CN113025528A - 一种侧孢芽孢杆菌及其在线虫病害防治中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一株新的侧孢芽孢杆菌ZB387（Brevibacillus laterosporus ZB387），保藏编号CCCTCC NO：M2020740，并提供了其在植物病害防治中的应用。所述侧孢芽孢杆菌可广泛应用于根结线虫病害的生物防治，同时可促进作物生长，提高作物的产量和品质，效果显著。

Description

一种侧孢芽孢杆菌及其在线虫病害防治中的应用

技术领域

本发明涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体涉及一种侧孢芽孢杆菌及其在农业生产中的应用。

背景技术

农作物在生长过程中会发生病害，给现代农业生产造成较大影响。防止农作物病害就变得迫在眉睫，防控病害的主要途径有化学防治、物理防治、生物防治等。20世纪80年代开始，人们已经将生物防治用于农作物病除害处理和应用，生物防治是指用一种生物与另一种生物进行对抗，从而达到防治农作物病害的目的。它具有高效、安全、环境友好等特点，已被国内外研究者关注。关于生防菌防治农作物病害的报道非常多，已在农作物病害防治中取显著效果。

目前应用较多生防菌种主要包括细菌、真菌及放线菌3大类。关于芽孢杆菌和假单胞杆菌的报道较多，芽孢杆菌中用于植物病虫害防治的主要有枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌等，其中苏云金芽孢杆菌是开发最成功的细菌杀虫剂，可用于防治园林植物上的多种昆虫，特别是鳞翅目害虫；假单胞杆菌能在植物根系周围的土壤中大量增殖，保护植物免遭受病原的侵害，其中荧光假单胞菌是近几十年来研究报道最多一类生防菌，但较少能制作成为生防制剂广泛应用和批量生产。例如，王勤英等公开了一株对鳞翅目害虫广谱高效的苏云金芽孢杆菌菌株及其可湿性粉剂的制备和应用，该菌株含有等多个杀虫基因，对梨小食心虫、棉铃虫、美国白蛾、苹小卷叶蛾、舟型毛虫、苹果蠹蛾、棉铃虫、斜纹夜蛾、小菜蛾、甜菜夜蛾等多种鳞翅目害虫具有高效的致死作用。侯园园利用绿针假单胞菌G5菌株对苦瓜枯萎病SG－15菌株和黄瓜枯萎病菌FOC菌株试验，具有明显拮抗作用，抑制率分别达到60％以上和78.39％。

木霉菌是一种重要的植物病害生防因子，自被发现能抑制植物病原菌增殖以来，各国科研人员对其进行了大量的试验，目前在农业生产中应用较普遍，随着对木霉菌在农业上的不断研究和对其作用机制的日臻完善，木霉菌和它的代谢产物在园林植物上的应用也将会有良好的发展前景。有研究报道，其对杨树叶枯病、烂皮病、泡溃疡等多种病菌有较好的抑制作用。毛壳菌在防治植物病害方面表现也比较突出，对多种农作物的种子腐烂和种苗猝倒都有明显的抑制作用，对番苹果黑星菌、百合灰霉病等也能表现出较好的抑制效果。

放线菌是细菌的特殊分支，应用最多的是链霉菌和它的变种，已有许多的生防制剂广泛地应用在工农业和医药等领域，如井冈霉菌素、阿维菌素等。阿维菌素是目前应用最普遍的生物农药，能防治鞘翅目、鳞翅目、蜱螨目的百余种害虫，园林上可用来防治各类植物叶螨、蚜虫、木虱、蓟马等病虫害。

未来利用微生物防治植物病虫害会有广阔的前景，尤其是在增强植物对病虫害的防御、促进植物生长、改善土壤以及增加营养物质的吸收利用率等方面。通过对生防微生物全面系统的研究，并借助于生物技术等多门学科的研究方法和手段，进一步完善其基础理论，筛选出优良的生物防治菌株，可以进一步促进生防微生物的研究工作不断深入。

发明内容

本发明的目的是提供一株侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)及其在植物病害防治中的应用。所述侧孢芽孢杆菌可广泛应用于根结线虫病害的生物防治，同时可促进作物生长，提高作物的产量和品质，效果显著。

