CN113045717A - 一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医用生物材料技术领域，具体公开了一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶‑丝素蛋白水凝胶及其制备方法和应用。本发明的水凝胶包括以下材料：甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂，所述水凝胶中，甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂的质量比为(100～150):(100～150):(0.5～1)。本发明制备的水凝胶不仅具有稳定的流变性，缓慢的生物降解性，较佳的机械性能，还可以持续释放生长因子(持续释放速率达14天)，显著促进脂肪干细胞增殖的性能，包裹在水凝胶中的脂肪干细胞具有较高的存活时间，可以在水凝胶内部连续增殖。
Description
技术领域
本发明涉及医用生物材料技术领域，尤其是涉及一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶及其制备方法和应用。
背景技术
消瘦的老年患者常因长时间瘫痪卧床而出现压疮，压疮的出现通常是由于长期缺乏脂肪组织保护的压力所致。臀部压疮在患者中更为常见。压疮不仅给患者带来了沉重的经济负担，而且加剧了他们的身体疼痛，甚至引起了危及生命的并发症。随着人口老龄化，压疮的发病率逐年增加。压疮的有效治疗方式是目前尚待解决的难题。目前，较传统的治疗方法是在术后固定并用纱布和棉垫包扎。但是，术后护理的不便之处不容忽视。压疮需要患者每2小时翻身一次。但是，手术部位和周围组织之间的相对运动会导致绷带松动，失去固定并影响伤口愈合。因此，制备具有高机械性能和良好生物相容性的伤口敷料仍然是压疮伤口的迫切临床需求。
压疮是一种慢性伤口，仅使用单一材料来治疗慢性伤口是不够的。先前的研究报道伤口愈合可以分为四个阶段：止血，炎症，增殖和重塑。在伤口愈合的增殖和重塑阶段，血管化尤其重要，因为血管在伤口愈合的过程中提供了充足的养分，加速了代谢废物的交换，并增强了细胞的黏附，迁移和存活率。据报道，脂肪干细胞(ADSCs)可以通过增加血管密度来促进组织修复。负载水凝胶的ADSCs可以促进受损组织中血管内皮生长因子(VEGF)和其他细胞因子的释放。细胞因子影响巨噬细胞和内皮祖细胞的增殖和分化，可以促进神经和胶原的再生。
此外，先前的研究表明，富含血小板的血浆(PRP)在伤口愈合中起着重要作用，不仅可以止血，而且还包含许多蛋白质和生长因子。PRP是从血液中分离出来的，具有大量的多种生长因子，例如血小板衍生生长因子(PDGF)，血管内皮生长因子(VEGF)，转化生长因子-β(TGF-β)和表皮生长因子(EGF)，等等，这些都有助于伤口修复。但是，目前的PRP管理方法有几个缺点，例如功效很低和生长因子的突然释放。装有PRP的生物材料可以刺激成纤维细胞的增殖和分化，减少蛋白水解基质金属蛋白酶(MMP)的分泌，并为伤口愈合提供理想的微环境。因此，载有ADSCs和PRP的材料将能有效抑制炎症，促进血管生成并加速伤口愈合。
尽管ADSCs和PRP在治疗上是有效的，但是它们在体内保留了很短的时间。因此，需要开发一种新的控制释放ADSCs和PRP的水凝胶材料，以达到最佳的治疗效果。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶及其制备方法和应用，本发明制备的水凝胶不仅具有稳定的流变性，缓慢的生物降解性，较佳的机械性能，还可以持续释放生长因子，显著促进脂肪干细胞增殖的性能，包裹在水凝胶中的脂肪干细胞具有较高的存活时间，可以在水凝胶内部连续增殖。
第一目的，本发明提供了一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶，包括以下材料：甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂，所述水凝胶中，甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂的质量比为(100～150):(100～150):(0.5～1)。
