二氯乙烷，室温下搅拌溶胀2小时，然后加入5g无水三氯化铝，以5℃/10min升温至80℃下反应3小时，然后将温度降至75℃以下，再加入5g无水三氯化铝，升温至80℃继续反应8小时。反应结束后在体系中加入自来水，加热至水和二氯乙烷共沸，回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，最后得黄色不透明大孔吸附树脂。

实施例3

一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法

将含有90g二乙烯苯(含量80％)、10g丙烯酸乙酯、180g甲苯和70g正癸烷以及1.0g过氧化苯甲酰的油相混合物加入到由500ml自来水、5.0g明胶以及15g0.1％的次甲基蓝溶液组成的水相溶液中，静置8分钟，待油相和水相完全分层后，调整搅拌速度控制油相粒径在0.285～1.0mm之间，然后保持匀速搅拌并缓慢升温至80℃反应2小时，90℃反应2小时，此时回收甲苯，95℃反应4小时。反应结束后用热水将白球进行冲洗，然后加入到水蒸气提取器中，在105℃下进行蒸汽提取回收剩余致孔剂甲苯和正癸烷，提取至出口冷凝液中几乎不含油状物，停止提取，最后降温出料。蒸汽提取回收的致孔剂经气相色谱法可检测出反应过程中剩余的甲苯，其含量为25.6％，经计算甲苯和正癸烷的回收率分别为为97.9％和93.2％。将提取完的白球在105℃下干燥4小时，烘干至水分含量≤2％。

称取50g干白球，加入400ml二氯乙烷，室温下搅拌溶胀3小时，然后加入7.5g无水三氯化铁，以5℃/10min升温至80℃下反应5小时，然后将温度降至75℃以下，再加入7.5g无水三氯化铁，升温至80℃继续反应6小时。反应结束后在体系中加入自来水，加热升温至水和二氯乙烷共沸，回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，最后得黄色不透明大孔吸附树脂。

实施例4

一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法

将含有90g二乙烯苯(含量80％)、10g丙烯酸甲酯，回收的甲苯和异构十二烷根据检测含量按比例加25g异构十二烷，175g甲苯以及1.5g过氧化苯甲酰的油相混合物加入到由500ml自来水、7.5g明胶以及5g0.1％的次甲基蓝溶液组成的水相溶液中，静置10分钟，待油相和水相完全分层后，调整搅拌速度控制油相粒径在0.285～1.0mm之间，然后保持匀速搅拌并缓慢升温至80℃反应3小时，90℃反应3小时，此时有甲苯流出要单独收集，95℃反应6小时。反应结束后用热水将白球进行冲洗出去残留的明胶，然后加入到水蒸气提取器中，在100℃下进行蒸汽提取回收剩余致孔剂甲苯和异构十二烷，提取至出口冷凝液中几乎不含油状物，停止提取，最后降温出料，蒸汽提取回收的致孔剂经气相色谱法可检测出反应过程中剩余的甲苯，其含量为23.5％，经计算甲苯和异构十二烷的回收率分别为为94.3％和92.6％。将提取完的白球在105℃下干燥4小时，烘干至水分含量≤2％。

称取50g干白球，加入250ml二氯乙烷，室温下搅拌溶胀4小时，然后加入2.5g无水三氯化铝，以5℃/10min升温至80℃下反应4小时，然后将温度降至75℃以下，再加入2.5g无水三氯化铝，升温至80℃继续反应7小时。反应结束后在体系中加入自来水，加热至水和二氯乙烷共沸，回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，最后得黄色不透明大孔吸附树脂。

表1为通过以上实施例合成的大孔吸附树脂的各项性能指标以及目前市售的其中一种用于绿原酸提取的大孔吸附树脂各性能对比。

表1大孔吸附树脂性能参数

从表中看出，本发明实施例所制备的大孔吸附树脂比表面积都在1000m²/g以上，强度较高，用KQ-3颗粒强度仪检测达到7N以上，磨后圆球率依据GB/12598-2001检测达到90％以上，本发明中四个实施例的比表面积均比市售用于绿原酸提取的LX-207大孔吸附树脂的比表面积大，能够为绿原酸提供更多的吸附位点，这样有助于提高其对绿原酸的吸附量，并且树脂强度较高，能够保证在实际使用过程中不容易出现碎球。