本发明一方面提供了一种侧孢芽孢杆菌，命名为侧孢芽孢杆菌ZB387(Brevibacillus laterosporus ZB387)，已于2020年11月16日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2020740。

所述侧孢芽孢杆菌ZB387菌株的16s rDNA序列为SEQ ID NO:1。

本发明一方面提供了所述侧孢芽孢杆菌ZB387在线虫病害防治中的应用。

本发明一方面提供了一种生防菌剂，包含上述侧孢芽孢杆菌ZB387。

所述生防菌剂还包含芽孢杆菌、假单胞菌、土壤杆菌、固氮菌、根瘤菌、青霉菌、曲霉菌、根霉菌、链霉菌中的任意一种或两种或多种的组合。

所述的芽孢杆菌优选枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌或暹罗芽孢杆菌。

所述生防菌剂中侧孢芽孢杆菌ZB387的活菌量至少为10⁹CFU/g。

本发明还提供了上述生防菌剂在植物病害防治中的应用。

本发明还提供了一种肥料，包含上述生防菌剂。

本发明所述侧孢芽孢杆菌ZB387对线虫病害的防治效果非常显著。其中，侧孢芽孢杆菌ZB387发酵液在24h时对线虫的触杀死亡率达100％；侧孢芽孢杆菌ZB387可显著抑制线虫虫卵孵化，虫卵孵化抑制率高达93.3％，显微镜下观察发现，线虫虫卵在单胞期阶段出现质壁分离现象，随着处理时间延长，质壁分离现象加重，最后导致虫卵破裂溶解死亡；侧孢芽孢杆菌ZB387对线虫有较强的致死效果，致死率高达90.89％，且能显著降低线虫活力。

侧孢芽孢杆菌ZB387对西红柿根结线虫病的防治效果高达85.5％，同时处理组西红柿的根系更发达，根结数量明显减少。与对照组相比，使用侧孢芽孢杆菌ZB387菌粉的处理组西红柿植株长势更好，株高普遍提高了5.6％-25.2％；而且西红柿中可溶性糖含量和vc含量也有不同程度的增加，分别提高了22.6％-32.3％和20.0％-57.1％；西红柿的产量也有大幅度提高，增产高达12.04％。从而说明本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387在田间使用时能显著促进西红柿生长，提高西红柿的产量和品质，并能有效降低线虫侵染，提高西红柿根系的发达程度，防治根结线虫病害。

此外，所述侧孢芽孢杆菌ZB387可有效产生几丁质酶、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶和果胶酶。

本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387可单独，或与其他芽孢杆菌、假单胞菌、土壤杆菌、固氮菌、根瘤菌、青霉菌、曲霉菌、根霉菌、链霉菌中的任意一种或多种进行组合，作为生防菌剂，或添加到有机肥、化肥等肥料中使用，广泛应用于农业种植生产中，有效防治根结线虫病等作物常发的真菌性病害，应用前景广阔。

附图说明

图1为ZB387菌株菌落图；

图2为ZB387菌株蛋白质谱峰图；

图3为西红柿根结情况对比图。

具体实施方式

对于实施例中所用到的具体方法或材料，本领域技术人员可以在本发明技术思路的基础上，根据已有的技术进行常规的替换选择，而不仅限于本发明实施例的具体记载。

下面结合具体实施例进一步阐述本发明。

实施例1菌株的分离与筛选

1、样品来源：山东省青岛市平度蔬菜种植大棚西红柿根际土壤。

2、菌株分离：

称取10g土壤样品装入有无菌玻璃珠和90m L无菌水的250mL锥形瓶中，充分摇匀。静置后用移液枪取1ml上清液加入9ml无菌水中，并用无菌水进行梯度稀释，得到10^-4、10^-5、10^-6三个梯度的稀释液，各取100μL涂布于营养琼脂平板上，重复3次。后置于37℃培养箱中培养，24h后观察生长情况，根据菌落大小、形状和颜色等特征进行分类，挑取单菌落进行纯化培养。最终挑选其中的5株菌，分别命名为B1、B2、B3、B4、B5，并分别进行液体甘油保种。

3、菌株筛选：

取分离纯化到的5株菌接种于装有营养肉汤培养基的试管中，37℃、200r/min摇床中培养48h后，用移液枪取上清液于培养皿中备用。挑取15～20条实验室保存的线虫于培养皿的发酵液中，置于16℃恒温培养箱内，分别在12h、24h观察线虫并计数，计算线虫死亡率，结果见表1。

线虫死亡率(％)＝死亡线虫数/供试线虫数×100％。

表1不同菌株对线虫的触杀效果

由表1的结果可知，本发明筛选到的5株菌中B5菌株发酵液对线虫触杀效果最好，在12h时对线虫的触杀率最高为80.67％，24h时对线虫的触杀死亡率达100％，申请人将该菌株命名为ZB387，并对其作进一步评价。

实施例2菌株ZB387的鉴定

2.1菌落形态鉴定

如图1所示，ZB387菌株在营养琼脂培养基上的菌落呈圆形，边缘不规则，表面光滑，菌落颜色为白色。

2.2 16S rRNA分子鉴定

采用试剂盒提取菌株ZB387的基因组。然后以该基因组为模板，利用特异性引物对其16S rRNA进行扩增。将扩增得到的PCR产物进行1％的琼脂糖凝胶电泳检测，结果显示PCR产物大小为1500bp左右，符合要求。将该PCR扩增产物送测序公司进行测序。

测序结果显示，PCR扩增产物的序列为SEQ ID NO:1。将该序列在NCBI数据库中进行BLAST比对，其与侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)的相似性最高。因此，初步确定ZB387菌株为侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)。

2.3 MALDI-TOF-MS蛋白质谱鉴定

取少量ZB387单菌落以薄膜的形式涂布于靶板上；加1μL质谱样本预处理试剂盒中的裂解液，室温下自然晾干；加1μL质谱样本预处理试剂盒中的基质溶液覆盖样品，室温下自然晾干；将样品靶放入质谱仪进行鉴定。鉴定结果显示，ZB387菌株为侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)，其蛋白质谱峰图如图2所示。

综上，申请人利用16S rRNA鉴定、MALDI-TOF-MS蛋白质谱鉴定两种分子生物学方法对菌株ZB387进行鉴定，鉴定结果一致。再结合菌株ZB387的菌落形态特征，申请人确定该菌株为侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)，命名为侧孢芽孢杆菌ZB387(Brevibacillus laterosporus ZB387)。

申请人已于2020年11月16日将上述侧孢芽孢杆菌ZB387(Brevibacilluslaterosporus ZB387)保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2020740。

实施例3侧孢芽孢杆菌ZB387产酶能力评价

申请人通过透明圈法评价侧孢芽孢杆菌ZB387产酶能力。将侧孢芽孢杆菌ZB387接种到加入相应底物的平板上，菌株生长时产生的酶会对相应底物进行分解，形成可以观察的产酶圈。产酶圈大小则代表该菌的产酶能力强弱。

将侧孢芽孢杆菌ZB387在营养琼脂培养基平板上划线活化，相应底物培养基灭菌后倾注平板，倒置于37℃培养箱中，过夜培养。用灭菌牙签将活化好的菌株点种到每种培养基上，做好标记，置于37℃培养箱中培养3～5d。用直尺测量产酶圈的直径，直径越大产酶能力越强。

1.几丁质酶

筛选培养基(pH7.0)：蛋白胨5.09g，KH₂P0₄、KCI、MgS0₄·7H₂0各0.59g，ZnS0₄·7H₂O20.01g，胶体几丁质10ml。用灭菌牙签取活化好的侧孢芽孢杆菌ZB387点在培养基中央，37℃培养48h。观察菌落周围出现透明圈，直径为22.5mm，说明本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387可有效产生几丁质酶。

2.纤维素酶

筛选培养基(PH7.2)：蛋白胨10g、酵母粉10g、羧甲基纤维素钠10g、氯化钠5g、磷酸二氢钾1g、琼脂20g，蒸馏水1000mL，115℃灭菌30min。用灭菌牙签取活化好的侧孢芽孢杆菌ZB387点在培养基中央，37℃培养48h。在培养基上加入0.2％的刚果红溶液染色30min，再用1mol/L Nacl洗涤10min，测定透明圈直径为20.5mm，说明本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387可有效产生纤维素酶。

3.蛋白酶

筛选培养基：A：脱脂奶粉15g、蒸馏水500mL，115℃灭菌15min。B：琼脂15g、蒸馏水500mL，115℃灭菌30min。灭菌后冷却至55℃，无菌操作将A、B混合均匀后倾注平板。用灭菌牙签取活化好的侧孢芽孢杆菌ZB387点在培养基中央，37℃培养48h，可以观察到ZB387菌株周围有透明圈产生，透明圈直径为25.5mm，说明本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387能有效产生蛋白酶。

4.淀粉酶

筛选培养基(PH7.0)：牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g、可溶性淀粉5g、琼脂20g、蒸馏水1000mL、115℃灭菌30min。用灭菌牙签取活化好的侧孢芽孢杆菌ZB387点在培养基中央，37℃培养48h，加入稀碘液使淀粉变色后，测量产酶圈直径为22.5mm，说明本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387能产生淀粉酶。

5.果胶酶

筛选培养基(PH7.0)：果胶5g、蛋白胨10g、氯化钠0.5g、刚果红0.15g、琼脂20g，蒸馏水1000mL，121℃灭菌20min。用灭菌牙签取活化好的侧孢芽孢杆菌ZB387点在培养基中央，37℃培养48h，可以观察到ZB387菌株周围有透明圈产生，透明圈直径为15mm，说明本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387能产生果胶酶。

实施例4侧孢芽孢杆菌ZB387对线虫卵孵化抑制及幼虫致死的效果评价

1.菌液制备：

将侧孢芽孢杆菌ZB387、E.coli OP50菌株分别接种LB培养基，37℃摇菌12h；将菌液均匀涂布在5-氟尿嘧啶NGM培养基，37℃过夜培养。

2.线虫传代培养

将秀丽隐杆线虫接种于涂有E.coli50的NGM培养基平皿上，16℃培养，每7天传代培养一次。

3.线虫同期化培养

将成虫期线虫3-5条用微量移液器接种于涂有E.coli50的NGM培养基，待产卵6-8h后，将成虫取出，得到同期虫卵进行虫卵孵化抑制实验，部分虫卵继续培养48h后，成长到L4期，完成同期化培养进行线虫致死实验。

4.线虫虫卵孵化抑制实验

将同期虫卵接种到涂有侧孢芽孢杆菌ZB387菌液的培养基上，每个平板接种20个左右，重复3次。E.coli OP50为空白对照，将所有平板置于16℃培养，每12h观察一次，统计虫卵孵化后线虫数量，计算虫卵孵化抑制率。

虫卵孵化抑制率(％)＝未孵化虫卵数/虫卵总数×100％。

表2不同时间虫卵孵化线虫的数量

由表2的实验结果可知，涂有E.coli OP50的对照组线虫虫卵随着时间的延长孵化数量增多，在48h基本完成孵化，孵化率达96.7％。而涂有侧孢芽孢杆菌ZB387菌液的处理组线虫虫卵孵化受到抑制，24h后无孵化，虫卵孵化抑制率高达93.3％。通过显微镜下观察发现，线虫虫卵在单胞期阶段出现质壁分离现象，随着处理时间延长，质壁分离现象加重，最后导致虫卵破裂溶解死亡。从而证明，本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387可显著抑制线虫虫卵孵化，取得了意料不到的技术效果。

5.线虫幼虫致死实验

将L4期线虫幼虫接种到涂有侧孢芽孢杆菌ZB387菌液的的培养基上，每个平板接种15条左右的线虫，重复3次。E.coli OP50为空白对照，将所有平板置于16℃培养，每天同一时间观察，统计线虫死亡数目，直到第12天为止。调查统计线虫存活数并以此计算线虫死亡率。

线虫死亡率(％)＝线虫死亡数/线虫总数×100％。

表3不同时间线虫存活数

由表3的实验结果可知，对照组线虫在整个观察期均能正常生长，线虫活力好。而涂有侧孢芽孢杆菌ZB387的处理组线虫生长受到抑制。通过观察线虫虫体发现，死亡的线虫体壁出现破裂，没死亡的线虫活力下降，线虫致死率高达88.89％。从而证明，本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387对线虫有较强的致死效果，且能显著降低线虫活力。