传统的明胶材料具有单一的结构，其具有较差的机械性能，且无生物活性，进而限制了它们的使用；明胶是具有良好粘附性和生物相容性的天然亲水胶体，甲基丙烯酸化明胶(GelMA)是载体的主要材料，是一种理想的光交联皮肤敷料，可以模仿细胞外基质(ECM)的结构。但是，纯GelMA水凝胶的机械强度很低。当伤口受到相对剪切力时，很容易被压缩以产生变形甚至断裂。在GelMA的基础上，本发明制备了同时负载有脂肪干细胞(ADSCs)和富含血小板血浆(PRP)的明胶-丝素蛋白水凝胶，该水凝胶采用两种ECM衍生生物聚合物，即甲基丙烯酸明胶(GelMA)和甲基丙烯酸化丝素蛋白(SFMA)，可以大大提高水凝胶的强度，当患者翻身或移动时，水凝胶仍牢固地附着在伤口上。另外，本发明的水凝胶具有连通的网状空间，可以实现ADSCs和PRP的控制释放，是组织工程应用的理想载体。
本发明通过将脂肪干细胞(ADSCs)负载水凝胶内部，可以促进受损组织中血管内皮生长因子(VEGF)和其他细胞因子的释放，进而促进神经和胶原的再生，有望成为治疗压疮的理想材料。
通过将富含血小板血浆(PRP)负载水凝胶内部，实现了PRP中生长因子在水凝胶中的缓慢释放，克服了当前PRP中生长因子的保留期短和易失活的问题。
当甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂的质量比为(100～150):(100～150):(0.5～1)时，其制备的水凝胶性能更佳，具有稳定的流变性，缓慢的生物降解性，较佳的机械性能，还可以持续释放生长因子，通过生物相容性测试表明，水凝胶可以显著促进脂肪干细胞增殖的性能。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述水凝胶中，甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂的质量比为100:100:1。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度为5w/v％～15w/v％。
通过改变甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度，孔尺寸随甲基丙烯酸化丝素蛋白浓度的增加而增加，这主要是由于明胶-丝素蛋白水凝胶中交联度的提高，从而影响了水凝胶内部结构的变化。通常，伤口敷料中的多孔网络结构可以促进营养物质和氧气的传输，并保持合适的水分环境。同时，具有三维亲水性聚合物网络的水凝胶可以吸收并保持伤口分泌物，而不会触发软组织浸润，这有利于伤口愈合。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度为10w/v％。
通过水凝胶的溶胀性能测试，实施例3制备的GelMA/10％SFMA水凝胶的溶胀度为8.7％，低于对比例1制备的GelMA水凝胶的溶胀度(16.1％)。这些结果可能归因于SFMA的添加增强了交联反应，导致缩短了分子间间隙并减小了孔径。
通过压缩模量测试，控制甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度可以改善水凝胶的压缩模量，当甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度为10w/v％时，其水凝胶的压缩模量接近人体组织和器官的杨氏模量，因此更适合伤口应用。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述甲基丙烯酸化明胶在水凝胶中的浓度为5w/v％～15w/v％，所述光引发剂在水凝胶中的浓度为0.01w/v％～0.5w/v％。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述甲基丙烯酸化明胶在水凝胶中的浓度为10w/v％，所述光引发剂在水凝胶中的浓度为0.01w/v％。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述甲基丙烯酸化丝素蛋白的制备方法，包括以下步骤：
1)将蚕茧放置在Na2CO3溶液中煮沸除去丝胶，在去离子水中超声冲洗，获得脱胶的丝素蛋白，干燥；
2)将干燥后的脱胶的丝素蛋白混入溴化锂溶液中，直至脱胶的丝素蛋白完全溶解，获得丝素蛋白高盐溶液，在室温下磁力搅拌丝素蛋白高盐溶液，向丝素蛋白高盐溶液滴加甲基丙烯酸缩水甘油酯，获得混合溶液；
3)将步骤2)制备的混合溶液过滤除杂，混合溶液除杂后采用截留分子量为8000～15000Da的透析袋透析，冻干，获得甲基丙烯酸化丝素蛋白。
优选地，甲基丙烯酸缩水甘油酯的加入量为4～12mL，更优选地，甲基丙烯酸缩水甘油酯的加入量为6mL。
优选地，甲基丙烯酸化丝素蛋白的制备反应时间为6～12h，更优选地，甲基丙烯酸化丝素蛋白的制备反应时间为8h。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述甲基丙烯酸化明胶的制备方法，包括以下步骤：
将明胶在60℃下溶解于PBS溶液中直至完全溶解获得混合物，然后在混合物中加入甲基丙烯酸酐，反应4～12小时，直到其变为乳白色，最后采用截留分子量为8000-15000Da的透析袋透析5天，以去除未反应的甲基丙烯酸酐和其他副产物，将所得溶液冻干以获得甲基丙烯酸化明胶。
作为本发明所述明胶-丝素蛋白水凝胶的优选实施方式，所述截留分子量为12000～15000Da。
第二目的，本发明提供了上述明胶-丝素蛋白水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
将甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂溶于去离子水中，加入富含血小板的血浆，蓝光照射5～10s，得明胶-丝素蛋白水凝胶。
本发明采用蓝光诱导交联法制备负载脂肪干细胞和含有血小板的血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶，可以促进受损组织中血管内皮生长因子(VEGF)和其他细胞因子的释放，进而促进神经和胶原的再生；并且还实现了PRP中生长因子在水凝胶中的缓慢释放，克服了当前PRP中生长因子的保留期短和易失活的问题。
第三目的，本发明提供了上述明胶-丝素蛋白水凝胶在制备压疮药物中的应用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1)本发明提供了一种明胶-丝素蛋白水凝胶，该水凝胶不仅具有稳定的流变性，缓慢的生物降解性，较佳的机械性能，还具有优异的生物相容性，可以显著促进脂肪干细胞的生长和增殖，包裹在水凝胶中的脂肪干细胞具有较高的存活时间，可以在水凝胶内部连续增殖；
2)本发明提供了一种明胶-丝素蛋白水凝胶，其对PRP中的生长因子具有优异的持续释放作用，生长因子的持续释放速率可达14天。
附图说明
图1为甲基丙烯酸化明胶(GelMA)核磁检测图；
图2为甲基丙烯酸化丝素蛋白(SFMA)核磁检测图；
图3为实施例3及对比例1-3制备的水凝胶的扫描电镜图；
图4为实施例3及对比例1-3制备的水凝胶的溶胀率结果图；
图5为实施例4制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶累计PDGF释放速率图；
图6为实施例3-4及对比例1制备的水凝胶的细胞存活率结果图；
图7为实施例3和实施例4制备的水凝胶促进ADSCs细胞增殖的结果图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。
在以下实施例和对比例中，所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、甲基丙烯酸化明胶(GelMA)的制备
将10g明胶在温度为60℃下溶解于100mL PBS溶液中直至完全溶解获得混合物，然后在温度为50℃下将12mL甲基丙烯酸酐(MA)加入至混合物中反应4～12小时，直到其变为乳白色，最后采用截留分子量为8000-15000Da的透析袋用去离子水透析5天，以去除未反应的甲基丙烯酸酐和其他副产物，将所得溶液冻干以获得甲基丙烯酸化明胶，置于温度为-20℃条件下以备进一步使用。
实施例2、甲基丙烯酸化丝素蛋白(SFMA)的制备
甲基丙烯酸化丝素蛋白(SFMA)的制备方法，包括以下步骤：
1)将50g蚕茧放置在500mL 0.1M Na2CO3溶液中煮沸20min，煮沸温度为100℃，除去丝胶，然后在去离子水中超声冲洗3次，获得脱胶的丝素蛋白，再置于温度为60℃的烘箱中过干燥至恒重干燥；
2)取20g干燥后的脱胶的丝素蛋白混入100mL溴化锂溶液(9.3mol/L)中，直至脱胶的丝素蛋白完全溶解，获得丝素蛋白高盐溶液，在室温下磁力搅拌丝素蛋白高盐溶液，搅拌8h，向丝素蛋白高盐溶液滴加6mL甲基丙烯酸缩水甘油酯，获得混合溶液；
3)将步骤2)制备的混合溶液通过神奇滤布过滤以除去杂质，混合溶液除杂后采用截留分子量为8000～15000Da的透析袋透析5天，冻干，获得甲基丙烯酸化丝素蛋白，置于温度为-20℃条件下以备进一步使用。
实施例3、GelMA/10％SFMA水凝胶的制备
取0.2g实施例1制备的GelMA(10wt.％)、0.2g实施例2制备的SFMA(10wt.％)和0.002g LAP光引发剂(0.1wt.％)溶于2mL去离子水中，蓝光照10s，即得GelMA/10％SFMA水凝胶。
实施例4、GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶的制备
取0.2g实施例1制备的GelMA(10wt.％)、0.2g实施例2制备的SFMA(10wt.％)和0.002g LAP光引发剂(0.1wt.％)溶于2mL去离子水中，加入200μL PRP，蓝光照10s，即得负载脂肪干细胞和含有血小板的血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶。
实施例5、GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶的制备
取0.3g实施例1制备的GelMA(10wt.％)、0.3g实施例2制备的SFMA(10wt.％)和0.001g LAP光引发剂(0.1wt.％)溶于2mL去离子水中，加入200μL PRP，蓝光照5s，即得负载脂肪干细胞和含有血小板的血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶。
对比例1
将0.2g实施例1制备的GelMA(10wt.％)和0.002g LAP光引发剂(0.1wt.％)溶于2mL去离子水中，蓝光照10s，即得GelMA水凝胶，与实施例3相似，区别仅在于，水凝胶中不含有实施例2制备的SFMA。
对比例2
将0.2g实施例1制备的GelMA(10wt.％)、0.1g实施例2制备的SFMA(5wt.％)和0.002g LAP光引发剂(0.1wt.％)溶于2mL去离子水中，蓝光照10s，即得GelMA/5％SFM水凝胶，与实施例3相似，区别仅在于，SFMA的浓度为5wt.％，SFMA的重量为0.1g。
对比例3
将0.2g实施例1制备的GelMA(10wt.％)、0.3g实施例2制备的SFMA(15wt.％)和0.002g LAP光引发剂(0.1wt.％)溶于2mL去离子水中，蓝光照10s，即得GelMA/15％SFM水凝胶，与实施例3相似，区别仅在于，SFMA的浓度为5wt.％，SFMA的重量为0.3g。
试验例一、
1、核磁检测
使用核磁共振光谱仪对实施例1制备的甲基丙烯酸化明胶(GelMA)和实施例2制备的甲基丙烯酸化丝素蛋白(SFMA)进行了1H-NMR谱图测定。
从图1可以看出，实施例1制备的甲基丙烯酸化明胶(GelMA)出现甲基丙烯酸酯基团的特征共振(δ＝5.27ppm和5.51ppm)，证实了甲基丙烯酸酯相关基序与明胶的成功结合。从图2可以看出，实施例2制备的甲基丙烯酸化丝素蛋白(SFMA)的甲基丙烯酸酯乙烯基的特征共振(δ＝5.89ppm和6.12ppm)，证实了SFMA的成功合成。
2、水凝胶的扫描电镜检测
使用扫描电子显微镜(SEM；S-3400，Hitachi，Japan)观察冷冻干燥水凝胶的微观形态。
从图3可以看出，实施例3及对比例1-3制备的水凝胶的SEM图像均显示出相互连接且均质的多孔微观结构。孔尺寸随SFMA浓度的增加而增加，这主要是由于GelMA/SFMA水凝胶中交联度的提高，从而影响了水凝胶内部结构的变化。通常，伤口敷料中的多孔网络结构可以促进营养物质和氧气的传输，并保持合适的水分环境。同时，具有三维亲水性聚合物网络的水凝胶可以吸收并保持伤口分泌物，而不会触发软组织浸润，这有利于伤口愈合。
3、水凝胶的溶胀性能
将实施例3及对比例1-3制备的水凝胶置于37℃水浴锅中水浴15min后脱模，称取其初始重量，记为M0，将其浸泡至PH＝7.4的PBS缓冲液中，每隔一定时间，将水凝胶取出，用稍微润湿的滤纸快速将水凝胶表面的水吸干，然后称量水凝胶的重量，直至水凝胶重量基本保持不变，将水凝胶吸水饱和时的重量记为Mt，按公式计算水凝胶溶胀率:
溶胀率(％)＝(Mt–M0)/M0×100％
如图4所示，水凝胶的溶胀程度与孔径有关，这最终会影响材料的机械强度。实施例3及对比例1-3制备的水凝胶都可以在PBS溶液中迅速溶胀，表明所有的水凝胶都具有良好的吸水性能。此外，可以看出，所有水凝胶的溶胀率随着时间的增加迅速增加，在4小时内达到最大值，然后开始达到溶胀平衡。其中，实施例3制备的GelMA/10％SFMA水凝胶的溶胀度为8.7％，低于对比例1制备的GelMA水凝胶的溶胀度(16.1％)。这些结果可能归因于SFMA的添加增强了交联反应，导致缩短了分子间间隙并减小了孔径。
4、压缩模量
使用万能试验机(ELF3200，Bose，美国)进行压应力-应变测量。将制得的等尺寸水凝胶(高度为6mm，直径为12mm的圆柱形状)以0.05mm/s的压缩速率压缩。
用于伤口愈合的理想水凝胶材料应具有良好的机械性能，以保持其完整性并在使用过程中保护伤口免受外部冲击。如表1所示，对比例3制备的GelMA/15％SFMA水凝胶的压缩模量最高，高达30kPa，显示出很强的刚性。但是，实施例3制备的GelMA/10％SFMA的压缩模量为20kPa，接近人体组织和器官的杨氏模量，因此更适合伤口应用。与对比例1制备的纯GelMA水凝胶相比，GelMA/SFMA复合水凝胶压缩模量更高，这是由于交联密度更高和结构更紧凑。我们的结果表明，通过控制SFMA浓度可以改善水凝胶的压缩模量。
表1水凝胶压缩强度
5、体外生长因子释放动力学
为了确定实施例4制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶是否具有缓慢释放生长因子的能力，使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了GelMA/10％SFMA水凝胶中PDGF的释放动力学。
具体步骤包括：向装有10mL PBS的50mL离心管中加入1mL装有PRP的水凝胶。收集每支试管的PBS上清液，每1d天用相同体积的新鲜PBS替换。然后将收集的PBS储存在-80℃进行进一步测试。最后，按照制造商的规程，使用ELISA试剂盒测量PDGF的浓度。
如图5所示，GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶表现出生长因子的持续释放速率达14天。但是，先前的研究报道，纯PRP水凝胶显示快速释放持续2天，此后生长因子的释放显著降低。这些结果表明，所制备的水凝胶对PRP中的生长因子具有优异的持续释放作用。实施例5制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶与实施例4的效果类似。
6、水凝胶中细胞的生物相容性
将测试对比例1，实施例3和实施例4制备的水凝胶(200μL)铺在48孔板上。在蓝光(405nm)诱导10s后，将500μL ADSCs细胞悬浮液(2×104细胞/mL)添加到水凝胶表面，并在DMEM低葡萄糖培养基(含10％FBS，1％青霉素/链霉素)。在37℃的5％二氧化碳培养箱中共培养5天后，进行CCK-8测试以评估实验组的细胞存活率。
如图6所示，CCK-8分析显示，在第1天，实施例3制备的GelMA/10％SFMA水凝胶组的细胞活力与对比例1制备的GelMA水凝胶组相当。值得注意的是，实施例4制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶的细胞活力高于对比例1制备的GelMA水凝胶组。之前的研究也表明，PRP可以增强细胞增殖和迁移。我们的结果证实了制备的水凝胶具有优异的生物相容性，有利于ADSCs细胞的生长和增殖。
7、水凝胶中细胞的包封
在DMEM低葡萄糖培养基(含有10％FBS和1％青霉素/链霉素)中培养ADSCs，直至传代前达到70-80％汇合。首先，在24孔板上铺上300μL含有ADSCs(5×103细胞)的实施例3和实施例4制备的水凝胶。在蓝光(405nm)诱导10s后，水凝胶在DMEM低葡萄糖培养基中进行细胞培养。为了测试水凝胶中ADSCS细胞的细胞增殖，水凝胶通过移液管尖端捣碎，然后加入100μl含有10％CCK-8溶液的DMEM培养基。在37℃温育1小时后，通过450nm波长的微孔板读取器(SH1000，Corona，日本)测量每个样品中的吸光度。