同时，采用回收的致孔剂经气相色谱法检测后作为新的致孔剂合成大孔吸附树脂，各项性能与实施例1中的大孔吸附树脂性能基本接近。

为了进一步验证以上实施例中各树脂对绿原酸的提取效果，下面将通过具体应用实施例实验进行验证。

应用实验实施例

1、提取：取250g烘干后的杜仲叶粉末，在60℃下纯水提取三次，每次3h，每次用水量为2000ml，pH4.0，最后合并三次提取液；

2、絮凝：取壳聚糖2.5g，用1％的醋酸水溶液配制成2％的壳聚糖水溶液，在40℃下加入提取液中，搅拌均匀后絮凝24h；

3、预处理：将絮凝后的提取液用20μm的滤膜过滤，收集过滤液；

4、吸附：将上述实施例1、实施例2、实施例3和实施例4所制备的大孔吸附树脂和市售的绿原酸提取用树脂LX-207各取50ml湿树脂装入树脂柱中，先用4BV的乙醇以2BV/h的流速对树脂进行预处理，然后用纯水洗至无醇味；将绿原酸提取液以1BV/h通过树脂柱进行吸附，待树脂柱流出液有绿原酸泄漏时停止吸附；

5、水洗：用0.5BV的水以2.0BV/h的流速对树脂柱进行冲洗，除去未吸附上去的绿原酸；

6、解吸：用浓度为50％的乙醇水溶液对吸附饱和的树脂柱进行解吸，解吸流速为0.5BV/h，收集解吸液；

7、再生：用3BV甲醇再生树脂，流速为0.5BV/h，再用纯水清洗至树脂出口流出液无乙醇味，待用。

将再生后的大孔吸附树脂进行下一周期吸附实验，重复三个周期，并对最后收集的过柱液中绿原酸含量测试，结果如表2所示。

表2：绿原酸动态吸附解吸实验

从结果中看出，本发明四个实施例中合成的大孔吸附树脂对发酵原液中绿原酸的吸附量均在5mg/ml以上，解吸率在90％以上，且经过三个周期的循环使用，大孔吸附树脂对绿原酸的提取效果均保持稳定。同时，采用回收的致孔剂合成的大孔吸附树脂对绿原酸也具有相同的提取效果。相比而言，市售的大孔吸附树脂LX-207对绿原酸的吸附量、解吸率均低于本发明方法所合成的大孔吸附树脂，并且经过三个周期的吸附实验，对绿原酸的提取效果也逐渐下降。

通过以上应用实验证明，采用本发明方法所制备的大孔吸附树脂对绿原酸具有良好的吸附和解吸效果，并且树脂合成过程具有致孔剂可回收、成本低、树脂强度高、易于放大、绿色环保、能耗低等优势。

综上所述，本发明一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法，合成成本低，在制备过程中回收的致孔剂可直接用于下一批次树脂的合成；合成过程绿色环保，不产生有机污染物；此外，树脂还带有弱极性官能团，对带有极性官能团物质可选择性吸附；采用该方法制备的大孔吸附树脂对绿原酸具有高吸附量和高解吸率，能够实现对绿原酸的高效提取和产业化生产。

以上内容仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明权利要求书的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、分散剂、阻聚剂和水混合并加热，搅拌至完全溶解制备成水相；单体、致孔剂和引发剂混合均匀作为油相；将油相加入水相中静置，待油相和水相完全分层后调整搅拌转速控制粒径大小，然后进行升温保温反应；反应结束后提取出树脂内部的致孔剂，然后水洗烘干，制得干白球；

S2、将步骤S1制备的干白球加入二氯乙烷中溶胀，然后加入催化剂进行反应，反应结束后在体系中加入自来水，通过水和二氯乙烷共沸回收二氯乙烷，然后将树脂水洗至中性，得到黄色不透明大孔吸附树脂成品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，自来水、分散剂和阻聚剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(1～5)。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，分散剂为明胶，阻聚剂为浓度0.1％的次甲基蓝溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，单体、引发剂和致孔剂的质量比为100：(0.5～1.5)：(100～250)。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，单体包括二乙烯苯和苯乙烯、乙基苯乙烯、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯腈等其中一种或几种；引发剂包括氧化苯甲酰、偶氮二异丁腈、偶氮二异戊腈、过氧化环己酮中的一种或多种；致孔剂包括饱和烃、甲苯、二甲苯、四甲苯中的任意一种或几种组成的致孔剂。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，油相加入水相中静置5～10分钟，待油相和水相完全分层后控制油相粒径0.285～1.0mm，然后升温至80～95℃，反应8～12小时。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2中，干白球在二氯乙烷中溶胀的时间为2～4h，然后分两次加入催化剂，反应8～12h。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，干白球和二氯乙烷的质量体积比为1：(5～8)。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，干白球和催化剂的质量比为1：(0.1～0.3)，催化剂为无水三氯化铝或无水三氯化铁。

10.根据权利要求1所述方法合成的从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂。