CN113045623A - 一种蛇毒肽syn-ake的液相合成方法 - Google Patents
一种蛇毒肽syn-ake的液相合成方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113045623A CN113045623A CN201911376872.7A CN201911376872A CN113045623A CN 113045623 A CN113045623 A CN 113045623A CN 201911376872 A CN201911376872 A CN 201911376872A CN 113045623 A CN113045623 A CN 113045623A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- trt
- compound
- dab
- nhbzl
- ala
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- HSUGRPOJOBRRBK-SXBSVMRRSA-N acetic acid;(2s)-n-[(2s)-4-amino-1-(benzylamino)-1-oxobutan-2-yl]-1-(3-aminopropanoyl)pyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O.N([C@@H](CCN)C(=O)NCC=1C=CC=CC=1)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CCN HSUGRPOJOBRRBK-SXBSVMRRSA-N 0.000 title claims abstract description 33
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 101000761020 Dinoponera quadriceps Poneritoxin Proteins 0.000 title claims abstract description 16
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 65
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 35
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 25
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims abstract description 25
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 24
- ZZDRDGKSMGGBDI-KRWDZBQOSA-N (2s)-4-azaniumyl-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanoate Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCN)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 ZZDRDGKSMGGBDI-KRWDZBQOSA-N 0.000 claims abstract description 20
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000005336 cracking Methods 0.000 claims abstract description 9
- -1 amino acid ester Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 26
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 22
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims description 18
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 16
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 14
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 13
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 claims description 12
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims description 9
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 8
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 8
- QGJOPFRUJISHPQ-NJFSPNSNSA-N carbon disulfide-14c Chemical compound S=[14C]=S QGJOPFRUJISHPQ-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 8
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 6
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 6
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 5
- 239000007821 HATU Substances 0.000 claims description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 claims description 4
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims description 2
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims 2
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000001664 diethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 17