实施例5侧孢芽孢杆菌ZB387在西红柿盆栽上的防线虫效果评价

1.无病土采集与处理：采集田间自然种植用且无根结线虫的土，过筛保证细度均一；再将土样灭菌处理，避免病原菌或已有线虫的影响。同时将灭菌土混入一定沙，沙与灭菌土的体积用量比为1：2制成备用土。

2.虫卵悬浮液制备：取根结线虫发病的植物根，用破壁机加水破碎得到粗悬浮液，在显微镜下统计1ml粗悬浮液卵块的数量，重复5次以上，计算粗悬液的卵含量，用于后续接种，接种量为每盆2000-4000个卵块。

3.育苗：实验用作物为西红柿的根结线虫易感品种，用育苗基质装入50孔育苗盆中，把根结线虫感病寄主的种子播入育苗基质中，每育苗孔1粒种子，待苗长到3-5真叶时可移栽。

4.接种：在接种花盆底部先加1/2到2/3的无菌备用土，再加定量的虫卵悬浮液，保证接种量在2000以上，后再加铺一层备用土，再加菌剂，菌剂拌土撒施一层，后再加铺一层备用土，最后移栽备用苗。接种移栽完成的盆栽浇适量定植水。

5.培养：将处理好的盆栽于20-25℃温室中培养，3d左右浇一次水，根据土壤干湿程度可适当调整，土壤湿度不超过50％。培养35-45d后，扣盆取根调查统计效果。

6.根结指数及防效调查计算

根结分级标准如下：0级，根部未发现根结；1级，通过仔细辨认能够发现少量根结；2级，主根无根结，须根有少量根结能够清晰辨别；3级，主根无根结，须根上能发现稍大的根结；4级，主根无根结，须根上以较大根结为主；5级，50％的根被侵染，主根极少量侵染；6级，主根上发现根结；7级，主根大部分被根结侵染；8级，所有主根被侵染或极少根未侵染；9级，所有根能被严重侵染或通常植株死亡；10级，所有根被严重侵染，无根。

根结指数和相对防效计算如下：

根结指数＝[∑(各级病株数×各级代表值)/(调查总株数×最高级代表值)]×100。

相对防效＝(对照组根结指数-处理组根结指数)/对照组根结指数×100％。

统计结果显示，侧孢芽孢杆菌ZB387能显著增加西红柿植株的长势，对根结线虫病的防治效果高达85.5％；同时从图3也可明显看出，侧孢芽孢杆菌ZB387处理组西红柿的根系更发达，根结数量明显减少。从而说明，本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387能够有效防治线虫病害，并且具有显著的促生长作用。

实施例6侧孢芽孢杆菌ZB387在西红柿大田种植中的应用效果评价

1.实验地点：

青岛平度市仁兆镇西红柿种植大棚。

2.西红柿种植实验：

实验小区面积为8m×6m，每个实验小区内有6垄西红柿，约240±10株，每个处理组重复3次，共15个实验小区，具体分组如下：

(1)空白对照组：正常田间管理，不使用菌剂，清水浇施；

(2)ZB387菌粉处理组：将ZB387菌粉(活菌量为10亿/g)按2-8kg/亩的用量在西红柿苗移栽后随水冲施，7-15天一次，共施3次。其中：

处理组1：ZB387菌粉用量为2kg/亩；

处理组2：ZB387菌粉用量为4kg/亩；

处理组3：ZB387菌粉用量为6kg/亩；

处理组4：ZB387菌粉用量为8kg/亩。

西红柿移栽种植后定期进行调查，前期主要调查植株长势，采摘期分不同批次进行取样统计单果重，并计算小区产量，同时通过阿贝折光仪测定西红柿可溶性糖含量，滴定法测定VC含量。收获后取植株根部，各小区随机取5-10株观察其根系情况，按上述病害分级标准记录病级数，计算病情指数和相对防效，数据结果见表4。

表4侧孢芽孢杆菌ZB387在西红柿上的应用效果

从表4的数据可以看出，与对照组相比，使用侧孢芽孢杆菌ZB387菌粉的处理组西红柿植株长势更好，株高普遍提高了5.6％-25.2％；而且西红柿中可溶性糖含量和vc含量也有不同程度的增加，分别提高了22.6％-32.3％和20.0％-57.1％；西红柿的产量也有大幅度提高，增产最高达12.04％。此外，处理组西红柿根结指数显著下降，侧孢芽孢杆菌ZB387对西红柿根结线虫病害的防治效率最高达66.5％。从而说明，本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387在田间使用时能显著促进西红柿生长，提高西红柿的产量和品质，并能有效降低线虫侵染，提高西红柿根系的发达程度，防治根结线虫病害。