如图7所示，CCK-8实验结果表明，将封装有ADSCs细胞的实施例4制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶培养1天后，OD值为0.26，3天后OD增至0.70，7天后OD值上升到1.31。随着培养时间的增加，ADSCs细胞在实施例4制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶中明显增殖。以上结果表明，实施例4制备的GelMA/10％SFMA/PRP水凝胶不仅为ADSCs的细胞存活和增殖提供了合适的微环境，而且具有良好的生物相容性，实施例5制备水凝胶也具有相似的效果。OD值较高是由于水凝胶中的明胶和丝素蛋白材料是重要的细胞外基质(ECM)，具有出色的生物相容性，并包含与细胞结合的特定位点，可以促进细胞的黏附和增殖。另外，水凝胶中的PRP含有大量的生长因子，可以促进细胞的增殖。而且，水凝胶的胶凝时间很短，这不影响细胞活力或细胞生长。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种负载脂肪干细胞和血浆的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，包括以下材料：甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂，所述水凝胶中，甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂的质量比为(100～150):(100～150):(0.5～1)。
2.如权利要求1所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述水凝胶中，甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂的质量比为100:100:1。
3.如权利要求1所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度为5w/v％～15w/v％。
4.如权利要求3所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述甲基丙烯酸化丝素蛋白在水凝胶中的浓度为10w/v％。
5.如权利要求1所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述甲基丙烯酸化明胶在水凝胶中的浓度为5w/v％～15w/v％，所述光引发剂在水凝胶中的浓度为0.01w/v％～0.5w/v％。
6.如权利要求1所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述甲基丙烯酸化明胶在水凝胶中的浓度为10w/v％，所述光引发剂在水凝胶中的浓度为0.01w/v％。
7.如权利要求1所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述甲基丙烯酸化丝素蛋白的制备方法，包括以下步骤：
1)将蚕茧放置在Na2CO3溶液中煮沸除去丝胶，在去离子水中超声冲洗，获得脱胶的丝素蛋白，干燥；
2)将干燥后的脱胶的丝素蛋白混入溴化锂溶液中，直至脱胶的丝素蛋白完全溶解，获得丝素蛋白高盐溶液，在室温下磁力搅拌丝素蛋白高盐溶液，向丝素蛋白高盐溶液滴加甲基丙烯酸缩水甘油酯，获得混合溶液；
3)将步骤2)制备的混合溶液过滤除杂，混合溶液除杂后采用截留分子量为8000～15000Da的透析袋透析，冻干，获得甲基丙烯酸化丝素蛋白。
8.如权利要求7所述的明胶-丝素蛋白水凝胶，其特征在于，所述截留分子量为12000～15000Da。
9.如权利要求1～8任一项所述的明胶-丝素蛋白水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将甲基丙烯酸化明胶、甲基丙烯酸化丝素蛋白和光引发剂溶于去离子水中，加入富含血小板的血浆，蓝光照射5～10s，得明胶-丝素蛋白水凝胶。
10.如权利要求1～8任一项所述的明胶-丝素蛋白水凝胶在制备压疮药物中的应用。
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