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 4
- 238000000861 blow drying Methods 0.000 description 3
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 3
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 3
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- LFZAGIJXANFPFN-UHFFFAOYSA-N N-[3-[4-(3-methyl-5-propan-2-yl-1,2,4-triazol-4-yl)piperidin-1-yl]-1-thiophen-2-ylpropyl]acetamide Chemical compound C(C)(C)C1=NN=C(N1C1CCN(CC1)CCC(C=1SC=CC=1)NC(C)=O)C LFZAGIJXANFPFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical class OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- BLWYXBNNBYXPPL-YFKPBYRVSA-N methyl (2s)-pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound COC(=O)[C@@H]1CCCN1 BLWYXBNNBYXPPL-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- WCFJUSRQHZPVKY-UHFFFAOYSA-N 3-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCC(O)=O WCFJUSRQHZPVKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDBQJSCPCGTAFG-QHCPKHFHSA-N 4,4-difluoro-N-[(1S)-3-[4-(3-methyl-5-propan-2-yl-1,2,4-triazol-4-yl)piperidin-1-yl]-1-pyridin-3-ylpropyl]cyclohexane-1-carboxamide Chemical compound FC1(CCC(CC1)C(=O)N[C@@H](CCN1CCC(CC1)N1C(=NN=C1C)C(C)C)C=1C=NC=CC=1)F WDBQJSCPCGTAFG-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- UVDIEZOBRSTXFC-JTQLQIEISA-N Achillen Natural products C[C@@H](C=C)C=CCC(=C)C UVDIEZOBRSTXFC-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 238000007167 Hofmann rearrangement reaction Methods 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101500004391 Tropidolaemus wagleri Waglerin-1 Proteins 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000004537 pulping Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000006257 total synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了一种蛇毒肽SYN‑AKE的液相合成方法，包括以下步骤：化合物Trt‑β‑Ala‑Pro‑OH的合成；化合物Fmoc‑Dab(Trt)‑NHBzl的合成；化合物H‑Dab(Trt)‑NHBzl的合成；化合物Trt‑β‑Ala‑Pro‑Dab(Trt)‑NHBzl的合成；蛇毒肽SYN‑AKE：H‑β‑Ala‑Pro‑Dab(Trt)‑NHBzl的合成。在合成的过程中以Trt‑β‑Ala‑OH，Fmoc‑Dab(Trt)‑OH为原料避免使用LiOH处理氨基酸酯的反应，减少反应步骤，降低消旋杂质产生，提高了中间体纯度。通过重结晶获得高纯度Trt‑β‑Ala‑Pro‑Dab(Trt)‑NHBzl后用醋酸溶液脱除Trt，最用乙醚沉淀后直接得到SYN‑AKE的醋酸盐，避免使用强腐蚀性的三氟乙酸作裂解试剂，环境友好，同时避免了制备纯化转盐过程，节约了成本。
Description
技术领域
本发明属于制药领域，具体涉及一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法。
背景技术
SYN-AKE为DSM全资子公司pentapharm 2007年开发的一种模拟蛇毒毒素WaglerinI活性的类蛇毒三肽。和肉毒杆菌和阿基瑞林一样，在除皱方面亦有特效，但是相比肉毒杆菌却更安全有效。肽序为H-β-Ala-Pro-Dab-NHBzl，分子结构如下所示：
文献Tetrahedron Letters 55(2014)5745–5747介绍了一种以不保护氨基酸为原料，最后一步采用霍夫曼重排反应全液相合成SYN-AKE的方法。专利CN201711270645公开了一种类蛇毒三肽的液相合成方法，该方法将Boc-β-Ala-OH和H-Pro-OMe·HCl为原料制备Boc-β-Ala-Pro-OMe，进一步用LiOH处理得到Boc-β-Ala-Pro-OH；采用相同方法和H-Dab(Boc)-OMe·HCl反应得到Boc-β-Ala-Pro-Dab(Boc)-OH；再和苄胺反应得Boc-β-Ala-Pro-Dab(Boc)-NH-Bzl，最后用三氟乙酸脱去Boc保护基并制备纯化得纯度大于95％的类蛇毒三肽。
文献Tetrahedron Letters 55(2014)5745方法步骤繁琐，全合成收率低于10％。专利CN201711270645公开方法以H-Pro-OMe·HCl及H-Dab(Boc)-OMe·HCl需要LiOH强碱处理，不但增加步骤，而且可能会造成消旋杂质产生。因为需用三氟乙酸脱除Boc保护基，三氟乙酸对设备腐蚀性较高。另外，三氟乙酸脱除Boc保护基后获得的是SYN-AKE的三氟乙酸盐，需要通过制备色谱柱进行纯化转盐获得SYN-AKE的醋酸盐，步骤繁琐，成本增加。
为了克服上述缺点，本发明提供了一种合成路线简单、环境友好而且不需制备色谱柱纯化转盐就可直接获得SYN-AKE醋酸盐形式的合成方法，使得生产成本大为降低。
发明内容
为了解决上述背景技术中所提出的问题，本发明的目的在于提供一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法。本发明以Trt-β-Ala-OH，Fmoc-Dab(Trt)-OH为原料采用2+2合成策略经过逐步偶联获得Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl，重结晶获得高纯度Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl后用醋酸溶液脱除Trt，最用乙醚沉淀后直接得到SYN-AKE的醋酸盐。
为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案为：一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，包括以下步骤：
1)化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成；
2)化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
3)化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
4)化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
5)蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成。
进一步地，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成方法为：以化合物1(Trt-β-Ala-OH)和HONb或化合物1(Trt-β-Ala-OH)和HOSu为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，在DIC或DCC作用下进行活化反应后，在碱的作用下与H-Pro-OH进行偶联反应得到化合物2(Trt-β-Ala-Pro-OH)。
进一步地，所述Trt-β-Ala-OH和HONb或Trt-β-Ala-OH和HOSu的摩尔比均为1：1.0～1.2；
所述Trt-β-Ala-OH和H-Pro-OH的摩尔比为1：1.0～1.2；
所述活化反应所用的活化剂优选为DIC；
所述活化反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述偶联反应所用的碱为DIPEA、N-甲基吗啉、碳酸氢钠或碳酸氢钾，优选DIPEA；
所述偶联反应的温度为室温，反应时间为1-3小时，优选为2小时；
所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷。
进一步地，所述化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物3(Fmoc-Dab(Trt)-OH)为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，与苄胺进行偶联反应得到化合物4(Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl)。
进一步地，所述Fmoc-Dab(Trt)-OH和苄胺的摩尔比为1：1.0～1.2；
所述偶联反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷；
所述偶联反应所用的偶联剂为DIC和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOAt或HOBt，化合物B为PyAOP、PyBOP、HATU、HBTU、TBTU或EDC，优选为DIPEA/EDC/HOBT组合物；更优选地，所述偶联剂组分摩尔比为EDC：HOBT：DIPEA＝1：1：3。
进一步地，所述化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物4(Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl)为原料，在溶剂存在下，用有机碱脱除Fmoc保护基得到化合物5(H-Dab(Trt)-NHBzl)。
进一步地，所述脱除Fmoc保护基的有机碱为二乙胺、哌啶或DBU有机碱，优选为二乙胺；
所述脱保护反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、水，优选二氯甲烷。
进一步地，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以中间体化合物Trt-β-Ala-Pro-OH和化合物H-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，进行偶联反应得到化合物6(Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl)。
进一步地，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH和化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的摩尔比为1.0～1.5:1；
所述偶联反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选二氯甲烷；
所述偶联反应所用的偶联剂为DIC和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOAt或HOBt，化合物B为PyAOP、PyBOP、HATU、HBTU、TBTU或EDC，优选为DIPEA/EDC/HOBT组合物；更优选地，偶联试剂组分摩尔比为EDC：HOBT：DIEPA＝1：1：3；
所述化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl粗品用乙酸乙酯溶解后，滴加正己烷析晶得到高纯度Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl；所述乙酸乙酯的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比为2～4mL：1g；所述正己烷的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比为6～12mL：1g。
进一步地，蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在醋酸作用下脱Trt保护基。
进一步地，所述脱Trt保护基所用的裂解液为冰醋酸和水，所述裂解液中HOAc和H2O体积比为80～99：20～1；
所述裂解液用量与化合物物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比为6～8mL：1g；
所述脱Trt保护基的温度为40℃±10℃，裂解时间为1～3小时，优选为2小时；
所述脱Trt保护基后用乙醚或甲叔醚进行沉淀，离心得到蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl，裂解液与沉降试剂的体积比为1：6～10，优选1:8。
与现有技术相比：
1)以Trt-β-Ala-OH，Fmoc-Dab(Trt)-OH为原料避免使用LiOH处理氨基酸酯的反应，减少反应步骤，降低消旋杂质产生，提高了中间体纯度。
2)通过重结晶获得高纯度Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl后用醋酸溶液脱除Trt，最用乙醚沉淀后直接得到SYN-AKE的醋酸盐。避免使用强腐蚀性的三氟乙酸作裂解试剂，环境友好；同时避免了制备纯化转盐过程，节约了成本。
附图说明
图1为实施例5中SYN-AKE的HPLC谱图；
图2为实施例5中SYN-AKE的质谱图；
图3为实施例7中SYN-AKE的HPLC谱图。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的内容，下面结合具体实施方法对本发明内容作进一步说明，但本发明的保护内容不局限以下实施例。
说明书和权利要求书中所使用的缩写的含义列于下表中：
SYN-AKE合成路线如下所示：
本发明中的室温为25℃±5℃。
实施例1：化合物2的合成(Trt-β-Ala-Pro-OH)
将Trt-β-Ala-OH(49.7g，150mmol)、HONb(30.0g，165mmol)溶解于350mL DCM中搅拌溶清，冰浴冷却至5℃以下，缓慢加入DIC(28mL，180mmol)，室温继续搅拌3小时，TLC监控反应。反应完全后，反应液过滤，再加入H-Pro-OH(16.0g，180mmol)继续搅拌，滴加入DIPEA(40.0mL，225mmol)。室温搅拌2小时，TCL监控反应。反应完后，过滤，浓缩。残余物加入350mL乙酸乙酯搅拌溶清，加入饱和柠檬酸溶液，调pH＝3～4，静置分层。有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(350mL)以及饱和食盐水溶液(350mL)洗涤，静置分层，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。过滤。40℃减压浓缩至100mL。滴加正己烷(400mL)，冷却至0℃析晶过夜。过滤，真空干燥得到白色固体60.1g，收率93.4％。
实施例2：化合物4的合成(Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl)
将Fmoc-Dab(Trt)-OH(23.3g，40mmol)、苄胺(5.1g，48mmol)、EDC(13.8g，72mmol)和HOBt(9.43g，72mmol)加入300mL二氯甲烷中搅拌溶清，冰浴冷却至5℃以下，继续滴加入DIPEA(37.7mL，216mmol)，控制温度不超过10℃。滴加完后室温继续搅拌3小时，TLC监控反应。反应完全后，向反应液中加纯化水(300mL)，搅拌15分钟后，静置分液，收集下层有机相。有机相在30℃条件下减压浓缩，残余物用乙酸乙酯(300mL)搅拌溶解，依次用纯化水(300mL)、饱和碳酸氢钠溶液(300mL)、饱和氯化钠溶液(300mL)洗涤，收集有机相，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，滤液浓缩至60mL，缓慢滴加入正己烷(240mL)。析出白色固体，继续搅拌1小时后，0℃环境下静置析晶过夜。过滤后40℃真空干燥得到白色固体24.3g，收率90.6％。
实施例3：化合物5的合成(H-Dab(Trt)-NHBzl)
将化合物3(24.3g，36.2mmol)加入DCM(250mL)搅拌溶解。将反应液降温至0℃后，缓慢加入二乙胺(26.4g,362.0mol)，加完后升至室温继续搅拌3小时。TLC监控反应。原料消耗完后，将反应液浓缩至50mL，再加入正己烷(120mL)，冷却至0℃搅拌析出白色固体。真空抽滤，滤饼用正己烷冲洗三次，再将滤饼加入反应瓶内，加正己烷(100mL)打浆2小时。真空抽滤，滤饼在50℃条件下鼓风干燥过夜得到米白色固体15.7g，收率96.3％。
实施例4：化合物6的合成(Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl)
将Trt-β-Ala-Pro-OH(18.0g，42mmol)、H-Dab(Trt)-NHBzl(15.7g，35.0mmol)、EDC(10.0g，52.4mmol)和HOBt(7.0g，52.4mmol)加入75mL二氯甲烷中搅拌溶清，冰浴冷却至5℃以下，继续滴加入DIPEA(27.5mL，157.1mmol)，控制温度不超过10℃。滴加完后室温继续搅拌3小时，TLC监控反应。反应完全后，向反应液中加纯化水(75mL)，搅拌15分钟后，静置分液，收集下层有机相。有机相在30℃条件下减压浓缩，残余物用乙酸乙酯(100mL)搅拌溶解，依次用纯化水(100mL)、饱和碳酸氢钠溶液(100mL)、饱和氯化钠溶液(100mL)洗涤，收集有机相，无水硫酸钠干燥过夜。过滤，浓缩至50mL，缓慢滴加正己烷150mL。室温析出白色固体，0℃环境下继续静置析晶过夜。过滤后40℃真空干燥得到白色固体27.1g，收率90.1％。
实施例5：SYN-AKE的合成
将实施例4中合成的化合物6加入30mL预冻的裂解液(HOAc:H2O＝95:5)中，室温搅拌3小时。将反应液倒入240mL冰冻乙醚中沉淀，离心，用乙醚洗两次。氮气吹干得到白色固体15.6g。总收率78.8％，HPLC纯度98.39％(见图1)，MS[M+1]:376(见图2)。
实施例6：化合物2的合成(Trt-β-Ala-Pro-OH)
将Trt-β-Ala-OH(24.9g，75mmol)、HOSu(9.5g，82.5mmol)溶解于175mL DCM中搅拌溶清，冰浴冷却至5℃以下，缓慢加入DIC(14mL，90mmol)，室温继续搅拌3小时，TLC监控反应。反应完全后，反应液过滤，再加入H-Pro-OH(8.0g，90mmol)继续搅拌，滴加入DIPEA(20.0mL，112.5mmol)。室温搅拌2小时，TCL监控反应。反应完后，过滤，浓缩。残余物加入175mL乙酸乙酯搅拌溶清，加入饱和柠檬酸溶液，调pH＝3～4，静置分层。有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液(175mL)以及饱和食盐水溶液(175mL)洗涤，静置分层，有机相用无水硫酸钠干燥过夜。过滤。40℃减压浓缩至50mL。滴加正己烷(200mL)，冷却至0℃析晶过夜。过滤，真空干燥得到白色固体27.1g，收率84.2％。
实施例7：SYN-AKE的合成
以实施例6中合成的Trt-β-Ala-Pro-OH为原料，按实施例2～5步骤继续合成获得SYN-AKE12.1g，总收率61.1％。，HPLC纯度99.72％(见图3)。
实施例8：SYN-AKE的合成
本实施例步骤1中以Trt-β-Ala-OH与HONb为原料，摩尔比为1:1.0，在室温(25℃±5℃)条件下通过活化剂进行活化，活化后在DIPEA的作用下与H-Pro-OH在室温(25℃±5℃)进行脱水缩合反应3小时得到化合物2。活化反应选用非质子性溶剂为四氢呋喃。室温(25℃±5℃)进行活化反应时间4小时。活化剂为DCC。
本实施例步骤2中以Fmoc-Dab(Trt)-OH和苄胺为原料，摩尔比为1:1.0，在室温(25℃±5℃)条件下偶联剂进行缩合反应。选用的非质子性溶剂包括四氢呋喃。反应时间4小时，偶联剂为DIC和HOAt。
本实施例步骤3中脱除Fmoc的碱为二乙胺，选用的溶剂为四氢呋喃。反应时间2小时。
步骤4中以中间体化合物2和化合物5为原料，摩尔比为1:1，在室温(25℃±5℃)条件下偶联剂进行缩合反应。选用的非质子性溶剂为四氢呋喃。反应时间2小时，偶联剂为DIPEA/HOBt/PyBOP。乙酸乙酯的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比(mL/g)为2:1；正己烷的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比(mL/g)为6:1。。
步骤5中化合物6为原料，以冰醋酸和水作裂解试剂脱除Trt，裂解液HOAc/H2O体积比为80:20进行裂解。加热50℃裂解1小时。沉降试剂为甲叔醚，裂解液和沉降试剂的体积比为1:6。氮气吹干得到白色固体14.3g。总收率72.2％，HPLC纯度98.04％。
实施例9：SYN-AKE的合成
本实施例步骤1中以Trt-β-Ala-OH与HONb为原料，摩尔比为1:1.2，在室温(25℃±5℃)条件下通过活化剂进行活化，活化后在DIPEA的作用下与H-Pro-OH在室温(25℃±5℃)进行脱水缩合反应1小时得到化合物2。活化反应选用非质子性溶剂为氯仿。室温(25℃±5℃)进行活化反应时间2小时。活化偶联剂为DCC。
本实施例步骤2中以Fmoc-Dab(Trt)-OH和苄胺为原料，摩尔比为1:1.2，在室温(25℃±5℃)条件下偶联剂进行缩合反应。选用的非质子性溶剂为氯仿。反应时间2小时，偶联剂为DIPEA/HOBt/PyBOP。
本实施例步骤3中脱除Fmoc的碱为二乙胺，选用的溶剂为氯仿。反应时间4小时。
步骤4中以中间体化合物2和化合物5为原料，摩尔比为1.5:1，在室温(25℃±5℃)条件下偶联剂进行缩合反应。选用的非质子性溶剂为四氢呋喃。反应时间4小时，偶联剂为DIPEA/HOAt/PyAOP。乙酸乙酯的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比(mL/g)为4:1；正己烷的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比(mL/g)为12:1。
步骤5中化合物6为原料，以冰醋酸和水作裂解试剂脱除Trt，裂解液HOAc/H2O体积比为99:1进行裂解。加热30℃裂解3小时。沉降试剂为甲叔醚，裂解液和沉降试剂的体积比为1:10。氮气吹干得到白色固体15.3g。总收率77.3％，HPLC纯度98.27％。
对比实施例：SYN-AKE的合成
专利CN201711270645公开方法三个实施例中，实施例1总收率最高为38.7％。纯度98.2％，收率明显低于实施例5。
以上所述仅为本发明的具体实施方式，不是全部的实施方式，本领域普通技术人员通过阅读本发明说明书而对本发明技术方案采取的任何等效的变换，均为本发明的权利要求所涵盖。
Claims (11)
1.一种蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成；
2)化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
3)化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
4)化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成；
5)蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成。
2.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH的合成方法为：以化合物Trt-β-Ala-OH和HONb或Trt-β-Ala-OH和HOSu为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，在DIC或DCC作用下进行活化反应后，在碱的作用下与H-Pro-OH进行偶联反应得到化合物Trt-β-Ala-Pro-OH。
3.根据权利要求2所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述Trt-β-Ala-OH和HONb或Trt-β-Ala-OH和HOSu的摩尔比均为1：1.0～1.2；
所述Trt-β-Ala-OH和H-Pro-OH的摩尔比为1：1.0～1.2；
所述活化反应所用的活化剂优选为DIC；
所述活化反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述偶联反应所用的碱为DIPEA、N-甲基吗啉、碳酸氢钠或碳酸氢钾，优选DIPEA；
所述偶联反应的温度为室温，反应时间为1-3小时，优选为2小时；
所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷。
4.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物Fmoc-Dab(Trt)-OH为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，与苄胺进行偶联反应得到化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl。
5.根据权利要求4所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述Fmoc-Dab(Trt)-OH和苄胺的摩尔比为1：1.0～1.2；
所述偶联反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选为二氯甲烷；
所述偶联反应所用的偶联剂为DIC和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOAt或HOBt，化合物B为PyAOP、PyBOP、HATU、HBTU、TBTU或EDC，优选为DIPEA/EDC/HOBT组合物；更优选地，所述偶联剂组分摩尔比为EDC：HOBT：DIPEA＝1：1：3。
6.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物Fmoc-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在溶剂存在下，用有机碱脱除Fmoc保护基得到化合物H-Dab(Trt)-NHBzl。
7.根据权利要求6所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述脱除Fmoc保护基的有机碱为二乙胺、哌啶或DBU有机碱，优选为二乙胺；
所述脱保护反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、水，优选二氯甲烷。
8.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以中间体化合物Trt-β-Ala-Pro-OH和化合物H-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在非质子性溶剂存在的条件下，进行偶联反应得到化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl。
9.根据权利要求8所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述化合物Trt-β-Ala-Pro-OH和化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的摩尔比为1.0～1.5:1；
所述偶联反应的温度为室温，反应时间为2-4小时，优选为3小时；
所述非质子性溶剂包括四氢呋喃、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二恶烷、乙腈、四氯化碳、二硫化碳、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷，优选二氯甲烷；
所述偶联反应所用的偶联剂为DIC和化合物A的组合物或DIPEA和化合物A和化合物B的组合物，其中化合物A为HOAt或HOBt，化合物B为PyAOP、PyBOP、HATU、HBTU、TBTU或EDC，优选为DIPEA/EDC/HOBT组合物；更优选地，偶联试剂组分摩尔比为EDC：HOBT：DIEPA＝1：1：3；
所述化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl粗品用乙酸乙酯溶解后，滴加正己烷析晶得到高纯度Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl；所述乙酸乙酯的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比为2～4mL：1g；所述正己烷的用量与化合物H-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比为6～12mL：1g。
10.根据权利要求1所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的合成方法为：以化合物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl为原料，在醋酸作用下脱Trt保护基。
11.根据权利要求10所述的蛇毒肽SYN-AKE的液相合成方法，其特征在于，所述脱Trt保护基所用的裂解液为冰醋酸和水，所述裂解液中HOAc和H2O体积比为80～99：20～1；
所述裂解液用量与化合物物Trt-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl的体积质量比为6～8mL:1g；
所述脱Trt保护基的温度为40℃±10℃，裂解时间为1～3小时，优选为2小时；
所述脱Trt保护基后用乙醚或甲叔醚进行沉淀，离心得到蛇毒肽SYN-AKE：H-β-Ala-Pro-Dab(Trt)-NHBzl，裂解液与沉降试剂的体积比为1：6～10，优选1:8。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911376872.7A CN113045623A (zh) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | 一种蛇毒肽syn-ake的液相合成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911376872.7A CN113045623A (zh) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | 一种蛇毒肽syn-ake的液相合成方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113045623A true CN113045623A (zh) | 2021-06-29 |
Family
ID=76506357
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911376872.7A Pending CN113045623A (zh) | 2019-12-27 | 2019-12-27 | 一种蛇毒肽syn-ake的液相合成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113045623A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114380887A (zh) * | 2021-12-09 | 2022-04-22 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法 |