综上所述，本发明提供的侧孢芽孢杆菌ZB387可单独，或与其他芽孢杆菌、假单胞菌、土壤杆菌、固氮菌、根瘤菌、青霉菌、曲霉菌、根霉菌、链霉菌中的任意一种或多种进行组合，作为生防菌剂，或添加到有机肥、化肥等肥料中使用，广泛应用于农业种植生产中，有效防治根结线虫病等作物常发的真菌性病害，应用前景广阔。

序列表

<110> 山东蔚蓝生物科技有限公司

山东康地恩生物科技有限公司

<120> 一种侧孢芽孢杆菌及其在线虫病害防治中的应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 974

<212> DNA

<213> 侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)

<400> 1

gttacctcac cgacttcggg tgttgcaaac tcccgtggtg tgacgggcgg tgtgtacaag 60

gcccgggaac gtattcaccg cggcatgctg atccgcgatt actagcgatt ccgacttcat 120

gtaggcgagt tgcagcctac aatccgaact gagattggtt ttaagagatt agcatcttct 180

cgcgaagtag catcccgttg taccaaccat tgtagcacgt gtgtagccca ggtcataagg 240

ggcatgatga tttgacgtca tccccgcctt cctccgtctt gtcgacggca gtctctctag 300

agtgcccaac tgaatgctgg caactaaaga taagggttgc gctcgttgcg ggacttaacc 360

caacatctca cgacacgagc tgacgacaac catgcaccac ctgtcaccac tgccccgaag 420

ggaagctcta tctctagagc ggtcagtggg atgtcaagac ctggtaaggt tcttcgcgtt 480

gcttcgaatt aaaccacatg ctccaccgct tgtgcgggcc cccgtcaatt cctttgagtt 540

tcactcttgc gagcgtactc cccaggcgga gtgcttattg cgttagctgc ggcactaagg 600

gtattgaaac ccctaacacc tagcactcat cgtttacggc gtggactacc agggtatcta 660

atcctgtttg ctccccacgc tttcgcgcct cagtgtcagt tacaggccag aaagtcgcct 720

tcgccactgg tgttcctcca catctctacg catttcaccg ctacacgtgg aataccactt 780

tcctctcctg cactcaagct acacagtttc caatgcgaac cgaggttgag cctcgggctt 840

taacatcaga cttacatagc cacctgcgcg cgctttacgc ccaataattc cggacaacgc 900

ttgccaccta cgtattaccg cggctgctgg cacgtagtta gccgtggctt tctcgttagg 960

taccgtcaag gtgc 974

Claims (10)

1.一种侧孢芽孢杆菌，其特征在于，所述侧孢芽孢杆菌的保藏号为CCTCC NO：M2020740。

2.如权利要求1所述的侧孢芽孢杆菌，其特征在于，所述侧孢芽孢杆菌的16s rDNA序列为SEQ ID NO:1。

3.权利要求1或2所述的侧孢芽孢杆菌在植物病害防治中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的植物病害为线虫病。

5.一种生防菌剂，其特征在于，所述的生防菌剂包含权利要求1或2所述的侧孢芽孢杆菌。

6.如权利要求5的生防菌剂，其特征在于，所述的生防菌剂还包含芽孢杆菌、假单胞菌、土壤杆菌、固氮菌、根瘤菌、青霉菌、曲霉菌、根霉菌、链霉菌中的任意一种或两种或多种的组合。

7.如权利要求6所述的生防菌剂，其特征在于，所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌或暹罗芽孢杆菌中的任意一种或两种或多种的组合。

8.如权利要求5-7任一所述的生防菌剂，其特征在于，所述的生防菌剂中侧孢芽孢杆菌的活菌量至少为10⁹CFU/g。

9.权利要求5-8任一所述的生防菌剂在植物病害防治中的应用。

10.一种肥料，其特征在于，所述的肥料包含权利要求5-8任一所述的生防菌剂。

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