| CN117486968A (zh) * | 2024-01-03 | 2024-02-02 | 深圳创元生物医药科技有限公司 | 一种类蛇毒肽的制备方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101061134A (zh) * | 2004-11-02 | 2007-10-24 | 彭特法姆股份公司 | 新型可局部施用的抗表情皱纹和与年龄相关的皱纹的活性物质 |
| CN102584945A (zh) * | 2012-02-09 | 2012-07-18 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种醋酸加尼瑞克的制备方法 |
| CN103224558A (zh) * | 2013-04-03 | 2013-07-31 | 齐鲁制药有限公司 | 一种艾塞那肽的制备方法 |
| CN103570804A (zh) * | 2013-09-11 | 2014-02-12 | 深圳市维琪医药研发有限公司 | 一种具皮肤活性的多肽的合成方法 |
| RU2551276C1 (ru) * | 2014-02-03 | 2015-05-20 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ получения диацетата трипептида |
| CN107857797A (zh) * | 2017-12-07 | 2018-03-30 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法 |
-
2019
- 2019-12-27 CN CN201911376872.7A patent/CN113045623A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101061134A (zh) * | 2004-11-02 | 2007-10-24 | 彭特法姆股份公司 | 新型可局部施用的抗表情皱纹和与年龄相关的皱纹的活性物质 |
| CN102584945A (zh) * | 2012-02-09 | 2012-07-18 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种醋酸加尼瑞克的制备方法 |
| CN103224558A (zh) * | 2013-04-03 | 2013-07-31 | 齐鲁制药有限公司 | 一种艾塞那肽的制备方法 |
| CN103570804A (zh) * | 2013-09-11 | 2014-02-12 | 深圳市维琪医药研发有限公司 | 一种具皮肤活性的多肽的合成方法 |
| RU2551276C1 (ru) * | 2014-02-03 | 2015-05-20 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Способ получения диацетата трипептида |
| CN107857797A (zh) * | 2017-12-07 | 2018-03-30 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114380887A (zh) * | 2021-12-09 | 2022-04-22 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法 |
| CN117486968A (zh) * | 2024-01-03 | 2024-02-02 | 深圳创元生物医药科技有限公司 | 一种类蛇毒肽的制备方法 |
| CN117486968B (zh) * | 2024-01-03 | 2024-03-29 | 深圳创元生物医药科技有限公司 | 一种类蛇毒肽的制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20120041172A1 (en) | Method for the manufacture of degarelix | |
| JP2017521487A (ja) | ガニレリクス前駆体、及びそれを用いた酢酸ガニレリクスの製造方法 | |
| WO2009003666A1 (en) | Process for the production of pramlintide | |
| CN109503655B (zh) | 一种Fmoc-氨基酸酯类衍生化产物的制备方法 | |
| CN113045623A (zh) | 一种蛇毒肽syn-ake的液相合成方法 | |
| KR102303092B1 (ko) | 합성 펜타펩티드의 제조법 | |
| CN114213503A (zh) | 一种类蛇毒三肽的合成方法 | |
| CN110964085A (zh) | 一种卡非佐米及其衍生物的制备方法 | |
| CN113667007A (zh) | 一种索马鲁肽侧链的液相制备方法 | |
| CN114874227B (zh) | 一种用于酰胺合成的催化剂及其制备与应用 | |
| WO2021026800A1 (zh) | 醋酸地加瑞克的合成方法 | |
| WO2021103458A1 (zh) | 一种地加瑞克的固相合成方法 | |
| WO2007110765A2 (en) | Processes for the preparation of octreotide | |
| CN110183532B (zh) | 一种大批量高效液相法合成比伐卢定保护五肽片段的工艺方法 | |
| CN114380887A (zh) | 一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法 | |
| CN108690121B (zh) | 一种奈米非肽液相制备方法 | |
| CN110330552B (zh) | 醋酸地加瑞克的合成方法 | |
| CN117126230B (zh) | 一种三肽-1、蓝铜肽的合成方法及其应用 | |
| CN109438363B (zh) | 一种环(亮氨酰-精氨酰)二肽盐的液相高纯度规模化合成方法 | |
| CN117683078A (zh) | 一种甘氨酰-l-谷氨酰胺的制备方法 | |
| CN110627874B (zh) | 一种帕瑞肽的制备方法 | |
| CN109810169B (zh) | 一种Reltecimod的液相制备方法 | |
| CN107698663B (zh) | 一种维洛丝肽的液相合成方法 | |
| CN117736262A (zh) | 一种三肽-1的制备方法 | |
| KR100272310B1 (ko) | 액상 1-데아미노-8-d-아르기닌 바소프레신 아세테이트 합성법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210629 |